Влияние условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека

• Main Authors: Скоробогатова, Н.Г., Грищук, В.П., Петренко, А.Ю.
• Format: Article
• Language: Russian
• Published: Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України 2002
• Series: Проблемы криобиологии и криомедицины
• Subjects: Теоретическая и экспериментальная криобиология
• Online Access: http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/136842

Изучено влияние различных условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность (ЖС) и колониеобразующую активность свежевыделенных и криоконсервированных клеток эмбриональной печени (КЭП) человека 7-10 недель гестации. Использование раствора Хенкса как среды отмывания (СО) приводит к снижению общего количества и количества жизнеспособных КЭП. Замена NaCl на сахарозу снижает повреждающее действие процедуры отмывания криопротектора. При этом медленное введение сахарозо-солевого раствора (ССР) позволяет в большей степени сохранить ЖС клеток по сравнению с быстрым способом добавления. Оценку повреждающего действия этапа удаления ДМСО проводили 2 методами окрашивания (трипановым синим и бромистым этидием), учитывая общее количество клеток, ЖС и выход жизнеспособных клеток (ВЖК). Результаты, полученные при различных условиях удаления криопротектора, не зависели от метода оценки и показали, что ВЖК является наиболее чувствительным параметром жизнеспособности криоконсервированных клеток. Колониеобразующая активность КЭП человека при культивировании в агаре на фидерном слое, содержащем лейкоциты здоровых взрослых доноров, после криоконсервирования и медленного удаления ДМСО с помощью ССР оставалась на уровне нативного контроля. Полученные результаты свидетельствуют о том, что ССР меньше повреждает КЭП человека на этапе удаления криопротектора ДМСО.