Влияние условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека

Изучено влияние различных условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность (ЖС) и колониеобразующую активность свежевыделенных и криоконсервированных клеток эмбриональной печени (КЭП) человека 7-10 недель гестации. Использование раствора Хенкса как среды отмывания (СО) приводит к снижению об...

Повний опис

Збережено в:
Бібліографічні деталі
Дата:2002
Автори: Скоробогатова, Н.Г., Грищук, В.П., Петренко, А.Ю.
Формат: Стаття
Мова:Russian
Опубліковано: Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України 2002
Назва видання:Проблемы криобиологии и криомедицины
Теми:
Онлайн доступ:http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/136842
Теги: Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:Влияние условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека / Н.Г. Скоробогатова, В.П. Грищук, А.Ю. Петренко // Проблемы криобиологии. — 2002. — № 4. — С. 16–23. — Бібліогр.: 19 назв. — рос.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id irk-123456789-136842
record_format dspace
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
language Russian
topic Теоретическая и экспериментальная криобиология
Теоретическая и экспериментальная криобиология
spellingShingle Теоретическая и экспериментальная криобиология
Теоретическая и экспериментальная криобиология
Скоробогатова, Н.Г.
Грищук, В.П.
Петренко, А.Ю.
Влияние условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека
Проблемы криобиологии и криомедицины
description Изучено влияние различных условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность (ЖС) и колониеобразующую активность свежевыделенных и криоконсервированных клеток эмбриональной печени (КЭП) человека 7-10 недель гестации. Использование раствора Хенкса как среды отмывания (СО) приводит к снижению общего количества и количества жизнеспособных КЭП. Замена NaCl на сахарозу снижает повреждающее действие процедуры отмывания криопротектора. При этом медленное введение сахарозо-солевого раствора (ССР) позволяет в большей степени сохранить ЖС клеток по сравнению с быстрым способом добавления. Оценку повреждающего действия этапа удаления ДМСО проводили 2 методами окрашивания (трипановым синим и бромистым этидием), учитывая общее количество клеток, ЖС и выход жизнеспособных клеток (ВЖК). Результаты, полученные при различных условиях удаления криопротектора, не зависели от метода оценки и показали, что ВЖК является наиболее чувствительным параметром жизнеспособности криоконсервированных клеток. Колониеобразующая активность КЭП человека при культивировании в агаре на фидерном слое, содержащем лейкоциты здоровых взрослых доноров, после криоконсервирования и медленного удаления ДМСО с помощью ССР оставалась на уровне нативного контроля. Полученные результаты свидетельствуют о том, что ССР меньше повреждает КЭП человека на этапе удаления криопротектора ДМСО.
format Article
author Скоробогатова, Н.Г.
Грищук, В.П.
Петренко, А.Ю.
author_facet Скоробогатова, Н.Г.
Грищук, В.П.
Петренко, А.Ю.
author_sort Скоробогатова, Н.Г.
title Влияние условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека
title_short Влияние условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека
title_full Влияние условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека
title_fullStr Влияние условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека
title_full_unstemmed Влияние условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека
title_sort влияние условий удаления криопротектора дмсо на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека
publisher Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
publishDate 2002
topic_facet Теоретическая и экспериментальная криобиология
url http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/136842
citation_txt Влияние условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека / Н.Г. Скоробогатова, В.П. Грищук, А.Ю. Петренко // Проблемы криобиологии. — 2002. — № 4. — С. 16–23. — Бібліогр.: 19 назв. — рос.
series Проблемы криобиологии и криомедицины
work_keys_str_mv AT skorobogatovang vliânieuslovijudaleniâkrioprotektoradmsonažiznesposobnostʹikolonieobrazuûŝuûaktivnostʹkriokonservirovannyhkletokémbrionalʹnojpečeničeloveka
AT griŝukvp vliânieuslovijudaleniâkrioprotektoradmsonažiznesposobnostʹikolonieobrazuûŝuûaktivnostʹkriokonservirovannyhkletokémbrionalʹnojpečeničeloveka
AT petrenkoaû vliânieuslovijudaleniâkrioprotektoradmsonažiznesposobnostʹikolonieobrazuûŝuûaktivnostʹkriokonservirovannyhkletokémbrionalʹnojpečeničeloveka
first_indexed 2023-10-18T21:14:16Z
last_indexed 2023-10-18T21:14:16Z
_version_ 1796152281830260736
spelling irk-123456789-1368422018-06-17T03:06:21Z Влияние условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека Скоробогатова, Н.Г. Грищук, В.П. Петренко, А.Ю. Теоретическая и экспериментальная криобиология Изучено влияние различных условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность (ЖС) и колониеобразующую активность свежевыделенных и криоконсервированных клеток эмбриональной печени (КЭП) человека 7-10 недель гестации. Использование раствора Хенкса как среды отмывания (СО) приводит к снижению общего количества и количества жизнеспособных КЭП. Замена NaCl на сахарозу снижает повреждающее действие процедуры отмывания криопротектора. При этом медленное введение сахарозо-солевого раствора (ССР) позволяет в большей степени сохранить ЖС клеток по сравнению с быстрым способом добавления. Оценку повреждающего действия этапа удаления ДМСО проводили 2 методами окрашивания (трипановым синим и бромистым этидием), учитывая общее количество клеток, ЖС и выход жизнеспособных клеток (ВЖК). Результаты, полученные при различных условиях удаления криопротектора, не зависели от метода оценки и показали, что ВЖК является наиболее чувствительным параметром жизнеспособности криоконсервированных клеток. Колониеобразующая активность КЭП человека при культивировании в агаре на фидерном слое, содержащем лейкоциты здоровых взрослых доноров, после криоконсервирования и медленного удаления ДМСО с помощью ССР оставалась на уровне нативного контроля. Полученные результаты свидетельствуют о том, что ССР меньше повреждает КЭП человека на этапе удаления криопротектора ДМСО. Вивчено вплив різних умов видалення кріопротектора ДМСО на життєздатність і колонієутворюючу активність нативних і кріоконсервованих клітин ембріональної печінки (КЕП) людини 7-10 тижнів гестації. Використання розчину Хенкса як середовища відмивання приводить до зниження загальної кількості і кількості життєздатних КЕП. Заміна NaCl на сахарозу знижує негативний вплив процедури видалення кріопротектора. При цьому повільне введення сахарозо-сольового розчину (ССР) дозволяє більше зберегти життєздатність клітин у порівнянні зі швидким способом відмивання. Оцінку дії етапу видалення ДМСО проводили 2 методами фарбування (трипановим синім і бромистим етидієм), враховуючи загальну кількість клітин, життєздатність і вихід життєздатних клітин. Результати, отримані при різних умовах видалення кріопротектора, не залежали від методу оцінки і показали, що вихід життєздатних клітин є найбільш чуттєвим параметром життєздатності кріоконсервованих клітин. Колонієутворююча активність КЕП людини при культивуванні в агарі на фідері, що містить лейкоцити здорових дорослих донорів, після кріоконсервування і повільного видалення ДМСО за допомогою ССР залишалася на рівні нативного контроля. Отримані результати свідчать про те, що ССР найменше ушкоджує КЕП людини на етапі видалення кріопротектора ДМСО. The authors studied the influence of various conditions of Me₂SO cryoprotectant removal on viability and colony forming activity of freshly isolated and cryopreserved cells of human fetal liver (HFL) of 7-10 gestation weeks. Usage of Hanks solution as a washing-out medium (WM) leads to a decrease in both total number of HFL cells and their viability. Substitution of NaCl with sucrose decreases the damaging effect of cryoprotectant washing-out procedure. In this case a slow introduction of sucrose based saline (SBS) allows to preserve the cells’ viability when comparing with rapid washing-out. Estimation of damaging effect of Me₂SO removal stage was performed by two staining methods (trypan blue and ethidium bromide) with determining the total cell number, viability and cell survival. The results, obtained under various cryoprotectant removal conditions, did not depend on estimation method and showed that cell survival was the most sensible parameter for viability of cryopreserved cells. The value of colony forming activity of HFL cells by culturing in agar on feeder layer with leukocytes of healthy adult donors after cryopreservation and slow removing of Me₂SO with SBS was at the control level. Obtained results testify to the fact that SBS does less damages to HFL cells at the stage of Me₂SO cryoprotectant removal. 2002 Article Влияние условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека / Н.Г. Скоробогатова, В.П. Грищук, А.Ю. Петренко // Проблемы криобиологии. — 2002. — № 4. — С. 16–23. — Бібліогр.: 19 назв. — рос. 0233-7673 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/136842 547.544:615.361.36.014.413 ru Проблемы криобиологии и криомедицины Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України