Модификация структурно-функциональной организации стволовых кроветворных клеток костного мозга после действия факторов низкотемпературного консервирования

Gespeichert in:

Bibliographische Detailangaben
Datum:	2005
Hauptverfasser:	Гольцев, А.Н., Дубрава, Т.Г., Бабенко, Н.Н., Останкова, Л.В., Мацевитая, И.Ю., Шатнева, О.М.
Format:	Artikel
Sprache:	Russian
Veröffentlicht:	Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України 2005
Schriftenreihe:	Проблемы криобиологии и криомедицины
Schlagworte:	Стволовые клетки. Современные проблемы клеточной и тканевой терапии
Online Zugang:	http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/137018
Tags:	Tag hinzufügen Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Назва журналу:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Zitieren:	Модификация структурно-функциональной организации стволовых кроветворных клеток костного мозга после действия факторов низкотемпературного консервирования / А.Н. Гольцев, Т.Г. Дубрава, Н.Н. Бабенко, Л.В. Останкова, И.Ю. Мацевитая, О.М. Шатнева // Проблемы криобиологии. — 2005. — Т. 15, № 3. — С. 362-366. — Бібліогр.: 14 назв. — рос.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	irk-123456789-137018
record_format	dspace
spelling	irk-123456789-1370182018-06-17T03:13:16Z Модификация структурно-функциональной организации стволовых кроветворных клеток костного мозга после действия факторов низкотемпературного консервирования Гольцев, А.Н. Дубрава, Т.Г. Бабенко, Н.Н. Останкова, Л.В. Мацевитая, И.Ю. Шатнева, О.М. Стволовые клетки. Современные проблемы клеточной и тканевой терапии 2005 Article Модификация структурно-функциональной организации стволовых кроветворных клеток костного мозга после действия факторов низкотемпературного консервирования / А.Н. Гольцев, Т.Г. Дубрава, Н.Н. Бабенко, Л.В. Останкова, И.Ю. Мацевитая, О.М. Шатнева // Проблемы криобиологии. — 2005. — Т. 15, № 3. — С. 362-366. — Бібліогр.: 14 назв. — рос. 0233-7673 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/137018 615.361.018.46.014.41:57.017 ru Проблемы криобиологии и криомедицины Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
language	Russian
topic	Стволовые клетки. Современные проблемы клеточной и тканевой терапии Стволовые клетки. Современные проблемы клеточной и тканевой терапии
spellingShingle	Стволовые клетки. Современные проблемы клеточной и тканевой терапии Стволовые клетки. Современные проблемы клеточной и тканевой терапии Гольцев, А.Н. Дубрава, Т.Г. Бабенко, Н.Н. Останкова, Л.В. Мацевитая, И.Ю. Шатнева, О.М. Модификация структурно-функциональной организации стволовых кроветворных клеток костного мозга после действия факторов низкотемпературного консервирования Проблемы криобиологии и криомедицины
format	Article
author	Гольцев, А.Н. Дубрава, Т.Г. Бабенко, Н.Н. Останкова, Л.В. Мацевитая, И.Ю. Шатнева, О.М.
author_facet	Гольцев, А.Н. Дубрава, Т.Г. Бабенко, Н.Н. Останкова, Л.В. Мацевитая, И.Ю. Шатнева, О.М.
author_sort	Гольцев, А.Н.
title	Модификация структурно-функциональной организации стволовых кроветворных клеток костного мозга после действия факторов низкотемпературного консервирования
title_short	Модификация структурно-функциональной организации стволовых кроветворных клеток костного мозга после действия факторов низкотемпературного консервирования
title_full	Модификация структурно-функциональной организации стволовых кроветворных клеток костного мозга после действия факторов низкотемпературного консервирования
title_fullStr	Модификация структурно-функциональной организации стволовых кроветворных клеток костного мозга после действия факторов низкотемпературного консервирования
title_full_unstemmed	Модификация структурно-функциональной организации стволовых кроветворных клеток костного мозга после действия факторов низкотемпературного консервирования
title_sort	модификация структурно-функциональной организации стволовых кроветворных клеток костного мозга после действия факторов низкотемпературного консервирования
publisher	Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
publishDate	2005
topic_facet	Стволовые клетки. Современные проблемы клеточной и тканевой терапии
url	http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/137018
citation_txt	Модификация структурно-функциональной организации стволовых кроветворных клеток костного мозга после действия факторов низкотемпературного консервирования / А.Н. Гольцев, Т.Г. Дубрава, Н.Н. Бабенко, Л.В. Останкова, И.Ю. Мацевитая, О.М. Шатнева // Проблемы криобиологии. — 2005. — Т. 15, № 3. — С. 362-366. — Бібліогр.: 14 назв. — рос.
series	Проблемы криобиологии и криомедицины
work_keys_str_mv	AT golʹcevan modifikaciâstrukturnofunkcionalʹnojorganizaciistvolovyhkrovetvornyhkletokkostnogomozgaposledejstviâfaktorovnizkotemperaturnogokonservirovaniâ AT dubravatg modifikaciâstrukturnofunkcionalʹnojorganizaciistvolovyhkrovetvornyhkletokkostnogomozgaposledejstviâfaktorovnizkotemperaturnogokonservirovaniâ AT babenkonn modifikaciâstrukturnofunkcionalʹnojorganizaciistvolovyhkrovetvornyhkletokkostnogomozgaposledejstviâfaktorovnizkotemperaturnogokonservirovaniâ AT ostankovalv modifikaciâstrukturnofunkcionalʹnojorganizaciistvolovyhkrovetvornyhkletokkostnogomozgaposledejstviâfaktorovnizkotemperaturnogokonservirovaniâ AT macevitaâiû modifikaciâstrukturnofunkcionalʹnojorganizaciistvolovyhkrovetvornyhkletokkostnogomozgaposledejstviâfaktorovnizkotemperaturnogokonservirovaniâ AT šatnevaom modifikaciâstrukturnofunkcionalʹnojorganizaciistvolovyhkrovetvornyhkletokkostnogomozgaposledejstviâfaktorovnizkotemperaturnogokonservirovaniâ
first_indexed	2025-07-10T03:11:04Z
last_indexed	2025-07-10T03:11:04Z
_version_	1837227910801391616
fulltext	362ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 15, 2005, №3 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 15, 2005, №3 УДК 615.361.018.46.014.41:57.017 Модификация структурно-функциональной организации стволовых кроветворных клеток костного мозга после действия факторов низкотемпературного консервирования А.Н. ГОЛЬЦЕВ, Т.Г. ДУБРАВА, Н.Н. БАБЕНКО, Л.В. ОСТАНКОВА, И.Ю. МАЦЕВИТАЯ, О.М. ШАТНЕВА Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков Адрес для корреспонденции: Гольцев А.Н., Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, ул. Переяславская, 23, г. Харьков, Украина 61015; тел.:+38 (057) 373-57-89, факс: +38 (057) 373-30-84, e-mail: cryo@online.kharkov.ua Давно известен тот факт, что после выхода из состояния глубокого холодового анабиоза сохран- ные стволовые кроветворные клетки (СКК) из- меняют скорость пролиферации и направленность дифференцировки, что отражается на качествен- ных характеристиках защитного потенциала гемо- поэтической ткани [2, 3, 4]. Однако причины нару- шений динамики восстановления гемопоэза у реци- пиентов криоконсервированного костного мозга (КМ) остаются до конца невыяснеными. Снижение количественного содержания СКК в криоконсерви- рованном миелотрансплантате за счет их гибели не может быть основной причиной таких измене- ний, так как повышение дозы вводимых миелока- риоцитов с целью компенсации погибших крове- творных предшественников (КОЕс) лишь незначи- тельно изменяло динамику этого процесса [6]. Ве- роятным является изменение структурно-функцио- нальной организации СКК за счет нарушения тече- ния внутриклеточных процессов под действием факторов криоконсервирования. Очевидно, напри- мер, что немаловажное значение в реализации те- рапевтического эффекта миелотрансплантата име- ет своевременное расселение (хоминг) кроветвор- ных предшественников, координируемое рецептор- ными структурами их клеточной мембраны, кото- рые могут изменяться в процессе криоконсерви- рования в результате сегрегации, агрегации либо схождения (шеддинг) компонентов плазматической мембраны [9, 12]. В этой связи, своевременное восстановление способности криоконсервирован- ных СКК взаимодействовать с микроокружением и воспринимать его регуляторные сигналы будет зависеть от активности течения метаболических процессов в клетках, обеспечивающих наработку вновь формируемых мембранных структур. Цель исследования – провести сравнительную аттестацию состояния кроветворных предшест- венников КМ по некоторым структурным и функ- циональным характеристикам до и после криокон- сервирования, на основании полученных результа- тов и теоретических предпосылок смоделировать возможные варианты изменения внутреннего состояния, а также феноменологии поведения СКК после действия факторов криоконсервирования. Материалы и методы Эксперименты проведены на мышах СВА 8– 10-недельного возраста, содержащихся в условиях вивария ИПКиК НАН Украины. Все манипуляции с животными выполнены согласно принципам Ев- ропейской конвенции о защите позвоночных живот- ных (Страсбург, 1985 г.). Криоконсервирование КМ проводили под защитой криопротектора ДМСО в конечной концентрации 10% со скоростью замора- живания 1 град/мин до –20°С с последующим по- гружением в жидкий азот в полиэтиленовых крио- контейнерах (“Nunc”), объемом 1 мл на программ- ном замораживателе “Cryoson” (Германия) по стан- дартной методике. Отогрев суспензии проводили на водяной бане при температуре 38–40°С в те- чение 40–50 с. Определение содержания КОЕс в донорском КМ до и после криоконсервирования проводили на 8–14 сутки после трансплантации нативных или криоконсервированных сингенных миелокарио- цитов летально облученным реципиентам по стан- дартной методике [13]. В качестве тестируемых характеристик были выбраны: “хоминг” и пролиферативный потенциал нативных и криоконсервированных СКК [4]. Крат- ко: первичным реципиентам, облученным в леталь- ной дозе, трансплантировали 5×106 ядерных клеток сингенного нативного или криоконсервированного КМ. Для определения абсолютного количества (динамики накопления) КОЕс в селезенке и КМ первичных реципиентов на различных этапах после трансплантации нативного или криоконсервирован- ного КМ (от 2-х часов до 100 суток), 1×105 клеток исследумых органов вводили вторичным летально облученным реципиентам, в селезенке которых на 10 сутки после трансплантации определяли содер- жание колоний. Проведена идентификация и оценка состояния Thy-1,2 антигена на КОЕс, формирующих колонии на 10 сутки. Для этих целей использовали пеннинг- метод для иммунологической селекции из костного мозга кроветворных предшественников монокло- нальными антителами (МАТ) к антигену Thy-1,2. В экспериментах был использован прямой пеннинг- метод [8], основанный на способности антител “прилипать” к пластику и затем сорбировать из суспензии клетки, несущие данный тип антигена. С помощью метода модуляции антигена Thy- 1,2 [5] определена также динамика синтеза Thy- 363ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 15, 2005, №3 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 15, 2005, №3 1,2 антигена на СКК по его экспрессии de novo. Принцип метода заключается в схождении анти- гена с мембраны СКК после формирования комп- лекса Thy-1,2 антиген + антимышиные МАТ к Thy- 1,2 антигену + антимышиные иммуноглобулины. Антиген-модулированные (до криоконсервирова- ния) нативные или криоконсервированные миелока- риоциты, то есть утратившие антиген Thy-1,2, вво- дили внутривенно летально облученным синген- ным реципиентам в определенной дозе. Через 2– 60 часов из селезенки первичных реципиентов готовили суспензию, которую обрабатывали анти- телами к антигену Thy-1,2 и комплементом (комп- лементзависимый цитотоксический тест), после чего определенное количество ядросодержащих клеток вводили вторичным облученным реципиен- там, в селезенках которых на 10 сутки определяли гемопоэтические колонии. По разнице в их содер- жании в опыте и контроле (клетки, обработанные нормальной мышиной сывороткой) судили о процентном содержании КОЕс, экспрессирующих (наработавших) антиген Thy-1,2 после антигенной модуляции. Статистическую обработку полученных резуль- татов проводили с использованием критерия Стьюдента. Результаты и обсуждение Одним из важных свойств СКК, от сохранности которого зависит эффективность миелотрансплан- тации при лечении гемо- и иммунодепрессий, яв- Рис. 1. Динамика накопления гемопоэтических колоний (КОЕс) в селезенке летально облученных мышей после трансплантации нативного ( ) и криоконсервирован- ного ( ) костного мозга 1×105 клеток/мышь. За 100% принято максимальное количество колоний (18,3), сформированных нативными СКК на 10-е сутки; * – P<0,05 по сравнению с группой с введением нативного материала. 0 20 40 60 80 100 120 8 10 12 14 * * * суток после трансплантации Ко ли че ст во к ол он ий , % ляется способность распознавать и расселяться в родственном кроветворном микроокружении. Установлено, что в процессе криоконсервиро- вания КМ часть КОЕс (около 15-20%) погибает, при этом сохранившиеся кроветворные предшест- венники с “опозданием” формируют колонии, в ре- зультате чего их число с 8-е по 14-е сутки посте- пенно увеличивается (рис. 1). Отмечено также, что у части кроветворных клеток временно снижается способность распознавать кроветворное микроок- ружение и расселяться в нем, а уже расселившиеся СКК с опозданием вступают в пролиферацию. Восстановление способности криоконсервиро- ванных кроветворных предшественников взаимо- действовать с микроокружением и воспринимать его регуляторные сигналы будет зависеть от актив- ности течения метаболических процессов в клет- ках, и следовательно, “наработки” вновь формируе- мых мембранных структур. На примере экспрес- сируемого на некоторых клетках КМ (включая СКК) антигена Thy-1,2 была проведена оценка “сохранности” рецепторного репертуара на мемб- ране этих клеток после криоконсервирования КМ. Установлено, что около 85% Thy-1,2+ клеток КМ после криоконсервирования теряли этот маркер, то есть концентрация их в КМ снижалась в 6-7 раз (рис. 2). При оценке колониеобразующей способ- ности сорбированных на Thy-1,2 МАТ клеток оказалось, что в нативной фракции концентрация СКК составляла около 9%, а в криоконсервирован- ной – всего 0,5%, то есть в 17 раз меньше. Из этого Рис. 2. Количество сорбированных пеннинг-методом ядерных клеток на моноклональных антителах (МАТ) к антигену Thy-1,2 и содержание КОЕс в нативном (1) и криоконсервированном (2) костном мозге. Количество сорбированных нативных ядросодержащих клеток составило 1,5±0,1% и было принято в дальнейшем за 100%. 0 20 40 60 80 100 120 количество сорбированных ядерных клеток содержание КОЕс в сорбированной фракции КМ * * * 1 2 1 2 Ко ли че ст во T hy -1 ,2 + - кл ет ок , % 364ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 15, 2005, №3 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 15, 2005, №3 следует, что, во-первых, действительно после крио- консервирования КМ определенная часть его Thy- 1,2+ клеток теряет этот антиген. Во-вторых, сопо- ставляя степень потери этой мембранной струк- туры на всей популяции Thy-1,2+ клеток и на СКК, становится очевидным, что на СКК она выражена значительно сильнее (в 2,5 раза). Учитывая значимость мембранных структур в проявлении функционального потенциала СКК была проведена оценка динамики синтеза Thy-1,2- антигена на этих клетках после его антигенной мо- дуляции. Отмечено, что в криоконсервированных СКК имеет место запаздывание начала экспрессии (синтеза) Thy-1,2-антигена на их мембране как минимум на 24–30 часов. Учитывая данную феноменологию поведения клеток после криоконсервирования, возникает Рис. 3. Динамика накопления КОЕс в селезенке и костном мозге мышей-реципиентов после введения нативного ( ) и криоконсервированного ( ) материала. Количественное содержание КОЕс в селезенке животных контрольной группы составило 2765±342; количественное содержание КОЕс костном мозге (бедро) животных контрольной группы составило 1735±206 (n=7). * – P< 0,05 по сравнению с группой с введением нативного материала; # – P<0,05 по сравнению с группой контрольных животных. 0 20 40 60 80 100 120 2 20 48 # # # # # # * * Селезенка 0 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000 3 5 7 9 11 20 30 40 50 100 Селезенка # # # # # # # * * * 0 5 10 15 20 25 30 35 40 2 20 48 # # # # # Костный мозг 0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800 2000 3 5 7 9 11 20 30 40 50 100 # # # # # # # * # * * # # # # # # Костный мозг часов после трансплантации Ко ли че ст во К О Ес , % суток после трансплантации Ко ли че ст во К О Ес , % часов после трансплантации Ко ли че ст во К О Ес , % суток после трансплантации Ко ли че ст во К О Ес , % вопрос: будет ли изменяться их хоминг и пролифе- ративная активность после расселения в кровет- ворном микроокружении? Полученные данные по сравнительному изучению динамики расселения нативных и криоконсервированных КОЕс в КМ и селезенке летально облученных сингенных реци- пиентов свидетельствуют о том, что темп расселе- ния КОЕс в этих компартментах существенно отличается в зависимости как от места расселе- ния, так и вида трансплантата. Так, в ранний пост- рансплантационный период (2–48 часов) в селезенке летально облученных реципиентов отме- чено снижение количества расселившихся КОЕс, причем у мышей с криоконсервированным миело- трансплантатом расселялось в среднем в 2 раза меньше КОЕс, чем с нативным (рис. 3). В костном мозге отмечено накопление количества осевших 365ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 15, 2005, №3 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 15, 2005, №3 КОЕс с пиком к 20-му часу с последующим сниже- нием к 48-му, причем количество КОЕс у реципиен- тов криоконсервированного материала было су- щественно ниже, чем нативного. Такая специфика динамики формирования колоний криоконсервировванным костным мозгом может быть связана с изменением состояния рецепторного репертуара СКК [7]. Кроме того, особенности расселения СКК в различных ком- партментах организма, по-видимому, объясняются характером микроокружения органов, особеннос- тями путей проникновения в них КОЕс, а также временным изменением состояния популяции КОЕс в костном мозге в условиях повышенного выброса глюкокортикоидов при стрессе [1]. В дальнейшем период активного “насыщения” селезенки КОЕс был отмечен с 3 по 20 сутки, а костного мозга – с 5 по 50 сутки наблюдения. При этом, темп изменения содержания КОЕс в селе- зенке реципиентов с введением нативного миело- трансплантата имел волнообразный характер со снижением определяемого показателя к 7-м сут- кам, и максимальным увеличением к 11-м суткам. В этот период в селезенке наступала фаза “овер- шута”. При введении криоконсервированного материала начало интенсивного накопления содер- жания КОЕс сдвигалось к 9 суткам в отличие от нативного (7 сутки), достигая фазы “овершута” также к 11-м суткам. В дальнейшем темп накоп- ления нативных и криоконсервированных КОЕс в селезенке снижался, приближаясь к норме к 30-м суткам, и оставался на таком уровне без достовер- ных изменений во все последующие сроки наблю- дения. В костном мозге отмечена иная картина: содер- жание КОЕс обеих исследуемых групп равномерно возрастало с 5-х и до 20-х суток наблюдения, при- чем во все сроки количество криоконсервирован- ных КОЕс было достоверно ниже, чем нативных. Отмеченные выше функциональные изменения СКК после криоконсервирования могут быть следствием модификации гликокаликса мембраны, что приводит к искажению сигнальной транс- дукции. Кроме того, причинами неадекватного поведения криоконсервированных СКК возможно являются повреждения мембран, выход лизосо- мальных ферментов, образование супероксид- радикалов и т.д., вызванные действием таких физико-химических факторов криоконсервирования как изменение солевого градиента, рH среды, вязкости цитоплазмы. Нельзя забывать и о сугубо “механических” повреждениях, обусловленных кристаллообразованием. Кроме того, возможным механизмом изменения функциональной актив- ности криоконсервированных СКК является существенная модуляция интенсивности проте- кания процессов сигналирования, характеризую- щихся модификацией механизмов фосфорилирова- ния, MAP-киназного, JAK-STAT, RAS/MAPK путей. В этих условиях в роли locus minoris могут оказаться ключевые транскрипционные факторы СКК, к которым относятся Gfi-1, GATA-2, ICAROS. Именно они оказывают влияние на функцию расселения, миграции и дальнейшей диф- ференцировки СКК посредством инициации транс- крипции ранних генов, регулирующих запуск поздних [14]. При их непосредственном участии осуществляется наработка широкого спектра мо- лекул-переносчиков, других транскрипционных факторов и, в итоге, полноценного рецепторного аппарата. Кроме того, опосредованно они участ- вуют в регуляции практически всех метаболичес- ких процессов клетки [11]. После криоконсервирования СКК могут проис- ходить изменения и на этапе преобразования сигнала во внутриядерный. Например, нарушения в структуре ключевых транскрипционных факто- ров приводят к невозможности их взаимодействия со своей мишенью – ДНК. Кроме того, при форми- ровании транскрипционного комплекса структур- ные нарушения одного из факторов могут привести к отсутствию достаточного количества компле- ментарных участков для взаимодействия с эн- хансером, что в свою очередь, снижает уровень транскрипции. В связи с этим стоит заметить, что Gfi-1, присутствующий во всех СКК, ингибирует клеточную пролиферацию в отсутствие необходи- мого микроокружения (или его восприятия), что является первым регуляторным звеном на стадии дифференцировки СКК [10]. То есть такого рода информация также дает нам основание предполо- жить, что эффект запаздывания накопления СКК в определенные периоды (например, 2-3 и 5-9 сутки) может быть следствием того, что изменен- ный рецепторный аппарат СКК не передает адек- ватных сигналов о наличии необходимого микро- окружения. То есть в данном случае Gfi-1 не вы- полняет своей функции вследствие структурных изменений транскрипционного аппарата. Выводы Таким образом, на основании полученных экс- периментальных данных можно заключить, что криоконсервирование является фактором, оказы- вающим выраженное влияние на структурно- функциональное состояние СКК. Точкой приложе- ния физико-химических факторов криоконсерви- рования являются разные этапы каскадного про- цесса реализации гемопоэтической функции этих клеток: от расселения в микроокружении до форми- рования колоний. При этом важно, что не все, а только определенная часть СКК подвергается 366ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 15, 2005, №3 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 15, 2005, №3 отрицательному влиянию криоконсервирования. Причем в одних и тех же СКК каждая из функций (расселение, пролиферация, наработка структур гликокаликса) изменяется по-разному в аналогич- ных условиях криоконсервирования. Данный факт говорит о том, что даже в пределах какого-то определенного компартмента СКК (например, КОЕс-10) имеются различия функционального, а, следовательно, исходного статуса клеток в целом. Литература Гольдберг Е.Д., Дыгай А.М., Шахов В.П., Кириенкова Е.В. Об участии глюкокортикоидов в механизмах регуляции процессов пролиферации и дифференцировки различных типов гемопоэтических клеток-предшественников при стрессе // Гематол. и трансфузиол.– 1987.– Т. 32, №6.– С. 47-51. Гольцев А.Н. Влияние факторов криоконсервирования на иммунологические свойства кроветворных клеток костного мозга : Автореф. дис. ... д-ра мед.наук.– Харьков, 1988.– 35 с. Гольцев А.Н., Дубрава Т.Г., Цуцаева А.А. Сравнительное изучение криоустойчивости КОЕс и КОЕк, находящихся в различном функциональном состоянии // Криобиоло- гия.– 1987, №1.– С. 11-17. Цуцаева А.А., Гольцев А.Н. “Хоминг” и пролиферация кроветворных клеток (КОЕс) криоконсервированного костного мозга в селезенке и костном мозге реципиен- тов // Криобиология.– 1987.– №4.– С. 9-15. Чертков И.Л., Гуревич О.А. Стволовая клетка и ее микроокружение.– М.: Медицина, 1977.– 270 с. Appelbaum R., Herzing G., Graw R. et al. Study of cell dose and storage time on engraftment of cryopreserved autologous bone marrow in a canine model // Transplantation.– 1978.– Vol. 26, N2.– P. 245-251. Goltsev A.N., Babenko N.N., Dubrava T.G. et al. Мodification of the state of bone marrow hemopoietic cells after cryopreservation // Int. J. Refrigeration (in Press). Goltsev A.N., Lutsenko E.D., Dubrava, T.G. et al. The im- portance of myelotransplant component content in the manifestation of cryopreserved haemopoietic precursors functional activity. 2. Adequate methods for assessing. The role of adhesive cells // Cryo-Letters.– 1996.– Vol.17.– P. 195-200. Hattori Y., Kato H., Nitta M., Takamoto S. Decrease of L- selectin expression on human CD34+ cells on freeze-thawing and rapid recovery with short-term incubation // Exp. Hematol.– 2001.– Vol. 29, N1.– P.114-122. Hock, H., Hamblen, M.J., Rooke, H.M. et al. Intrinsic requirement for zinc-finger transcription factor Gfi-1 in neutrophil differentiation // Immunity.– 2003.– Vol. 18.– P. 109-120. Nichogiannopoulou A., Trevisan M., Neben S. et al. Defects in hemopoietic stem cell activity in Ikaros mutant mice // J. Exp. Med.– 1999.– Vol. 190, N9.– P. 1201–1214. Takahashi T., Inada S., Pommier C.G. et al. Osmotic stress and the freeze-thaw cycle cause shedding of Fc and C3b receptors by human polymorphonuclear leukocytes // J. Immunol.– 1985.– Vol. 134, N6.– P. 4062-4068. Till J.E., McCulloch E.A. A direct measurement of the radiation sensitivity of normal mouse bone marrow cells // Rad. Res.– 1961.– Vol. 14, N12.– P. 213-222. Tsai F.Y., Keller G., Kuo F.C. et al. An early haematopoietic defect in mice lacking the transcription factor GATA-2 // Nature.– 1994.– Vol. 371.– P. 221-226. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. То есть подтверждается тезис значимости исход- ного состояния биообъекта в определении его криолабильности и криостабильности. Другими словами, криоконсервирование в данном случае выступает в роли фактора, селективно действую- щего не только на разные клеточные структуры, но и на одни и те же, однако, находящиеся на раз- ных этапах реализации своей функциональной активности.

Модификация структурно-функциональной организации стволовых кроветворных клеток костного мозга после действия факторов низкотемпературного консервирования

Institution

Ähnliche Einträge