Влияние криоконсервированной культуры микрофрагментов поджелудочной железы на иммунный статус крыс с развитием аллоксанового диабета

Исследовалось влияние криоконсервированной культуры микрофрагментов поджелудочной железы (ПЖ) новорожденных поросят на иммунный статус крыс в модели аллоксанового диабета (АД), сходного с инсулинзависимым сахарным диабетом человека. Показано, что введение криоконсервированной культуры микрофрагменто...

Ausführliche Beschreibung

Gespeichert in:

Bibliographische Detailangaben
Datum:	2006
Hauptverfasser:	Останкова, Л.В., Побеленский, О.Н., Останков, М.В., Гольцев, А.Н.
Format:	Artikel
Sprache:	Russian
Veröffentlicht:	Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України 2006
Schriftenreihe:	Проблемы криобиологии и криомедицины
Schlagworte:	Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология
Online Zugang:	http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/137100
Tags:	Tag hinzufügen Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Назва журналу:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Zitieren:	Влияние криоконсервированной культуры микрофрагментов поджелудочной железы на иммунный статус крыс с развитием аллоксанового диабета / Л.В. Останкова, О.Н. Побеленский, М.В. Останков, А.Н. Гольцев // Проблемы криобиологии. — 2006. — Т. 16, № 3. — С. 316-325. — Бібліогр.: 32 назв. — рос.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	irk-123456789-137100
record_format	dspace
spelling	irk-123456789-1371002018-06-17T03:14:24Z Влияние криоконсервированной культуры микрофрагментов поджелудочной железы на иммунный статус крыс с развитием аллоксанового диабета Останкова, Л.В. Побеленский, О.Н. Останков, М.В. Гольцев, А.Н. Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология Исследовалось влияние криоконсервированной культуры микрофрагментов поджелудочной железы (ПЖ) новорожденных поросят на иммунный статус крыс в модели аллоксанового диабета (АД), сходного с инсулинзависимым сахарным диабетом человека. Показано, что введение криоконсервированной культуры микрофрагментов ПЖ способствовало восстановлению клеточного и гуморального звена иммунитета. Наиболее выраженный эффект был получен после ее введения в парапанкреатическую клетчатку. Досліджувався вплив кріоконсервованої культури мікрофрагментів підшлункової залози (ПЗ) новонароджених поросят на імунний статус щурів у моделі алоксанового діабету, подібного до інсулінзалежного цукрового діабету людини. Показано, що введення в різні ділянки організму кріоконсервованої культури мікрофрагментів ПЗ сприяють відновленню клітинної і гуморальної ланки імунітету. Найбільш виражений ефект було отримано після її введення у парапанкреатичну клітковину. The effect of cryopreserved culture of newborn piglet pancreas microfragments on rat’s immune status in the model of aloxane diabetes (AD), similar to human insulin-dependent diabetes mellitus has been studied. Administration of pancreas microfragment cryopreserved culture was demonstrated as contributing to cell and humoral immunity link recovery. The most manifested effect was after its introduction into parapancreatic fat. 2006 Article Влияние криоконсервированной культуры микрофрагментов поджелудочной железы на иммунный статус крыс с развитием аллоксанового диабета / Л.В. Останкова, О.Н. Побеленский, М.В. Останков, А.Н. Гольцев // Проблемы криобиологии. — 2006. — Т. 16, № 3. — С. 316-325. — Бібліогр.: 32 назв. — рос. http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/137100 615.361.441.014.41:616.379-008.64:57.085.23 ru Проблемы криобиологии и криомедицины Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
language	Russian
topic	Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология
spellingShingle	Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология Останкова, Л.В. Побеленский, О.Н. Останков, М.В. Гольцев, А.Н. Влияние криоконсервированной культуры микрофрагментов поджелудочной железы на иммунный статус крыс с развитием аллоксанового диабета Проблемы криобиологии и криомедицины
description	Исследовалось влияние криоконсервированной культуры микрофрагментов поджелудочной железы (ПЖ) новорожденных поросят на иммунный статус крыс в модели аллоксанового диабета (АД), сходного с инсулинзависимым сахарным диабетом человека. Показано, что введение криоконсервированной культуры микрофрагментов ПЖ способствовало восстановлению клеточного и гуморального звена иммунитета. Наиболее выраженный эффект был получен после ее введения в парапанкреатическую клетчатку.
format	Article
author	Останкова, Л.В. Побеленский, О.Н. Останков, М.В. Гольцев, А.Н.
author_facet	Останкова, Л.В. Побеленский, О.Н. Останков, М.В. Гольцев, А.Н.
author_sort	Останкова, Л.В.
title	Влияние криоконсервированной культуры микрофрагментов поджелудочной железы на иммунный статус крыс с развитием аллоксанового диабета
title_short	Влияние криоконсервированной культуры микрофрагментов поджелудочной железы на иммунный статус крыс с развитием аллоксанового диабета
title_full	Влияние криоконсервированной культуры микрофрагментов поджелудочной железы на иммунный статус крыс с развитием аллоксанового диабета
title_fullStr	Влияние криоконсервированной культуры микрофрагментов поджелудочной железы на иммунный статус крыс с развитием аллоксанового диабета
title_full_unstemmed	Влияние криоконсервированной культуры микрофрагментов поджелудочной железы на иммунный статус крыс с развитием аллоксанового диабета
title_sort	влияние криоконсервированной культуры микрофрагментов поджелудочной железы на иммунный статус крыс с развитием аллоксанового диабета
publisher	Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
publishDate	2006
topic_facet	Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология
url	http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/137100
citation_txt	Влияние криоконсервированной культуры микрофрагментов поджелудочной железы на иммунный статус крыс с развитием аллоксанового диабета / Л.В. Останкова, О.Н. Побеленский, М.В. Останков, А.Н. Гольцев // Проблемы криобиологии. — 2006. — Т. 16, № 3. — С. 316-325. — Бібліогр.: 32 назв. — рос.
series	Проблемы криобиологии и криомедицины
work_keys_str_mv	AT ostankovalv vliâniekriokonservirovannojkulʹturymikrofragmentovpodželudočnojželezynaimmunnyjstatuskryssrazvitiemalloksanovogodiabeta AT pobelenskijon vliâniekriokonservirovannojkulʹturymikrofragmentovpodželudočnojželezynaimmunnyjstatuskryssrazvitiemalloksanovogodiabeta AT ostankovmv vliâniekriokonservirovannojkulʹturymikrofragmentovpodželudočnojželezynaimmunnyjstatuskryssrazvitiemalloksanovogodiabeta AT golʹcevan vliâniekriokonservirovannojkulʹturymikrofragmentovpodželudočnojželezynaimmunnyjstatuskryssrazvitiemalloksanovogodiabeta
first_indexed	2025-07-10T03:15:02Z
last_indexed	2025-07-10T03:15:02Z
_version_	1837228154859552768
fulltext	316 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 16, 2006, №3 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 16, 2006, №3 УДК 615.361.441.014.41:616.379-008.64:57.085.23 Л.В. ОСТАНКОВА1, О.Н. ПОБЕЛЕНСКИЙ2, М.В. ОСТАНКОВ1, А.Н. ГОЛЬЦЕВ1 Влияние криоконсервированной культуры микрофрагментов поджелудочной железы на иммунный статус крыс с развитием аллоксанового диабета UDC 615.361.441.014.41:616.379-008.64:57.085.23 L.V. OSTANKOVA1, O.N. POBELENSKY2, M.V. OSTANKOV1, A.N. GOLTSEV1 Effect of Cryopreserved Culture of Pancreas Microfragments on Immune Status of Rats with Aloxane Diabetes Development Исследовалось влияние криоконсервированной культуры микрофрагментов поджелудочной железы (ПЖ) новорожденных поросят на иммунный статус крыс в модели аллоксанового диабета (АД), сходного с инсулинзависимым сахарным диабетом человека. Показано, что введение криоконсервированной культуры микрофрагментов ПЖ способствовало восстановлению клеточного и гуморального звена иммунитета. Наиболее выраженный эффект был получен после ее введения в парапанкреатическую клетчатку. Ключевые слова:криоконсервированная культура, поджелудочная железа, иммунный статус, модель аллоксанового диабета. Досліджувався вплив кріоконсервованої культури мікрофрагментів підшлункової залози (ПЗ) новонароджених поросят на імунний статус щурів у моделі алоксанового діабету, подібного до інсулінзалежного цукрового діабету людини. Показано, що введення в різні ділянки організму кріоконсервованої культури мікрофрагментів ПЗ сприяють відновленню клітинної і гуморальної ланки імунітету. Найбільш виражений ефект було отримано після її введення у парапанкреатичну клітковину. Ключові слова: кріоконсервована культура, підшлункова залоза, імунний статус, модель алоксанового діабету. The effect of cryopreserved culture of newborn piglet pancreas microfragments on rat’s immune status in the model of aloxane diabetes (AD), similar to human insulin-dependent diabetes mellitus has been studied. Administration of pancreas microfragment cryopreserved culture was demonstrated as contributing to cell and humoral immunity link recovery. The most manifested effect was after its introduction into parapancreatic fat. Key-words: cryopreserved culture, pancreas, immune status, aloxane diabetes model. * Автор, которому необходимо направлять корреспонденцию: ул. Переяславская, 23, г. Харьков, Украина 61015; тел.:+38 (057) 373-57-91, факс: +38 (057) 373-30-84, электронная почта: cryo@online.kharkov.ua * To whom correspondence should be addressed: 23, Pereyaslavskaya str., Kharkov, Ukraine 61015; tel.:+380 57 373 5791, fax: +380 57 373 3084, e-mail: cryo@online.kharkov.ua 1Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the Na- tional Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine 2Kharkov National University, Kharkov, Ukraine 1Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков 2Харьковский национальный университет им. В.Н. Каразина Сахарный диабет (СД) – типичный пример патологии, относящейся к аутоиммунным заболе- ваниям (АИЗ) [19-22, 27, 30, 32]. Его развитие связано с особенностями взаимодействия иммун- ной и эндокринной сферы. Известно, что морфоло- гической основой СД является воспаление [26], ло- кализующееся в островках Лангерганса, приво- дящее к деструкции β-клеток [10, 29-31]. Наруше- ние эндокринной функции органа, особенно ее гормонопродуцирующей активности [12, 21], существенно сказывается на состоянии иммунной системы (ИС) всего организма [23]. При прове- дении исследований, направленных на изучение новых методов лечения СД 1-го типа, обязательна оценка показателей ИС [8]. Применение эмбрио- нальных стволовых клеток [3-6] является новым Diabetes mellitus (DM) is a typical example of pathology, relating to autoimmune diseases (AIDs) [19- 22, 27, 30, 32]. Its development is associated to the peculiarities of immune and endocrine spheres interaction. The inflammation [26], locating in Langerhans islets, resulting in β-cells destruction [29- 31] is known to be DM morphological base. Disorder in endocrine function of an organ, especially its hormone-producing activity [12, 21] significantly affects an immune system (IS) state of the whole organism [23]. The IS indices estimation is indispen- sable when performing researches, targeted to studying the novel therapies for I type DM treatment [8]. The application of embryonic stem cells [3-6] is a new direction in AIDs treatment. The alloxane diabetes (AD), being recently treated with xenotransplantation КРИОМЕДИЦИНА, КЛИНИЧЕСКАЯ И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ТРАНСПЛАНТОЛОГИЯ CRYOMEDICINE, CLINICAL AND EXPERIMENTAL TRANSPLANTOLOGY K 317 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 16, 2006, №3 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 16, 2006, №3 направлением в лечении АИЗ. В эксперименте моделью СД является аллоксановый диабет (АД), для лечения которого в последние годы исполь- зуют ксенотрансплантацию нативных [16] или криоконсервированных [14] β-клеток ПЖ. Цель работы – изучить в сравнительном аспекте особенности изменения ИС крыс с индуцированным АД до и после введения крио- консервированной культуры микрофрагментов ПЖ новорожденных поросят. Материалы и методы В работе были использованы 175 половозрелых крыс-самцов линии Вистар массой 180-210 г. Исследования проводили в соответствии с “Об- щими этическими принципами экспериментов на животных” [7], которые согласуются с положения- ми “Европейской конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей” (Страсбург, 1985). Для создания модели АД аллоксанмоногидрат (ICN Biomedical Inc.) вводили под кожу одноразово в дозе 130 мг/кг массы животного после предваритель- ного 24-часового их голодания при свободном доступе к воде [13]. Крысы были разделены на группы по семь в каждой. Контрольная группа – интактные крысы. Опытные – с индукцией АД на 3, 7, 14, 28-е сутки, и опытные, которым на 14-е сутки развития АД вводили в дозе 0,5 г разморо- женной криоконсервированной культуры микро- фрагментов ПЖ новорожденных поросят в парен- химу печени и селезенки, под капсулу почки, в парапанкреатическую клетчатку и внутримышеч- но в боковую поверхность бедра. На 3, 7, 14, 28-е сутки после лечения животных выводили из экспе- римента декапитацией под эфирным наркозом. Ткань ПЖ получали у новорожденных поросят по методу [16], криоконсервировали по методу [14], хранили при низкой температуре (–196°С) в течение года в герметически закрытых контейне- рах. Размораживали на водяной бане при темпе- ратуре 40-41°С. Клеточное звено ИС исследовали у крыс с индукцией АД и после введения биоматериала методом прямой иммунофлуоресценции субпопу- ляций Т-лимфоцитов (СD4+ и CD-8+) с исполь- зованием антикрысиных ФИТЦ меченых монокло- нальных антител (CALTAG, США) в люминес- центном микроскопе ЛЮМАМ по методу [17]. В гуморальном звене ИС циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК) крови определяли по методу [15]. Способность к адгезии клеток перитонеаль- ной полости (ПП) оценивали по методу [9]. Состояние моноцитарно-фагоцитарной системы (МФС) клеток ПП, т.е. фагоцитарный индекс (ФИ) и фагоцитарное число (ФЧ), определяли по методу [2]. of either native [16] or cryopreserved [14] pancreatic β-cells served as DM model in the experiment. This research was targeted to comparatively study the peculiarities of IS change in rats with induced AD prior to and after introducing cryopreserved culture of newborn piglet pancreas microfragments. Material and methods In research there were used 175 mature Wistar male rats of 180-210 g. The research was performed according to the “General ethical principles of experi- ments in animals” [7], conformed with the statements of the “European Convention for the Protection of Vertebrate Animals Used for Experimental and Other Scientific Purposes” (Strasbourg, 1985). To create AD model a single subcutaneous introduction of aloxane- monohydrate (ICN Biomedical Inc.) in 130 mg/kg of animal weight was done after preliminary 24-hrs starvation with free access to water [13]. Rats were divided into groups by 7 in each. The control group comprised intact rats. The experimental groups were as follows: rats with AD development to the 3rd, 7th, 14th, 28th days and those, administered under slight ether narcosis by 0.5 g of frozen-thawed cryopreserved culture of newborn piglet pancreas microfragments into liver and spleen parenchyma, kidney capsule, parapancreatic fat and intramuscularly into lateral femur surface to the 14th day of AD development. To the 3rd, 7th, 14th, 28th days after treatment the animals were remo-ved out of experiment by decapitation under ether narcosis. Pancreas tissue was derived from newborn piglets according to the method [16], cryopreserved as described [14] and stored at low temperature (–196°C) for year in hermetically sealed containers. Thawing was done on water bath at 40-41°C. IS cell link was studied in rats with AD induction and after biomaterial administration with the method of direct immune fluorescence of T-lymphocyte (CD4+ and CD-8+) subpopulations using anti-rat FITC of labelled monoclonal antibodies (CALTAG, USA) under LUMAM luminescent microscope according to the method [17]. Blood circulating immune complexes (CICs) were determined in IS humoral link according to the method [15]. Adhesive ability of peritoneal cavity (PC) cells was evaluated by the method [10]. State of monocyte-phagocyte system of PC cells, i.e. phagocyte index (PI) and phagocyte number (PN) were determined by the method [2]. The obtained experimental data were statistically processed with “Microsoft Excel 2000”. Results and discussion When estimating the IS changes, being pathoge- netically important in DM development, of note is that among T-cell link components there is a change in CD4+ cell activity [25] at the background of a sharp 318 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 16, 2006, №3 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 16, 2006, №3 Полученные эксперимен- тальные данные статистичес- ки обрабатывали в электрон- ных таблицах “Microsoft Excel 2000”. Результаты и обсуждение Оценивая патогенетически значимые в развитии СД изме- нения в ИС, следует отметить, что среди компонентов Т-кле- точного звена изменяется активность CD4+ клеток [25] на фоне резкого снижения СD8+ клеток [23]. С этой концепцией согласуются и полученные нами результаты илетазакоП dnI i sec ьлортноК lortnoC анасколлаяинедеввелсопиктуС noitartsinimdaenaxolaretfayaD 3-и dr3 7-е ht7 41 -е ht41 82 -е ht82 4DC + %,иктелк 4DC + %,sllec 63,1±12,53 041,2±142,03 * 262,1±260,22 * 23,1±21,61 * 304,1±180,51 * 8DC + %,иктелк 8DC + %,sllec 38,1±42,22 040,0±280,41 * 043,1±149,21 * 67,0±49,6 * 086,0±061,7 * ИРИ IRI 185,0±385,1 102,0±741,2 * 701,1±507,1 * 813,0±232,2 * 202,0±601,2 * Таблица. 1. Показатели клеточного звена ИС при развитии АД Table 1. Indices of IS cell link at AD development Примечание:– различия достоверны по сравнению с контролем, p< 0,05. Notes: – differences are statistically significant if compared with the control, p< 0.05. илетазакоП dnI i sec ьлортноК lortnoC анасколлаяинедеввелсопиктуС noitcudortnienaxolaretfayaD 3-и dr3 7-е ht7 41 -е ht41 82 -е ht82 еынсрепсидоклеМ КИЦ CICs 026,0±210,41 407,1±426,81 * 502,3±860,43 * 045,4±425,87 * 336,2±023,02 * атнатсноК tnatsnoC 60,0±38,0 40,0±00,1 * 60,0±20,1 * 21,0±86,1 * 050,0±052,1 * CD8+ cell reduction [23]. Our results obtained in AD model system conform with this concept as well. Change in CD8+ cell content was more significant and the maximum deviation value from initial one in the immune regulatory index (IRI) was observed to the 14th day when pathology was the most manifested (Table 1). This disorder of T-cell content of regulatory suppressor subpopulation is a typical “marker” for change in IS state at AIDs in general [3, 4] and DM, in particular [24, 25]. Therefore the established by us after AD induction the IRI augmentation of different extent but statistically significant at three stages of four ones (excluding 7th day) is quite regular (Table 1). The sign of disorder in humoral component of immune system in AD-induced rats is a surplus content of small circulating immune complexes (sCIC). As reported in the paper [20], one of the first signs of failure in immunological tolerance to pancreas islet β- cells antigens is an increase in auto-antibody concentration in blood serum. As it was shown [10], the main antibodies (ABs) types, revealed in blood of DM patients are the ABs to β-cell cytoplasmic components: ICA. These ABs appear long before DM в модельной системе АД. Изменение содержания СD8+ клеток было более существенным, и максимальное значение отклонения от исходного в показателях иммунорегуляторного индекса (ИРИ) наблюдали на 14-е сутки в момент наиболее выраженного проявления патологии (табл. 1). Такое нарушение содержания Т-клеток регуля- торной супрессорной субпопуляции является характерным “маркером” изменения состояния ИС при АИЗ вообще [3, 4] и в частности СД [24, 25]. Поэтому вполне закономерно установленное нами разной степени, но достоверное на трех сроках из четырех (за исключением 7-х суток) повышение ИРИ после индукции АД (табл.1). Признаком нарушения гуморального звена иммунитета крыс с индукцией АД является избыточное содержание в крови мелкодисперсных циркулирующих иммунных комплексов (мЦИК). В [20] отмечается, что одним из первых признаков срыва иммунологической толерантности к анти- генам β-клеток островков ПЖ является увели- чение концентрации аутоантител в сыворотке крови. Показано [10], что основными типами антител (АТ), выявляемых в крови больных СД, Примечание:– различия достоверны по сравнению с контролем, p< 0,05. Notes: – differences are statistically significant if compared with the control, p< 0.05. Таблица 2. Содержание мЦИК в сыворотке крови крыс при развитии АД Table 2. sCIC content in rat blood serum at AD development clinical signs, but their role in this pathology development has remained unclear. Consequently, an increase in sCIC concentration stipu- lates pathological process development in different organ-tissue structures of organism [3]. Together with large CIC they are capable of activating the system of cells, being a part of MPS, by changing cytokine profile of an organism [3, 4] and aggrava- ting the immune-inflammatory 319 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 16, 2006, №3 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 16, 2006, №3 Примечание:– различия достоверны по сравнению с контролем, p< 0,05. Notes: – differences are statistically significant if compared with the control, p< 0.05. илетазакоП dnI i sec ьлортноК lortnoC анасколлаяинедеввелсопиктуС noitartsinimdaenaxolaretfayaD 3-и dr3 7-е ht7 41 -е ht41 82 -е ht82 ИФ IP 81,1±71,83 614,2±210,43 * 105,1±000,33 * 02,2±03,03 246,1±621,82 * ЧФ NP 56,0±53,6 095,0±000,5 * 106,0±000,5 * 28,0±00,3 * 054,0±076,3 * Таблица 3. Фагоцитарная активность клеток ПП крыс при развитии АД Table 3. Phagocyte activity of rat PC cells at AD development являются АТ к цитоплазматическим компонентам β-клеток – ICA. Эти АТ появляются задолго до клинических проявлений СД, однако их роль в развитии данной патологии остается не до конца выясненной. Следовательно, повышение концентрации мЦИК обусловливает развитие патологических процессов в различных органо-тканевых структу- рах организма [3]. Вместе с крупнодисперсными ЦИК они могут активировать систему клеток, входящих в МФС, изменяя цитокиновый профиль организма [3, 4], агравируя течение иммуновоспа- лительного процесса [26]. Так, у крыс с развитием АД наблюдались существенные изменения в гуморальном звене ИС по сравнению с контролем (табл. 2). Концентрация мЦИК в крови крыс достоверно повышалась уже с 3-х суток индукции АД. На 7-е сутки концентрация и суммарное количество ЦИК увеличивались в 2 раза, на 14-е сутки – в 14 раз, а к 28-м суткам хотя и наблюдали некоторое их снижение, однако по-прежнему значения оставались выше контрольных. Отмечен- ные изменения являются логическим откликом ИС на развитие хронического воспаления. Изменение концентрации ЦИК при индукции АД четко взаимодействовало с активностью МФС. Достоверное снижение фагоцитарной активности клеток ПП наблюдали с 7-х по 14-е сутки (табл.3). Полученные данные подтверждаются работами [3, 4], в которых указывается на “заинтересован- ность” клеток МФС в развитии АИЗ и прежде всего у лиц с генетической предрасположенностью [32]. Макрофаги продуцируют в повышенной концентрации ИЛ-10, ИЛ-18 [18, 23, 28, 32], активирующие Txl-клетки, которые являются основным фактором развития иммунного вектора СД [20]. Такие изменения связаны, по всей видимости, с ответом ИС на развивающийся патологический процесс и миграцией клеток в очаги воспаления [26]. На более поздних стадиях развития АД (28-е сутки) за счет увеличения process course [26]. Thus, the significant changes in IS humoral link were observed in rats with AD development compared with the control (Table 2). Con- centration of sCIC in rat blood statistically and significantly increased even from the 3rd day of AD induction. CIC concentration and total amount were twice increased to the 7th day, this was by 14 times to the 14th day but although their certain reduction was observed to the 28th day, the values have remained still higher than the control. The noted changes are reasonable IS response to chronic inflammation development. Change in CIC concentration during AD induction interacted distinctly with MPS activity. A statistically significant reduction of PC cell phagocyte activity was observed since the 7th to 14th days (Table 3). The data obtained are confirmed by the researches [3, 4], where an “ interest” of MPS cells in AID development and primarily in persons with genetic predisposition is shown [32]. Macrophages produce high concentrated IL-10, IL-18 [18, 23, 28, 32], activating Th1-cells, being the main factor for DM immune vector development [20]. These changes are apparently associated to IS response to a developing pathological process and cell migration into inflammation foci [26]. At later stages of AD development (the 28th day) due to an increase in Ig and CIC production, which are phagocytized by MPS cells, their function reduces and amount decreases, that resulted in cell exhausting. Their accumulation of an excessive amount of inflammatory cytokines [11], oxygen active forms prevents accomplishing functional physiological loading for MPS cells during AD development. As mentioned above, during AID, which is DM [19- 22], there is the pathology development of the whole organism, associated to a disorder in manifestation of adhesive properties in immune competent cells (ICCs). A two-fold decrease in PC cell amount compared with the control was observed since the 7th to 14th day of AD development (Table 4). This change in adhesive cell (AC) content in PC testifies to ICCs response to AD development and is accompa- nied with their migration into inflammation focus. Taking into account that this ICCs function is associated to adhesion molecules of different classes and their expression extent being controlled by orga- nism cytokines [18], the data obtained on a change in PC cell adhesion confirm the fact of cytokine profile alteration during AD development [30, 32]. Con- tent of PC adhesive cells increa- sed to the 28th day and corres- 320 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 16, 2006, №3 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 16, 2006, №3 Таблица 4. Способность клеток ПП к адгезии у крыс при развитии АД Table 4. Adhesive ability of PC cells in rats at AD development Примечание:– различия достоверны по сравнению с контролем, p< 0,05. Notes: – differences are statistically significant if compared with the control, p< 0.05. продукции Ig и ЦИК, которые фагоцитируются клетками МФС, их функция снижается и количество уменьшается, что является результатом истоще- ния клеток. Наработка ими чрезмерного количества вос- палительных цитокинов [11], активных форм кислорода препятствует выполнению функциональных физиологи- ческих нагрузок клетками МФС при развитии АД. Как отмечалось выше, при АИЗ, каким является СД [20- илетазакоП dnI i sec ьлортноК lortnoC анасколлаяинедеввелсопиктуС noitartsinimdaenaxolaretfasyaD и-3 dr3 е-7 ht7 е-41 ht41 е-82 ht82 котелковтсечилоК 01ПП 6 лм/ IP 26,1±41,51 04,1±20,21 84,0±4,7 26,0±77,6 30,1±63,21 ППКА sCACP 07,0±2,06 054,3±82,73 506,2±51,53 061,0±26,23 121,5±02,94 23], развивается патология всего организма и касается нарушения проявления свойств адгезии иммунокомпетентных клеток (ИКК). С 7-х по 14-е сутки развития АД наблюдали уменьшение количества клеток ПП в два раза по сравнению с контролем (табл. 4). Такое изменение в содержа- нии адгезивных клеток (АК) в ПП свидетельствует об ответе ИКК на развитие АД и сопровождается их миграцией в очаг воспаления. Учитывая, что эта функция ИКК связана с различного класса молекулами адгезии и степень их экспрессии находится под контролем цитокинов организма [18, 24], полученные данные об изменении адгезии клеток ПП подтверждают факт изменения профиля цитокинов при развитии АД [30,32]. Содержание адгезивных клеток ПП увеличивалось к 28-м суткам и соответствовало данным, полу- ченным на 3-и сутки, оставаясь достоверно ниже контрольных значений (табл.4). Таким образом, анализ показателей ИС крыс с индукцией АД показывает существенные изме- нения в ней. Систематизация опубликованных работ по патогенезу СД свидетельствует о том, что в инициации развития и поддержания его течения принимают участие различные факторы внешней и внутренней среды организма, т.е. СД является мультифакторным заболеванием, при котором возможен отклик на ситуацию всех трех систем обеспечения гомеостаза, а именно нейро- иммуноэндокринной сферы [1]. Следовательно, состояние организма при экспансии в нем каких- либо сопутствующих патологий вызывает дополни- тельную разбалансировку этих фундальных систем гомеостаза. После введения криоконсервированной куль- туры микрофрагментов ПЖ абсолютное содер- жание СД 4+ клеток (Т-хелперов) возвратилось к исходным значениям. Несмотря на тенденцию к увеличению содержания СD8+ клеток (Т-супрес- соров) у всех животных, которых лечили, дос- товерных изменений по сравнению с контрольной ponded to the data, obtained by the 3rd day, remaining statisti-cally and significantly lower than the control values (Table 4). Thus, the analysis of IS indices in rats with induced AD shows its significant changes. The summarising of published data on DM pathogenesis testifies to the fact that various factors of organism’s internal and external environments take part in initiating DM development and maintaining its course, i.e. DM is a multifactor disease, when a response of all three homeostasis providing systems, namely neuroimmune- endocrine sphere, is feasible [1]. Consequently, an �� 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 С од ер жа ни е м Ц И К, у сл . е д/ м л sC IC c on te nt , r el . u ni ts /m l Сутки после введения Day after administration Рис.1. Содержание мЦИК в крови крыс до и после введения криоконсервированной культуры микрофраг- ментов ПЖ: – в парапанкреатическую клетчатку; – внутриселезеночно; 123 123 123 – под капсулу почки; 123123 – внутрипеченочно; 123 123 123 – внутримышечно; – АД; – интакт. Fig. 1. sCIC content in rat blood prior to and after adminis- tering cryopreserved culture of pancreatic microfragments: –intrahepatic; – intraspleen; 123 123 123 – under kidney capsule;123 123 123 – intrahepatic; 123 123 – intramuscularly; – AD; – intact. АД AD 3-и 3rd 7-е 7th 14-е 14th 28-е 28th 321 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 16, 2006, №3 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 16, 2006, №3 Та бл иц а 5. О тн ос ит ел ьн ое со де рж ан ие Т -х ел пе ро в и Т- су пр ес со ро в у кр ы с с А Д п ос ле в ве де ни я кр ио ко нс ер ви ро ва нн ой к ул ьт ур ы м ик ро фр аг ме нт ов П Ж Ta bl e 5 . R el at iv e co nt en t o f T -h el pe rs a nd T -s up pr es so rs in ra ts w ith A D a fte r a dm in is te rin g cr yo pr es er ve d cu ltu re o f p an cr ea tic m ic ro fr ag m en ts я и недевв отсе М ya w noitartsini m d A я и недевв елсоп икту С noitartsini m da retfa sya D 3- и dr3 7- е ht7 е -41 ht41 82 -е ht82 ыт и цо ф м ил - Т setycoh p myl - T ыт и цо ф м ил - Т setycoh p myl - T ыт и цо ф м ил - Т setycoh p myl - T ыт и цо ф м ил - Т setycoh p myl - T 4 D C + 4 D C + 8 D C + 8 D C + И Р И I RI 4 D C + 4 D C + 8 D C + 8 D C + И Р И I RI 4 D C + 4 D C + 8 D C + 8 D C + И Р И I RI 4 D C + 4 D C + 8 D C + 8 D C + И Р И I RI о нчо нечеп и рту н В ta pehartnI ic 112,1 ±169,01 000,1 ±300,01 001,0 ±690,1 009,0 ±109,7 001,1 ±304,01 201,0 ±957,0 204,1 ±297,1 206,2 ±05,22 858,0 ±697,0 005,2 ±432,42 341,3 ±336,02 597,0 ±571,1 о нчо незелес и рту н В neel psartnI 214,1 ±444,21 419,0 ±306,8 201,0 ±644,1 005,1 ±05,41 203,2 ±414,12 050,0 ±776,0 209,2 ±216,42 044,2 ±010,62 202,0 ±649,0 001,3 ±217,62 32,2 ±07,81 093,0 ±824,1 икчоп улуспак до П el us pac yen dik re dn U 109,1 ±238,01 006,0 ±512,5 002,0 ±770,2 002,1 ±711,01 613,1 ±02,21 080,0 ±928,0 008,2 ±011,52 209,0 ±336,7 401,0 ±982,3 308,2 ±328,22 009,1 ±006,51 574,0 ±364,1 юуксеч итае рк напа рап В уктачтелк taercna para p otnI i taf c 017,1 ±212,51 4,1 ±0,21 102,0 ±762,1 532,1 ±009,41 006,1 ±419,51 001,0 ±639,0 306,2 ±512,22 337,2 ±03,12 259,0 ±340,1 2,3 ±0,82 3,2 ±0,91 193,1 ±474,1 о нче ш ы м и рту н В ylral ucs u martnI 416,1 ±456,41 015,0 ±102,4 044,0 ±884,3 205,1 ±212,41 409,0 ±339,7 204,0 ±297,1 002,3 ±512,52 206,1 ±204,91 899,0 ±992,1 203,2 ±326,22 610,1 ±006,21 670,0 ±597,1 Д А D A 4 D С + 8 D C 023,1 ±20,51 - + 813,0 ±890,2 -I RI/ И Р И 67,0 ±61,7 - ыс ы рк е ы нткат н И star tcatnI 4 D С + 8 D C 63,1 ±13,53 - + 185,0 ±385,1 -I RI/ И РI 38,1 ±42,22 - П ри м еч ан ие :* – ра зл ич ия д ос то ве рн ы п о ср ав не ни ю с к он тр ол ем , p < 0, 05 . N ot es :* – d iff er en ce s a re st at ist ic al ly si gn ifi ca nt if c om pa re d w ith th e co nt ro l, p< 0 .0 5. 322 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 16, 2006, №3 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 16, 2006, №3 Рис. 2. Фагоцитарный индекс (а) и фагоцитарное число (б) клеток ПП крыс после введения криоконсервированной культуры микрофрагментов ПЖ: – внутрипеченочно; –внутриселезеночно; 123 123 – под капсулу почки; 123123 123 – в парапанкреатическую клетчатку; 123 123 123 – внутримышечно; – АД; – интакт. Fig. 2. Phagocyte index (a) and phagocyte number (b) of rat PC cells after applying cryopreserved culture of pancreatic microfragments: – intrahepatic; –intraspleen; 12 12 12 – under kidney capsule; 123123 – into parapancreatic fat; 123 123 123 – intramuscularly; – AD; – intact. Ф аг оц ит ар ны й ин де кс Ph ag oc yt e in de x Ф аг оц ит ар но е чи сл о Ph ag oc yt e nu m be r Сутки после введения Day after administration Сутки после введения Day after administration группой достигнуто не было, это отражается в по- казателях ИРИ (табл. 5) и свидетельствует о раз- ном отклике регуляторных субпопуляций Т-клеток на такой вид терапии. Учитывая, что под контролем клеточного звена находится и гуморальное звено ИС, логичными являются положительные изменения в нем у крыс с введением криоконсервированной культуры микрофрагментов ПЖ на 14-е сутки. И хотя к этому сроку у всех животных после лечения количество мЦИК оставалось достоверно увели- ченным, наблюдалась тенденция к их снижению. И только к 28-м суткам у крыс с введением биоматериала в парапанкреатическую клетчатку количество мЦИК и константа достигали уровня контрольных значений (рис.1). Фагоцитарная активность клеток ПП крыс независимо от области введения криоконсер- вированной культуры микрофрагметов ПЖ восстанавливалась, начиная с 7-х суток. Эти пока- затели достигали исходных значений у всех крыс на 28-е сутки после лечения (рис. 2, а, б). Количество клеток в ПП (рис.3,а) и их способ- ность к адгезии (рис. 3, б) были несколько выше на 7-е сутки только у крыс, которым вводили криоконсервированную культуру микрофрагментов ПЖ в парапанкреатическую клетчатку. Следует отметить, что у этих животных данная функция восстанавливалась быстрее, чем другие показа- тели ИС. В то же время после введения био- organism’s state under expansion in it of any accompanying pathologies causes an additional dysbalance of these homeostasis basic systems. After administering cryopreserved culture of pancreas microfragments the absolute content of CD4+ cells (T-helpers) get the initial values. As for CD8+ cells (T-suppressors) in spite of the tendency to their increase in all treated animals, no statistically significant changes in their content were achieved if compared with the control group, that was shown in IRI indices (Table 5) and testified to a different response of T- cells regulatory subpopulations to this therapy. Taking into consideration that IS humoral link is controlled by a cell one as well, the positive changes in it for rats with administered cryopreserved culture of pancreatic microfragments to the 14th day are rea- sonable. Even though by this term the sCIC amount remained statistically and significantly increased in all animals after treatment, the tendency to their reduction was observed. Only to the 28th day in rats with admi- nistered biomaterial into parapancreatic fat the sCIC amount and the constant reached the control values (Fig. 1). Phagocyte activity of rat PC cells recovered since the 7th day independently on the area of applying pancreas microfragment cryopreserved culture. These indices reached the initial values in all rats to the 28th day after treatment (Fig. 2, a, b). Cell number in PC (Fig. 3, a) and their adhesive capability (Fig. 3, b) were slightly higher to the 7th day �� 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 �� 0 1 2 3 4 5 6 7 8 АД AD 7-е 7th 14-е 14th 28-е 28th 3-и 3rd АД AD 7-е 7th 14-е 14th 28-е 28th 3-и 3rd a a б b 323 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 16, 2006, №3 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 16, 2006, №3 Сутки после введения Day after administration Сутки после введения Days after administration Рис. 3. Количество клеток в ПП (а) и их способность к адгезии (б) у крыс с развитием АД до и после введения криоконсервированной культуры микрофрагментов ПЖ: – внутрипеченочно; –внутриселезеночно; 123 123 123 – под капсулу почки; 123 123 123 – в парапанкреатическую клетчатку; 123123 – внутримышечно; – АД; – интакт. Fig. 3. Cells amount in PC (a) and their adhesive ability (b) in rats with AD development prior to and after applying cryopreserved culture of pancreatic microfragments: – intrahepatic; –intraspleen; 123123 – under kidney capsule; 12 12 12 – into papancreatic fat; 123 123 123 – intramuscularly; – AD; – intact. материала в другие области у животных, начиная с 7-х суток, наблюдали восстановление количества клеток ПП. Однако их способность к адгезии соответствовала уровню контроля только на 14-е сутки. На 28-е сутки отмечали увеличение коли- чества клеток в ПП и повышение их способности к адгезии по сравнению с контролем. Выводы Приведенные экспериментальные данные поз- волили установить, что терапия с использованием криоконсервированной культуры микрофрагментов ПЖ эффективно коррегирует состояние всех звеньев ИС: клеточного, гуморального и МФС. Наиболее манифестно характеризуется состояние Т-звена иммунитета, в котором наблюдается вос- становление их функционального статуса, т. е. сте- пени экспрессии мембранных структур. Более выраженный эффект восстановления ИС у крыс с индукцией АД был получен при введении криоконсервированной культуры микрофрагментов ПЖ в парапанкреатическую клетчатку. only in rats with an administered cryopreserved culture of pancreatic microfragments into parapancreatic fat. Of note is that in these animals the present function recovered more rapidly, than other IS indices. At the same time, after administering biomaterial into other areas the recovery of PC cell number was observed in animals since the 7th day. However their adhesive ability corresponded to the control level only to the 14th day. An increase in cell amount in PC and their adhesive ability compared with the control was observed to the 28th day. Conclusions The shown experimental data enabled to establish the therapy with applying cryopreserved culture of pancreas microfragments as efficiently correcting the state of all IS links: cell, humoral and MPS ones. The most manifested is the state of immunity T-link, where recovery of their functional status, i.e. expression extent of membrane structures, is observed. More manifested effect of IS recovery in rats with AD induction was obtained under administering cryopreserved culture of pancreas microfragments into parapancreatic fat. Ад ге зи вн ы е кл ет ки , % Ad he si ve c el ls , % Литература Абрамов В.В. Взаимодействие иммунной и нервной систем.– Новосибирск: Наука, 1988.– 166 с. Александров М.Т., Кудрявицкий А.И., Румянцева Е.Г. и др. Метод вычисления абсолютных показателей фагоцитоза// Лаб. дело.– 1988.– №9.– С. 30-36. Гольцев А.Н. Возможные причины развития аутоим- мунной патологии и поиск путей ее лечения // Пробл. мед.науки та освіти.– 2000.– №1.– С. 22-37. References Abramov V.V. Interaction of immune and nerve systems.– Novosibirsk: Nauka, 1998.– 166 p. Aleksandrova M.T., Kudryavitsky A.I., Rumyantseva E.G. et al. Method of calculation of absolute indices of phagocytosis // Lab. Delo.– 1988.– N9.– P. 30-36. 1. 2. 1. 2. 3. �� 0 10 20 30 40 50 60 70 �� 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 АД AD 7-е 7th 14-е 14th 28-е 28th 3-и 3rd АД AD 7-е 7th 14-е 14th 28-е 28th 3-и 3rd a a б b Ко ли че ст во к ле то к, 1 ×1 06 /м л C el l a m ou nt , 1× 10 6 /m l 324 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 16, 2006, №3 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 16, 2006, №3 Гольцев А.М., Бабенко Н.М., Останкова Л.В. та ін. Застосування кріоконсервованих продуктів ембріофето- плацентарного комплексу (ПЕФПК) як коректорів ауто- імунних захворювань на моделі експериментального алергійного енцефаломієліту (ЕАЕ) // Трансплантологія.– 2003.– Т. 4, №1.– С. 207-209. Грищенко В.И. Роль криобиологии в создании биоло- гической клеточной и тканевой трансплантации // Пробл. криобиологии.– 2001.– №2.– С.7-9. Грищенко В.И., Гольцев А.Н. Трансплантация продуктов эмбриофетоплацентарного комплекса. От понимания механизма действия к повышению эффективности приме- нения // Пробл. криобиологии.– 2002.– №1.– С. 54-87. Загальноетичні принципи експериментів на тваринах // Ендокринологія.– 2003.– Т. 8, №1.– С. 142-145. Зверева Л.С, Дубинкин И.В., Зилов А.В. и др. Иммуноло- гические подходы к предикции инсулинзависимого сахарного диабета // Пробл. эндокринологии.– 1999.– №6.– С. 3-6. Иммунология: Практикум /Под ред. Е.И.Пастера и др.– Киев: Вища школа, 1989.– 304 с. Колесник Ю.М., Орловский М.А. Панкреатические остров- ки: некоторые аспекты морфологии, физиологии и процессов деструкции при сахарном диабете типа 1// Пробл. эндокринологии.– 2004.– Т. 50, №2.– С. 3-10. Малышев И.Ю., Круглов С.В., Бантина Л.Ю. и др. Стресс- ответ и апоптоз в про- и антивоспалительном фенотипе макрофагов // Бюл. эксперим. биологии и медицины.– 2004.– Т. 138, №8.– С. 162-165. Мельниченко А.Г., Фадеев В.В. Аутоиммунный инсулиновый синдром как причина гипогликемического состояния // Пробл. эндокринологии.– 1997.– №5.– С. 48-51. Садовникова Н.В., Кондратьев Л.Ю., Федотов В.П. Моделирование сахарного диабета у крыс: латентная и манифестная формы // Пробл. эндокринологии.– 1988.– №5.– С. 69-72. Сандомирский Б.П., Волкова Н.А., Гальченко С.Е., Белочкина И.В. Влияние режимов криоконсервирования на сохранность микрофрагментов поджелудочной железы поросят // Пробл. криобиологии.– 2000.– №2.– С.76-80. Стручков П.В., Константинова Н.А., Лаврентьев В.В. и др. Скрининг-тест для оценки патогенных свойств иммунных комплексов // Лаб. дело.– 1985.– №7.– С. 410-413. Тронько М.Д., Турчин И.С., Ковальская И.А. и др. Трансплантация культур β-клеток поджелудочной железы новорожденных поросят, больных сахарным диабетом // Материалы I-го съезда трансплатологов Украины.– Киев, 1995.– С.180-181. Шторх В., Эммрах И. Определение клеточных маркеров методом мембранной иммунофлюoресценции. Имму- нологические методы / Под ред. В.Фрилля.– М: Медицина, 1987.– С. 254-268. Balasa B., La Cava A., Van Gunst K. et al. A mechanism for IL-10-mediated diabetes in the nonobese diabetic (NOD) mouse: ICAM-1 deficiency blocks accelerated diabetes // J. Immunol.– 2000.– Vol. 165, N12.– P. 7330-7337. Bertry-Coussot L., Lucas B., Danel C. et al. Long-term reversal of established autoimmunity upon transient blockade of the LFA- 1/intercellular adhesion molecule-1 pathway // J. Immunol.– 2002.– Vol. 168, N19.– P. 3641-3648. Chen C., Lee W. H., Yun P., Snow P., Liu Chin-Pin. Induction of autoantigen-specific Th2 and Tr1 regulatory T cells and modulation of autoimmune diabetes // J. Immunol.– 2003.– Vol. 171, N2.– P. 733-744. Chen Y., Shi Du Yan S., Colgan J. et al. Blockade of late stages of autoimmune diabetes by inhibition of the receptor for advanced glycation end products // J. Immunol.– 2004.– Vol. 173, N2.– P. 1399-1405. Goltsev A.N. Possible causes of autoimmune pathology development and search for ways of its treatment //Probl. med. nauki ta osvity.– 2000.– N1.– P. 22-37. Goltsev A.M., Babenko N.M., Ostankova L.V et al. Application of cryopreserved products of embryofetoplacental complex as correctors of autoimmune diseases in the model of experimental allergic encephalomyelitis (EAE) // Transplan- tologiya.– 2003.– Vol. 4, N1.– P. 207-209. Grischenko V.I. The role of cryobiology in creation of biotechnologies for cell and tissue transplantation // Problems of Cryobiology.– 2001.– N3.– P. 7-9. Grischenko V.I., Goltsev A.N. Transplantation of the products of embryofetoplacental complex. From understanding of mechanism of the effect to increasing the efficiency of application // Problems of Cryobiology.– 2002.– N1.– P. 54-87. General-ethic principles of experiments in animals // Endokrinologiya.– 2003.– Vol. 8, N1.– P. 142-145. Zvereva L.S., Dubinkin I.V., Zilov A.V. et al. Immunological approaches to insulin-dependent Diabetes mellitus prediction // Problemy endokrinologii.– 1999.– N6.– P. 3-6. Immunology: Laboratory manual / Ed. by E.I. Paster et al.– Kiev: Vyscha shkola, 1989.– 304 p. Kolesnik Yu.M., Orlovsky M.A. Pancreatic islets: some aspects of morphology, physiology and destruction processes at Diabetes mellitus of I type // Problemy endokrinologii.– 2004.– Vol. 50, N2.– P. 3-10. Malyshev I.Yu., Kruglov S.V., Bantina L.Yu. et al. Stress- response and apoptosis in pro- and anti-inflammatory phenotype of macrophages // Bull. eksperim. biologii i meditsiny.– 2004.– Vol. 138, N8.– P. 162-165. Melnichenko A.G., Fadeyev V.V. Autoimmune insulin syndrome as the reason of hypoglycemic state // Problemy endokrinologii.– 1997.– N5.– P. 48-51. Sadovnikova N.V., Kondratyev K.Yu., Fedorov V.P. Modelling of diabetes mellitus in rats: latent and manifested forms // Problemy endokrinologii.– 1988.– N5.– P. 69-75. Sandomirsky B.P., Volkova N.A., Galchenko S.E., Belochkina I.V. The effect of cryopreservation regimens on the integrity of microfragments of piglets’ pancreas // Problems of Cryobiology.– 2000.– N2.– P. 76-80. Struchkov P.V., Konstantinova N.A., Lavrentiev V.V. et al. Screening-test to estimate pathogenic properties of immune complexes // Laboratornoe delo.– 1985.– N7.– P. 410-413. Tronko M.D., Turchin I.S., Kovalskaya I.A. et al. Transplan- tation of β-cell cultures of newborn piglet pancreas to patients with Diabetes mellitus // Materials of the Ist Congress of Transplantologists of Ukraine.– Kiev, 1995.– P.180-181. Shtorkh V., Emmarkh I. Determination of cell markers using the method of memrbane immune fluorescence. Immunological methods / Ed. by V. Frill.– Moscow: Meditsina, 1987.– P.254-268. Balasa B., La Cava A., Van Gunst K. et al. A mechanism for IL-10-mediated diabetes in the nonobese diabetic (NOD) mouse: ICAM-1 deficiency blocks accelerated diabetes // J. Immunol.– 2000.– Vol. 165, N12.– P. 7330-7337. Bertry-Coussot L., Lucas B., Danel C. et al. Long-term reversal of established autoimmunity upon transient blockade of the LFA- 1/intercellular adhesion molecule-1 pathway // J. Immunol.– 2002.– Vol. 168, N19.– P. 3641-3648. Chen C., Lee W. H., Yun P., Snow P., Liu Chin-Pin. Induction of autoantigen-specific Th2 and Tr1 regulatory T cells and modulation of autoimmune diabetes // J. Immunol.– 2003.– Vol. 171, N2.– P. 733-744. Chen Y., Shi Du Yan S., Colgan J. et al. Blockade of late stages of autoimmune diabetes by inhibition of the receptor for advanced glycation end products // J. Immunol.– 2004.– Vol. 173, N2.– P. 1399-1405. Chong M. M. W., Chen Y., Darwiche R. et al. Suppressor of cytokine signaling-1 over expression protects pancreatic cells from CD8+ T cell-mediated autoimmune destruction // J. Immunol.– 2004.– Vol. 172, N9.– P. 5714-5721. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19. 20. 21. 22. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19. 20. 21. 325 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 16, 2006, №3 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 16, 2006, №3 Chong M. M. W., Chen Y., Darwiche R. et al. Suppressor of cytokine signaling-1 over expression protects pancreatic cells from CD8+ T cell-mediated autoimmune destruction // J. Immunol.– 2004.– Vol. 172, N9.– P. 5714-5721. Ejrnaes M., Videbaek N., Christen U. et al. Different diabetogenic potential of autoaggressive CD8+ clones associated with IFN-inducible protein 10 (CXC chemokine ligand 10) production but not cytokine expression, cytolytic activity, or homing characteristics // J. Immunol.– 2005.– Vol. 174, N5.– P. 2746-2755. Gregg K., Bell J., Lee H. et al. IL-10 diminishes CTLA-4 expression on islet-resident T-cells and sustains their activation rather than tolerance // J. Immunology.– 2005.– Vol. 174, N2.– P. 662-670. Havari E., Lennon-Dumenil A. M., Klein L. et al. Expression of the B7.1 costimulatory molecule on pancreatic cells abrogates the requirement for CD4 T-cells in the development of type 1 diabetes // J. Immunology.– 2004.– Vol. 173, N2.– P. 787- 796. Larbi A., Grenier A., Frisch F. et al. Acute in vivo elevation of intravascular triacylglycerol lipolysis impairs peripheral T cell activation in humans // Am. J. Clin. Nutr.– 2005.– Vol. 82, N5.– P. 949-956. Mallone R., Nepom G.T. Targeting T lymphocytes for immune monitoring and intervention in autoimmune diabetes // Am. J. Therap.– 2005.– Vol.12, N6.– P. 534-550. Oikawa Y., Shimada A., Kasuga A. et al. Systemic administra- tion of IL-18 promotes diabetes development in young nonobese diabetic mice // J. Immunol.– 2003.– Vol. 171, N11.– P. 5865-5875. Silva D. G., Petrovsky N., Socha L. et al. Mechanisms of accelerated immune-mediated diabetes resulting from islet cell expression of a Fas ligand transgene // J. Immunol.– 2003.– Vol. 170, N10.– P. 4996-5002. Suk K., Kim S., Kim Y.H. et al. IFN-/TNF – synergism as the final effector in autoimmune diabetes: A key role for STAT1/IFN regulatory factor-1 pathway in pancreatic cell death // J. Immunol.– 2001.– Vol. 166, N7.– P. 4481-4489. Wen L., Peng J., Li Z., Wong F. S. The effect of innate immu- nity on autoimmune diabetes and the expression of Toll-like receptors on pancreatic islets // J. Immunol.– 2004.– Vol. 172, N5.– P. 3173-3180. Yang Z., Chen M., Wu R. et al. Suppression of autoimmune diabetes by viral IL-10 gene transfer // J. Immunol.– 2002.– Vol. 168, N12.– P. 6479-6485. Поступила 13.06.2007 Ejrnaes M., Videbaek N., Christen U. et al. Different diabetogenic potential of autoaggressive CD8+ clones associated with IFN-inducible protein 10 (CXC chemokine ligand 10) production but not cytokine expression, cytolytic activity, or homing characteristics // J. Immunol.– 2005.– Vol. 174, N5.– P. 2746-2755. Gregg K., Bell J., Lee H. et al. IL-10 diminishes CTLA-4 expression on islet-resident T-cells and sustains their activation rather than tolerance // J. Immunol.– 2005.– Vol. 174, N2.– P. 662-670. Havari E., Lennon-Dumenil A. M., Klein L. et al. Expression of the B7.1 costimulatory molecule on pancreatic cells abrogates the requirement for CD4 T-cells in the development of type 1 diabetes // J. Immunol.– 2004.– Vol. 173, N2.– P. 787-796. Larbi A., Grenier A., Frisch F. et al. Acute in vivo elevation of intravascular triacylglycerol lipolysis impairs peripheral T cell activation in humans // Am. J. Clin. Nutr.– 2005.– Vol. 82, N5.– P. 949-956. Mallone R., Nepom G.T. Targeting T lymphocytes for immune monitoring and intervention in autoimmune diabetes // Am. J. Therap.– 2005.– Vol.12, N6.– P. 534-550. Oikawa Y., Shimada A., Kasuga A. et al. Systemic administra- tion of IL-18 promotes diabetes development in young nonobese diabetic mice // J. Immunol.– 2003.– Vol. 171, N11.– P. 5865-5875. Silva D. G., Petrovsky N., Socha L. et al. Mechanisms of accelerated immune-mediated diabetes resulting from islet cell expression of a Fas ligand transgene // J. Immunol.– 2003.– Vol. 170, N10.– P. 4996-5002. Suk K., Kim S., Kim Y.H. et al. IFN-/TNF – synergism as the final effector in autoimmune diabetes: A key role for STAT1/IFN regulatory factor-1 pathway in pancreatic cell death // J. Immunol.– 2001.– Vol. 166, N7.– P. 4481-4489. Wen L., Peng J., Li Z., Wong F. S. The effect of innate immu- nity on autoimmune diabetes and the expression of Toll-like receptors on pancreatic islets // J. Immunol.– 2004.– Vol. 172, N5.– P. 3173-3180. Yang Z., Chen M., Wu R. et al. Suppression of autoimmune diabetes by viral IL-10 gene transfer // J. Immunol.– 2002.– Vol. 168, N12.– P. 6479-6485. Accepted in 13.06.2007 22. 23. 24. 25. 26. 27. 28. 29. 30. 31. 32. 23. 24. 25. 26. 27. 28. 29. 30. 31. 32.

Влияние криоконсервированной культуры микрофрагментов поджелудочной железы на иммунный статус крыс с развитием аллоксанового диабета

Institution

Ähnliche Einträge