Особенности изменения иммунологических и биохимических показателей организма крыс с экспериментальным аллергическим энцефаломиелитом
Представлены результаты изучения показателей иммунного статуса и интенсивности метаболических процессов организма крыс на модели экспериментального аллергического энцефаломиелита (ЭАЭ) как аналога рассеянного склероза (РС) человека. Отмечено наличие корреляционных взаимосвязей между изученными показ...
Збережено в:
| Дата: | 2004 |
|---|---|
| Автори: | , , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Russian |
| Опубліковано: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2004
|
| Назва видання: | Проблемы криобиологии и криомедицины |
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/138468 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Особенности изменения иммунологических и биохимических показателей организма крыс с экспериментальным аллергическим энцефаломиелитом / А.Н. Гольцев, Ю.А. Козлова, Н.Н. Бабенко, С.Е. Овсянников, Ю.В. Никитченко // Проблемы криобиологии. — 2004. — № 1. — С. 41–49. — Бібліогр.: 24 назв. — рос. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
irk-123456789-138468 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
irk-123456789-1384682018-06-20T03:10:39Z Особенности изменения иммунологических и биохимических показателей организма крыс с экспериментальным аллергическим энцефаломиелитом Гольцев, А.Н. Козлова, Ю.А. Бабенко, Н.Н. Овсянников, С.Е. Никитченко, Ю.В. Теоретическая и экспериментальная криобиология Представлены результаты изучения показателей иммунного статуса и интенсивности метаболических процессов организма крыс на модели экспериментального аллергического энцефаломиелита (ЭАЭ) как аналога рассеянного склероза (РС) человека. Отмечено наличие корреляционных взаимосвязей между изученными показателями. Полученные данные могут быть использованы в клинической практике для оптимизации методов лечения РС. Представлено результати вивчення показників імунного статусу та інтенсивності метаболічних процесів організму щурів на моделі експериментального алергічного енцефаломієліту (ЕАЕ) як аналога розсіяного склерозу (РС) людини. Відзначено наявність кореляційного взаємозв’язку між вивченими показниками. Отримані дані можуть бути використані у клінічній практиці з метою оптимізації методів лікування РС. The investigation results of the intensity of metabolic processes and the indices of immune status in the model of experimental allergic encephalomyelitis (EAE) of rats as the analogue of human multiple sclerosis (MS) are shown. The presence of correlations between studied indices is noted. The data obtained can be used in clinical practice for optimisation of the MS treatment method. 2004 Article Особенности изменения иммунологических и биохимических показателей организма крыс с экспериментальным аллергическим энцефаломиелитом / А.Н. Гольцев, Ю.А. Козлова, Н.Н. Бабенко, С.Е. Овсянников, Ю.В. Никитченко // Проблемы криобиологии. — 2004. — № 1. — С. 41–49. — Бібліогр.: 24 назв. — рос. 0233-7673 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/138468 616.832-002-006.3-092.4:611.013 ru Проблемы криобиологии и криомедицины Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| language |
Russian |
| topic |
Теоретическая и экспериментальная криобиология Теоретическая и экспериментальная криобиология |
| spellingShingle |
Теоретическая и экспериментальная криобиология Теоретическая и экспериментальная криобиология Гольцев, А.Н. Козлова, Ю.А. Бабенко, Н.Н. Овсянников, С.Е. Никитченко, Ю.В. Особенности изменения иммунологических и биохимических показателей организма крыс с экспериментальным аллергическим энцефаломиелитом Проблемы криобиологии и криомедицины |
| description |
Представлены результаты изучения показателей иммунного статуса и интенсивности метаболических процессов организма крыс на модели экспериментального аллергического энцефаломиелита (ЭАЭ) как аналога рассеянного склероза (РС) человека. Отмечено наличие корреляционных взаимосвязей между изученными показателями. Полученные данные могут быть использованы в клинической практике для оптимизации методов лечения РС. |
| format |
Article |
| author |
Гольцев, А.Н. Козлова, Ю.А. Бабенко, Н.Н. Овсянников, С.Е. Никитченко, Ю.В. |
| author_facet |
Гольцев, А.Н. Козлова, Ю.А. Бабенко, Н.Н. Овсянников, С.Е. Никитченко, Ю.В. |
| author_sort |
Гольцев, А.Н. |
| title |
Особенности изменения иммунологических и биохимических показателей организма крыс с экспериментальным аллергическим энцефаломиелитом |
| title_short |
Особенности изменения иммунологических и биохимических показателей организма крыс с экспериментальным аллергическим энцефаломиелитом |
| title_full |
Особенности изменения иммунологических и биохимических показателей организма крыс с экспериментальным аллергическим энцефаломиелитом |
| title_fullStr |
Особенности изменения иммунологических и биохимических показателей организма крыс с экспериментальным аллергическим энцефаломиелитом |
| title_full_unstemmed |
Особенности изменения иммунологических и биохимических показателей организма крыс с экспериментальным аллергическим энцефаломиелитом |
| title_sort |
особенности изменения иммунологических и биохимических показателей организма крыс с экспериментальным аллергическим энцефаломиелитом |
| publisher |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| publishDate |
2004 |
| topic_facet |
Теоретическая и экспериментальная криобиология |
| url |
http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/138468 |
| citation_txt |
Особенности изменения иммунологических и биохимических показателей организма крыс с экспериментальным аллергическим энцефаломиелитом / А.Н. Гольцев, Ю.А. Козлова, Н.Н. Бабенко, С.Е. Овсянников, Ю.В. Никитченко // Проблемы криобиологии. — 2004. — № 1. — С. 41–49. — Бібліогр.: 24 назв. — рос. |
| series |
Проблемы криобиологии и криомедицины |
| work_keys_str_mv |
AT golʹcevan osobennostiizmeneniâimmunologičeskihibiohimičeskihpokazatelejorganizmakrysséksperimentalʹnymallergičeskiméncefalomielitom AT kozlovaûa osobennostiizmeneniâimmunologičeskihibiohimičeskihpokazatelejorganizmakrysséksperimentalʹnymallergičeskiméncefalomielitom AT babenkonn osobennostiizmeneniâimmunologičeskihibiohimičeskihpokazatelejorganizmakrysséksperimentalʹnymallergičeskiméncefalomielitom AT ovsânnikovse osobennostiizmeneniâimmunologičeskihibiohimičeskihpokazatelejorganizmakrysséksperimentalʹnymallergičeskiméncefalomielitom AT nikitčenkoûv osobennostiizmeneniâimmunologičeskihibiohimičeskihpokazatelejorganizmakrysséksperimentalʹnymallergičeskiméncefalomielitom |
| first_indexed |
2025-07-10T05:49:24Z |
| last_indexed |
2025-07-10T05:49:24Z |
| _version_ |
1837237873219207168 |
| fulltext |
41ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2004, №1
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2004, №1
Особенности изменения иммунологических и биохимических
показателей организма крыс с экспериментальным аллергическим
энцефаломиелитом
А.Н. ГОЛЬЦЕВ1, Ю.А. КОЗЛОВА1, Н.Н. БАБЕНКО1, С.Е. ОВСЯННИКОВ1, Ю.В. НИКИТЧЕНКО2
1Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков
2Харьковский национальный университет им. В.Н. Каразина
Peculiarities of Change in Immunological and Biochemical Indices
in Organism of Rats with Experimental Allergic Encephalomyelitis
GOLTSEV A.N.1, KOZLOVA YU.A.1, BABENKO N.N.1, OVSYANNIKOV S.E.1, NIKITCHENKO YU.V.2
1Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the National Academy
of Sciences of the Ukraine, Kharkov
2Kharkov National University named by V.N. Karazin
Представлены результаты изучения показателей иммунного статуса и интенсивности метаболических процессов организма
крыс на модели экспериментального аллергического энцефаломиелита (ЭАЭ) как аналога рассеянного склероза (РС) человека.
Отмечено наличие корреляционных взаимосвязей между изученными показателями. Полученные данные могут быть
использованы в клинической практике для оптимизации методов лечения РС.
Ключевые слова: экспериментальный аллергический энцефаломиелит, аутоиммунные заболевания, перекисное окисление
липидов.
Представлено результати вивчення показників імунного статусу та інтенсивності метаболічних процесів організму щурів
на моделі експериментального алергічного енцефаломієліту (ЕАЕ) як аналога розсіяного склерозу (РС) людини. Відзначено
наявність кореляційного взаємозв’язку між вивченими показниками. Отримані дані можуть бути використані у клінічній
практиці з метою оптимізації методів лікування РС.
Ключові слова: експериментальний алергічний енцефаломієліт, аутоімунні захворювання, перекисне окислення ліпідів.
The investigation results of the intensity of metabolic processes and the indices of immune status in the model of experimental
allergic encephalomyelitis (EAE) of rats as the analogue of human multiple sclerosis (MS) are shown. The presence of correlations
between studied indices is noted. The data obtained can be used in clinical practice for optimisation of the MS treatment method.
Key words: experimental allergic encephalomyelitis, autoimmune diseases, lipid peroxidation.
УДК 616.832-002-006.3-092.4:611.013 UDC 616.832-002-006.3-092.4:611.013
Адрес для корреспонденции: Гольцев А.Н., Институт проблем
криобиологии и криомедицины НАН Украины,ул. Переяславская,23,
г. Харьков, Украина 61015; тел.:+38 (057) 7720104, факс: +38 (057)
7720084, e-mail: cryo@online.kharkov.ua
Address for correspondence: Goltsev A.N., Institute for Problems
of Cryobiology&Cryomedicine of the Natl. Acad. Sci. of Ukraine,
23, Pereyaslavskaya str.,Kharkov, Ukraine 61015; tel.:+38 (057)
7720104, fax: +38 (057) 7720084, e-mail:cryo@online.kharkov.ua
Клиническая практика показывает, что на
протяжении последних лет наблюдается отчет-
ливая тенденция к возрастанию числа патологий,
имеющих аутоиммунный генез, в частности РС
[2,5]. Для лечения подобного рода патологий
высокоэффективных фармакологических препара-
тов не существует, что в значительной степени
определяется недостаточностью сведений о
механизмах их возникновения и развития на
молекулярном и клеточном уровнях.
По современным представлениям опреде-
ляющую роль в индукции и развитии РС и его
экспериментальной модели ЭАЭ играет срыв
иммунологической толерантности к собственным
энцефалитогенным антигенам. При этом наблю-
дается повышенная активность Тх1 клеток,
которые в условиях изменения цитокинового
профиля инициируют экспансию клеточного
иммунного ответа. При развитии РС, подобно
любому хронически протекающему иммуно-
воспалительному процессу, наблюдается интенси-
Clinical practice shows that recently there has been
observed a distinct tendency to the growth of pathology
numbers with an autoimmune genesis, in particular, MS
[2,5]. There are no effective pharmacological
preparations for such a kind of pathology treatment,
which in a considerable extent is determined by the
lack of information about their origin and development
mechanisms at molecular and cellular levels.
According to contemporary views, the main role in
MS induction and development and EAE as its
experimental model is played by the failure of
immunology tolerance to the own encephalitogenic
antigens. At the same time there is observed an
increased activity of Th1 cells, which under conditions
of cytokine profile changes initiate the cellular immune
response expansion. At MS development, as any state
of chronically proceeding immune-inflammatory
process, the intensity of free-radical lipid oxidation
[13,15] reactions is observed. An increased level of
active oxygen forms (AOF) synthesis induces the
damage of proteins, lipids, nucleic acids that nowadays
42ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2004, №1
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2004, №1
фикация реакций свободнорадикального окисления
липидов [13,15]. Повышенный уровень синтеза
активных форм кислорода (АФК) индуцирует
повреждение белков, липидов, нуклеиновых кислот,
что в настоящее время трактуется как так
называемый “ порочный круг “ перекисного
окисления липидов (ПОЛ) [8]. Модификация белков
под действием избытка АФК вызывает изменение
их конформационной организации с экспансией
скрытых антигенных эпитопов и приобретением
ими новых иммуногенных свойств. Активи-
зирующийся в этих условиях антительный ответ и
образующиеся иммунные комплексы стимулируют
активность фагоцитов и продукцию АФК. Окисле-
ние липидов приводит к появлению хемоаттрак-
тантов, усиливающих миграцию фагоцитов в очаг
воспаления.
Много работ посвящено изучению степени
изменения иммунного статуса при АИЗ, в
частности РС [5, 19,22], и интенсивности свободно-
радикальных процессов при данной патологии
[1,3,13,15,24]. Однако в теоретическом и практи-
ческом аспектах представляют интерес взаимо-
связь подобного рода изменений и ее степень.
Актуальность изучения корреляции между
вышеупомянутыми процессами определяется, во-
первых, тем, что изменение состояния иммунного
гомеостаза и интенсивность течения ПОЛ
являются факторами, взаимоопределяющими друг
друга, во-вторых – противоречивостью данных об
особенностях течения свободнорадикальных
реакций при АИЗ, что связано с использованием
неидентичных способов расчета исследованных
параметров (на 1 г ткани, мг белка, количество
клеток и т.д.) [13,15]. Все это затрудняет анализ и
сравнение полученных данных.
Цель работы – определение некоторых показа-
телей иммунного статуса организма, интенсив-
ности ПОЛ и уровня антиоксидантной активности
(АОА) на различных этапах развития ЭАЭ.
Материалы и методы
Эксперименты были выполнены на белых
беспородных крысах-самцах массой 150-180 г. Все
манипуляции с животными проводили согласно
Международным принципам Европейской конвен-
ции о защите позвоночных животных (Страсбург,
1985г.). ЭАЭ индуцировали введением в подушеч-
ки лап крыс гомогената аллогенной ткани спинного
мозга, эмульгированной в полном адъюванте
Фрейнда по методу [4]. Тяжесть клинических
проявлений оценивали по следующей шкале: 0+ –
отсутствие клинических проявлений; 1+ – снижен-
ный тонус хвоста; 2+ – мышечная слабость или
легкий паралич передних конечностей; 3+ – тяжелый
паралич задних или всех четырех конечностей; 4+ –
is interpreted as so-called lipid peroxidation (LPO)
“vicious circle” [8]. Protein modification under the
AOF surplus influence causes a change in their
conformational organisation with the expansion of
latent antigen epitopes and their new immunogenic
peculiarities gaining. Antibodies response, activated
under these conditions and created immune complexes
stimulate a phagocyte activity and their AOF
production. Lipid oxidation brings to the appearing of
chemoattractants, intensifying the phagocyte migration
to the inflammation focus.
There are a lot of papers, devoted to the question
of studying the degree of change in immune status at
AID, in particular MS [5, 19, 22], and the intensity of
free-radical processes at this pathology [1, 3, 13, 15,
24] as well. However, in theoretical and practical
aspects both such a kind of changes interaction and its
degree are of some interest. The actuality of correlation
studying between mentioned above processes is
determined, firstly, by the fact that change in the state
of immune homeostasis and the intensity in the course
of LPO are the factors, mutually determining each
other, secondly: by data discrepancy about the course
peculiarities of free-radical reactions at AID, this is
connected with the usage of non-identical calculation
ways of the investigated parameters (for 1 g of tissue,
mg of protein, cell number, etc.) [13,15]. All this makes
difficulties in the analysis and comparison of the data
obtained.
The aim of the work is the estimation of some
indices of organism immune status, LPO intensity and
the antioxidant activity (AOA) level at different stages
of EAE development.
Materials and methods
The experiments were performed in white mongrel
male rats of 150-180 g. All manipulations with animals
were performed according to International principles
of the European convention on vertebrates’ protection
(Strasbourg, 1985). EAE was induced by introduction
in rat’s paws of the homogenate of spinal cord allogenic
tissue, emulsificated in a complete Freund’s adjuvant
according to the method [4]. The clinical manifestations
severity was estimated on the following scale: 0+ –
absence of clinical manifestations; 1+ – reduced tail
tonus; 2+ – myasthenia or light paralysis of anterior
extremities; 3+ – severe paralysis of posterior
extremities and all 4 limbs; 4+ – premortal state; 5+ –
death. The group of intact animals, to those
physiological solution was introduced, served as the
control. To the 7th, 14th, 21 st day after the immunisation
the animals were decapitated under a light ether
anesthesia, and their blood was taken into a dry test-
tube for serum receiving. The peritoneal cavity (PC)
cells suspension was taken by washing out with the
medium 199 with the calf fetal serum and sodium
43ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2004, №1
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2004, №1
предсмертное состояние; 5+ – смерть. Контролем
служила группа интактных животных, которым
вводили физиологический раствор. На 7-е, 14-е,
21-е сутки после иммунизации животных декапи-
тировали под легким эфирным наркозом, кровь
собирали в сухую пробирку для получения
сыворотки. Суспензию клеток перитонеальной
полости (ПП) вымывали средой 199 с добавлением
телячьей плодовой сыворотки и цитрата натрия [6].
Содержание адгезивных клеток (АК) пери-
тонеальной полости определяли инкубированием в
пластиковых чашках при температуре 37°С в
течение 1 часа с дальнейшим отделением непри-
крепившихся клеток [6]. Для оценки фагоцитарной
активности клетки ПП инкубировали с суточной
убитой культурой Staphylococcus aureus (1 млрд
на 1 мл) [6]. Процент фагоцитировавших клеток –
фагоцитарный индекс (ФИ) и число захваченных
одной клеткой микроорганизмов – фагоцитарное
число (ФЧ) определяли при микроскопическом
исследовании препаратов, окрашенных азур-II-
эозином (по Романовскому-Гимза). Концентрацию
и размер циркулирующих иммунных комплексов
(ЦИК) в сыворотке крови определяли методом
преципитации с 3%-м и 4%-м растворами поли-
этиленгликоля (ПЭГ) [9].
Уровень ПОЛ оценивали по содержанию
гидроперекисей липидов (ГПЛ) в гомогенатах
печени и головного мозга по методу [20], в
сыворотке крови, как описано в [17]. Гомогенаты
печени и головного мозга готовили на 100 мМ трис-
HCl-буфере (pH 7,4); соотношение ткань : буфер (1:3).
Спектр поглощения окрашенного продукта записы-
вали на двулучевом спектрофотометре Specord UV
VIS с измерением разности экстинции при 535 и
580 нм. Содержание ГПЛ выражали в эквивалент-
ных количествах малонового диальдегида (МДА).
Содержание белка в гомогенатах определяли
методом Лоури в модификации Миллера [21],
общую АОА сыворотки крови – по ее способности
тормозить накопление ТБК-активных продуктов
ПОЛ в суспензии желточных липопротеидов [7].
Данные статистически обрабатывали с исполь-
зованием компьютерной программы Excel.
Результаты и обсуждение
Мониторинг состояния животных показал, что
у крыс с 7-го дня после индукции заболевания
наблюдалась потеря массы тела, а с 10-го - первые
клинические признаки (степень тяжести 0+-1+). На
14-16-е сутки основная масса заболевших живот-
ных проявляла клиническую симптоматику в 1+-2+,
на 21-е – 3+ балла по принятой шкале оценки.
Смертельных исходов выявлено не было.
К 7-м суткам заболевания количество клеток
ПП достоверно снижалось на 56% по сравнению с
citrate adding as well [6]. Peritoneal cavity adhesive
cells (AC) content was determined by incubation in
plastic dishes at 37°C during one hour with the further
isolation of the non-adhered cells [6]. For phagocyte
activity estimation, PC cells were incubated with 24hrs
killed culture Staphylococcus aureus (1bil per 1 ml)
[6]. The percentage of phagocyted cells, the phagocyte
index (PI), and the number of microorganisms,
captured by one cell, the phagocyte number (PN), were
determined by microscopic preparations investigation,
stained by azur-II-eosin (by Romanovsky-Gimza). The
concen-tration and the size of circulating immune
complexes (CIC) in the blood serum were determined
by precipitation method with 3% and 4% polyethylene
glycol solution (PEG) [9].
LPO level was estimated according to the content
of lipid hydroperoxides (LHP) in liver and brain
homogenates according to the method [20], in the blood
serum, as it was described in the work [17]. The liver
and brain homogenates were prepared with 100 mM
tris-HCL buffer (pH 7.4); the tissue/buffer ratio is 1/3.
The spectrum of stained product absorption was
recorded using the two-beam spectrophotometer
(Specord UV VIS) with the extinction difference
measuring at 535 and 580 nm. LHP content was
marked in malone dialdehyde (MDA) equivalent
amount. The protein content in homogenates was
performed by Louri method in Miller’s modification
[21], and total blood serum AOA as to its capability to
inhibit the accumulation of TBA-active LPO products
in yolk lipoproteins suspension [7]. The obtained
experimental data were statistically processed with
Excel software.
Results and discussion
The monitoring of animal state showed that in rats
starting from the 7th day after disease induction the
loss of body mass was observed, and from the 10th
day the first clinical signs (the severity degree was
0+-1+) were observed. To the 14th-16th day the majority
of fallen ill animals showed the clinical symptoms in
1+- 2+ points, to the 21st it was 3+ according to assumed
measuring. There were no lethal outcomes.
To the 7th day of disease the number of PC cells
statistically decreased by 56% compared with the
control (Table 1). To the 14th and 21st day their number
recovered to the intact organism level. These changes
in index can characterise a generalised response in
immune-competent cells to pathological process
developing and can testify to both their cytolysis by
the antigen introduced and to the release into blood
channel for elimination of sharply increased content
of finely-dispersed circulating immune complexes
(FDCIC) as well. Moreover, there is not excluded the
possibility of cell migration out of PC into the sites of
direct interaction with specific structures in CNS on
44ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2004, №1
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2004, №1
контролем (табл.1). К 14-м и
21-м суткам их количество
восстанавливалось до уровня
интактного организма. Такие
изменения показателя могут
характеризовать генера-
лизованный ответ иммуно-
компетентных клеток на раз-
вивающийся патологический
процесс и свидетельствовать
как об их цитолизе на вводи-
мый антиген, так и о выходе в
кровяное русло для элиминации
резко повышенного содер-
жания мелкодисперсных цир-
кулирующих иммунных комп-
лексов (мЦИК). Кроме того,
не исключена возможность
миграции клеток из ПП в
участки непосредственного
взаимодействия со специфи-
ческими структурами в ЦНС
на фоне нарушения прони-
цаемости гематоэнцефали-
ческого барьера (ГЭБ) в условиях
развития ЭАЭ [23]. Время выра-
женного (и, возможно, одномо-
ментного) “выброса” клеток из
ПП примерно совпадает с
периодом накопления пула
антигенпрезентирующих, рас-
познающих и эффекторных кле-
еиксечиголонуммИ
илетазакоп
secidnilacigolonummI
К ьлортно
lortnoC
yaDиктуС
е-7
ht7
е-41
ht41
е-12
ts12
К ,ППкотелковтсечило
01 6 лм/котелк
,sllecCPforebmuN
01 6 lm/sllec
70,1±59,41 24,0±5,6 1 68,0±68,31 2 65,0±98,61 2
еоньлетисонтО
%,ППКАовтсечилок
%,rebmunevitalerCACP
96,0±9,65 79,1±90,32 1 72,0±62,51 2,1 71,2±41,97 2,1
еинажредосеонтюлосбА
,ППКА
01 6 лм/котелк
,CACPfotnetnocetulosbA
01 6 lm/sllec
20,0±5,8 10,0±86,1 1 700,0±50,1 2,1 30,0±63,31 2,1
%,ППкотелкИФ
%,sllecCPfoIP 38,0±38,63 15,0±0,11
1 15,0±00,9 2,1 21,1±21,52 2
.де.сба,ППкотелкЧФ
stinu.sba,sllecCPfoNP 72,0±52,5 46,0±88,7
1 12,0±59,6 1 54,0±76,5
ИЦовтсечилокеещбО ,К
аровтсарлм/.де.лсу
.ler,ytitnauqCIClatotehT
noitulosfolm/stinu
67,1±6,92 50,5±66,672 1 6,4±0,79 2,1 56,8±76,131 2,1
К ИЦмовтсечило ,К
аровтсарлм/.де.лсу
,ytitnauqCICDFehT
noitulosfolm/stinu.ler
5,0±32,31 30,6±33,821 1 04,0±59,26 2,1 34,6±67,68 2,1
Таблица 1. Показатели состояния моноцитарно-фагоцитарной системы
(МФС) и гуморального звена иммунитета в динамике развития ЭАЭ
Table 1. Monocyte and phagocyte system (MPS) state indices and humoral
immunity link in the dynamics of EAE development
Примечание: 1 – достоверно по отношению к контролю (Р≤0,05); 2 – достоверно по
отношению к 7-м суткам (Р≤0,05).
Notes: 1 – statistically significant comparing to the control (P≤ 0.05) 2 – statistically
significant comparing to the indices on 7th day (P≤0.05).
ток при развитии иммунного ответа на антиген [22].
Увеличение содержания клеток в ПП к 14-м
суткам заболевания может быть следствием как
активации их пролиферации in situ, так и миграции
молодых клеток МФС из костного мозга, которые
еще не экспрессируют молекулы клеточной
адгезии, что соответствует нашим данным о
низком содержании АК ПП к этому времени
(табл.1). К 21-м суткам развития ЭАЭ происходило
увеличение числа АК ПП более чем в 5 раз по
сравнению с 14-ми сутками, и в 1,3 раза превышало
контрольный показатель. Известно, что адгезия,
как способность клеток закрепляться на искус-
ственных или биологических субстратах, является
одним из важнейших свойств макрофагов [10].
Проявление этого свойства есть функция различ-
ного класса молекул адгезии [16], степень
экспрессии которых на иммунокомпетентных
клетках находится под контролем цитокинового
профиля организма в целом и in situ, в частности
[12]. Из этого следует, что отмеченное нами
изменение адгезивного потенциала клеток ПП
подтверждает факт изменения цитокинового фона
при ЭАЭ. Следовательно, в процессе развития ЭАЭ
the background of blood brain barrier (BBB)
permeability impairment under conditions of EAE
development [23]. Time of a manifested (and may be
simultaneous) cell sharp release out of PC appro-
ximately coincides with the accumulation period of
antigenpresenting, effector and identifying pool cells
at immune response to antigen development [22].
To the 14th day of the disease the increase of cell
content in PC can be both the cause of their
proliferation activation in situ and the MPS young cell
migration out of bone marrow, which has not expressed
the cell adhesion molecules yet, that corresponds to
our data about the low content of PC adhesive cells to
that time (Table 1). To the 21 th day of EAE
development the increase of PC AC number was
observed more than in 5 times in comparison with the
14th day, which is higher in 1.3 times in comparison
with the control number. Adhesion is to be known the
capability of cells to adhere on artificial or biological
substrates, which is one of the main properties of
macrophage [10]. This property manifestation is the
function of various classes of adhesion molecules [16],
which expression degree on immune-competent cells
is under control of the organism cytokine profile in a
45ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2004, №1
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2004, №1
в ПП происходит изменение не только количест-
венного содержания, но и качественных характе-
ристик макрофагальных элементов в виде
перераспределения их субпопуляционного соста-
ва. Подобная закономерность выявлена при
исследовании уровня экспрессии молекул клеточ-
ной адгезии на мононуклеарах периферической
крови у больных РС на субклинической стадии
заболевания [18].
Функциональный потенциал фагоцитирующих
клеток зависит от ряда параметров, включая
наличие молекул адгезии на их мембране [12].
Поэтому закономерно, что при определении
фагоцитарной способности перитонеальных
макрофагов существенно изменялись ФИ и ФЧ.
Так, ФИ к 7-м и 14-м суткам снижался в 3 раза, а
к 21-м – в 1,5 раза по сравнению с контролем. В то
же время поглощающая активность каждой клетки
к 7-м суткам возрастала в 1,5 раза, а к 14-м - в 1,3
раза, что может отражать компенсаторную
реакцию клеток на изменение их количества.
Одним из характерных признаков развития
хронического иммуновоспалительного процесса,
включая и АИЗ, является чрезмерное накопление
в организме ЦИК [14]. Эти субстраты ИС в
физиологических условиях играют важную роль в
поддержании иммунного гомеостаза [12]. По мере
увеличения их количества они начинают приоб-
ретать патогенетическую значимость. Процесс
чрезмерного накопления иммунных комплексов
является одной из причин развития повреждения
тканей при РС [14]. В общем спектре ЦИК
наиболее патогенными являются мелкодисперсные
структуры. Так, установлено достоверное увели-
чение к 7-м суткам как количества мЦИК в 10
раз, так и суммарного количества ЦИК в 9,3 раза
по сравнению с контролем. К 14-м и 21-м суткам
количество мЦИК продолжало оставаться выше
уровня контроля, но существенно снижалось по
сравнению с 7-ми сутками. Снижение содержания
ЦИК к этим суткам может объясняться оседанием
их на эндотелии сосудов “шоковых органов”, что
приводит к уменьшению количества и с одно-
временной реализацией их патогенного действия [12].
Представляло интерес изучить, каким же
образом в условиях описанного выше нарушения
иммунного гомеостаза организма животных с ЭАЭ
изменяется содержание ГПЛ и АОА .
При определении интенсивности ПОЛ было
отмечено, что, несмотря на однонаправленность
развития данного процесса в гомогенатах разных
органов, наблюдались и тканеспецифические
особенности. Так, в печени содержание ГПЛ с
динамикой изменения, обратной нарастанию
неврологических проявлений болезни, было выше
контрольных значений в 4,3 раза на 7-е сутки. К
whole and in situ, in particular [12]. As it proceeds,
the mentioned by us change in adhesive potential of
PC cells confirms the change in cytokine background
at EAE. Thus, in the process of EAE development in
PC not only the change in quantitative content, but
that in qualitative characteristics of macrophage
elements in the form of their subpopulation content
redistribution take place. Such regularity is revealed
when investigating the cellular adhesion molecules
expression level on the periphery blood mononuclear
in patients with MS on disease subclinical stage [18].
Phagocyte cells functional potential depends upon
several parameters, including the presence of adhesion
molecules on their membrane [12]. Therefore, when
determining the phagocyte ability of peritoneal
macrophages both the PI and PN considerably
changed, that is the regularity. Thus, PI by the 7th and
the 14th day decreased in 3 times, and by 21st day did
in 1.5 time, in comparison with the control. At the same
time the absorbing activity of each cell increased by
the 7th day in 1.5 time and by the 14th day in 1.3 times,
which may reflect the compensatory cells reaction on
the change in their number.
Among the characteristic symptoms of chronic
immune-inflammatory process development, including
AID is excessive CIC accumulation in organism [14].
These IS substrates in physiological conditions play a
very important role in immune homeostasis keeping
[12]. With the increase of their number they begin to
gain pathogenetic significance. Immune complexes
excessive accumulation process is one of the tissue
damage causes at MS [14]. In total CIC spectrum the
finely-dispersed structures are the most pathogenic.
Thus, statistically true increase of both FDCIC number
in 10 times and also the summarised CIC number in
9.3 times is found to the 7th day in comparison with the
control. To the 14th and the 21st day FDCIC number
continued to be higher than the control level, but as
much lower in comparison with the 7th day. The
decrease of CIC content to these days can be explained
by their settling on the vessels endothelium of “shock
organs” which results in the decrease in the number
with simultaneous realisation of their pathogenic action
[12].
It was interesting to study the way of LHP and AOA
content change under conditions of mentioned above
immune homeostasis disorder in EAE animal organisms.
When estimating LPO intensity it was noted that,
in spite of the one-way LPO process development in
organs’ homogenates, tissue-specific peculiarities were
observed as well. Thus, in liver the LHP content, having
the dynamics of changes, which is inverse to an
increase in the neurological disease manifestation, was
higher than the control values in 4.3 times to the 7th
day. To the 14th and 21st day the decrease of LHP
level was observed which, however, was higher than
46ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2004, №1
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2004, №1
0
0,5
1
1,5
2
2,5
Контроль 7-е 14-е 21-е
14-м и 21-м суткам снижался уровень ГПЛ,
который, однако, оставался выше контрольных
значений. В мозгу уровень ГПЛ после значитель-
ного повышения на 7-е сутки на пике клинической
манифестации патологии был достоверно ниже
контроля (рис.1).
Таким образом, оценка интенсивности сво-
боднорадикальных реакций в гомогенатах печени
и мозга показала, что у животных с ЭАЭ активация
процессов ПОЛ происходит уже на стадии
доклинических проявлений заболевания (7-е сутки)
с достоверным снижением содержания ГПЛ к 14-м
и 21-м суткам (фаза клинических проявлений).
Вместе с тем общая АОА сыворотки крови и
содержание в ней ГПЛ достоверно повышались
на 14-е сутки развития заболевания по сравнению
с контрольными значениями (табл.2). К 21-м
суткам развития ЭАЭ отмечена активация
процессов ПОЛ с увеличением количества ГПЛ в
сыворотке крови на 13%, в гомогенатах мозга на
11% по сравнению с 14-ми сутками патологии. При
этом количество ГПЛ в гомогенатах печени
снижалось на 23%, АОА сыворотки оставалась на
уровне 14-х суток ЭАЭ.
Приведенные результаты согласуются с сов-
ременными концепциями о физиологической роли
ПОЛ. Так, авторы работы [8] считают, что повы-
шение содержания гидроперекисей ненасыщенных
жирных кислот мембран под воздействием низко-
интенсивного лазерного излучения приводит к
праймингу иммунокомпетентных клеток, повыше-
нию проницаемости их мембран для ионов кальция,
включению гена, ответственного за наработку в
клетках индуцибельной NO-синтазы, продукты
деятельности которой улучшают микроциркуляцию
крови. Можно предположить, что подобные изме-
нения происходят и на начальных этапах развития
АИЗ. Поэтому повышение ГПЛ в фазе доклини-
ческого развития заболевания может манифести-
Рис.1. Динамика изменения содержания ГПЛ в гомо-
генатах тканей крыс с ЭАЭ. – печень; – мозг;
* – достоверно по отношению к контролю (Р≤0,05);
# – достоверно по отношению к 7-м суткам (Р≤0,05).
Fig 1. The dynamics of changes in LHP content in tissue
homogenates of rats with EAE. – liver; – brain; * –
statistically significant comparing to the control (P≤ 0.05);
# – statistically significant comparing to the indices on 7th
day (P≤0.05).
сутки
Control 7th 14th 21st
day
С
од
ер
жа
ни
е
ГП
Л,
н
м
ол
ь
М
Д
А
/ м
г
бе
лк
а
LH
P
co
nt
en
t,
nm
ol
M
D
A/
m
g
of
p
ro
te
in
*
*
* #
#
#
the control values. The LHP level in brain after
considerable increase to the 7th day at the peak of
pathology clinical manifestation was significntly lower
than the control (Fig.1).
Thus, free radical reactions intensity assessment
in liver and brain homogenates showed that in animals
with EAE the LPO process activation took place at
the stage of pre-clinical disease manifestation (7th day)
with statistically significant decrease of LHP content
to the 14th and 21st day (the phase of clinical
manifestations). At the same time the total AOA of
blood serum and the LHP content in it significantly
increased to the 14th day of the disease development,
comparing with the control values (Table 2). To the
21st day of EAE development, the LPO process
activation with the increase of LHP content in blood
serum by 13 %, for brain homogenates by 11%,
compared with the 14th day of the pathology, is noted.
Under these conditions the LHP number in liver
homogenates decreased by 23%, AOA of serum
remained at the EAE 14th day level.
The given results are coordinated with the current
conceptions about LPO physiological role. Thus, the
authors of the paper [8] consider that the increase in
the content of membrane non-saturated fatty acids
hydroperoxides under the influence of low intensive
laser irradiation brings to the priming in immune-
competent cells, the increase in their membrane
permeability for calcium ions, to gene including, which
is responsible for the accumulation of inducible
ьлетазакоП
xednI
К ьлортно
lortnoC
иктуС
yaD
е-7
ht7
е-41
ht41
е-12
ts12
,ЛПГеинажредоС
лм/АДМьломн
,tnetnocOPL
lmrepADMfolomn
11,0±64,2 91,0±76,2 12,0±50,3 * 1,0±44,3 *7
%,АОА 83,3±3,05 52,1±54,45 0,2±8,85 * 31,1±9,75
Таблица 2. Динамика изменений содержания ГПЛ и
АОА сыворотки крови крыс с ЭАЭ
Table 2. The dynamics of change in LHP content and
AOA in blood serum of rats with EAE
Примечание: *– достоверно по отношению к контролю (p≤0,05).
Note: * – statistically significant comparing to the control
(p≤0.05).
47ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2004, №1
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2004, №1
ровать активацию ИС организма, необходимую
для инициации иммуновоспалительной реакции [8].
Снижение содержания ГПЛ к 14-м и 21-м суткам
происходит либо в результате их утилизации при
синтезе простагландинов [11], либо из-за выхода
их в кровяное русло, что подтверждается досто-
верным повышением содержания ГПЛ в сыворот-
ке крови на тот же период развития патологии. Уве-
личение АОА является ответной реакцией на
данные изменения (табл.2).
Итак, проведенные исследования показывают
наличие выраженных изменений уровня биохими-
ческих процессов (ГПЛ, АОА) и показателей,
характеризующих состояние иммунокомпетентной
сферы (ФИ, ФЧ, процент АК клеток ПП, уровень
ЦИК), в условиях развития ЭАЭ как на стадии
доклинической картины заболевания, так и на
стадии острой фазы. Наивысшие показатели со-
держания ГПЛ в гомогенатах печени и мозга от-
мечены в период доклинической фазы развития
заболевания, что может свидетельствовать об
определенном вкладе ПОЛ в развитие АИЗ, в
частности ЭАЭ. Можно предположить, что
снижение содержания ГПЛ в мозгу в период острой
фазы связано, по-видимому, с истощением субстра-
тов ПОЛ головного мозга вследствие слишком
быстрой деструкции миелина и выхода свободных
жирных кислот в ликвор и через ГЭБ в кровяное
русло. Одновременное повышение содержания
ГПЛ в сыворотке крови частично подтверждает
данное предположение. Подобная направленность
процессов отмечена у больных РС на стадии ост-
рой фазы [13].
Математическая обработка результатов (про-
веденный корреляционный анализ) подтверждает
следующую взаимосвязь. Значения коэффи-
циентов корреляции при оценке взаимосвязи между
содержанием ГПЛ и количеством мЦИК при
патологии составляли 0,55-0,82 (р≤0,05). В то же
время у контрольных животных коэффициент
корреляции был значительно ниже и не являлся
достоверным (от 0,11 до 0,45). Положительная
корреляция между мЦИК и изменением АОА
отмечена на 7-е сутки патологии, а к 14-м суткам
взаимосвязь стала обратной (рис. 2).
Выводы
Таким образом, выбранная экспериментальная
модель может быть использована для выявления
определенных закономерностей, степени и харак-
тера изменений состояния иммунокомпе-тентной
сферы и активности метаболических процессов в
организме при развитии АИЗ в виде ЭАЭ. Полу-
ченные в работе данные могут служить предпо-
сылкой оптимизации методов лечения РС в
клинической практике, в частности продуктами
эмбриофетоплацентарного комплекса.
NO-synthetase in cells, which activity products improve
the blood microcirculation. It is possible to suppose
that such changes take place at the initial stages of
AID development as well. Thus, the increase of LHP
content in the pre-clinical disease development phase
can manifest the organism immune system (IS)
activation, which is necessary for immune-inflam-
matory reaction initiation [8]. The decrease of LHP
content to the 14th and the 21st day takes place either
as the result of their utilization during synthesis of
prostaglandins [11], or as a case of their entrance in
blood channel that is confirmed by the statistically
significant LHP increase in blood serum for the same
period of pathology development. AOA increase is the
response to the given changes (Table 2).
Thus, performed investigations show the existence
of the expressed changes in the level of biochemical
processes (LHP, OAO) and the indices which
characterize the state of immune-competent sphere
(PI, PN, the percent of PC ACs, CIC level), in
conditions of EAE development both at pre-clinical
disease picture stage and at an acute phase one as
well. The highest indices of LHP content in liver and
brain homogenates are noted in the period of disease
development pre-clinical phase that can testify the
certain LPO contribution into the AID development,
EAE, in particular. It is possible to suppose that the
decrease of LHP content in brain in an acute phase
period is probably connected with exhaustion of LPO
brain substrates in the case of too fast myelin
destruction and the free fatty acids entrance into liquor
and through BBB into blood channel. Simultaneous
increase of LHP content in blood serum partially
confirms this supposition. Such direction of the process
is observed in the patients with MS at an acute phase
stage [13].
ГПЛпечени ГПЛсыворотки
LHPliver LHPserum
мЦИК
FDCIC
ГПЛмозга АОАсыворотки
LHPbrain AOAserum
0 0,57 -0,71
0,78 0,82
0,77 -0,59
0,56 0,68
Рис. 2. Значения коэффициентов корреляции между
количеством мЦИК и уровнем свободнорадикальных
процессов. – 7-е сутки; – 14-е сутки.
Fig. 2. Correlation coefficients values between MFCIC
number and free radical processes level. – 7th day;
– 14th day.
48ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2004, №1
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2003, №2
Mathematical processing of results (carried-out
correlation analysis) confirms the following relationship.
The values of coefficients of correlation when
estimating the interaction between LHP content and
the number of FDCIC at the pathology were from 0.55
to 0.82 (p≤0.05). At the same time in control animals
the correlation coefficient was considerably lower and
not statistically significant (from 0.11 to 0.45). The
positive correlation between MFCIC and AOA change
is found only to the 7th day of the pathology, to the 14th
day the interaction became reverse (Fig. 2).
Conclusions
Thus, the chosen experimental model can be used
to reveal the specific regularities, the degree and the
character of the change in the immune-competent
sphere state and the metabolic processes activity in
the organism at AID development in the form of EAE.
Obtained data can serve as premisee for the
optimisation of the MS treatment methods in the clinical
practice, in particular, by the embryofetoplacental
complex products [2].
Литература
Гольцев А.Н. Возможные причины развития ауто-
иммунной патологии и поиск путей ее лечения // Пробл.
мед. науки та освіти.– 2000.– №1.– C. 22-37.
Гольцев А.Н., Грищенко В.И., Бабенко Н.Н. Эксперимен-
тальный аллергический энцефаломиелит как возможная
модель изучения механизма действия продуктов
эмбриофетоплацентарного комплекса при лечении
аутоиммунных заболеваний // Пробл. криобиологии.–
2002.– №2.– C. 34-43.
Гольцев А.Н., Овсянников С.Е., Козлова Ю.А. и др.
Изучение характера взаимодействия между степенью
развития аутоиммунных заболеваний и интенсивностью
перекисного окисления липидов // Укр. біохім. журн.–
2002.– Т.74, №4а (додаток 1).– С. 123.
Давыдова Г.С. Применение адъюванта с различным
количеством БЦЖ для воспроизведения ЭАЭ у крыс //
Острый энцефаломиелит в эксперименте и клинике.–
Минск: Наука и техника, 1969.– С. 32-37.
Завалишин И.А., Жученко Т.Д., Переседова А.В.
Патогенез и лечение рассеянного склероза (состояние
проблемы на 2000 год) // Вестник Рос. Акад. мед. наук.–
2001.– № 7.– С. 18-22.
Иммунология: Практикум / Е.У. Пастер, В.В. Овод, В.К. Позур,
Н.Е. Вихоть.– Киев: Выща школа, 1989.– 304 с.
Клебанов Г.И., Бабенкова И.В., Теселнин Ю.О. и др. Оценка
антиоксидантной активности плазмы крови с приме-
нением желточных липопротеидов // Лаб. дело.– 1988,
№5.– С. 59-62.
Клебанов Г.И., Чичук Т.В., Владимиров Ю.А. Влияние
низкоинтенсивного лазерного излучения на пероксидацию
мембранных липидов и концентрацию ионов кальция в
цитозоле фагоцитов // Биол. мембраны.– 2001.– Т.18,
№1.– С. 42-51.
Лабораторные методы исследования в клинике.
Справочник / Под ред. В.В. Меньшикова.– М.: Медицина,
1987.– 365 с.
Маянский А.Н., Маянский Д.Н. Очерки о нейтрофиле и
макрофаге.– Новосибирск: “Наука”, 1989.– 344 с.
Окислительно-антиоксидантный гомеостаз в норме и
патологии / Под ред. Ю.А. Зозули. – Киев: Наук.думка,
1997.– 420 с.
Ройт А. Основы иммунологии / Под ред. Р.Г. Василова,
А.Ф. Киркина.– М.: Мир, 1991.– 327 с.
Соколова Л.І., Юрженко Н.М., Брюзгіна Т.С. Ліпоперокси-
дація у хворих на розсіяний склероз // Фізіол. журн.– 1997.–
Т. 43, №3-4.– С. 86-92.
Хондкарион О.А., Завалишин И.А., Невская О.М. Рассеян-
ный склероз.– М., 1987.– 256 с.
Штибель В.Г., Терлецька О.І., Серветник М.І. Експери-
ментальний алергічний енцефаломієліт: патоморфологія,
патогенез, клініка // Буковинський мед. вісник.– 2000.–
Т.4, №3.– С. 223-228.
Albelda SM, Smith CW, Ward PA. Adhesion molecules and
inflammatory injury. // FASEB J.– 1994.– Vol.8, N8.– P. 504-
512.
Asakawa T., Matsushita S. Coloring conditions of tiobarbituric
acid test for deleting lipid hydroperoxides // Lipids.– 1980.–
Vol.15, N3.– P.137-140.
Kraus J., Engelhardt B., Chatzimanolis N., et al. Cell surface
bound and soluble adhesion molecules in CSF and blood in
multiple sclerosis: correlation with MRI-measures of
subclinical disease severity and activity // J. Neuroimmunol.–
2002.– Vol.122, N1-2.– P.175-185.
Martino G., Hartung H.P. Immunopathogenesis of multiple
sclerosis: the role of T-cells // Curr. Opin. Neurol.– 1999.–
Vol.12.– P. 309-321.
Mihara M., Uchiyama M., Fukuzawa K. Thiobarbituric acid
value on fresh homоgenate of rat as a parameter of lipid
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
References
Goltsev A.N. Possible causes of the development of auto-
immune pathology and the search for its treatment ways //
Probl. Med. Nauki ta Osvity.– 2000.– N1.– P.22-37.
Goltsev A.N., Grischenko V.I., Babenko N.N. Experimental
allergic encephalomyelitis as a probable model for studying
the effect mechanism of the products of embryofetoplacental
complex when treating autoimmune diseases // Problems of
Cryobiology.– 2002.– N2.– P. 34-43.
Goltsev A.N., Ovsyannikov S.E., Kozlova Yu.A., et.al. Study
of the relationship character between the extent of the
development of autoimmune diseases and the intensity of
lipid peroxidation // Ukr. Biochim. Zhurn.– 2002.– Vol.74, №4a
(ann. 1).– P. 123.
Davydova G.S. Application of adjuvant with various amount
of BCG for EAE reproduction in rats // Acute encephalomyelitis
in the experiment and clinic.– Minsk: Nauka i tekhnika, 1969.–
P. 32-37.
Zavalishin I.A., Zhuchenko T.D., Peresedova A.V. Patho-
genesis and treatment of multiple sclerosis (state of the
problem to 2000 year) // Vestnik RAMN.– 2001, N7.– P.18-22.
Immunology: Practicum / Paster E.U., Ovod V.V., Pozur V.K.,
Vykhot N.E.– Kiev: Vyscha shkola, 1989.– 304 p.
Klebanov G.I., Babenkova I.V., Teselnin Y.O. et al. The esti-
mation of antioxidant activity of blood plasma with application
of yolk lipoproteids // Lab. Delo.– 1988.– N5.– P.59-62.
Klebanov G.I., Chichuk T.V., Vladimirov Y.A. The influence
of low-intensive laser radiation on membrane lipids
peroxidation and calcium ion concentration in cytosol of
phagocytes // Biol. membrany.– 2001.– Vol.18, N1.– P. 42-51.
Laboratory methods of investigations in clinic. Reference
book / Ed. by Menshikov V.V.– Moscow: Meditsina, 1987.–
365 p.
Mayanskiy A.N., Mayanskiy D.N. Essays about neutrophil
and macrophage. Novosibirsk: Nauka, 1989.– 344 p.
Oxidation and antioxidation homeostasis in norm and
pathology / Ed. by Zozulya Yu.A.– Kiev: Nauk. Dumka, 1997.–
420 p.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
49ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2004, №1
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2004, №1
peroxidation on aging, CCL4 intoxication and vitamin E
eficiency // Biochem. Med.– 1980.– Vol.23, N3.– P. 302-311.
Miller B.L. Protein determination for large numbers of
samples // Anal. hem.–1959.– V.31, N5.– P. 964-966.
Neumann H, Medana IM, Bauer J, Lassmann H. Cytotoxic T
lymphocytes in autoimmune and degenerative CNS diseases //
Trends Neurosci.– 2002– Vol.25, N6.– P. 313-319.
Sharief M.K., Noori M.A., Ciardi M., et al. Increased levels
of circulating ICAM-1 in serum and cerebrospinal fluid of
patients with active multiple sclerosis. Correlation with TNF-
alpha and blood-brain barrier damage // J. Neuroimmunol.–
1993.– Vol.43, N1-2.– P. 15-21.
Syburra С., Bassi S. Oxidative stress in patients with multiple
sclerosis // Укр. біохім.журнал.– 1999.– Т.71, N3.– C.112-115.
Поступила 02.12.2003
21.
22.
23.
24.
Reut A. Grounds of immunology / Ed. by Vasilov R.G., Kirkin A.F.–
Moscow: Mir, 1991.– 327 p.
Sokolova L.I., Yurzhenko N.M., Bryuzgina T.S. Lipid peroxi-
dation in patients with multiple sclerosis // Fiziol. zhurn.– 1997.–
Vol.43, N3-4.– P. 86-92.
Hondkarion O.A., Zavalishin I.A., Nevskaya O.M. Multiple
sclerosis.– Moscow, 1987.– 256 p.
Shtibel V.G., Terletska O.I., Servetnik M.I. Experimental
allergic encephalomyelitis: pathomorphology, pathogenesis,
clinics // Bukovin. med. visnyk.– 2000.– Vol.4, N3.– P. 223-228.
Albelda SM, Smith CW, Ward PA. Adhesion molecules and
inflammatory injury // FASEB J.– 1994.– Vol.8, N8.– P. 504-
512.
Asakawa T., Matsushita S. Coloring conditions of tiobarbituric
acid test for deleting lipid hydroperoxides // Lipids.– 1980.–
Vol.15, N3.– P.137-140.
Kraus J., Engelhardt B., Chatzimanolis N., et al. Cell surface
bound and soluble adhesion molecules in CSF and blood in
multiple sclerosis: correlation with MRI-measures of
subclinical disease severity and activity // J. Neuroimmunol.–
2002.– Vol.122, N1-2.– P.175-185.
Martino G., Hartung H.P. Immunopathogenesis of multiple
sclerosis: the role of T-cells // Curr. Opin. Neurol.– 1999.–
Vol.12.– P. 309-321.
Mihara M., Uchiyama M., Fukuzawa K. Thiobarbituric acid
value on fresh homоgenate of rat as a parameter of lipid
peroxidation on aging, CCL4 intoxication and vitamin E eficiency
// Biochem. Med.– 1980.– Vol.23, N3.– P. 302-311.
Miller B.L. Protein determination for large numbers of
samples // Anal. hem.–1959.– V.31, N5.– P. 964-966.
Neumann H, Medana IM, Bauer J, Lassmann H. Cytotoxic T
lymphocytes in autoimmune and degenerative CNS diseases //
Trends Neurosci.– 2002– Vol.25, N6.– P. 313-319.
Sharief M.K., Noori M.A., Ciardi M., et al. Increased levels
of circulating ICAM-1 in serum and cerebrospinal fluid of
patients with active multiple sclerosis. Correlation with TNF-
alpha and blood-brain barrier damage // J. Neuroimmunol.–
1993.– Vol.43, N1-2.– P. 15-21.
Syburra С., Bassi S. Oxidative stress in patients with multiple
sclerosis // Ukr. biokhim.zhurn.– 1999.– Vol.71, N3.– P. 112-115.
Accepted in 02.12.2003
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
|