Структурно-функциональные механизмы действия экстремального охлаждения на терморегуляторные центры гипоталамуса
Исследованы центральные структурно-функциональные механизмы действия периодического краткосрочного охлаждения организма в криокамере (-120°С). Показано периодическое повышение проницаемости гематоэнцефалического барьера (ГЭБ), обусловленное долгосрочной активизацией синаптического аппарата нейронов...
Saved in:
| Date: | 2004 |
|---|---|
| Main Authors: | , , , , |
| Format: | Article |
| Language: | Russian |
| Published: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2004
|
| Series: | Проблемы криобиологии и криомедицины |
| Subjects: | |
| Online Access: | http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/139163 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Структурно-функциональные механизмы действия экстремального охлаждения на терморегуляторные центры гипоталамуса / В.Г. Бабийчук, В.С. Марченко, Г.А. Бабийчук, Л.Н. Марченко, Т.И. Бондарь // Проблемы криобиологии. — 2004. — № 2. — С. 62–70. — Бібліогр.: 29 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
irk-123456789-139163 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
irk-123456789-1391632018-06-20T03:09:08Z Структурно-функциональные механизмы действия экстремального охлаждения на терморегуляторные центры гипоталамуса Бабийчук, В.Г. Марченко, В.С. Бабийчук, Г.А. Марченко, Л.Н. Бондарь, Т.И. Теоретическая и экспериментальная криобиология Исследованы центральные структурно-функциональные механизмы действия периодического краткосрочного охлаждения организма в криокамере (-120°С). Показано периодическое повышение проницаемости гематоэнцефалического барьера (ГЭБ), обусловленное долгосрочной активизацией синаптического аппарата нейронов преоптической области гипоталамуса. Высказаны предположения о связи лечебного эффекта криотерапии с повышением функциональной активности системы нейротрансмиттеры – циклические мононуклеозиды – ретроградные мессенджеры (NO, CO), действие которых унифицируется на уровне цитолеммы и рецепторно-цитоскелетного комплекса. Досліджено центральні структурно-функціональні механізми дії періодичного короткострокового охолодження організму в кріокамері (-120°С). Показано періодичне підвищення проникності гематоенцефалічного бар’єра, обумовлене довгостроковою активізацією синаптичного апарата нейронів преоптичної області гіпоталамуса. Висловлено припущення про зв’язок лікувального ефекту кріотерапії з підвищенням функціональної активності системи нейротрансмітери – циклічні мононуклеозиди – ретроградні месенжери (NO, CO), дія яких уніфікується на рівні цитолеми і рецепторно-цитоскелетного комплексу. The authors studied the central structural and functional effect mechanisms of periodic short term organism cooling in cryochamber (-120°C). There has been demonstrated a periodic increase of blood brain barrier (BBB) permeability stipulated by a long-term activation of the neurons’ synaptic apparatus of pre-optic hypothalamus area. There were presented the suppositions on the relation of cryotherapy therapeutic effect with the increase of functional activity in neurotransmitter-cyclic mononucleosides-retrograde messengers (NO, CO) system which effect was unified at the level of cytolemma and receptor-cytoskeleton complex. 2004 Article Структурно-функциональные механизмы действия экстремального охлаждения на терморегуляторные центры гипоталамуса / В.Г. Бабийчук, В.С. Марченко, Г.А. Бабийчук, Л.Н. Марченко, Т.И. Бондарь // Проблемы криобиологии. — 2004. — № 2. — С. 62–70. — Бібліогр.: 29 назв. — рос. 0233-7673 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/139163 612.826.4:57.043 ru Проблемы криобиологии и криомедицины Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| language |
Russian |
| topic |
Теоретическая и экспериментальная криобиология Теоретическая и экспериментальная криобиология |
| spellingShingle |
Теоретическая и экспериментальная криобиология Теоретическая и экспериментальная криобиология Бабийчук, В.Г. Марченко, В.С. Бабийчук, Г.А. Марченко, Л.Н. Бондарь, Т.И. Структурно-функциональные механизмы действия экстремального охлаждения на терморегуляторные центры гипоталамуса Проблемы криобиологии и криомедицины |
| description |
Исследованы центральные структурно-функциональные механизмы действия периодического краткосрочного охлаждения организма в криокамере (-120°С). Показано периодическое повышение проницаемости гематоэнцефалического барьера (ГЭБ), обусловленное долгосрочной активизацией синаптического аппарата нейронов преоптической области гипоталамуса. Высказаны предположения о связи лечебного эффекта криотерапии с повышением функциональной активности системы нейротрансмиттеры – циклические мононуклеозиды – ретроградные мессенджеры (NO, CO), действие которых унифицируется на уровне цитолеммы и рецепторно-цитоскелетного комплекса. |
| format |
Article |
| author |
Бабийчук, В.Г. Марченко, В.С. Бабийчук, Г.А. Марченко, Л.Н. Бондарь, Т.И. |
| author_facet |
Бабийчук, В.Г. Марченко, В.С. Бабийчук, Г.А. Марченко, Л.Н. Бондарь, Т.И. |
| author_sort |
Бабийчук, В.Г. |
| title |
Структурно-функциональные механизмы действия экстремального охлаждения на терморегуляторные центры гипоталамуса |
| title_short |
Структурно-функциональные механизмы действия экстремального охлаждения на терморегуляторные центры гипоталамуса |
| title_full |
Структурно-функциональные механизмы действия экстремального охлаждения на терморегуляторные центры гипоталамуса |
| title_fullStr |
Структурно-функциональные механизмы действия экстремального охлаждения на терморегуляторные центры гипоталамуса |
| title_full_unstemmed |
Структурно-функциональные механизмы действия экстремального охлаждения на терморегуляторные центры гипоталамуса |
| title_sort |
структурно-функциональные механизмы действия экстремального охлаждения на терморегуляторные центры гипоталамуса |
| publisher |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| publishDate |
2004 |
| topic_facet |
Теоретическая и экспериментальная криобиология |
| url |
http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/139163 |
| citation_txt |
Структурно-функциональные механизмы действия экстремального охлаждения на терморегуляторные центры гипоталамуса / В.Г. Бабийчук, В.С. Марченко, Г.А. Бабийчук, Л.Н. Марченко, Т.И. Бондарь // Проблемы криобиологии. — 2004. — № 2. — С. 62–70. — Бібліогр.: 29 назв. — рос. |
| series |
Проблемы криобиологии и криомедицины |
| work_keys_str_mv |
AT babijčukvg strukturnofunkcionalʹnyemehanizmydejstviâékstremalʹnogoohlaždeniânatermoregulâtornyecentrygipotalamusa AT marčenkovs strukturnofunkcionalʹnyemehanizmydejstviâékstremalʹnogoohlaždeniânatermoregulâtornyecentrygipotalamusa AT babijčukga strukturnofunkcionalʹnyemehanizmydejstviâékstremalʹnogoohlaždeniânatermoregulâtornyecentrygipotalamusa AT marčenkoln strukturnofunkcionalʹnyemehanizmydejstviâékstremalʹnogoohlaždeniânatermoregulâtornyecentrygipotalamusa AT bondarʹti strukturnofunkcionalʹnyemehanizmydejstviâékstremalʹnogoohlaždeniânatermoregulâtornyecentrygipotalamusa |
| first_indexed |
2025-07-10T07:43:10Z |
| last_indexed |
2025-07-10T07:43:10Z |
| _version_ |
1837245024770719744 |
| fulltext |
62ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2004, №2
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2004, №2
УДК 612.826.4:57.043
Структурно-функциональные механизмы действия
экстремального охлаждения на терморегуляторные центры
гипоталамуса
В. Г. БАБИЙЧУК, В.С. МАРЧЕНКО, Г.А. БАБИЙЧУК, Л.Н. МАРЧЕНКО, Т.И. БОНДАРЬ
Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков
Structural and Functional Effect Mechanisms of Extreme Cooling on
Hypothalamus Thermoregulatory Centers
V.G. BABIJCHUK, V.S. MARCHENKO, G.A. BABIJCHUK, L.N. MARCHENKO, T.I. BONDAR
Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the National Academy
of Sciences of the Ukraine, Kharkov
Исследованы центральные структурно-функциональные механизмы действия периодического краткосрочного охлаждения
организма в криокамере (-120°С). Показано периодическое повышение проницаемости гематоэнцефалического барьера (ГЭБ),
обусловленное долгосрочной активизацией синаптического аппарата нейронов преоптической области гипоталамуса. Высказаны
предположения о связи лечебного эффекта криотерапии с повышением функциональной активности системы нейротрансмит-
теры – циклические мононуклеозиды – ретроградные мессенджеры (NO, CO), действие которых унифицируется на уровне
цитолеммы и рецепторно-цитоскелетного комплекса.
Ключевые слова: экстремальное охлаждение, криотерапия, гипотермия, гематоэнцефалический барьер, гипоталамус,
ультраструктура.
Досліджено центральні структурно-функціональні механізми дії періодичного короткострокового охолодження організму
в кріокамері (-120°С). Показано періодичне підвищення проникності гематоенцефалічного бар’єра, обумовлене довгостроковою
активізацією синаптичного апарата нейронів преоптичної області гіпоталамуса. Висловлено припущення про зв’язок
лікувального ефекту кріотерапії з підвищенням функціональної активності системи нейротрансмітери – циклічні
мононуклеозиди – ретроградні месенжери (NO, CO), дія яких уніфікується на рівні цитолеми і рецепторно-цитоскелетного
комплексу.
Ключові слова: екстремальне охолодження, кріотерапія, гіпотермія, гематоенцефалічний бар’єр, гіпоталамус,
ультраструктура.
The authors studied the central structural and functional effect mechanisms of periodic short term organism cooling in cryochamber
(-120°C). There has been demonstrated a periodic increase of blood brain barrier (BBB) permeability stipulated by a long-term
activation of the neurons’ synaptic apparatus of pre-optic hypothalamus area. There were presented the suppositions on the relation
of cryotherapy therapeutic effect with the increase of functional activity in neurotransmitter-cyclic mononucleosides-retrograde
messengers (NO, CO) system which effect was unified at the level of cytolemma and receptor-cytoskeleton complex.
Key-words: extreme cooling, cryotherapy, hypothermia, blood brain barrier, hypothalamus, ultrastructure.
UDC 612.826.4:57.043
Адрес для корреспонденции: Марченко В.С., Институт проблем
криобиологии и криомедицины НАН Украины, ул. Переяславская,
23, г. Харьков, Украина 61015; тел.:+38 (057) 770-29-35, факс: +38
(057) 772-00-84, e-mail: cryo@online.kharkov.ua
Address for correspondence: Marchenko V.S., Institute for Problems
of Cryobiology&Cryomedicine of the Natl. Acad. Sci. of Ukraine, 23,
Pereyaslavskaya str.,Kharkov, Ukraine 61015; tel.:+38 (057) 7702935,
fax: +38 (057) 7720084, e-mail:cryo@online.kharkov.ua
Развитие криогенных технологий за последние
10 лет вызывает интерес практической медицины
к терапевтическому использованию экстремально
низких (около -120°С) температур. Анализируя
фрагментарные экспериментальные данные [3, 6,
19] и клинические результаты, можно отметить как
эффективность метода в комплексном лечении
больных с психосоматической патологией,
депрессиями различного генеза, артрозо-артри-
тами, нейродермитами, нейрогуморальными
нарушениями репродуктивных и некоторых других
функций, так и необходимость проведения фунда-
ментальных исследований механизмов функцио-
нирования центров терморегуляции и широкого
клинико-экспериментального изучения всего
спектра биологических реакций на экстремальное
охлаждение. Существующие нейро-трансмит-
Development of cryogenic technologies within 10
recent years has caused the interest of practical
medicine to therapeutic use of extremely low
temperatures (-120°C). Having analyzed the
fragmental experimental data [3, 6, 19] and clinical
results one can note both the method efficacy in
complex treatment of the patients with psychosomatic
pathology, depressions of various origin, arthrosis-
arthritis, neurodermites, neurohumoral disorders of
reproductive and some other functions, and the
necessity of conducting the fundamental studies of the
functioning mechanisms of thermoregulation centers
and wide clinical experimental investigation of the entire
spectrum of biological responses to extreme cooling.
Existing neurotransmitter concepts for central
thermoregulation are known to explain easily such
complicated neurophysiological processes [17, 19],
63ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2004, №2
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2004, №2
терные концепции центральной терморегуляции
объясняют сложные нейрофизиологические
процессы [17, 19], но в них не учитываются
активность и ультраструктурное состояние ГЭБ
гипоталамуса.
Цель исследования – выяснение роли струк-
турно-функционального состояния ГЭБ гипота-
ламуса в нейротрансмиттерных механизмах
действия экстремально низких (порядка -120°С)
для гомойотермных организмов температур.
Материалы и методы
Работа выполнена на белых беспородных
крысах с соблюдением Международных принципов
Европейской конвенции о защите позвоночных
животных (Страсбург, 1985). Ритмическую
гипотермию (РГ) проводили на протяжении 120 мин,
обдувая тело животного 1-2 с холодным воздухом
(4°С) с частотой 0,1 Гц [6]. Периодическое
2-минутное охлаждение животных проводили в
криокамере при температуре -120°С. В соответ-
ствии с существующими международными требо-
ваниями к медицинской технике использовано
криостатирование без применения жидкого азота.
Структурно-функциональное состояние элементов
ГЭБ изучали с помощью электронно-микро-
скопических гистохимических методов выявления
активности аденилатциклазы, проницаемости ГЭБ
для пероксидазы хрена [2], спектрально-корреля-
ционного анализа сверхмедленной биоэлектри-
ческой активности головного мозга и сердца (в том
числе при системном введении адреналина).
Проницаемость ГЭБ для 3H-норадреналина
(3Н-НА) и 3Н-ацетилхолина (3Н-АХ) определяли
радиоизотопным методом [6].
Препарирование образцов ткани гипоталамуса
для трансмиссионной электронной микроскопии
ультратонких срезов проводили в соответствии с
общепринятыми методами [2]. Полутонкие
(0,5 мкм) срезы окрашивали толуидиновым синим
и анализировали в оптическом микроскопе. Ультра-
тонкие срезы изготавливали на ультрамикротоме,
контрастировали 2%-м уранилацетатом на 50%-м
этиловом спирте, а также цитратом свинца по
методу Рейнольдса. Просмотр и фотографи-
рование осуществляли в электронном микроскопе
просвечивающего типа ПЭМ-125К при ускоряю-
щем напряжении 75 кВ.
В качестве маркерного фермента для изучения
процессов проницаемости ГЭБ и эндотелиального
транспорта веществ использовали пероксидазу
хрена (молекулярная масса 44000). Для выявления
пероксидазной активности применяли метод [16].
Пероксидазу хрена (Reanal, активность 350-500 ед.
в 1 мг) вводили в виде 20%-го раствора (на
физиологическом растворе NaCl) в хвостовую вену
though with no consideration of the activity and
ultrastructural state of the hypothalamus BBB.
The work was aimed to revealing the role of
structural and functional state of the hypothalamus
BBB in neurotransmitter effect mechanisms of extra-
low temperatures (-120°C) for homoiothermal organisms.
Materials and methods
The work was performed in white mongrel rats
with keeping the International Principles of the
European Convention for Vertebrates Protection
(Strasbourg, 1985). Rhythmic hypothermia (RH) was
done during 120 min by blowing on the animal’s body
with cold air during 1-2 s (4°C) with the frequency of
0.1Hz [6]. Periodic 2-min animal cooling was done in
cryochamber under the temperature of -120°C.
According to the existing international requirements
to medical equipment there was used cryostating with
no liquid nitrogen. Structural and functional state of
BBB elements was studied using electron microscopic
histochemical methods for revealing the adenylate
cyclase activity, BBB permeability for horse reddish
peroxidase [2], spectral correlational analysis of ultra-
slow bioelectrical brain and heart activity (also at
systemic adrenaline injection). BBB permeability for
3H-noradrenaline (3H-NA) and 3H-acetylcholine
(3H-AC) was determined radioisotopically [6].
Samples preparing of hypothalamus tissue for
transmission electron microscopy of ultra-fine sections
was done according to generally approved methods
[2]. Semi-fine (0.5 µm) sections were stained with
tholuidine blue and analyzed using optic microscope.
Ultra-fine sections were prepared in ultramicrotome,
contrasted with 2% uranil acetate with 50% ethyl
alcohol, as well as lead citrate according to Reynolds’
method. Viewing and photographing were performed
using PEM-125K electron transmission microscope
under accelerating voltage of 75 kW.
As a labeling enzyme to study the BBB permeability
processes and endothelial transport of substances we
used horse reddish peroxidase (molecular mass of
44000). To reveal the peroxidase activity there was
used the method [16]. Horse reddish peroxidase
(Reanal, 350-500 units/mg activity) was intraperito-
neally injected as 20% solution (based on NaCl solution)
into an animal’s tail vein directly prior to decapitation
and 10 min beforehand by 1ml. At the same time the
control animals were injected with the identical amount
of horse reddish peroxidase solution. Animals were
decapitated. Quickly procured brain was placed into
4% glutaraldehyde solution based on 0.1M of
cacodylate buffer (pH 7.3). Hypothalamus tissue
pieces were fixed for 90 min and cut to 50-100 µm
sections, and continued to be fixed for 30 min.
Hypothalamus sections which were washed out in
cocadylate buffer (pH 7.4) under the temperature of
64ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2004, №2
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2004, №2
животным непосредственно перед забоем и за 10
мин – по 1 мл внутрибрюшинно. Одновременно
контрольным животным вводили те же количества
раствора пероксидазы хрена. Животных забивали
декапитацией. Быстро извлеченный головной мозг
помещали в 4%-й раствор глутар-альдегида на
0,1М какодилатном буфере (рН 7,3). Кусочки ткани
гипоталамуса фиксировали в течение 90 мин и
изготавливали срезы толщиной 50-100 мкм,
фиксация которых продолжалась в течение 30 мин.
Срезы гипоталамуса, отмытые в какодилатном
буфере (рН 7,4) при температуре 4°С быстро
промывали 0,05М трис-НСl буфером (рН 7,6).
Затем следовала инкубация срезов 30 мин в среде
без добавления перекиси водорода: 5 мг 3,3‘-ди-
аминобензидингидрохлорида (ДАВ, Sigma) в 10 мл
0,05М трис-НСl буфера (рН 7,6). Инкубацию в
среде с добавлением 0,2 мл свежеприготовленного
1%-го раствора перекиси водорода выполняли в
течение 60 мин. Образцы ткани, промытые
дважды дистиллированной водой, постфиксировали
в 1%-м буферном растворе четырехокиси осмия
90 мин. Обезвоживание ткани производили в
этаноле возрастающей концентрации и абсолютном
ацетоне. Образцы заключали в смесь эпоксидных
смол эпон-аралдит. Контролем служили образцы
гипоталамуса, инкубированные в среде, не
содержащей перекиси водорода. При просмотре
срезов в электронном микроскопе продукт
гистохимической реакции представляет собой
гомогенный электронно-плотный осадок.
Для выявления аденилатциклазы использовали
гистохимический метод [26]. Образцы фикси-
ровали погружением в 1%-й глютаральдегид на
0,05 М какодилат-нитратном буфере (рН 7,4) с
4.5%-й декстрозой. Кусочки ткани толщиной
0,5 мм промывали в буферном растворе и поме-
щали в среду инкубации на 30 мин при 30°С. Среда
состояла из 80 мМ малеатного трис-буфера (рН 7,4),
8% декстрозы, 2,0 мМ теофилина, 4.0 мМ сульфата
магния, 0,3 мМ АТФ в 0,5 мл воды, 4,8 мМ
Pb(NО3)2. Для контроля проводили инкубацию в
среде без субстрата и в среде с 0,0125 М фторида
натрия для устранения неспецифических реакций
НТФ-азы и усиления активности аденилат-
циклазы. Ткань промывали в забуференном
растворе декстрозы и дополнительно фиксировали
в 1%-м OsО4 на веронал-ацетатном буфере с 7,5%-й
декстрозой. Обезвоживание проводили в этаноле
возрастающей концентрации и абсолютном
ацетоне, образцы заключали в смесь эпон-аралдит.
Ультратонкие срезы контрастировали 2%-м
уранилацетатом на 50%-м этиловом спирте без
контрастирования цитратом свинца. Электронно-
плотный осадок пирофосфата свинца маркирует
места локализации фермента. Уровень NO в ткани
4°C, were rapidly washed-out with 0.05 M tris-HCl
buffer (pH 7.6). Then followed a 30-min incubation of
sections in hydrogen peroxide-free medium: 5mg of
3.3-diaminobenzidinhydrochloride (DAB, Sigma) in
10 ml 0.05 M tris-HCl buffer (pH 7.6). Incubation in
the medium with adding 0.2 ml of freshly prepared
1% hydrogen peroxide solution was accomplished
within 60 min. Washed twice with distilled water tissue
samples were post-fixed in 1% buffer solution of
osmium tetroxide for 90 min. Tissue dehydration was
done in ethanol of increasing concentration and absolute
acetone. The samples were placed into epoxy resins
epon-araldit mixture. Hypothalamus samples incubated
in hydrogen peroxide-free medium served as the
control. While viewing the sections in electron
microscope the product of histochemical reaction is
seen as homogenous electronically-dense sediment.
To reveal adenylate cyclase we used the histo-
chemical method [26]. The samples were fixed by
immersion into 1% glutaraldehyde based on 0.05M
cacodylate-nitrate buffer (pH 7.4) with 4.5% dextrose.
Tissue pieces of 0.5mm thickness were washed out in
a buffer solution and placed into the incubation medium
for 30min at 30°C. The medium comprised 80mM
maleate tris-buffer (pH 7.4), 8% dextrose, 2.0 mM
thiophyllin, 4.0 mM magnesium sulfate, 0.3mM ATP
in 0.5 ml of water, 4.8 mM Pb(NO3)2 . With the aim of
the control there was accomplished the incubation in a
substrate-free medium with 0.0125M of sodium
fluorine to remove non-specific reactions of NTPhase
and intensify the adenylate cyclase activity. Tissue was
washed out in buffered dextrose solution and fixed
additionally in 1% OsO4 based on veronal-acetate
buffer with 7.5% dextrose. Dehydration was done in
ethanol of an increasing concentration and absolute
acetone, the samples were placed into epon-araldit
mixture. Ultra-fine sections were contrasted with 2%
uranil acetate based on 50% ethanol without contrasting
by lead citrate. Electronically dense sediment of lead
pyrophosphate is known to label the sites of an enzyme
localisation. NO level in brain tissue was evaluated on
the content of nitrites determined by Griss-Ilosvaja
spectrophotometric method [4] with sulphonamide and
N(1-naftilethylen) diaminhydrochloride. Deproteini-
sation was done with the following solution: 75 mmol/l
ZnSO4 and 55 mmol/l NaOH [24]. Calibrating diagram
was built within the range of 10-7 to 10-6 g/ml of nitrite
(1.43-14.3 µmol/l).
Results and discussion
Referring to morphological and neurophysiological
criteria one can find 3 stages or steps of the central
effect of extreme cooling, which correspond to 3 levels
of BBB permeability. At the 1st stage in a capillary
endothelium there is observed the intensification of the
processes of non-specific pinocytosis of all known
65ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2004, №2
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2004, №2
мозга оценивали по содержанию нитритов, которое
определяли спектрофотометрически методом
Грисса-Илосвая [4] с сульфонамидом и N(1-наф-
тилэтилен)диамингидрохлоридом. Депротеини-
зацию проводили раствором из 75 ммоль/л ZnSO4
и 55 ммоль/л NaOH [24]. Калибровочный график
строили в диапазоне от 10-7 до 10-6 г/мл нитрита
(1,43-14,3 мкмоль/л).
Результаты и обсуждение
По морфологическим и нейрофизиологическим
критериям можно условно выделить 3 этапа или
стадии центрального действия экстремального
охлаждения, которые отвечают 3 уровням
проницаемости ГЭБ. На первом этапе в капил-
лярном эндотелии наблюдается усиление процес-
сов неспецифического пиноцитоза всех известных
видов и их комбинаций с соответствующими
изменениями люминальной плазматической
мембраны эндотелиоцитов (рис.1). Пероксидаза
хрена, которая маркирует пиноцитоз, обнаружи-
вается за базальной мембраной. Неспецифический
пиноцитоз протекает параллельно с рецептор-
индуцированным трансцитозом, о чем свиде-
тельствует увеличение количества клатриновых
везикул. Активация специфического и неспеци-
фического трансцитоза приводит к повышению
проницаемости ГЭБ [6, 20, 21, 25, 27]. При дальней-
шем усилении процессов пиноцитоза (второй этап)
реактивность сосудистого эндотелия повышается
за счет значительных перестроек цитоскелетно-
мембранных взаимодействий, сопровождающихся
образованием больших кольцевидных выростов
плазмолеммы, захватывающих агрегаты белков
плазмы крови, а вместе с ними и вазоактивные
вещества, которые могут связываться не только
с мембранными, но и со свободными рецепторами
плазмы. Наши данные подтверждают такую
возможность, так как гистохимически аденилат-
циклазная активность была выявлена в кольце-
видных выростах эндотелиоцитов (рис. 2), а
системное введение адреналина имело ярко
выраженное центральное действие – отрицатель-
ные кардиотропные эффекты, что свидетельствует
о повышении проницаемости ГЭБ. На третьем
этапе действия экстремального охлаждения
проницаемость ГЭБ (по пероксидазе хрена и ЭКГ-
критерию) отвечает норме (рис. 3). Однако ГЭБ
как физиологическая система приходит в новое
функциональное состояние. На ультраструктурном
уровне наблюдаются перестройки клеток базаль-
ного слоя. Отростки перицитов характеризуются
значительной везикуляцией, гипертрофией комплек-
са Гольджи (рис. 4), образуют контакты с
отростками и телами эндотелиоцитов, иногда
синапсоподобной формы. Выявление интенсивной
Рис. 1. Ультраструктура капиллярной стенки гипотала-
муса крысы после экстремального охлаждения: 1 –
эритроцит в просвете капилляра; 2 – формирование
“опушенной” клатрином везикулы; 3 – комплекс
пиноцитозных везикул; 4 – осмиофобные (гидрати-
рованные) концевые отростки астроцитов. Активация
пиноцитоза. Маштабная линейка 0,5 µм.
Fig. 1. Capillary wall ultrastructure of rat hypothalamus
following the extreme cooling: 1 – erythrocyte in a capillary
lumen; 2 – “fuzzied“ vesicle formation with clatrine; 3 –
complex of pynocytotic vesicles; 4 – osmiophobic (hydrated)
terminal outgrowings of astrocytes. Activation of non-
specific and receptor-induced pinocytosis. Scale bar 0,5 µm.
types and their combinations with the corresponding
changes of luminal plasmatic membrane in endothelio-
cytes (Fig.1). Horse reddish peroxidase, which is
known to label pinocytosis is found behind the basal
membrane. Non-specific pinocytosis appears in parallel
with the receptor-induced transcytosis, testified by the
increase of the amount of clatrine vesicles. Activation
of specific and non-specific transcytosis results in an
increase of BBB permeability [6, 20, 21, 25, 27]. At
further intensification of pinocytosis processes (step 2)
the reactivity of vascular endothelium increases due
to considerable rearrangements of cytoskeleton-
membrane interactions accompanied by the formation
of large ring-like plasmolemma outgrowings, capturing
the aggregates of blood plasm proteins, evolving also
vasoactive substances, which may bind not only to
membranous but also free plasm receptors. Our data
approve such a possibility, as histochemically adenylate
cyclase activity was found in endotheliocytes’ ring-
like outgrowings (Fig.2), and systemic adrenaline
injection possessed a strongly manifested central
effect: negative cardiotropic effects, that testifies to
an increased BBB permeability. At the 3rd step of the
effect of extreme cooling the BBB permeability (on
horse reddish peroxidase and ECG criterion)
4
3
1
2
66ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2004, №2
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2004, №2
corresponds to the norm (Fig. 3). However BBB as a
physiological system enters its new functional state.
In an ultrastructure level there are observed basal layer
cell rearrangements. Pericyte outgrowings are
characterized by a strong formation of vesicles,
hypertrophy of Golgi complex (Fig. 4), form the contacts
with endotheliocytes’ outgrowings and bodies,
sometimes of a synapse-like shape. Revealing the
intense adenylate cyclase activity in pericytes’
outgrowings may testify indirectly to the participation
of these temporary formations in capture and
exocytosis of vasoactive substances to brain
parenchyma. We think such ultrastructural rearrange-
ments promote the increase of an organism’s adaptive
capabilities.
We should also note that in 30% of experimental
animals there were found focal ultrastructural
impairments in blood capillaries surrounding cells. In
the series of cases we observed strong hydration-
caused enlightenment of the astrocytes’ terminal
outgrowings, basal membrane crumbling, appearance
of autophagosomes and apoptotic bodies in pericytes
and pericapillary astrocytes. We tend to consider these
changes as the adaptational ones, though they may
also have a pre-pathological character.
Functional activity of vascular epithelium is known
to be regulated by not only humoral factors, but
neurotransmitter mechanisms as well [9, 12, 22]. It
was found that even after the first extreme cooling
session certain changes of submicroscopic organisation
of hypothalamus areas under study occurred. Synaptic
apparatus in some neurons is in the state of increased
Рис. 2. Ультраструктура фрагмента капилляра гипотала-
муса крысы после экстремального охлаждения: 1 –
просвет капилляра; 2 – ядро эндотелиоцита; 3 – концевые
отростки астроцитов. Формирование кольцевидных
выростов эндотелиоцитов (стрелка). Масштабная
линейка 1 µм.
Fig. 2. Ultrastructure of rat hypothalamus capillary fragment
following the extreme cooling: 1 – capillary lumen; 2 –
endotheliocyte nucleus; 3 – terminal outgrowings of
astrocytes. Formation of ring-like outgrowings of endo-
theliocytes (arrow). Scale bar 1 µm.
2
аденилатциклазной активности в отростках
перицитов может косвенно свидетельствовать об
участии этих временных образований в захвате и
экзоцитозе вазоактивных веществ в паренхиму
мозга. По нашему мнению, такие ультраструктур-
ные перестройки способствуют повышению
адаптационных возможностей организма.
Вместе с тем надо заметить, что у 30%
экспериментальных животных отмечались очаго-
вые ультраструктурные нарушения в клетках,
окружающих кровеносные капилляры. В ряде
случаев наблюдались значительное обусловленное
гидратацией просветление концевых отростков
астроцитов, разрыхление базальных мембран,
появление аутофагосом и апоптозных тел в
перицитах и перикапиллярных астроцитах. Эти
изменения мы склонны трактовать как адапта-
ционные, но они могут иметь и предпатологический
характер.
Известно, что функциональная активность
сосудистого эндотелия регулируется не только
гуморальными факторами, но и нейротранс-
миттерными механизмами [9, 12, 22]. Установлено,
что уже после первого сеанса экстремального
охлаждения происходят определенные изменения
субмикроскопической организации исследуемых
областей гипоталамуса. У части нейронов
синаптический аппарат находится в состоянии
повышенного функционального напряжения,
сопровождающегося перестройкой везикулярного
Рис.3. Ультраструктура капилляра гипоталамуса крысы
в норме. Пероксидаза хрена заполняет просвет сосуда,
не проникая в паренхиму мозга через структурные
элементы ГЭБ. Масштабная линейка 1 µм.
Fig. 3. Ultrastructure of rat hypothalamus capillary in
norm. Horse reddish peroxidase fills in vascular lumen with
no penetrating into brain parenchyma through structural
BBB elements. Scale bar 1 µm.
3
1
3
67ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2004, №2
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2004, №2
аппарата пресинаптических бутонов: везикулы
агглютинируют между собой и сливаются с
синаптической мембраной, увеличиваются длина
и электронная плотность зон синаптических
контактов, а также длина активной зоны (рис. 5).
В постсинаптических областях образуются субпо-
верхностные цистерны, характерные для явления
долговременной потенциации.
Инициация процесса долговременной потенциа-
ции подтверждается и модельными электрофизио-
логическими исследованиями по ритмическому
холодовому раздражению периферического
аппарата терморецепции. В этих условиях, как и
при экстремальной криотерапии, не происходит
общего охлаждения организма, однако наблю-
дается усиление сверхмедленной биоэлектри-
ческой активности в коре и гипоталамусе, в
спектре которой доминирует квазисинусоидный
секундный ритм; повышается пространственная
синхронизация биоэлектрической активности
неокортекса. Процессы долговременной потенциа-
ции поддерживаются ретроградными мессендже-
рами NO и СО [14, 15, 18, 28, 29]. Как свидетель-
ствуют модельные нейрофизиологические опыты,
существуют оптимальные для повышения прони-
цаемости ГЭБ концентрации NО и СО. На
максимумах проницаемости ГЭБ как блокаторы,
так и активаторы NO-синтаз ведут к снижению
проницаемости [6, 7]. В этой связи показательна
оценка уровня NO по содержанию нитритов в мозге
в условиях ритмической гипотермии (рис.6).
Рис. 4. Ультраструктура фрагмента капиллярной стенки
с отростком перицита из гипоталамуса крысы после
экстремального охлаждения: 1 – эритроцит; 2 – базальная
мембрана капилляра; 3 – комплекс Гольджи перицита.
Масштабная линейка 0,5 µм.
Fig. 4. Ultrastructure of capillary wall fragment with
pericyte’s outgrowing of rat hypothalamus following the
extreme cooling: 1 – erythrocyte; 2 – basal membrane of a
capillary; 3 – Golgi complex in pericyte. Scale bar 0,5 µm.
functional tension accompanied by the rearrangement
of vesicular apparatus of pre-synaptic buds: vesicles
agglutinate and fuse with synaptic membrane, the length
and electron density of synaptic contact zones, as well
as the length of active zone were noted to increase
too (Fig. 5). In post-synaptic areas sub-superficial
cisterns are formed, characteristic for the phenomenon
of long-term potentiation.
Initiation of the process of long term potentiation is
also approved by model electrophysiological investi-
gations on rhythmic cold irritation of peripheric
thermoreception apparatus. Under these conditions the
same as at extreme cryotherapy, no general cooling of
an organism occurs, but the intensification of over-
slow bioelectric activity in cortex and hypothalamus,
in the spectrum of which a quasi sinusoid second
rhythm dominates; a spatial synchronisation of
neocortex bioelectric activity increases. The processes
of long term potentiation are supported by retrograde
NO and CO messengers [14, 15, 18, 28, 29]. As model
neurophysiological experiments testify, there exist
optimum NO and CO concentration to increase BBB
permeability. In the maximums of BBB permeability
both blockers and activators of NO synthases cause
the permeability reduction [6, 7]. In this respect the
estimation of the NO level is demonstrative in terms
of nitrite content in brain under the conditions of
rhythmic hypothermia (Fig. 6). The phenomenon of
increase in the NO concentration oscillations of
hypothalamus in the rhythm of BBB permeability
dynamics and under extreme hypothermia regimens is
thought to be quite possible. Electron-microscopic data
obtained by us on lipofuscin, the final LPO product
Рис.5. Активные синапсы в гипоталамусе крысы после
их экстремального охлаждения: 1 – везикулы пресинап-
тических окончаний нейронов; 2 – активная зона
синапсов. Масштабная линейка 0,5 µм.
Fig. 5. Active synapses in rat hypothalamus after their
extreme cooling: 1 – vesicles of preisynaptic neuron
endings; 2 – active synapses zone. Scale bar 0,5 µm.
1
2
3
2
1
2
2
1
68ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2004, №2
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2004, №2
Весьма вероятен феномен усиления колебаний
концентрации NO гипоталамуса в ритме динамики
проницаемости ГЭБ и при экстремальных режимах
гипотермии. Об этом свидетельствуют получен-
ные нами электронно-микроскопические данные
(рис. 7) о накоплении в нейроглиальных комплексах
гипоталамуса на разных этапах экстремального
охлаждения липофусцина – конечного продукта
перекисного окисления липидов, одним из ингиби-
торов которого является оксид азота, а индукто-
ром – свободные радикалы [5, 8].
Мы считаем, что лечебное действие экстре-
мальной криотерапии в ряде случаев может быть
связано с модификацией процессов физио-
логического действия монооксидов азота и
углерода. Недостаточный синтез оксида азота
приводит к свободнорадикальному повреждению
мембран, его избыточный синтез обусловливает
апоптозную гибель клеток и лишь концентрация
порядка нескольких наномолей оказывается
оптимальной для процессов жизнедеятельности [1,
7, 10, 11, 13]. Снижение концентрации оксида азота
является одним из механизмов старения орга-
низма, которое приводит к повышению риска
развития артериальной гипертензии, атеросклероза,
снижению противоопухолевой и противоинфек-
ционной активности иммунной системы, к угнете-
нию сексуальной функции [13, 21]. Ещё в 1992 году
оксид азота был объявлен молекулой года, с тех
accumulation in neuroglial hypothalamus complexes at
different extreme cooling stages, one of the inhibitors
of which is nitric oxide, and free radicals are known to
be its inductor, testify to this fact [5, 8].
We consider the medical effect of extreme
cryotherapy to be related to the processes modification
Рис. 7. Липофусциновые гранулы в цитоплазме перика-
пиллярного астроцита в гипоталамусе крысы после
экстремального охлаждения: 1 – эритроцит в просвете
капилляра. Масштабная линейка 1 µм.
Fig. 7. Lipofuscin granules in cytoplasm of pericapillary
astrocyte in rat hypothalamus following the extreme cool-
ing: 1 – erythrocyte in a capillary lumen. Scale bar 1 µm.
0
50
100
150
200
250
300
350
400
0 ~ 60 65 70 75
90
95
100
105
110
115
120
125
130
135
0 ~ 60 65 70 75
П
ро
це
нт
о
т
ко
нт
ро
ля
Pe
rc
en
ta
ge
o
f c
on
tro
l
П
ро
це
нт
о
т
ко
нт
ро
ля
Pe
rc
en
ta
ge
o
f c
on
tro
l
Рис. 6. NO-зависимые физиологические параметры сердечно-сосудистой и центральной нервной систем после
ритмической гипотермии: 0 – контрольные параметры до охлаждения; – коэффициент проницаемости ГЭБ для
3Н-НА (контроль 0,07); – коэффициент проницаемости ГЭБ для 3Н-АХ (контроль 0,06); – артериальное давление
(контроль 120 мм рт.ст.); – концентрация нитритов в мозге (контроль 6,8 мкМ/л); – концентрация нитритов в сердце
(контроль 6,4 мкМ/л). Охлаждение прекращено на 60-й минуте.
Fig. 6. NO-dependent physiological parameters of cardiovascular and central nerve system in the dynamics of rhythmic
hypothermia: 0 – control parameters prior to cooling; – BBB permeability coefficient for 3H-NA (control – 0,07); – BBB
permeability of 3H-AC (control – 0,06); – arterial pressure (control – 120 mm of mercurium column); – nitrites concentra-
tion in brain (control – 6,8 µmol/l); – nitrites concentration in heart (control – 6,4 µmol/l). Cooling was terminated by the
60th minute.
Время, мин Time, min Время, мин Time, min
1
69ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2004, №2
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2004, №2
Литература
Башкатова В.Г., Вицкова Ю.Г., Наркевич В.Б. и др.
Возможная роль оксида азота в патогенезе модельных
судорожных состояний различной природы // Бюл.
эксперим. биологии и медицины. – 1998.– Т. 125, №1.–
С. 26-29.
Боголепов Н.Н. Методы электронно-микроскопического
исследования мозга.– М.: Изд. мед. ин-та им. И.М.Сече-
нова, 1976.– 187 с.
Булдакова С.Л., Дутова Е.А., Ивлев С.В. Вызванная
температурой длительная потенциация в срезах
гиппокампа // Журн. эволюц. биохимии и физиологии.–
1993.– Т. 29, №4.– С. 364-370.
Ванханен В.Д., Суханова Г.А. Техника санитарно-
гигиенических исследований.– Киев: Вища школа, 1983.–
С. 236-237.
Марков Х.М. Окись азота и окись углерода – новый класс
сигнальных молекул // Успехи физиолог. наук.– 1996.–
Т. 27, №4.– С. 30-43.
Марченко В.С., Бабийчук Г.А., Шило А.В. и др. К механиз-
мам регуляции проницаемости гематоэнцефалического
барьера охлажденного мозга. Сообщение 3. Оксид азота
(ІІ) – один из триггеров проницаемости гемато-
энцефалического барьера в структуре сверхмедленной
управляющей системы организма? // Пробл. криобио-
логии.– 1995.– №3.– С. 10-19.
Раевский К.С. Оксид азота – новый физиологический
мессенджер: возможная роль при патологии нервной
системы // Бюл. эксперим. биологии и медицины.– 1997.–
Т. 123, №5.– С. 484-490.
Реутов В.П. Цикл окиси азота в организме млеко-
питающих // Успехи биол. наук.– 1995.– Т.35.– С. 189-228.
Ткаченко М.М. Оксид азоту та судинна регуляція (огляд
літератури) // Журн. АМН України.– 1997.– Т. 3, №2.–
С. 241-254.
Шимановский Н.Л., Гуревич К.С. Роль оксида азота в
механизмах действия лекарственных веществ //
Международ. мед. журн.– 2000.– №1.– С. 104-107.
Boje K.M. Inhibition of nitric oxide synthase attenuates blood-
brain barrier disruption during experimental meningitis // Brain
Res.–1996.– Vol. 720, N 1-2.– P. 75-83.
Busse R., Fleming I., Schini V. Nitric oxide formation in
vascular wall: regulation and functional implications // The
role of nitric oxide in physiology and pathophysiology.– Berlin-
Heidelberg: Springer Verlag.– 1995.– P. 7-18.
Crow J., Beckman J. The role of peroxynitrite in nitric oxide –
mediated toxicity // The role of nitric oxide in physiology and
pathophysiology.– Berlin-Heidelberg: Springer Verlag, 1995.–
P. 57-73.
References
Bashkatova V.G., Vitskova Yu.G., Narkevich V.B. et al.
Probable role of nitric oxide in pathogenesis of model
convulsive states of various origin // Byul. Experim. Biol. Med.–
1988.– Vol. 125, N1.– P. 26-29.
Bogolepov N.N. Methods for electron-microscopic brain
investigation.– Moscow: Sechenov Medical Institute Edition,
1976.– 187 p.
Buldakova S.L., Dutova E.A., Ivlev S.V. Long-term tempe-
rature-induced potentiation in hyppocampus sections//
Zhurnal evolutsii biokhimii i fiziologii.– 1993.– Vol. 29, N4.–
P. 364-370.
Vankhanen V.D., Sukhanova G.A. Methods for sanitary-
hygienic investigations.– Kiev: Vyscha shkola, 1983.–
P. 236-237.
Markov Kh.M. Nitric oxide and carbon oxide: the new class
of signalling molecules // Uspekhi fiziolog. nauk.– 1996.–
Vol. 27, N4.– P. 30-43.
Marchenko V.S., Babijchuk G.A., Shilo A.V. et al. On the
mechanisms of regulation of blood brain barrier permeability
of the cooled brain. Report III. Is nitric oxide one of the triggers
of BBB permeability in the structure of the supraslow
controlling system of the brain? // Problems of Cryobiology.–
1995.– N3.– P. 10-19.
Raevsky K.S. Nitric oxide as the new physiological
messenger: probable role at nerve system pathology // Bul.
Experim. Biol. Med.– 1997.– Vol. 123, N5.– P. 484-490.
Reutov V.P. Nitric oxide cycle in a mammal’s organism //
Uspekhi Biol. Nauk.– 1995.– Vol. 35.– P. 189-228.
Tkachenko M.M. Nitric oxide and vascular regulation
(review) // Zhurnal AMN Ukrainy.– 1997.– Vol. 3, N2.–
P. 241-254.
Shimanovsky N.L., Gurevich K.S. Nitric oxide role in effect
mechanisms of medicines // International Medical Journal.–
2000.– N1.– P. 104-107.
in the physiological effect of nitrogen and carbon
monoxides. The lack of nitric oxide synthesis causes
free radical membrane damage, its surplus synthesis
results in apoptotic cell death and only the concentration
of some nanomoles was found to be the optimum for
vital activity processes [1, 7, 10, 11, 13]. The fall of
nitric oxide concentration is known to be one of the
mechanisms of an organism aging, causing the risk
increase for arterial hypertension, atherosclerosis, the
decrease of antitumor and anti-infectious immune
system activity, sexual function suppression [13, 21].
Even in 1992 nitric oxide was announced as the
molecule of the year, since then the number of
publications on its participation in physiological,
biochemical and pathophysiological processes is high
as well [7, 13, 23].
Conclusions
Extreme cooling was found to cause a periodic
change of the BBB functional activity, long term acti-
vation of synaptic apparatus in hypothalamus neurons,
optimisation of the content of retrograde messengers,
which effect is integrated at the level of cytolemma
and receptor-cytoskeletal complex of endotheliocytes.
пор не уменьшается количество публикаций по его
участию в физиологических, биохимических и
патофизиологических процессах [7, 13, 23].
Выводы
Экстремальное охлаждение приводит к перио-
дическому изменению функциональной активности
ГЭБ, долгосрочной активации синаптического
аппарата нейронов гипоталамуса, оптимизации
содержания ретроградных мессенджеров, дейст-
вие которых интегрируется на уровне цитолеммы
и рецепторно-цитоскелетного комплекса эндоте-
лиоцитов.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
70ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2004, №2
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2004, №2
Boje K.M. Inhibition of nitric oxide synthase attenuates blood-
brain barrier disruption during experimental meningitis // Brain
Res.–1996.– Vol. 720, N 1-2.– P. 75-83.
Busse R., Fleming I., Schini V. Nitric oxide formation in
vascular wall: regulation and functional implications // The
role of nitric oxide in physiology and pathophysiology.– Berlin-
Heidelberg: Springer Verlag.– 1995.– P. 7-18.
Crow J., Beckman J. The role of peroxynitrite in nitric oxide –
mediated toxicity // The role of nitric oxide in physiology and
pathophysiology.– Berlin-Heidelberg: Springer Verlag, 1995.–
P. 57-73.
Dawson T., Snyder S. Gases as biological messengers: nitric
oxide and carbon monoxide in the brain // J.Neurosci. – 1994.–
Vol.14(9).– P. 5147-5159.
Garthwaite J., Boulton C. Nitric oxide signaling in the central
nervous system //Annu.Rev.Physiol. – 1995. –Vol.57. – P.
683-706.
Graham R.C., Karnovsky M.J. The early stages of absorption
of injected horseradish peroxidase in the proximal tubules of
mouse kidney: ultrastructural cytochemistry by a new
technique // J. Histochem. Cytochem.– 1966.– N14.– P. 291-302.
Gerstberger R. Nitric oxide and body temperature control //
News Physiol.Sci.– 1999.– Vol. 14.– P. 30-36.
Ingi T., Ronnett G.V. Direct demonstration of a physiological
role for carbon monoxide in olfactory receptor neurons // J.
Neuroscience.– 1995.– Vol. 15, N12.– P. 8214-8222.
Marchenko V.S. Neuronal gas (NO and CO) in the mecha-
nisms of permeability of the blood-brain barrier of the cooled
brain // Problems of cryobiology.– 1997.– N3.– P.57-59.
Mayhan W.G. Role of nitric oxide in histamine-induced
increases in permeability of the blood-brain barrier // Brain
res.– 1996.– Vol. 743, N1-2.– P. 70-76.
Mayhan W.G. Role of nitric oxide in the blood-brain barrier
during acute hypertension // Brain Res.– 1995.– Vol. 686,
N1.– P. 99-103.
Miller R.D., Monsul N.T., Vender J.R., Lehmann J.C. NMDA
and endothelin-1-induced increases in blood-brain barrier
permeability quantitated with Lucifer yellow // J. Neurol. Sci.–
1996.– Vol. 136, N1-2.– P. 37-40.
Motterlini R., Hidalgo A., Sammut I., et al. A precursor of the
nitric oxide donor SIN-1 modulates the stress protein heme
oxygenase-1 in rat liver // Biochem. Biophys. Research
Commun.– 1996.– Vol. 225.– P. 167-172.
Nakamura T., Ohyama Y., et al. Chronic blockade of nitric
oxide synthesis increases urinary endothelin- 1 excretion //
J. Hypert.– 1992.– Vol. 15, N4.– P. 373-383.
Nag S. Role of the endothelial cytoskeleton in blood-brain-
barrier permeability to protein // Acta Neuropathol. (Berl).–
1995.– Vol. 90, N5.– P. 454-460.
Reik J., Petzold G.L., Higgins J.A., et al. Hormosensitive
adenyl cyclase: cytochemical localization in rat liver //
Science.– 1970.– Vol. 168.– P. 382-384.
Shukla A., Dikshit M., Srimal R.C. Nitric oxide- dependent
blood-brain barrier permeability alteration in the rat brain //
Experientia.– 1996.– Vol. 52, N2.– P. 136-140.
Stevens C.F., Wang Y. Reversal of long-term potentiation by
inhibitors of haem oxygenase // Nature.– 1993.– Vol. 364.–
P. 147-148.
Zhuo M., Small S.A., Kandel E.R., Hawkins R.D. Nitric oxide
and carbon monoxide produce activity-dependent long-term
synaptic enhancement in hippocampus // Science.– 1993.–
Vol. 260.– P. 1946-1950.
Accepted in 18.05.2004
Dawson T., Snyder S. Gases as biological messengers: nitric
oxide and carbon monoxide in the brain // J.Neurosci. – 1994.–
Vol. 14 (9).– P. 5147-5159.
Garthwaite J., Boulton C. Nitric oxide signaling in the central
nervous system // Annu. Rev. Physiol. – 1995. –Vol.57. –
P. 683-706.
Graham R.C., Karnovsky M.J. The early stages of absorption
of injected horseradish peroxidase in the proximal tubules of
mouse kidney: ultrastructural cytochemistry by a new
technique // J. Histochem. Cytochem.– 1966.– N14.– P. 291-302.
Gerstberger R. Nitric oxide and body temperature control //
News Physiol.Sci.– 1999.– Vol. 14.– P. 30-36.
Ingi T., Ronnett G.V. Direct demonstration of a physiological
role for carbon monoxide in olfactory receptor neurons // J.
Neuroscience.– 1995.– Vol. 15, N12.– P. 8214-8222.
Marchenko V.S. Neuronal gas (NO and CO) in the mecha-
nisms of permeability of the blood-brain barrier of the cooled
brain // Problems of cryobiology.– 1997.– N3.– P.57-59.
Mayhan W.G. Role of nitric oxide in histamine-induced
increases in permeability of the blood-brain barrier // Brain
res.– 1996.– Vol. 743, N1-2.– P. 70-76.
Mayhan W.G. Role of nitric oxide in the blood-brain barrier
during acute hypertension // Brain Res.– 1995.– Vol. 686,
N1.– P. 99-103.
Miller R.D., Monsul N.T., Vender J.R., Lehmann J.C. NMDA
and endothelin-1-induced increases in blood-brain barrier
permeability quantitated with Lucifer yellow // J. Neurol. Sci.–
1996.– Vol. 136, N1-2.– P. 37-40.
Motterlini R., Hidalgo A., Sammut I., et al. A precursor of the
nitric oxide donor SIN-1 modulates the stress protein heme
oxygenase-1 in rat liver // Biochem. Biophys. Research
Commun.– 1996.– Vol. 225.– P. 167-172.
Nakamura T., Ohyama Y., et al. Chronic blockade of nitric
oxide synthesis increases urinary endothelin- 1 excretion //
J. Hypert.– 1992.– Vol. 15, N4.– P. 373-383.
Nag S. Role of the endothelial cytoskeleton in blood-brain-
barrier permeability to protein // Acta Neuropathol. (Berl).–
1995.– Vol. 90, N5.– P. 454-460.
Reik J., Petzold G.L., Higgins J.A., et al. Hormosensitive
adenyl cyclase: cytochemical localization in rat liver //
Science.– 1970.– Vol. 168.– P. 382-384.
Shukla A., Dikshit M., Srimal R.C. Nitric oxide- dependent
blood-brain barrier permeability alteration in the rat brain //
Experientia.– 1996.– Vol. 52, N2.– P. 136-140.
Stevens C.F., Wang Y. Reversal of long-term potentiation by
inhibitors of haem oxygenase // Nature.– 1993.– Vol. 364.–
P. 147-148.
Zhuo M., Small S.A., Kandel E.R., Hawkins R.D. Nitric oxide
and carbon monoxide produce activity-dependent long-term
synaptic enhancement in hippocampus // Science.– 1993.–
Vol. 260.– P. 1946-1950.
Поступила 18.05.2004
14.
15.
16
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
|