Влияние криоконсервированной сыворотки кордовой крови и экстракта плаценты на заживление холодовых ран
Изучена динамика планиметрических и микробиологических показателей холодовых ран при лечении криоконсервированной сывороткой кордовой крови (КСКК) и экстрактом плаценты (ЭП). Холодовые раны моделировали у крыс линии Сфинкс криоинструментом с диаметром аппликатора 8,0 мм, при температуре –195°C и э...
Збережено в:
| Дата: | 2015 |
|---|---|
| Автори: | , , , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Russian |
| Опубліковано: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2015
|
| Назва видання: | Проблемы криобиологии и криомедицины |
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/140005 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Влияние криоконсервированной сыворотки кордовой крови и экстракта плаценты на заживление холодовых ран / Г.А. Ковалев, И.П. Высеканцев, И.О. Ищенко, Л.Г. Абрафикова, А.А. Олефиренко, Б.П. Сандомирский // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2015. — Т. 25, № 1. — С. 57–66. — Бібліогр.: 20 назв. — рос. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
irk-123456789-140005 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
irk-123456789-1400052018-06-22T03:03:04Z Влияние криоконсервированной сыворотки кордовой крови и экстракта плаценты на заживление холодовых ран Ковалев, Г.А. Высеканцев, И.П. Ищенко, И.О. Абрафикова, Л.Г. Олефиренко, А.А. Сандомирский, Б.П. Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология Изучена динамика планиметрических и микробиологических показателей холодовых ран при лечении криоконсервированной сывороткой кордовой крови (КСКК) и экстрактом плаценты (ЭП). Холодовые раны моделировали у крыс линии Сфинкс криоинструментом с диаметром аппликатора 8,0 мм, при температуре –195°C и экспозиции 60 с. Инъекции выполняли на 3-и сутки после криодеструкции через день внутримышечно по 0,1 мл/кг массы тела (всего 5 инъекций). На 7-е сутки после введения КСКК или ЭП площадь ран уменьшалась в 2,8 или 1,9 раза. Площадь ран у крыс, не получавших лечение, уменьшалась лишь на 9-е сутки. На 21-е сутки эксперимента площадь ран у животных после лечения ЭП была в 3,3 раза меньше, чем у нелеченных, а применение КСКК приводило к полной эпителизации ран. Введение КСКК и ЭП способствовало очищению ран от микроорганизмов. Количество микробов в ранах у крыс, получавших КСКК или ЭП, уменьшалось, начиная с 7-х суток наблюдения в 3,4 или 1,9 раза. На 21-е сутки эксперимента количество микроорганизмов в ранах животных на фоне терапии ЭП было в 8,4 раза меньше, чем в контроле, в то же время лечение КСКК приводило к ирадикации ран от патогенной микрофлоры. Таким образом, показано выраженное стимулирующее влияние КСКК и ЭП на процессы репарации ран. Представленные результаты открывают перспективу включения КСКК в протоколы лечения ран. Вивчено динаміку планіметричних і мікробіологічних показників холодових ран при лікуванні кріоконсервованою сироваткою кордової крові (КСКК) й екстрактом плаценти (ЕП). Холодові рани моделювали у щурів лінії Сфінкс кріоінструментом із діаметром аплікатора 8,0 мм за температури –195°C та експозиції 60 с. Ін’єкції починали на 3-ю добу після кріодеструкції внутрішньом’язово через день по 0,1 мл/кг маси тіла (усього 5 ін’єкцій). На 7-у добу після введення КСКК або ЕП площа ран зменшувалася в 2,8 або 1,9 раза відповідно. Площа ран у щурів, які не отримували лікування, зменшувалася лише на 9-у добу. На 21-у добу експерименту площа ран у тварин після лікування ЕП була в 3,3 раза менша, ніж у нелікованих тварин, а застосування КСКК приводило до повної епітелізації ран. Введення КСКК або ЕП сприяло очищенню ран від мікроорганізмів. Кількість мікробів у ранах щурів, які отримували КСКК або ЕП, зменшувалася починаючи з 7-ї доби спостереження (в 3,4 або 1,9 раза). На 21-у добу експерименту кількість мікроорганізмів у ранах тварин на тлі лікування ЕП була в 8,4 раза менша, ніж у контролі, в той самий час лікування КСКК приводило до ерадикації ран від патогенної мікрофлори. Таким чином, показано виражений стимулюючий вплив КСКК і ЕП на процеси репарації ран. Представлені результати відкривають перспективу включення КСКК у протоколи лікування ран. The dynamics of planimetric and microbiological indices of cold wounds during therapy with cryopreserved cord blood serum (CCBS) and placenta extract (PE) has been studied. Cold wounds were modelled in Sphinx using the cryodevice with 8.0 mm applicator, temperature of –195°C and 60 sec exposure. Injections were started on day 3 following cryodestruction intramuscularly each other day by 0.1 ml/kg of body mass (5 injections in general). On day 7 after CCBC or PE introduction the wound area decreased 2.8 or 1.9 times, correspondingly. Wound area in non-trated animals decreased only to day 9. On day 21 the wound area in animals with PE treatment was 3.3 times smaller, than in non-treated ones, and CCBC application resulted in full epithelization of wounds. Application of CCBC and PE contributed to elimination of microbes in wounds. Number of germs in wounds of rats which were treated with CCBC or PE decreased starting from 7th day of observation (3.4 or 1.9 fold, correspondingly). On day 21 the number of germs in wounds of rats treated with PE was 8.4 times less than in control, and in case of CCBC no patogenic microflora was present. Thus, an expressed stimulation effect of CCBC and PE on wound healing was shown. The presented results offer the prospect to include the CCMA into the wound treatment protocols. 2015 Article Влияние криоконсервированной сыворотки кордовой крови и экстракта плаценты на заживление холодовых ран / Г.А. Ковалев, И.П. Высеканцев, И.О. Ищенко, Л.Г. Абрафикова, А.А. Олефиренко, Б.П. Сандомирский // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2015. — Т. 25, № 1. — С. 57–66. — Бібліогр.: 20 назв. — рос. 0233-7673 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/140005 612.44.014.086.3:616.127-002:612.649.011.87.014.3 ru Проблемы криобиологии и криомедицины Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| language |
Russian |
| topic |
Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология |
| spellingShingle |
Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология Ковалев, Г.А. Высеканцев, И.П. Ищенко, И.О. Абрафикова, Л.Г. Олефиренко, А.А. Сандомирский, Б.П. Влияние криоконсервированной сыворотки кордовой крови и экстракта плаценты на заживление холодовых ран Проблемы криобиологии и криомедицины |
| description |
Изучена динамика планиметрических и микробиологических показателей холодовых ран при лечении
криоконсервированной сывороткой кордовой крови (КСКК) и экстрактом плаценты (ЭП). Холодовые раны моделировали у
крыс линии Сфинкс криоинструментом с диаметром аппликатора 8,0 мм, при температуре –195°C и экспозиции 60 с.
Инъекции выполняли на 3-и сутки после криодеструкции через день внутримышечно по 0,1 мл/кг массы тела (всего 5
инъекций). На 7-е сутки после введения КСКК или ЭП площадь ран уменьшалась в 2,8 или 1,9 раза. Площадь ран у крыс, не
получавших лечение, уменьшалась лишь на 9-е сутки. На 21-е сутки эксперимента площадь ран у животных после лечения
ЭП была в 3,3 раза меньше, чем у нелеченных, а применение КСКК приводило к полной эпителизации ран. Введение КСКК
и ЭП способствовало очищению ран от микроорганизмов. Количество микробов в ранах у крыс, получавших КСКК или ЭП,
уменьшалось, начиная с 7-х суток наблюдения в 3,4 или 1,9 раза. На 21-е сутки эксперимента количество микроорганизмов
в ранах животных на фоне терапии ЭП было в 8,4 раза меньше, чем в контроле, в то же время лечение КСКК приводило к
ирадикации ран от патогенной микрофлоры. Таким образом, показано выраженное стимулирующее влияние КСКК и ЭП на
процессы репарации ран. Представленные результаты открывают перспективу включения КСКК в протоколы лечения ран. |
| format |
Article |
| author |
Ковалев, Г.А. Высеканцев, И.П. Ищенко, И.О. Абрафикова, Л.Г. Олефиренко, А.А. Сандомирский, Б.П. |
| author_facet |
Ковалев, Г.А. Высеканцев, И.П. Ищенко, И.О. Абрафикова, Л.Г. Олефиренко, А.А. Сандомирский, Б.П. |
| author_sort |
Ковалев, Г.А. |
| title |
Влияние криоконсервированной сыворотки кордовой крови и экстракта плаценты на заживление холодовых ран |
| title_short |
Влияние криоконсервированной сыворотки кордовой крови и экстракта плаценты на заживление холодовых ран |
| title_full |
Влияние криоконсервированной сыворотки кордовой крови и экстракта плаценты на заживление холодовых ран |
| title_fullStr |
Влияние криоконсервированной сыворотки кордовой крови и экстракта плаценты на заживление холодовых ран |
| title_full_unstemmed |
Влияние криоконсервированной сыворотки кордовой крови и экстракта плаценты на заживление холодовых ран |
| title_sort |
влияние криоконсервированной сыворотки кордовой крови и экстракта плаценты на заживление холодовых ран |
| publisher |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| publishDate |
2015 |
| topic_facet |
Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология |
| url |
http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/140005 |
| citation_txt |
Влияние криоконсервированной сыворотки кордовой крови и экстракта плаценты на заживление холодовых ран / Г.А. Ковалев, И.П. Высеканцев, И.О. Ищенко, Л.Г. Абрафикова, А.А. Олефиренко, Б.П. Сандомирский // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2015. — Т. 25, № 1. — С. 57–66. — Бібліогр.: 20 назв. — рос. |
| series |
Проблемы криобиологии и криомедицины |
| work_keys_str_mv |
AT kovalevga vliâniekriokonservirovannojsyvorotkikordovojkroviiékstraktaplacentynazaživlenieholodovyhran AT vysekancevip vliâniekriokonservirovannojsyvorotkikordovojkroviiékstraktaplacentynazaživlenieholodovyhran AT iŝenkoio vliâniekriokonservirovannojsyvorotkikordovojkroviiékstraktaplacentynazaživlenieholodovyhran AT abrafikovalg vliâniekriokonservirovannojsyvorotkikordovojkroviiékstraktaplacentynazaživlenieholodovyhran AT olefirenkoaa vliâniekriokonservirovannojsyvorotkikordovojkroviiékstraktaplacentynazaživlenieholodovyhran AT sandomirskijbp vliâniekriokonservirovannojsyvorotkikordovojkroviiékstraktaplacentynazaživlenieholodovyhran |
| first_indexed |
2025-07-10T02:56:37Z |
| last_indexed |
2025-07-10T02:56:37Z |
| _version_ |
1837226997024030720 |
| fulltext |
УДК 612.44.014.086.3:616.127-002:612.649.011.87.014.3
Г.А. Ковалев1*, И.П. Высеканцев2, И.О. Ищенко1,
Л.Г. Абрафикова2, А.А. Олефиренко3, Б.П. Сандомирский1
Влияние криоконсервированной сыворотки кордовой крови
и экстракта плаценты на заживление холодовых ран
UDC 612.44.014.086.3:616.127-002:612.649.011.87.014.3
G.A. Kovalyov1*, I.P. Vysekantsev2, I.O. Ischenko1,
L.G. Abrafikova2, A.A. Olefirenko3, B.P. Sandomirskiy1
Effect of Cryopreserved Cord Blood Serum
and Placental Extract on Cold-Wound Healing
Реферат: Изучена динамика планиметрических и микробиологических показателей холодовых ран при лечении
криоконсервированной сывороткой кордовой крови (КСКК) и экстрактом плаценты (ЭП). Холодовые раны моделировали у
крыс линии Сфинкс криоинструментом с диаметром аппликатора 8,0 мм, при температуре –195°C и экспозиции 60 с.
Инъекции выполняли на 3-и сутки после криодеструкции через день внутримышечно по 0,1 мл/кг массы тела (всего 5
инъекций). На 7-е сутки после введения КСКК или ЭП площадь ран уменьшалась в 2,8 или 1,9 раза. Площадь ран у крыс, не
получавших лечение, уменьшалась лишь на 9-е сутки. На 21-е сутки эксперимента площадь ран у животных после лечения
ЭП была в 3,3 раза меньше, чем у нелеченных, а применение КСКК приводило к полной эпителизации ран. Введение КСКК
и ЭП способствовало очищению ран от микроорганизмов. Количество микробов в ранах у крыс, получавших КСКК или ЭП,
уменьшалось, начиная с 7-х суток наблюдения в 3,4 или 1,9 раза. На 21-е сутки эксперимента количество микроорганизмов
в ранах животных на фоне терапии ЭП было в 8,4 раза меньше, чем в контроле, в то же время лечение КСКК приводило к
ирадикации ран от патогенной микрофлоры. Таким образом, показано выраженное стимулирующее влияние КСКК и ЭП на
процессы репарации ран. Представленные результаты открывают перспективу включения КСКК в протоколы лечения ран.
Ключевые слова: кожа, раны, репарация, криоконсервированная сыворотка кордовой крови, экстракт плаценты.
Реферат: Вивчено динаміку планіметричних і мікробіологічних показників холодових ран при лікуванні кріоконсервованою
сироваткою кордової крові (КСКК) й екстрактом плаценти (ЕП). Холодові рани моделювали у щурів лінії Сфінкс кріоінстру-
ментом із діаметром аплікатора 8,0 мм за температури –195°C та експозиції 60 с. Ін’єкції починали на 3-ю добу після кріодест-
рукції внутрішньом’язово через день по 0,1 мл/кг маси тіла (усього 5 ін’єкцій). На 7-у добу після введення КСКК або ЕП площа
ран зменшувалася в 2,8 або 1,9 раза відповідно. Площа ран у щурів, які не отримували лікування, зменшувалася лише на 9-у
добу. На 21-у добу експерименту площа ран у тварин після лікування ЕП була в 3,3 раза менша, ніж у нелікованих тварин,
а застосування КСКК приводило до повної епітелізації ран. Введення КСКК або ЕП сприяло очищенню ран від мікроорганізмів.
Кількість мікробів у ранах щурів, які отримували КСКК або ЕП, зменшувалася починаючи з 7-ї доби спостереження (в 3,4 або
1,9 раза). На 21-у добу експерименту кількість мікроорганізмів у ранах тварин на тлі лікування ЕП була в 8,4 раза менша, ніж
у контролі, в той самий час лікування КСКК приводило до ерадикації ран від патогенної мікрофлори. Таким чином, показано
виражений стимулюючий вплив КСКК і ЕП на процеси репарації ран. Представлені результати відкривають перспективу
включення КСКК у протоколи лікування ран.
Ключові слова: шкіра, рани, репарація, кріоконсервована сироватка кордової крові, екстракт плаценти.
Abstract: The dynamics of planimetric and microbiological indices of cold wounds during therapy with cryopreserved cord blood
serum (CCBS) and placenta extract (PE) has been studied. Cold wounds were modelled in Sphinx using the cryodevice with 8.0 mm
applicator, temperature of –195°C and 60 sec exposure. Injections were started on day 3 following cryodestruction intramuscularly
each other day by 0.1 ml/kg of body mass (5 injections in general). On day 7 after CCBC or PE introduction the wound area decreased
2.8 or 1.9 times, correspondingly. Wound area in non-trated animals decreased only to day 9. On day 21 the wound area in animals
with PE treatment was 3.3 times smaller, than in non-treated ones, and CCBC application resulted in full epithelization of wounds.
Application of CCBC and PE contributed to elimination of microbes in wounds. Number of germs in wounds of rats which were treated
with CCBC or PE decreased starting from 7th day of observation (3.4 or 1.9 fold, correspondingly). On day 21 the number of germs in
wounds of rats treated with PE was 8.4 times less than in control, and in case of CCBC no patogenic microflora was present. Thus,
an expressed stimulation effect of CCBC and PE on wound healing was shown. The presented results offer the prospect to include
the CCMA into the wound treatment protocols.
Key words: skin, cold wounds, reparation, cryopreserved cord blood serum, placental extract.
*Автор, которому необходимо направлять корреспонденцию:
ул. Переяславская, 23, г. Харьков, Украина 61015;
тел.: (+38 057) 373-, факс: (+38 057) 373-30-84,
электронная почта: kovalyovhome@ukr.net
*To whom correspondence should be addressed:
23, Pereyaslavskaya str., Kharkov, Ukraine 61015;
tel.:+380 57 373, fax: +380 57 373 3084,
e-mail: kovalyovhome@ukr.net
1Department of Experimental Cryomedicine, and
2Department of Long Term Storage of Biological Objects at Low
Temperatures and Cryomicrobiology, Institute for Problems
of Cryobiology and Cryomedicine of the National Academy
of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine
3Southern Railway Clinical Hospital, Kharkov, Ukraine
1Отдел экспериментальной криомедицины, Институт проблем
криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков
2Отдел долгосрочного хранения биологических объектов при
низких температурах и криомикробиологии, Институт проблем
криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков
3 ГУ «Дорожная клиническая больница ст. Харьков» УТОО «ЮЖД»
Поступила 21.07.2014
Принята в печать 02.09.2014
Проблемы криобиологии и криомедицины. – 2015. – Т. 25, №1. – С. 57–66.
© 2015 Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины
Received June, 21, 2014
Accepted September, 02, 2014
Probl. Cryobiol. Cryomed. 2015. 25(1): 57–66.
© 2015 Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine
оригинальное исследование research article
58 проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 25, №/issue 1, 2015
Лечение пациентов с локальной холодовой трав-
мой является актуальной задачей современной
клинической медицины [7]. Низкотемпературное
повреждение кожи возникает как вследствие ат-
мосферных явлений, так и в результате медицин-
ского применения холода. Деструктивное влияние
низких температур – основной лечебный фактор
криохирургии. Привлекательность криохирурги-
ческих методик для лечения заболеваний кожи
обусловлена их высокой эффективностью, меньшей
по сравнению с лазерными и хирургическими ме-
тодами травматичностью [5, 20].
На процессы саногенеза, возникающие в ответ
на повреждение и направленные на восстановление
анатомической и функциональной целостности
поврежденных тканей – заживление раны, влияют
различные факторы как общего, так и местного
характера, в том числе степень ее инфицирования
и виды микроорганизмов [1, 8, 19]. Скорость
заживления – итоговый показатель эффективности
лечения ран, определяющий время нетрудоспо-
собности пациента. Поиск способов сокращения
длительности заживления ран является важной
проблемой современной хирургии. Одним из таких
способов может быть включение в протоколы
лечения терапевтических агентов природного про-
исхождения, которые содержат комплекс биоло-
гически активных веществ, обладают системным
регуляторным воздействием на процессы сано-
генеза – естественных регуляторов метаболичес-
ких процессов. В качестве таких агентов можно
рассматривать криоконсервированную сыворотку
кордовой крови (КСКК), воздействие которой на
метаболические процессы отмечено в работах
Б.П. Введенского и соавт. [3], Я.А. Поповича и
соавт. [13], а также медицинский препарат из
фармакотерапевтической группы средств, влияю-
щих на метаболические процессы, – экстракт
плаценты (ЭП).
Цель работы – изучение динамики планиметри-
ческих и микробиологических показателей холо-
довых ран у крыс при лечении КСКК и ЭП.
Материалы и методы
Работу выполняли на крысах Сфинкс в соот-
ветствии с требованиями комитета по биоэтике
ИПКиК НАН Украины, согласованными с дирек-
тивой Европейского парламента и Совета Европей-
ского союза от 22.09.2010 [18]. Холодовые раны
моделировали на латеральной поверхности бедра
способом, описанным в работе Е.О. Богатыревой
и соавт. [2], в нашей модификации. Применяли
криоинструмент с диаметром аппликатора 8,0 мм
(температура –195°C, время экспозиции 60 с).
Животные были разделены на 3 группы по 10 особей
The therapy of patients with local cold injury is an
actual task in current clinical medicine [8]. The low
temperature skin injury might occur as a result of either
atmospheric phenomena or medical cold application.
Destructive effect of low temperatures is the main
therapeutic factor in cryosurgery. Cryosurgical techni-
ques for treating skin diseases are attractive due to
their high efficiency and lower traumatic injuries as
compared to laser and surgical techniques [18, 20].
Processes of sanogenesis resulting from the injury
and targeted to recover the anatomical and functional
integrity of damaged tissues, i. e. wound healing, are
affected by various factors of both general and local
characters, in particular the degree of its contamination
and microbial species [1, 14, 17]. The healing rate is a
total index of wound healing efficiency, determining
the time of patients disability. Searching the ways to
reduce a wound healing time is an important task in
current surgery. One of these ways may be the supple-
mentation of treatment protocols with therapeutic
agents of natural origin, containing a combination of
biologically active substances with systemic regulatory
impact on sanogenesis processes: natural regulators
of metabolic processes. As we believe such agents
include the cryopreserved cord blood serum (CCBS),
the effect of which on metabolic processes was em-
phasised in papers of B.P. Vvedensky et al. [19],
Ya.A. Popovich et al. [13], as well as placenta extract
(PE), a medical product from pharmacotherapeutic
group of agents affecting metabolic processes.
The research was aimed to study the dynamics of
planimetric and microbiological indices of cold wounds
in the rats treated with CCBS and PE.
Materials and methods
The research was performed in Sphinx rats accor-
ding to the requirements of Bioethics Committee of
the Institute for Problems of Cryobiology and Cryo-
medicine of NAS of Ukraine agreed with the Guidelines
of European Parliament and the Council of the Euro-
pean Union of September 22, 2010 [6]. Cold wounds
were modelled on lateral femoral surface using the
technique described previously [4] with our modifi-
cation. The cryodevice with 8.0 mm applicator dia-
meter (temperature of –195°C, 60 sec exposure time)
was used. The animals were divided into 3 groups by
10 animals in each. In the control group (CG) the rats
received the physiological saline, in experimental
groups 1 and 2 (EG-1, EG-2) the animals got CCBS
and PE, respectively. The administration protocol
corresponded to the instruction for applying medical
immune biological preparation ‘Cryocell-Cryocord’
(Interdepartmental Scientific Center of Cryobiology and
Cryomedicine of National Academy of Sciences,
Academy of Medical Sciences and the Ministry of
проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 25, №/issue 1, 2015
59
в каждой. В контрольной группе (КГ) крысам вво-
дили физиологический раствор, в эксперименталь-
ной группе 1 (ЭГ-1) – КСКК, в экспериментальной
группе 2 (ЭГ-2) – ЭП. Схема введения соответст-
вовала инструкции для применения медицинского
иммунобиологического препарата «Криоцелл-крио-
корд» (ГП «Межведомственный научный центр
криобиологии и криомедицины НАН, АМН и МОЗ
Украины»), содержащего сыворотку кордовой кро-
ви. Инъекции начинали на 3-и сутки после крио-
деструкции через день внутримышечно по 0,1 мл/кг
массы тела (всего 5 инъекций). Дозировку рассчи-
тывали, как описано в работе Ю.Р. Рыболовлева
и соавт. [16]. Применяли КСКК, хранившуюся в
низкотемпературном банке ИПКиК НАН Украины,
и медицинский препарат «Экстракт плаценты»
(«Биофарма», Украина).
Планиметрические показатели ран изучали на
3-и, 7-, 9-, 14- и 21-е сутки. Для объективизации
оценки динамики заживления холодовых ран в ходе
эксперимента рассчитывали абсолютные и относи-
тельные планиметрические показатели. Измере-
ние площади ран проводили на цифровых изображе-
ниях с помощью программы «Adobe Photoshop
CS3» («Adobe Systems», США). Процент уменьше-
ния площади (ПУП) раны от исходного рассчиты-
вали по формуле: ПУП = (S0 – S)/S0×100%, где S0 –
исходная средняя площадь ран на начало лечения,
S – средняя площадь ран на момент измерения
[4]. Скорость заживления (СЗ) ран вычисляли по
формуле: СЗ = (ПУП1 – ПУП0)/Т, где ПУП1 –
процент уменьшения площади ран от исходной на
момент измерения; ПУП0 – процент уменьшения
площади ран при предыдущем измерении; Т –
количество дней между измерениями [4].
Микробиологическое изучение холодовых ран
осуществляли на 7-, 14- и 21-е сутки эксперимента.
Подготовку материала к посеву и посев произво-
дили в соответствии с требованиями, изложенными
в нормативных документах по работе с микроорга-
низмами [10, 11, 15]. Забор фрагментов тканей из-
под лейкоцитарно-фибринозного струпа раны
производили с соблюдением правил асептики и оп-
ределяли массу каждого биоптата. Полученные
биоптаты измельчали в гомогенизаторах и поме-
щали в стеклянные пробирки, в которые добавляли
по 5 мл стерильного физиологического раствора.
Пробирки встряхивали на механической качалке
(350 об/мин) в течение 30 мин. Из полученных
суспензий тканей готовили серийные разведения
на физиологическом растворе, которые в дальней-
шем высевали в объеме 0,2 мл на чашки Петри с
ростовыми средами: мясо-пептонным, 5%-м
кровяным, шоколадным, желточно-солевым агара-
ми, анаэробным гемагаром, агаром МакКонки,
Health of Ukraine, Ukraine), containing the cord blood
serum. Injections started from day 3 after cryodestruc-
tion, were performed each other day, intramuscularly
by 0.1 ml/kg of body weight within 10 days. The
dosage was calculated as reported by Yu.R. Rybolovlev
et al. [16]. The experimental medical products were
the CCBS, stored at the low temperature bank of the
Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedi-
cine of NAS of Ukraine, and commercial medical
product Placenta Extract (Biofarma, Ukraine).
Wound planimetric indices were studied to days 3,
7, 9, 14 and 21. To provide impartial evaluation of cold
wound healing dynamics during experiment we
calculated the absolute and relative planimetric indices.
The wound area was measured in digital images using
the Adobe Photoshop CS3 software (Adobe Systems,
USA). The percentage of area reduction (PAR) of
wound from initial one was calculated by the formula:
PAR = (S0 – S)/S0×100%; S0 was initial average wound
area at the beginning of therapy, S was average wound
area at the time of measurement [9]. The healing rate
(HR) of wounds was calculated by the following for-
mula: HR = (PAR1 – PAR0)/T; where PAR1 was the
percentage of area reduction of wounds from initial
one at the time of measurement; PAR0 was the per-
centage of area reduction of wounds during previous
measurement; T was a number of days between mea-
surements [4].
Cold wounds were microbiologically studied to day
7, 14 and 21 of the experiment. The material was pre-
pared for inoculation and then seeded according to the
requirements stated in the practical guidelines for
handling with microorganisms [2, 3, 15]. Tissue
fragments from fibrin-leukocyte wound crust were ta-
ken under aseptic conditions, the weight for each bioptic
specimen was determined. The obtained bioptic speci-
mens were disintegrated in homogenizers and placed
into glass vials, supplemented with 5 ml of sterile
physiological saline. The vials were shaken with
mechanical shaker (350 rpm) for 30 min. Serial
dilutions in physiological saline were prepared from
obtained tissue suspensions, thereafter 0.2 ml were
transfered for seeding to Petri dishes filled with
following growth media: meat-peptone, 5% blood,
chocolate, and vitelline-salt agars, anaerobic hem agar,
MacConkey agar, and agarized Sabouraud medium [8,
10, 12]. Platings in anaerobic hem agar and a part of
those in 5% blood agar were cultured in anaerobic jar
for 4 days at 37°C in oxygen-free gas medium. The
‘GasPak EZ’ system (Dickinson and Co, USA) was
used to create anaerobic conditions. Inoculations in
chocolate agar were cultured within a day at 37°C in
atmosphere with 6–8% CO2. Those in Sabouraud
medium were cultured for 48 hours at 30°C. All other
ones were cultured at 37°C for a day.
60 проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 25, №/issue 1, 2015
Following the incubation of the samples the
macrocolonies of microorganisms grown on agarized
growth media were assessed and a number of
microbial cells per 1 g of tissue taken from wound and
adjacent tissues was calculated [2, 3]. Colonies were
counted in those dishes, where the visible clusters of
growing bacteria were found. The grown colonies of
microorganisms were identified in accordance with the
formal recommendations [2, 3, 8].
Statistical processing was performed using the
Excel 2003 (Microsoft, USA), and SPSS v.10.0 (SPSS
Inc., USA) software package. The data were presen-
ted as mean ± standard deviation. The significance of
the differences between samplings was estimated by
non-parametric Mann-Whitney U-test, the differences
were assumed as significant at p < 0.05.
Results and discussion
Reparative processes, occurring in skin injuries are
universal and independent on a damaging agent type.
Healing of any wound has a similar dynamics [5],
providing the possibility to apply the objective criteria
for assessing wound process irrespective of a wound
type. The wound detersion, reduction and elimination
of edema, hyperemia, and infiltration in wound area,
the appearance and development of granulation tissue,
contraction and epithelization of wound surface are
the most obvious clinical signs, characterising the
wound process course, which directly depend on the
amount and type of microorganisms in a wound.
It is known that a site of skin-located cryonecrosis
transforms in a few days into a dry crust rejected in
2–3 weeks, depending on a size of destroyed site [11].
All this time the cryonecrosis accomplishes the role of
protecting biological dressing, therefore neither surgical
treatment nor other manipulations with wounds were
done.
The results of wound area measurement after skin
cryoinjury in experimental animals are shown in
Table 1. Proceeding from the features of cold wound
reparative dynamics in different groups, the values of
PAR and HR of wounds were calculated between such
observation terms, when the statistically significant
differences in a wound area were recorded. The
wounds area in CG animals to day 7 was not signifi-
cantly different from those to day 3 after cryodest-
ruction of investing tissues. At the same time the CCBS
and PE application resulted in a significant decrease
of the studied index.
The CCBS and PE treatment led to a decrease in
wound area by 2.8 and 1.9 times, respectively. The
wound PAR in the animals of the mentioned groups
was 63.6 and 46.9, respectively. Statistically significant
decrease (1.6 fold) of wound area in non-treated rats
was recorded only to day 9 after cryodestruction, that
агаризированной средой Сабуро [7, 9, 12]. Посевы
на анаэробный гемагар и часть посевов на 5%-й
кровяной агар культивировали в анаэростате в тече-
ние 4-х суток при температуре 37°С в газовой сре-
де без кислорода. Для создания анаэробных усло-
вий использовали систему «GasPak EZ» («Dickinson
and Company», США). Посевы на шоколадный агар
культивировали в течение суток при температуре
37°С в атмосфере с 6–8% СО2. Посевы на среду
Сабуро культивировали в течение 48 ч при темпера-
туре 30°С. Все остальные посевы культивировали
при температуре 37°С в течение суток.
После инкубирования проб оценивали выросшие
макроколонии микроорганизмов на агаризиро-
ванных ростовых средах и пересчитывали коли-
чество микробных клеток на 1 г тканей, взятых из
раны и прилегающих к ней тканей [10, 11]. Колонии
подсчитывали на тех чашках, в которых их рост
был изолированным. Идентификацию выросших
колоний микроорганизмов проводили в соответст-
вии с установленными рекомендациями [7, 10, 11]
Статистическую обработку осуществляли с
помощью пакета программ «Excel 2003» («Micro-
soft», США), «SPSS v. 10.0» («SPSS Inc.», США).
Данные выражали в виде среднего ± среднеквад-
ратичное отклонение. Для оценки значимости раз-
личий между выборками использовали непарамет-
рический критерий Манна-Уитни, значимыми
считали различия при р < 0,05.
Результаты и обсуждение
Репаративные процессы, возникающие после
ранений кожи, носят универсальный характер и не
зависят от вида повреждающего агента. Заживле-
ние любой раны имеет сходную динамику [17], что
определяет возможность применения объективных
критериев оценки раневого процесса, вне зависи-
мости от вида раны. Очищение раны, уменьшение
и ликвидация отека, гиперемии и инфильтрации в
области раны, появление и развитие грануляционной
ткани, контракция и эпителизация раневой по-
верхности являются наиболее демонстративными
клиническими признаками, характеризующими про-
текание раневого процесса, которые напрямую зави-
сят от количества и вида микроорганизмов в ране.
Известно, что участок крионекроза, распола-
гающегося на коже, через несколько дней превра-
щается в сухую корочку, которая, в зависимости
от размеров разрушенного участка, отторгается
через 2–3 недели [14]. Все это время крионекроз
исполняет роль защищающей рану биологической
повязки, поэтому хирургическая обработка или
другие манипуляции с ранами нами не проводились.
Результаты измерения площади ран после
криоповреждения кожи у экспериментальных жи-
проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 25, №/issue 1, 2015
61
testified to the severity of low temperature injury in
tissues. Within this observation period the areas of
wounds in experimental groups were significantly
lower than in the control group: by 2.8 and 1.4 times
after CCBS and PE administration, respectively. The
wound PAR in EG-1 was 78.0, and in the rats received
either physiological saline or PE no significant changes
in wound area from days 7 to 9 was recorded.
To day 14 of the experiment the wound area in
EG-1 was 6.1 times lower than in CG, and the wound
PAR was equal to 91.5. In the EG-2 the wound area
reduced by 2.1 times, the PAR was 74.8. The wound
area in CG animals remained unchanged from days 9
to 14, the significant differences were found only
between the indices of days 7 and 14 of observation,
the wound PAR within this time period was 48.2.
To day 21 of the experiment the wounds in the rats
received CCBS were completely epithelialized. If
comparing with the results in CG the PE application
resulted in a reduction of wound area in 3.3 times, the
PAR was equal to 91.7. To the mentioned observation
term the wound area in non-treated animals was
reduced by 72.8%.
The Figure shows that administration of CCBS and
PE was accompanied by a significant effect on wound
HR dynamics. The maximum wound HR in experi-
mental groups 1 and 2 was observed from day 3 to 7
of the experiment and was equal to 15.9 and 11.7%/day,
respectively. Later the HR decreased. In particular,
from days 7 to 9 in the CCBS-treated animals it reached
7.2%/day, and in PE treated rats it was 4.9%/day.
Within the period from day 9 to 14 the HR in EG-1 and
вотных показаны в табл. 1. Исходя из особенностей
динамики репарации холодовых ран в разных
группах, значения ПУП и СЗ ран рассчитывались
между сроками наблюдения, когда были зафикси-
рованы статистически значимые отличия в площа-
ди ран. На 7-е сутки площадь ран у животных КГ
значимо не отличалась от площади ран на 3-и сутки
после выполнения криодеструкции покровных
тканей. В то же время применение КСКК и ЭП
приводило к значимому уменьшению изучаемого
показателя.
После введения КСКК площадь ран уменьша-
лась в 2,8 раза, лечения ЭП – в 1,9 раза. При этом
ПУП ран у животных в указанных группах составил
63,6 и 46,9 соответственно. Статистически значи-
мое уменьшение (в 1,6 раза) площади ран у крыс,
не получавших лечение, было зафиксировано лишь
на 9-е сутки после криодеструкции, что свидетель-
ствует о тяжести низкотемпературного поврежде-
ния тканей. В указанный срок наблюдения площадь
ран в экспериментальных группах была значимо
меньше, чем в контрольной: в 2,8 и 1,4 раза на фоне
применения КСКК и ЭП соответственно. При этом
ПУП ран в ЭГ-1 составил 78,0, а у крыс, которым
вводили физиологический раствор или ЭП, значи-
мого изменения площади ран с 7-х по 9-е сутки не
зафиксировано.
На 14-е сутки эксперимента площадь ран в ЭГ-1
была меньше, чем в КГ в 6,1 раза, а ПУП ран
равнялся 91,5. В ЭГ-2 площадь ран уменьшилась
в 2,1 раза, ПУП составил 74,8. Площадь ран
животных КГ с 9-х по 14-е сутки не изменялась,
значимые отличия зафиксированы только между
показателями на 7- и 14-е сутки наблюдения, ПУП
ран за этот отрезок времени равнялся 48,2.
На 21-е сутки эксперимента раны у крыс, кото-
рым вводили КСКК, полностью эпителизирова-
лись. По сравнению с результатами в КГ, приме-
нение ЭП приводило к уменьшению площади ран
в 3,3 раза, ПУП был равен 91,7. У нелеченных
животных площадь ран к указанному сроку
наблюдения уменьшилась на 72,8%.
Как показано на рисунке, введение КСКК и ЭП
сопровождалось существенным влиянием на дина-
мику СЗ ран. Максимальная СЗ ран в эксперимен-
тальных группах 1 и 2 отмечалась с 3-х по 7-е сут-
ки эксперимента и составляла 15,9 и 11,7%/сутки
соответственно. В дальнейшем СЗ уменьшалась.
Так, с 7-х по 9-е сутки у животных, получавших
КСКК, она была равна 7,2%/сутки, а у животных,
которым вводили ЭП, – 4,9%/сутки. В период с 9-х
по 14-е сутки СЗ составляла в ЭГ-1 – 2,7, а ЭГ-2 –
3,6%/сутки, а с 14-х по 21-е сутки – 1,2 и 2,4%/сутки.
У крыс, не получавших лечение, СЗ ран также
уменьшалась с течением времени. В период с 3-х
Таблица 1. Площадь холодовых ран (мм2) у животных
(M ± σ) после введения КСКК и ЭП
Table 1. Area of cold wounds (mm2) in animals (M ± σ)
after introduction of CCBS and PE
иктуС
syaD
ГK
GC
1-ГЭ
1-GE
2-ГЭ
2-GE
3 9,02±1,861
7 1,91±8,731 3,8±2,16 1 1,31±3,98 2,1
9 9,61±1,401 8,4±0,73 3,1 4,9±7,27 2,1
41 2,41±1,78 8,1±2,41 3,1 1,7±3,24 3,2,1
12 9,6±8,54 3 – 7,1±9,31 3,1
Примечание. Отличия статистически значимы по срав-
нению: 1 – с контрольной группой; 2 – ЭГ-1; 3 – соответст-
вующей группой на предыдущий срок наблюдения; p ≤ 0,05.
Note. The differences are statistically significant if compared with:
1 – control group; 2 –EG-1, 3 – corresponding group in previous
observation terms; p ≤ 0.05.
62 проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 25, №/issue 1, 2015
по 9-е сутки эксперимента она была равна
6,3%/сутки, с 7-х по 14-е сутки – 4,3%/сутки, а с
14-х по 21-е сутки – 3,5%/сутки.
В связи с тем, что в работе использовали жи-
вотных, лишенных шерстяного покрова, эпители-
зация ран носила характер краевой. Известно, что
наползание эпителия со стороны здоровой кожи
возможно только на поверхность грануляционной
ткани [8]. Исходя из чего результаты, полученные
в группе животных с введением КСКК, подтверж-
дают адекватное развитие грануляционной ткани
и косвенно свидетельствуют об активации мест-
ных иммунных реакций.
Любая рана является «открытыми воротами»
для внедрения патогенных микроорганизмов. Не-
жизнеспособные ткани в ране, сосудистые и прочие
нарушения, вызванные травмой, способствуют
размножению микробной флоры, которая, в свою
очередь, приводит к развитию воспаления и со-
путствующего ему каскада морфофункциональных
нарушений на местном и системном уровнях.
Нарушение местных иммунных процессов замед-
ляет эрадикацию раны от патогенных микроорга-
низмов. Таким образом, очищение раны замед-
ляется, что препятствует ее эпителизации.
Изучение микробиологических показателей хо-
лодовых ран выявило, что у крыс КГ на 7-е сутки
наблюдения количество колониеобразующих еди-
ниц (КОЕ) в 1 г биоптата раны составляло 5,7×109.
У животных, получавших КСКК, бактериальная
обсемененность равнялась (1,66×109) КОЕ/г, что
в 3,4 раза меньше, чем в КГ. Введение ЭП также
способствовало очищению ран от микроорганиз-
мов – бактериальная обсемененность составляла
(3,02×109) КОЕ/г, что в 1,9 раза меньше, чем в КГ.
Позитивное влияние КСКК и ЭП на 14-е сутки
эксперимента проявлялось дальнейшим уменьше-
нием количества микроорганизмов в ранах. Так,
показатель бактериальной обсемененности у живот-
ных контрольной группы составлял (6,3×107) КОЕ/г,
у крыс, пролеченных КСКК и ЭП, – (6,92×105) и
(3,76×107) КОЕ/г соответственно. Таким образом,
по сравнению с данными в контрольной группе
бактериальная обсемененность ран при лечении
ЭП была меньше в 1,7 раза, а количество КОЕ
в ранах животных, получавших КСКК, снижалось
почти на два порядка (в 91 раз).
Сходная динамика изучаемых показателей со-
хранялась и на 21-е сутки эксперимента. Бакте-
риальная обсемененность ран у крыс контрольной
группы составляла (1,95×105) КОЕ/г, введение ЭП
сопровождалось уменьшением количества микро-
организмов до (2,32×104) КОЕ/г (в 8,4 раза). Лече-
ние КСКК приводило к эрадикации ран от пато-
генной микрофлоры.
EG-2 was 2.7 and 3.6%/day, but from day 14 to 21 it
was 1.2 and 2.4%/day, respectively.
In non-treated rats the wound HR was also reduced
with the course of time. Within the period from day 3
to 9 of the experiment it was 6.3%/day, from day 7 to
14 and from 14 to 21 it was 4.3%/day and 3.5%/day
respectively.
Due to the fact that in this research we used the
coat-deprived animals, the wound epithelialization had
a marginal character. It is known that the creep of
epithelium on the side of healthy skin is only possible if
granulation tissue surface is present [17]. Proceeding
from this fact the results obtained in the group of CCBS
treated animals confirm an adequate development of
granulation tissue and indirectly testify to the activation
of local immune responses.
Any wound is the ’open gates’ for pathogenic mic-
roorganisms entering. Presence of non-viable tissues
in the wound, vascular and other trauma-induced
disorders, contribute to microflora propagation, which,
in its turn, leads to development of inflammation and
accompanying cascade of morphofunctional disorders
at a local and systemic levels. Disorder in local immune
processes slows down the wound eradication from
pathogenic microorganisms. Consequently the wound
cleansing is slowed down, thereby preventing its
epithelialization.
The study of microbial indices of cold wounds de-
monstrated that in CG rats to day 7 of observation the
number of colony-forming units (CFUs) in 1 g of bioptic
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
0 5 10 15 20 25
Динамика скорости заживления холодовых ран у экспе-
риментальных животных после введения КСКК и ЭП:
– КГ; – ЭГ-1; –- ЭГ-2.
Dynamics of cold wound healing rate in animals after intro-
duction of CCBS and PE: – CG; – EG-1; – EG-2.
С
ко
ро
ст
ь
за
жи
вл
ен
ия
,
%
/с
ут
ки
W
ou
nd
h
ea
lin
g
ra
te
, %
/d
ay
Срок наблюдения, сутки
Observation term, days
проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 25, №/issue 1, 2015
63
number in the wounds of CCBS animals decreased by
almost two orders (91 times).
Similar dynamics of the studied indices remained
to day 21 of the experiment as well. Bacterial conta-
mination of wounds in the control group rats was
(1.95×105) CFUs/g, the PE administration was accom-
panied by a decrease in microorganism number down
to (2.32×104) CFUs/g (in 8.4 times). The CCBS the-
rapy resulted in wound eradication from pathogenic
organisms.
A change in species composition of wound micro-
flora corresponds to the results of studying the dyna-
mics of change in cold wound area and microbial con-
tamination of tissues (Table. 2). To day 7 of observation
in all the groups the wound tissues were infected with
Staphylococci, Enterococci, bacteria of Enterobacte-
riaceae family and asporogenous anaerobic ones. To
day 14 the species composition of microflora from the
wounds of control group animals remained unchanged.
In EG-2 rats the tissue eradication from Staphylo-
coccus capitis, Serratia marcescens, Providencia
alcalifaciens occurred, and in EG-1 rats it did from
S. capitis, Enterococcus faecalis, S. marcescens, P.
alcalifaciens, Streptococcus pyogenes. To day 21
Результатам изучения динамики изменения
площади холодовых ран и микробной обсеменен-
ности тканей соответствует изменение видового
состава раневой микрофлоры (табл. 2). На 7-е сут-
ки наблюдения во всех группах ткани ран были
инфицированы стафилококками, энтерококками,
бактериями семейства Enterobacteriaceae и аспо-
рогенными анаэробными бактериями. На 14-е
сутки видовой состав микрофлоры из ран у живот-
ных контрольной группы не изменился. У крыс из
ЭГ-2 произошла эрадикация тканей от Staphylo-
coccus capitis, Serratia marcescens, Providencia
аlcalifaciens, а у крыс ЭГ-1 – от S. capitis, Entero-
coccus faecalis, S. marcescens, P. alcalifaciens,
Streptococcus pyogenes. На 21-е сутки из тканей
холодовых ран животных контрольной группы были
выделены: Staphylococcus aureus, E. faecalis,
Proteus vulgaris, S. pyogenes, Fusobacterium
necrophorum, Peptostreptococcus spp. Из тканей
ран крыс, пролеченных ЭП, выделены S. aureus,
P. vulgaris, S. pyogenes, F. necrophorum, Pepto-
streptococcus spp. В посевах из биоптатов у живот-
ных, которым вводили КСКК, рост микрофлоры
отсутствовал.
еыннеледыВ
ымзинагроорким
smsinagroorcimdetalosI
ГK
GC
1-ГЭ
1-GE
2-ГЭ
2-GE
syad,mretnoitavresbOиктус,яинедюлбанкорС
7 41 12 7 41 12 7 41 12
suerua.S + + + + + – + + +
sitipac.S + + – + – – + – –
sucityloisac.S + + – + + – + + –
silaceaf.E + + + + – – + + –
iloc.E + + – + + – + + –
eainomuenp.C + + – + + – + + –
siragluv.P + + + + + – + + +
snecsecram.S + + – + – – + – –
sneicafilacla.P + + – + – – + – –
senegoyp.S + + + + – – + + +
murohporcen.F + + + + + – + + +
ppssuccocotpertsotpeP + + + + + – + + +
Таблица 2. Видовой состав микрофлоры в холодовых ранах
экспериментальных животных после введения КСКК и ЭП
Table 2. Microflora in cold wounds of experimental animals
after introduction of CCBS and PE
specimen was 5.7× 109. In the
CCBS treated animals a bac-
terial contamination was equal
to (1.66×109) CFUs/g, that
was 3.4 times lower than in
CG. The PE introduction also
contributed to wound clean-
sing from microorganisms:
bacterial contamination was
(3.02×109) CFUs/g, that was
1.9 times lower than in the
CG.
Positive effect of CCBS
and PE introduction observed
to day 14 of the experiment
was further manifested in a
decreased number of micro-
organisms found in wounds.
In particular, the index of
bacterial contamination in the
control group animals was
(6.3×107)CFU/g, and in the
rats treated with CCBS and
PE it made (6.92×105) and
(3.76×107) CFU/g, respecti-
vely. By other words, if com-
paring with the data in the
control group the bacterial
contamination of wounds
during PE therapy was 1.7
times lower, and the CFUs
64 проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 25, №/issue 1, 2015
Анализ бактериологических параметров холо-
довых ран крыс различных групп свидетельствует
о существенном влиянии системного введения
КСКК и ЭП на микробную обсемененность ран и
видовой состав их микрофлоры. В отсутствие ле-
чения бактериальная обсемененность ран умень-
шалась медленно, а видовой состав микрофлоры
не изменялся. На наш взгляд, это является одной
из главных причин медленного заживления холодо-
вых ран у животных контрольной группы. Замед-
ленное заживление ран у животных, не получавших
лечение, подтверждается отсутствием значимых
различий между показателями площади ран на 3-и
и 7-е; 7- и 9-е; 9- и 14-е сутки после криоповреж-
дения.
Введение животным КСКК и ЭП приводило к
значительному снижению количества микробов в
ранах, а также сопровождалось сужением спектра
их видового состава. Наблюдалась эрадикация ран
от патогенных микроорганизмов, существенно
замедляющих репаративные процессы в ней. При
этом интенсивность терапевтического влияния
КСКК была выше, чем у ЭП.
Однонаправленное действие КСКК и ЭП мы
объясняем тем, что они содержат биологически
активные вещества, физиологичные для организма
животного и сбалансировано влияют на работу им-
мунной, эндокринной, нервной, кроветворной сис-
тем, которые находятся в тесном функциональном
взаимодействии. Из положений концепции много-
уровневой регуляции поддержания гомеостаза [9]
следует, что активные начала обоих изучавшихся
регуляторов метаболических процессов могут
действовать на любом уровне регуляции: централь-
ном, системном, клеточном, молекулярном. Одной
из наиболее чувствительных интегративных сис-
тем организма является иммунная [6]. Нормаль-
ный иммунный ответ обеспечивается согласован-
ным участием клеточных, гуморальных механиз-
мов и специфической иммунной реактивностью.
Поскольку КСКК и ЭП не оказывают прямого
антибактериального действия, то, скорее всего, они
активируют реакции иммунной системы (возмож-
но, через клеточные механизмы) и взаимосвязан-
ные с ней остальные вышеуказанные системы.
Более выраженное влияние КСКК на процессы
репарации ран, вероятнее всего, связано с разли-
чиями в составе КСКК и ЭП.
Выводы
Полученные нами данные свидетельствуют о
выраженном стимулирующем влиянии КСКК и ЭП
на процессы репарации холодовых ран, что под-
тверждается уменьшением микробной обсеменен-
ности и сужением спектра видового состава
микроорганизмов ран, ускорением их эпителизации.
the cold wound tissues of the control group animals
yielded the following: Staphylococcus aureus, E. fae-
calis, Proteus vulgaris, S. pyogenes, Fusobacterium
necrophorum, Peptostreptococcus spp. The tissues
of PE treated animals had S. aureus, P. vulgaris,
S. pyogenes, F. necrophorum, Peptostreptococcus
spp. As mentioned above, there was no microflora
growth observed in the inoculations from bioptic speci-
mens of animals received CCBS.
The analysis of bacteriological parameters of cold
wounds in rats of different groups demonstrated a
significant effect of systemic administration of CCBS
and PE on microbial contamination of wounds and the
species composition of their microflora. If no therapy
was performed the bacterial contamination of wounds
decreased slowly, and the species composition of
microflora remained unchanged. We believe this fact
is one of the main reasons of slow cold wound healing
in the control group animals. Delayed wound healing
in non-treated animals was confirmed by absence of
significant differences between the wound area bet-
ween days 3 and 7; 7 and 9; 9 and 14 after cryoinjury.
The CCBS and PE introduction to animals resulted
in a significant reduction in a number of germs in
wounds, and it was accompanied by the narrowing of
their species composition range as well. Of note is the
fact, that we observed a wound eradication from the
pathogens, significantly slowing down the reparative
processes in it. The intensity of CCBS therapeutic
effect was higher than the PE one.
One-direction effect of CCBS and PE we explain
by their composition of biologically active substances,
being physiological for animal organism and a balanced
effect on immune, endocrine, nervous and hematopoie-
tic systems, which are in a close functional interaction.
Proceeding from the statements of the concept about
multilevel regulated homeostasis maintenance [10], the
active effectors in both studied regulators of metabolic
processes may act at any level of regulation: central,
systemic, cellular, and molecular ones. Immune system
is one of the most sensitive integrative parts of the bo-
dy [7]. Normal immune response is provided by a coor-
dinated participation of cellular, humoral mechanisms
and a specific immune reactivity. Since the CCBS and
PE have no direct antibacterial effect, it is most likely,
that they activate the immune system responses (pos-
sibly through cellular mechanisms) and other associated
systems mentioned above. More pronounced CCBS
effect on wound reparative processes is most likely
due to differences in CCBS and PE composition.
Conclusions
Our findings demonstrate a pronounced stimulating
effect of the studied natural regulators of metabolic
processes on reparative processes of cold wounds, as
evidenced by a decreased microbial contamination and
Литература
1. Абаев Ю.К. Справочник хирурга. Раны и раневая инфек-
ция. – Ростов-на-Дону: Феникс, 2006. – 427 с.
2. Богатирьова О.О., Гальченко С.Є., Сандомирський Б.П.
Вплив екстрактів кріоконсервованих фрагментів селезін-
ки свиней та шкіри поросят на лейкоцитарний профіль
крові щурів з холодовою травмою шкіри // Проблемы крио-
биологии. – 2012. – Т. 22, №1. – С. 97–103.
3. Введенский Б.П., Ковалев Г.А., Тыныныка Л.Н. и др. Крио-
консервированная сыворотка кордовой крови при лечении
деструктивно-дистрофических процессов в суставах //
Вестник неотложной и восстановительной медицины. –
2012. – Т. 13, №1. – С. 41–43.
4. Григорян А.Ю., Бежин А.И., Панкрушева Т.А. и др. Иммоби-
лизированные формы антисептиков для лечения гнойных
ран в эксперменте // Курский научно-практ. вестник «Че-
ловек и его здоровье». – 2011, №4. – С. 24–33.
5. Дерматовенерология: Национальное руководство / Под
ред. Ю.К. Скрипкина, Ю.С. Бутова, О.Л. Иванова – М.:
ГЭОТАР-Медиа, 2011. – 1024 с.
6. Дранник Г.Н. Клиническая иммунология и аллергология. –
К.: Фолиант, 2010. – 552 с.
7. Дяченко В.Ф., Бірюкова С.В., Старобінець З.Г. та ін. Лабора-
торна діагностика гнійно-запальних захворювань, обумов-
лених аспорогенними анаеробними мікроорганізмами:
Методичні рекомендації. – Х.: ХНДІМІ ім. І.І. Мечнікова,
2000. – 35 с.
8. Клиническая хирургия: Национальное руководство в 3 т. /
Под ред. B.C. Савельева, А.И. Кириенко – М.: ГЭОТАР-
Медиа, 2008. – Т. 1. – 864 с.
9. Куценко С.А. Основы токсикологии. – СПб: Фолиант, 2004. –
720 с.
10.Об унификации микробиологических (бактериологиче-
ских) методов исследования, применяемых в клинико-
диагностических лабораториях лечебно-профилактичес-
ких учреждений: Приказ МЗ СССР №535. – М., 1985.
11.Основные методы лабораторных исследований в клини-
ческой лаборатории. – Женева: Всемирная организация
здравоохранения, 1994. – 132 с.
12.Поляк М.С., Сухаревич В.И., Сухаревич М.Э. Питательные
среды для медицинской микробиологии. – СПб.: Научно-
исследовательский центр фармакотерапии, 2002. – 80 с.
13.Попович Я.О., Шевчук А.Г., Василюк М.Д. Препарати фето-
плацентарного комплексу в корекції оксидантного стресу
при хірургічному лікуванні хворих на синдром діабетичної
стопи // Трансплантологія. – 2007. – Т. 9, №1. – С. 224–227.
14.Пористо-проницаемые криоаппликаторы из никелида ти-
тана в медицине / Под ред. Д.Д. Мельник. – Томск: Изд-во
МИЦ, 2010. – 306 с.
References
1. Abayev Yu.K. Manual for surgeon. Wounds and infection of
wounds: Rostov-on-Don: Feniks; 2006.
2. About unification оf microbiological (bacteriological) research
methods in clinical and diagnostic laboratories at medical
preventive institutions: Decree of Ministry of Healthcare of
the USSR Nr. 535: Moscow: 1985.
3. Basic laboratory methods in clinical laboratory: Geneva: World
Health Organization; 1994.
4. Bogatyreva O.O., Galchenko S.Ye., Sandomirsky B.P. Effect
of extracts of pig spleen and piglet skin cryopreserved frag-
ments on blood leukocyte profile of rats with cold injury of
skin. Problems of Cryobiology 2012; 22(1): 97–103.
5. Demidova-Rice T., Hamblin M., Herman I. Acute and impaired wound
healing: pathophysiology and current methods for drug delivery,
part 1: normal and chronic wounds: biology, causes, and ap-
proaches to care. Adv Skin Wound Care 2012; 25(7): 304–314.
6. Directive 2010/63/EU of the European parliament and of the
council of 22 September 2010 on the protection of animals
used for scientific purposes. Official Journal of the European
Union 2010; L276: 33–79.
7. Drannik G.N. Clinical immunology and allergology: Kiev: Foliant;
2010.
8. Dyachenko V.F., Biryukova S.V., Starobineth Z.G. et al. Labo-
ratory diagnostics of pyo-inflammatory diseases, caused as-
porogenic anaerobic microorganisms: Methodical recommen-
dations. Kharkov: Mechnikov Institute of Microbiology and
Immunology; 2000.
9. Grigoriyan A.Yu., Bezhin A.I., Pankrusheva T.A. et al. Immobilized
forms of antiseptics to treat purulent wounds in experiment.
Kurskiy Nauchno-Prakticheskiy Vestnik Chelovek i Ego Zdo-
rovie 2011; 4: 24–33.
10.Kutsenko S.A. Basics of toxicology: St. Petersburg: Foliant; 2004.
11.Melnik D.D., editor Porous-permeable cryoapplicators of tita-
nium nickelide in medicine. Tomsk: MITS; 2010.
12.Polyak M.S., Sukharevich V.I., Sukharevich M.E. The nutrient
media for medical microbiology. St. Petersburg: Research
Center of Drug Therapy; 2002.
13.Popovich Ya.O., Shevchuk A.G., Vasylyuk M.D. Preparations
of fetoplacental complex in correcting oxidative stress correc-
tion under surgical treatment of patients with diabetic foot
syndrome. Transplantologiya 2007; 9(1): 224–227.
14.Posluszny J., Conrad J., Halerz M. et al. Surgical burn wound
infections and their clinical implications. Burn Care Res. 2011;
32(2): 324–333.
15.Rules and procedures with the material admitted for study in
microbiological (clinical microbiology) laboratory: Methodical
recommendations. Moscow: Moscow Regional R&D Clinical
Institute of Rus. Acad. Sci.; 1999.
проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 25, №/issue 1, 2015
65
Обнаружено, что влияние КСКК и ЭП однонаправ-
лено и проявляется улучшением заживления
преимущественно в первую фазу раневого процес-
са, при этом терапевтическая эффективность
КСКК выше, чем у ЭП.
Представленные результаты свидетельствуют
о возможности включения КСКК в протоколы лече-
ния ран. Перспективным направлением дальней-
ших исследований может стать сравнительное
изучение влияния регуляторов метаболических
процессов ксеногенного происхождения на динами-
ку заживления ран.
a narrowed range of species composition of wound
microorganisms, and their accelerated epithelialization.
The CCBS and PE effect was found to be one-direc-
tion, and was manifested in an improved healing mostly
in the first phase of wound process, wherein the CCBS
therapeutic efficiency was higher than the PE one.
The results presented offer the prospects for the
possibility to include CCBS into the wound manage-
ment protocols. A promising direction for further
research could be a comparative study of the effect
of regulators of metabolic processes of xenogenic origin
on the wound process dynamics.
66 проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 25, №/issue 1, 2015
15.Правила и техника работы с материалом, поступающим
для исследования в микробиологическую (клинической
микробиологии) лабораторию: Методические указания. –
М.: МОНИКИ РАМН, 1999. – С. 6–16.
16.Рыболовлев Ю.Р., Рыболовлев Р.С. Дозирование веществ
для млекопитающих по константе биологической актив-
ности // Доклады АН СССР. – 1979. – Т. 247, №6. – С. 1513–
1516.
17.Demidova-Rice T., Hamblin M., Herman I. Acute and impaired
wound healing: pathophysiology and current methods for drug
delivery, part 1: normal and chronic wounds: biology, causes,
and approaches to care // Adv. Skin. Wound. Care. – 2012. –
Vol. 25, №7. – P. 304–314.
18.Directive 2010/63/EU of the European parliament and of the
council of 22 September 2010 on the protection of animals
used for scientific purposes // Official Journal of the European
Union. – 2010. – L 276. – P. 33–79.
19.Posluszny J., Conrad J., Halerz M. et al. Surgical burn wound
infections and their clinical implications // J. Burn Care Res. –
2011. – Vol. 32, №2. – P. 324–333.
20.Zimmerman E., Crawford P. Cutaneous cryosurgery // Am.
Fam. Physician. – 2012. – Vol. 86, №12. – P. 1118–1124.
16.Rybolovlev Yu.R., Rybolovlev R.S. Dosage of substances for
mammals by the constant of biological activity. Doklady
Academii Nauk SSSR 1979; 247(6): 1513–1516.
17.Saveliev V.S., Kirienko A.I., editors. Clinical surgery: national
guidance. Moscow: GEOTAR-Media; 2008.
18.Skripkin Yu.K., Butov Yu.S., Ivanov O.L., editors. Dermatove-
nereology. National guidance. Moscow: GEOTAR-Media; 2011.
19.Vvedensky B.P., Kovalоv G.A., Tynynyka L.N. et al. Cryo-
preserved cord blood serum in the treatment of destructive
and degenerative processes in the joints. Bulletin of Urgent
and Recovery Medicine 2012; 13(1): 41–43.
20.Zimmerman E., Crawford P. Cutaneous cryosurgery. Am Fam
Physician 2012; 86(12): 1118–1124.
|