Изменения Fos-иммунореактивности в моторной коре крыс, реализующих оперантные движения, после системного введения блокатора NO-синтазы

Изменения Fos-иммунореактивности в моторной коре крыс, реализующих оперантные движения, после системного введения блокатора NO-синтазы

Проведено сравнительное изучение иммунореактивности по отношению к белку с-Fos в первичной моторной коре (области M1) мозга крыс. Выявлена специфика соответствующих паттернов во II–VI слоях этой зоны у интактных животных и крыс, реализовавших оперантные пищедобывательные рефлексы, в контроле и пос...

Ausführliche Beschreibung

Gespeichert in:
Bibliographische Detailangaben
Datum:2013
Hauptverfasser: Власенко, О.В., Маньковская, Е.П., Мазниченко, А.В., Пилявский, А.И., Майский, В.А.
Format: Artikel
Sprache:Russian
Veröffentlicht: Інститут фізіології ім. О.О. Богомольця НАН України 2013
Schriftenreihe:Нейрофизиология
Schlagworte:
Матеріали міжнародного симпозіуму “Молекулярні механізми регуляції синаптичної передачі” (пам’яті В. І. Скока)
Online Zugang:http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/148034
Tags: Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Zitieren:Изменения Fos-иммунореактивности в моторной коре крыс, реализующих оперантные движения, после системного введения блокатора NO-синтазы / О.В. Власенко, Е.П. Маньковская, А.В. Мазниченко, А.И. Пилявский, В.А. Майский // Нейрофизиология. — 2013. — Т. 45, № 1. — С. 87-91. — Бібліогр.: 12 назв. — рос.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id irk-123456789-148034
record_format dspace
spelling irk-123456789-1480342019-02-17T01:27:07Z Изменения Fos-иммунореактивности в моторной коре крыс, реализующих оперантные движения, после системного введения блокатора NO-синтазы Власенко, О.В. Маньковская, Е.П. Мазниченко, А.В. Пилявский, А.И. Майский, В.А. Матеріали міжнародного симпозіуму “Молекулярні механізми регуляції синаптичної передачі” (пам’яті В. І. Скока) Проведено сравнительное изучение иммунореактивности по отношению к белку с-Fos в первичной моторной коре (области M1) мозга крыс. Выявлена специфика соответствующих паттернов во II–VI слоях этой зоны у интактных животных и крыс, реализовавших оперантные пищедобывательные рефлексы, в контроле и после предварительных системных инъекций блокатора нейронной синтазы оксида азота (nNOS) 7-нитроиндазола (7-NI). Средние значения плотности распределения Fos-иммунопозитивных (Fos-ип-) нейронов во II–III слоях области М1 на уровнях +2.7 и +2.2 мм от брегмы у крыс после предварительной инъекции 7-NI, а также у животных, реализующих оперантные рефлексы, были достоверно ниже, чем в группе контроля. В глубоких же слоях коры (IV– VI) данной зоны у крыс, реализовавших оперантные пищедобывательные рефлексы, после инъекции 7-NI обнаруживалось достоверно большее количество Fos-ип-нейронов на стороне мозга, контралатеральной по отношению к рабочей конечности. Предполагается, что генерирующие NO НАДФ-Н-диафоразореактивные клетки зоны М1 и афферентные проекции от подкорковых лимбических центров, расположенные в этой области, участвуют в формировании специфических паттернов нейронной активности в исследованных слоях коры. Подавление активности nNOS при системном введении животным 7-NI может разнонаправлено модулировать нейронную активность в поверхностных и глубоких слоях М1 как у контрольных крыс, так и у животных, реализующих оперантные пищедобывательные рефлексы. Проведено порівняльне вивчення імунореактивності щодо білка с-Fos у первинній моторній корі (області M1) мозку щурів. Виявлена специфіка відповідних патернів у II–VI шарах цієї зони в інтактних тварин і щурів, що реалізовували оперантні їжодобувні рефлекси в умовах високої харчової мотивації в контролі та після попередніх системних ін’єкцій блокатора нейронної синтази оксиду азоту (nNOS) 7-нітроіндазолу (7-NI). Середні значення щільності розподілу Fos-імунопозитивних (Fos-іп-) нейронів у II–III шарах області М1 на рівнях +2.7 та +2.2 мм від брегми у щурів після попередньої ін’єкції 7-NI, а також у тварин, що реалізували оперантні рефлекси, були вірогідно нижчими, ніж у групі контролю. У глибоких же шарах кори (IV–VI) даної зони у щурів, що реалізували оперантні їжодобувні рефлекси, після ін’єкції 7-NI виявлялася вірогідно більша кількість Fos-іп-нейронів на боці мозку, контралатеральному щодо робочої кінцівки. Висловлено припущення, що розташовані в зоні М1 НАДФН-діафоразореактивні (ті що генерують NO) нейрони та аферентні проекції від підкоркових лімбічних центрів мозку, беруть участь у формуванні специфічних патернів нейронної активності в досліджених шарах кори. Пригнічення активності (nNOS) при системному введенні тваринам 7-NI може різноспрямовано модулювати нейронну активність у поверхневих та глибоких шарах М1 як у контрольних щурів, так і у тварин, реалізуючих оперантні їжодобувні рефлекси. 2013 Article Изменения Fos-иммунореактивности в моторной коре крыс, реализующих оперантные движения, после системного введения блокатора NO-синтазы / О.В. Власенко, Е.П. Маньковская, А.В. Мазниченко, А.И. Пилявский, В.А. Майский // Нейрофизиология. — 2013. — Т. 45, № 1. — С. 87-91. — Бібліогр.: 12 назв. — рос. 0028-2561 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/148034 612.825.1+575.113 ru Нейрофизиология Інститут фізіології ім. О.О. Богомольця НАН України
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
language Russian
topic Матеріали міжнародного симпозіуму “Молекулярні механізми регуляції синаптичної передачі” (пам’яті В. І. Скока)
Матеріали міжнародного симпозіуму “Молекулярні механізми регуляції синаптичної передачі” (пам’яті В. І. Скока)
spellingShingle Матеріали міжнародного симпозіуму “Молекулярні механізми регуляції синаптичної передачі” (пам’яті В. І. Скока)
Матеріали міжнародного симпозіуму “Молекулярні механізми регуляції синаптичної передачі” (пам’яті В. І. Скока)
Власенко, О.В.
Маньковская, Е.П.
Мазниченко, А.В.
Пилявский, А.И.
Майский, В.А.
Изменения Fos-иммунореактивности в моторной коре крыс, реализующих оперантные движения, после системного введения блокатора NO-синтазы
Нейрофизиология
description Проведено сравнительное изучение иммунореактивности по отношению к белку с-Fos в первичной моторной коре (области M1) мозга крыс. Выявлена специфика соответствующих паттернов во II–VI слоях этой зоны у интактных животных и крыс, реализовавших оперантные пищедобывательные рефлексы, в контроле и после предварительных системных инъекций блокатора нейронной синтазы оксида азота (nNOS) 7-нитроиндазола (7-NI). Средние значения плотности распределения Fos-иммунопозитивных (Fos-ип-) нейронов во II–III слоях области М1 на уровнях +2.7 и +2.2 мм от брегмы у крыс после предварительной инъекции 7-NI, а также у животных, реализующих оперантные рефлексы, были достоверно ниже, чем в группе контроля. В глубоких же слоях коры (IV– VI) данной зоны у крыс, реализовавших оперантные пищедобывательные рефлексы, после инъекции 7-NI обнаруживалось достоверно большее количество Fos-ип-нейронов на стороне мозга, контралатеральной по отношению к рабочей конечности. Предполагается, что генерирующие NO НАДФ-Н-диафоразореактивные клетки зоны М1 и афферентные проекции от подкорковых лимбических центров, расположенные в этой области, участвуют в формировании специфических паттернов нейронной активности в исследованных слоях коры. Подавление активности nNOS при системном введении животным 7-NI может разнонаправлено модулировать нейронную активность в поверхностных и глубоких слоях М1 как у контрольных крыс, так и у животных, реализующих оперантные пищедобывательные рефлексы.
format Article
author Власенко, О.В.
Маньковская, Е.П.
Мазниченко, А.В.
Пилявский, А.И.
Майский, В.А.
author_facet Власенко, О.В.
Маньковская, Е.П.
Мазниченко, А.В.
Пилявский, А.И.
Майский, В.А.
author_sort Власенко, О.В.
title Изменения Fos-иммунореактивности в моторной коре крыс, реализующих оперантные движения, после системного введения блокатора NO-синтазы
title_short Изменения Fos-иммунореактивности в моторной коре крыс, реализующих оперантные движения, после системного введения блокатора NO-синтазы
title_full Изменения Fos-иммунореактивности в моторной коре крыс, реализующих оперантные движения, после системного введения блокатора NO-синтазы
title_fullStr Изменения Fos-иммунореактивности в моторной коре крыс, реализующих оперантные движения, после системного введения блокатора NO-синтазы
title_full_unstemmed Изменения Fos-иммунореактивности в моторной коре крыс, реализующих оперантные движения, после системного введения блокатора NO-синтазы
title_sort изменения fos-иммунореактивности в моторной коре крыс, реализующих оперантные движения, после системного введения блокатора no-синтазы
publisher Інститут фізіології ім. О.О. Богомольця НАН України
publishDate 2013
topic_facet Матеріали міжнародного симпозіуму “Молекулярні механізми регуляції синаптичної передачі” (пам’яті В. І. Скока)
url http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/148034
citation_txt Изменения Fos-иммунореактивности в моторной коре крыс, реализующих оперантные движения, после системного введения блокатора NO-синтазы / О.В. Власенко, Е.П. Маньковская, А.В. Мазниченко, А.И. Пилявский, В.А. Майский // Нейрофизиология. — 2013. — Т. 45, № 1. — С. 87-91. — Бібліогр.: 12 назв. — рос.
series Нейрофизиология
work_keys_str_mv AT vlasenkoov izmeneniâfosimmunoreaktivnostivmotornojkorekrysrealizuûŝihoperantnyedviženiâposlesistemnogovvedeniâblokatoranosintazy
AT manʹkovskaâep izmeneniâfosimmunoreaktivnostivmotornojkorekrysrealizuûŝihoperantnyedviženiâposlesistemnogovvedeniâblokatoranosintazy
AT mazničenkoav izmeneniâfosimmunoreaktivnostivmotornojkorekrysrealizuûŝihoperantnyedviženiâposlesistemnogovvedeniâblokatoranosintazy
AT pilâvskijai izmeneniâfosimmunoreaktivnostivmotornojkorekrysrealizuûŝihoperantnyedviženiâposlesistemnogovvedeniâblokatoranosintazy
AT majskijva izmeneniâfosimmunoreaktivnostivmotornojkorekrysrealizuûŝihoperantnyedviženiâposlesistemnogovvedeniâblokatoranosintazy
first_indexed 2025-07-11T03:45:08Z
last_indexed 2025-07-11T03:45:08Z
_version_ 1837320648145240064
fulltext NEUROPHYSIOLOGY / НЕЙРОФИЗИОЛОГИЯ.—2013.—T. 45, № 1 87 УДК 612.825.1+575.113 О. В. ВЛАСЕНКО1, Е. П. МАНЬКОВСКАЯ2, А. В. МАЗНИЧЕНКО2, А. И. ПИЛЯВСКИЙ2, В. А. МАЙСКИЙ2 ИЗМЕНЕНИЯ FOS-ИММУНОРЕАКТИВНОСТИ В МОТОРНОЙ КОРЕ КРЫС, РЕАЛИЗУЮЩИХ ОПЕРАНТНЫЕ ДВИЖЕНИЯ, ПОСЛЕ СИСТЕМНОГО ВВЕДЕНИЯ БЛОКАТОРА NO-СИНТАЗЫ Поступила 14.08.2012. Проведено сравнительное изучение иммунореактивности по отношению к белку с­Fos в первичной моторной коре (области M1) мозга крыс. Выявлена специфика соответствую­ щих паттернов во II–VI слоях этой зоны у интактных животных и крыс, реализовавших оперантные пищедобывательные рефлексы, в контроле и после предварительных си­ стемных инъекций блокатора нейронной синтазы оксида азота (nNOS) 7­нитроиндазола (7­NI). Средние значения плотности распределения Fos­иммунопозитивных (Fos­ип­) нейронов во II–III слоях области М1 на уровнях +2.7 и +2.2 мм от брегмы у крыс после предварительной инъекции 7­NI, а также у животных, реализующих оперантные реф­ лексы, были достоверно ниже, чем в группе контроля. В глубоких же слоях коры (IV– VI) данной зоны у крыс, реализовавших оперантные пищедобывательные рефлексы, после инъекции 7­NI обнаруживалось достоверно большее количество Fos­ип­нейронов на стороне мозга, контралатеральной по отношению к рабочей конечности. Предпо­ лагается, что генерирующие NO НАДФ­Н­диафоразореактивные клетки зоны М1 и афферентные проекции от подкорковых лимбических центров, расположенные в этой области, участвуют в формировании специфических паттернов нейронной активности в исследованных слоях коры. Подавление активности nNOS при системном введении животным 7­NI может разнонаправлено модулировать нейронную активность в поверх­ ностных и глубоких слоях М1 как у контрольных крыс, так и у животных, реализующих оперантные пищедобывательные рефлексы. КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: c-Fos, нейронная NO-синтаза (nNOS), блокатор синтеза NO 7-NI, моторная кора, оперантный пищедобывательный рефлекс. 1 Винницкий национальный медицинский университет им. Н. И. Пиро­ гова МЗ Украины (Украина). 2 Институт физиологии им. А. А. Богомольца НАН Украины, Киев (Украина). Эл. почта: vlasenko@vsmu.vinnica.ua (О. В. Власенко). emankovskaya@gmail.com (Е. П. Маньковская) ВВЕДЕНИЕ Нейронная синтаза оксида азота (nNOS), которая обеспечивает продукцию NO, обнаруживается в ГАМК­содержащих кортикальных интернейронах [1], а также в афферентных холинергических во­ локнах, поступающих в кору из безымянной суб­ станции и ядра Мейнерта [2, 3]. Клетки, содержа­ щие в себе nNOS, могут быть идентифицированы гистохимически согласно наличию в них фермента НАДФ­Н­диафоразы (НАДФ­Н­д). Недавно было установлено, что функциональное выключение NOS­содержащих нейронов приводит к развитию процесса растормаживания в корковых нейронных сетях [4]. Известно, что экспрессия гена c-fos находится в тесной связи с интенсивностью нейронной актив­ ности в тех или иных структурах мозга, в том числе в неокортексе. В период выработки и реализации животными повторных оперантных пищедобыва­ тельных движений были выявлены специфические паттерны экспрессии белка c­Fos в различных сло­c­Fos в различных сло­­Fos в различных сло­Fos в различных сло­ в различных сло­ ях первичной моторной зоны коры мозга крыс [5]. В настоящем исследовании с использованием имму­ ногистохимической и гистохимической методик мы провели сравнительное исследование особенностей распределения Fos­иммунопозитивных (Fos­ип­) и НАДФ­Н­диафоразореактивных (НАДФ­Н­др­) нейронов в различных слоях области М1 мозга крыс NEUROPHYSIOLOGY / НЕЙРОФИЗИОЛОГИЯ.—2013.—T. 45, № 188 О. В. ВЛАСЕНКО, Е. П. МАНЬКОВСКАЯ, А. В. МАЗНИЧЕНКО и др. (в пределах представительства передней конечно­ сти). Соответствующие характеристики сравнива­ лись у интактных крыс и животных после повтор­ ных реализаций оперантных пищедобывательных рефлексов в условиях нормального функциониро­ вания системы nNOS и подавления синтеза NO в результате предварительных системных инъекций блокатора данной системы 7­нитроиндазола (7­NI). МЕТОДИКА Были исследованы четыре группы крыс­самцов ли­ нии Вистар массой 250–300 г (по четыре животных в каждой). Группу 1 составили интактные живот­ ные, группу 2 – также интактные крысы, которым за 60 мин до перфузии и забора материала внутри­ брюшинно инъецировали 30 мг/кг 7­NI (“Sigma”, США). Животные групп 3 и 4 с высоким уровнем пищевой мотивации (голодание в течение суток) осуществляли многократные стереотипные пи­ щедобывательные оперантные движения – захват шариков корма передней конечностью из трубо­ образной кормушки. Такая оперантная моторная активность реализовывалась в ходе 12 ежеднев­ ных тренировочных сеансов длительностью по 30 мин. Крысам группы 4 за 30 мин до начала по­ следнего тренировочного сеанса делались инъекции 30 мг/кг 7­NI. Все экспериментальные процедуры были выполнены в соответствии с Европейской ди­ рективой Совета сообществ от 24 ноября 1986 г. (86/609/ЕЕС). Крыс групп 1 и 2 и экспериментальных живот­ ных групп 3 и 4 (последних – через 1.5 ч после окончания финальной тренировки) под глубоким наркозом (пентобарбитал натрия, 90 мг/кг, внутри­ брюшинно; “Sigma”, США) перфузировали интра­Sigma”, США) перфузировали интра­”, США) перфузировали интра­ кардиально через восходящую аорту фиксатором (4 %­ным раствором параформальдегида на фос­ фатном буфере). Головной мозг каждого животного извлекали, дополнительно фиксировали и выдер­ живали в растворе сахарозы (с целью криопротек­ ции). На замораживающем микротоме изготавлива­ ли срезы мозга толщиной 40 мкм для дальнейшей иммуногистохимической и гистохимической обра­ ботки. Процедуры фиксации и окрашивания были подробно описаны ранее [6, 7]. В качестве индексов плотности Fos­ип­клеток подсчитывали их количество в единичных сре­ зах мозга в пределах участков препаратов разме­ ром 200×200 мкм2. Подсчет проводили во II–III, IV, V и VI слоях зоны М1 на фронтальных уров­ нях +2.7 и +2.2 мм от брегмы по атласу [8]; рассчи­ тывали средние значения этих индексов ± ошибка среднего. Полученные значения сравнивали с по­ мощью двухфакторного дисперсионного анализа вариаций (ANOVA). Если различия между средни­ANOVA). Если различия между средни­). Если различия между средни­ ми были найдены, дополнительно применяли post­ hoc­анализ Ньюмена–Кеулса. Межгрупповые раз­­анализ Ньюмена–Кеулса. Межгрупповые раз­ личия считали достоверными при Р < 0.05. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ В моторной коре интактных крыс основные скоп­ ления Fos­ип­нейронов и самая высокая их плот­Fos­ип­нейронов и самая высокая их плот­­ип­нейронов и самая высокая их плот­ ность регистрировались на уровнях +2.7 и +2.2 мм ростральнее брегмы во II и III слоях зоны М1 в об­ ласти представительства передней конечности – 20.4 ± 2.6 и 25.2 ± 2.4 единицы в тест­участках соответственно. В более глубоких слоях М1 плот­ ность распределения Fos­ип­нейронов на этих уровнях была примерно вдвое ниже. У крыс груп­ пы 2 (не выполнявших оперантных движений) Fos­ иммунопозитивность в поверхностных слоях М1 после ведения 7­NI оказалась значительно более слабой. Индексы плотности распределения Fos­ ип­нейронов во II–III слоях коры животных дан­ ной группы на уровнях +2.7 и +2.2 мм от брегмы составляли лишь 8.2 ± 0.7 и 9.8 ± 0.8 (т. е. были примерно в два с половиной раза меньшими, чем в группе 1; Р < 0.05) (рис. 1). По сравнению с ин­ тактными крысами группы 1 у животных, реализо­ вавших оперантные пищедобывательные движения (группа 3), также наблюдались заметно меньшие значения средней плотности Fos­ип­нейронов во II–III слоях зоны М1 на исследованных фронталь­ ных уровнях. Так, на уровне +2.7 мм от брегмы средняя плотность в указанных слоях на контра­ латеральной стороне мозга по отношению к рабо­ чей конечности составляла 17.4 ± 0.9, а на уровне +2.2 мм – 9.9 ± 0.7 единицы. В то же время количе­ ство таких нейронов в более глубоких слоях было сравнимо с таковым в условиях контроля. У крыс же группы 4 (выполнявших оперантные движе­ ния) плотность Fos­ип­нейронов в контралатераль­Fos­ип­нейронов в контралатераль­­ип­нейронов в контралатераль­ ной (по отношению к рабочей конечности) зоне М1 после предварительного блокирования NO­синтазы была существенно выше, чем аналогичные показа­ тели у животных остальных трех групп (рис. 1). Так, контралатерально в IV слое зоны М1 средние индексы плотности меченых нейронов на уровнях NEUROPHYSIOLOGY / НЕЙРОФИЗИОЛОГИЯ.—2013.—T. 45, № 1 89 ИЗМЕНЕНИЯ FOS­ИММУНОРЕАКТИВНОСТИ В МОТОРНОЙ КОРЕ КРЫС +2.2 и +2.7 мм от брегмы составляли 46.6 ± 2.2 и 31.1 ± 1.8 соответственно. Значительные количе­ ства Fos­ип­нейронов у животных группы 4 реги­Fos­ип­нейронов у животных группы 4 реги­­ип­нейронов у животных группы 4 реги­ стрировались в зоне М1 контралатеральной сторо­ ны мозга также в остальных (II–III, V и VI) слоях коры (А, Б). Средние значения индексов плотности в этих слоях на уровне + 2.7 мм от брегмы состав­ ляли 21.7 ± 1.9, 22.8 ± 1.0 и 23.2 ± 1.3 единицы со­ ответственно. Проявления НАДФ­Н­д­активности регистри­ ровались в I–VI слоях М1 у животных всех групп. При этом подобную реактивность демонстриро­ вали только непирамидные нейроны и многочис­ ленные афферентные волокна, восходящие в кору [2, 9]. Введение 7­NI не вызывало существенного уменьшения количества НАДФ­Н­др­единиц, по­ скольку указанный блокатор подавляет лишь соб­ ственно процесс генерации NO, не влияя на содер­NO, не влияя на содер­, не влияя на содер­ жание кофермента, вовлеченного в данный процесс (НАДФ­Н­диафоразы) [7]. Таким образом, мы подтвердили наличие доста­ точно выраженного дорсо­вентрального градиента плотности Fos­ип­нейронов в кортикальной зоне М1. Значительная плотность таких нейронов обна­ руживалась во II и III слоях М1 у интактных жи­ вотных. Заметно меньшие значения плотности Fos­ ип­нейронов (Р < 0.05) почти во всех слоях М1 у животных «оперантной» группы 2, наблюдаемые без блокирования NO­синтазы перед забором ма­NO­синтазы перед забором ма­­синтазы перед забором ма­ териала, могут быть связаны с пластическими из­ менениями в коре. Такие изменения обусловлены закреплением моторных навыков соответствующих пищедобывательных рефлексов, когда для поддер­ жания уровня оперантной активности уже не тре­ буется большой массы активированных кортикаль­ ных нейронов и происходит перераспределение количеств активных единиц между моторной корой и другими церебральными структурами, связанное с устойчивой выработкой двигательного автома­ тизма. В то же время существенное количество та­ ких клеток в этих условиях сохраняется в глубо­ ких слоях (IV и V). Достоверно бóльшие (Р < 0.05) значения плотности Fos­ип­нейронов во всех сло­Fos­ип­нейронов во всех сло­­ип­нейронов во всех сло­ ях М1 на контралатеральной стороне мозга у крыс после предварительной системной инъекций 7­NI, Р и с. 1. Диаграммы средних значений плотности (M ± s.e.m) Fos­иммунопозитивных (Fos­ип­) нейронов (их количеств на тест­площади 200×200 мкм2 в срезе толщиной 40 мкм) во II–VI слоях первичной моторной коры (M1) на фронтальных уровнях мозга +2.7 (А) и +2.2 (Б) мм от брегмы. Под горизонтальной осью приведены номера групп (1–4) животных с обозначением ипси­ (i) и контралатеральной (c) сторон мозга по отношению к рабочей левой конечности: 1 – средняя плотность Fos­ип­нейронов в М1 у интактных контрольных животных, 2 – у животных после системных инъекций 7­нитроиндазола (7­NI), 3 – у крыс, реализовавших оперантные движения и 4 – у животных, выполнявших оперантные движения и подвергнутых системным инъекциям 7­NI. Звездочками над колонками указаны случаи достоверных различий (Р < 0.05) плотности меченых нейронов на ипси­ и контралатеральной сторонах мозга у крыс группы 3 или 4; звездочками над стрелками – случаи достоверных различий плотности нейронов на контралатеральной стороне мозга у крыс групп 3 и 4, а крестиками – у крыс групп 3 и 1 (контрольной) или 4 и 1. Р и с. 1. Діаграми середніх значень щільності (M ± s.e.m) Fos­імунопозитивних нейронів (їх кількостей на тест­площі 200×200 мкм2 у зрізі товщиною 40 мкм) у II–VI шарах первинної моторної кори на фронтальних рівнях мозку +2.7 (А) та +2.2 (Б) мм від брегми. A Б 1 2 II–III IV V VI 3і 4і3с 4с NEUROPHYSIOLOGY / НЕЙРОФИЗИОЛОГИЯ.—2013.—T. 45, № 190 О. В. ВЛАСЕНКО, Е. П. МАНЬКОВСКАЯ, А. В. МАЗНИЧЕНКО и др. по­видимому, связаны со значительным снижением активности тормозных NOS­содержащих нейронов в коре мозга [1, 10, 11]. Результаты настоящей работы дают основания полагать, что состояние системы NOS в моторной коре мозга и количество с­Fos­позитивных клеток в этой зоне соотносятся довольно сложным обра­ зом. Введение блокатора nNOS животным, которые не реализовывали специфической рефлекторной моторной активности и у которых присутствова­ ло заметное количество Fos­ип­нейронов (прежде всего, в поверхностных слоях коры), обусловли­ вало уменьшение числа таких единиц. В отличие от этого, у животных, длительно реализовывав­ Р и с. 2. Микрофотографии Fos­иммунопозитивных (Fos­ип­) нейронов (окрашенные ядра) и НАДФ­Н­диафоразореактивных (НАДФ­Н­др) клеток в I–VI слоях первичной моторной коры на ипсилатеральной (относительно рабочей конечности) стороне мозга крысы с предварительной инъекцией блокатора нейронной NO­синтазы. Черными стрелками обозначены Fos­ип­ядра, белыми – НАДФ­Н­др­нейроны и волокна. Прямоугольные участки, выделенные пунктирными линиями на А, представлены на Б и В с бóльшим увеличением. fmi – малые щипцы мозолистого тела. Р и с. 2. Мікрофотографії Fos­імунопозитивних нейронів (забарвлені ядра) та НАДФ­Н­діафоразореактивних клітин у I–VI шарах первинної моторної кори на іпсилатеральному (щодо робочої кінцівки) боці мозку щура з попередньою ін’єкцією блокатора нейронної NO­синтази. A M1 Б В Б 100 мкм 100 мкм100 мкм В NEUROPHYSIOLOGY / НЕЙРОФИЗИОЛОГИЯ.—2013.—T. 45, № 1 91 ИЗМЕНЕНИЯ FOS­ИММУНОРЕАКТИВНОСТИ В МОТОРНОЙ КОРЕ КРЫС ших оперантные пищедобывательные движения, после введения блокатора nNOS в моторной коре наблюдалось явно увеличенное количество Fos­ип­ единиц, причем существенное количество таких клеток отмечалось именно в глубоких слоях коры (IV и V) контралатерально рабочей конечности, т. е. как раз в тех кортикальных локусах, которые наиболее непосредственно вовлечены в управле­ ние указанной моторной активностью (где форми­ руются непосредственные кортикальные моторные команды на выполнение соответствующих движе­ ний). Таким образом, введение блокатора nNOS 7­NI определенным образом акцентирует разли­NI определенным образом акцентирует разли­ определенным образом акцентирует разли­ чия между неактивированным и активированным состояниями моторной коры, снижая количество Fos­ип­нейронов в состоянии моторного покоя и в целом повышая количество таких единиц у жи­ вотных, реализовавших интенсивную пищедобы­ вательную моторную активность. Очевидно, что механизмы подобного феномена – взаимозависи­ мости интенсивностей синтеза NO и экспрессии белка «быстрого реагирования» c­Fos – требуют специальных исследований. О. В. Власенко1, О. П. Маньківська2, А. В. Мазниченко2, О. І. Пілявський2, В. О. Майський2 ЗМІНИ РІВНЯ FOS­ІМУНОРЕАКТИВНОСТІ У МОТОРНІЙ КОРІ ЩУРІВ, ЯКІ РЕАЛІЗУВАЛИ ОПЕРАНТНІ РУХИ, ПІСЛЯ СИСТЕМНОГО ВВЕДЕННЯ БЛОКАТОРА NO­СИНТАЗИ 1 Вінницький національний медичний університет ім. М. І. Пирогова МОЗ України (Україна). 2 Інститут фізіології ім. О. О. Богомольця НАН України, Київ (Україна). Р е з ю м е Проведено порівняльне вивчення імунореактивності щодо білка с­Fos у первинній моторній корі (області M1) мозку щурів. Виявлена специфіка відповідних патернів у II–VI шарах цієї зони в інтактних тварин і щурів, що реалізову­ вали оперантні їжодобувні рефлекси в умовах високої хар­ чової мотивації в контролі та після попередніх системних ін’єкцій блокатора нейронної синтази оксиду азоту (nNOS) 7­нітроіндазолу (7­NI). Середні значення щільності розпо­ ділу Fos­імунопозитивних (Fos­іп­) нейронів у II–III шарах області М1 на рівнях +2.7 та +2.2 мм від брегми у щурів після попередньої ін’єкції 7­NI, а також у тварин, що реа­ лізували оперантні рефлекси, були вірогідно нижчими, ніж у групі контролю. У глибоких же шарах кори (IV–VI) да­ ної зони у щурів, що реалізували оперантні їжодобувні реф­ лекси, після ін’єкції 7­NI виявлялася вірогідно більша кіль­ кість Fos­іп­нейронів на боці мозку, контралатеральному щодо робочої кінцівки. Висловлено припущення, що роз­ ташовані в зоні М1 НАДФН­діафоразореактивні (ті що ге­ нерують NO) нейрони та аферентні проекції від підкорко­ вих лімбічних центрів мозку, беруть участь у формуванні специфічних патернів нейронної активності в досліджених шарах кори. Пригнічення активності (nNOS) при системно­ му введенні тваринам 7­NI може різноспрямовано модулю­ вати нейронну активність у поверхневих та глибоких ша­ рах М1 як у контрольних щурів, так і у тварин, реалізуючих оперантні їжодобувні рефлекси. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 1. X. H. Jaglin, J. Hjerling­Leffler, G. Fishell, and R. Batista­ Brito, “The origin of neocortical nitric oxide synthase­ expressing inhibitory neurons,” Front. Neural. Circ., 6, 44 (2012). 2. O. V. Vlasenko, V. A. Maisky, A. V. Maznychenko, et al., “NADPH­diaphorase activity and neurovascular coupling in the rat cerebral cortex,” Фізіол. журн., 54, № 1, 45­53 (2008). 3. M. M. Mesulan, E. J. Mufson, B. H. Wainer, et al., “Central cholinergic pathways in the rat: an overview based on an alternative nomenclature (Ch1–Ch6),” Neuroscience, 10, 1185­1201 (1983). 4. D. Shlosberg, Y. Buskila, Y. Abu­Ghanem, and Y. Amitai, “Spatiotemporal alterations of cortical network activity by selective loss of NOS­expressing interneurons,” Front. Neural. Circ., 6, 3 (2012). 5. О. В. Власенко, А. И. Пилявский, В. А. Майский и др., “Fos­иммунореактивность и НАДФН­д­реактивность в коре больших полушарий крыс, реализующих мотивированные стереотипные движения передней конечностью”, Нейрофи- зиология / Neurophysiology, 40, № 4, 348­358 (2008). 6. S.­M. Hsu, L. Raine, and H. Fanger, “Use of avidin­biotin­ peroxidase complex (ABC) in immunoperoxidase techniques: a comparison between ABC and unlabelled antibody (PAP) procedures,” J. Histochem. Cytochem., 29, 577­580 (1981). 7. S. R. Vincent and H. Kimura, “Histochemical mapping of nitric oxide synthase in the rat brain,” Neuroscience, 46, 755­ 784 (1992). 8. G. Paxinos and C. Watson, The Rat Brain in Stereotaxic Coordinates, Acad. Press, San Diego (1997). 9. C. Iadecola, “Intrinsic signals and functional brain mapping: caution, blood vessels at work,” Cerebr. Cortex, 12, 223­224 (2002). 10. S. Yang and C. L. Cox, “Modulation of inhibitory activity by nitric oxide in the thalamus,” J. Neurophysiol., 97, 3386­3395 (2006). 11. M. Silva, D. C. Aguiar, C. R. Diniz, et al., “Neuronal NOS inhibitor and conventional antidepressant drugs attenuate stress­induced for expression in overlapping brain regions,” Cell Mol. Neurobiol., 32, 443­453 (2012). 12. O. V. Vlasenko, A. V. Dovgan, V. A. Maisky, et al., “NADPH­ diaphorase reactivity and neurovascular coupling in the basal forebrain and motor cortex,” Нейрофизиология / Neurophysiology, 39, № 4/5, 405­407 (2007).

Ähnliche Einträge