Development of monoclonal antibody against protein Rictor, a component of the mTORC2 complex

Aim. Rictor is a component of the protein complex mTORC2 that is activated by growth factors and regulates cell growth, survival and migration. Here, we describe the development of the Rictor specific monoclonal antibody and characterize its suitability for various immunological assays. Methods. Hyb...

Повний опис

Збережено в:
Бібліографічні деталі
Дата:2015
Автор: Malanchuk, O.M.
Формат: Стаття
Мова:English
Опубліковано: Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 2015
Назва видання:Вiopolymers and Cell
Теми:
Онлайн доступ:http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/152616
Теги: Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:Development of monoclonal antibody against protein Rictor, a component of the mTORC2 complex / O.M. Malanchuk // Вiopolymers and Cell. — 2015. — Т. 31, № 5. — С. 379-386. — Бібліогр.: 28 назв. — англ.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id irk-123456789-152616
record_format dspace
spelling irk-123456789-1526162019-06-13T01:25:48Z Development of monoclonal antibody against protein Rictor, a component of the mTORC2 complex Malanchuk, O.M. Molecular and Cell Biotechnologies Aim. Rictor is a component of the protein complex mTORC2 that is activated by growth factors and regulates cell growth, survival and migration. Here, we describe the development of the Rictor specific monoclonal antibody and characterize its suitability for various immunological assays. Methods. Hybridoma technology has been used for the monoclonal antibody production. Immunization was carried out with the recombinant N-terminal fragment of human Rictor expressed in E. coli as a GST-tagged fusion protein. Results. Specific monoclonal antibody (mAb) against Rictor has been developed. Conclusions. The generated mAb specifically recognizes the recombinant and endogenous Rictor and is suitable for Western blotting, immunoprecipitation, and immunofluorescence assays of mammalian cells. This mAb will be a useful tool for the investigations of a physiological role of Rictor as well as the function of the mTORC2 in general. Мета. Rictor є унікальним компонентом білкового комплекса mTORC2, що активується ростовими факторами та регулює ріст клітин, виживання та міграцію. В даній статті описано процедуру отримання моноклональних антитіл, специфічних до Rictor, а також особливості їх використання у різноманітних імунологічних методах аналізу. Методи. Для отримання моноклональних антитіл було використано гібридомну технологію. Імунізацію проводили рекомбінантним GST-таг злитим N-термінальним фрагментом Rictor, синтезованим в E. coli. Результати. Отримано специфічні моноклональні антитіла проти Rictor. Висновки. Отримані моноклональні антитіла специфічно розпізнають рекомбінантний та ендогенний Rictor в Вестерн-блот аналізі, імунопреципітації та імунофлюорисценції клітин ссавців, та можуть бути використані як необхідний інстумент досліджень при вивченні як індивідуальної фізіологічної ролі Rictor в клітині, так і в складі комплекса mTORC2 в цілому. Цель. Rictor является уникальным компонентом белкового комплекса mTORC2, который активируется ростовыми факторами и регулирует рост клеток, выживание и миграцию. В данной статье описано процедуру получения моноклональных антител, специфичных к Rictor, а также особенности их использования в различных иммунологических методах анализа. Методы. Для получения моноклональных антител была использована гибридомная технология. Иммунизацию проводили рекомбинантным GST-таг слитым N-терминальным фрагментом Rictor, синтезированном в E. coli. Результаты. Получены специфические моноклональные антитела против Rictor. Выводы. Полученные моноклональные антитела специфично распознают рекомбинантный и эндогенный Rictor в Вестерн-блот анализе, иммунопреципитации и иммунофлюорисценции клеток млекопитающих, и могут быть использованы как необходимый инстумент исследований при изучении как индивидуальной физиологической роли Rictor а в клетке, так и в составе комплекса mTORC2 в целом. 2015 Article Development of monoclonal antibody against protein Rictor, a component of the mTORC2 complex / O.M. Malanchuk // Вiopolymers and Cell. — 2015. — Т. 31, № 5. — С. 379-386. — Бібліогр.: 28 назв. — англ. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.0008FA http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/152616 577.112.7 + 616-097 + 576.31 en Вiopolymers and Cell Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
language English
topic Molecular and Cell Biotechnologies
Molecular and Cell Biotechnologies
spellingShingle Molecular and Cell Biotechnologies
Molecular and Cell Biotechnologies
Malanchuk, O.M.
Development of monoclonal antibody against protein Rictor, a component of the mTORC2 complex
Вiopolymers and Cell
description Aim. Rictor is a component of the protein complex mTORC2 that is activated by growth factors and regulates cell growth, survival and migration. Here, we describe the development of the Rictor specific monoclonal antibody and characterize its suitability for various immunological assays. Methods. Hybridoma technology has been used for the monoclonal antibody production. Immunization was carried out with the recombinant N-terminal fragment of human Rictor expressed in E. coli as a GST-tagged fusion protein. Results. Specific monoclonal antibody (mAb) against Rictor has been developed. Conclusions. The generated mAb specifically recognizes the recombinant and endogenous Rictor and is suitable for Western blotting, immunoprecipitation, and immunofluorescence assays of mammalian cells. This mAb will be a useful tool for the investigations of a physiological role of Rictor as well as the function of the mTORC2 in general.
format Article
author Malanchuk, O.M.
author_facet Malanchuk, O.M.
author_sort Malanchuk, O.M.
title Development of monoclonal antibody against protein Rictor, a component of the mTORC2 complex
title_short Development of monoclonal antibody against protein Rictor, a component of the mTORC2 complex
title_full Development of monoclonal antibody against protein Rictor, a component of the mTORC2 complex
title_fullStr Development of monoclonal antibody against protein Rictor, a component of the mTORC2 complex
title_full_unstemmed Development of monoclonal antibody against protein Rictor, a component of the mTORC2 complex
title_sort development of monoclonal antibody against protein rictor, a component of the mtorc2 complex
publisher Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
publishDate 2015
topic_facet Molecular and Cell Biotechnologies
url http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/152616
citation_txt Development of monoclonal antibody against protein Rictor, a component of the mTORC2 complex / O.M. Malanchuk // Вiopolymers and Cell. — 2015. — Т. 31, № 5. — С. 379-386. — Бібліогр.: 28 назв. — англ.
series Вiopolymers and Cell
work_keys_str_mv AT malanchukom developmentofmonoclonalantibodyagainstproteinrictoracomponentofthemtorc2complex
first_indexed 2023-05-20T17:39:18Z
last_indexed 2023-05-20T17:39:18Z
_version_ 1796153786037698560