Бактериальная экспрессия полноразмерных и усеченных форм цитокина ЕМАР-2 и цитокинподобного домена тирозил-тРНК синтетазы млекопитающих
В вектор для бактериальной экспрессии рЕТ32а клонированы и секвенированы вставки ДНК, кодирующие полноразмерные цитокин ЕМАР-2 и цитокинподобный домен тирозил-тРНК синтетазы (TyrRS) млекопитающих, а также их делетированные с СООН- и NH₂-концов формы. Получена бактериальная экспрессия всех клонов, и...
Збережено в:
Дата: | 2000 |
---|---|
Автори: | , , , , |
Формат: | Стаття |
Мова: | Russian |
Опубліковано: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
2000
|
Назва видання: | Биополимеры и клетка |
Теми: | |
Онлайн доступ: | http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/152620 |
Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
Цитувати: | Бактериальная экспрессия полноразмерных и усеченных форм цитокина ЕМАР-2 и цитокинподобного домена тирозил-тРНК синтетазы млекопитающих / А.Л. Дубровский, Дж. Браун, А.И. Корнелюк, Дж.К. Мюррей, Г.X. Мацука // Биополимеры и клетка. — 2000. — Т. 16, № 3. — С. 229-235. — Бібліогр.: 12 назв. — рос. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraineid |
irk-123456789-152620 |
---|---|
record_format |
dspace |
spelling |
irk-123456789-1526202019-06-13T01:26:08Z Бактериальная экспрессия полноразмерных и усеченных форм цитокина ЕМАР-2 и цитокинподобного домена тирозил-тРНК синтетазы млекопитающих Дубровский, А.Л. Браун, Дж. Карнелюк, А.И. Мюррей, Дж.К. Мацука, Г.Х. Структура и функции биополимеров В вектор для бактериальной экспрессии рЕТ32а клонированы и секвенированы вставки ДНК, кодирующие полноразмерные цитокин ЕМАР-2 и цитокинподобный домен тирозил-тРНК синтетазы (TyrRS) млекопитающих, а также их делетированные с СООН- и NH₂-концов формы. Получена бактериальная экспрессия всех клонов, и для полноразмерных форм осуществлены аффинная очистка до гомогенного состояния, протеолитическое удаление константной части слитых рекомбинантных белков, а также тестирование их биологической активности в реакции индукции тканевого фактора. Полноразмерная форма цитокинподобного домена TyrRS не взаимодействует с поликлональными антителами к ЕМАР-2 в вестерн-блот-анализе. Делается вывод о пригодности полученной панели рекомбинантных белков для сравнительного изучения локализации функционально важных участков белков У вектор для бактеріальної експресії рЕТ32а клоновано і секвеновано вставки ДНК, що кодують повнорозмірні цитокін ЕМАР-2 і цитокінподібний домен тирозил-тРНК синтетазы (TyrRS) ссавців, а також їхні делетовані з СООН- і NH₂-кінців форми. Отримано бактеріальну експресію всіх клонів, та для повнорозмірних форм здійснено афінне очищення до гомогенного стану, протеолітичне видалення константної частини злитих рекомбінантних білків, а також тестування їхньої біологічної активності у реакції індукції тканинного фактора. Повнорозмірна форма цитокінподібного домену TyrRS не взаємодіє з поліклональними антитілами до ЕМАР-2 у вестерн-блот-аналізі. Зроблено висновок щодо придатності одержаної панелі рекомбінантньїх білків для порівняльного вивчення локалізації функціонально важливих ділянок білків DNA fragments encoded full-length cytokine EMAP-2 and cytokine-like domain of mammalian TyrRS and truncated from COOH- and NH₂-termini forms were cloned in vector for bacterial expression pET32a. For all clones bacterial overexpression were obtained and full-length forms were purified to homogeneity state by affin chromatography and affinity tag was remove by protease cleavage. Induction of tissue factor for full-length forms was tested. Full-length form of cytokine-like domain of mammalian TyrRS did not interact with polyclonal antibody against EMAP-2 in western-blot analysis. It was concluded that this set of recombinant proteins may be usefull for functional study of these cytokine proteins. 2000 Article Бактериальная экспрессия полноразмерных и усеченных форм цитокина ЕМАР-2 и цитокинподобного домена тирозил-тРНК синтетазы млекопитающих / А.Л. Дубровский, Дж. Браун, А.И. Корнелюк, Дж.К. Мюррей, Г.X. Мацука // Биополимеры и клетка. — 2000. — Т. 16, № 3. — С. 229-235. — Бібліогр.: 12 назв. — рос. 0233-7657 DOI:http://dx.doi.org/10.7124/bc.00056B http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/152620 577.152.611 ru Биополимеры и клетка Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
collection |
DSpace DC |
language |
Russian |
topic |
Структура и функции биополимеров Структура и функции биополимеров |
spellingShingle |
Структура и функции биополимеров Структура и функции биополимеров Дубровский, А.Л. Браун, Дж. Карнелюк, А.И. Мюррей, Дж.К. Мацука, Г.Х. Бактериальная экспрессия полноразмерных и усеченных форм цитокина ЕМАР-2 и цитокинподобного домена тирозил-тРНК синтетазы млекопитающих Биополимеры и клетка |
description |
В вектор для бактериальной экспрессии рЕТ32а клонированы и секвенированы вставки ДНК, кодирующие полноразмерные цитокин ЕМАР-2 и цитокинподобный домен тирозил-тРНК синтетазы (TyrRS) млекопитающих, а также их делетированные с СООН- и NH₂-концов формы. Получена бактериальная экспрессия всех клонов, и для полноразмерных форм осуществлены аффинная очистка до гомогенного состояния, протеолитическое удаление константной части слитых рекомбинантных белков, а также тестирование их биологической активности в реакции индукции тканевого фактора. Полноразмерная форма цитокинподобного домена TyrRS не взаимодействует с поликлональными антителами к ЕМАР-2 в вестерн-блот-анализе. Делается вывод о пригодности полученной панели рекомбинантных белков для сравнительного изучения локализации функционально важных участков белков |
format |
Article |
author |
Дубровский, А.Л. Браун, Дж. Карнелюк, А.И. Мюррей, Дж.К. Мацука, Г.Х. |
author_facet |
Дубровский, А.Л. Браун, Дж. Карнелюк, А.И. Мюррей, Дж.К. Мацука, Г.Х. |
author_sort |
Дубровский, А.Л. |
title |
Бактериальная экспрессия полноразмерных и усеченных форм цитокина ЕМАР-2 и цитокинподобного домена тирозил-тРНК синтетазы млекопитающих |
title_short |
Бактериальная экспрессия полноразмерных и усеченных форм цитокина ЕМАР-2 и цитокинподобного домена тирозил-тРНК синтетазы млекопитающих |
title_full |
Бактериальная экспрессия полноразмерных и усеченных форм цитокина ЕМАР-2 и цитокинподобного домена тирозил-тРНК синтетазы млекопитающих |
title_fullStr |
Бактериальная экспрессия полноразмерных и усеченных форм цитокина ЕМАР-2 и цитокинподобного домена тирозил-тРНК синтетазы млекопитающих |
title_full_unstemmed |
Бактериальная экспрессия полноразмерных и усеченных форм цитокина ЕМАР-2 и цитокинподобного домена тирозил-тРНК синтетазы млекопитающих |
title_sort |
бактериальная экспрессия полноразмерных и усеченных форм цитокина емар-2 и цитокинподобного домена тирозил-трнк синтетазы млекопитающих |
publisher |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
publishDate |
2000 |
topic_facet |
Структура и функции биополимеров |
url |
http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/152620 |
citation_txt |
Бактериальная экспрессия полноразмерных и усеченных форм цитокина ЕМАР-2 и цитокинподобного домена тирозил-тРНК синтетазы млекопитающих
/ А.Л. Дубровский, Дж. Браун, А.И. Корнелюк, Дж.К. Мюррей, Г.X. Мацука // Биополимеры и клетка. — 2000. — Т. 16, № 3. — С. 229-235. — Бібліогр.: 12 назв. — рос. |
series |
Биополимеры и клетка |
work_keys_str_mv |
AT dubrovskijal bakterialʹnaâékspressiâpolnorazmernyhiusečennyhformcitokinaemar2icitokinpodobnogodomenatiroziltrnksintetazymlekopitaûŝih AT braundž bakterialʹnaâékspressiâpolnorazmernyhiusečennyhformcitokinaemar2icitokinpodobnogodomenatiroziltrnksintetazymlekopitaûŝih AT karnelûkai bakterialʹnaâékspressiâpolnorazmernyhiusečennyhformcitokinaemar2icitokinpodobnogodomenatiroziltrnksintetazymlekopitaûŝih AT mûrrejdžk bakterialʹnaâékspressiâpolnorazmernyhiusečennyhformcitokinaemar2icitokinpodobnogodomenatiroziltrnksintetazymlekopitaûŝih AT macukagh bakterialʹnaâékspressiâpolnorazmernyhiusečennyhformcitokinaemar2icitokinpodobnogodomenatiroziltrnksintetazymlekopitaûŝih |
first_indexed |
2023-05-20T17:39:18Z |
last_indexed |
2023-05-20T17:39:18Z |
_version_ |
1796153777523261440 |