Препаративное получение рибоолигонуклеотидов заданного строения путем транскрипции дезоксирибоолигонуклеотидов

• Дата: 1990
• Автори: Денисова, Л.Я., Загребельный, С.Н., Пустошилова, Н.М., Веньяминова, А.Г., Горн, В.В., Зарытова, В.Ф., Репкова, М. Н.
• Формат: Стаття
• Мова: Russian
• Опубліковано: Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 1990
• Назва видання: Биополимеры и клетка
• Теми: Структура и функции биополимеров
• Онлайн доступ: http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/153437
• Назва журналу: Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
• Цитувати: Препаративное получение рибоолигонуклеотидов заданного строения путем транскрипции дезоксирибоолигонуклеотидов / Л.Я. Денисова, С.Н. Загребельный, Н.М. Пустошилова, А.Г. Веньяминова, В.В. Горн, В.Ф. Зарытова, М. Н. Репкова // Биополимеры и клетка. — 1990. — Т. 6, № 3. — С. 50-55. — Бібліогр.: 11 назв. — рос.

Транскрипция дезоксирибоолигонуклеотидных матриц в системе РНК-полимеразы Escherichia coli является одним из перспективных методов получения рибоолигонуклеотидов заданного строения. Для получения препаративных количеств AGGGGAUUGAAAAUC-фрагмента антикодоновой петли фенилаланиновой тРНК и AUGAGGAAUACCCAUG-фрагмента РНК фага MS2 проведена транскрипция комплементарных дезоксирибоолигонуклеотидов. Уровень включения нуклеотидов в продукт транскрипции при этом составил не менее 70 % нуклеотидного материала матрицы. Разработана процедура извлечения транскрипта из реакционной смеси, включающая хроматографию на гепарин-агарозе, хроматографию на гидрофобном сорбенте Lichroprep RP18 и электрофорез в 20 %-ном полиакриламидном геле (ПААГ) с последующей электроэлюцией целевого продукта из геля. При использовании в РНК-полимеразной реакции 5 о. е. A₂₆₀ дезоксирибоматрицы конечный выход точной РНК-копии составил 1,0—1,5 о. е. A₂₆₀.