Полимеразная цепная реакция (ПЦР) для диагностики вирусной инфекции: цитомегаловирус человека

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) для диагностики вирусной инфекции: цитомегаловирус человека

Описана процедура быстрого, чувствительного а точного определения цитомегаловируса (ЦМВ) в тканях и биологических жидкостях человека с помощью термофильной ДНК-по ли ме разы из Thermus thermophilus. Процедура состоит из двух последовательных ПЦР. Первая включает 40 циклов (денатурация ДНК, отжиг пра...

Повний опис

Збережено в:
Бібліографічні деталі
Дата:1991
Автори: Виноградская, Г.Р., Горышин, И.Ю., Новикова, Л.Н., Плуталов, О.В., Башмакова, М.А., Берлин, Ю.А., Цинзерлинг, В.А., Шварц, Е.И., Ланцов, В.А.
Формат: Стаття
Мова:Russian
Опубліковано: Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 1991
Назва видання:Биополимеры и клетка
Онлайн доступ:http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/153530
Теги: Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:Полимеразная цепная реакция (ПЦР) для диагностики вирусной инфекции: цитомегаловирус человека / Г.Р. Виноградская, И.Ю. Горышин, Л.Н. Новикова, О.В. Плуталов, М.А. Башмакова, Ю.А. Берлин, В.А. Цинзерлинг, Е.И. Шварц, В.А. Ланцов // Биополимеры и клетка. — 1991. — Т. 7, № 3. — С. 31-35. — Бібліогр.: 13 назв. — рос.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id irk-123456789-153530
record_format dspace
spelling irk-123456789-1535302019-06-15T01:24:53Z Полимеразная цепная реакция (ПЦР) для диагностики вирусной инфекции: цитомегаловирус человека Виноградская, Г.Р. Горышин, И.Ю. Новикова, Л.Н. Плуталов, О.В. Башмакова, М.А. Берлин, Ю.А. Цинзерлинг, В.А. Шварц, Е.И. Ланцов, В.А. Описана процедура быстрого, чувствительного а точного определения цитомегаловируса (ЦМВ) в тканях и биологических жидкостях человека с помощью термофильной ДНК-по ли ме разы из Thermus thermophilus. Процедура состоит из двух последовательных ПЦР. Первая включает 40 циклов (денатурация ДНК, отжиг праймеров и ДНК-полимеризация), выполняемых с двумя праймерами по 20 оснований, консервативная последовательность которых взята из гена MIE (major immediate early) ЦВМ. Вторая реакция включает от 20 до 50 циклов, аналогичных первым, но на основе 20-членных праймеров, фланкирующих внутреннюю часть фрагмента ДНК, намноженного ранее. Конечный фрагмент обнаруживается по окрашиванию бромистым этидием после электрофореза в полиакриламидном геле. Верификация искомой полосы включает ее рестрикционный анализ. С помощью плазмиды рСМ5018, несущей ген MIE вируса, показано, что предлагаемая процедура может выявлять столь малые количества ДНК, как несколько (от 1 до 5) плазмидных молекул. Описана процедура швидкого, чутливого та точного визначення цитомегаловірусу (ЦМВ) у тканинах і біологічних рідинах людини за допомогою термофільної ДНК-полімерази Thermus thermophilus. Процедура складається з двох послідовних ПЦР. У першій реакції проходить 40 циклів (денатурація ДНК, ренатурація праймерів і ДНК-полімерізація), що виконуються з двома праймерами по 20 основ, консервативна послідовність яких узята із гену MIE (major immediate early) ЦМВ. Друга реакція включає від 20 до 50 циклів, що відповідають першим, але на основі 20-членних праймерів, які ампліфікують внутрішню частину фрагменту ДНК (останній намножений раніше). Кінцевий фрагмент виявляється при фарбуванні бромистим етидієм після електрофорезу в поліакриламідному гелі. Веріфікація потрібної смуги провадиться і на·основі рестрикційного аналізу. За допомогою плазміди рСМ5018, що несе ген MIE вірусу, показано, що пропонована процедура може виявляти такі малі кількості ДНК, як декілька (від 1 до 5) плазмідних молекул. A rapid, sensitive and precise procedure of detecting cytomegalovirus (CMV) DNA in human tissue and biological liquid by means of the thermostable DNA-polymerase from Thermus thermophilus is described. The procedure consists of two consecutive PCRs. The-first one includes 40 cycles of denaturation, primer annealing and chain extension with two 20-base primers chosen from the conserved sequence ot MIE (major immediate early) gene of CMV. The second reaction includes from 20 up to 50 cycles consisting of the same steps but with 20-base primers chosen to amplify the internal part of the fragment amplified during the first reaction. The final fragment is detected by the ethidium bromide staining after polyacrylamide gel electrophoresis. Verification of the band includes restriction enzyme analysis. Use of pCM5018 plasmid bearing the CMV MIE gene shows that the proposed procedure can detect as little as several (from 1 to 5) molecules of DNA. 1991 Article Полимеразная цепная реакция (ПЦР) для диагностики вирусной инфекции: цитомегаловирус человека / Г.Р. Виноградская, И.Ю. Горышин, Л.Н. Новикова, О.В. Плуталов, М.А. Башмакова, Ю.А. Берлин, В.А. Цинзерлинг, Е.И. Шварц, В.А. Ланцов // Биополимеры и клетка. — 1991. — Т. 7, № 3. — С. 31-35. — Бібліогр.: 13 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.0002CB http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/153530 577.21 ru Биополимеры и клетка Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
language Russian
description Описана процедура быстрого, чувствительного а точного определения цитомегаловируса (ЦМВ) в тканях и биологических жидкостях человека с помощью термофильной ДНК-по ли ме разы из Thermus thermophilus. Процедура состоит из двух последовательных ПЦР. Первая включает 40 циклов (денатурация ДНК, отжиг праймеров и ДНК-полимеризация), выполняемых с двумя праймерами по 20 оснований, консервативная последовательность которых взята из гена MIE (major immediate early) ЦВМ. Вторая реакция включает от 20 до 50 циклов, аналогичных первым, но на основе 20-членных праймеров, фланкирующих внутреннюю часть фрагмента ДНК, намноженного ранее. Конечный фрагмент обнаруживается по окрашиванию бромистым этидием после электрофореза в полиакриламидном геле. Верификация искомой полосы включает ее рестрикционный анализ. С помощью плазмиды рСМ5018, несущей ген MIE вируса, показано, что предлагаемая процедура может выявлять столь малые количества ДНК, как несколько (от 1 до 5) плазмидных молекул.
format Article
author Виноградская, Г.Р.
Горышин, И.Ю.
Новикова, Л.Н.
Плуталов, О.В.
Башмакова, М.А.
Берлин, Ю.А.
Цинзерлинг, В.А.
Шварц, Е.И.
Ланцов, В.А.
spellingShingle Виноградская, Г.Р.
Горышин, И.Ю.
Новикова, Л.Н.
Плуталов, О.В.
Башмакова, М.А.
Берлин, Ю.А.
Цинзерлинг, В.А.
Шварц, Е.И.
Ланцов, В.А.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) для диагностики вирусной инфекции: цитомегаловирус человека
Биополимеры и клетка
author_facet Виноградская, Г.Р.
Горышин, И.Ю.
Новикова, Л.Н.
Плуталов, О.В.
Башмакова, М.А.
Берлин, Ю.А.
Цинзерлинг, В.А.
Шварц, Е.И.
Ланцов, В.А.
author_sort Виноградская, Г.Р.
title Полимеразная цепная реакция (ПЦР) для диагностики вирусной инфекции: цитомегаловирус человека
title_short Полимеразная цепная реакция (ПЦР) для диагностики вирусной инфекции: цитомегаловирус человека
title_full Полимеразная цепная реакция (ПЦР) для диагностики вирусной инфекции: цитомегаловирус человека
title_fullStr Полимеразная цепная реакция (ПЦР) для диагностики вирусной инфекции: цитомегаловирус человека
title_full_unstemmed Полимеразная цепная реакция (ПЦР) для диагностики вирусной инфекции: цитомегаловирус человека
title_sort полимеразная цепная реакция (пцр) для диагностики вирусной инфекции: цитомегаловирус человека
publisher Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
publishDate 1991
url http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/153530
citation_txt Полимеразная цепная реакция (ПЦР) для диагностики вирусной инфекции: цитомегаловирус человека / Г.Р. Виноградская, И.Ю. Горышин, Л.Н. Новикова, О.В. Плуталов, М.А. Башмакова, Ю.А. Берлин, В.А. Цинзерлинг, Е.И. Шварц, В.А. Ланцов // Биополимеры и клетка. — 1991. — Т. 7, № 3. — С. 31-35. — Бібліогр.: 13 назв. — рос.
series Биополимеры и клетка
work_keys_str_mv AT vinogradskaâgr polimeraznaâcepnaâreakciâpcrdlâdiagnostikivirusnojinfekciicitomegalovirusčeloveka
AT goryšiniû polimeraznaâcepnaâreakciâpcrdlâdiagnostikivirusnojinfekciicitomegalovirusčeloveka
AT novikovaln polimeraznaâcepnaâreakciâpcrdlâdiagnostikivirusnojinfekciicitomegalovirusčeloveka
AT plutalovov polimeraznaâcepnaâreakciâpcrdlâdiagnostikivirusnojinfekciicitomegalovirusčeloveka
AT bašmakovama polimeraznaâcepnaâreakciâpcrdlâdiagnostikivirusnojinfekciicitomegalovirusčeloveka
AT berlinûa polimeraznaâcepnaâreakciâpcrdlâdiagnostikivirusnojinfekciicitomegalovirusčeloveka
AT cinzerlingva polimeraznaâcepnaâreakciâpcrdlâdiagnostikivirusnojinfekciicitomegalovirusčeloveka
AT švarcei polimeraznaâcepnaâreakciâpcrdlâdiagnostikivirusnojinfekciicitomegalovirusčeloveka
AT lancovva polimeraznaâcepnaâreakciâpcrdlâdiagnostikivirusnojinfekciicitomegalovirusčeloveka
first_indexed 2023-05-20T17:42:05Z
last_indexed 2023-05-20T17:42:05Z
_version_ 1796153891930243072

Схожі ресурси