Невирусная доставка гена ароА1 человека в клетки млекопитающих in vitro и in vivo

• Дата: 2004
• Автори: Топорова, Е.К., Новикова, С.Н., Лихачева, Л.И., Сухорада, Е.М., Рубан, Т.А., Козел, Ю.Н., Иродов, Д.М.
• Формат: Стаття
• Мова: Russian
• Опубліковано: Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 2004
• Назва видання: Біополімери і клітина
• Теми: Ювілеї
• Онлайн доступ: http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/154964
• Назва журналу: Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
• Цитувати: Невирусная доставка гена ароА1 человека в клетки млекопитающих in vitro и in vivo / Е.К. Топорова, С.Н. Новикова, Л.И. Лихачева, Е.М. Сухорада, Т.А. Рубан, Ю.Н. Козел, Д.М. Иродов, В.А. Кордюм // Біополімери і клітина. — 2004. — Т. 20, № 1-2. — С. 25-32. — Бібліогр.: 28 назв. — рос.

Исследованы подходы к генной терапии атеросклероза путем невирусного переноса гена аполипопротеина A1 (ароА1) – основного белкового компонента антиатерогенных липопротеинов – в клетки печени. Сконструирован плазмидный вектор для экспрессии полноразмерного гена ароА1 человека в клетках млекопитающих. Конструкция содержит последовательности бактериальной плазмиды, позволяющие ей реплицироваться в клетках Escherihia coli, и кассету для экспрессии гена ароА1, фланкированную инвертированными терминальными повторами аденоассоциированного вируса человека. Для доставки векторной ДНК использован синтетический полимер полиэтиленимин (ПЭИ, 25 кДа). Показано>, что в результате ПЭИ-опосредованной трансфекции клеток в культуре аналогичным вектором, содержащим репортерный ген зеленого флуоресцирующего белка, 50–70 % клеток экспрессируют введенный ген. На экспериментальных животных, которым вводили конструкцию с геном ароА1 человека прямой инъекцией в печень, продемонст­рировано, что белок АроАІ человека тестируется в плазме крови в течение 15 сут после доставки гена. ПЦР-анализ суммарной ДНК печени подопытных животных показал наличие расчетного фрагмента гена apoA1 человека у крыс через 15 дней после введения гена