Надмолекулярная организация и активность киназы легких цепей миозина гладких мышц

• Main Authors: Филенко, А.М., Собешек, А., Бабийчук, Э.Б., Омельянюк, В.С., Данилова, В.М., Яновская, Н.Б., Бабенко, А.Ю.
• Format: Article
• Language: Russian
• Published: Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 1995
• Series: Биополимеры и клетка
• Online Access: http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/155670

Киназа легких цепей миозина (КЛЦМ) играет ключевую роль в механизмах регу­ляции сокращения гладких мышц. Полученные нами с помощью лазерной корреля­ционной спектроскопии данные позволяют утверждать, что неактивированная КЛЦМ из гладких мышц в растворе в условиях близких к физиологическим, существует в виде смеси олигомерных и димерных частиц с гидродинамическими диаметрами – 150 и 20 нм соответственно. Эти частицы очевидно находятся в динамическом равновесии. Мы не обнаружили заметных изменений в распределении различных форм киназы в растворе после ее активации при избытке как киназы, так и кальмодулина (СаМ). При значительном избытке киназы по отношению к СаМ ее активность через 5–10 мин уменьшается в несколько раз. По-видимому, наблюдаемое ингибирование ки­назы перед добавлением субстрата связано с медленными конформационными изме­нениями активированных молекул киназы, о чем свидетельствуют результаты про­веденных нами флюоресцентных исследований. Подобные перестройки отмечаются и при эквимолярном соотношении киназы и СаМ, однако в этом случае они характеризуются меньшей глубиной и незначительным понижением активности КЛЦМ. Мед­ленные конформационные перестройки в надмолекулярных структурах активированной киназы. скорее всего имеют коллективный характер и связаны с усилением взаимного влияния между молекулами киназы. приводящего к ослаблению связывания Са²⁺-СаМ. В качестве рабочей гипотезы можно предположить, что в надмолекулярных комплек­сах активированной киназы устанавливаются взаимодействия псевдосубстратного участка одной молекулы t активным центром соседней с возникновением стерических препятствий для связывания СаМ.