Конструювання штамів — надпродуцентів формальдегіддегідрогенази метилотрофних дріжджів Hansenula polymorpha

Конструювання штамів — надпродуцентів формальдегіддегідрогенази метилотрофних дріжджів Hansenula polymorpha

Для генно-інженерного конструювання надпродуцента глутатіонзалежної формальдегіддегідро­генази (ФдДГ) обрано термотолерантні метилотрофні дріжджі Н. polymorpha NCYC 495 (leul-l). Ген FLD1 з власним промотором введено у плазміду інтегративного типу pYTl, яка містила ген LEU2 Saccharomyces cerevisiae,...

Повний опис

Збережено в:
Бібліографічні деталі
Дата:2005
Автори: Демків, О.М., Парижак, С.Я., Красовська, О.С., Стасик, О.В., Гайда, Г.З., Сибірний, А.А., Гончар, М.В.
Формат: Стаття
Мова:Ukrainian
Опубліковано: Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 2005
Назва видання:Біополімери і клітина
Теми:
Молекулярна та клітинна біотехнології
Онлайн доступ:http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/155876
Теги: Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:Конструювання штамів — надпродуцентів формальдегіддегідрогенази метилотрофних дріжджів Hansenula polymorpha / О.М. Демків, С.Я. Парижак, О.С. Красовська, О.В. Стасик, Г.З. Гайда, А.А. Сибірний, М.В. Гончар // Біополімери і клітина. — 2005. — Т. 21, № 6. — С. 525-530. — Бібліогр.: 14 назв. — укр.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id irk-123456789-155876
record_format dspace
spelling irk-123456789-1558762019-06-18T01:28:28Z Конструювання штамів — надпродуцентів формальдегіддегідрогенази метилотрофних дріжджів Hansenula polymorpha Демків, О.М. Парижак, С.Я. Красовська, О.С. Стасик, О.В. Гайда, Г.З. Сибірний, А.А. Гончар, М.В. Молекулярна та клітинна біотехнології Для генно-інженерного конструювання надпродуцента глутатіонзалежної формальдегіддегідро­генази (ФдДГ) обрано термотолерантні метилотрофні дріжджі Н. polymorpha NCYC 495 (leul-l). Ген FLD1 з власним промотором введено у плазміду інтегративного типу pYTl, яка містила ген LEU2 Saccharomyces cerevisiae, з подальшим включенням цього гена у геном штаму-реципіента leul-I. Здійснено селекцію інтегративних трансформантів за ознаками прототрофності по лейцину та резистентності до підвищених концентрацій формальдегіду (до 15 мМ) у ростовому середовищі. Визначено оптимальні умови культивування штамів для досягнення максимального рівня синтезу ФдДГ. Відібрано кращий трансформант як перспективний продуцент ФдДГ з активністю до 4 мкмоль·хв⁻¹· мг⁻¹ білка у безклітинному екстракті. Для генно-инженерного конструирования сверхпродуцента глутатионзависимой формальдегиддегидрогеназы (ФдДГ) выбра­ны термотолерантные метилотрофные дрожжи Н. polymor­pha NCYC 495 (leul-1). Ген FLD1 с собственным промотором был введен в плазмиду интегративного типа pYTl, содержа­щую ген LEU2 Saccharomyces cerevisiae, с последуюищм вклю­чением целевого гена в геном штамма-реципиента leul-1. Проведена селекция интегративных трансформантов по при­знакам прототрофности по лейцину и резистентости к повы­шенным концентрациям формальдегида (до 15 мМ) в росто­вой среде. Определены оптимальные условия культивирования штаммов для достижения максимального уровня синтеза ФдДГ. Выбран лучший трансформант как перспективный продуцент ФдДГ (с активностью до 4 мкмоль·мин⁻¹ ·мг⁻¹ белка в бесклеточном экстракте). The thermotolerant methylotrophic yeast H. polymorpha NCYC 495 (leu1-1) was chosen for genetic construction of the strain, over-producing glutathione-dependent formaldehyde dehydrogenase (FdDH). FLD1 gene with its own promoter was inserted into an integrative plasmid pYT1 containing LEU2 gene of Saccharomyces cerevisiae (as a selective marker) and the constructed vector was used for multi-copy integration of the target gene into genome of leu1-1 recipient cells. Selection of the strains was carried out by leucine prototrophy, as well as by resistance to elevated concentrations of formaldehyde in the medium (up to 15 mM). The optimal cultivation conditions for the selected strains were established which resulted in maximal synthesis of the target enzyme. The best recombinant strain was chosen as a perspective over-producer of FdDH (with the protein activity of 4 mmoles × min⁻¹ ×mg⁻¹ in cell-free extract). 2005 Article Конструювання штамів — надпродуцентів формальдегіддегідрогенази метилотрофних дріжджів Hansenula polymorpha / О.М. Демків, С.Я. Парижак, О.С. Красовська, О.В. Стасик, Г.З. Гайда, А.А. Сибірний, М.В. Гончар // Біополімери і клітина. — 2005. — Т. 21, № 6. — С. 525-530. — Бібліогр.: 14 назв. — укр. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.000710 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/155876 577.21:577.152.1 + 661.727.1 uk Біополімери і клітина Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
language Ukrainian
topic Молекулярна та клітинна біотехнології
Молекулярна та клітинна біотехнології
spellingShingle Молекулярна та клітинна біотехнології
Молекулярна та клітинна біотехнології
Демків, О.М.
Парижак, С.Я.
Красовська, О.С.
Стасик, О.В.
Гайда, Г.З.
Сибірний, А.А.
Гончар, М.В.
Конструювання штамів — надпродуцентів формальдегіддегідрогенази метилотрофних дріжджів Hansenula polymorpha
Біополімери і клітина
description Для генно-інженерного конструювання надпродуцента глутатіонзалежної формальдегіддегідро­генази (ФдДГ) обрано термотолерантні метилотрофні дріжджі Н. polymorpha NCYC 495 (leul-l). Ген FLD1 з власним промотором введено у плазміду інтегративного типу pYTl, яка містила ген LEU2 Saccharomyces cerevisiae, з подальшим включенням цього гена у геном штаму-реципіента leul-I. Здійснено селекцію інтегративних трансформантів за ознаками прототрофності по лейцину та резистентності до підвищених концентрацій формальдегіду (до 15 мМ) у ростовому середовищі. Визначено оптимальні умови культивування штамів для досягнення максимального рівня синтезу ФдДГ. Відібрано кращий трансформант як перспективний продуцент ФдДГ з активністю до 4 мкмоль·хв⁻¹· мг⁻¹ білка у безклітинному екстракті.
format Article
author Демків, О.М.
Парижак, С.Я.
Красовська, О.С.
Стасик, О.В.
Гайда, Г.З.
Сибірний, А.А.
Гончар, М.В.
author_facet Демків, О.М.
Парижак, С.Я.
Красовська, О.С.
Стасик, О.В.
Гайда, Г.З.
Сибірний, А.А.
Гончар, М.В.
author_sort Демків, О.М.
title Конструювання штамів — надпродуцентів формальдегіддегідрогенази метилотрофних дріжджів Hansenula polymorpha
title_short Конструювання штамів — надпродуцентів формальдегіддегідрогенази метилотрофних дріжджів Hansenula polymorpha
title_full Конструювання штамів — надпродуцентів формальдегіддегідрогенази метилотрофних дріжджів Hansenula polymorpha
title_fullStr Конструювання штамів — надпродуцентів формальдегіддегідрогенази метилотрофних дріжджів Hansenula polymorpha
title_full_unstemmed Конструювання штамів — надпродуцентів формальдегіддегідрогенази метилотрофних дріжджів Hansenula polymorpha
title_sort конструювання штамів — надпродуцентів формальдегіддегідрогенази метилотрофних дріжджів hansenula polymorpha
publisher Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
publishDate 2005
topic_facet Молекулярна та клітинна біотехнології
url http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/155876
citation_txt Конструювання штамів — надпродуцентів формальдегіддегідрогенази метилотрофних дріжджів Hansenula polymorpha / О.М. Демків, С.Я. Парижак, О.С. Красовська, О.В. Стасик, Г.З. Гайда, А.А. Сибірний, М.В. Гончар // Біополімери і клітина. — 2005. — Т. 21, № 6. — С. 525-530. — Бібліогр.: 14 назв. — укр.
series Біополімери і клітина
work_keys_str_mv AT demkívom konstruûvannâštamívnadproducentívformalʹdegíddegídrogenazimetilotrofnihdríždžívhansenulapolymorpha
AT parižaksâ konstruûvannâštamívnadproducentívformalʹdegíddegídrogenazimetilotrofnihdríždžívhansenulapolymorpha
AT krasovsʹkaos konstruûvannâštamívnadproducentívformalʹdegíddegídrogenazimetilotrofnihdríždžívhansenulapolymorpha
AT stasikov konstruûvannâštamívnadproducentívformalʹdegíddegídrogenazimetilotrofnihdríždžívhansenulapolymorpha
AT gajdagz konstruûvannâštamívnadproducentívformalʹdegíddegídrogenazimetilotrofnihdríždžívhansenulapolymorpha
AT sibírnijaa konstruûvannâštamívnadproducentívformalʹdegíddegídrogenazimetilotrofnihdríždžívhansenulapolymorpha
AT gončarmv konstruûvannâštamívnadproducentívformalʹdegíddegídrogenazimetilotrofnihdríždžívhansenulapolymorpha
first_indexed 2023-05-20T17:48:18Z
last_indexed 2023-05-20T17:48:18Z
_version_ 1796154129838505984

Схожі ресурси