Биосинтез основного фактора роста фибробластов человека в клетках Escherichia coli и его очистка

• Дата: 2003
• Автори: Славченко, И.Ю., Борейко, Е.В., Гавриш, Т.Г., Костюченко, И.П., Кордюм, В.А.
• Формат: Стаття
• Мова: Russian
• Опубліковано: Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 2003
• Назва видання: Біополімери і клітина
• Теми: Молекулярна та клітинна біотехнології
• Онлайн доступ: http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/156425
• Назва журналу: Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
• Цитувати: Биосинтез основного фактора роста фибробластов человека в клетках Escherichia coli и его очистка / И.Ю. Славченко, Е.В. Борейко, Т.Г. Гавриш, И.П. Костюченко, В.А. Кордюм // Вiopolymers and Cell. — 2003. — Т. 19, № 2. — С. 179-184. — Бібліогр.: 21 назв. — рос.

Основной фактор роста фибробластов (bFGF, известный также как FGF-2) является важным модулятором клеточной дифференциации, пролиферации, миграции, ангиогенеза и других процес­сов в клетках различного типа. Рекомбинантный bFGF человека рассматривается как потенци­альное средство для лечения сосудистых и некоторых других заболеваний. В представленной работе разработана система биосинтеза bFGF человека (146 аминокислотных остатков) в клетках Е. coli и его очистка. Метод получения рекомбинантного белка предусматривает инфицирование фагом X клеток BL21 (DE3), несущих плазмиду с целевым геном под контролем промотора фага Т7. Данный процесс заканчивается лизисом клеток штамма-продуцента и синтезированный bFGF высвобождается в кулътуралъную среду, где накапливается в растворимой форме (около 60 мг/л). Целевой белок очищен с использованием аффинной хроматографии на гепарин-сефарозе до гомогенного состояния (не менее 98 %). В биологических тестах показано, что полученный bFGF тимулирует ангиогенез в хориоаллантоидной мебране куриных эмбрионов.