Получение рекомбинантного шаперона GroEL и его иммунологическая кросс-реактивность с Hsp60

Получение рекомбинантного шаперона GroEL и его иммунологическая кросс-реактивность с Hsp60

Описан метод получения рекомбинантного шаперона GroEL (прокариотного гомолога эукариотного шаперона Hsp60), включающий экспрессию белка в клетках Escherichia coli с последующей очисткой белка градиентным высаливанием из лизата клеток-продуцентов, гель-фильтрацией на сефакриле-8300 и ионообменной хро...

Повний опис

Збережено в:
Бібліографічні деталі
Дата:2006
Автори: Капустян, Л.Н., Киямова, Р.Г., Гришкова, В.С., Терентьев, А.Г., Филоненко, В.В., Сидорик, Л.Л.
Формат: Стаття
Мова:Russian
Опубліковано: Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 2006
Назва видання:Біополімери і клітина
Теми:
Структура та функції біополімерів
Онлайн доступ:http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/156476
Теги: Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:Получение рекомбинантного шаперона GroEL и его иммунологическая кросс-реактивность с Hsp60 / Л.Н. Капустян, Р.Г. Киямова, В.С. Гришкова, А.Г. Терентьев, В.В. Филоненко, Л.Л. Сидорик // Біополімери і клітина. — 2006. — Т. 22, № 2. — С. 117-120. — Бібліогр.: 20 назв. — рос., англ.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id irk-123456789-156476
record_format dspace
spelling irk-123456789-1564762019-06-19T01:30:59Z Получение рекомбинантного шаперона GroEL и его иммунологическая кросс-реактивность с Hsp60 Капустян, Л.Н. Киямова, Р.Г. Гришкова, В.С. Терентьев, А.Г. Филоненко, В.В. Сидорик, Л.Л. Структура та функції біополімерів Описан метод получения рекомбинантного шаперона GroEL (прокариотного гомолога эукариотного шаперона Hsp60), включающий экспрессию белка в клетках Escherichia coli с последующей очисткой белка градиентным высаливанием из лизата клеток-продуцентов, гель-фильтрацией на сефакриле-8300 и ионообменной хроматографией на MonoQ HR 5/5. Данный метод позволяет эффективно наработать белок GroEL 95 %-й степени очистки в препаративных количествах. Рекомбинантный белок затем использовали для получения поликлональных анти-GroEL антител и синтеза аффинной колонки. Показан иммунологический перекрест аффинно очищенных поликло­нальных анти-GroEL антител с представителями семейства Hsp60 в лизатах органов и клеток различных видов млекопитающих — от мыши до человека, что позволяет использовать данные антитела при изучении изменения уровней экспрессии и клеточной локализации Hsp60 в случае аутоиммунных и раковых патологий человека Описано метод одержання і очищення рекомбінантного шапе­рону GroEL (прокаріотного гомолога еукаріотного шаперону Hsp60), що включає експресію білка в клітинах Escherichia coli з наступним градієнтним висолюванням з лізату клітин-продуцентів, гель-фільтрацією на сефакрилі-SZQO та іонообмін­ною хроматографією на MonoQ HR 5/5. Такий метод дозво­лив ефективно напрацювати білок GroEL у препаративних кількостях, який потім використовували для отримання анmu-GroEL антитіл і синтезу афінної колонки. Показано імуно­ логічний перехрест афінно очищених поліклональних анти-GroEL антитіл з білком родини Hsp60 у лізатах органів і клітин різних видів ссавців — від миші до людини, що дозволяє використовувати ці антитіла при вивченні змін рівня експ­ресії і клітинної локалізації Hsp60 в разі аутоімунних і ракових патологій людини. The method of obtaining and purification of recombinant chaperon GroEL (prokaryotic homolog of eukaryotic chaperon Hsp60) including the protein expression in E. coli cells, precipitation with saturated ammonium sulphate from a producent lysate, gel-filtration on Sephacryl-300 column and ion-exchange chromatography on MonoQ HR 5/5 column, is described. The present method allows effective obtaining of the preparative amount of the GroEL protein of 95 % purity. The recombinant protein was used for the anti-GroEL antibodies production and synthesis of the affine column. The immunological cross-reactivity of polyclonal affinepurified anti-GroEL antibodies and members of Hsp60 family from different organs and cells lysates of different mammals, from mouse to human, have been revealed, which allows using these antibodies for research of Hsp60 expression alterations and cell localization at human autoimmune and cancer pathologies. 2006 Article Получение рекомбинантного шаперона GroEL и его иммунологическая кросс-реактивность с Hsp60 / Л.Н. Капустян, Р.Г. Киямова, В.С. Гришкова, А.Г. Терентьев, В.В. Филоненко, Л.Л. Сидорик // Біополімери і клітина. — 2006. — Т. 22, № 2. — С. 117-120. — Бібліогр.: 20 назв. — рос., англ. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.000724 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/156476 577.21 ru Біополімери і клітина Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
language Russian
topic Структура та функції біополімерів
Структура та функції біополімерів
spellingShingle Структура та функції біополімерів
Структура та функції біополімерів
Капустян, Л.Н.
Киямова, Р.Г.
Гришкова, В.С.
Терентьев, А.Г.
Филоненко, В.В.
Сидорик, Л.Л.
Получение рекомбинантного шаперона GroEL и его иммунологическая кросс-реактивность с Hsp60
Біополімери і клітина
description Описан метод получения рекомбинантного шаперона GroEL (прокариотного гомолога эукариотного шаперона Hsp60), включающий экспрессию белка в клетках Escherichia coli с последующей очисткой белка градиентным высаливанием из лизата клеток-продуцентов, гель-фильтрацией на сефакриле-8300 и ионообменной хроматографией на MonoQ HR 5/5. Данный метод позволяет эффективно наработать белок GroEL 95 %-й степени очистки в препаративных количествах. Рекомбинантный белок затем использовали для получения поликлональных анти-GroEL антител и синтеза аффинной колонки. Показан иммунологический перекрест аффинно очищенных поликло­нальных анти-GroEL антител с представителями семейства Hsp60 в лизатах органов и клеток различных видов млекопитающих — от мыши до человека, что позволяет использовать данные антитела при изучении изменения уровней экспрессии и клеточной локализации Hsp60 в случае аутоиммунных и раковых патологий человека
format Article
author Капустян, Л.Н.
Киямова, Р.Г.
Гришкова, В.С.
Терентьев, А.Г.
Филоненко, В.В.
Сидорик, Л.Л.
author_facet Капустян, Л.Н.
Киямова, Р.Г.
Гришкова, В.С.
Терентьев, А.Г.
Филоненко, В.В.
Сидорик, Л.Л.
author_sort Капустян, Л.Н.
title Получение рекомбинантного шаперона GroEL и его иммунологическая кросс-реактивность с Hsp60
title_short Получение рекомбинантного шаперона GroEL и его иммунологическая кросс-реактивность с Hsp60
title_full Получение рекомбинантного шаперона GroEL и его иммунологическая кросс-реактивность с Hsp60
title_fullStr Получение рекомбинантного шаперона GroEL и его иммунологическая кросс-реактивность с Hsp60
title_full_unstemmed Получение рекомбинантного шаперона GroEL и его иммунологическая кросс-реактивность с Hsp60
title_sort получение рекомбинантного шаперона groel и его иммунологическая кросс-реактивность с hsp60
publisher Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
publishDate 2006
topic_facet Структура та функції біополімерів
url http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/156476
citation_txt Получение рекомбинантного шаперона GroEL и его иммунологическая кросс-реактивность с Hsp60 / Л.Н. Капустян, Р.Г. Киямова, В.С. Гришкова, А.Г. Терентьев, В.В. Филоненко, Л.Л. Сидорик // Біополімери і клітина. — 2006. — Т. 22, № 2. — С. 117-120. — Бібліогр.: 20 назв. — рос., англ.
series Біополімери і клітина
work_keys_str_mv AT kapustânln polučenierekombinantnogošaperonagroeliegoimmunologičeskaâkrossreaktivnostʹshsp60
AT kiâmovarg polučenierekombinantnogošaperonagroeliegoimmunologičeskaâkrossreaktivnostʹshsp60
AT griškovavs polučenierekombinantnogošaperonagroeliegoimmunologičeskaâkrossreaktivnostʹshsp60
AT terentʹevag polučenierekombinantnogošaperonagroeliegoimmunologičeskaâkrossreaktivnostʹshsp60
AT filonenkovv polučenierekombinantnogošaperonagroeliegoimmunologičeskaâkrossreaktivnostʹshsp60
AT sidorikll polučenierekombinantnogošaperonagroeliegoimmunologičeskaâkrossreaktivnostʹshsp60
first_indexed 2023-05-20T17:49:05Z
last_indexed 2023-05-20T17:49:05Z
_version_ 1796154164350287872

Схожі ресурси