RTK signaling regulator SPRY2 associates with endocytic adaptor ITSN1 in vivo

Передача митогенного сигнала от RTK (рецепторных тирозиновых киназ) тесно связана с эндоцитозом, регулирующим ее точность. Интерсектин 1 (ITSN1) – эволюционно-консервативный адапторный белок, вовлеченный в самые ранние стадии клатринопосредованного эндоцитоза, а также в злокачественную трансформацию...

Повний опис

Збережено в:
Бібліографічні деталі
Дата:2012
Автори: Novokhatska, O.V., Skrypkina, I.Ya., Dergai, M.V., Tsyba, L.O., Rynditch, A.V.
Формат: Стаття
Мова:English
Опубліковано: Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 2012
Назва видання:Вiopolymers and Cell
Теми:
Онлайн доступ:http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/156934
Теги: Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:RTK signaling regulator SPRY2 associates with endocytic adaptor ITSN1 in vivo / O.V. Novokhatska, I.Ya. Skrypkina, M.V. Dergai, L.O. Tsyba, A.V. Rynditch // Вiopolymers and Cell. — 2012. — Т. 28, № 4. — С. 314-316. — Бібліогр.: 7 назв. — англ.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id irk-123456789-156934
record_format dspace
spelling irk-123456789-1569342019-06-20T01:27:25Z RTK signaling regulator SPRY2 associates with endocytic adaptor ITSN1 in vivo Novokhatska, O.V. Skrypkina, I.Ya. Dergai, M.V. Tsyba, L.O. Rynditch, A.V. Short Communications Передача митогенного сигнала от RTK (рецепторных тирозиновых киназ) тесно связана с эндоцитозом, регулирующим ее точность. Интерсектин 1 (ITSN1) – эволюционно-консервативный адапторный белок, вовлеченный в самые ранние стадии клатринопосредованного эндоцитоза, а также в злокачественную трансформацию в случае его сверхэкспрессии. Цель. Поиск белков, способных обеспечивать связь ITSN1 с процессом передачи сигнала от RTK. Методы. Предсказание мотивов взаимодействия in silico, экспрессия белков в бактериальной системе и в культуре клеток млекопитающих, иммунопреципитация, преципитация белков, слитых с GST, иммунофлуоресцентный анализ. Результаты. С применением сервиса «Scansite» предсказано связывание домена SH3A ITSN1 с SPRY2. Для экспериментального подтверждения этого взаимодействия GST-слитые домены ITSN1 получены и очищены из клеток Escherichia coli. Используя преципитацию белков, слитых с GST, установлено, что домены SH3A, N-SH3A (нейрон-специфический вариант), SH3C и SH3E способны преципитировать SPRY2-Flag из лизата клеток. Данные иммунофлуоресцентного анализа и коиммунопреципитации свидетельствуют о частичной колокализации белков Omni-ITSN1 и Flag-SPRY2 и формирование ими комплекса in vivo. Выводы. Полученные данные подтверждают ассоциацию эндоцитозного адапторного белка ITSN1 с сигнальным белком SPRY2 in vivo. Ключевые слова: интерсектин 1, передача митогенного сигнала, SPRY2, домен SH3. Передача мітогенного сигналу від рецепторних тирозинкіназ (RTK) у клітині тісно пов’язана з ендоцитозом, який регулює точність такої передачі. Інтерсектин 1 (ITSN1) – це еволюційно консервативний адапторний білок, що бере участь у найбільш ранніх етапах клатрин-опосередкованого ендоцитозу та залучений до процесу злоякісної трансформації за умов надекспресії. Мета. Пошук білків, які можуть забезпечити зв’язок ITSN1 із процесом передачі сигналу від RTK. Методи. Передбачення мотивів взаємодії in silico, експресія білків у бактерійній системі та культурі клітин ссавців, імунопреципітація, преципітація білків, злитих з GST, імунофлуоресцентні дослідження. Результати. За допомогою сервісу «Scansite» передбачено зв’язування домену SH3A ITSN1 із SPRY2. Для експериментального підтвердження цієї взаємодії злиті з GST SH3-домени ITSN1 отримано і очищено з бактерій Escherichia coli. Використовуючи преципітацію білків, злитих з GST, встановлено, що домени SH3A, N-SH3A (нейрон-специфічний варіант), SH3C і SH3E ITSN1 здатні преципітувати Flag-SPRY2 з лізату клітин. Дані імунофлуоресцентного аналізу та коімунопреципітації свідчать про часткову колокалізацію білків Omni-ITSN1 і Flag-SPRY2 та формування ними комплексу in vivo. Висновки. Отримані дані підтверджують асоціацію ендоцитозного адапторного білка ITSN1 із сигнальним білком SPRY2 in vivo. Ключові слова: інтерсектин 1, передача мітогенного сигналу, SPRY2, домен SH3. 2012 Article RTK signaling regulator SPRY2 associates with endocytic adaptor ITSN1 in vivo / O.V. Novokhatska, I.Ya. Skrypkina, M.V. Dergai, L.O. Tsyba, A.V. Rynditch // Вiopolymers and Cell. — 2012. — Т. 28, № 4. — С. 314-316. — Бібліогр.: 7 назв. — англ. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.000067 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/156934 577.22 en Вiopolymers and Cell Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
language English
topic Short Communications
Short Communications
spellingShingle Short Communications
Short Communications
Novokhatska, O.V.
Skrypkina, I.Ya.
Dergai, M.V.
Tsyba, L.O.
Rynditch, A.V.
RTK signaling regulator SPRY2 associates with endocytic adaptor ITSN1 in vivo
Вiopolymers and Cell
description Передача митогенного сигнала от RTK (рецепторных тирозиновых киназ) тесно связана с эндоцитозом, регулирующим ее точность. Интерсектин 1 (ITSN1) – эволюционно-консервативный адапторный белок, вовлеченный в самые ранние стадии клатринопосредованного эндоцитоза, а также в злокачественную трансформацию в случае его сверхэкспрессии. Цель. Поиск белков, способных обеспечивать связь ITSN1 с процессом передачи сигнала от RTK. Методы. Предсказание мотивов взаимодействия in silico, экспрессия белков в бактериальной системе и в культуре клеток млекопитающих, иммунопреципитация, преципитация белков, слитых с GST, иммунофлуоресцентный анализ. Результаты. С применением сервиса «Scansite» предсказано связывание домена SH3A ITSN1 с SPRY2. Для экспериментального подтверждения этого взаимодействия GST-слитые домены ITSN1 получены и очищены из клеток Escherichia coli. Используя преципитацию белков, слитых с GST, установлено, что домены SH3A, N-SH3A (нейрон-специфический вариант), SH3C и SH3E способны преципитировать SPRY2-Flag из лизата клеток. Данные иммунофлуоресцентного анализа и коиммунопреципитации свидетельствуют о частичной колокализации белков Omni-ITSN1 и Flag-SPRY2 и формирование ими комплекса in vivo. Выводы. Полученные данные подтверждают ассоциацию эндоцитозного адапторного белка ITSN1 с сигнальным белком SPRY2 in vivo. Ключевые слова: интерсектин 1, передача митогенного сигнала, SPRY2, домен SH3.
format Article
author Novokhatska, O.V.
Skrypkina, I.Ya.
Dergai, M.V.
Tsyba, L.O.
Rynditch, A.V.
author_facet Novokhatska, O.V.
Skrypkina, I.Ya.
Dergai, M.V.
Tsyba, L.O.
Rynditch, A.V.
author_sort Novokhatska, O.V.
title RTK signaling regulator SPRY2 associates with endocytic adaptor ITSN1 in vivo
title_short RTK signaling regulator SPRY2 associates with endocytic adaptor ITSN1 in vivo
title_full RTK signaling regulator SPRY2 associates with endocytic adaptor ITSN1 in vivo
title_fullStr RTK signaling regulator SPRY2 associates with endocytic adaptor ITSN1 in vivo
title_full_unstemmed RTK signaling regulator SPRY2 associates with endocytic adaptor ITSN1 in vivo
title_sort rtk signaling regulator spry2 associates with endocytic adaptor itsn1 in vivo
publisher Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
publishDate 2012
topic_facet Short Communications
url http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/156934
citation_txt RTK signaling regulator SPRY2 associates with endocytic adaptor ITSN1 in vivo / O.V. Novokhatska, I.Ya. Skrypkina, M.V. Dergai, L.O. Tsyba, A.V. Rynditch // Вiopolymers and Cell. — 2012. — Т. 28, № 4. — С. 314-316. — Бібліогр.: 7 назв. — англ.
series Вiopolymers and Cell
work_keys_str_mv AT novokhatskaov rtksignalingregulatorspry2associateswithendocyticadaptoritsn1invivo
AT skrypkinaiya rtksignalingregulatorspry2associateswithendocyticadaptoritsn1invivo
AT dergaimv rtksignalingregulatorspry2associateswithendocyticadaptoritsn1invivo
AT tsybalo rtksignalingregulatorspry2associateswithendocyticadaptoritsn1invivo
AT rynditchav rtksignalingregulatorspry2associateswithendocyticadaptoritsn1invivo
first_indexed 2023-05-20T17:51:08Z
last_indexed 2023-05-20T17:51:08Z
_version_ 1796154240692912128