Оценка методов ренатурации для промышленного получения рекомбинантных белков из телец включения Escherichia coli в биологически активной форме

• Дата: 2004
• Автор: Гильчук, П.В.
• Формат: Стаття
• Мова: Russian
• Опубліковано: Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 2004
• Назва видання: Біополімери і клітина
• Теми: Огляди
• Онлайн доступ: http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/157567
• Назва журналу: Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
• Цитувати: Оценка методов ренатурации для промышленного получения рекомбинантных белков из телец включения Escherichia coli в биологически активной форме / П.В. Гильчук // Біополімери і клітина. — 2004. — Т. 20, № 3. — С. 182-192. — Бібліогр.: 38 назв. — рос.

Одной из широко применяемых стратегий для получения рекомбинантных белков в клетках Е. coli является их накопление при экспрессии в виде нерастворимых цитоплазматических агрега­тов — телец включения. Преимущество такого синтеза обусловлено высокими уровнями накоп­ления и чистоты целевого белка, а также возможностью проведения успешной ренатурации и получения активного продукта из нерастворимых агрегатов в условиях in vitro. Основная проблема, препятствующая индустриализации этого процесса, обусловлена отсутствием универ­сальных схем ренатурации, так как рефолдинг рекомбинантных белков является эмпирическим процессом и требует разработки уникальных протоколов для индивидуальных белков. Изучение основных путей агрегации, а также процессов фолдинга in vivo позволило разработать эффектив­ные подходы для рефолдинга многих рекомбинантных белков. В обзоре дана оценка некоторым современным методам ренатурации белков и описаны основные стратегии, которые могут быть использованы для промышленного получения белков из бактериальных телец включения. Кратко рассмотрены недавние достижения в области ренатурации рекомбинантных белков, содержащих дисульфидные связи (окислительный рефолдинг), а также причины, вызывающие агрегацию белков в процессе ренатурации in vitro, и подходы, применяемые для увеличения выхода правильно ренатурированного продукта.