Ренатурація химерного білка ScFv-CBD з тілець включення Escherichia соli

• Дата: 2008
• Автори: Горбатюк, О.Б., Ніколаєв, Ю.С., ІродовІродов, Д.М., Дубей, І.Я., Гільчук, П.В.
• Формат: Стаття
• Мова: Ukrainian
• Опубліковано: Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 2008
• Назва видання: Біополімери і клітина
• Теми: Молекулярна та клітинна біотехнології
• Онлайн доступ: http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/157663
• Назва журналу: Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
• Цитувати: Ренатурація химерного білка ScFv-CBD з тілець включення Escherichia соli / О.Б. Горбатюк, Ю.С. Ніколаєв, Д.М. Іродов, І.Я. Дубей, П.В. Гільчук // Біополімери і клітина. — 2008. — Т. 24, № 1. — С. 51-59. — Бібліогр.: назв. — укр.

Запропоновано ефективний і недорогий метод ренатурації химерного білка ScFv-CBD із тілець включення E. coli. Метод грунтується на ступінчастому розведенні солюбілізованого в розчині 6 М гуанідингідрохлориду ScFv-CBD буфером для ренатурації, який містить L-аргінін та глутатіон. Досліджено вплив вихідної концентрації білка та різного співвідношення реагентів окисно-відновної пари GSSG:GSН, які додавали на певних стадіях ренатурації, на вихід функціонально активного ScFv-CBD і його агрегацію. Показано, що зниження виходу активного ScFv-CBD відбувається за рахунок формування значної кількості його розчинних агрегатів при вихідній концентрації, вищій за 0,53 мг/мл. Визначено умови ренатурації, які забезпечують найбільший вихід розчинного ScFv-CBD у мономерній формі, та найвищу функціональну активність його антигензв’язувального (ScFv) і целюлозозв’язувального (CBD) компонентів (відповідно ~63 і ~96 %).