Влияние низкомолекулярной фракции (до 5 кДа) из кордовой крови на фагоцитарную активность лейкоцитов in vivo и in vitro
Дослiджено вплив низькомолекулярної фракцiї кордової кровi великої рогатої худоби на фагоцитарну активнiсть лейкоцитiв у дослiдах in vivo та in vitro у порiвняннi з онтогенетично близьким за складом препаратом актовегiном. Показано, що введення ФКК i актовегiну експериментальним щурам сприяє нормалi...
Збережено в:
| Дата: | 2009 |
|---|---|
| Автори: | , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Russian |
| Опубліковано: |
Видавничий дім "Академперіодика" НАН України
2009
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/17257 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Влияние низкомолекулярной фракции (до 5 кДа) из кордовой крови на фагоцитарную активность лейкоцитов in vivo и in vitro / А.К. Гулевский, В.И. Грищенко, Н.Н. Моисеева, О.Л. Горина // Доп. НАН України. — 2009. — № 8. — С. 184-188. — Бібліогр.: 10 назв. — рос. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
irk-123456789-17257 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
irk-123456789-172572011-02-25T12:04:03Z Влияние низкомолекулярной фракции (до 5 кДа) из кордовой крови на фагоцитарную активность лейкоцитов in vivo и in vitro Гулевский, А.К. Грищенко, В.И. Моисеева, Н.Н. Горина, О.Л. Медицина Дослiджено вплив низькомолекулярної фракцiї кордової кровi великої рогатої худоби на фагоцитарну активнiсть лейкоцитiв у дослiдах in vivo та in vitro у порiвняннi з онтогенетично близьким за складом препаратом актовегiном. Показано, що введення ФКК i актовегiну експериментальним щурам сприяє нормалiзацiї зниженої пiсля опiку IIIВ ступеня фагоцитарної активностi нейтрофiлiв. У дослiдах in vitro встановлено дозозалежну iмуностимулювальну дiю ФКК та актовегiну. The influence of a low-molecular fraction of cattle cord blood on the leukocyte phagocytic activity in vivo and in vitro is studied in comparison with that of the ontogenically close composition аctovegin. It has been shown that the fraction and аctovegin administrations in experimental rats promote the normalization of the neutrophil phagocytic activity reduced after a IIIB degree burn. Dose-dependent immunopotentiating actions of the cattle cord blood fraction less than 5 kD and аctovegin on leukocytes in vitro have been established. 2009 Article Влияние низкомолекулярной фракции (до 5 кДа) из кордовой крови на фагоцитарную активность лейкоцитов in vivo и in vitro / А.К. Гулевский, В.И. Грищенко, Н.Н. Моисеева, О.Л. Горина // Доп. НАН України. — 2009. — № 8. — С. 184-188. — Бібліогр.: 10 назв. — рос. 1025-6415 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/17257 615.361.018.5.013.8 ru Видавничий дім "Академперіодика" НАН України |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| language |
Russian |
| topic |
Медицина Медицина |
| spellingShingle |
Медицина Медицина Гулевский, А.К. Грищенко, В.И. Моисеева, Н.Н. Горина, О.Л. Влияние низкомолекулярной фракции (до 5 кДа) из кордовой крови на фагоцитарную активность лейкоцитов in vivo и in vitro |
| description |
Дослiджено вплив низькомолекулярної фракцiї кордової кровi великої рогатої худоби на фагоцитарну активнiсть лейкоцитiв у дослiдах in vivo та in vitro у порiвняннi з онтогенетично близьким за складом препаратом актовегiном. Показано, що введення ФКК i актовегiну експериментальним щурам сприяє нормалiзацiї зниженої пiсля опiку IIIВ ступеня фагоцитарної активностi нейтрофiлiв. У дослiдах in vitro встановлено дозозалежну iмуностимулювальну дiю ФКК та актовегiну. |
| format |
Article |
| author |
Гулевский, А.К. Грищенко, В.И. Моисеева, Н.Н. Горина, О.Л. |
| author_facet |
Гулевский, А.К. Грищенко, В.И. Моисеева, Н.Н. Горина, О.Л. |
| author_sort |
Гулевский, А.К. |
| title |
Влияние низкомолекулярной фракции (до 5 кДа) из кордовой крови на фагоцитарную активность лейкоцитов in vivo и in vitro |
| title_short |
Влияние низкомолекулярной фракции (до 5 кДа) из кордовой крови на фагоцитарную активность лейкоцитов in vivo и in vitro |
| title_full |
Влияние низкомолекулярной фракции (до 5 кДа) из кордовой крови на фагоцитарную активность лейкоцитов in vivo и in vitro |
| title_fullStr |
Влияние низкомолекулярной фракции (до 5 кДа) из кордовой крови на фагоцитарную активность лейкоцитов in vivo и in vitro |
| title_full_unstemmed |
Влияние низкомолекулярной фракции (до 5 кДа) из кордовой крови на фагоцитарную активность лейкоцитов in vivo и in vitro |
| title_sort |
влияние низкомолекулярной фракции (до 5 кда) из кордовой крови на фагоцитарную активность лейкоцитов in vivo и in vitro |
| publisher |
Видавничий дім "Академперіодика" НАН України |
| publishDate |
2009 |
| topic_facet |
Медицина |
| url |
http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/17257 |
| citation_txt |
Влияние низкомолекулярной фракции (до 5 кДа) из кордовой крови на фагоцитарную активность лейкоцитов in vivo и in vitro / А.К. Гулевский, В.И. Грищенко, Н.Н. Моисеева, О.Л. Горина // Доп. НАН України. — 2009. — № 8. — С. 184-188. — Бібліогр.: 10 назв. — рос. |
| work_keys_str_mv |
AT gulevskijak vliânienizkomolekulârnojfrakciido5kdaizkordovojkrovinafagocitarnuûaktivnostʹlejkocitovinvivoiinvitro AT griŝenkovi vliânienizkomolekulârnojfrakciido5kdaizkordovojkrovinafagocitarnuûaktivnostʹlejkocitovinvivoiinvitro AT moiseevann vliânienizkomolekulârnojfrakciido5kdaizkordovojkrovinafagocitarnuûaktivnostʹlejkocitovinvivoiinvitro AT gorinaol vliânienizkomolekulârnojfrakciido5kdaizkordovojkrovinafagocitarnuûaktivnostʹlejkocitovinvivoiinvitro |
| first_indexed |
2025-07-02T18:27:21Z |
| last_indexed |
2025-07-02T18:27:21Z |
| _version_ |
1836560775081099264 |
| fulltext |
оповiдi
НАЦIОНАЛЬНОЇ
АКАДЕМIЇ НАУК
УКРАЇНИ
8 • 2009
МЕДИЦИНА
УДК 615.361.018.5.013.8
© 2009
А.К. Гулевский, академик НАН Украины В.И. Грищенко,
Н.Н. Моисеева, О. Л. Горина
Влияние низкомолекулярной фракции (до 5 кДа)
из кордовой крови на фагоцитарную активность
лейкоцитов in vivo и in vitro
Дослiджено вплив низькомолекулярної фракцiї кордової кровi великої рогатої худоби на
фагоцитарну активнiсть лейкоцитiв у дослiдах in vivo та in vitro у порiвняннi з онто-
генетично близьким за складом препаратом актовегiном. Показано, що введення ФКК
i актовегiну експериментальним щурам сприяє нормалiзацiї зниженої пiсля опiку IIIВ
ступеня фагоцитарної активностi нейтрофiлiв. У дослiдах in vitro встановлено дозоза-
лежну iмуностимулювальну дiю ФКК та актовегiну.
Ранее в наших работах было показано, что препараты цельной кордовой крови и ее отдель-
ные компоненты обладают иммуномодулирующим действием [1–4]. Однако не установлено,
с какими компонентами кордовой крови связан этот феномен. Принимая во внимание дан-
ные о механизмах действия известных препаратов актовегин (“Nycomed”, Австрия) и сол-
косерил (“Solco Basel AG”, Швейцария), в состав которых входят соединения до 5–10 кДа,
полученные из крови молочных телят, можно предположить, что биологическая активность
кордовой крови связана с низкомолекулярными компонентами, входящими в ее состав.
Цель наших исследований состояла в изучении влияния низкомолекулярной фракции
кордовой крови (до 5 кДа) крупного рогатого скота и актовегина, как препарата сравнения,
на фагоцитарную активность лейкоцитов в условиях in vivo и in vitro.
Материалы и методы. Низкомолекулярную фракцию до 5 кДа из дефибринирован-
ной кордовой крови, подвергнутой криодеструкции, получали с помощью ультрафильтра-
ционного оборудования фирмы “Sartorius” (Германия).
Для снижения фагоцитарной активности лейкоцитов в опытах in vivo животных по-
двергали диатермическому ожогу IIIВ степени по методу [5], который воспроизводили на
лабораторных крысах массой 160–180 г. Иммуномодулирующее действие низкомолекуляр-
ной фракции кордовой крови (ФКК) и актовегина в опытах in vivo оценивали по фагоци-
тарной активности нейтрофилов периферической крови крыс методом [6]. В опытах in vitro
функциональную активность фагоцитов изучали в лейкоцитарной массе, полученной из
184 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2009, №8
Рис. 1. Фагоцитарный индекс (а) и фагоцитарное число (б ) нейтрофилов после 2 ч инкубации со стафило-
кокком периферической крови экспериментальных крыс.
* — отличия достоверны в сравнении с контролем (P < 0,05)
донорской крови человека, по методу [7], в зависимости от концентрации фракции в преде-
лах 0,17 — 3,30 мг/мл. В контрольные пробы вносили физиологический раствор. Конечное
соотношение лейкоцитов и бактерий (суточная инактивированная культура Staphylococcus
aureus штамм № 209) составляло 1 : 50. Для оценки специфичности реакции отдельно ста-
вили пробу с добавлением колхицина (ингибитора фагоцитоза) в конечной концентрации
100 мМ [8].
Для оценки фагоцитарной активности лейкоцитов использовали следующие показатели:
фагоцитарный индекс (ФИ) лейкоцитов периферической крови — процент активных лей-
коцитов, т. е. соотношение фагоцитирующих клеток к их общему числу после 45 мин и 2 ч
инкубации крови со стафилококком; фагоцитарное число (ФЧ) — среднее число микро-
бов, поглощенных одной фагоцитирующей клеткой после 45 мин и 2 ч инкубации крови со
стафилококком; коэффициент фагоцитарного числа (КФЧ) — показатель завершенности
фагоцитоза, отношение ФЧ45 мин/ФЧ2 ч.
Статистическую обработку экспериментальных данных проводили с помощью статисти-
ческого программного пакета “STATGRAPHIC plus for Windows” версии 2.1 с использова-
нием t-критерия Стьюдента и Манна-Уитни.
Результаты исследований. Как свидетельствуют полученные данные, диатермиче-
ский ожог IIIВ степени приводит к резкому снижению фагоцитарного процесса, что со-
гласуется с данными литературы [9]. В наших экспериментах ФИ, отражающий процент
клеток, вступивших в реакцию со стафилококком, в наибольшей мере снижался на 7–14-е
сутки после ожога и составлял (53,0 ± 3,0)%, в норме — (70,0 ± 1,0)% (рис. 1, а). Введе-
ние экспериментальным животным ФКК приводило к нормализации в указанные сроки
этой функции фагоцитов (см. рис. 1, а). Введение препарата сравнения актовегина способ-
ствовало не только нормализации ФИ нейтрофилов, но и увеличению процента активных
лейкоцитов до (76,0±2,0)% на 21-е сутки эксперимента (см. рис. 1, а).
После термокоагуляции уменьшался не только показатель ФИ, но и ФЧ лейкоцитов
периферической крови, отражающее количество поглощенных микробов (см. рис. 1, б ).
Введение актовегина и ФКК позволяло нормализовать и эту функцию фагоцитов. При вве-
дении ФКК нормализация ФЧ наблюдалась уже на 7-е сутки после термической травмы,
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2009, №8 185
Рис. 2. Динамика коэффициента фагоцитарного числа нейтрофилов периферической крови эксперимен-
тальных крыс.
* — отличия достоверны в сравнении с контролем (P < 0,05)
а при использовании актовегина — уже на 3-тьи сутки. В то же время в группе контроль-
ных животных на протяжении всего эксперимента показатель ФЧ был достоверно ниже
нормальных значений (см. рис. 1, б ).
Как известно [7], функциональное состояние фагоцитов в наибольшей мере характери-
зует показатель КФЧ, отражающий способность нейтрофилов переваривать захваченные
микробы. В наших экспериментах КФЧ после термокоагуляции снижался до 0,89 ± 0,05,
в норме — 1,1± 0,03 (рис. 2). После введения ФКК уже на 7-е сутки происходило достовер-
ное (p < 0,05) повышение данного показателя до 0,97 ± 0,02 по сравнению с контролем —
0,8± 0,02. К 14-м суткам функциональная способность по показателю КФЧ у нейтрофилов
восстанавливалась в полной мере, о чем свидетельствовали значения данного показателя —
1,1 ± 0,03. Введение актовегина способствовало нормализации КФЧ в более ранние сроки
эксперимента (на 3-тьи сутки) по сравнению с ФКК (на 7-е сутки) (см. рис. 2).
В связи с тем что ФКК и актовегин могут оказывать свое иммуномодулирующее дей-
ствие как на уровне организма, так и непосредственно воздействовать на клетки, прини-
мающие участие в реакциях фагоцитоза, представлялось интересным исследовать их дей-
ствие в опытах in vitro в диапазоне концентраций 0,17–3,3 мг/мл. Влияние ФКК и пре-
парата сравнения актовегина на фагоцитарную активность лейкоцитов донорской крови
оценивали по КФЧ, который характеризует степень завершения фагоцитоза и отражает
процесс внутриклеточного лизиса бактерий. Как видно из рис. 3, максимальное значение
КФЧ (1,92±0,08) по сравнению с контролем (1,06±0,08) было отмечено при концентрации
ФКК в инкубационной среде 0,17 мг/мл. Препарат сравнения актовегин также стимулиро-
вал внутриклеточное переваривание фагоцитами поглощенных микроорганизмов. Однако
его биологическая активность проявлялась лишь при концентрации в инкубационной среде
1,70 мг/мл (см. рис. 3). Следовательно, ФКК в опытах in vitro более эффективно акти-
вирует фагоцитарную активность лейкоцитов по сравнению с актовегином, что, видимо,
обусловлено разным и составом этих фракций [10] и концентрацией содержащихся в ней
активирующих компонентов.
Таким образом, нами в экспериментах in vivo и in vitro установлено, что низкомоле-
кулярная фракция кордовой крови обладает сходным с актовегином иммуномодулирую-
щим действием. В опытах in vivo актовегин более эффективно стимулирует фагоцитарную
186 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2009, №8
Рис. 3. Коэффициент фагоцитарного числа нейтрофилов лейкоцитарной массы, полученной из донорской
крови человека, в опытах in vitro.
* — отличия достоверны в сравнении с контролем (P < 0,05)
активность, чем ФКК. Однако на клеточном уровне, как показывают данные экспериментов
in vitro, иммуномодулирующее действие ФКК более специфично.
1. Гулевський О.К., Грищенко В. I., Нiкольченко А.Ю., Моiсєєва Н.М. Властивостi i перспективи вико-
ристання кордової кровi в клiнiчнiй практицi // Укр. журн. гематологiї та трансфузiологiї. – 2005. –
№ 1(5). – С. 5–14.
2. Мошко Ю.А. Криоконсервирование сыворотки кордовой крови, определение ее биологической актив-
ности и клинической эффективности в терапии хронических сальпингоофоритов: Дис. . . канд. мед.
наук/ Ин-т проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины. – Харьков, 2003. – 161 с.
3. Цуцаєва А.О., Глушко Т.О., Лобасенко Н.П. та iн. Гемокорд – препарат комплексної терапiї //
Трансплантологiя – 2003. – № 4. – С. 46–48.
4. Грищенко В.И., Гольцев А.Н. Трансплантация продуктов эмбриофетоплацентарного комплекса. От
понимания механизма действия к повышению эффективности применения // Проблемы криобиоло-
гии. – 2002. – № 1. – С. 54–84.
5. Хакимов З. З., Наджимутдинов К.Н., Мавлянов И. Р. Фармакодинамика лекарственных веществ,
метаболизирующихся в печени, при ожоговой травме у крыс // Фармакология и токсикология. –
1985. – № 2. – С. 103–106.
6. Кудрявицкий А.И. Оценка киллерной бактерицидности нейтрофилов периферической крови здоро-
вых и больных в прямом и визуальном тесте // Лаб. дело. – 1985. – № 1. – С. 45–47.
7. Подопригора Г.И., Андреев В.Н. Современные методы изучения фагоцитарной активности лейкоци-
тов in vitro // Журн. микробиологии. – 1976. – № 1. – С. 19–25.
8. Scheef H., Stelzner A., Kunze M. Effect of colchicine and indomethacin on leukocytic phagocytosis of
Staphylococcus aureus and E. coli // Zbl. Bacteriol. Mikrobiol. und Hyg. A. – 1984. – No 3(257). –
P. 388–399.
9. Саркисов Д.С., Сологуб В.К., Каем Р.И., Колкер И.И. Современные проблемы ожоговой болезни //
Клинич. медицина. – 1986. – 64, № 2. – С. 14–22.
10. Гулевский А.К., Абакумова Е. С., Моисеева Н.Н., Долгих О.Л. Влияние фракции кордовой крови
(до 5 кДа) крупного рогатого скота на биохимические показатели крови при экспериментальной
субхронической язве желудка у крыс // Укр. бiохiм. журн. – 2008. – 80, № 2. – С. 120–127.
Поступило в редакцию 23.01.2009Институт проблем криобиологии
и криомедицины НАН Украины, Харьков
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2009, №8 187
A.K. Gulevsky, Academician of the NAS of Ukraine V. I. Grischenco,
N.N. Moiseeva, O. L. Gorina
Influence of low-molecular fraction (less than 5 kD) of cord blood on
leukocyte phagocytic activity in vivo and in vitro
The influence of a low-molecular fraction of cattle cord blood on the leukocyte phagocytic activity
in vivo and in vitro is studied in comparison with that of the ontogenically close composition
аctovegin. It has been shown that the fraction and аctovegin administrations in experimental rats
promote the normalization of the neutrophil phagocytic activity reduced after a IIIB degree burn.
Dose-dependent immunopotentiating actions of the cattle cord blood fraction less than 5 kD and
аctovegin on leukocytes in vitro have been established.
188 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2009, №8
|