Dominant-negative constructs of human 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase-3 and -4: effect on the expression of endogenous 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase mRNA
Expression of 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase (PFKFB), a key regulatory enzyme of glycolysis, is significantly increased in different malignant tumors provides a potential mechanism of enhanced glycolysis and cancer cell proliferation. We created dominant-negative constructs of...
Збережено в:
| Дата: | 2008 |
|---|---|
| Автори: | , , , , , , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | English |
| Опубліковано: |
Інститут біохімії ім. О.В. Палладіна НАН України
2008
|
| Назва видання: | Біотехнологія |
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/28152 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Dominant-negative constructs of human 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase-3 and -4: effect on the expression of endogenous 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase mRNA / D.O. Minchenko, A.Y. Bobarykina, O.O. Ratushna, R.Y. Marunych, K. Tsuchihara, M. Moenner, J. Caro, H. Esumi, O.H. Minchenko // Біотехнологія. — 2008. — Т. 1, № 4. — С. 49-56. — Бібліогр.: 47 назв. — англ. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
irk-123456789-28152 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| language |
English |
| topic |
Експериментальні статті Експериментальні статті |
| spellingShingle |
Експериментальні статті Експериментальні статті Minchenko, D.O. Bobarykina, A.Y. Ratushna, O.O. Marunych, R.Y. Tsuchihara, K. Moenner, M. Caro, J. Esumi, H. Minchenko, O.H. Dominant-negative constructs of human 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase-3 and -4: effect on the expression of endogenous 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase mRNA Біотехнологія |
| description |
Expression of 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase (PFKFB), a key regulatory enzyme of glycolysis, is significantly increased in different malignant tumors provides a potential mechanism of enhanced glycolysis and cancer cell proliferation. We created dominant-negative constructs of 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase-3 and -4 (dnPFKFB-3 and dnPFKFB-4) cDNA for suppression of strongly enhanced expression endogenous PFKFB-3 and PFKFB-4. We introduce point mutation in ATP-binding domain of 6-phosphofructo-2-kinase part of PFKFB-3 as well as PFKFB-4 cDNA for suppression of 6-phosphofructo-2-kinase activity in the products of dnPFKFB-3 and dnPFKFB-4 expression. Cancer cells were stable transfected with these dominant-negative constructs for suppression of endogenous PFKFB-3 and PFKFB-4 expression and cell proliferation. We have shown that PFKFB-3 expression in pancreatic cancer cell line Panc1, stable transfected by dnPFKFB-3, was significantly reduced in normal as well as in hypoxic conditions. Pancreatic cancer cells proliferation, stable transfected by dnPFKFB-3 or dnPFKFB-4, was also reduced. Results of this investigation demonstrate possibility to apply the dominant-negative constructs of PFKFB-3 and PFKFB-4 for suppression of glycolysis and tumor cells proliferation via reduction of endogenous PFKFB expression. |
| format |
Article |
| author |
Minchenko, D.O. Bobarykina, A.Y. Ratushna, O.O. Marunych, R.Y. Tsuchihara, K. Moenner, M. Caro, J. Esumi, H. Minchenko, O.H. |
| author_facet |
Minchenko, D.O. Bobarykina, A.Y. Ratushna, O.O. Marunych, R.Y. Tsuchihara, K. Moenner, M. Caro, J. Esumi, H. Minchenko, O.H. |
| author_sort |
Minchenko, D.O. |
| title |
Dominant-negative constructs of human 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase-3 and -4: effect on the expression of endogenous 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase mRNA |
| title_short |
Dominant-negative constructs of human 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase-3 and -4: effect on the expression of endogenous 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase mRNA |
| title_full |
Dominant-negative constructs of human 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase-3 and -4: effect on the expression of endogenous 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase mRNA |
| title_fullStr |
Dominant-negative constructs of human 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase-3 and -4: effect on the expression of endogenous 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase mRNA |
| title_full_unstemmed |
Dominant-negative constructs of human 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase-3 and -4: effect on the expression of endogenous 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase mRNA |
| title_sort |
dominant-negative constructs of human 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase-3 and -4: effect on the expression of endogenous 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase mrna |
| publisher |
Інститут біохімії ім. О.В. Палладіна НАН України |
| publishDate |
2008 |
| topic_facet |
Експериментальні статті |
| url |
http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/28152 |
| citation_txt |
Dominant-negative constructs of human 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase-3 and -4: effect on the expression of endogenous 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase mRNA / D.O. Minchenko, A.Y. Bobarykina, O.O. Ratushna, R.Y. Marunych, K. Tsuchihara, M. Moenner, J. Caro, H. Esumi, O.H. Minchenko // Біотехнологія. — 2008. — Т. 1, № 4. — С. 49-56. — Бібліогр.: 47 назв. — англ. |
| series |
Біотехнологія |
| work_keys_str_mv |
AT minchenkodo dominantnegativeconstructsofhuman6phosphofructo2kinasefructose26bisphosphatase3and4effectontheexpressionofendogenous6phosphofructo2kinasefructose26bisphosphatasemrna AT bobarykinaay dominantnegativeconstructsofhuman6phosphofructo2kinasefructose26bisphosphatase3and4effectontheexpressionofendogenous6phosphofructo2kinasefructose26bisphosphatasemrna AT ratushnaoo dominantnegativeconstructsofhuman6phosphofructo2kinasefructose26bisphosphatase3and4effectontheexpressionofendogenous6phosphofructo2kinasefructose26bisphosphatasemrna AT marunychry dominantnegativeconstructsofhuman6phosphofructo2kinasefructose26bisphosphatase3and4effectontheexpressionofendogenous6phosphofructo2kinasefructose26bisphosphatasemrna AT tsuchiharak dominantnegativeconstructsofhuman6phosphofructo2kinasefructose26bisphosphatase3and4effectontheexpressionofendogenous6phosphofructo2kinasefructose26bisphosphatasemrna AT moennerm dominantnegativeconstructsofhuman6phosphofructo2kinasefructose26bisphosphatase3and4effectontheexpressionofendogenous6phosphofructo2kinasefructose26bisphosphatasemrna AT caroj dominantnegativeconstructsofhuman6phosphofructo2kinasefructose26bisphosphatase3and4effectontheexpressionofendogenous6phosphofructo2kinasefructose26bisphosphatasemrna AT esumih dominantnegativeconstructsofhuman6phosphofructo2kinasefructose26bisphosphatase3and4effectontheexpressionofendogenous6phosphofructo2kinasefructose26bisphosphatasemrna AT minchenkooh dominantnegativeconstructsofhuman6phosphofructo2kinasefructose26bisphosphatase3and4effectontheexpressionofendogenous6phosphofructo2kinasefructose26bisphosphatasemrna |
| first_indexed |
2023-10-18T17:25:24Z |
| last_indexed |
2023-10-18T17:25:24Z |
| _version_ |
1796141499310669824 |
| spelling |
irk-123456789-281522011-10-30T12:24:33Z Dominant-negative constructs of human 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase-3 and -4: effect on the expression of endogenous 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase mRNA Minchenko, D.O. Bobarykina, A.Y. Ratushna, O.O. Marunych, R.Y. Tsuchihara, K. Moenner, M. Caro, J. Esumi, H. Minchenko, O.H. Експериментальні статті Expression of 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase (PFKFB), a key regulatory enzyme of glycolysis, is significantly increased in different malignant tumors provides a potential mechanism of enhanced glycolysis and cancer cell proliferation. We created dominant-negative constructs of 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase-3 and -4 (dnPFKFB-3 and dnPFKFB-4) cDNA for suppression of strongly enhanced expression endogenous PFKFB-3 and PFKFB-4. We introduce point mutation in ATP-binding domain of 6-phosphofructo-2-kinase part of PFKFB-3 as well as PFKFB-4 cDNA for suppression of 6-phosphofructo-2-kinase activity in the products of dnPFKFB-3 and dnPFKFB-4 expression. Cancer cells were stable transfected with these dominant-negative constructs for suppression of endogenous PFKFB-3 and PFKFB-4 expression and cell proliferation. We have shown that PFKFB-3 expression in pancreatic cancer cell line Panc1, stable transfected by dnPFKFB-3, was significantly reduced in normal as well as in hypoxic conditions. Pancreatic cancer cells proliferation, stable transfected by dnPFKFB-3 or dnPFKFB-4, was also reduced. Results of this investigation demonstrate possibility to apply the dominant-negative constructs of PFKFB-3 and PFKFB-4 for suppression of glycolysis and tumor cells proliferation via reduction of endogenous PFKFB expression. Експресія 6-фосфофрукто-2-кінази/фруктозо-2,6-бісфосфатази (PFKFB), ключового регуляторного ензиму гліколізу, різко зростає в різних злоякісних пухлинах, що розкриває можливий механізм посиленого гліколізу в ракових клітинах та їх проліферації. Ми створили домінантнегативні конструкції кДНК 6-фосфофрукто-2-кінази/фруктозо-2,6-бісфосфатази-3 та -4 (dnPFKFB-3 та dnPFKFB-4) для пригнічення посиленої експресії ендогенних PFKFB-3 та PFKFB-4. Для цього вводили точкові мутації в АТР-зв’язувальний домен 6-фосфофрукто-2-кінази як PFKFB-3, так і PFKFB-4 кДНК для пригнічення 6-фосфо-фрукто-2-кіназної активності у продуктах експресії цих конструкцій. Проводили трансфекцію ракових клітин цими домінантнегативними конструкціями для пригнічення експресії ендогенних PFKFB-3 і PFKFB-4 та проліферації клітин. Встановлено, що експресія PFKFB-3 в клітинах карциноми підшлункової залози лінії Panc1, стабільно трансфекованих dnPFKFB-3, знижується як у нормальних умовах, так і за гіпоксії. У клітинах з посиленою експресією dnPFKFB-4 спостерігали пригнічення ендогенних як PFKFB-4, так і PFKFB-3. Проліферація клітин карциноми підшлункової залози, стабільно трансфекованих як dnPFKFB-3, так і dnPFKFB-4, знижується. Результати цих досліджень показують можливість використання домінантнегативних конструкцій PFKFB-3 та PFKFB-4 для зменшення інтенсивності гліколізу та проліферації ракових клітин шляхом зниження експресії ендогенних PFKFB. Экспрессия 6-фосфофрукто-2-киназы/фруктозо-2,6-бисфосфатазы (PFKFB), ключевого регуляторного энзима гликолиза, резко возрастает в различных злокачественных опухолях, что раскрывает возможный механизм усиленного гликолиза в раковых клетках и их пролиферации. Мы создали доминантнегативные конструкции кДНК 6-фосфофрукто-2-киназы/фруктозо-2,6-бисфосфатазы-3 и -4 (dnPFKFB-3 и dnPFKFB-4) для угнетения усиленной экспрессии эндогенных PFKFB-3 и PFKFB-4. Для этого вводили точечные мутации в АТР-связывающий домен 6-фосфофрукто-2-киназы как PFKFB-3, так и PFKFB-4 для угнетения 6-фосфофрукто-2-киназной активности в продуктах экспрессии этих конструкций. Проводили трансфекцию раковых клеток этими доминантнегативными конструкциями для угнетения экспрессии эндогенных PFKFB-3, а также пролиферации клеток. Установлено, что экспрессия PFKFB-3 в клетках карциномы поджелудочной железы линии Panc1, стабильно трансфецированных dnPFKFB-3, снижается как в нормальных условиях, так и при гипоксии. В клетках с усиленной экспрессией dnPFKFB-4 наблюдали угнетение эндогенных как PFKFB-4, так и PFKFB-3. Пролиферация клеток карциномы поджелудочной железы, стабильно трансфецированных как dnPFKFB-3, так и dnPFKFB-4, снижается. Результаты этих исследований показывают возможность использования доминантнегативных конструкций PFKFB-3 и PFKFB-4 для уменьшения интенсивности гликолиза и пролиферации раковых клеток путем снижения экспрессии эндогенных PFKFB. 2008 Article Dominant-negative constructs of human 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase-3 and -4: effect on the expression of endogenous 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase mRNA / D.O. Minchenko, A.Y. Bobarykina, O.O. Ratushna, R.Y. Marunych, K. Tsuchihara, M. Moenner, J. Caro, H. Esumi, O.H. Minchenko // Біотехнологія. — 2008. — Т. 1, № 4. — С. 49-56. — Бібліогр.: 47 назв. — англ. 1995-5537 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/28152 577.112:616 en Біотехнологія Інститут біохімії ім. О.В. Палладіна НАН України |