Вплив N-стеароїлетаноламіну на апоптозні процеси в гормонально активних пухлинних тканинах кори надниркових залоз людини
Дослiджено вплив N-стеароїлетаноламiну (NSE) на експресiю проапоптозного бiлка Bax, активацiю каспази-3 та розщеплення полi(АДФ-рибозо) полiмерази в пухлиннiй тканинi кори надниркових залоз людини. Виявлено захисний, антиапоптозний ефект NSE в гормонально активних пухлинних тканинах. Розглянуто можл...
Збережено в:
| Дата: | 2010 |
|---|---|
| Автори: | , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Ukrainian |
| Опубліковано: |
Видавничий дім "Академперіодика" НАН України
2010
|
| Назва видання: | Доповіді НАН України |
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/29569 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Вплив N-стеароїлетаноламіну на апоптозні процеси в гормонально активних пухлинних тканинах кори надниркових залоз людини / Н. I. Левчук, В.М. Пушкарьов, М.Д. Тронько // Доп. НАН України. — 2010. — № 4. — С. 189-192. — Бібліогр.: 9 назв. — укр. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
irk-123456789-29569 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
irk-123456789-295692011-12-17T12:11:55Z Вплив N-стеароїлетаноламіну на апоптозні процеси в гормонально активних пухлинних тканинах кори надниркових залоз людини Левчук, Н.І. Пушкарьов, В.М. Тронько, М.Д. Медицина Дослiджено вплив N-стеароїлетаноламiну (NSE) на експресiю проапоптозного бiлка Bax, активацiю каспази-3 та розщеплення полi(АДФ-рибозо) полiмерази в пухлиннiй тканинi кори надниркових залоз людини. Виявлено захисний, антиапоптозний ефект NSE в гормонально активних пухлинних тканинах. Розглянуто можливi механiзми гальмування апоптозних процесiв у деяких типах пухлинних тканин кори надниркових залоз людини. The effects of N-stearoylethanolamine (NSE) on the proapoptotic protein Bax expression, caspase-3 activation, and poly(ADP-ribose) polymerase cleavage in tumor tissue of human adrenal cortex are studied. The protective antiapoptotic effect of NSE in hormonally active tumors of adrenal cortex is demonstrated. The possible mechanisms of the inhibition of apoptotic processes in some tumor tissues of human adrenal cortex are discussed. 2010 Article Вплив N-стеароїлетаноламіну на апоптозні процеси в гормонально активних пухлинних тканинах кори надниркових залоз людини / Н. I. Левчук, В.М. Пушкарьов, М.Д. Тронько // Доп. НАН України. — 2010. — № 4. — С. 189-192. — Бібліогр.: 9 назв. — укр. 1025-6415 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/29569 612.453.015 uk Доповіді НАН України Видавничий дім "Академперіодика" НАН України |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| language |
Ukrainian |
| topic |
Медицина Медицина |
| spellingShingle |
Медицина Медицина Левчук, Н.І. Пушкарьов, В.М. Тронько, М.Д. Вплив N-стеароїлетаноламіну на апоптозні процеси в гормонально активних пухлинних тканинах кори надниркових залоз людини Доповіді НАН України |
| description |
Дослiджено вплив N-стеароїлетаноламiну (NSE) на експресiю проапоптозного бiлка Bax, активацiю каспази-3 та розщеплення полi(АДФ-рибозо) полiмерази в пухлиннiй тканинi кори надниркових залоз людини. Виявлено захисний, антиапоптозний ефект NSE в гормонально активних пухлинних тканинах. Розглянуто можливi механiзми гальмування апоптозних процесiв у деяких типах пухлинних тканин кори надниркових залоз людини. |
| format |
Article |
| author |
Левчук, Н.І. Пушкарьов, В.М. Тронько, М.Д. |
| author_facet |
Левчук, Н.І. Пушкарьов, В.М. Тронько, М.Д. |
| author_sort |
Левчук, Н.І. |
| title |
Вплив N-стеароїлетаноламіну на апоптозні процеси в гормонально активних пухлинних тканинах кори надниркових залоз людини |
| title_short |
Вплив N-стеароїлетаноламіну на апоптозні процеси в гормонально активних пухлинних тканинах кори надниркових залоз людини |
| title_full |
Вплив N-стеароїлетаноламіну на апоптозні процеси в гормонально активних пухлинних тканинах кори надниркових залоз людини |
| title_fullStr |
Вплив N-стеароїлетаноламіну на апоптозні процеси в гормонально активних пухлинних тканинах кори надниркових залоз людини |
| title_full_unstemmed |
Вплив N-стеароїлетаноламіну на апоптозні процеси в гормонально активних пухлинних тканинах кори надниркових залоз людини |
| title_sort |
вплив n-стеароїлетаноламіну на апоптозні процеси в гормонально активних пухлинних тканинах кори надниркових залоз людини |
| publisher |
Видавничий дім "Академперіодика" НАН України |
| publishDate |
2010 |
| topic_facet |
Медицина |
| url |
http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/29569 |
| citation_txt |
Вплив N-стеароїлетаноламіну на апоптозні процеси в гормонально активних пухлинних тканинах кори надниркових залоз людини / Н. I. Левчук, В.М. Пушкарьов, М.Д. Тронько // Доп. НАН України. — 2010. — № 4. — С. 189-192. — Бібліогр.: 9 назв. — укр. |
| series |
Доповіді НАН України |
| work_keys_str_mv |
AT levčukní vplivnstearoíletanolamínunaapoptozníprocesivgormonalʹnoaktivnihpuhlinnihtkaninahkorinadnirkovihzalozlûdini AT puškarʹovvm vplivnstearoíletanolamínunaapoptozníprocesivgormonalʹnoaktivnihpuhlinnihtkaninahkorinadnirkovihzalozlûdini AT tronʹkomd vplivnstearoíletanolamínunaapoptozníprocesivgormonalʹnoaktivnihpuhlinnihtkaninahkorinadnirkovihzalozlûdini |
| first_indexed |
2025-07-03T09:48:21Z |
| last_indexed |
2025-07-03T09:48:21Z |
| _version_ |
1836618719291244544 |
| fulltext |
оповiдi
НАЦIОНАЛЬНОЇ
АКАДЕМIЇ НАУК
УКРАЇНИ
4 • 2010
МЕДИЦИНА
УДК 612.453.015
© 2010
Н. I. Левчук, В. М. Пушкарьов,
член-кореспондент НАН України М. Д. Тронько
Вплив N-стеароїлетаноламiну на апоптознi процеси
в гормонально активних пухлинних тканинах кори
надниркових залоз людини
Дослiджено вплив N-стеароїлетаноламiну (NSE) на експресiю проапоптозного бiлка Bax,
активацiю каспази-3 та розщеплення полi(АДФ-рибозо) полiмерази в пухлиннiй тканинi
кори надниркових залоз людини. Виявлено захисний, антиапоптозний ефект NSE в гор-
монально активних пухлинних тканинах. Розглянуто можливi механiзми гальмування
апоптозних процесiв у деяких типах пухлинних тканин кори надниркових залоз людини.
N-ацилетаноламiни (NAE) — клас бiологiчно активних речовин, молекули яких складаю-
ться з етаноламiну, сполученого iз залишком певної жирної кислоти, насиченої або ненаси-
ченої. NAE характеризуються широким спектром бiологiчних та фармакологiчних власти-
востей, найважливiшим з яких є їх захисна дiя при iшемiчних процесах, насамперед при
iнфарктi мiокарда [1]. Проте механiзм, за яким реалiзуються захиснi ефекти NAE щодо
пошкоджених тканин, залишається нез’ясованим. З iншого боку, була показана здатнiсть
цих сполук посилювати апоптоз, пригнiчувати пролiферацiю та мiграцiю пухлинних клi-
тин [1], що робить їх перспективними протипухлинними агентами.
У даному повiдомленнi наведено результати дослiдження впливу N-стеароїлетаноламiну
(NSE) на розвиток апоптозних процесiв у пухлинних клiтинах кори надниркових залоз
людини.
Дослiдження проводили на постоперацiйних тканинах, отриманих вiд хворих, про-
оперованих у хiрургiчному вiддiленнi ДУ “Iнститут ендокринологiї та обмiну речовин
iм. В.П. Комiсаренка АМН України”. На проведення дослiджень був одержаний дозвiл
вiд комiсiї Iнституту з питань бiоетики. Усього дослiджено сiм зразкiв пухлинних тканин,
якi за клiнiчними показниками виявились гормонально активними (альдостероми та кор-
тикостероми).
Зрiзи тканини (100 мг) завтовшки ∼ 0,5 мм iнкубували в 1 мл середовища 199 (Держав-
ний завод медичних препаратiв, Україна), що мiстило 10 мМ HEPES (pH 7,4) (“Calbiochem”,
США) та 2 мг/мл сироваткового альбумiну бика (“Serva”, Нiмеччина), при 37 ◦С протягом
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2010, №4 189
Рис. 1. Вплив NSE (10−6 М) на активацiю каспази-3 в гормонально активнiй пухлиннiй тканинi кори на-
дниркових залоз людини. а — результат iмуноблотингу (К — контроль); б — кiлькiсна оцiнка вмiсту каспа-
зи-3 (%); M ±m; n = 3. * — P < 0,05, вiрогiднi змiни щодо контролю (без NSE)
3 год у присутностi спиртового розчину NSE (N-стеароїлетаноламiн 18 : 0, Iнститут бiохiмiї
iм. О.В. Палладiна НАН України) у кiнцевiй концентрацiї 10−6 М. Контрольна проба мiс-
тила етиловий спирт у вiдповiднiй концентрацiї, яка не перевищувала 1%. Пiсля iнкубацiї
зрiзи тканини гомогенiзували в холодному буферi, який мiстив 25 мМ трис-HCl (pH 7,4),
1 мМ ЕГТА, 1 мМ ЕДТА, 1 мМ лейпептин, 10 мМ 2-меркаптоетанол, 0,5% тритон Х-100.
Роздiлення бiлкiв у полiакриламiдному гелi виконували за методом Леммлi [2], iмуно-
блотинг — за ранiше описаною методикою [3]. При проведеннi вестерн-блотингу викорис-
товували такi антитiла: моноклональнi антитiла до Bax, каспази-3 та полi(АДФ-рибозо)
полiмерази (ПАРП) вiд “Cell Signaling Technology” (США). Комплекси бiлкiв з антитiлами
вiзуалiзували за допомогою реагенту ECL (“Sigma”, CША).
Iнкубацiю тканин, видiлення ДНК, електрофорез ДНК в агарозному гелi проводили
як описано в роботi [4]. Для визначення iнтенсивностi фрагментацiї ДНК зрiзи тканин
iнкубували в присутностi NSE у кiнцевiй концентрацiї 10−8–10−4 М.
Статистичну обробку даних проводили за Стьюдентом.
Ранiше нами було показано, що гормонально активнi пухлини є стiйкiшими до дiї канце-
ростатичних препаратiв порiвняно з гормонально неактивними [5]. Щоб з’ясувати можли-
вий механiзм такої резистентностi, ми вивчали дiю NAE, а саме NSE, що мiстить насичений
ацильний залишок, на ключовi етапи розвитку апоптозних процесiв.
Проапоптозний бiлок Вах, який впливає на стабiльнiсть мiтохондрiальної мембрани,
вiдiграє значну роль в iнiцiацiї апоптозу. Виявилось, що пiд впливом NSE експресiя цього
бiлка вiрогiдно зменшується (не показано).
Одним з найважливiших етапiв апоптозу є активацiя каспази-3, яка вважається голов-
ною ефекторною каспазою. Виявлено, що кiлькiсть активованої каспази-3 помiтно зменшу-
ється в присутностi NSE (рис. 1).
Найбiльш показовим процесом, що характеризує динамiку апоптозних процесiв у клiти-
нi, є розщеплення ПАРП — одного iз субстратiв каспаз. Завдяки тому, що iнтактний бiлок
190 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2010, №4
Рис. 2. Вплив NSE (10−6 М) на розщеплення ПАРП в гормонально активнiй пухлиннiй тканинi кори на-
дниркових залоз людини. а — результат iмуноблотингу (К — контроль); б — оцiнка кiлькостi iнтактного
ПАРП з молекулярною масою 116 кДа (бiлi стовпчики) та його фрагмента з масою 89 кДа (заштрихованi
стовпчики); M ±m; n = 3. * — P < 0,05, вiрогiднi змiни щодо контролю (без NSE)
та його бiльший фрагмент є близькими за масою, можна одночасно спостерiгати збiльшення
кiлькостi останнього та зменшення кiлькостi iнтактного ПАРП. Одержанi нами данi свiд-
чать про захисний ефект NSE щодо деградацiї ПАРП: кiлькiсть iнтактного бiлка вiрогiдно
збiльшується, а його фрагмента — зменшується (рис. 2).
Антиапоптозний ефект NSE виявляється i на рiвнi фрагментацiї ДНК, яка є однiєю з фi-
нальних стадiй апоптозу. У присутностi всiх дослiджених концентрацiй NSE фрагментацiї
ДНК не спостерiгалось (не показано).
Таким чином, захисна, антиапоптозна дiя NSE виражена на всiх дослiджених стадiях
апоптозу. Механiзми, що опосередковують цi захиснi ефекти, поки що невiдомi. Рiвень NAE
помiтно зростає при дегенерацiї тканин та клiтин в умовах стресу. Так, NAE i їх попередни-
ки — N -ацилфосфатидилетаноламiн, накопичуються при пошкодженнi мозкової тканини i
у постмортальнiй тканинi, їх кiлькiсть значно пiдвищується при дiї CdCl2 на сiм’яники щу-
рiв, пiд дiєю iндукованого азидом натрiю пошкодження клiтин в культивованих нейронах
нової кори, при iндукованiй глютаматом цитотоксичностi щодо нейронiв, при опромiненнi
ультрафiолетом епiдермальних клiтин, при фокальнiй iшемiї головного мозку, в моделях
хвороби Альцгеймера i Паркiнсона та пiд впливом оксидативного стресу в дрiжджах [1].
Пiдвищений рiвень NAE пов’язаний з клiтинною смертю нейронiв як через апоптоз, так
i через некротичнi процеси [6]. Саме на пiдставi цих фактiв можна зробити висновок про
захиснi властивостi NAE.
Оскiльки NAE посилюють апоптоз у гормонально неактивних пухлинах надниркових за-
лоз [4], основною причиною стiйкостi гормонально активних пухлин може бути пiдвищений
рiвень стероїдiв у цих пухлинах. Антиапоптознi ефекти стероїдних гормонiв добре вiдомi [7].
Iншою причиною може бути залишковий антиапоптозний ефект кортикотропiну — одного
з важливих стимуляторiв стероїдогенезу в корi надниркових залоз [8]. Iмовiрним внутрiш-
ньоклiтинним механiзмом антиапоптозної дiї NАЕ може бути активацiя цими сполуками
ERK1/2, якi пов’язанi здебiльшого з пролiферативними процесами [9].
1. Pushkarev V.M., Kovzun O. I., Tronko M.D. Antineoplastic and apoptotic effects of cannabinoids. N-acyl-
ethanolamines: protectors or killers? // Exp. Oncol. – 2008. – 30, No 1. – P. 6–21.
2. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 //
Nature. – 1970. – 227. – P. 680–685.
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2010, №4 191
3. Berdyshev E.V., Schmid P.C., Dong Z., Schmid H.O. Stress-induced generation of N-acylethanolamines
in mouse epidermal JB6 P+ cells // Biochem J. – 2000. – 346. – P. 369–374.
4. Kostyuchenko N., Pushkarev V., Kashevarov G. et al. Effects of N-acylethanolamines and various anti-
mitotic agents on apoptotic DNA fragmentation in conventionally normal and tumor tissue of human
adrenals // Exp. Oncol. – 2005. – 27, No 3. – P. 215–219.
5. Левчук Н. I., Пушкарьов В.М., Ковзун О. I., Тронько М.Д. Вплив таксолу на апоптозну фрагмента-
цiю ДНК в позапухлинних та пухлинних тканинах надниркових залозах людини // Ендокринологiя. –
2009. – 14, № 1. – С. 126–133.
6. Hansen H.H., Ikonomidou C., Bittigau P. et al. Accumulation of the anandamide precursor and other
N-acylethanolamine phospholipids in infant rat models of in vivo necrotic and apoptotic neuronal death //
J. Neurochem. – 2001. – 76. – P. 39–46.
7. Fan W. Possible mechanisms of paclitaxel-induced apoptosis // Biochem. Pharmacol. – 1999. – 57. –
P. 1215–1221.
8. Регулятори функцiї кори надниркових залоз / За ред. М.Д. Тронька, О С. Микошi, О. I. Ковзун,
В.М. Пушкарьова. – Київ: ТОВ “Доктор-Медiа”. Видавничий дiм “Здоров’я України”, 2009. – 244 с.
9. Berdyshev E.V., Schmid P. C., Krebsbach R. J. et al. Cannabinoid-receptor-independent cell signalling by
N-acylethanolamines // Biochem. J. – 2001. – 360. – P. 67–75.
Надiйшло до редакцiї 24.10.2009Державна установа “Iнститут ендокринологiї
та обмiну речовин iм. В.П. Комiсаренка
АМН України”, Київ
N. I. Levchuk, V. M. Pushkarev,
Corresponding Member of the NAS of Ukraine M. D. Tronko
The effect of N-stearoylethanolamine on the apoptotic processes in
hormonally active tumor tissues of adrenal cortex
The effects of N-stearoylethanolamine (NSE) on the proapoptotic protein Bax expression, caspase-3
activation, and poly(ADP-ribose) polymerase cleavage in tumor tissue of human adrenal cortex are
studied. The protective antiapoptotic effect of NSE in hormonally active tumors of adrenal cortex
is demonstrated. The possible mechanisms of the inhibition of apoptotic processes in some tumor
tissues of human adrenal cortex are discussed.
192 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2010, №4
|