Одержання рекомбінантного аналога білка р24 вірусу BLV

• Дата: 2008
• Автори: Коновалова, А.М., Кобозєв, Ю.А., Грабченко, Н.І., Ганова, Л.О.
• Формат: Стаття
• Мова: Ukrainian
• Опубліковано: Інститут біохімії ім. О. В. Палладіна НАН України 2008
• Теми: Експериментальні статті
• Онлайн доступ: http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/4063
• Назва журналу: Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
• Цитувати: Одержання рекомбінантного аналога білка р24 вірусу BLV / А. М. Коновалова, Ю. А. Кобозєв, Н. І. Грабченко, Л. О. Ганова // Біотехнологія. — 2008. — Т. 1, № 1. — С. 100-105. — Бібліогр.: 5 назв. — укр.

Розроблено високоефективну технологію одержання рекомбінантного аналога білка р24 вірусу бичачої лейкемії з підтвердженими методом імуноферментного аналізу (ІФА) антигенними властивостями. У процесі досліджень відібрано найкращий штамм-реципієнт E. coli BL21(DE3) CodonPlus-RIL для інтродукції рекомбінантної плазміди, оптимізовано склад живильного середовища для культивування продуцента. Розроблено методику проведення металохелатафінного хроматографічного очищення та рефолдингу рекомбінантного білка. Як критерій для оцінки ефективності кожного етапу застосовували ІФА, за допомогою якого контролювали антигенні характеристики рекомбінантного білка. Встановлено, що вид штамму-продуцента та склад живильного середовища впливають на продуктивність і розподіл рекомбінантного білка у клітині між цитоплазматичною та нерозчинною фракціями. Розроблена технологія дає змогу одержувати препарати білка зі ступенем чистоти 98% та поліпшеними антигенними властивостями, що дозволяє використовувати його для підвищення специфічності та чутливості імуноферментних діагностичних тестсистем для виявлення збудника бичачої лейкемії.