Оцінка ефективності дослідної установки для одержання інтерферонів І типу

Описано експериментальну установку з програмованою дією для культивування клітин та здійснення ними індукованого біосинтезу інтерферонів (ІФН) типу І за допомогою розроблених раніше частинок іммобілізованого комплексного індуктора (ІММК) багаторазової дії. Показано її ефективність у разі культивуван...

Повний опис

Збережено в:

Бібліографічні деталі
Дата:	2008
Автори:	Пенчук, Ю.М., Карпов, О.В., Поводзинський, В.М., Верьовка, С.В., Ульберг, З.Р.
Формат:	Стаття
Мова:	Ukrainian
Опубліковано:	Інститут біохімії ім. О. В. Палладіна НАН України 2008
Теми:	Експериментальні статті
Онлайн доступ:	http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/4068
Теги:	Додати тег Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:	Оцінка ефективності дослідної установки для одержання інтерферонів І типу / Ю. М. Пенчук, О. В. Карпов, В.М. Поводзинський, С. В. Верьовка, З. Р. Ульберг // Біотехнологія. — 2008. — Т. 1, № 1. — С. 80-85. — Бібліогр.: 14 назв. — укр.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	irk-123456789-4068
record_format	dspace
spelling	irk-123456789-40682013-02-13T02:11:20Z Оцінка ефективності дослідної установки для одержання інтерферонів І типу Пенчук, Ю.М. Карпов, О.В. Поводзинський, В.М. Верьовка, С.В. Ульберг, З.Р. Експериментальні статті Описано експериментальну установку з програмованою дією для культивування клітин та здійснення ними індукованого біосинтезу інтерферонів (ІФН) типу І за допомогою розроблених раніше частинок іммобілізованого комплексного індуктора (ІММК) багаторазової дії. Показано її ефективність у разі культивування як моношарових, так і суспензійних клітин<продуцентів ІФН. Вивчено фізіологічні умови культивування клітин обох типів в установці. Зроблено висновок щодо доцільності використання установок такого типу для одержання біологічно активних речовин в умовах застосування даної технології. Описана экспериментальная установка с программированным действием для культивирования клеток и осуществления ими индуцированного биосинтеза интерферонов (ИФН) І типа с помощью разработанных ранее частиц иммобилизованного комплексного индуктора (ИММК) многоразового действия. Показана ее эффективность при культивировании как монослойных, так и суспензионных клеток-продуцентов ИФН. Изучены физиологические условия культивирования клеток обоих типов в установке. Сделан вывод о целесообразности использования установок такого типа для получения биологически активных веществ в условиях применения данной технологии. The authors describe an experimental device with computer assisted action for cell cultivation and induced type I interferon (IFN) synthesis. The device is based on the use of previously elaborated particles bearing an immobilized complex inductor of repeated action. The device is shown to be effective for cultivation of both monolayer and suspended cells producing the IFN. Physiological conditions of both cell types cultivation are investigated. The authors conclude their device to be useful for obtaining of biologically active substances by this technology. 2008 Article Оцінка ефективності дослідної установки для одержання інтерферонів І типу / Ю. М. Пенчук, О. В. Карпов, В.М. Поводзинський, С. В. Верьовка, З. Р. Ульберг // Біотехнологія. — 2008. — Т. 1, № 1. — С. 80-85. — Бібліогр.: 14 назв. — укр. http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/4068 578.245:577.1113.7:57.086.833 uk Інститут біохімії ім. О. В. Палладіна НАН України
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
language	Ukrainian
topic	Експериментальні статті Експериментальні статті
spellingShingle	Експериментальні статті Експериментальні статті Пенчук, Ю.М. Карпов, О.В. Поводзинський, В.М. Верьовка, С.В. Ульберг, З.Р. Оцінка ефективності дослідної установки для одержання інтерферонів І типу
description	Описано експериментальну установку з програмованою дією для культивування клітин та здійснення ними індукованого біосинтезу інтерферонів (ІФН) типу І за допомогою розроблених раніше частинок іммобілізованого комплексного індуктора (ІММК) багаторазової дії. Показано її ефективність у разі культивування як моношарових, так і суспензійних клітин<продуцентів ІФН. Вивчено фізіологічні умови культивування клітин обох типів в установці. Зроблено висновок щодо доцільності використання установок такого типу для одержання біологічно активних речовин в умовах застосування даної технології.
format	Article
author	Пенчук, Ю.М. Карпов, О.В. Поводзинський, В.М. Верьовка, С.В. Ульберг, З.Р.
author_facet	Пенчук, Ю.М. Карпов, О.В. Поводзинський, В.М. Верьовка, С.В. Ульберг, З.Р.
author_sort	Пенчук, Ю.М.
title	Оцінка ефективності дослідної установки для одержання інтерферонів І типу
title_short	Оцінка ефективності дослідної установки для одержання інтерферонів І типу
title_full	Оцінка ефективності дослідної установки для одержання інтерферонів І типу
title_fullStr	Оцінка ефективності дослідної установки для одержання інтерферонів І типу
title_full_unstemmed	Оцінка ефективності дослідної установки для одержання інтерферонів І типу
title_sort	оцінка ефективності дослідної установки для одержання інтерферонів і типу
publisher	Інститут біохімії ім. О. В. Палладіна НАН України
publishDate	2008
topic_facet	Експериментальні статті
url	http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/4068
citation_txt	Оцінка ефективності дослідної установки для одержання інтерферонів І типу / Ю. М. Пенчук, О. В. Карпов, В.М. Поводзинський, С. В. Верьовка, З. Р. Ульберг // Біотехнологія. — 2008. — Т. 1, № 1. — С. 80-85. — Бібліогр.: 14 назв. — укр.
work_keys_str_mv	AT penčukûm ocínkaefektivnostídoslídnoíustanovkidlâoderžannâínterferonívítipu AT karpovov ocínkaefektivnostídoslídnoíustanovkidlâoderžannâínterferonívítipu AT povodzinsʹkijvm ocínkaefektivnostídoslídnoíustanovkidlâoderžannâínterferonívítipu AT verʹovkasv ocínkaefektivnostídoslídnoíustanovkidlâoderžannâínterferonívítipu AT ulʹbergzr ocínkaefektivnostídoslídnoíustanovkidlâoderžannâínterferonívítipu
first_indexed	2025-07-02T07:18:36Z
last_indexed	2025-07-02T07:18:36Z
_version_	1836518701640187904
fulltext	80 У зв’язку з широким використанням у сучасній лікарській практиці препаратів інтерферонів (ІФН) досить актуальним є вдосконалення технології одержання їх в умовах великомасштабного виробництва. Ключовим етапом біосинтезу природного ІФН є процес індукції, тобто позаклітинної активації відповідних генів клітин<проду< центів [1], що культивуються в умовах in vitro як у флаконах, так і в спеціальних ус< тановках, подібних до мікробіологічних ферментерів [2,3]. Нещодавно нами запро< поновано принципово новий індуктор ІФН І типу — молекулярний комплекс дріжджо< ва РНК–гідрохлорид тилорону, іммобілізо< ваний на гранулах сферону (ІММК) [4,5]. ІММК має суттєві переваги перед індуктора< ми, які застосовують зараз у виробництві природного ІФН типу І [6]. Однак викорис< тання ІММК потребує деякої модифікації процесу ролерного біосинтезу ІФН, що є най< поширенішим в Україні. Тому метою даної роботи стало розроблення відповідного апа< ратурного оформлення біосинтезу ІФН із застосуванням ІММК як індуктора. Для вивчення відповідності сконструйо< ваної нами дослідної установки меті й зав< данням зазначеної технології було проведе< но такі дослідження: 1 — загальна оцінка ефективності культивування клітин і біо< синтезу ІФН у дослідній установці порівня< но зі стаціонарними умовами культивуван< ня; 2 — експериментальне визначення співвідношення робочого об’єму клітинної суспензії і загального об’єму місткості для культивування, оптимального для моноша< рової та суспензійної культур. Матеріали і методи Клітини[продуценти ІФН. Досліди про< водили на перещеплюваній лінії клітин тес< тикулів поросят (ПТП), отриманій з НДІ ве< теринарії УААН (моношарова культура), а також на первинній культурі мононукле< арних клітин людини (суспензійна культу< ра), які виділяли з периферійної крові групи І(0) у градієнті фікол<урографін (р = 1,077) за стандартною методикою [7]. Культиву< вання клітин як у дослідній установці, так ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНІ СТАТТІ Описано експериментальну установку з програмованою дією для культивування клітин та здійснення ними індукованого біосинтезу інтерферонів (ІФН) типу І за допомогою розроблених раніше частинок іммобілізовано< го комплексного індуктора (ІММК) багаторазової дії. Показано її ефективність у разі культивування як моноша< рових, так і суспензійних клітин<продуцентів ІФН. Вивчено фізіологічні умови культивування клітин обох типів в установці. Зроблено висновок щодо доцільності використання установок такого типу для одержання біологічно активних речовин в умовах застосування даної технології. УДК 578.245:577.1113.7:57.086.833 ОЦІНКАОЦІНКА ЕФЕКТИВНОСТІ ЕФЕКТИВНОСТІ ДОСЛІДНОЇ УСТАНОВКИ ДЛЯ ОДЕРЖАННЯДОСЛІДНОЇ УСТАНОВКИ ДЛЯ ОДЕРЖАННЯ ІНТЕРФЕРОНІВ І ТИПУ ІНТЕРФЕРОНІВ І ТИПУ Ключові слова: інтерферон, індуктор, іммобілізація, сферон, культура клітин, ролерне культивування, мононуклеари. Ю. М. Пенчук1 1Національний університет харчових технологій, Київ О. В. Карпов1 2Інститут біохімії ім. О. В. Палладіна НАН України, Київ В. М. Поводзинський1 3Інститут отоларингології ім. О. С. Коломійченка АМН України, Київ С. В. Верьовка2, 3 4Інститут біоколоїдної хімії ім. Ф. Д. Овчаренка НАН України, Київ З. Р. Ульберг4 E$mail: penchuk$yuri@yandex.ru Експериментальні статті 81 і в стаціонарних умовах здійснювали відпо< відно до загальноприйнятого методу [8], ви< користовуючи живильне середовище 199 (НВП «Біо<Тест<Лабораторія», Україна) з додаванням 5–10% ембріональної сироват< ки телят (Serva, Німеччина), 25 мМ/мл HEPES (Serva), 10 мМ/мл L<глютаміну та антибіотиків пеніциліну, стрептоміцину або канаміцину в загальноприйнятих дозах при 37 0С і 5%<му вмісті двооксиду вуглецю в га< зовій фазі. У випадку суспензійної культури (мононуклеари) в місткості для культиву< вання попередньо вносили завись клітин у концентрації приблизно 106–5·106 кл./мл. У разі культивування моношарової культу< ри клітини ПТП перед внесенням ІММК підрощували в місткостях для культивування протягом однієї доби на середовищі з 10%<ї сироватки великої рогатої худоби (НВП «Біо<Тест<Лабораторія», Україна) для утво< рення суцільного моношару на внутрішній поверхні стінок місткостей. Клітинну масу мононуклеарних лейко< цитів відмивали розчином версену, доводи< ли до відповідної концентрації живильним середовищем і вносили в місткості для куль< тивування. Моношарову культуру вносили безпосередньо в місткості для культивування, після чого проводили підрощування культу< ри з метою утворення суцільного моношару. Швидкість обертання вала в цьому разі ста< новила 12 об/год у перші дві години для закріплення клітин на поверхні флаконів та 5 об/хв — при подальшому культивуванні. Після цього відпрацьоване середовище зли< вали й замінювали новим з додаванням ін< дуктора. ІММК (інтерфероногенний молекулярний комплекс) — це конструкція на основі гранул сферону 300 (Spheron 300 (LC) 63–100 µm, Lachema, Чехія), до яких ковалентно приєд< нуються молекули одноланцюгової дріжджо< вої РНК (НПО «Біохімреактив», Латвія), інтеркальовані гідрохлоридом тилорону (Sigma, США). Приготування ІММК деталь< но описано нами раніше [4–6]. ІММК вноси< ли в місткості у співвідношенні 0,1 мл зависі ІММК /1,5 мл робочого об’єму місткості, клітини<продуценти — у концентрації 5·106 кл./мл. Дослідна установка. Схему створеної на< ми дослідної установки наведено на рис. 1. В основу її дії покладено принцип ролерного перемішування горизонтально закріплених місткостей для культивування. Установку конструювали як універсальну для культи< вування як моношарових, так і суспензій< них культур. Установку зібрано на базі редукційного електродвигуна з максимальною швидкістю обертання вала 60 об/год. На валу двигуна розташований диск з отворами, в яких закріп< люють місткості для культивування — скляні флакони об’ємом 15 мл, площа внутрішньої поверхні яких становить 28 см2. Флакони закривають корками із силіконової гуми і за< кріплюють у перфорованому диску, фіксую< чи їх спеціальним фіксатором — гумовим кільцем із зовнішнім діаметром 30 мм, внут< рішнім — 12 мм, завтовшки 3–4 мм, розмі< щеним на горловині флакона. Для підтримання температури на певно< му рівні установку розміщують у термоста< ті. Як датчик температури використовують термометр опору ТСП<5071 (Росія), а як дат< чик обертів — магнітний датчик VDO 804/6/10 (Чехія). Точність підтримання температури в установці дорівнює ±0,1 °С, а швидкість обертання вала, на якому мі< ститься робочий диск, — ±0,1 об/год від за< даної швидкості. Для регулювання процесу біосинтезу ІФН установку оснащено електронним бло< ком керування на базі двох мікроконтроле< рів, один з яких запрограмовано на керування швидкістю обертання диска та температу< рою інкубації, а другий — для запису цих параметрів у поточному режимі культиву< вання клітин<продуцентів та накопичення ІФН у пам’яті комп’ютера. Зв’язок електронного блока керування з комп’ютером відбувається через СОМ<порт за допомогою інтерфейсного блока, зібрано< го на базі мікросхеми МАХ 233. Контроль за технологічним процесом та введення згаданих параметрів культивування здійснювалось комп’ютером за допомогою програми BioTech v.1, розробленої спеціаль< но для виконання цієї роботи. Рис. 1. Схема дослідної ролерної установки для культивування клітин та біосинтезу ІФН Датчик температури Комп’ютер Кабель комутаційний Електронний блок керування Датчик обертів Установка для культивування Термостат БІОТЕХНОЛОГІЯ, Т. 1, №1, 2008 82 Визначення життєздатності клітин у культурах здійснювали методом виклю< чення барвника живими клітинами під час фарбування 0,1%<м розчином трипанового синього в ізотонічному розчині NaCl. Підра< хунок пофарбованих і непофарбованих клі< тин проводили в гемоцитометрі за стандарт< ною методикою [9]. Титрування ІФН у зразках виконували за стандартною методикою [10], використо< вуючи як тест вірус везикулярного стомати< ту (штам Індіана) у дозі 100 ТЦД50. Результати та обговорення Головним завданням даної роботи була оцінка ефективності культивування клітин і біосинтезу ІФН у дослідній установці в по< рівнянні зі стаціонарними умовами культи< вування. Оскільки таке культивування відбу< вається в умовах контакту клітин із частинками ІММК, важливо було простежити вплив цих частинок на загальну життєздатність клі< тин<продуцентів. Для ефективного біосин< тезу ІФН такими клітинами важливим є підтримання ними високої життєздатності протягом усього періоду інтерфероногенезу. Клітини ссавців, як правило, більші за мік< роорганізми і не мають типових для остан< ніх клітинних стінок, які забезпечують їх< ню механічну стійкість. Будь<які механічні зрушення, що відбуваються під час масо< обмінних процесів у середовищі культиву< вання, негативно впливають на такі клітини [2,11,12]. У разі застосування ІММК як ком< понента рідкої фази, що покриває моношар субстратзалежних клітин<продуцентів і здійс< нює певний рух уздовж цього моношару, те< оретично може відбуватись як деяке пригні< чення життєздатності клітин (механічне пошкодження, зниження поглинальної здат< ності внаслідок зменшення ефективної по< верхні клітин при створенні стабільного контакту з частинками ІММК), так і підви< щення їхньої життєздатності (що є резуль< татом інтенсифікації процесу мікроперемі< шування живильного середовища відносно моношару частинками ІММК). Аналогічних наслідків слід очікувати й у випадку суспензій< них культур клітин. Таким чином, для запро< понованої технології питання щодо життєздат< ності клітин<продуцентів ІФН стає ключовим. Дані відповідних дослідів, проведених на обох типах клітинних культур, наведено на рис. 2, a, б. З’ясовано, що культивування в дослід< ній установці значною мірою сприяє збере< женню життєздатності клітин<продуцентів порівняно з таким процесом у стаціонарних умовах. Так, у випадку моношарової культу< ри (рис. 2, а) кількість клітин збільшується під час культивування в установці приблиз< но в 1,5 раза порівняно з вихідною концент< рацією клітин, а в стаціонарних умовах змен< шується, досягаючи нульового значення на 8<му годину культивування. У разі суспен< зійної культури мононуклеарних клітин крові людини (рис. 2, б) на 8<му годину куль< тивування у стаціонарних умовах кількість клітин зменшується майже в 4 рази порівня< но з культивуванням у дослідній установці. Дані щодо кількості ІФН, синтезованого клітинами<продуцентами в дослідних умо< вах, підтверджують попередній висновок (рис. 3, а, б). Рис. 2. Вплив умов культивування клітин6продуцентів ІФН із додаванням ІММК на життєздатність клітин: a — моношарова культура (ПТП); б — суспензійна культура (мононуклеарні кліти< ни крові людини); 1 — стаціонарні умови; 2 — культивування в дослідній установці Експериментальні статті 83 Культивування обох досліджуваних нами типів культур клітин в установці приводить до накопичення ІФН у значно вищих тит< рах, ніж за стаціонарних умов. Таким чином, динамічні умови культивування обох типів культур, які забезпечуються в установці, дозволяють суттєво збільшити як життє< здатність клітин<продуцентів, так і відпо< відно кількість синтезованого ними ІФН. Вирішальними факторами забезпечення життєдіяльності клітин ссавців зазвичай вважають оптимальний температурний ре< жим, рівень рН середовища (параметри, практично незалежні від конструктивних особливостей апаратів для культивування), а також забезпечення киснем [12, 13]. Однак умови культивування еукаріотичних клітин не вичерпуються переліченими і багато в чо< му визначаються типом застосовуваного біореактора, його геометричними парамет< рами, видом енергії, яка підводиться, скла< дом живильного середовища тощо. Форма і об’єм місткостей для культивування клітин є досить суттєвими факторами, що впливають на ріст клітин у культурі, оскільки вони до певної міри визначають забезпечення клі< тин киснем і рівень рН шарів середовища, які безпосередньо оточують клітини, особли< во у випадку моношарових культур [11,12]. Серед доступних нам місткостей ми зу< пинилися на скляних циліндричних флако< нах, які використовують у фармацевтичній промисловості для упакування антибіоти< ків, оскільки поверхня закріплення моно< шарових клітинних ліній в них є достатньою для накопичення клітинного матеріалу, не< обхідного для максимального продукування ІФН. У разі застосування скляного посуду легко забезпечується його стерильність та можливість багаторазового використання. При культивуванні клітин в установках ролерного типу, як, власне, й в інших, міст< кості для культивування заповнюють жи< вильним середовищем не повністю з метою збільшити зону контакту клітинного мате< ріалу із цим середовищем, а також наситити середовище киснем без використання інтен< сивних масообмінних процесів [14]. Співвідношення робочого об’єму суспен< зії клітин в місткості для культивування і за< гального об’єму цієї місткості є одним із клю< чових параметрів культивування клітин у культурах, оскільки саме від цього спів< відношення залежать кількість кінцевого продукту та швидкість накопичення клітин< ного матеріалу у випадку моношарових клітинних ліній. Виходячи з попередньо за< даних параметрів геометричного об’єму місткостей для культивування клітин та площі вільної поверхні флакона, на якому закріплюються клітини (15 мл та 28 см2 від< повідно), ми дослідно підбирали оптимальне співвідношення робочого об’єму суспензії клітинного матеріалу та індуктора (VP) і за< гального об’єму місткості для культивуван< ня (VЗ). Для конкретних умов нашої уста< новки це співвідношення становило VP/VЗ = 1/10. Таке співвідношення зазначених об’ємів забезпечує ефективну підтримку клітин<про< дуцентів у життєздатному стані впродовж усього процесу інтерфероногенезу завдяки достатній кількості живильних компонен< тів та відсутності їх інгібування продуктами життєдіяльності клітин. Культивування суспензії лейкоцитів не передбачає попереднього підрощування цих клітин, а той чи інший індуктор вноситься до місткостей для культивування одночасно з клітинною суспензією. Таким чином, культивування клітин у цьому разі зводилося до виконання таких етапів: 1) приготування зависі лейкоцитів із середньою концентрацією 2–4·108 кл./мл; 2) внесення клітинної зависі (об’ємом 1,5 мл) та живильного середовища певного складу в місткості для культивуван< ня; 3) індукції ІФН шляхом внесення індук< торів в ємності з клітинами; 4) власне біосинтезу ІФН. Моношарову культуру перед внесенням індукторів підрощували в місткостях для культивування протягом однієї доби на се< редовищі з 10%<ї сироватки великої рогатої худоби для утворення суцільного моношару на внутрішній поверхні стінок місткостей. Рис. 3. Вплив умов культивування клітин6продуцентів ІФН із додаванням ІММК на кількість синтезованого ІФН: — культивування в дослідній установці; — стаціонарні умови культивування БІОТЕХНОЛОГІЯ, Т. 1, №1, 2008 84 Одержання препаратів ІФН складалося з таких етапів: 1) приготування зависі клі< тин<продуцентів; 2) внесення клітинної за< висі та живильних компонентів у місткості для культивування; 3) закріплення та підро< щування клітин; 4) заміни живильного сере< довища; 5) індукції інтерфероногенезу шляхом внесення індукторів у місткості з клітина< ми; 6) власне біосинтезу ІФН. Попередньо вирощені у скляних флако< нах об’ємом 500 мл з використанням середо< вища 199 із 10%<ї сироватки великої рогатої худоби моношарові клітинні лінії обробля< ли 0,02%<м розчином версену, витримували протягом 10 хв, після чого версен зливали. У флакон додавали невелику кількість сере< довища 199 із 10%<ї сироватки великої рога< тої худоби та змивали клітини піпетуванням. Необхідну концентрацію клітин одержува< ли, додаючи живильне середовище зазначе< ного складу. Потім суспензію клітин у живильному середовищі з додаванням сироватки великої рогатої худоби вносили до флаконів (об’єм суспензії дорівнював 1,5 мл). Для одержан< ня суцільного моношару клітини культиву< вали протягом 24 год. Після утворення суцільного моношару на внутрішній поверхні місткостей для культивування відпрацьоване живильне се< редовище замінювали на нове такого самого складу. Одночасно з новим середовищем вносили ІММК. На результати цього етапу культивуван< ня суттєво впливає правильна орієнтація місткостей для культивування відносно площини диска, оскільки при похибці від< бувається нерівномірний розподіл клітин уздовж внутрішньої поверхні місткостей. У такому разі площа клітинного моношару зменшується, що призводить до відповідно< го зниження виходу синтезованого ІФН. Ко< рекцію кута нахилу місткостей здійснювали за допомогою фіксатора. У випадку ж сус< пензійної культури нахил флакона не впли< вав на вихід ІФН. Таким чином, наведені результати дослі< джень свідчать про переваги застосування ролерної установки порівняно зі стаціонар< ним культивуванням клітин у специфічних умовах використання ІММК як індуктора інтерфероногенезу. Вважаємо, що подальші дослідження в цьому напрямі дозволять створити ґрунтовну експериментальну базу для впровадження зазначеної технології у фармацевтичне виробництво. 1. Ho M. Induction and inducers of interferon. // Interferon 1. General and applied aspects / Ed. A. Billiau — Amsterdam — N.Y. — Oxford: Elsevier, 1984. — P. 79–124. 2. Ryu D. D., Nam D. H. Recent progress in bio< molecular engineering // Biotechnol. Prog. — 2000. — V. 16 — P. 2–16. 3. Kretzmer G. Industrial processes with ani< mal cells // Appl. Microbiol. Biotechnol. — 2002 — V. 59, N2–3. — P. 135–142. 4. Карпов О. В., Верьовка С. В., Манджос О. П. та ін. Індукція інтерферонів І типу в умо< вах in vitro за допомогою іммобілізованого комплексного інтерфероногену // Доп. НАН України. — 2003. — №9 — С. 178–181. 5. Жолобак Н. М., Манджос А. П., Веревка С. В. и др. Интерфероногенное действие иммо< билизованных рибополинуклеотидов in vitro // Укр. биохим. журн. — 2003. — Т. 75, №6 — С. 106–110. 6. Карпов А. В., Пенчук Ю. Н., Веревка С. В. Применение иммобилизованных индукто< ров в технологии получения природных интерферонов І типа в культурах клеток. Использование гранулярных носителей // Биотехнология. — 2006. — №1. — С. 3035. 7. Иммунологические методы исследований / Под ред. И. Лефковитса и Б. Перниса — М.: Мир, 1988. — С. 232–240. 8. Культуры животных клеток / Под ред. Д. Фреши — М.: Мир, 1989. — 332 с. 9. Doyle A., Griffiths J. Cell and Tissue Culture: Laboratory Procedures in Biotecnology. — John Willey and Sons, 1998. — 332 p. 10. Ершов Ф. И., Новохатский А. С. Интерфе< рон и его индукторы. — М.: Медицина, 1980. — 193 с. 11. Oka M. S., Rupp R. G. Large<scale animal cell culture: a biological perspective // Biopro< cess Technol. — 1990. — V. 10 — Р. 71–92. 12. Nelson K.L., Geyer S. Bioreactor and process design for large<scale mammalian cell cul< ture manufacturing // Ibid. — 1991. — V. 13 — Р. 112–143. 13. Reiter M., Bluml G. Large<scale mammalian cell culture // Curr. Opin. Biotechnol. — 1994 — V. 5, N2. — Р. 175–179. 14. Griffiths B. Scale<up of suspension and anchorage<dependent animal cells // Mol. Biotechnol. — 2001. — V. 17. — Р. 225–238. ЛІТЕРАТУРА Експериментальні статті 85 ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ОПЫТНОЙ УСТАНОВКИ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ИНТЕРФЕРОНОВ I ТИПА Ю. Н Пенчук1 А. В Карпов1 В. Н Поводзинский1 С. В. Веревка2, 3 З. Р. Ульберг4 1Национальный университет пищевых тех$ нологий, Киев 2Институт биохимии им. А. В. Палладина НАН Украины, Киев 3Институт отоларингологии им. А. С. Ко$ ломийченко АМН Украины, Киев 4Институт биоколлоидной химии им. Ф. Д. Ов$ чаренко НАН Украины, Киев E$mail: penchuk$yuri@yandex.ru Описана экспериментальная установка с программированным действием для культи< вирования клеток и осуществления ими инду< цированного биосинтеза интерферонов (ИФН) І типа с помощью разработанных ранее частиц иммобилизованного комплексного индуктора (ИММК) многоразового действия. Показана ее эффективность при культивировании как мо< нослойных, так и суспензионных клеток<про< дуцентов ИФН. Изучены физиологические ус< ловия культивирования клеток обоих типов в установке. Сделан вывод о целесообразности использования установок такого типа для по< лучения биологически активных веществ в ус< ловиях применения данной технологии. Ключевые слова: интерферон, индуктор, иммо< билизация, сферон, культура клеток, ролерное культивирование, мононуклеары. ESTIMATION OF EFFECTIVENESS OF EXPERIMENTAL DEVICE FOR OBTAINING OF TYPE I INTERFERONS Yu. M. Penchuk1 O. V. Karpov1 V. M. Povodzinsky1 S. V. Veriovka2, 3 Z. R. Ul’berg4 1National Universyti of Food Technologies, Kyiv 2Palladin Institute of Biochemistry of National Academy of Sciences of Ukraine, Kyiv 3Kolomiychenko Institute of Otolaringology of Academy of Medical Sciences of Ukraine, Kyiv 4Ovcharenko Institute of Biocolloid Chemisrty of Nationale Academy of Sciences of Ukraine, Kyiv E$mail: penchuk$yuri@yandex.ru The authors describe an experimental device with computer assisted action for cell cultiva< tion and induced type I interferon (IFN) synthe< sis. The device is based on the use of previously elaborated particles bearing an immobilized complex inductor of repeated action. The device is shown to be effective for cultivation of both monolayer and suspended cells producing the IFN. Physiological conditions of both cell types cultivation are investigated. The authors con< clude their device to be useful for obtaining of biologically active substances by this technology. Key words: interferon, inductor, immobilization, cpheron, cell culture, roller cultivation, mononu< clears. << /ASCII85EncodePages false /AllowTransparency false /AutoPositionEPSFiles true /AutoRotatePages /None /Binding /Left /CalGrayProfile (Dot Gain 20%) /CalRGBProfile (sRGB IEC61966-2.1) /CalCMYKProfile (U.S. Web Coated \050SWOP\051 v2) /sRGBProfile (sRGB IEC61966-2.1) /CannotEmbedFontPolicy /Warning /CompatibilityLevel 1.4 /CompressObjects /Tags /CompressPages true /ConvertImagesToIndexed true /PassThroughJPEGImages true /CreateJDFFile false /CreateJobTicket false /DefaultRenderingIntent /Default /DetectBlends true /ColorConversionStrategy /LeaveColorUnchanged /DoThumbnails false /EmbedAllFonts true /EmbedJobOptions true /DSCReportingLevel 0 /EmitDSCWarnings false /EndPage -1 /ImageMemory 1048576 /LockDistillerParams false /MaxSubsetPct 100 /Optimize true /OPM 1 /ParseDSCComments true /ParseDSCCommentsForDocInfo true /PreserveCopyPage false /PreserveEPSInfo true /PreserveHalftoneInfo false /PreserveOPIComments false /PreserveOverprintSettings true /StartPage 1 /SubsetFonts false /TransferFunctionInfo /Apply /UCRandBGInfo /Preserve /UsePrologue false /ColorSettingsFile () /AlwaysEmbed [ true ] /NeverEmbed [ true ] /AntiAliasColorImages false /DownsampleColorImages true /ColorImageDownsampleType /Bicubic /ColorImageResolution 300 /ColorImageDepth -1 /ColorImageDownsampleThreshold 1.50000 /EncodeColorImages false /ColorImageFilter /DCTEncode /AutoFilterColorImages true /ColorImageAutoFilterStrategy /JPEG /ColorACSImageDict << /QFactor 0.15 /HSamples [1 1 1 1] /VSamples [1 1 1 1] >> /ColorImageDict << /QFactor 0.15 /HSamples [1 1 1 1] /VSamples [1 1 1 1] >> /JPEG2000ColorACSImageDict << /TileWidth 256 /TileHeight 256 /Quality 30 >> /JPEG2000ColorImageDict << /TileWidth 256 /TileHeight 256 /Quality 30 >> /AntiAliasGrayImages false /DownsampleGrayImages true /GrayImageDownsampleType /Bicubic /GrayImageResolution 300 /GrayImageDepth -1 /GrayImageDownsampleThreshold 1.50000 /EncodeGrayImages false /GrayImageFilter /DCTEncode /AutoFilterGrayImages true /GrayImageAutoFilterStrategy /JPEG /GrayACSImageDict << /QFactor 0.15 /HSamples [1 1 1 1] /VSamples [1 1 1 1] >> /GrayImageDict << /QFactor 0.15 /HSamples [1 1 1 1] /VSamples [1 1 1 1] >> /JPEG2000GrayACSImageDict << /TileWidth 256 /TileHeight 256 /Quality 30 >> /JPEG2000GrayImageDict << /TileWidth 256 /TileHeight 256 /Quality 30 >> /AntiAliasMonoImages false /DownsampleMonoImages false /MonoImageDownsampleType /Bicubic /MonoImageResolution 1200 /MonoImageDepth -1 /MonoImageDownsampleThreshold 1.50000 /EncodeMonoImages true /MonoImageFilter /CCITTFaxEncode /MonoImageDict << /K -1 >> /AllowPSXObjects false /PDFX1aCheck false /PDFX3Check false /PDFXCompliantPDFOnly false /PDFXNoTrimBoxError true /PDFXTrimBoxToMediaBoxOffset [ 0.00000 0.00000 0.00000 0.00000 ] /PDFXSetBleedBoxToMediaBox true /PDFXBleedBoxToTrimBoxOffset [ 0.00000 0.00000 0.00000 0.00000 ] /PDFXOutputIntentProfile (None) /PDFXOutputCondition () /PDFXRegistryName (http://www.color.org) /PDFXTrapped /Unknown /Description << /JPN <FEFF3053306e8a2d5b9a306f30019ad889e350cf5ea6753b50cf3092542b308030d730ea30d730ec30b9537052377528306e00200050004400460020658766f830924f5c62103059308b3068304d306b4f7f75283057307e305930023053306e8a2d5b9a30674f5c62103057305f00200050004400460020658766f8306f0020004100630072006f0062006100740020304a30883073002000520065006100640065007200200035002e003000204ee5964d30678868793a3067304d307e305930023053306e8a2d5b9a306b306f30d530a930f330c8306e57cb30818fbc307f304c5fc59808306730593002> /FRA <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> /DEU <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> /PTB <FEFF005500740069006c0069007a006500200065007300740061007300200063006f006e00660069006700750072006100e700f5006500730020007000610072006100200063007200690061007200200064006f00630075006d0065006e0074006f0073002000500044004600200063006f006d00200075006d00610020007200650073006f006c007500e700e3006f00200064006500200069006d006100670065006d0020007300750070006500720069006f0072002000700061007200610020006f006200740065007200200075006d00610020007100750061006c0069006400610064006500200064006500200069006d0070007200650073007300e3006f0020006d0065006c0068006f0072002e0020004f007300200064006f00630075006d0065006e0074006f0073002000500044004600200070006f00640065006d0020007300650072002000610062006500720074006f007300200063006f006d0020006f0020004100630072006f006200610074002c002000520065006100640065007200200035002e00300020006500200070006f00730074006500720069006f0072002e00200045007300740061007300200063006f006e00660069006700750072006100e700f50065007300200072006500710075006500720065006d00200069006e0063006f00720070006f0072006100e700e3006f00200064006500200066006f006e00740065002e> /DAN <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> /NLD <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> /ESP <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> /SUO <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> /ITA <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> /NOR <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> /SVE <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> /ENU <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> >> >> setdistillerparams << /HWResolution [2400 2400] /PageSize [612.000 792.000] >> setpagedevice

Оцінка ефективності дослідної установки для одержання інтерферонів І типу

Репозитарії

Схожі ресурси