Влияние криоконсервированного лейкоконцентрата кордовой крови человека на выраженность эндогенной интоксикации при остром гнойном перитоните

Показано, что при экспериментальном остром гнойном перитоните у животных релапаротомия, сочетанное введение ампициллина и криоконсервированного лейкоконцентрата кордовой крови обеспечивают эрадикацию крови от микроорганизмов, выраженное снижение колонизации тонкого кишечника и инфицированности брю...

Повний опис

Збережено в:
Бібліографічні деталі
Дата:2011
Автори: Гольцев, К.А., Бабинец, О.М., Кожина, О.Ю., Останкова, Л.В., Гольцев, А.Н.
Формат: Стаття
Мова:Russian
Опубліковано: Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України 2011
Теми:
Онлайн доступ:http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/44890
Теги: Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:Влияние криоконсервированного лейкоконцентрата кордовой крови человека на выраженность эндогенной интоксикации при остром гнойном перитоните / К.А. Гольцев, О.М. Бабинец, О.Ю. Кожина, Л.В. Останкова, А.Н. Гольцев // Пробл. криобиологии. — 2011. — Т. 21, № 2. — С. 179-190. — Бібліогр.: 25 назв. — рос., англ.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id irk-123456789-44890
record_format dspace
spelling irk-123456789-448902013-06-07T03:07:03Z Влияние криоконсервированного лейкоконцентрата кордовой крови человека на выраженность эндогенной интоксикации при остром гнойном перитоните Гольцев, К.А. Бабинец, О.М. Кожина, О.Ю. Останкова, Л.В. Гольцев, А.Н. Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология Показано, что при экспериментальном остром гнойном перитоните у животных релапаротомия, сочетанное введение ампициллина и криоконсервированного лейкоконцентрата кордовой крови обеспечивают эрадикацию крови от микроорганизмов, выраженное снижение колонизации тонкого кишечника и инфицированности брюшной полости патогенными и условно- патогенными бактериями, уменьшение дистрофических и некротических процессов в брюшной полости. Доведено, що при експериментальному гострому гнійному перитоніті у тварин релапаротомія, комбіноване введення ампіциліну та кріоконсервованого лейкоконцентрату кордової крові забезпечують ерадикацію крові від мікроорганізмів, значне зниження колонізації тонкого кишечника та інфікованості черевної порожнини патогенними та умовно-патогенними бактеріями, зменшення дистрофічних і некротичних процесів у черевній порожнині. At experimental acute purulent peritonitis in animals the relaparotomy, combined injection of ampicillin and cryopreserved cord blood leucoconcentrate has been shown to provide eradication of blood from microorganisms, manifested reduction of colonization of small intes-tine and infection of abdominal cavity with pathogenic and opportunistic bacteria, decrease in dystrophic and necrotic processes in abdominal cavity. 2011 Article Влияние криоконсервированного лейкоконцентрата кордовой крови человека на выраженность эндогенной интоксикации при остром гнойном перитоните / К.А. Гольцев, О.М. Бабинец, О.Ю. Кожина, Л.В. Останкова, А.Н. Гольцев // Пробл. криобиологии. — 2011. — Т. 21, № 2. — С. 179-190. — Бібліогр.: 25 назв. — рос., англ. http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/44890 615.361.013.68.014.41:612.017.1:616.381-002 ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
language Russian
topic Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология
Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология
spellingShingle Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология
Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология
Гольцев, К.А.
Бабинец, О.М.
Кожина, О.Ю.
Останкова, Л.В.
Гольцев, А.Н.
Влияние криоконсервированного лейкоконцентрата кордовой крови человека на выраженность эндогенной интоксикации при остром гнойном перитоните
description Показано, что при экспериментальном остром гнойном перитоните у животных релапаротомия, сочетанное введение ампициллина и криоконсервированного лейкоконцентрата кордовой крови обеспечивают эрадикацию крови от микроорганизмов, выраженное снижение колонизации тонкого кишечника и инфицированности брюшной полости патогенными и условно- патогенными бактериями, уменьшение дистрофических и некротических процессов в брюшной полости.
format Article
author Гольцев, К.А.
Бабинец, О.М.
Кожина, О.Ю.
Останкова, Л.В.
Гольцев, А.Н.
author_facet Гольцев, К.А.
Бабинец, О.М.
Кожина, О.Ю.
Останкова, Л.В.
Гольцев, А.Н.
author_sort Гольцев, К.А.
title Влияние криоконсервированного лейкоконцентрата кордовой крови человека на выраженность эндогенной интоксикации при остром гнойном перитоните
title_short Влияние криоконсервированного лейкоконцентрата кордовой крови человека на выраженность эндогенной интоксикации при остром гнойном перитоните
title_full Влияние криоконсервированного лейкоконцентрата кордовой крови человека на выраженность эндогенной интоксикации при остром гнойном перитоните
title_fullStr Влияние криоконсервированного лейкоконцентрата кордовой крови человека на выраженность эндогенной интоксикации при остром гнойном перитоните
title_full_unstemmed Влияние криоконсервированного лейкоконцентрата кордовой крови человека на выраженность эндогенной интоксикации при остром гнойном перитоните
title_sort влияние криоконсервированного лейкоконцентрата кордовой крови человека на выраженность эндогенной интоксикации при остром гнойном перитоните
publisher Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
publishDate 2011
topic_facet Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология
url http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/44890
citation_txt Влияние криоконсервированного лейкоконцентрата кордовой крови человека на выраженность эндогенной интоксикации при остром гнойном перитоните / К.А. Гольцев, О.М. Бабинец, О.Ю. Кожина, Л.В. Останкова, А.Н. Гольцев // Пробл. криобиологии. — 2011. — Т. 21, № 2. — С. 179-190. — Бібліогр.: 25 назв. — рос., англ.
work_keys_str_mv AT golʹcevka vliâniekriokonservirovannogolejkokoncentratakordovojkrovičelovekanavyražennostʹéndogennojintoksikaciipriostromgnojnomperitonite
AT babinecom vliâniekriokonservirovannogolejkokoncentratakordovojkrovičelovekanavyražennostʹéndogennojintoksikaciipriostromgnojnomperitonite
AT kožinaoû vliâniekriokonservirovannogolejkokoncentratakordovojkrovičelovekanavyražennostʹéndogennojintoksikaciipriostromgnojnomperitonite
AT ostankovalv vliâniekriokonservirovannogolejkokoncentratakordovojkrovičelovekanavyražennostʹéndogennojintoksikaciipriostromgnojnomperitonite
AT golʹcevan vliâniekriokonservirovannogolejkokoncentratakordovojkrovičelovekanavyražennostʹéndogennojintoksikaciipriostromgnojnomperitonite
first_indexed 2025-07-04T03:27:47Z
last_indexed 2025-07-04T03:27:47Z
_version_ 1836685373138272256
fulltext 179 * Автор, которому необходимо направлять корреспонденцию: ул. Переяславская, 23, г. Харьков, Украина 61015; тел.: (+38 057) 373-57-89, факс: (+38 057) 373-30-84, электронная почта: cryopato@rambler.ru * To whom correspondence should be addressed: 23, Pereyaslavskaya str., Kharkov, Ukraine 61015; tel.: +380 57 373 5789, fax: +380 57 373 3084, e-mail: cryopato@rambler.ru Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the Na- tional Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков В последнее время эндогенную интоксикацию считают одной из основных причин развития многих патологических процессов, различных инфекционных заболеваний, в частности перито- нита [4, 7, 10, 13, 19]. В патогенезе перитонита большую роль играет нарушение барьерной функции стенки тонкой кишки. Доказано, что микроорганизмы кишечника через мезентериальные лимфатические узлы и воротную вену попадают в общий кровоток, вызы- вая развитие инфекции, сепсиса и эндогенной интоксикации [25, 26]. При попадании микроорга- низмов в брюшину или при ее травматическом повреждении развивается как местное воспаление, так и комплексная реакция всего организма, сопро- вождающаяся нарушением всех его функций по типу “порочного круга”. Вследствие этого происхо- дят нарушение целостности органов брюшной Recently endogenous intoxication has been con- sidered as one of the main causes of development of many pathological processes, different infection diseases, in particular, peritonitis [4, 7, 10, 13, 19]. In peritonitis pathogenesis the disordered barrier function of small intestine wall plays a major role. It has been proved that microorganisms in a bowel through mesenteric lymph nodes and portal vein en- ter into general blood flow, causing an infection, sepsis and endogenous intoxication [25, 26]. In case of mic- robial contamination of the peritoneum, or its trauma, both local inflammation and a complex response of the whole organism are developed and accompanied by the impairments of its all functions according to the "vicious circle" type. As a result, there are the disorders in integrity of peritoneal cavity organs; en- teroparesis; intoxication, changed indices of aqueous- electrolyte exchange and redox state; immune de- problems of cryobiology Vol. 21, 2011, №2 проблемы криобиологии Т. 21, 2011, №2 УДК 615.361.013.68.014.41:612.017.1:616.381-002 К.А. ГОЛЬЦЕВ*, О.М. БАБИНЕЦ, О.Ю. КОЖИНА, Л.В. ОСТАНКОВА, А.Н. ГОЛЬЦЕВ Влияние криоконсервированного лейкоконцентрата кордовой крови человека на выраженность эндогенной интоксикации при остром гнойном перитоните UDC 615.361.013.68.014.41:612.017.1:616.381-002 K.A. GOLTSEV*, O.M. BABINETS, O.YU. KOZHINA, L.V. OSTANKOVA, A.N. GOLTSEV Effect of Cryopreserved Human Cord Blood Leucoconcentrate on Manifestation of Endogenous Intoxication at Acute Purulent Peritonitis Показано, что при экспериментальном остром гнойном перитоните у животных релапаротомия, сочетанное введение ампициллина и криоконсервированного лейкоконцентрата кордовой крови обеспечивают эрадикацию крови от микроорганизмов, выраженное снижение колонизации тонкого кишечника и инфицированности брюшной полости патогенными и условно- патогенными бактериями, уменьшение дистрофических и некротических процессов в брюшной полости. Ключевые слова: криоконсервированный лейкоконцентрат кордовой крови, гнойный перитонит, релапаротомия, воспаление брюшины, патогенные и условно-патогенные бактерии. Доведено, що при експериментальному гострому гнійному перитоніті у тварин релапаротомія, комбіноване введення ампіциліну та кріоконсервованого лейкоконцентрату кордової крові забезпечують ерадикацію крові від мікроорганізмів, значне зниження колонізації тонкого кишечника та інфікованості черевної порожнини патогенними та умовно-патогенними бактеріями, зменшення дистрофічних і некротичних процесів у черевній порожнині. Ключові слова: кріоконсервований лейкоконцентрат кордової крові, гнійний перитоніт, релапаротомія, запалення черевини, патогенні та умовно-патогенні бактерії. At experimental acute purulent peritonitis in animals the relaparotomy, combined injection of ampicillin and cryopreserved cord blood leucoconcentrate has been shown to provide eradication of blood from microorganisms, manifested reduction of colonization of small intes-tine and infection of abdominal cavity with pathogenic and opportunistic bacteria, decrease in dystrophic and necrotic processes in abdominal cavity. Key words: cryopreserved cord blood leucoconcentrate, purulent peritonitis, relaparotomy, peritoneal inflammation, pathogenic and opportunistic bacteria. 180 problems of cryobiology Vol. 21, 2011, №2 проблемы криобиологии Т. 21, 2011, №2 полости; парез кишечника; интоксикация; измене- ние показателей водно-электролитного обмена и кислотно-основного состояния; иммунодепрессия; расстройство гемодинамики, микроциркуляции и тканевого дыхания с возникновением гипоксии; нарушение всех видов обмена с последующим развитием синдрома полиорганной недостаточ- ности [2, 3, 10, 13]. При классификации перитонита учитывают этиологический фактор, способ проник- новения инфекции в брюшную полость, характер экссудата, распространенность, стадию и клиничес- кое течение заболевания [17]. В начальной (реак- тивной) стадии перитонита интоксикация организма обусловлена продуктами деградации белка, кле- точных структур очага воспаления, медиаторами воспаления, микроорганизмами, а также продук- тами их жизнедеятельности и распада. Поступление микроорганизмов в кровь приводит к напряжению защитно-компенсаторных механизмов организма. При этом изменяется двигательная функция ки- шечника. В связи с нарушением барьерной функции кишечной стенки, угнетением секреторного имму- нитета в кишечнике, развивающимся дисбактерио- зом, возникновением симбионтного пищеварения сам кишечник и становится источником интокси- кации и токсемии [2, 11, 12]. Чрезмерная колониза- ция бактериями тонкой кишки – один из основных механизмов развития синдрома эндогенной инто- ксикации [16, 19]. При перитоните видовой состав и количественное содержание колонизированных бактерий тонкой кишки приближаются к показате- лям микробной флоры толстой кишки [15]. Лечение эндогенной интоксикации при перито- ните, осложняющей его течение, – одна из наиболее сложных и актуальных проблем современной ме- дицины [20, 24]. Устранение причины перитонита и борьба с интоксикацией являются решающим мо- ментом в лечении этого заболевания [2–4, 13]. В комплексной терапии перитонитов одними из глав- ных мер являются применение антибиотиков и проведение мероприятий по дезинтоксикации [2, 4, 15, 20]. Вопрос об эффективности иммуномодули- рующей терапии остается открытым [3, 5]. Ранее был показан терапевтический эффект от введения клеток кордовой крови [1, 22, 23] при септических и воспалительных заболеваниях, однако возмож- ность применения криоконсервированной кордовой крови при перитонитах не изучалась. Цель работы – сравнительная оценка клиничес- кого течения микробного обсеменения, патоморфо- логических изменений ткани брюшной полости при экспериментальном остром гнойном перитоните у крыс после лечения антибиотиком либо в сочетании с криоконсервированным лейкоконцентратом кордовой крови человека (ЛКК). pression, disorder of microcirculation, hemodynamics and tissue respiration with hypoxia appearance; dis- orders of all types of metabolism with following de- velopment of the syndrome of polyorgan insufficiency [2, 3, 10, 13]. When classifying peritonitis there are taken into account the etiological factor, way of in- fection penetration into a peritoneal cavity, charac- ter of exudates, prevalence, stage and clinical course of the disease [17]. At an initial (reactive) stage of peritonitis an organism intoxication is stipulated with the products of protein degradation, cell structures of inflammation focus, inflammation mediators, micro- organisms, as well as by the products of their vital activity and decay. Penetration of microorganisms into blood results in the straining of protective and compensatory mechanisms of an organism. Herewith there is a disorder in bowel motor function. Due to the impairment of intestinal barrier function, suppres- sion of secretory immunity in a bowel, developing dysbacteriosis, appearance of symbiotic digestion the bowel itself becomes the source of intoxication and toxemia [2, 11, 12]. Excessive colonization of small intestine with bacteria is one of basic mechanisms of endogenous intoxication syndrome development [16, 19]. At peritonitis the composition of species and quantitative content of colonized bacteria of small intestine approach to those of large bowel microbial flora [15]. Treatment of endogenous intoxication aggravating the course of peritonitis is one of the most compli- cated and actual tasks of current medicine [20, 24]. The elimination of the peritonitis cause and control- ling the intoxication are the decisive moments in treat- ing this disease [2–4, 13]. In a combined therapy of peritonites one of the main links is the application of antibiotics and detoxication measures [2, 4, 15, 20]. The question about the efficiency of immune modu- lating therapy has remained open [3, 5]. Recently re- ports there was shown the therapeutic effect of the introduction of cord blood cells [1, 22, 23] at septic and inflammatory diseases, however, the possibility of application of cryopreserved cord blood at perito- nitis has not been studied. The research aim is to comparatively assess the clinical course of microbial contamination, pathomor- phological changes of abdominal cavity at experimen- tal acute purulent peritonitis in rats after antibiotic treatment or in combination with cryopreserved hu- man cord blood leuconcentrate (CBL). Materials and methods The investigations were performed in 6-month-old Wistar rats of 160–180 g weight in accordance with General Ethical Principles of Experiments in Animals, approved by National Congress on Bioethics (Kiev, 181 problems of cryobiology Vol. 21, 2011, №2 проблемы криобиологии Т. 21, 2011, №2 Материалы и методы Работа выполнена на 6-месячных крысах линии Вистар массой 160–180 г в соответствии с “Обще- этическими принципами экспериментов на живот- ных”, одобренными Национальным конгрессом по биоэтике (Киев, 2003 г.) [8] и согласованными с положениями “Европейской Конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспе- риментальных и других научных целей” (Страсбург, 1985 г.). Лабораторные животные содержались в условиях вивария ИПКиК НАН Украины и были использованы в экспериментальной работе согласно рекомендациям [9]. Моделировали острый гнойный перитонит (ОГП) путем перевязки и отсечения червеобразно- го отростка, который оставляли в брюшной полости [18]. Крыс оперировали под общим тиопенталовым наркозом. Лейкоконцентрат кордовой крови чело- века получали путём пассивной седиментации эрит- роцитов в градиенте плотности с добавлением полиглюкина [21] и криоконсервировали на про- граммном замораживателе УОП-6 (СКТБ с ОП ИПКиК НАН Украины) по двухэтапной программе, разработанной и запатентованной в ИПКиК НАН Украины [21]. Суспензию размораживали на водя- ной бане при температуре 40–41°С [6]. Все крысы были разделены на 5 групп: 1 – ин- тактный контроль; 2 – животные с ОГП, которым че- рез 24 ч после операции проводили релапаротомию и санацию брюшной полости 0,02%-м водным раствором фурацилина; 3 – крысы с ОГП, которым после релапаротомии внутримышечо вводили ам- пициллин (“Дарница”, Украина) в дозе 40 мг/кг мас- сы тела; 4 – животные с ОГП, которым после релапаротомии одновременно с инъекцией ампи- циллина внутривенно вводили ЛКК в объеме 0,3 мл (5–6×106 клеток); 5 – крысы с ОГП, которым про- водили релапаротомию и внутривенно вводили ЛКК в объеме 0,3 мл без антибиотика. Проводили комплексное бактериологическое исследование содержимого тонкой кишки, венозной крови, перитонеального экссудата. Венозную кровь у крыс получали из хвостовой вены. Выделение, идентификацию и количественное определение содержания микробов в 1 мл экссудата осущест- вляли по классическим методикам, утвержденным МЗ Украины [4, 7, 11, 12]. Чувствительность выде- ленных изолятов к антибиотику определяли диско- диффузионным методом Кирби-Бауэра [15]. Морфологическое исследование париетальной брюшины проводили с использованием гистоло- гических и морфометрических методов [14]. Ткань фиксировали в 10%-м нейтральном формалине. Серийные срезы толщиной 7–9 мкм окрашивали гематоксилином и эозином, азур-II эозином по Рома- новскому [14]. Анализировали гистологические препараты в световом микроскопе “Primo Star” 2003) and coordinated with the statements of Euro- pean Convention on the Protection of Vertebrate Animals Used for Experimental and Other Purposes (Strasbourg, 1985). Laboratory animals were kept un- der vivarium conditions of the IPC&C of the National Academy of Sciences of Ukraine and used in the re- search according to the recommendations [9]. Acute purulent peritonitis (APP) was simulated by means of ligation and excision of cecal appendage, which was left in abdominal cavity [18]. The surgery in rats was performed with general thiopental nar- cosis. Human cord blood leucoconcentrate (CBL) was obtained by passive sedimentation of erythro- cytes in polyglucinum density gradient [21] and was cryopreserved by means of programmable freezer UOP-6 (produced by Special Design and Construc- tion Bureau with Experimental Unit of the IPC&C) according to two-step program designed and patented at IPC&C the National Academy of Sciences of Ukraine [21]. The suspension was thawed on water bath at 40–41°C [6]. All rats were divided into 5 groups: 1 – intact control; 2 – animals with APP, which 24 hrs later the surgery were treated with laparotomy and sana- tion of abdominal cavity with 0.02% Furacinum aqueous solution; 3 – animals with APP, which af- ter relaparotomy were intramuscularly introduced with Ampicillin in a dose of 40 mg/kg of body mass; 4 – animals with APP, which after relaparotomy si- multaneously with Ampicillin injection intravenously were introduced with CBL in a volume of 0.3 ml (5– 6×106 cells); 5 – the rats with APP, to those rela- parotomy was performed and intravenously injected with CBL in a volume of 0.3 ml (5–6×106 cells) with no antibiotic. There was performed a complex bacteriological study of the contents of small intestine, venous blood, peritoneal exudates. Venous blood in rats was taken from a caudal vein. Isolation, identification and quan- titative examination of the content of microbes in 1 ml of exudates was accomplished according to classic methods, approved by the Ministry of Health Care of Ukraine [4, 7, 11, 12]. Sensitivity of isolates to an- tibiotic was found by Kirby-Bauer disk diffusion sus- ceptibility test [15]. Perietal peritoneum was morphologically studied using histological and morphometric methods [14]. The tissue was fixed in 10% neutral formalin. Mul- tiple sections of 7–9 mm width were stained with hematoxylin and eosin, azur-II eosin according to Romanowsky [14]. Histological analysis of sections was performed using light microscopes Primo Star (Carl Zeiss) and LOMO-2. Morphometry of necro- sis foci areas and quantitation of relative amount (in shares) of neutrophil polymorphonuclear leukocytes (NPNL) in infiltrates was done using ocular microm- eter. 182 problems of cryobiology Vol. 21, 2011, №2 проблемы криобиологии Т. 21, 2011, №2 (“Carl Zeiss”, Германия) и ЛОМО-2. Морфометри- ческую оценку площади очагов некроза и подсчет относительного количества (указано в долях) ней- трофильных полиморфоядерных лейкоцитов (НПЯЛ) осуществляли с использованием окуляр- микрометра по трем полям зрения. Статистическую обработку эксперименталь- ных данных проводили по методу Стьюдента- Фишера с помощью программы Statistica 7.0, (“Stat Soft Inc.”), адаптированной к поставленным зада- чам и специфике данных. Результаты и обсуждение При бактериологическом исследовании при- стеночной миклофлоры тонкого кишечника после операции было установлено выраженное измене- ние микробного пейзажа по сравнению с контро- лем. Так, в норме в тонком кишечнике у крыс были обнаружены преимущественно бифидобактерии, лактобактерии в концентрации 105–108 КОЕ/мл и эубактерии, энтерококки, порфиромонады, анаэроб- ные кокки в концентрации 103–105 КОЕ/мл, что соответствует данным литературы [9, 12]. Через сутки после операции (группа 2) в муцине тонкого кишечника были выявлены бактерии: Escherichia coli, рода Enterococcus, Staphylococ- cus, Proteus, Klebsiella, Bacteroides и Fusobacte- rium (табл. 1). На 3-и сутки после операции содержание ука- занных бактерий в муцине тонкого кишечника повышалось в 10–100 раз и сохранялось в этой концентрации у выживших животных в течение всего срока наблюдения. У выживших животных, которым проводили релапаротомию и санацию брюшной полости раствором фурацилина (группа 2), лишь на 5-е сутки после проведения манипуляций концентрация E. coli и Enterococcus снизилась в 100 раз. У выживших животных, которым проводили релапаротомию и внутримышечное введение ампициллина (группа 3), на 5-е сутки концентрация бактерий, за исключением родов Klebsiella и Fusobacterium, снижалась в 10–100 раз. В группе животных, которым проводили релапа- ротомию и вводили ампициллин вместе с ЛКК (группа 4), на 5-е сутки после релапаротомии кон- центрация всех видов бактерий в тонком кишечнике снижалась в 10–100 раз. При этом достоверное уменьшение числа микробных клеток наблюдали на 1–3-и сутки. У животных группы 5, которым проводили релапаротомию и вводили ЛКК, на 5-е сутки после релапаротомии в 10–100 раз снизилась концент- рация E. coli и бактерий родов Enterococcus и Bacteroides. При бактериологическом исследовании пери- тонеального экссудата у крыс с ОГП были вы- Experimental data were statistically processed according to Student-Fisher method by means of Statistica 7.0 software (Stat Soft Inc.), adapted for the tasks set and the data specificity. Results and discussion Bacteriological study of parietal microflora of small intestine after surgery revealed a manifested change of microbic picture if compared with the control. So in the norm in small intestine of rats there were revealed mostly bifidobacteria, lactobacteria in concentration of 105–108 CFU/ml and eubacteria, enterococci, porfiromonadaceae, anaerobic cocci in concentration of 103–105 CFU/ml, that is in the ac- cordance with the published data [9, 12] . In 24 hrs after surgery (group 2) in mucin of small intestine the following bacteria were found: Escheri- chia coli; Enterococcus; Staphylococcus; Proteus; Klebsiella; Bacteriodes and Fusobacterium (Ta- ble 1). To the 3rd day after surgery the content of the mentioned bacteria in small intestine mucin increased in 10–100 times and kept in this concentration in the survived animals for the whole observation term. In the survived animals in which a relaparotomy and sanation of abdominal cavity with Furacinum so- lution (group 2) were performed, just to the 5th day after manipulations the concentration of E.coli and Enterococcus reduced in 100 times. In the survived animals to which the relaparotomy and intramuscular injection of Ampicillin were done (group 3) to the 5th day the concentration of bacte- ria excluding Klebsiella and Fusobacterium, reduced in 10–100 times. In the group of animals with relaparotomy and Ampicillin and CBL injection (group 4) to the 5th day after relaparotomy the concentration of all the types of bacteria in small intestine decreased in 10–100 ti- mes. Herewith the statistically significant number of microbic cells was observed to the 1st–3rd days. In the animals of the group 5 with relaparotomy and CBL injection to the 5th day after relaparotomy the concentration of E.coli and bacteria of Entero- coccus and Bacteriodes reduced in 10–100 times. During bacteriological study of peritoneal exudate in the rats with APP the same types of bacteria as those from small intestine were isolated. Highest con- centrations were found for following bacteria: E.coli, Enterococcus and Staphylococcus (Table 2). In the animals of the groups 2 and 3 the species composi- tion of microflora of peritoneal exudates during 5 days after relaparotomy was not changed, but the concen- tration of bacteria decreased statistically and signifi- cantly. In group 4 the concentration of bacteria even in 24 hrs after relaparotomy statistically and signifi- cantly reduced. To the 3rd day Klebsiella bacteria were absent and to the 5th day Bacteriodes ones. хынтовижаппурГ slaminafopuorG ымзинагрооркиМ Mi smsinagroorc лм/ЕОK,йиреткабовтсечилоK lm/UFC,airetcabforebmuN елсопиктус1 иицарепо yregrusretfayad1 елсопиктус1 иимоторапалер retfayad1 ymotorapaler елсопкотус3 иимоторапалер retfasyad3 ymotorapaler елсопкотус5 иимоторапалер retfasyad5 ymotorapaler )ьлортнок(яанткатнИ lortnoctcatnI rehcsE i ilocaihc )2,0±6,1( × 01 8 )3,0±0,3( × 01 9 )2,0±1,5( × 01 01 )2,0±0,4( × 01 01 ppssuccocoretnE )3,0±1,4( × 01 7 )2,0±0,2( × 01 8 )3,0±1,4( × 01 9 )2,0±3,1( × 01 9 ppssuccocolyhpatS )2,0±0,3( × 01 4 )2,0±7,3( × 01 6 )3,0±9,2( × 01 7 )3,0±1,5( × 01 7 ppssuetorP )2,0±5,2( × 01 3 )3,0±1,4( × 01 5 )2,0±5,5( × 01 6 )2,0±0,2( × 01 6 ppsalleisbelK )2,0±8,1( × 01 3 )2,0±4,4( × 01 5 )3,0±8,2( × 01 6 )3,0±2,7( × 01 6 ppssedioretcaB )2,0±4,2( × 01 01 )2,0±0,3( × 01 11 )3,0±2,7( × 01 11 )3,0±8,3( × 01 11 ppsmuiretcabosuF )2,0±2,3( × 01 8 )2,0±6,3( × 01 01 )2,0±2,4( × 01 11 )3,0±0,6( × 01 01 ПГО PPA rehcsE i ilocaihc - )3,0±8,1( × 01 9 )3,0±2,3( × 01 9 )3,0±6,1( × 01 7 ppssuccocoretnE - )3,0±2,6( × 01 8 )3,0±6,4( × 01 8 )2,0±1,5( × 01 6 ppssuccocolyhpatS - )2,0±2,4( × 01 4 )3,0±8,4( × 01 11 )3,0±7,3( × 01 4 ppssuetorP - )3,0±2,5( × 01 5 )3,0±5,2( × 01 5 )3,0±4,2( × 01 5 ppsalleisbelK - )3,0±8,4( × 01 5 )4,0±9,3( × 01 5 )2,0±0,4( × 01 5 ppssedioretcaB - )3,0±9,2( × 01 11 )2,0±4,3( × 01 11 )3,0±2,1( × 01 11 ppsmuiretcabosuF - )3,0±0,4( × 01 01 )3,0±6,3( × 01 01 )2,0±5,1( × 01 01 ниллиципмА+ПГО pmA+PPA ci nilli rehcsE i ilocaihc - )3,0±5,2( × 01 9 )3,0±1,4( × 01 8 )3,0±8,2( × 01 7 ppssuccocoretnE - )2,0±0,5( × 01 7 )3,0±9,3( × 01 6 )3,0±1,1( × 01 6 ppssuccocolyhpatS - )2,0±2,1( × 01 7 )3,0±5,4( × 01 3 )2,0±4,1( × 01 3 ppssuetorP - )3,0±2,3( × 01 5 )3,0±8,3( × 01 5 )3,0±2,6( × 01 4 ppsalleisbelK - )3,0±2,7( × 01 4 )2,0±1,1( × 01 4 )3,0±4,3( × 01 4 ppssedioretcaB - )3,0±2,5( × 01 01 )3,0±1,3( × 01 9 )3,0±5,8( × 01 8 ppsmuiretcabosuF - )3,0±9,2( × 01 01 )3,0±8,1( × 01 01 )20,0±5,0( × 01 01 +ниллиципмА+ПГО KKЛ pmA+PPA ci +nilli LBC rehcsE i ilocaihc - )3,0±2,4( × 01 7 )3,0±1,3( × 01 6 )3,0±8,2( × 01 6 ppssuccocoretnE - )2,0±9,4( × 01 4 )3,0±2,3( × 01 4 )3,0±0,3( × 01 4 ppssuccocolyhpatS - )3,0±4,6( × 01 6 )2,0±8,3( × 01 5 )3,0±4,4( × 01 5 ppssuetorP - )3,0±8,5( × 01 4 )3,0±4,4( × 01 4 )3,0±0,4( × 01 3 ppsalleisbelK - )3,0±2,1( × 01 5 )3,0±4,3( × 01 4 )2,0±0,1( × 01 4 ppssedioretcaB - )3,0±2,4( × 01 01 )3,0±8,3( × 01 9 )3,0±3,5( × 01 8 ppsmuiretcabosuF - )3,0±3,4( × 01 01 )2,0±5,1( × 01 01 )3,0±9,4( × 01 8 183 problems of cryobiology Vol. 21, 2011, №2 проблемы криобиологии Т. 21, 2011, №2 Таблица 1. Показатели пристеночной микрофлоры тонкого кишечника крыс с ОГП при различных методах терапии Table 1. Indices of parietal microflora of small intestine of rats with APP under different treatment methods хынтовижаппурГ slaminafopuorG ымзинагрооркиМ Mi smsinagroorc лм/ЕОK,йиреткабовтсечилоK lm/UFC,airetcabforebmuN елсопиктус1 иицарепо yregrusretfayad1 елсопиктус1 иимоторапалер retfayad1 ymotorapaler елсопкотус3 иимоторапалер retfasyad3 ymotorapaler елсопкотус5 иимоторапалер retfasyad5 ymotorapaler KKЛ+ПГО LBC+PPA rehcsE i ilocaihc - )3,0±2,4( × 01 7 )3,0±1,3( × 01 6 )3,0±8,2( × 01 6 ppssuccocoretnE - )3,0±6,3( × 01 9 )3,0±1,4( × 01 8 )3,0±7,3( × 01 7 ppssuccocolyhpatS - )2,0±2,5( × 01 8 )3,0±4,3( × 01 7 )2,0±9,2( × 01 7 ppssuetorP - )3,0±0,6( × 01 4 )3,0±1,4( × 01 4 )3,0±3,1( × 01 4 ppsalleisbelK - )3,0±8,3( × 01 5 )3,0±9,2( × 01 5 )3,0±8,2( × 01 5 ppssedioretcaB - )3,0±9,3( × 01 5 )3,0±2,4( × 01 5 )3,0±0,2( × 01 5 ppsmuiretcabosuF - )3,0±2,3( × 01 11 )3,0±1,4( × 01 01 )3,0±6,3( × 01 9 184 problems of cryobiology Vol. 21, 2011, №2 проблемы криобиологии Т. 21, 2011, №2 делены такие же виды бактерий, как и из тонкого кишечника. В наиболее высоких концентрациях были выделены E. coli, бактерии родов Enterococ- cus и Staphylococcus (табл. 2). У животных групп 2 и 3 видовой состав микрофлоры перитонеального экссудата в течение 5-и суток после релапаротомии не изменялся, однако концентрация бактерий достоверно снизилась. В группе 4 концентрация бактерий уже через сутки после релапаротомии достоверно снижалась. На 3-и сутки отсутствовали бактерии рода Klebsiella, а на 5-е – Bacteroides. В группе 5 на 5-е сутки после релапаротомии видовой состав микрофлоры перитонеального экссудата не изменился, а концентрация бактерий достоверно снизилась. Из венозной крови у крыс с ОГП были выде- лены микроорганизмы трех видов: E. coli, S. aureus и рода Bacteroides. У животных группы 2 концент- рация бактерий в крови на 1-е сутки после операции составила 104–107 КОЕ/мл , на 3-е сутки повыси- лась до 105–109 КОЕ/мл, на 5-е сутки снизилась до 102–104 КОЕ/мл (табл. 3). В группе 3 через сутки после релапаротомии она составляла 104– 108 КОЕ/мл, снижаясь на 3-и сутки до 102–107, а на 5-е – до 102–103 КОЕ/мл. В группе 4 через сутки после релапаротомии концентрация бактерий снизилась до 103 КОЕ/мл, на 3-и сутки концентрация E. coli и S. aureus – до 102 КОЕ/мл, а бактерии рода Bacteroides не выделялись. На 5-е сутки у крыс этой группы была установлена эрадикация венозной крови от всех бактерий. В группе 5 концентрация бактерий на 3-е сутки после релапаротомии снижалась до 102–106 КОЕ/мл, а на 5-е сутки – до 102–103 КОЕ/мл. Продолжение таблицы 1 Table 1. (Continued from previous page) In group 5 to the 5th day after relaparotomy the species composition of microflora of peritoneal exu- date was not altered and concentration of bacteria statistically and significantly reduced. In venous blood of rats with APP the microor- ganisms of three types were found: E.coli, S. aureus and Bacteriodes. In the animals of group 2 the con- centration of bacteria in blood to the 1st day after sur- gery made 104–107 CFU/ml, to the 3rd day it in- creased up to 105–109 CFU/ml, to the 5th day it re- duced down to 102–104 CFU/ml (Table 3). In group 3 in 24 hrs after relaparotomy it made 104– 108 CFU/ml reducing to the 3rd day down to 102–107 and to 102–103 CFU/ml to the 5th day. In group 4 in 24 hrs after relaparotomy the con- centration of bacteria reduced down to 103 CFU/ml, to the 3rd day the concentration of E.coli and S. aureus decreased down to 102 CFU/ml and bac- teria of Bacteriodes species were not isolated. To the 5th day in the rats of this group there was found an eradication of venous blood from all the bacteria. In the group 5 the concentration of bacteria to the 3rd day after relaparotomy reduced down to 102–106 CFU/ml and to the 5th day – down to 102–103 CFU/ml. The presented data about parietal microflora of small intestine, peritoneal exudate and venous blood of experimental animals testify to the fact that the used by us model of acute peritonitis allowed to re- produce a classic from the point of view of current concepts pyoseptic mixed infection. As the result of the surgery a small intestine microflora changed quali- tatively and quantitatively. Its colonization in high ti- tres with pathogenic and opportunistic bacteria of Enterobacteriaceae family, asporogenic anaerobic bacteria, gram-positive bacteria of Staphylococcus хынтовижаппурГ slaminafopuorG ымзинагрооркиМ Mi smsinagroorc лм/ЕОK,йиреткабовтсечилоK lm/UFC,airetcabforebmuN елсопиктус1 иицарепо yregrusretfayad1 елсопиктус1 иимоторапалер retfayad1 ymotorapaler елсопкотус3 иимоторапалер retfasyad3 ymotorapaler елсопкотус5 иимоторапалер retfasyad5 ymotorapaler )ьлортнок(яанткатнИ lortnoctcatnI rehcsE i ilocaihc )3,0±5,2( × 01 9 )3,0±7,4( × 01 9 )3,0±4,3( × 01 9 )2,0±8,2( × 01 7 ppssuccocoretnE )2,0±9,3( × 01 6 )3,0±1,5( × 01 6 )3,0±9,4( × 01 6 )3,0±2,5( × 01 6 ppssuccocolyhpatS )3,0±1,4( × 01 6 )3,0±3,3( × 01 8 )3,0±2,4( × 01 8 )3,0±6,5( × 01 6 ppssuetorP )3,0±2,7( × 01 2 )2,0±7,4( × 01 4 )3,0±9,3( × 01 4 )3,0±1,5( × 01 4 ppsalleisbelK )3,0±4,4( × 01 2 )3,0±8,5( × 01 2 )3,0±9,4( × 01 2 )3,0±5,3( × 01 2 ppssedioretcaB )2,0±1,3( × 01 5 )3,0±2,4( × 01 4 )2,0±9,3( × 01 4 )3,0±3,6( × 01 4 ppsmuiretcabosuF )3,0±2,7( × 01 6 )3,0±3,5( × 01 6 )3,0±3,4( × 01 5 )3,0±9,2( × 01 5 ПГО PPA rehcsE i ilocaihc - )3,0±8,2( × 01 6 )3,0±1,7( × 01 5 )3,0±3,3( × 01 5 ppssuccocoretnE - )3,0±2,4( × 01 4 )3,0±4,5( × 01 4 )3,0±9,3( × 01 3 ppssuccocolyhpatS - )3,0±6,5( × 01 7 )3,0±7,4( × 01 7 )2,0±9,1( × 01 6 ppssuetorP - )3,0±5,5( × 01 3 )3,0±8,4( × 01 3 )3,0±1,4( × 01 3 ppsalleisbelK - )3,0±2,3( × 01 2 )3,0±2,1( × 01 2 )3,0±4,1( × 01 2 ppssedioretcaB - )3,0±2,4( × 01 3 )3,0±1,5( × 01 3 )3,0±0,4( × 01 3 ppsmuiretcabosuF - )3,0±2,7( × 01 4 )3,0±0,6( × 01 4 )3,0±4,1( × 01 4 ниллиципмА+ПГО pmA+PPA ci nilli rehcsE i ilocaihc - )3,0±2,5( × 01 6 )3,0±8,3( × 01 5 )3,0±4,4( × 01 5 ppssuccocoretnE - )3,0±3,3( × 01 5 )3,0±2,4( × 01 4 )3,0±4,1( × 01 4 ppssuccocolyhpatS - )3,0±5,4( × 01 6 )3,0±1,3( × 01 5 )3,0±1,4( × 01 5 ppssuetorP - )3,0±3,3( × 01 3 )3,0±5,2( × 01 3 )3,0±4,1( × 01 3 ppsalleisbelK - )3,0±0,3( × 01 2 )3,0±4,2( × 01 2 )3,0±0,1( × 01 2 ppssedioretcaB - )3,0±9,3( × 01 3 )3,0±1,3( × 01 2 )3,0±9,1( × 01 2 ppsmuiretcabosuF - )3,0±6,2( × 01 4 )3,0±8,2( × 01 4 )3,0±2,2( × 01 4 +ниллиципмА+ПГО KKЛ pmA+PPA ci +nilli LBC rehcsE i ilocaihc - )3,0±1,3( × 01 4 )3,0±7,2( × 01 3 )3,0±9,4( × 01 2 ppssuccocoretnE - )3,0±6,1( × 01 3 )3,0±1,2( × 01 3 )3,0±2,5( × 01 2 ppssuccocolyhpatS - )3,0±4,5( × 01 4 )3,0±3,1( × 01 4 )3,0±0,5( × 01 3 ppssuetorP - )3,0±1,7( × 01 2 )3,0±4,5( × 01 2 )2,0±2,2( × 01 2 ppsalleisbelK - )3,0±1,3( × 01 2 0 0 ppssedioretcaB - )3,0±5,2( × 01 3 )3,0±1,4( × 01 2 0 ppsmuiretcabosuF - )3,0±8,3( × 01 2 )3,0±4,3( × 01 2 )3,0±0,1( × 01 2 185 problems of cryobiology Vol. 21, 2011, №2 проблемы криобиологии Т. 21, 2011, №2 Таблица 2. Микрофлора перитонеального экссудата крыс при различных методах терапии Table 2. Microflora of peritoneal exudate of rats under different therapy methods хынтовижаппурГ slaminafopuorG ымзинагрооркиМ smsinagroorciM лм/ЕОK,йиреткабовтсечилоK lm/UFC,airetcabforebmuN елсопиктус1 иицарепо yregrusretfayad1 елсопиктус1 иимоторапалер retfayad1 ymotorapaler елсопкотус3 иимоторапалер retfasyad3 ymotorapaler елсопкотус5 иимоторапалер retfasyad5 ymotorapaler )ьлортнок(яанткатнИ lortnoctcatnI rehcsE i ilocaihc )2,0±1,2( × 01 4 )2,0±5,3( × 01 5 )2,0±7,2( × 01 4 )2,0±9,3( × 01 2 ppssuccocolyhpatS )2,0±0,4( × 01 5 )3,0±1,6( × 01 6 )2,0±5,8( × 01 7 )2,0±1,3( × 01 4 ppssedioretcaB )2,0±8,1( × 01 7 )2,0±1,1( × 01 9 )2,0±5,1( × 01 9 )2,0±0,2( × 01 4 ПГО PPA rehcsE i ilocaihc - )3,0±0,3( × 01 5 )3,0±0,3( × 01 4 )3,0±6,1( × 01 2 ppssuccocolyhpatS - 2,4( )3,0± × 01 5 )3,0±9,1( × 01 4 )2,0±8,4( × 01 3 ppssedioretcaB - )3,0±2,5( × 01 8 )3,0±5,3( × 01 7 )3,0±2,1( × 01 4 ниллиципмА+ПГО pmA+PPA ci nilli rehcsE i ilocaihc - )3,0±2,5( × 01 4 )3,0±4,6( × 01 2 )3,0±1,1( × 01 2 ppssuccocolyhpatS - )3,0±3,2( × 01 4 )3,0±7,3( × 01 2 )3,0±9,1( × 01 2 ppssedioretcaB - )3,0±5,2( × 01 8 )3,0±9,2( × 01 7 )3,0±5,4( × 01 3 +ниллиципмА+ПГО KKЛ pmA+PPA ci +nilli LBC rehcsE i ilocaihc - )3,0±4,6( × 01 3 )2,0±80,1( × 01 2 0 ppssuccocolyhpatS - )3,0±5,2( × 01 3 )3,0±7,1( × 01 2 0 ppssedioretcaB - )3,0±1,3( × 01 3 0 0 KKЛ+ПГО LBC+PPA rehcsE i ilocaihc - )3,0±3,6( × 01 4 )3,0±1,3( × 01 2 )3,0±3,1( × 01 2 ppssuccocolyhpatS - )3,0±0,3( × 01 4 )3,0±3,2( × 01 2 )3,0±2,1( × 01 2 ppssedioretcaB - )3,0±5,3( × 01 7 )3,0±9,5( × 01 6 )3,0±8,1( × 01 3 хынтовижаппурГ slaminafopuorG ымзинагрооркиМ Mi smsinagroorc лм/ЕОK,йиреткабовтсечилоK lm/UFC,airetcabforebmuN елсопиктус1 иицарепо yregrusretfayad1 елсопиктус1 иимоторапалер retfayad1 ymotorapaler елсопкотус3 иимоторапалер retfasyad3 ymotorapaler елсопкотус5 иимоторапалер retfasyad5 ymotorapaler KKЛ+ПГО LBC+PPA rehcsE i ilocaihc - )3,0±5,4( × 01 5 )3,0±1,4( × 01 4 )3,0±2,1( × 01 4 ppssuccocoretnE - )3,0±2,3( × 01 4 )3,0±5,2( × 01 4 )3,0±1,6( × 01 3 ppssuccocolyhpatS - )3,0±7,4( × 01 7 )3,0±3,8( × 01 6 )3,0±1,4( × 01 6 ppssuetorP - )3,0±0,6( × 01 3 )3,0±8,2( × 01 5 )3,0±5,1( × 01 3 ppsalleisbelK - )3,0±9,2( × 01 2 )3,0±5,2( × 01 2 )3,0±8,1( × 01 2 ppssedioretcaB - )3,0±0,4( × 01 3 )3,0±1,2( × 01 3 )3,0±5,1( × 01 3 ppsmuiretcabosuF - )3,0±0,5( × 01 4 )3,0±8,2( × 01 4 )30,0±8,0( × 01 4 186 problems of cryobiology Vol. 21, 2011, №2 проблемы криобиологии Т. 21, 2011, №2 Продолжение таблицы 2 Table 2. (Continued from previous page) Таблица 3. Микробная обсемененность венозной крови крыс с ОПП при различных методах терапии Table 3. Microbial contamination of venous blood of rats with APP under different therapy methods 187 problems of cryobiology Vol. 21, 2011, №2 проблемы криобиологии Т. 21, 2011, №2 Представленные данные о пристеночной мик- рофлоре тонкого кишечника, перитонеального экссудата и венозной крови экспериментальных животных свидетельствуют о том, что использо- ванная нами модель острого перитонита позволи- ла воспроизвести классическую, с точки зрения со- временных концепций, гнойно-септическую микст- инфекцию. В результате проведенной операции произошло качественное и количественное измене- ние микрофлоры тонкого кишечника. Развилась его колонизация в высоких титрах патогенными и ус- ловно-патогенными бактериями семейства Entero- bacteriaceae, аспорогенными анаэробными бакте- риями, грамположительными бактериями родов Staphylococсus и Enterococcus. Под действием совокупности факторов вирулентности (адгезинов, инвазинов, агрессинов, имидинов, модулинов и др.) были нарушены защитные барьеры с последующим инфицированием брюшной полости и крови [2]. Об этом свидетельствует качественный состав микро- флоры перитонеального экссудата и венозной крови. При использованных методах терапии выраженный антимикробный эффект наблюдали при релапаро- томии с введением ампициллина в сочетании с ЛКК. Данная терапия обеспечивала наиболее выражен- ное снижение колонизации тонкого кишечника и инфицирования брюшной полости патогенными и условно-патогенными бактериями, а также эради- кацию венозной крови от микроорганизмов. Тера- певтический эффект релапаротомии с санацией брюшной полости одним из препаратов (раствор фурацилина, ампициллин или ЛКК) был менее выражен и одинаков во всех 3-х группах. Учитывая, что ЛКК не обладает прямым бактерицидным или бактериостатическим действием, можно сделать вывод о его иммуномодулирующем эффекте. Известно, что при сепсисе формируется иммуно- логический дистресс [1, 3], для коррекции которого необходимо нейтрализовать возбудителя и его токсины, изменить активность макрофагов, грану- лоцитов, лимфоцитов, тромбоцитов [6, 11], восстано- вить баланс синтеза и экскреции про- и противос- палительных цитокинов [3], предупредить развитие полиорганной недостаточности [2, 4]. Наиболее вероятно, что препарат криоконсервированного ЛКК участвует в коррекции иммунологического дистресса [1, 6], что в комбинации с противомик- робным действием ампициллина дает выраженный терапевтический эффект. При макроскопическом исследовании парие- тальной брюшины у всех животных с ОГП на 1-е сутки после релапаротомии морфологическая картина отражала реакцию организма на началь- ном этапе развития воспалительного процесса. Париетальная брюшина была тусклая, набухшая, полнокровная с обилием инъецированных, четко контурируемых кровеносных сосудов, умеренным and Euterococcus developed. The combination of virulence factors (adhesins, invasins, agressins, imidins, modulins etc.) disordered the protective bar- riers, and resulted in following infection of abdomi- nal cavity and blood [2]. This is confirmed with quali- tative composition of microflora of peritoneal exu- dates and venous blood. When using these therapeutic methods the manifested antimicrobic effect was ob- served during relaparotomy and with the injection of ampicillin in a combination with CBL. This therapy provided the most manifested reduction of small in- testine colonization and infection of abdominal cav- ity with pathogenic and opportunistic bacteria, as well as eradication of venous blood from microorganisms. Therapeutic effect from relaparotomy when sanating an abdominal cavity with one of the preparation (Furacinum, Ampicillin or CBL) was less manifested and similar in all three groups. Taking into accound that CBL does not possess a direct bactericide and bacteriostatic effect, its immune modulating influence may be supposed. Its is known that during sepsis an immunologic distress is formed [1, 3], for the correc- tion of which it is necessary to neutralize the causa- tive agent and its toxins, to correct the activity of macrophages, granulocytes, lymphocytes, platelets [6, 11], to recover the balance of synthesis and excre- tion of pro- and anti-inflammatory cytokines [3], to prevent the development of polyorgan insufficiency [2, 4]. It is more likely that preparation of cryopre- served CBL participates in the correction of immu- nological distress [1, 6], that in the combination with antimicrobic effect of Ampicillin provides a mani- fested therapeutic effect. Macroscopic study of parietal of peritoneum in all the animals with APP revealed to the first day after relaparotomy the morphological picture of an organ- ism response at an initial stage of development of inflammatory process. Parietal peritoneum was dim, swollen, plethorical with an abundance of injected, dis- tinctly circumscribed blood vessels, moderate number of fibrinous depositions on its surface. Intestinal loops are moderately infiltrated, covered with fibrin touch, liquid is found in the lumen. There was microscopically observed the perito- neum oedema with loosening and separation of elas- tic and collagen fibers. There was sharply expressed the vessel lumen ectasia of microhemocirculatory channel (MHCC). In peritoneum there was revealed a small number of neutrophil polymorphonuclear leukocytes (NPNL) (0.2200 ± 0.0240), single macro- phages and lymphocytes. To the 3rd day the morpho- logical picture of parietal peritoneum was character- ized with leukocyte-macrophage reaction, progress- ing of discirculatory disorders in MHCC, stipulated by focus disorganization of collagen fibers of capil- laries and venulas basal membranes, contributing to the strengthening of permeability of MHCC vessels 188 problems of cryobiology Vol. 21, 2011, №2 проблемы криобиологии Т. 21, 2011, №2 количеством фибринозных наложений на ее поверх- ности. Петли кишок умеренно инфильтрированы, покрыты налетом фибрина, в просвете обнаружи- валась жидкость. Микроскопически наблюдали отек брюшины с разрыхлением и разволокнением эластических и коллагеновых волокон. Резко выражена эктазия про- света сосудов микрогемоциркуляторного русла (МГЦР). В брюшине выявляли небольшое коли- чество нейтрофильных полиморфноядерных лейко- цитов (НПЯЛ) (0,2200 ± 0,0240), единичные макро- фаги и лимфоциты. На 3-и сутки морфологическая картина париетальной брюшины характеризова- лась лейкоцитарно-макрофагальной реакцией, про- грессированием дисциркуляторных расстройств в МГЦР, обусловленных очаговой дезорганизацией коллагеновых волокон базальных мембран капилля- ров и венул, что способствовало усилению прони- цаемости сосудов МГЦР и лейкодиапедезу. На 5-е сутки у животных наблюдали гнойно-фибринозное воспаление париетальной брюшины с выраженным некротическим компонентом, резкое угнетение барьерной функции тонкой кишки. Микроскопичес- ки брюшина практически лишена мезотелиальной выстилки. Во всех ее слоях выявляли инфильтраты НПЯЛ (0,3803 ± 0,0 320), очаги некроза (0,0172 ± 0,004 мм2). В большинстве сосудов отмечали де- структивные изменения всей толщины стенки в виде альтеративного тромбофлебита и тромбоарте- риолита. У крыс группы 3 релапаротомия с введением ампициллина незначительно снижала воспаление (с 1-х по 3-и сутки). Однако у них отмечали поврежде- ние барьерной функции тонкой кишки и транслока- цию симбионтной микрофлоры из просвета кишеч- ника в полость брюшины. Микроскопически в брюшине были выявлены инфильтраты, состоящие из НПЯЛ (0,3230 ± 0,0334), лаброцитов, лимфоцитов и единичных макрофагов, очаги некроза (0,0160 ± 0,0038 мм2). На 5-е сутки у животных этой группы отмечали нарастание ди- строфических и некротических процессов в пари- етальной брюшине с инфильтратами, состоящими из НПЯЛ (0,3780 ± 0,0330), макрофагов. Лимфоциты обнаружены не были. Совместное введение с антибиотиком препара- та ЛКК обеспечивало уменьшение воспалительно- го процесса в брюшине и колонизации тонкого кишечника. Уже на 3-и сутки у крыс этой группы дистрофические и некротические процессы в брю- шине были менее выражены. Микроскопически точечные инфильтраты состояли из единичных НПЯЛ и макрофагов. Очаги некроза обнаружива- лись не у всех животных, площадь очагов уменьша- лась и составляла в среднем 0,0023 ± 0,0002 мм2. На 5-е сутки у всех крыс группы 4 наблюдали and leukodiapedesis. To the 5th day in the animals there were observed pyo-fibrinous inflammation of parietal peritoneum with manifested necrotic compo- nent, sharp suppression of barrier function of small intestine. Microscopically the peritoneum was nearly deprived of mesothelial embedding. In all its layers there were found NPNL infiltrates (0.3803 ± 0.00320), necrosis foci (0.0172 ± 0.004 mm2). In the majority of vessels there were noted destructive changes of the whole width of the wall of an alter- native thrombophlebitis or thromboarterioritis types. In the rats of group 3 the relaparotomy with Am- picillin injection slightly decreased an inflammation (from the first to the third days). However, there were noticed the impairment of barrier function of small intestine and translocation of symbiotic micro- flora from bowel lumen into peritoneum cavity. Microscopically in peritoneum there were revealed infiltrates, consisting of NPNL (0.3230 ± 0.0334), labrocytes, lymphocytes and single macrophages, necrosis foci (0.0160 ± 0.038 mm2). To the 5th day in the animals of this group there was found an en- hancement of dystrophic and necrotic processes in parietal peritoneum with infiltrates, consisting of NPNL (0.3780 ± 0.0330), macrophages. No lympho- cytes were found. A combined injection of CBL with antibiotic pro- vided the lessening of inflammatory process in peri- toneum and colonization of small intestine. Even to the 3rd day in rats of this group dystrophic and necrotic processes in peritoneum were less profound. Micro- scopically the point infiltrates consisted of single NPNL and macrophages. Necrosis foci were found not in all animals, the area of foci decreased and made in average 0.0023 ± 0.0002 mm2. To the 5th day in all the rats of group 4 there was observed the re- duction of oedema of parietal peritoneum with no fibrinous depositions on its surface with a distinct contour of blood vessels. Intestinal loops were not infiltrated. Therapeutic effect of the application of cryopre- served CBL preparation was less manifested in the rats of group 5. Reduced inflammatory process in peritoneum and colonization of small intestine were noted to the 5th day. Microscopic study has shown that to the 3rd day in the rats of this group dystrophic and necrotic processes in peritoneum were less mani- fested if compared with the group 3, but were more profound comparing to group 4. Infiltrates, revealed in parietal peritoneum of animals to the 3rd day con- sisted of NPNL (0.1560 ± 0.230), lymphocytes and single macrophages, and necrosis foci were found (0.0326 ± 0.0032 mm2). To the 5th day in animals of this group a reduced inflammation of peritoneum was observed, although infiltrates and necrosis foci were found both in peritoneum and intestinal loops. 189 problems of cryobiology Vol. 21, 2011, №2 проблемы криобиологии Т. 21, 2011, №2 уменьшение отечности париетальной брюшины без фибринозных наложений на ее поверхности с чет- ким контуром кровеносных сосудов. Петли кишок не были инфильтрированы. Терапевтический эффект от применения только препарата криоконсервированного ЛКК был менее выраженным (группа 5). Уменьшение воспали- тельного процесса в брюшине и колонизации тонкого кишечника отмечали на 5-е сутки. Микроскопи- ческое исследование показало, что на 3-и сутки у крыс этой группы дистрофические и некротические процессы в брюшине были менее выраженными по сравнению с группой 3, но более выраженными, чем у крыс группы 4. Инфильтраты, выявленные в париетальной брюшине животных на 3-и сутки, состояли из НПЯЛ (0,1560 ± 0,0230), лимфоцитов и единичных макрофагов, наблюдались очаги некро- за (0,0326 ± 0,0032 мм2). На 5-е сутки у животных этой группы наблюдали уменьшение воспаления брюшины, хотя инфильтраты и очаги некроза обна- руживались как в брюшине, так и в петлях кишок. Выводы Использованная экспериментальная модель острого разлитого перитонита воспроизводит гной- но-септическую микст-инфекцию с качественным и количественным изменением микрофлоры тонко- го кишечника, инфицированием этой микрофлорой брюшной полости и крови. Релапаротомия с введе- нием ампициллина и препарата криоконсервиро- ванного лейкоконцентрата кордовой крови обеспе- чивает эрадикацию микроорганизмов из крови и наиболее выраженное снижение колонизации тонкого кишечника и инфицированности брюшной полости патогенными и условно-патогенными бак- териями, уменьшение дистрофических и некроти- ческих процессов в брюшной полости по сравнению с монотерапией раствором фурацилина, ампицил- лином или препаратом ЛКК. Литература Бойко В.В., Грищенко В.И., Цуцаева А.А., Криворучко И.А. Применение кордовой крови у больных с желудочными кровотечениями язвенного генеза // Вісник проблем біології і медицини.– 1999.– Вип. 3.– С. 14–18. Бондарев В.И., Бондарев Р.В. К вопросу о видеолапарос- копической санации брюшной полости у больных с острым разлитым перитонитом // Укр. мед. альманах.– 2003.– №6.– С. 20–22. Бунатян А.А., Ивняева Е.В., Нигода В.В., Винницкий Л.И. Иммунокорректоры в комплексном лечении послеопе- рационных гнойно-воспалительных осложнений у хирур- гических больных и мониторинг иммунологических пока- зателей // Анестезиология и реаниматология.– 2004.– №5.– С. 79–83. Гельдфанд Б.Р., Руднев В.А., Проценко Д.Н. и др. Сепсис: диагностическая концепция, патогенез и интенсивная терапия // Сепсис в начале ХХI века: классификация, Conclusions Used experimental model of acute generalized peritonitis reproduces pyo-septic mixed infection with qualitative and quantitative change of small intestine microflora, infection with this microflora of perito- neum and blood. Relaparotomy with injection of ampi- cillin and preparation of cryopreserved cord blood leucoconcentrate provides eradication of microorgan- isms from blood and the most manifested decrease of small intestine colonization and infection of peri- toneal cavity with pathogenic and opportunistic bac- teria, reduced dystrophic and necrotic processes in peritoneal cavity if compared with monotherapy by Furacinum solution, Ampicillin or CBL preparation. References Boyko V.V., Grishenko V.I., Tsutsaeva A.A., Krivoruchko I.A. Application of cord blood in patients with gastric bleedings of ulcer genesis// Visnyk Problem Biologii i Meditsyny.– 1999.– Issue 3.– P. 14–18. Bondarev V.I., Bondarev R.V. To the question of videolaparos- copic sanation of abdominal cavity of patients with acute generalized peritonitis// Ukr. Med. Almanakh.– 2003.– N6.– P. 20–22. Butanyan A.A., Ivnyaeva E.V., Nigoda V.V., Vinnitsky L.I. Immune correctors in complex treatment of post-surgery pyo- inflammatory complications in surgical patients and monitoring of immunological indices// Anesteziologiya i Reanimatologiya.– 2004.– N5.– P. 79–83. Geldfand B.R., Rudnev V.A., Protsenko D.N. et al. Sepsis: diagnostic conception, pathogenesis and intensive therapy// Sepsis in the beginning of 21st century: classification, clinical- diagnostical conception and treatment.– Moscow-Saint- Petersburg, 2004.– P. 3–35. Purulent peritonitis. Pathophysiology and treatment/ Ed. by A.Ya. Tsyganenko.– Kharkov: Kontrast, 2002.– 280 p. Goltsev A.N., Kalinichenko T.A. Human umbilical cord blood as the source of hemopoietic cells for clinical application. Characteristics of hemopoietic potential// Problems of Cryobiology.– 1998.– N1.– P. 3–24. Dachenko V.F., Biryukova S.V., Starobinets Z.T. et al. Laboratory diagnostics of pyo-inflammatory diseases, stipulated by asporogenic anaerobic microorganisms: Methodical recommendations.– Kharkiv, 2000.– 35 p. General ethical principles of experiments in animals // Endokrinologiya.– 2003.– Vol. 8, N1.– P. 142–145. Zapadnyuk I.P., Zapadnyuk V.I., Zakhariya E.A., Zapad- nyuk B.V. Laboratory animals. Breeding, keeping, use in experiment. Kyiv: Vysscha Shkola, 1983.– 383p. Malyy V.P. Sepsis in clinician's practice.– Kharkov: Prapor, 2008.– 584 p. Medical microbiology. Part one / Ed. By A.M. Korolyuk, V.B. Sboychakov.– St.-Petersburg: Meditsyna, 2002.– 267 p. Medical microbiology, virusology and immunology: Manual / Ed. by A.A. Vorobyev.– Moscow: Meditsinskoe informatsion- noe agentstvo, 2004.– 691 p. Melnik V.M., Pojda O.I. Substantiation and results of pathogenetic treatment of experimental purulent generalized peritonitis // Ukr. Zhurnal Ekstremalnoi Medytsyny. im. G.O. Mozhayeva.– 2005.– Vol. 6, N4.– P. 56–60. Merkulov G.A. Course of pathological technique.– Moscow: Meditsina, 1969.– 423p. Order of the Ministry of Health Care of Ukraine N167 dated of 05.04.2007 "About approval of methodical recommen- 1. 2. 3. 4. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 190 problems of cryobiology Vol. 21, 2011, №2 проблемы криобиологии Т. 21, 2011, №2 клинико-диагностическая концепция и лечение.– М.-СПб, 2004.– С. 3–35. Гнойный перитонит. Патофизиология и лечение /Под ред. А.Я. Цыганенко.– Харьков: Контраст, 2002.– 280 с. Гольцев А.Н., Калиниченко Т.А. Пуповинная кордовая кровь человека как источник гемопоэтических клеток для клинического применения. Характеристики гемопоэ- тического потенциала // Проблемы криобиологии.– 1998.– №1.– С. 3–24. Даченко В.Ф., Бірюкова С.В., Старобінець З.Т. та ін. Лабораторна діагностика гнійно-запальних захворювань, обумовлених аспорогенними анаеробними мікроорга- нізмами: Метод. рекомендації.– Харків, 2000.– 35 с. Загальноетичні принципи експериментів на тваринах // Ендокринологія.– 2003.– Т. 8, №1.– С. 142–145. Западнюк И.П., Западнюк В.И., Захария Е.А., Запад- нюк Б.В. Лабораторные животные. Разведение, содержа- ние, использование в эксперименте.– Київ: Вища школа, 1983.– 383 с. Малый В.П. Сепсис в практике клинициста.– Харьков: Прапор, 2008.– 584 с. Медицинская микробиология. Часть первая / Под ред. А.М. Королюка, В.Б. Сбойчакова.– СПб: Медицина, 2002.– 267 с. Медицинская микробиология, вирусология и иммуноло- гия: Учебник / Под ред. А.А. Воробьева.– М.: Медицинское информационное агентство, 2004.– 691 с. Мельник В.М., Пойда О.І. Обґрунтування і результати патогенетичного лікування експериментального гострого гнійного поширеного перитоніту // Укр. журнал екстре- мальної медицини ім. Г.О. Можаєва.– 2005.– Т. 6, №4.– С. 56–60. Меркулов Г.А. Курс патологической техники.– М.: Меди- цина, 1969.– 423 с. Наказ МОЗ України №167 від 05.04.2007 р. "Про затвердження методичних вказівок "Визначення чутли- вості мікроорганізмів до антибактеріальних препаратів". Приказ МЗ СССР №535 от 22.04.85 г. "Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений". Симонян К.С. Перитонит.– М.: Медицина, 1971.– 296 с. Усиков Ф.Ф., Пастернак Е.В., Романова Л.Д. и др. Хирургическая модель острого гнойного перитонита // Хирургия.– 1984.– №8.– С. 27–29. Чернов В.Н., Белик Б.М. Классификация и принципы лечения острого гнойного перитонита // Хирургия.– 2000.– №4.– С. 52–56. Ярешко Н.А. Антибиотикотерапия разлитого гнойного перитонита: методологические аспекты преподавания на кафедре общей хирургии // З'їзд хірургів України. Тези доп.– Тернопіль, 2002.– С. 337–339. Пат. № 31847А Україна, МПК А01№1/02. Спосіб кріо- консервування кровотворних клітин кордової крові / А.О. Цуцаєва, В.І. Грищенко, О.С. Прокопюк та ін.; Зая- влено 05.11.98; Опубл. 15.12.2000.– Бюл. №7.– С. 1.10. Burger S.R. Umbical cord blood stem cells // Handbook of transfusion medicine.– London: Academic Press, 2001.– P. 171–178. Kurtzberg J. Progress with unrelated cord blood transplants in adults // Blood.– 2003.– Vol. 101.– P. 4648–4659. Zapata-Sirvent R.L., Hansbrough J.F. Bacterial translocation. A role in an etiology of a sepsis and multiorgane insufficiency // GEN.– 1992.– Vol. 46, N2.– P. 137–151. Rennekampff O.H., Tenenhaus M., Hansbrough J. et al. Effects of recombinant bactericidal, permeability-increasing protein on bacterial translocation and pulmonary neutrophil sequestration in burned mice // J. Burn Care Rehabil.– 1997.– Vol. 18, N1 (Pt. 1).– P. 17–21. Поступила 01.03.2011 dations "Examination of sensitivity of microorganisms to anti- bacterial preparations"". Order of the Ministry of Health Care of USSR N535 dated of 22.04.1985 "About unification of microbiological research methods, applied in clinical and diagnostic laboratories of therapeutic and prophylactic institutions". Simonyan K.S. Peritonitis. - Moscow: Meditsina, 1971. - 296p. Usikov F.F., Pasternak E.B., Romanova L.D. et al. Surgical model of acute purulent peritonitis// Khirurgiya.– 1984.– N8.– P. 27–29. Chernov V.N., Belik B.M. Classification and principles of treatment of acute purulent peritonitis // Khirurgiya.– 2000.– N4.– P. 52–56. Yareshko N.A. Antibiotic therapy of generalized purulent peritonitis: methodological aspects of teaching at the chair of general surgery// Congress of Surgeons of Ukraine. Proceedings Reports.– Ternopil, 2002.– P. 337–339. Patent N31847A Ukraine IPC A01N1/02. Method of cryopreservation of cord blood hemopoietic cells / A.O. Tsu- tsayeva, V.I. Grischenko, O.S. Prokopyuk et al.; Applied 05.11.98; Publ. 15.12.200.– Bul. N7.– P. 1.10. Burger S.R. Umbical cord blood stem cells // Handbook of transfusion medicine.– London: Academic Press, 2001.– P. 171–178. Kurtzberg J. Progress with unrelated cord blood transplants in adults // Blood.– 2003.– Vol. 101.– P. 4648–4659. Zapata-Sirvent R.L., Hansbrough J.F. Bacterial translocation. A role in an etiology of a sepsis and multiorgane insufficiency // GEN.– 1992.– Vol. 46, N2.– P. 137–151. Rennekampff O.H., Tenenhaus M., Hansbrough J. et al. Effects of recombinant bactericidal, permeability-increasing protein on bacterial translocation and pulmonary neutrophil sequestration in burned mice // J. Burn Care Rehabil.– 1997.– Vol. 18, N1 (Pt. 1).– P. 17–21. Accepted 01.03.2011 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19. 20. 21. 22. 23. 24. 25. 16. 17. 18. 19. 20. 21. 22. 23. 24. 25.