Влияние трансплантации криоконсервированного костного мозга на динамику восстановления морфофункциональных свойств лимфоидных, миелоидных и эндокринных органов у летально облученных реципиентов

Комплексно изучали морфофункциональные свойства лимфоидных, миелоидных и эндокринных органов у летально облученных мышей на разных этапах после трансплантации им криоконсервированных клеток сингенного костного мозга (КСКМ). Показано, что трансплантация КСКМ летально облученным животным стимулирует п...

Повний опис

Збережено в:

Бібліографічні деталі
Дата:	2009
Автори:	Цуцаева, А.А., Черноусова, С.С., Глушко, Т.А., Шатилова, Л.Е., Волина, В.В., Сокол, Л.В., Ивахненко, Л.Ю., Чернышенко, Л.Г., Бровко, Е.В.
Формат:	Стаття
Мова:	Russian
Опубліковано:	Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України 2009
Теми:	Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология
Онлайн доступ:	http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/5388
Теги:	Додати тег Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:	Влияние трансплантации криоконсервированного костного мозга на динамику восстановления морфофункциональных свойств лимфоидных, миелоидных и эндокринных органов у летально облученных реципиентов / А.А. Цуцаева, С.С. Черноусова, Т.А. Глушко, Л.Е. Шатилова, В.В. Волина, Л.В. Сокол, Л.Ю. Ивахненко, Л.Г. Чернышенко, Е.В. Бровко // Пробл. криобиологии. — 2009. — T. 19, № 1. — С. 71-87. — Бібліогр.: 27 назв. — рос.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	irk-123456789-5388
record_format	dspace
spelling	irk-123456789-53882010-01-19T12:01:16Z Влияние трансплантации криоконсервированного костного мозга на динамику восстановления морфофункциональных свойств лимфоидных, миелоидных и эндокринных органов у летально облученных реципиентов Цуцаева, А.А. Черноусова, С.С. Глушко, Т.А. Шатилова, Л.Е. Волина, В.В. Сокол, Л.В. Ивахненко, Л.Ю. Чернышенко, Л.Г. Бровко, Е.В. Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология Комплексно изучали морфофункциональные свойства лимфоидных, миелоидных и эндокринных органов у летально облученных мышей на разных этапах после трансплантации им криоконсервированных клеток сингенного костного мозга (КСКМ). Показано, что трансплантация КСКМ летально облученным животным стимулирует процессы восстановления органов нейрогуморальной системы. При этом изменения уровня гормонов трийодтиронина (Т3), тироксина (Т4), кортикостерона и инсулина в периферической крови, протекающие волнообразно, хоть и не достигают уровня физиологической нормы, однако обеспечивают выживаемость в течение 3-х месяцев летально облученных животных, погибающих без трансплантации к 10 суткам. Комплексно вивчали морфофункціональні властивості лімфоїдних, мієлоїдних та ендокринних органів у летально опромінених мишей на різних етапах після трансплантації їм кріоконсервованих клітин сингенного кісткового мозку (КСКМ). Показано, що трансплантація КСКМ летально опроміненим тваринам стимулює процеси відновлення органів нейрогуморальної системи. При цьому зміни рівня гормонів трийодтироніну (Т3), тироксину (Т4), кортикостерону та інсуліну в периферичній крові, які протікають хвилеподібно, хоч і не досягають рівня фізіологічної норми, проте забезпечують виживання на протязі 3-х місяців летально опромінених тварин, що гинуть без трансплантації на 10 добу. There was realised a combined study of morphofunctional properties of lymphoid, myeloid and endocrine organs in lethally irradiated mice at different stages after cryopreserved syngeneic bone marrow (CSBM) cell transplantation. The CSBM cell transplantation to lethally irradiated animals demonstrated the stimulation of recovery processes in neurohumoral organs. At the same time the wave-like changes in triiodothyronine (T3), thyroxin (T4), corticosterone and insulin hormone levels in peripheral blood, even if not reaching the level of physiological norm, provide the survival within 3 months for lethally irradiated animals, dying without transplantation to the 10th day. 2009 Article Влияние трансплантации криоконсервированного костного мозга на динамику восстановления морфофункциональных свойств лимфоидных, миелоидных и эндокринных органов у летально облученных реципиентов / А.А. Цуцаева, С.С. Черноусова, Т.А. Глушко, Л.Е. Шатилова, В.В. Волина, Л.В. Сокол, Л.Ю. Ивахненко, Л.Г. Чернышенко, Е.В. Бровко // Пробл. криобиологии. — 2009. — T. 19, № 1. — С. 71-87. — Бібліогр.: 27 назв. — рос. 0233-7673 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/5388 616.419-089.843-001.28-092.9:616.4-003.93 ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
language	Russian
topic	Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология
spellingShingle	Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология Цуцаева, А.А. Черноусова, С.С. Глушко, Т.А. Шатилова, Л.Е. Волина, В.В. Сокол, Л.В. Ивахненко, Л.Ю. Чернышенко, Л.Г. Бровко, Е.В. Влияние трансплантации криоконсервированного костного мозга на динамику восстановления морфофункциональных свойств лимфоидных, миелоидных и эндокринных органов у летально облученных реципиентов
description	Комплексно изучали морфофункциональные свойства лимфоидных, миелоидных и эндокринных органов у летально облученных мышей на разных этапах после трансплантации им криоконсервированных клеток сингенного костного мозга (КСКМ). Показано, что трансплантация КСКМ летально облученным животным стимулирует процессы восстановления органов нейрогуморальной системы. При этом изменения уровня гормонов трийодтиронина (Т3), тироксина (Т4), кортикостерона и инсулина в периферической крови, протекающие волнообразно, хоть и не достигают уровня физиологической нормы, однако обеспечивают выживаемость в течение 3-х месяцев летально облученных животных, погибающих без трансплантации к 10 суткам.
format	Article
author	Цуцаева, А.А. Черноусова, С.С. Глушко, Т.А. Шатилова, Л.Е. Волина, В.В. Сокол, Л.В. Ивахненко, Л.Ю. Чернышенко, Л.Г. Бровко, Е.В.
author_facet	Цуцаева, А.А. Черноусова, С.С. Глушко, Т.А. Шатилова, Л.Е. Волина, В.В. Сокол, Л.В. Ивахненко, Л.Ю. Чернышенко, Л.Г. Бровко, Е.В.
author_sort	Цуцаева, А.А.
title	Влияние трансплантации криоконсервированного костного мозга на динамику восстановления морфофункциональных свойств лимфоидных, миелоидных и эндокринных органов у летально облученных реципиентов
title_short	Влияние трансплантации криоконсервированного костного мозга на динамику восстановления морфофункциональных свойств лимфоидных, миелоидных и эндокринных органов у летально облученных реципиентов
title_full	Влияние трансплантации криоконсервированного костного мозга на динамику восстановления морфофункциональных свойств лимфоидных, миелоидных и эндокринных органов у летально облученных реципиентов
title_fullStr	Влияние трансплантации криоконсервированного костного мозга на динамику восстановления морфофункциональных свойств лимфоидных, миелоидных и эндокринных органов у летально облученных реципиентов
title_full_unstemmed	Влияние трансплантации криоконсервированного костного мозга на динамику восстановления морфофункциональных свойств лимфоидных, миелоидных и эндокринных органов у летально облученных реципиентов
title_sort	влияние трансплантации криоконсервированного костного мозга на динамику восстановления морфофункциональных свойств лимфоидных, миелоидных и эндокринных органов у летально облученных реципиентов
publisher	Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
publishDate	2009
topic_facet	Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология
url	http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/5388
citation_txt	Влияние трансплантации криоконсервированного костного мозга на динамику восстановления морфофункциональных свойств лимфоидных, миелоидных и эндокринных органов у летально облученных реципиентов / А.А. Цуцаева, С.С. Черноусова, Т.А. Глушко, Л.Е. Шатилова, В.В. Волина, Л.В. Сокол, Л.Ю. Ивахненко, Л.Г. Чернышенко, Е.В. Бровко // Пробл. криобиологии. — 2009. — T. 19, № 1. — С. 71-87. — Бібліогр.: 27 назв. — рос.
work_keys_str_mv	AT cucaevaaa vliânietransplantaciikriokonservirovannogokostnogomozganadinamikuvosstanovleniâmorfofunkcionalʹnyhsvojstvlimfoidnyhmieloidnyhiéndokrinnyhorganovuletalʹnooblučennyhrecipientov AT černousovass vliânietransplantaciikriokonservirovannogokostnogomozganadinamikuvosstanovleniâmorfofunkcionalʹnyhsvojstvlimfoidnyhmieloidnyhiéndokrinnyhorganovuletalʹnooblučennyhrecipientov AT gluškota vliânietransplantaciikriokonservirovannogokostnogomozganadinamikuvosstanovleniâmorfofunkcionalʹnyhsvojstvlimfoidnyhmieloidnyhiéndokrinnyhorganovuletalʹnooblučennyhrecipientov AT šatilovale vliânietransplantaciikriokonservirovannogokostnogomozganadinamikuvosstanovleniâmorfofunkcionalʹnyhsvojstvlimfoidnyhmieloidnyhiéndokrinnyhorganovuletalʹnooblučennyhrecipientov AT volinavv vliânietransplantaciikriokonservirovannogokostnogomozganadinamikuvosstanovleniâmorfofunkcionalʹnyhsvojstvlimfoidnyhmieloidnyhiéndokrinnyhorganovuletalʹnooblučennyhrecipientov AT sokollv vliânietransplantaciikriokonservirovannogokostnogomozganadinamikuvosstanovleniâmorfofunkcionalʹnyhsvojstvlimfoidnyhmieloidnyhiéndokrinnyhorganovuletalʹnooblučennyhrecipientov AT ivahnenkolû vliânietransplantaciikriokonservirovannogokostnogomozganadinamikuvosstanovleniâmorfofunkcionalʹnyhsvojstvlimfoidnyhmieloidnyhiéndokrinnyhorganovuletalʹnooblučennyhrecipientov AT černyšenkolg vliânietransplantaciikriokonservirovannogokostnogomozganadinamikuvosstanovleniâmorfofunkcionalʹnyhsvojstvlimfoidnyhmieloidnyhiéndokrinnyhorganovuletalʹnooblučennyhrecipientov AT brovkoev vliânietransplantaciikriokonservirovannogokostnogomozganadinamikuvosstanovleniâmorfofunkcionalʹnyhsvojstvlimfoidnyhmieloidnyhiéndokrinnyhorganovuletalʹnooblučennyhrecipientov
first_indexed	2025-07-02T08:31:52Z
last_indexed	2025-07-02T08:31:52Z
_version_	1836523310733590528
fulltext	71 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 19, 2009, ¹1 ÏÐÎÁËÅÌÛ ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ Ò. 19, 2009, ¹1 УДК 616.419-089.843-001.28-092.9:616.4-003.93 À.À. ÖÓÖÀÅÂÀ, Ñ.Ñ. ×ÅÐÍÎÓÑÎÂÀ, Ò.À. ÃËÓØÊÎ, Ë.Å. ØÀÒÈËÎÂÀ, Â.Â. ÂÎËÈÍÀ, Ë.Â. ÑÎÊÎË, Ë.Þ. ÈÂÀÕÍÅÍÊÎ, Ë.Ã. ×ÅÐÍÛØÅÍÊÎ, Å.Â. ÁÐÎÂÊÎ Âëèÿíèå òðàíñïëàíòàöèè êðèîêîíñåðâèðîâàííîãî êîñòíîãî ìîçãà íà äèíàìèêó âîññòàíîâëåíèÿ ìîðôîôóíêöèîíàëüíûõ ñâîéñòâ ëèìôîèäíûõ, ìèåëîèäíûõ è ýíäîêðèííûõ îðãàíîâ ó ëåòàëüíî îáëó÷åííûõ ðåöèïèåíòîâ UDC 616.419-089.843-001.28-092.9:616.4-003.93 A.A. TSUTSAYEVA, S.S. CHERNOUSOVA, T.A. GLUSHKO, L.E. SHATILOVA, V.V. VOLINA, L.V. SOKOL, L.YU. IVAKHNENKO, L.G. CHERNYSHENKO, E.V. BROVKO Effect of Cryopreserved Bone Marrow Transplantation on Dynamics of Recovery of Morphofunctional Properties of Lymphoid, Myeloid and Endocrine Organs in Lethally Irradiated Recipients Комплексно изучали морфофункциональные свойства лимфоидных, миелоидных и эндокринных органов у летально облученных мышей на разных этапах после трансплантации им криоконсервированных клеток сингенного костного мозга (КСКМ). Показано, что трансплантация КСКМ летально облученным животным стимулирует процессы восстановления органов нейрогуморальной системы. При этом изменения уровня гормонов трийодтиронина (Т3), тироксина (Т4), кортикостерона и инсулина в периферической крови, протекающие волнообразно, хоть и не достигают уровня физиоло- гической нормы, однако обеспечивают выживаемость в течение 3-х месяцев летально облученных животных, погибающих без трансплантации к 10 суткам. Ключевые слова: летальное облучение, трансплантация, криоконсервированный сингенный костный мозг, лимфоидные, миелоидные, эндокринные органы, гормоны. Комплексно вивчали морфофункціональні властивості лімфоїдних, мієлоїдних та ендокринних органів у летально опромінених мишей на різних етапах після трансплантації їм кріоконсервованих клітин сингенного кісткового мозку (КСКМ). Показано, що трансплантація КСКМ летально опроміненим тваринам стимулює процеси відновлення органів нейро- гуморальної системи. При цьому зміни рівня гормонів трийодтироніну (Т3), тироксину (Т4), кортикостерону та інсуліну в периферичній крові, які протікають хвилеподібно, хоч і не досягають рівня фізіологічної норми, проте забезпечують виживання на протязі 3-х місяців летально опромінених тварин, що гинуть без трансплантації на 10 добу. Ключові слова: летальне опромінення, трансплантація, кріоконсервований сингенний кістковий мозок, лімфоїдні, мієлоїдні, ендокринні органи, гормони. There was realised a combined study of morphofunctional properties of lymphoid, myeloid and endocrine organs in lethally irradiated mice at different stages after cryopreserved syngeneic bone marrow (CSBM) cell transplantation. The CSBM cell transplantation to lethally irradiated animals demonstrated the stimulation of recovery processes in neurohumoral organs. At the same time the wave-like changes in triiodothyronine (T3), thyroxin (T4), corticosterone and insulin hormone levels in peripheral blood, even if not reaching the level of physiological norm, provide the survival within 3 months for lethally irradiated animals, dying without transplantation to the 10th day. Keywords: lethal irradiation, transplantation, cryopreserved syngeneic bone marrow, lymphoid, myeloid, endocrine organs, hormones. * Àâòîð, êîòîðîìó íåîáõîäèìî íàïðàâëÿòü êîððåñïîíäåíöèþ: óë. Ïåðåÿñëàâñêàÿ, 23, ã. Õàðüêîâ, Óêðàèíà 61015; òåë.:+38 (057) 373-31-26, ôàêñ: +38 (057) 373-30-84, ýëåêòðîííàÿ ïî÷òà: cryo@online.kharkov.ua * To whom correspondence should be addressed: 23, Pereyaslavskaya str., Kharkov, Ukraine 61015; tel.:+380 57 373 3126, fax: +380 57 373 3084, e-mail: cryo@online.kharkov.ua Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the Na- tional Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine Èíñòèòóò ïðîáëåì êðèîáèîëîãèè è êðèîìåäèöèíû ÍÀÍ Óêðàèíû, ã. Õàðüêîâ Известно, что гомеостаз зависит от состояния ведущих систем организма: кроветворной, иммун- ной, эндокринной и нервной [4]. Поскольку функ- ционирование этих систем взаимосвязано, то нару- шение функций одной из них может повлечь за собой изменение функций других систем [7]. ÊÐÈÎÌÅÄÈÖÈÍÀ, ÊËÈÍÈ×ÅÑÊÀß È ÝÊÑÏÅÐÈÌÅÍÒÀËÜÍÀß ÒÐÀÍÑÏËÀÍÒÎËÎÃÈß CRYOMEDICINE, CLINICAL AND EXPERIMENTAL TRANSPLANTOLOGY Homeostasis is known to be dependent on the state of leading systems of an organism such as: hemo- poietic, immune, endocrine and nervous ones [4]. Sin- ce the functioning of these systems is interrelated, the disorder in one of them may involve the changes in functions of other systems [7]. 72 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 19, 2009, ¹1 ÏÐÎÁËÅÌÛ ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ Ò. 19, 2009, ¹1 Ionising radiation depending on the doze and effect duration causes differently pronounced morphofunc- tional disorders in organs of lymphoid and myeloid complexes and organs of neuroendocrine system, being the cause of hemo- and immune depressions in lethally irradiated animals and humans, that may result either in their death or development of different pathological processes [14, 20, 25]. The transplanta- tion of syngeneic or HLA-DR-DQ-compatible allogenic bone marrow was established to be the only way to recover hemopoietic processes after lethal irradiation [10, 15, 24]. The researches, devoted to studying the recovery dynamics of morphofunctional properties of neuroendocrine organs after lethal irra- diation at different stages after bone marrow transplan- tation, are single and their findings are not deprived of contradictions [1, 3, 16, 19, 23, 26, 27]. The research was aimed to study the recovery dynamics of morphofunctional properties of lympho- myeloid organs (bone marrow, blood, lymph nodes, thymus, spleen, peritoneal cavity) and endocrine ones (hypophysis, thyroid and adrenal glands, pancreas) in lethally irradiated recipients at different stages after transplantation of cryopreserved cells of syngeneic bone marrow. Materials and methods Experiments were performed in 2 months’ male mice (CBA×C57B1)F1 with 18–20 g (n=600) in autumn-winter period. Animals were divided into 3 groups: the 1st group comprised lethally irradiated animals; the 2nd one did lethally irradiated animals with introduced cryopreserved syngeneic bone marrow (CSBM) cells; and the intact animals made the 3rd one (control). Bone marrow cells were isolated from femoral bones and cryopreserved by the method, repor- ted in the paper [14]. After cryopreservation more than 90% integral cells and 87% CFUs and CFUc were determined in suspension. Donor cryopreserved bone marrow cells were intravenously introduced in 0.2 ml volume under 1×107 cell/ml dose. Animals were irra- diated in morning hours with RUМ-17 device in 7.55 Gy dose, under 180 kV voltage, 10 mA current inten- sity, 0.5±0.1 mm with LD100/10 filters. Animals were decapitated with ether narcosis in 1, 2, 3, 4, 5, 7, 10, 15, 20, 25, 30, 40, 60, 70, 80 and 90 days after expe- riment beginning. Bone marrow cells were transplan- ted 1 hr later irradiation. The experiments were carried-out according to the “General ethical principles of experiments in animals”, approved by the 2nd National Congress on Bioethics (Kiev, 2004). Thymus and lymph node cellularities were determined with Goryaev’s chamber by calculating the number of nucleated cells, obtained after soft homo- Ионизирующая радиация в зависимости от дозы и продолжительности воздействия вызывает разной степени выраженности морфофункцио- нальные нарушения органов лимфоидного и мие- лоидного комплекса и органов нейроэндокринной системы, являющиеся причиной возникновения у летально облученных животных и человека гемо- и иммунодепрессий, которые могут приводить к их гибели либо к развитию разных патологи- ческих процессов [14, 20, 25]. Установлено, что единственным способом восстановления процес- сов кроветворения после летального облучения является трансплантация сингенного, либо сов- местимого по HLA-DR-DQ аллогенного костного мозга [10, 15, 24]. Работы, посвященные исследова- нию динамики восстановления морфофункцио- нальных свойств нейроэндокринных органов пос- ле летального облучения на разных этапах после трансплантации костного мозга, единичны, а их результаты не лишены противоречий [1, 3, 16, 19, 23, 26, 27]. Цель данной работы – изучение динамики восстановления морфофункциональных свойств органов лимфомиелоидного комплекса (костного мозга, крови, лимфатических узлов, тимуса, селезенки, перитонеальной полости) и эндокрин- ных органов (гипофиза, щитовидной железы, надпочечников, поджелудочной железы) у леталь- но облученных реципиентов на разных этапах после трансплантации криоконсервированных клеток сингенного костного мозга (КСКМ) . Ìàòåðèàëû è ìåòîäû Эксперименты проводили на 600 линейных мышах-самцах (CBA×C57Bl)F1 массой 18–20 г в возрасте 2 мес. в осенне-зимний период. Животные были разделены на 3 группы: 1 – летально облучен- ные; 2 – летально облученные животные, которым вводили криоконсервированные клетки синген- ного костного мозга; 3 – интактные животные (контроль). Клетки костного мозга выделяли из бедренных костей и подвергали криоконсерви- рованию по методу [14]. После криоконсервиро- вания в суспензии определялось больше 90% сохранных клеток и 87% КОЕс и КОЕк. Клетки криоконсервированного донорского костного моз- га вводили внутривенно в объеме 0,2 мл в дозе 1×107 кл/мл. Облучали животных в утренние часы на установке РУМ-17 в дозе 7,55 Гр, при напряже- нии 180 кВ, силе тока 10 мА, фильтры 0,5±0,1 мм Al c ЛД100/10. Декапитировали животных под эфир- ным наркозом через 1, 2, 3, 4, 5, 7, 10, 15, 20, 25, 30, 40, 60, 70, 80 и 90 суток после начала экспери- мента. Клетки костного мозга трансплантировали через 1 ч после облучения. 73 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 19, 2009, ¹1 ÏÐÎÁËÅÌÛ ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ Ò. 19, 2009, ¹1 Эксперименты проведены в соответствии с “Общими принципами экспериментов на живот- ных”, одобренными ІІ Национальным конгрессом по биоэтике (Киев, 2004). Клеточность тимуса и лимфоузлов определяли в камере Горяева путем подсчета количества ядер- ных клеток, полученных после мягкой гомогени- зации предварительно взвешенного соответствую- щего органа. Количество антителообразующих клеток (АОК) в селезенке облученных животных определяли по стандартному методу [18]. Исследо- вали активность реакции бласттрансформации Т-лимфоцитов мышей на митогены фитогемагглю- тинин (ФГА) и конканавалин А (Кон А) (“Difco”, США; “Wellcome”, Великобритания) и В-лимфо- цитов – на липополисахарид (ЛПС) (“Sigma”, США). Трансформирующую активность клеток определяли по уровню включения 3Н-тимидина на счетчике SL-40 (Intertechniquе, Франция). Индекс бласттрансформации (индекс стимуляции) клеток вычисляли по формуле: уровень включения 3Н-ти- мидина в клетки, культивируемые в присутствии митогенов, в отношении к уровню включения 3Н-тимидина в клетки, культивируемые без митоге- нов [21]. Моноцитарно-макрофагальные клетки получали из экссудата перитонеальной полости животных [12]. Мазки окрашивали азур ІІ – эози- ном и подсчитывали процентное содержание раз- личных видов клеток. Фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов определяли через 1 ч после инкубации клеток со стафилоккоком-209, убитым нагреванием, подсчетом количества фаго- цитирующих клеток. Кислую фосфатазу и неспе- цифическую эстеразу в клетках экссудата перито- неальной полости определяли гистохимическим методом [17, 22], средний гистохимический коэф- фициент (СГК) вычисляли по формуле [13]. Гистологические препараты эндокринных органов (гипофиза, щитовидной железы, надпочечников, поджелудочной железы) окрашивали гематоксили- ном и эозином. В гипофизе подсчитывали хромо- фильные и хромофобные ряды клеток передней доли гипофиза (аденогипофиз); вычисляли про- центное содержание этих клеток, измеряли пло- щадь клеток и их ядер с помощью окуляр-микро- метра и определяли ядерно-цитоплазменное отношение в этих группах клеток [2]. Для гистоло- гического исследования использовали правый надпочечник, а левый – для определения липидов в криостатных срезах, которые окрашивали суда- ном III и суданом черным В по Лизону [8]. Степень суданофилии оценивали с помощью гистохими- ческого коэффициента [13]. В плазме крови живот- ных радиоиммунологическими методами опреде- ляли концентрацию тиреоидных гормонов – тироксина (Т4) и трийодтиронина (Т3), кортикосте- рона и инсулина (наборы ХОП ИБОХ НАН Бела- genisation of a preliminary suspended corresponding organ. The number of antibody-forming cells (AFCs) in spleen of irradiated animals was defined according to the standard method [18]. The activity of murine T-lymphocyte blast-transformation response to phyto- hemagglutinin (PHA) and concanavalin A (Con A) mitogens (Difco, USA; Wellcome, UK) and B-lym- phocyte to lypopolysaccharide (LPS) (Sigma, USA), was under study. Transforming activity of cells was determined by the 3H-thymidine inclusion level using the SL-40 counter (Intertechnique, France). The cell blast-transformation index (stimulation index) was calculated by the formulae: the level of 3H-timidine inclusion into the cells, cultured in mitogen presence, towards to the level of 3H-timidine inclusion into the mitogen-free cultured ones [21]. Monocyte-macro- phage cells were derived from the animal peritoneal cavity exudate [12]. Smears were azure II-eosin stained and the percentage of different cell types was calcula- ted. Phagocyte activity of peritoneal macrophages was defined 1 hr following cell incubation with heat-killed staphylococcus-209 by calculating the number of phagocytic cells. Acid phosphatase and non-specific esterase in exudate cells of peritoneal cavity was deter- mined using the histochemical methods [17, 22], the average histochemical coefficient (AHC) was calcula- ted by the formula [13]. Histological preparations of endocrine organs (hypophysis, thyroid, adrenal glands, pancreas) were stained with hematoxylin and eosin. In hypophysis there were calculated the chromophilic and chromophobic cell rows of anterior lobe of hypo- physis (adenohypophysis) and the percentage of these cells; the area of cells and their nuclei was measured by means of ocular-micrometer and the nucleus-cyto- plasm ratio in these cell groups was determined [2]. Right adrenal gland was used for histological study and the left one for examining lipids in cryostat sec- tions, stained with sudan III and sudan black B by Lison [8]. The sudanophily extent was estimated with histochemical coefficient [13]. In animal blood plasm there was radioimmunologically determined the con- centration of thyroid hormones: thyroxin (T4) and triiodothyronine (T3), corticosterone and insulin (kits of Institute of Bioorganic Chemistry of the National Academy of Sciences of Belarus, Belarus). Sugar con- tent in blood plasma was examined by the method [9]. The data were statistically processed by the Student- Fisher method [6] using Excel and Statistica software. Results and discussion Cryopreserved bone marrow cell transplantation to the lethally irradiated animals in syngeneic system completely protected them against death. Histological structure of thymus and lymph nodes in the irradiated animals and CSBM cell protected ones recovered to 60 and 30 days, correspondingly. An increase in lymph node and thymus mass started from the 15th day, more- а a 74 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 19, 2009, ¹1 ÏÐÎÁËÅÌÛ ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ Ò. 19, 2009, ¹1 руси, Беларусь). Содержание сахара в плазме крови определяли по методу [9]. Статистическую обработку данных проводили по методу Стьюдента-Фишера [6] с использова- нием пакетов программ MS Excel и Statistica. Ðåçóëüòàòû è îáñóæäåíèå Трансплантация криоконсервированного кост- ного мозга летально облученным животным в син- генной системе полностью защищала их от гибели. Гистологическое строение тимуса у облученных и защищенных клетками КСКМ животных восста- навливалось к 60-м, лимфоузлов – к 30-м суткам. Увеличение массы лимфоузлов и тимуса начина- лось с 15-х суток, причем более интенсивно – лим- фоузлов, а в интервале между 30–40-ми сутками масса лимфоузлов превышала значения ее в контроле. Масса тимуса возрастала менее интен- сивно и только к 60-м суткам достигала значений нормы (рис. 1). Клеточность и в тимусе, и в лимфатических узлах у животных 2 группы также начинало возрас- тать с 15-х суток (более интенсивно – в лимфати- ческих узлах) и почти достигало значения этого показателя у интактных животных к 90-м суткам наблюдения (рис. 2). Количество клеток, отвечающих на ФГА, в ти- мусе достигало уровня их содержания у интактных животных на 20-е сутки и с незначительными коле- баниями сохранялось на этом уровне до конца наб- людения (90 суток). В лимфоузлах количество over it was more intensive in lymph nodes, but within the interval of 30–40 days the lymph node mass exceeded its control values. Thymus mass increase was less active and only to the 60th day achieved the norm values (Fig. 1). The cellullarity both in thymus and lymph nodes in animals of the 2nd group started to rise from the 15th day (more intensively in lymph nodes) and almost achieved the values of this index in the intact animals to the 90th observation day (Fig. 2). The number of cells, responding to PHA in thymus reached the level of their content in the intact animals to the 20th day and was kept at this level with slight variation up to the observation end (90 days). In lymph nodes the number of lymphocytes with positive response to PHA changed wave-like without reaching to the 90th day their number in the intact animals (Fig. 3, a). The amount of T-lymphocytes, responding in blast- formation reaction (BFR) to Con A started its statis- tically significant increase in lymph nodes and thymus from the 20th day, then it was a wave-like change, but in lymph nodes the number of functionally active T-lymphocytes to the 60th day did not differ from their content in the intact animals, but reduced again to the 70th-90th days. The number of functionally active T-lymphocytes in thymus was lower, than that in these cells at all observation stages (Fig. 3, b). The number of B-lymphocytes in lymph nodes, responding to BTR to LPS in the groups of experimen- tal animals began increasing to the 20th day and to the Рис. 1. Изменение массы тимуса (а) и лимфоузлов (б) у летально облученных животных на разных этапах после трансплантации КСКМ: – летально облученные животные; – летально облученные животные, защищенные КСКМ; 1234512345 – контроль. Fig. 1. Change in thymus (a) and lymph nodes (b) mass in lethally irradiated animals at different stages after CSBM cell transplantation: – lethally irradiated animals; – CSBM protected lethally irradiated animals; 1234512345 – control. 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 0 1 2 3 4 5 6 7 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 Сроки наблюдения, сутки Observation term, days М ас са о рг ан а, м г O rg an m as s, m g 0 1 2 3 5 7 15 30 40 60 90 0 10 20 30 40 Контроль Control Сроки наблюдения, сутки Observation term, days М ас са о рг ан а, м г O rg an m as s, m g 0 1 2 3 5 7 15 30 40 60 90 Контроль Control б b 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 Контроль Control 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 а a б b 75 лимфоцитов, положительно реагирующих на ФГА, изменялось волнообразно, не достигая на 90-е сутки количества у интактных животных (рис. 3, а). Количество Т-лимфоцитов, отвечающих в реак- ции бласттрансформации (РБТ) на Кон А, начина- ло достоверно возрастать в лимфоузлах и тимусе с 20-х суток, далее – изменялось волнообразно, но в лимфоузлах количество функционально актив- PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 19, 2009, ¹1 ÏÐÎÁËÅÌÛ ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ Ò. 19, 2009, ¹1 60th one was statistically and significantly lower than the one of functionally active B-lymphocytes in the intact animals (Fig. 4). During post-transplantation period the AFCs number in spleen of lethally irradiated and CSBM- protected animals began to augment uniformly from the 20th day, but reduced to the 60th one compared to their content in the intact animals (Fig. 5). 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 Сроки наблюдения, сутки Observation term, days Ко ли че ст во я де рн ы х кл ет ок , × 10 6 N um be r o f n uc le at ed c el ls , × 10 6 0 1 2 3 5 7 15 30 40 60 90 Контроль Control 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 Сроки наблюдения, сутки Observation term, days Ко ли че ст во я де рн ы х кл ет ок , × 10 6 N um be r o f n uc le at ed c el ls , × 10 6 0 1 2 3 5 7 15 30 40 60 90 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 123456789012345678901234567890121234 Контроль Control Рис. 2. Количество ядерных клеток в тимусе (а) и лимфоузлах (б) ) у летально облученных животных на разных этапах после трансплантации КСКМ: – летально облученные животные; – летально облученные животные, защищенные КСКМ; 12345 12345 12345 – контроль. Fig. 2. Number of nucleated cells in thymus (a) and lymph nodes (b) in lethally irradiated animals at different stages after CSBM cell transplantation: – lethally irradiated animals; – CSBM protected lethally irradiated animals; 1234 1234 1234 – control. 0 10 20 30 40 50 60 70 0 10 20 30 40 50 60 70 80 Контроль Control Рис. 3. Ответ на ФГА (а) и Кон А (б) клеток тимуса ( ) и лимфоузлов ( ) в зависимости от сроков после облучения и трансплантации КСКМ. 1234512345 – контроль. Fig. 3. Response to PHA (a) and Con A (b) of thymus ( ) and lymph node ( ) cells depending on terms after irradiation and CSBM transplantation; 12345 12345 12345 – control. а a б bСроки наблюдения, сутки Observation term, days Сроки наблюдения, сутки Observation term, days 0 10 20 30 40 50 60 70 80 0 10 20 30 40 50 60 70 80 Ко ли че ст во я де рн ы х кл ет ок , × 10 6 N um be r o f n uc le at ed c el ls , × 10 6 Ко ли че ст во я де рн ы х кл ет ок , × 10 6 N um be r o f n uc le at ed c el ls , × 10 6 76 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 19, 2009, ¹1 ÏÐÎÁËÅÌÛ ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ Ò. 19, 2009, ¹1 ных Т-лимфоцитов к 60-м суткам не отличалось от их содержания у интактных животных, однако снова снижалось к 70–90-м суткам. В тимусе количество функционально активных Т-лимфоци- тов было ниже количества этих клеток на всех этапах наблюдения (рис. 3, б). Количество В-лимфоцитов в лимфоузлах, отве- чающих в РБТ на ЛПС, в группах опытных живот- ных начинало возрастать на 20-е сутки, а к 60-м суткам было достоверно ниже количества функ- ционально активных В-лимфоцитов у интактных животных (рис. 4). В посттрансплантационный период количество АОК в селезенках животных, летально облучен- ных и защищенных КСКМ, начинало равномерно повышаться с 20-х суток, но к 60-м суткам было снижено по сравнению с их содержанием у интакт- ных животных (рис. 5). Относительное количество макрофагов в интер- вале между 7-ми и 20-ми сутками было либо достоверно выше, либо не отличалось от их содер- жания у интактных животных, а начиная с 15-х суток, снижалось по сравнению с их содержанием у интактных животных (рис. 6, а). Относительное количество моноцитов в пери- тонеальной полости животных опытной группы в первые 20 суток после облучения и транспланта- ции костного мозга снижалось, затем возрастало (рис. 6, б). Количество фагоцитирующих клеток у живот- ных опытной группы было достоверно ниже на всех этапах наблюдения по сравнению с их содер- жанием у интактных животных (рис. 7). Активность ферментов, определяющих перева- ривающую активность фагоцитов (неспецифичес- кая эстераза и кислая фосфатаза) либо не изме- нялась, либо изменялась волнообразно, достигая исходного уровня на 60-е сутки (рис. 8). Далее будут рассмотрены морфофункциональ- ные свойства нейроэндокринных органов живот- ных на разных этапах после летального облучения и после трансплантации им КСКМ. Гипофиз. У летально облученных животных морфологические изменения в ткани передней доли гипофиза наблюдали, начиная с первых суток после облучения. Возрастало количество секретор- ных клеток с пикнотичными ядрами и вакуолизи- рованной цитоплазмой, преобладали клетки не- больших размеров, сосуды были расширены и переполнены кровью. Начиная с 3-х суток, отме- чались увеличение количества ацидофильных кле- ток и снижение количества базофильных и хромо- фобных клеток по сравнению с их содержанием у интактных животных (таблица). К моменту гибели животных (7–10-е сутки) нарастали дегенератив- ные изменения в секреторных клетках, большин- A relative number of macrophages within the interval between 7 and 20 days was either statistically and significantly higher or with no difference from their content in the intact animals, but starting from the 15th day decreased compared to their content in the intact animals (Fig. 6, a). 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 0 10 20 30 40 50 60 Сроки наблюдения, сутки Observation term, days И нд ек с ст им ул яц ии St im ul at io n in de x Контроль Control Рис. 4. Ответ клеток лимфоузлов на ЛПС в зависимости от сроков после облучения и трансплантации КСКМ. Fig. 4. Response of lymph node cells to LPS depending on terms after irradiation and CSBM cell transplantation. Рис. 5. Содержание антителообразующих клеток (АОК) в селезенке летально облученных и защищенных живот- ных после трансплантации КСКМ. Fig. 5. Number of antibody-forming cells (AFCs) in spleen of lethally irradiated and protected animals after CSBM cell transplantation. 0 20 40 60 80 100 Контроль Control Ко ли че ст во А О К, % к к он тр ол ю AF C s nu m be r, % o f t he c on tro l 0 1 7 15 20 25 30 40 60 Сроки наблюдения, сутки Observation term, days 12345678901234567890123456789012123 12345678901234567890123456789012123 12345678901234567890123456789012123 12345678901234567890123456789012123 77 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 19, 2009, ¹1 ÏÐÎÁËÅÌÛ ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ Ò. 19, 2009, ¹1 A relative number of monocytes in peritoneal cavity of experimental group’s animals reduced, then enhanced during first 20 days after irradiation and bone marrow transplantation (Fig. 6, b). The number of phagocytic cells in animals of experimental group was statistically and significantly lower at all observation stages compared to their content in the intact animals (Fig.7). The enzyme activity, determining a digesting activi- ty of phagocytes (non-specific esterase and acid phosphatase) were either unchanged or had the wave- like changes by achieving the initial level to the 60th day (Fig. 8). Hereinafter we will focus to the morphofunctional properties of animals neuroendocrine organs at diffe- rent stages after lethal irradiation and CSBM trans- plantation. Hypophysis. In the lethally irradiated animals the morphological changes in tissue of hypophysis anterior lobe were observed starting from the first days after irradiation. The number of secretory cells with pycno- tic nuclei and vacuolated cytoplasm increased, there were mostly the cells of small size, the vessels were extended and congested. Starting from the 3rd day we noted the augmentation of acidophilic cell number and a decrease in basophilic and chromophobic cells com- pared to their content in the intact animals (Table). To the moment of animal death (7–10 days) the degene- rative changes intensified in secretory cells, the majo- rity of which destroyed with revealing cell detritus at their place. The value of nucleus-cytoplasm ratio to 1234567890123456789012345678901212 1234567890123456789012345678901212 1234567890123456789012345678901212 1234567890123456789012345678901212 Контроль Control 0 10 20 30 40 0 10 20 30 40 а aСроки наблюдения, сутки Observation term, days Ко ли че ст во к ле то к, % C el l n um be r, % 2 7 15 20 30 40 50 60 Контроль Control Сроки наблюдения, сутки Observation term, days Ко ли че ст во к ле то к, % C el l n um be r, % 2 7 15 20 30 40 50 60 б b Рис. 6. Количество макрофагов (а) и моноцитов (б) в перитонеальной полости летально облученных мышей в зависимости от сроков после облучения и трансплантации КСКМ: – летально облученные животные; – ле- тально облученные животные, защищенные КСКМ; 12345 12345 12345 – контроль. Fig. 6. Macrophage (a) and monocyte (b) number in peritoneal cavity of lethally irradiated mice depending on terms after irradiation and CSBM cell transplantation: – lethally irradiated animals; – CSBM protected lethally irradiated animals; 12345 12345 12345 – control. Рис. 7. Количество фагоцитирующих моноцитарно- макрофагальных клеток в перитонеальной полости летально облученных мышей в зависимости от сроков после облучения и трансплантации КСКМ: – летально облученные животные; – летально облученные животные, защищенные КСКМ. Fig. 7. Number of phagocyte monocyte-macrophage cells in peritoneal cavity of lethally irradiated mice depending on terms after irradiation and CSBM cell transplantation: – lethally irradiated animals; – CSBM protected lethally irradiated animals. 0 20 40 60 80 100 2 7 15 20 30 40 50 60 Сроки наблюдения, сутки Observation term, days С ГК , у сл . е д AH S, u ni ts Контроль Control ство из них разрушались и на их месте определялся клеточный детрит. Величина ядерно-цитоплазмен- ного отношения на первые сутки в базофилах гипо- а a б b 12345678901234567890123456789012123 12345678901234567890123456789012123 12345678901234567890123456789012123 12345678901234567890123456789012123 12345678901234567890123456789012123 78 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 19, 2009, ¹1 ÏÐÎÁËÅÌÛ ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ Ò. 19, 2009, ¹1 физа достоверно снижалась по сравнению с ана- логичными показателями у интактных животных. На 3-и сутки у ацидофильных клеток эта величина достоверно увеличивалась. К 7–10-м суткам вели- чина ядерно-цитоплазменного отношения у ацидо- филов и базофилов не достигала ее уровня у ин- тактных животных. У летально облученных животных через сутки после трансплантации КСКМ гистологическое строение передней доли гипофиза было сравнимо с таковым у контрольных животных, однако при этом отмечали увеличение количества ацидофилов и тенденцию к снижению количества базофильных и хромофобных клеток. Начиная с 3-х суток, в аде- ногипофизе увеличивались размеры и кровенапол- нение синусов, появлялись секреторные клетки с гиперхромными и пикнотичными ядрами. Увели- чение количества ацидофильных клеток и умень- шение количества хромофобных клеток сохраня- лись на протяжении всего срока наблюдения, а количество базофильных клеток колебалось от минимального значения на 10- и 40-е сутки до максимального − на 20-е сутки, но не превышало значения этого показателя у интактных животных. При анализе ядерно-цитоплазменного отношения во всех секреторных клетках передней доли гипо- физа выявлялась тенденция к снижению этого по- казателя на протяжении всего срока наблюдения у животных 2-й группы с достоверным снижением по сравнению со значением его у интактных жи- the first day in hypophysis basophils statistically and significantly reduced compared to similar indices in the intact animals. To the 3rd day this value statistically and significantly augmented in acidophilic cells. To the 7th–10th days the value of nuclear-cytoplasm ratio in acidophils and basophils did not achieve its level in the intact animals. In the lethally irradiated animals one day after CSBM transplantation the histological structure of hypophysis anterior lobe was comparable to that in the control animals, but at the same time there was noted an increase in acidophil number and the tenden- cy to reduction in basophilic and chromophobic cells. Starting from the 3rd day in adenohypophysis there was an increase in size and blood-filling of sinuses, the secretory cells with hyperchromic and pycnotic nuclei appeared. The enhancement of acidophilic cell number and the reduction of chromophobic cell one were preserved within all observation term and a number of basophilic cells varied from the minimum value by the 10th and 40th days up to the maximum one to the 20th day, but not exceeded this index for the intact animals. When analysing the nucleus-cytoplasm ratio in all secretory cells of hypophysis anterior lobe there was found out the tendency to this index reduction within the all observation term in animals of the 2nd group with a statistically significant decrease compared to its value in the intact animals: to the 3rd, 20th, 60th and 90th days in acidophils; to the 7th, 10th, 20th and 60th ones in basophils; to the 10th and 30th 0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 2 7 15 20 30 40 50 60 0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 2 7 15 20 30 40 50 60 Сроки наблюдения, сутки Observation term, days С ГК , у сл . е д AH S, re l. un its Контроль Control Контроль Control Сроки наблюдения, сутки Observation term, days С ГК , у сл . е д AH S, re l. un its Рис. 8. Активность неспецифической эстеразы (а) и кислой фосфатазы (б) в моноцитарно-макрофагальных клетках перитонеальной полости летально облученных мышей в зависимости от сроков после облучения и трансплантации КСКМ: – летально облученные животные; – летально облученные животные, защищенные КСКМ; 1234512345 – контроль; * – статистически достоверные различия с контрольной группой (Р < 0,05). Fig. 8. Activity of non-specific esterase (a) and acid phosphatase (b) in monocyte-macrophage cells of peritoneal cavity of lethally irradiated mice depending on terms after irradiation and SCBM cell transplantation: – lethally irradiated ani- mals; – SCBM protected lethally irradiated animals; 12345 12345 12345 – control; * – data with statistically significant differences with the control group (P < 0.05). * * * * * * * * * * * 79 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 19, 2009, ¹1 ÏÐÎÁËÅÌÛ ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ Ò. 19, 2009, ¹1 вотных: у ацидофилов – на 3-, 20-, 60- и 90-е сутки; у базофилов – на 7-, 10-, 20- и 60-е сутки; у хромофобных клеток – на 10- и 30-е сутки. Начиная с 10-х суток, развивались процессы восстановле- ния гистологического строения аденогипофиза, увеличивались размеры секреторных клеток, осо- бенно на 40-е сутки. К 90-м суткам гистологи- ческое строение ткани передней доли гипофиза у летально облученных и защищенных КСКМ жи- вотных восстанавливалось. ones in chromophobic cells. From the 10th day the recovery processes of adenohypophysis histological structure developed and the size of secretory cells augmented, especially to the 40th day. To the 90th day a histological structure of tissue of anterior hypophysis lobe in lethally irradiated and CSBM-protected ani- mals recovered. Thyroid gland. In the lethally irradiated animals one day after irradiation the size of thyroid gland follic- les differed by heterogeneity (from average to large Соотношение количества секреторных клеток в аденогипофизе и их ядерно-цитоплазменное отношение у летально облученных мышей линии (CBA×C57Вl)F1 после трансплантации КСКМ Secretory cell content in adenohypophysis and their nucleus to cytoplasm ratio in lethally irradiated mice of (CBA×C57B1)F1 line after CSBM cell transplantation Примечание: * – достоверные различия данных по сравнению с контролем (P < 0,05). Notes: * – statistically significant differences comparing to the control data (P < 0,05). èêîðÑ ,ÿèíåäþëáàí èêòóñ ,smretnoitavresbO syad éåøûìåçèôîïèãîíåäàâêîòåëêûïèÒ sisyhpopyhonedaenirumnisepytlleC îâòñå÷èëîK %,êîòåëê %,rebmunlleC åûíüëèôîäèöÀ cilihpodecA åûíüëèôîçàÁ cilihposaB åûíáîôîìîðÕ cibohpomorhC îíðåäß - åîííåìçàëïîòèö ,åèíåøîíòî .äå.íòî otsuelcuN ,oitarmsalpotyc stinu.ler îâòñå÷èëîK %,êîòåëê %,rebmunlleC îíðåäß - åîííåìçàëïîòèö ,åèíåøîíòî .äå.íòî otsuelcuN ,oitarmsalpotyc stinu.ler îâòñå÷èëîK %,êîòåëê %,rebmunlleC îíðåäß - åîííåìçàëïîòèö ,åèíåøîíòî .äå.íòî otsuelcuN ,oitarmsalpotyc stinu.ler )åûíòîâèæåûíòêàòíè(üëîðòíîK )slaminatcatni(lortnoC 32,1±0,45 02,1 92,0±5,7 51,1 21,3±5,83 59,0 åèíå÷óëáîåîíüëàòåË noitaidarrilahteL 1 13,2±3,95 02,1 13,0±7,4 15,0 * 71,2±0,73 89,0 3 39,1±1,36 * 07,1 * 71,0±2,5 36,0 * 83,2±7,13 09,0 7 10,2±2,67 * 65,0 * 15,0±1,6 46,0 * 72,1±7,71 * 28,0 01 90,2±9,67 * 15,0 * 27,0±1,5 16,0 * 51,1±0,81 * 18,0 MKÑKÿèöàòíàëïñíàðÒ noitatnalpsnartllecMBSC 1 71,1±0,36 * 20,1 71,0±0,5 60,1 10,2±0,23 29,0 3 59,1±0,75 58,0 * 11,0±9,3 * 90,1 15,1±1,92 * 08,0 7 13,1±5,56 * 71,1 13,0±5,6 67,0 * 37,1±0,82 * 39,0 01 72,1±0,46 * 90,1 52,0±0,2 * 08,0 * 71,2±0,92 05,0 * 02 68,1±0,95 06,0 * 81,0±0,7 97,0 * 10,1±7,32 * 09,0 03 50,2±8,06 * 99,0 90,0±9,6 78,0 99,2±0,72 56,0 04 59,1±7,85 10,1 11,0±2,2 59,0 50,1±6,52 * 19,0 06 10,3±8,95 08,0 * 60,0±7,3 * 76,0 * 11,1±5,72 * 07,0 09 08,1±4,16 08,0 * 21,0±9,4 99,0 54,1±7,72 * 06,0 б b а a 80 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 19, 2009, ¹1 ÏÐÎÁËÅÌÛ ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ Ò. 19, 2009, ¹1 лями резорбции. На 7-е сутки наблюдали дезин- теграцию части фолликулов и наличие кровоиз- лияния в межфолликулярные пространства. Фол- ликулы были средних размеров, содержали плот- ный коллоид с микротрещинами и мелкими вакуолями резорбции. На 60–90-е сутки строение железы частично восстанавливалось. В эти же сроки в межфолликулярном пространстве отмеча- лись участки с группами эпителиальных клеток, которые могли быть остатками разрушенных фол- ликулов или ранней стадией образования новых фолликулов. На 1–3-и сутки уровень Т3 в сыворотке крови у этой группы животных не изменялся по сравнению с интактными животными, тогда как на 7-, 10- и 40-е сутки − увеличивался. К 20-, 60- и ones), the most follicles were covered with flattened epithelium, comprised a dense colloid and no resorp- tion vacuoles. Somewhere the small foci of haemor- rhage in the interfollicle spaces were detected. To the 3rd day together with the described changes there were appeared the partially or completely absent disintegra- ted follicles with a contracted colloid. To the 7th–10th days the number of haemorrhages into the interfollicle spaces augmented. A colloid in follicles was of loose consistence with small vacuoles of resorption, appa- rently associated to the secretion discharge into blood. Thyroid hormone content in blood serum changed in a wave-like way. Thus, the T3 level during 10 days after irradiation did not reach the control level, mean- while the T4 one statistically and significantly increa- 60 70 80 90 100 110 120 1 3 7 10 20 30 40 60 90 Сроки наблюдения, сутки Observation term, days Ур ов ен ь Т 3 , % к к он тр ол ю T 3 l ev el , % to th e co nt ro l 60 80 100 120 140 1 3 7 10 20 30 40 60 90 Сроки наблюдения, сутки Observation term, days Ур ов ен ь Т 4 , % к к он тр ол ю T 4 l ev el , % to th e co nt ro l Щитовидная железа. У летально облученных животных спустя сутки после облучения размеры фолли- кулов щитовидной железы отлича- лись гетерогенностью (от средних до крупных), большинство фолли- кулов были выстланы уплощенным эпителием и содержали плотный коллоид, вакуоли резорбции отсут- ствовали. В межфолликулярных пространствах местами определя- лись мелкие очаги кровоизлияния. На 3-и сутки, наряду с описанными изменениями, появлялись частично либо полностью дезинтегрирован- ные фолликулы, содержащие смор- щенный коллоид. На 7–10-е сутки увеличивалось количество кровоиз- лияний в межфолликулярные прост- ранства. Коллоид в фолликулах был неплотной консистенции с мелкими вакуолями резорбции, что, по-види- мому, связано с выбросом секрета в кровь. Содержание тиреоидных гор- монов в сыворотке крови волнооб- разно колебалось. Так, уровень Т3 на протяжении 10 суток после облу- чения не достигал контрольного уровня, тогда как уровень Т4 на пер- вые и 10-е сутки достоверно увели- чивался по сравнению с контролем, а на 7-е – снижался (рис. 9). После летального облучения и трансплантации КСКМ на первые сутки в щитовидной железе эпите- лий, выстилающий фолликулы, сохранял кубическую форму. По периферии железы фолликулы были небольших размеров, а к центру их размеры увеличивались. Коллоид был густым, с единичными вакуо- Рис. 9. Содержание тиреоидных гормонов Т3 (а) и Т4 (б) в сыворотке крови летально облученных животных после трансплантации КСКМ. – летально облученные животные; – летально облученные животные, защищенные КСКМ; линия – контроль. Fig. 9. Сontent of T3 (a) and T4 (b) thyroid hormones in blood serum of lethally irradiated animals after SCBM cell transplantation: – lethally irradiated animals; – SCBM protected lethally irradiated animals; solid line is control value. 81 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 19, 2009, ¹1 ÏÐÎÁËÅÌÛ ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ Ò. 19, 2009, ¹1 90-м суткам отмечалось достоверное снижение уровня Т3 по сравнению с его содержанием у ин- тактных животных (рис. 9, а). Содержание Т4 в сыворотке крови животных, которым вводили КСКМ, на 1-, 3-, 10-, 40- и 60-е сутки увеличи- валось по сравнению с его содержанием у интакт- ных животных, тогда как на 7-, 20- и 90-е сутки оно снижалось. На 30-е сутки уровень Т4 не отли- чался от его содержания у интактных животных (рис. 9, б). Надпочечники. Изменения гистологического строения надпочечников у летально облученных животных наблюдались спустя сутки после облучения: увеличивались размеры коркового и уменьшались размеры мозгового слоев, наблюда- лось полнокровие органов. В клетках обнаружива- лись вакуолизация цитоплазмы, особенно в пучковой зоне, пикноз и лизис ядер, стертость клеточных границ, очаги кровоизлияний. Отмечен- ные гистологические изменения сохранялись вплоть до гибели животных. Количество липидов в первые сутки после облучения, особенно в клет- ках пучковой зоны, было достоверно ниже конт- рольного уровня, а начиная с 3-х суток, оно увели- чивалось и к началу массовой гибели животных (10 суток) резко снижалось (рис. 10). В первые сутки после облучения и транспланта- ции КСКМ в надпочечниках увеличивались размеры пучковой зоны за счет гипертрофии кле- ток, наблюдалось полнокровие органов. Деструк- тивные изменения в клетках клубочковой и пуч- ково-сетчатой зон у животных этой группы были менее выражены, чем у летально облученных жи- вотных, не защищенных трансплантацией КСКМ, в этот же срок наблюдения. На 10–20-е сутки в коре надпочечников наблюдали единичные клетки с пикнотичными и лизированными ядрами. К 30– 40-м суткам гистологическое строение коры надпо- чечников нормализовалось. Изменение количества липидов носило волнообразный характер. Содер- жание липидов в клетках коры в первые сутки достоверно снижалось, а к 3-м суткам возрастало, достигая значения этого показателя у интактных животных. Достоверно увеличивалось количество липидов у животных этой группы на 7-е сутки, а к 10-м суткам содержание их приближалось к уровню интактных животных. Второй максимум накопления липидов приходился на 20-е сутки, а в интервале между 30- и 40-ми сутками их количест- во снижалось. Начиная с 60-х суток, суданофилия в клетках вновь возрастала, достигая уровня тако- вой у контрольных животных (рис. 10). Содержание кортикостерона в сыворотке крови летально облученных животных было выше, чем у интактных животных, особенно на 4–5-е сутки, sed to the 1st and 10th days compared to the control, but reduced to the 7th one (Fig. 9). To the 1st day after lethal irradiation and CSBM transplantation the epithelium, covering follicles, in thyroid gland preserved a cubic form. Peripheral gland follicles were small, but their size augmented to the center. Colloid was dense, with single resorption vacuoles. To the 7th day a part of follicles disintegrated and the haemorrhages into interfollicle spaces were revealed. Follicles were of middle size, comprising a dense colloid with microfractures and small resorption vacuoles. To the 60th–90th days the gland structure was partially recovered. Within these terms the sites with groups of epithelial cells, which might be either resi- duals of destroyed follicles or early stage of new fol- licle formation, were observed in an interfollicular space. To the 1st–3rd days the T3 level in blood serum in this group’s animals remained unchanged compared to the intact animals, meanwhile it increased to the 7th, 10th and 40th ones. To the 20th, 60th and 90th days there was observed a statically significant reduction of T3 level compared to its content in the intact animals (Fig. 9, a). To the 1st, 3rd, 10th, 40th and 60th days the T4 content in blood serum of animals with introduced CSBM augmented compared to its content in the intact animals, meanwhile it decreased to the 7th, 20th and 90th ones. To the 30th day the T4 level did not distinguish from its content in the intact animals (Fig. 9, b). Adrenal glands. Changes in adrenal gland histo- logical structure in lethally irradiated animals were observed a day later irradiation: sizes of cortical and medullar layers increased and reduced, correspon- dingly, the organs plethora was observed. In cells the cytoplasm vacuolisation, especially in zona fascicu- lata, nuclear pycnosis and lysis, blurring of cell edges, hemorrhagic foci, were observed. The noted histolo- gical changes were preserved till animal death. Lipid amount in the 1st day after irradiation especially in cells of zona fasciculata was statistically and signifi- cantly lower than the control level, but starting to the 3rd day it augmented and to the beginning of mass animal death sharply decreased (10 days) (Fig. 10). Within the first day after irradiation and CSBM cell transplantation in adrenal glands there was an increase in zona fasciculata size due to cell hypertro- phy, the organ plethora was observed. Destructive changes in cells of glomerular and fascicular-reticular zones in animals of this group were less manifested, than in lethally irradiated ones, not protected with CSBM cell transplantation within the same observa- tion term. To the 10th–20th days on adrenal cortex there were observed the single cells with pycnotic and lysed nuclei. To the 30th–40th days a histological structure of adrenal cortex normalised. A change in lipid number с достоверным снижением на 7–10-е сутки (рис. 11, а). Уровень кортикостерона в сыворотке крови у летально облученных и защищенных КСКМ реципиентов в первые трое суток и на 10-е сутки после трансплантации костного мозга уве- личивался, а на 5- и 20-е сутки снижался по срав- нению с его содержанием у интактных животных. К 90-м суткам уровень гормона был достоверно ниже его значения у интактных животных. Поджелудочная железа. В первые сутки после летального облучения мышей наиболее выражен- ные деструктивные изменения отмечались в экзокринной части железы. В стенках сосудов наб- людали набухание эндотелия и пикноз ядер в его клетках, обнаруживались множественные участки микронекрозов. Ацинусы были уменьшены в раз- мерах. Наиболее выраженные деструктивные изменения в ацинарной паренхиме наблюдали на 7-е сутки. В ацинусах в этот период появлялись двуядерные ацинарные клетки. В большинстве островков Лангерганса на 3-и сутки обнаружены расширенные межклеточные пространства, клетки с гипо- и гиперхромными ядрами. Островки были окружены хорошо контурирующейся соединитель- ной тканью. На 7-е сутки после облучения наблю- дали островки, потерявшие свои четкие контуры. Уровень сахара и инсулина в крови в первые сутки достоверно снижался в 1,5–2 раза по сравнению с содержанием их у интактных животных. Количест- во сахара достигало минимального значения на 5– 10-е сутки, а инсулина – на 1-е и 3-и сутки. На 5-е was of wave-like character. The lipid content in cortex cells within the first day statistically and significantly decreased, but augmented to the 3rd one, by achieving this index values in the intact animals. There was a statistically significant augmentation of lipid number in the animals of this group to the 7th day, but their content approached to the level of intact animals to the 10th one. The second maximum of lipid accumula- tion was to the 20th day, but within the interval between the 30th and 40th days their number reduced. Beginning from the 60th day the sudanophily in cells enhanced again, by achieving that level in the control animals (Fig. 10). The corticosterone content in blood serum of lethal- ly irradiated animals was higher than in the intact ones, especially to the 4th–5th days with a statistically signifi- cant decrease to the 7th–10th ones (Fig. 11, a). The corticosterone level in blood serum of lethally irradia- ted and CSBM-protected recipients during first three days and to the 10th one after bone marrow transplan- tation augmented, but to the 5th and 20th ones decreased compared to its content in the intact animals. By the 90th day the hormone level was statistically and signifi- cantly lower, than its values in the intact animals. Pancreas. During first day after mice lethal irradiation the most pronounced destructive changes were noted in an exocrine part of gland. The endothe- lium swelling and nuclear pycnosis in its cells were seen in vessel walls, the numerous sites of micronecro- ses were revealed. The acini were diminished in size. The most pronounced destructive changes in acinar 82 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 19, 2009, ¹1 ÏÐÎÁËÅÌÛ ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ Ò. 19, 2009, ¹1 0 25 50 75 100 125 1 3 7 10 20 30 40 60 90 Рис. 10. Степень суданофилии в надпочечниках летально облученных мышей в разные сроки после трансплантации КСКМ: – летально облученные животные; – летально облученные животные, защищен- ные КСКМ; линия – контроль; * – статистически достоверные различия с контрольной группой (Р < 0,05). Fig. 10. Sudanophily extent in adrenal glands of lethally irradiated mice within different terms after SCBM cell transplantation: – lethally irradia- ted animals; – SCBM protected lethally irradiated animals; solid line is control value; * – data with statistically significant differences with the control group (P < 0.05). Сроки наблюдения, сутки Observation term, days С те пе нь с уд ан оф ил ии , % к к он тр ол ю Su da no ph ily e xt en t, % o f t he c on tro l * * * * * parenchyma were observed to the 7th day. In the acini within this period the binuclear acinar cells appeared. In the majority of Langerhans islets to the 3rd day there were found out the extended intercellular spaces, cells with hypo- and hyperchromic nuclei. The islets were surrounded with well-contoured connective tissue. To the 7th day after irradiation the islets, lost their distinct contours, were seen. The sugar and insulin levels in blood within the first day was 1.5–2 times statistically and significantly decreased compared to their content in the intact animals. The sugar and insulin amounts achieved the minimum value to the 5th–10th and 1st– 3rd days, correspondingly. To the 5th day the insulin amount enhanced, but without reaching its level in the intact animals (Fig. 11, b). In the lethally irradiated CSBM- protected animals during first three days the histological changes of acinar tissue were similar to those in the а a сутки количество инсулина повы- шалось, но не достигало его уровня у интактных животных (рис. 11, б). У летально облученных живот- ных, защищенных КСКМ, на протя- жении первых 3-х суток гистологи- ческие изменения ацинарной ткани были аналогичны изменениям у летально облученных животных, на- чиная с 3-х суток, в островках Лан- герганса появлялись единичные митотически делящиеся клетки. На 7-е сутки в ацинарной ткани наблю- дали двуядерные клетки. В инсуляр- ных островках видимые гистоло- гические изменения не отмечены до конца наблюдений (90 суток). На 10– 20-е сутки в экзокринной ткани еще встречались единичные двуядерные ацинарные клетки, а к 40–90-м сут- кам гистологическое строение экзо- кринной части поджелудочной желе- зы частично нормализовалось. Уровень сахара и инсулина в кро- ви 2-й группы животных на протяже- нии первых суток достоверно сни- жался. Количество сахара на 5-е сут- ки и количество инсулина на 7-е сут- ки повышалось, достигая их значе- ния у интактных животных. Уровень сахара снижался на 10-, 20- и 30-е сутки, а уровень инсулина снижался только на 30-е сутки. Начиная с 40-х суток, содержание сахара в крови нормализовалось и не изменялось до конца наблюдения (90 суток), а уро- вень инсулина достоверно увеличи- вался на 40- и 90-е сутки (рис. 11, в). Представленные результаты сви- детельствуют о том, что степень ра- диочувствительности структур эндо- кринных органов различна. Так, эк- зокринная ткань поджелудочной железы страдает больше, чем эндо- кринная; в гипофизе (аденогипофи- зе) нарушается соотношение хромо- фильных и хромофобных клеток, а также ядерно-цитоплазматическое отношение в этих клетках в сторону уменьшения значения этого показа- теля (таблица); в надпочечниках наиболее выраженные повреждения отмечаются в корковом слое. Для 83 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 19, 2009, ¹1 ÏÐÎÁËÅÌÛ ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ Ò. 19, 2009, ¹1 0 25 50 75 100 125 150 175 200 1 3 4 5 7 10 20 30 40 60 90 Сроки наблюдения, сутки Observation term, days Ур ов ен ь ко рт ик ос те ро на , % о т ко нт ро ля C or tic os te ro ne le ve l, % o f c on tro l * * * * * ** * * * * Рис. 11. Содержание кортикостерона (а), инсулина (б) и сахара (в) в сыворотке крови летально облученных мышей в разные сроки после трансплантации КСКМ: – летально облученные животные; – ле- тально облученные животные, защищенные КСКМ; линия – контроль; * – статистически достоверные различия с контрольной группой (Р < 0,05). Fig. 11. Content of corticosterone (a), insulin (b) and sugar (c) in blood serum of lethally irradiated mice within different terms after SCBM cell transplantation: – lethally irradiated animals; – SCBM protected lethally irradiated animals; solid line is control value; * – data with statistically significant differences with the control group (P < 0.05). lethally irradiated ones, starting from the 3rd day in the Langerhans islets the single mitotically dividing cells, appeared. To the 7th day the binuclear cells were б b 0 25 50 75 100 125 150 175 1 3 4 5 7 10 20 30 40 60 90 Сроки наблюдения, сутки Observation term, days Ур ов ен ь ко рт ик ос те ро на , % о т ко нт ро ля C or tic os te ro ne le ve l, % o f c on tro l * * * ** * * 0 20 40 60 80 100 120 1 3 4 5 7 10 20 30 40 60 90 в cСроки наблюдения, сутки Observation term, days Ур ов ен ь ко рт ик ос те ро на , % о т ко нт ро ля C or tic os te ro ne le ve l, % o f c on tro l ** * ** * * ** * * * всех органов характерны кровоизлияния, появ- ления очагов некроза, изменение морфологии кле- ток, особенно их ядер. 84 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 19, 2009, ¹1 ÏÐÎÁËÅÌÛ ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ Ò. 19, 2009, ¹1 В результате трансплантации КСКМ летально облученные реципиенты выживали, у них отмеча- лось восстановление морфофункциональных свойств органов лимфомиелоидного комплекса, что способствовало развитию репаративных про- цессов в эндокринных органах. Активность тече- ния репаративных процессов в разных структурах эндокринных органов отличается. Так, структура экзокринной ткани поджелудочной железы начи- нает восстанавливаться позже, чем эндокринной, и даже через 3 месяца полностью не восстанавли- вается. Гистологическое строение эндокринных органов начинает восстанавливаться с появления в них морфологически сохранных клеток, секрети- рующих гормоны в гипофизе, щитовидной железе, надпочечниках и поджелудочной железе, а также с появления пролиферирующих клеток. В щито- видной железе обнаруживаются группы межфол- ликулярных клеток, из которых впоследствии бу- дут формироваться новые фолликулы. Процессы кровообращения в эндокринных органах нормали- зуются, исчезают очаги некроза. Динамика измене- ния уровня гормонов в периферической крови животных, защищенных КСКМ, носит волнообраз- ный характер. Однако уровень гормонов (кортико- стерона, Т3, Т4, инсулина) не достигает значений контрольной группы. Учитывая важную роль нейроэндокринной ре- гуляции процессов гемопоэза и иммуногенеза, можно допустить, что причинами задержки про- цесса полного восстановления морфофункцио- нальных свойств органов лимфомиелоидного комплекса являются замедление процессов вос- становления морфофункциональных свойств орга- нов нейроэндокринной системы и нарушение гор- монального статуса организма. Таким образом, приведенные результаты свиде- тельствуют о том, что скорость и полнота восста- новления морфофункциональных свойств органов лимфомиелоидного комплекса находятся в зависи- мости от скорости и полноты восстановления мор- фофункциональных свойств органов нейроэндо- кринной системы. В свою очередь биологически активные вещества, монокины, пептиды, продуци- руемые клетками органов лимфомиелоидного комплекса, также принимают активное участие в регуляции процессов гистогенеза и продукции гор- монов в нейроэндокринных органах [10]. Можно допустить, что на ранних стадиях фило- генеза разные коммитированные стволовые клетки при миграции могут оседать в различных участках тела эмбриона, но генетически коммитированные клетки формируют только те органы или ткани, где находится родственное микроокружение [5]. Остальные стволовые коммитированные клетки, determined in an acinar tissue. No visible histological changes were seen until observation end in the insular islets (90th day). To the 10th –20th days the single binuclear acinar cells were met in an exocrine tissue, but to the 40th–90th ones a histological structure of exocrine part of pancreas was partially normalised. Sugar and insulin levels in blood of the 2nd group of animals during the first day statistically and significantly reduced. Sugar amount to the 5th day and that of insulin to the 7th one augmented, by achieving their values in the intact animals. Sugar level reduced to the 10th, 20th and 30th days, but that of insulin dimi- nished only to the 30th one. Starting from the 40th day the sugar content in blood normalised and remained unchanged until the observation end (90th day), but the insulin level statistically and significantly increa- sed to the 40th and 90th days (Fig. 11, c). The presented findings testify to the fact, that the radiosensitivity extent in structures of endocrine organs is different. Thus, an exocrine tissue of pancreas suffers more than an endocrine one; in hypophysis (adenohypophysis) the ratio of chromophilic and chromophobic cells is impaired, as well as the nucleus- cytoplasm ratio in these cells is changed towards reduction of this index value (Table). In adrenal glands the most pronounced damages are seen in a cortical layer. The haemorrhages, appearance of necrosis foci, change in cell morphology, especially in their nuclei, are typical for all organs. The CSBM cell transplantation resulted in a survi- val of lethally irradiated recipient, along with a reco- very of morphofunctional properties of lymphomye- loid organs, furthering to the reparative process deve- lopment in the endocrine organs. The activity of repa- rative process proceeding in various structures of endocrine organs is different. Thus, the structure of pancreas exocrine tissue begins to recover later, than the endocrine one, being not completely recovered 3 months later. Histological structure of endocrine organs is recovered starting from the appearance in them of morphologically integral cells, secreting hor- mones in hypophysis, thyroid and adrenal glands, pancreas, as well as from an uprising of proliferating cells. The groups of interfollicular cells, from which the new follicles will be formed in future, are found out in thyroid gland. Blood circulation in endocrine organs normalises, the necrosis foci disappear. The dynamics of change in hormone level in peripheral blood of CSBM cell protected animals is of wave- like character. However the level of hormones (cortic- osterone, T3, T4, insulin) does not achieve the control group’s values. Taking into account an important role of neuro- endocrine regulation of hemopoiesis and immuno- genesis processes, we may assume the slowing down 85 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 19, 2009, ¹1 ÏÐÎÁËÅÌÛ ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ Ò. 19, 2009, ¹1 попавшие туда, где нет условий для их дифферен- цировки и созревания, находятся в покоящемся состоянии [5]. Когда гетерогенные суспензии попу- ляций стволовых клеток вводятся в организм реципиента, эти клетки, мигрируя в кровяном рус- ле, могут попадать в родственное микроокруже- ние, способствующее реализации ими специфи- ческих функций [5]. В этой связи можно предпо- ложить, что в суспензиях миелокариоцитов наряду со стволовыми кроветворными клетками находят- ся и коммитированные стволовые некроветворные клетки, которые могут принимать участие в про- цессах гистогенеза эндокринных органов и способ- ствуют восстановлению их морфофункциональ- ных свойств. Исходя из вышеизложенного, можно допустить, что причиной возникновения реакции “трансплан- тат против хозяина” (РТПХ) при трансплантации аллогенных стволовых клеток может быть не толь- ко развитие иммунной реакции аллогенных имму- нокомпетентных лимфоцитов донора против кле- ток реципиента, но также и отторжение транс- плантата стволовых клеток. При этом не восстанав- ливаются кроветворная и иммунокомпетентная системы реципиента, в результате чего не восста- навливаются и морфофункциональные свойства эндокринных органов и, как следствие, может раз- виваться гипофизарная кахексия, которая имеет сходную клиническую картину с синдромом РТПХ. Âûâîäû Полученные результаты обосновывают необхо- димость специфической стимуляции процессов репарации эндокринных органов у летально облу- ченных животных и человека с помощью комбини- рованного введения стволовых кроветворных и некроветворных клеток, находящихся в суспензии криоконсервированных миелокариоцитов и сус- пензии клеток, полученных из тканей эндокрин- ных органов эмбрионов и трупного материала. in recovery of morphofunctional properties of neuro- endocrine organs and disorder in organism’s hormonal status to be the causes of delaying in a compete reco- very of morphofunctional properties of lympho-mye- loid organs. Thus, the mentioned findings testify to the fact that the rate and completeness of the recovery of morpho- logical properties of lymphomyeloid organs are depen- dent on those for neuroendocrine organs. In their turn, biologically active substances, monokines, peptides, produced by cells of lymphomyeloid organs, take an active part in regulating histogenesis and hormone production in neuroendocrine organs as well [10]. We may assume, that at early stages of phyloge- nesis, different committed stem cells during migration may be settled in different sites of embryo body, but genetically committed cells form only those organs or tissues, where an affined microenvironment is loca- ted [5]. The rest committed stem cells, if occurring the place with no conditions for their differentiation and maturation, remain in a quiescent state [5]. When the heterogeneous suspensions of stem cell populations are introduced into recipient’s organism, these cells, by migrating within blood channel, may find an affined microenvironment, furthering to the realisation by them of specific functions [5]. In this connection we may suggest that in myelokaryocyte suspensions together with the stem hemopoietic cells are also located the committed stem hemopoietic cells, which may participate in endocrine organ histogenesis and contribute to recovery of their morphofunctional pro- perties. Proceeding from the mentioned above, we may suggest that not only the development of immune response of donor’s allogenic immune competent lymphocytes versus recipient’s cells, but the rejection of stem cell transplant as well may be the causes for GVH-disease occurrence during allogenic stem cell transplantation. At the same time the hemopoietic and immune competent systems of a recipient are not reco- vered, resulting in recovery failure of morphofunctio- nal properties of endocrine organs as well, and as a consequence, the hypophyseal cachexia may develop, having the similar picture with GVH-syndrome. Conclusions The results obtained substantiate the necessity of a specific stimulation of reparative processes of endocrine organs in the lethally irradiated animals and humans using a combined introduction of stem hemopoietic and non-hemopoietic cells, being in suspension of cryopreserved myelokaryocytes and that of cells, derived from tissue of embryonic endocrine organs and cadaver material. Литература Абдулкадыров К.М., Шабалин В.Н. Трансплантация костного мозга.– Л.: Медицина, 1976. – 136 с. Автандилов Г.Г. Морфометрия в патологии. – М.: Медицина, 1973.– 248 с. Бутомо Н.В. Трансплантация костного мозга при лучевых поражениях.– Л.: Медицина, 1970.– 191 с. Гомеостаз / Под ред. П.Д. Горизонтова. – М.: Медицина, 1981.– 576 с. Кухарчук А.Л., Радченко В.В., Сирман В.М. Стволовые клетки: эксперимент, теория, клиника. Эмбриональные, мезенхимальные, нейральные и гемопоэтические стволо- вые клетки.– Чернівці, 2004.– 505 с. 1. 2. 3. 4. 5. References Abdulkadyrov K.M., Shabalin V.N. Bone marrow transplanta- tion.– Leningrad: Meditsina, 1976.– 136 p. Avtandilov G.G. Morphometry in pathology.– Moscow: Meditsina, 1973.– 248 p. Butomo N.V. Bone marrow transplantation at radiation dama- ges.– Leningrad: Meditsina, 1970.– 191 p. Homeostasis / Ed. by P.D. Gorizontov.– Moscow: Meditsina, 1981.– 576 p. Kukharchuk A.P., Radchenko V.V., Sirman V.M. Stem cells: experiment, theory, clinics. Embryonic, mesenchymal, neural and hemopoietic stem cells.– Chernovtsy, 2004.– 505 p. Lakin G.F. Biometry.– Moscow: Vysshaya shkola, 1990.– 352 p. Lischuk V.A., Lord B., Pavlovich-Kantera V. et al. Homeostasis and regulation of physiological systems of organism.– Novosibirsk, 1992.– 152 p. Luppa Kh. Basics of histochemistry: Transl. from German.- Moscow: Mir, 1980.– 127 p. Raytsis A.B., Ustinova A.O. Method to determine sugar level in blood // Lab. delo.– 1965.– N1.– P. 33–36. Rumyantsev A.G., Maschan A.A. Transplantation of hemo- poietic stem cells in children: Manial for physicians.– Moscow, 2003.– 912 p. Tsutsayeva A.A., Goltsev A.N., Popov N.N. et al. Cryoimmuno- logy.– Kiev: Naukova dumka, 1988.– 176 p. Tsutsayeva A.A., Kudokotseva O.V., Lobasenko N.P., Shcheg- lov A.V. Character and dynamics of recovery of morphofun- ctional activity of macrophages in irradiated recipients after myelotransplantation // Gematologiya i Tranfuziologiya.– 1999.– N5.– P. 13–15. Astaldi G., Verga L. The glycogen content of the cells of lymphatic leukemia // Acta Haematol.– 1957.– Vol. 17, N3.– P. 129–135. Cui Y.Z., Hisha H., Yang G.X. et al. Optimal protocol for total body irradiation for allogeneic bone marrow transplantation in mice // Bone Marrow Transplant.– 2002.– Vol. 30, N12.– P. 843–849. Down J.D., Tarbell N.J., Thames H.D., Mauch P.M. Syngenic and allogenic bone marrow engraftment after total bodi irradiation: dependence on dose, dose rate and fractionation // Blood.– 1991.– Vol. 77, N11.– P. 661–669. Hancock S.L., McDougall J.R., Constine L.S. Thyroid abnor- malities after therapeutic external radiation // Int. J. Radiation Oncol. Biol. Phys.– 1995.– Vol. 31, N7.– P. 1165–1170. Higgi K.E., Burns G.F., Hayhoe F.G.J. Identification of the hairy cells of leukaemic reticuloendotheliosis by an esterase method// Brit. J. Haemat.– 1978.– Vol. 38, N8. – P. 99–105. Jerne N.K., Nordin A.A. Plaque fromation in agar by single antibody producing cells // Science.– 1963.– Vol. 140, N3565.– P. 405. Jereczek-Fossa B.A., Alterio D., Jassem J. et al. Radiotherapy- induced thyroid disorders // Cancer Treat. Rev.– 2004.– Vol. 30, N2.– P. 369–384. Kubota C., Shinohara T., Hinohara T. et al. Changes in hypotha- lamic-pituitari function following bone marrow transplantation in children // Acta Paediatr. Jpn.– 1994.– Vol. 36, N1.– P. 37– 43. Kuznetsky R.D., Trobaugh F.E.Jr., Adler S.S. An immunologic comparison between bone marrow and spleen-derived pluripotent hemopoietic stem cells (CFU-S) of mouse: effect of rabbit anti-mouse brain serum // Biomedicine.– 1978.– Vol. 29, N6.– P. 191–193. Li C.Y., Yam L.T., Lam K.W. Acid phosphatase isoenzyme in human leukocytes in normal and pathologic conditions // J. Histochem. Cytochem.– 1970.– Vol. 18, N1.– P. 473–481. Лакин Г.Ф. Биометрия.– М.: Высш. школа, 1990.– 352 с. Лищук В.А., Лорд Б., Павлович-Кантера В. и др. Гомеостаз и регуляция физиологических систем организма.– Новосибирск, 1992.– 152 с. Луппа Х. Основы гистохимии: Пер. с нем.– М.: Мир, 1980.– 127 с. Райцис А.Б., Устинова А.О. Метод определения уровня сахара в крови // Лаб. дело. – 1965. – № 1. – С. 33-36. Румянцев А.Г., Масчан А.А. Трансплантация гемопоэтичес- ких стволовых клеток у детей: Руководство для врачей.– М., 2003.– 912 с. Цуцаева А.А., Гольцев А.Н., Попов Н.Н. и др. Криоиммуно- логия.– Киев: Наук. думка, 1988.– 176 с. Цуцаева А.А., Кудокоцева О.В., Лобасенко Н.П., Щег- лов А.В. Характер и динамика восстановления морфофунк- циональной активности макрофагов у облученных реципиентов после миелотрансплантации // Гематология и трансфузиология.– 1999.– №5.– С. 13–15. Astaldi G., Verga L. The glycogen content of the cells of lymphatic leukemia // Acta Haematol.– 1957.– Vol. 17, N3.– P. 129–135. Cui Y.Z., Hisha H., Yang G.X. et al. Optimal protocol for total body irradiation for allogeneic bone marrow transplantation in mice // Bone Marrow Transplant.– 2002.– Vol. 30, N12.– P. 843–849. Down J.D., Tarbell N.J., Thames H.D., Mauch P.M. Syngenic and allogenic bone marrow engraftment after total bodi irradiation: dependence on dose, dose rate and fractionation // Blood.– 1991.– Vol. 77, N11.– P. 661–669. Hancock S.L., McDougall J.R., Constine L.S. Thyroid abnor- malities after therapeutic external radiation // Int. J. Radiation Oncol. Biol. Phys.– 1995.– Vol. 31, N7.– P. 1165–1170. Higgi K.E., Burns G.F., Hayhoe F.G.J. Identification of the hairy cells of leukaemic reticuloendotheliosis by an esterase method// Brit. J. Haemat.– 1978.– Vol. 38, N8. – P. 99–105. Jerne N.K., Nordin A.A. Plaque fromation in agar by single antibody producing cells // Science.– 1963.– Vol. 140, N3565.– P. 405. Jereczek-Fossa B.A., Alterio D., Jassem J. et al. Radiotherapy- induced thyroid disorders // Cancer Treat. Rev.– 2004.– Vol. 30, N2.– P. 369–384. Kubota C., Shinohara T., Hinohara T. et al. Changes in hypotha- lamic-pituitari function following bone marrow transplantation in children // Acta Paediatr. Jpn.– 1994.– Vol. 36, N1.– P. 37– 43. Kuznetsky R.D., Trobaugh F.E.Jr., Adler S.S. An immunologic comparison between bone marrow and spleen-derived pluripotent hemopoietic stem cells (CFU-S) of mouse: effect of rabbit anti-mouse brain serum // Biomedicine.– 1978.– Vol. 29, N6.– P. 191–193. Li C.Y., Yam L.T., Lam K.W. Acid phosphatase isoenzyme in human leukocytes in normal and pathologic conditions // J. Histochem. Cytochem.– 1970.– Vol. 18, N1.– P. 473–481. Nakagawa Y., Mori K., Hoshikawa S. et al. Development of subclinical hyperthyroidism due to Graves’ disease in a hypothyroid woman who had undergone hemithyroidectomy for adenomatous goiter and radiotherapy for nasopharyngeal cancer // Endocr. J.– 2007.– Vol. 54, N1.– P. 35–37. Szydlo R., Goldman J., Klein J. et al. Results for allogeneic bone marrow transplants for leukemia using donors other then HLA-identikal siblings // J. Clin. Oncol.– 1997.– Vol. 15, N1.– P. 1767–1777. Tsukada T., Katayama N., Masuya M. et al. Intensive chemotherapy followed by autologous bone marrow transplantation for a patient having wide-spread embryonal carcinoma in the central nervous system // Jpn. J. Clin. Oncol.– 1989.– Vol. 19, N1.– P. 67–71. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19. 20. 21. 22. 23. 24. 25. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19. 20. 21. 22. 86 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 19, 2009, ¹1 ÏÐÎÁËÅÌÛ ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ Ò. 19, 2009, ¹1 Nakagawa Y., Mori K., Hoshikawa S. et al. Development of subclinical hyperthyroidism due to Graves’ disease in a hypothyroid woman who had undergone hemithyroidectomy for adenomatous goiter and radiotherapy for nasopharyngeal cancer // Endocr. J.– 2007.– Vol. 54, N1.– P. 35–37. Szydlo R., Goldman J., Klein J. et al. Results for allogeneic bone marrow transplants for leukemia using donors other then HLA-identiсal siblings // J. Clin. Oncol.– 1997.– Vol. 15, N1.– P. 1767–1777. Tsukada T., Katayama N., Masuya M. et al. Intensive chemotherapy followed by autologous bone marrow transplantation for a patient having wide-spread embryonal carcinoma in the central nervous system // Jpn. J. Clin. Oncol.– 1989.– Vol. 19, N1.– P. 67–71. Truner S.L., Tiver K.W., Boyages S.C. Thyroid dysfunction following radiotherapy for head and neck cancer // Int. J. Radiation Oncol. Biol. Phys.– 1995.– Vol. 31, N2.– P. 279– 283. Weissler M.C., Berry B.W. Thyroid-stimulating hormone levels after radiotherapy and combined therapy for heat and neck cancer // Head. Neck.– 1991.– Vol. 13, N1.– P. 420–423. Accepted in 01.07.2008 Truner S.L., Tiver K.W., Boyages S.C. Thyroid dysfunction following radiotherapy for head and neck cancer // Int. J. Radiation Oncol. Biol. Phys.– 1995.– Vol. 31, N2.– P. 279– 283. Weissler M.C., Berry B.W. Thyroid-stimulating hormone levels after radiotherapy and combined therapy for heat and neck cancer // Head. Neck.– 1991.– Vol. 13, N1.– P. 420–423. Поступила 01.07.2008 Рецензент Е.П. Жуликова 23. 24. 25. 26. 27. 87 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 19, 2009, ¹1 ÏÐÎÁËÅÌÛ ÊÐÈÎÁÈÎËÎÃÈÈ Ò. 19, 2009, ¹1 26. 27.

Репозитарії

Схожі ресурси