Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления
Белковым сплайсингом называют пост-трансляционное автокаталитическое вырезание внутренней белковой последовательности (интеина) с последующим лигированием фланкирующих пептидов (экстеинов). Высокая специфичность расщепления белков-предшественников, которая обеспечивается интеинами, позволяет использ...
Збережено в:
Дата: | 2007 |
---|---|
Автори: | , , , |
Формат: | Стаття |
Мова: | Russian |
Опубліковано: |
Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України
2007
|
Назва видання: | Цитология и генетика |
Теми: | |
Онлайн доступ: | http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/66523 |
Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
Цитувати: | Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления / П.Л. Старокадомский, И.Я. Дубей, О.В. Окунев, Д.М. Иродов // Цитология и генетика. — 2007. — Т. 41, № 2. — С. 3-11. — Бібліогр.: 16 назв. — рос. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraineid |
irk-123456789-66523 |
---|---|
record_format |
dspace |
spelling |
irk-123456789-665232014-07-18T03:01:51Z Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления Старокадомский, П.Л. Дубей, И.Я. Окунев, О.В. Иродов, Д.М. Оригинальные работы Белковым сплайсингом называют пост-трансляционное автокаталитическое вырезание внутренней белковой последовательности (интеина) с последующим лигированием фланкирующих пептидов (экстеинов). Высокая специфичность расщепления белков-предшественников, которая обеспечивается интеинами, позволяет использовать белковый сплайсинг в биотехнологических целях. Цель работы – получение в клетках E. coli рекомбинантного фактора роста человека с нативным N-концом. Для этого был создан химерный белок, состоявший из короткого N-концевого пептида, интеина Mxe GyrA и гормона роста человека. В процессе трансляции формилметионином модифицируется N-концевой пептид, впоследствии удаляющийся. Показано, что интеин обеспечивал отщепление экстеинов, однако последующего их лигирования не происходило. Это позволило получить гормон роста человека с нативным N-концом. Исследовано влияние различных факторов на эффективность расщепления. Установлено, что наилучший результат расщепления химерного белка (60–80 %) достигается при добавлении индуктора (100 мМ β-меркаптоэтанол) с инкубацией в течение 4–6 сут. 2007 Article Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления / П.Л. Старокадомский, И.Я. Дубей, О.В. Окунев, Д.М. Иродов // Цитология и генетика. — 2007. — Т. 41, № 2. — С. 3-11. — Бібліогр.: 16 назв. — рос. 0564-3783 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/66523 ru Цитология и генетика Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України |
institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
collection |
DSpace DC |
language |
Russian |
topic |
Оригинальные работы Оригинальные работы |
spellingShingle |
Оригинальные работы Оригинальные работы Старокадомский, П.Л. Дубей, И.Я. Окунев, О.В. Иродов, Д.М. Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления Цитология и генетика |
description |
Белковым сплайсингом называют пост-трансляционное автокаталитическое вырезание внутренней белковой последовательности (интеина) с последующим лигированием фланкирующих пептидов (экстеинов). Высокая специфичность расщепления белков-предшественников, которая обеспечивается интеинами, позволяет использовать белковый сплайсинг в биотехнологических целях. Цель работы – получение в клетках E. coli рекомбинантного фактора роста человека с нативным N-концом. Для этого был создан химерный белок, состоявший из короткого N-концевого пептида, интеина Mxe GyrA и гормона роста человека. В процессе трансляции формилметионином модифицируется N-концевой пептид, впоследствии удаляющийся. Показано, что интеин обеспечивал отщепление экстеинов, однако последующего их лигирования не происходило. Это позволило получить гормон роста человека с нативным N-концом. Исследовано влияние различных факторов на эффективность расщепления. Установлено, что наилучший результат расщепления химерного белка (60–80 %) достигается при добавлении индуктора (100 мМ β-меркаптоэтанол) с инкубацией в течение 4–6 сут. |
format |
Article |
author |
Старокадомский, П.Л. Дубей, И.Я. Окунев, О.В. Иродов, Д.М. |
author_facet |
Старокадомский, П.Л. Дубей, И.Я. Окунев, О.В. Иродов, Д.М. |
author_sort |
Старокадомский, П.Л. |
title |
Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления |
title_short |
Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления |
title_full |
Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления |
title_fullStr |
Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления |
title_full_unstemmed |
Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления |
title_sort |
конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления |
publisher |
Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України |
publishDate |
2007 |
topic_facet |
Оригинальные работы |
url |
http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/66523 |
citation_txt |
Конструирование химерного интеин-содержащего белка и оценка условий его расщепления / П.Л. Старокадомский, И.Я. Дубей, О.В. Окунев, Д.М. Иродов // Цитология и генетика. — 2007. — Т. 41, № 2. — С. 3-11. — Бібліогр.: 16 назв. — рос. |
series |
Цитология и генетика |
work_keys_str_mv |
AT starokadomskijpl konstruirovaniehimernogointeinsoderžaŝegobelkaiocenkauslovijegorasŝepleniâ AT dubejiâ konstruirovaniehimernogointeinsoderžaŝegobelkaiocenkauslovijegorasŝepleniâ AT okunevov konstruirovaniehimernogointeinsoderžaŝegobelkaiocenkauslovijegorasŝepleniâ AT irodovdm konstruirovaniehimernogointeinsoderžaŝegobelkaiocenkauslovijegorasŝepleniâ |
first_indexed |
2023-10-18T18:50:21Z |
last_indexed |
2023-10-18T18:50:21Z |
_version_ |
1796145295471411200 |