Получение трансгенных линий ячменя, продуцирующих лактоферрин человека, с использованием мутантного альфа-тубулина в качестве селективного маркерного гена

Метод биолистической трансформации был использован для генетического усовершенствования трех коммерческих сортов ячменя отечественной селекции (Оксамытовый, Водограй и Гетьман). Для трансформации использовали конструкцию pHLFTuBA, содержащую ген интереса, ген человеческого лактоферрина (hLF) под кон...

Повний опис

Збережено в:
Бібліографічні деталі
Дата:2011
Автори: Танасиенко, И.В., Емец, А.И., Пирко, Я.В., Корховой, В.И., Абумхади, Н., Блюм, Я.Б.
Формат: Стаття
Мова:Russian
Опубліковано: Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України 2011
Назва видання:Цитология и генетика
Теми:
Онлайн доступ:http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/66817
Теги: Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:Получение трансгенных линий ячменя, продуцирующих лактоферрин человека, с использованием мутантного альфа-тубулина в качестве селективного маркерного гена / И.В. Танасиенко, А.И. Емец, Я.В. Пирко, В.И. Корховой, Н. Абумхади, Я.Б. Блюм // Цитология и генетика. — 2011. — Т. 45, № 1. — С. 3-10. — Бібліогр.: 30 назв. — рос.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id irk-123456789-66817
record_format dspace
spelling irk-123456789-668172014-07-23T03:01:36Z Получение трансгенных линий ячменя, продуцирующих лактоферрин человека, с использованием мутантного альфа-тубулина в качестве селективного маркерного гена Танасиенко, И.В. Емец, А.И. Пирко, Я.В. Корховой, В.И. Абумхади, Н. Блюм, Я.Б. Оригинальные работы Метод биолистической трансформации был использован для генетического усовершенствования трех коммерческих сортов ячменя отечественной селекции (Оксамытовый, Водограй и Гетьман). Для трансформации использовали конструкцию pHLFTuBA, содержащую ген интереса, ген человеческого лактоферрина (hLF) под контролем глютелинового В-1 (GluB-1) промотора риса. В качестве селективного маркерного гена использовали ген мутантного a-тубулина, обеспечивающего устойчивость к трифлюралину (гербицид динитроанилинового ряда). Для установления селективной концентрации трифлюралина был проведен скрининг его разных концентраций в диапазоне от 0,1 до 30 мкМ. После 2–3 месяцев селекции на 10 мкМ трифлюралина были получены две трансгенные линии растений ячменя сорта Оксамытовый и каллусная линия сорта Гетьман. Для подтверждения стабильной интеграции гена hLF был проведен ПЦР-анализ листьев растений-регенерантов после их адаптации в грунте. В обеих линиях ячменя был амплифицирован фрагмент гена hLF размером 734 п.н. Метод біолістичної трансформації використовували для генетичного вдосконалення трьох комерційних сортів ячменю вітчизняної селекції (Оксамитовий, Водограй і Гетьман). Для трансформації використовували конструкцію pHLFTuBA, що містила ген інтересу, ген людського лактоферину (hLF) під контролем глютелінового В 1 (GluB 1) промотору рису. Як селективний маркерний ген використовували ген мутантного α-тубуліну, що забезпечував стійкість до трифлюраліну (гербіцид динітроанілінового ряду). Для встановлення селективної концентрації агенту було проведено скринінг різних концентрацій трифлюраліну в діапазоні від 0,1 до 30 мкМ. Після 2–3 місяців селекції на 10 мкМ трифлюраліну було отримано дві трансгенні лінії рослин ячменю сорту Оксамитовий та калусну лінію сорту Гетьман. Для підтвердження стабільної інтеграції гена hLF було проведено ПЦР аналіз листків рослин-регенерантів після їх адаптації в грунті. В обох лініях було ампліфіковано фрагмент гена розміром 734 п.н. Method of biolistic transformation was used for genetic improvement of commercial barley cultivars (Oksamitoviy, Vodogray and Getman). The plasmid pHLFTuBA was used for particle bombardment that consists of the hLF gene under the control of the barley glutelin B-1 promoter and a selectable marker gene, α-tubulin conferring resistance to trifluralin (dinitroanilinr herbicide). Preliminary screening of different trifluralin concentration range from 0,1 to 30 μM was tested for determination of effective selective agent concentration. Two transgenic barley line of genotype Oksamitiviy and transgenic callus line of cultivar Getman were obtained after selection on 10 μM of trifluralin. To confirm the transgenic nature of regenerated plants, the PCR analysis was carried out. The 734bp length fragment of hLF gene was amplified from both regenerated plants. 2011 Article Получение трансгенных линий ячменя, продуцирующих лактоферрин человека, с использованием мутантного альфа-тубулина в качестве селективного маркерного гена / И.В. Танасиенко, А.И. Емец, Я.В. Пирко, В.И. Корховой, Н. Абумхади, Я.Б. Блюм // Цитология и генетика. — 2011. — Т. 45, № 1. — С. 3-10. — Бібліогр.: 30 назв. — рос. 0564-3783 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/66817 ru Цитология и генетика Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
language Russian
topic Оригинальные работы
Оригинальные работы
spellingShingle Оригинальные работы
Оригинальные работы
Танасиенко, И.В.
Емец, А.И.
Пирко, Я.В.
Корховой, В.И.
Абумхади, Н.
Блюм, Я.Б.
Получение трансгенных линий ячменя, продуцирующих лактоферрин человека, с использованием мутантного альфа-тубулина в качестве селективного маркерного гена
Цитология и генетика
description Метод биолистической трансформации был использован для генетического усовершенствования трех коммерческих сортов ячменя отечественной селекции (Оксамытовый, Водограй и Гетьман). Для трансформации использовали конструкцию pHLFTuBA, содержащую ген интереса, ген человеческого лактоферрина (hLF) под контролем глютелинового В-1 (GluB-1) промотора риса. В качестве селективного маркерного гена использовали ген мутантного a-тубулина, обеспечивающего устойчивость к трифлюралину (гербицид динитроанилинового ряда). Для установления селективной концентрации трифлюралина был проведен скрининг его разных концентраций в диапазоне от 0,1 до 30 мкМ. После 2–3 месяцев селекции на 10 мкМ трифлюралина были получены две трансгенные линии растений ячменя сорта Оксамытовый и каллусная линия сорта Гетьман. Для подтверждения стабильной интеграции гена hLF был проведен ПЦР-анализ листьев растений-регенерантов после их адаптации в грунте. В обеих линиях ячменя был амплифицирован фрагмент гена hLF размером 734 п.н.
format Article
author Танасиенко, И.В.
Емец, А.И.
Пирко, Я.В.
Корховой, В.И.
Абумхади, Н.
Блюм, Я.Б.
author_facet Танасиенко, И.В.
Емец, А.И.
Пирко, Я.В.
Корховой, В.И.
Абумхади, Н.
Блюм, Я.Б.
author_sort Танасиенко, И.В.
title Получение трансгенных линий ячменя, продуцирующих лактоферрин человека, с использованием мутантного альфа-тубулина в качестве селективного маркерного гена
title_short Получение трансгенных линий ячменя, продуцирующих лактоферрин человека, с использованием мутантного альфа-тубулина в качестве селективного маркерного гена
title_full Получение трансгенных линий ячменя, продуцирующих лактоферрин человека, с использованием мутантного альфа-тубулина в качестве селективного маркерного гена
title_fullStr Получение трансгенных линий ячменя, продуцирующих лактоферрин человека, с использованием мутантного альфа-тубулина в качестве селективного маркерного гена
title_full_unstemmed Получение трансгенных линий ячменя, продуцирующих лактоферрин человека, с использованием мутантного альфа-тубулина в качестве селективного маркерного гена
title_sort получение трансгенных линий ячменя, продуцирующих лактоферрин человека, с использованием мутантного альфа-тубулина в качестве селективного маркерного гена
publisher Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України
publishDate 2011
topic_facet Оригинальные работы
url http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/66817
citation_txt Получение трансгенных линий ячменя, продуцирующих лактоферрин человека, с использованием мутантного альфа-тубулина в качестве селективного маркерного гена / И.В. Танасиенко, А.И. Емец, Я.В. Пирко, В.И. Корховой, Н. Абумхади, Я.Б. Блюм // Цитология и генетика. — 2011. — Т. 45, № 1. — С. 3-10. — Бібліогр.: 30 назв. — рос.
series Цитология и генетика
work_keys_str_mv AT tanasienkoiv polučenietransgennyhlinijâčmenâproduciruûŝihlaktoferrinčelovekasispolʹzovaniemmutantnogoalʹfatubulinavkačestveselektivnogomarkernogogena
AT emecai polučenietransgennyhlinijâčmenâproduciruûŝihlaktoferrinčelovekasispolʹzovaniemmutantnogoalʹfatubulinavkačestveselektivnogomarkernogogena
AT pirkoâv polučenietransgennyhlinijâčmenâproduciruûŝihlaktoferrinčelovekasispolʹzovaniemmutantnogoalʹfatubulinavkačestveselektivnogomarkernogogena
AT korhovojvi polučenietransgennyhlinijâčmenâproduciruûŝihlaktoferrinčelovekasispolʹzovaniemmutantnogoalʹfatubulinavkačestveselektivnogomarkernogogena
AT abumhadin polučenietransgennyhlinijâčmenâproduciruûŝihlaktoferrinčelovekasispolʹzovaniemmutantnogoalʹfatubulinavkačestveselektivnogomarkernogogena
AT blûmâb polučenietransgennyhlinijâčmenâproduciruûŝihlaktoferrinčelovekasispolʹzovaniemmutantnogoalʹfatubulinavkačestveselektivnogomarkernogogena
first_indexed 2023-10-18T18:50:55Z
last_indexed 2023-10-18T18:50:55Z
_version_ 1796145321942712320