Чувствительность трансмембранного потенциала митохондрий гепатоцитов к регуляции фенилэфрином после экспозиции в растворах диметилсульфоксида и 1,2-пропандиола, а также замораживания-отогрева

• Main Authors: Малюкина, М.Ю., Кавок, Н.С., Боровой, И.А., Аверченко, Е.А.
• Format: Article
• Language: Russian
• Published: Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України 2013
• Series: Проблемы криобиологии и криомедицины
• Subjects: Теоретическая и экспериментальная криобиология
• Online Access: http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/68717

Методом микрофлуориметрии одиночных клеток оценивали интенсивность флуоресценции агрегатов зонда JС-1 и агонист-индуцированные изменения трансмембранного потенциала митохондрий гепатоцитов крыс до и после замораживания-отогрева. Показано, что экспозиция клеток в растворах 10% диметилсульфоксида (ДМСО) или 1,2-пропандиола (1,2-ПД) в течение часа и последующая отмывка не приводили к уменьшению флуоресценции агрегатов красителя. После замораживания-отогрева клеток в присутствии данных криопротекторов (2-ступенчатое замораживание до температуры жидкого азота, отогрев и отмывка криопротекторов) отмечено снижение интенсивности флуоресценции агрегатов красителя до (83 ± 6)% от контроля в случае использования ДМСО, в случае 1,2-ПД этот показатель составил менее 10%. В отличие от свежевыделенных клеток, в которых отмечалось повышение интенсивности флуоресценции агрегатов на 30% в ответ на краткосрочную стимуляцию фенилэфрином (10⁻⁵ М), в гепатоцитах, инкубированных в растворах ДМСО, динамика ответа нарушалась. После замораживания-отогрева клеток отмечено частичное восстановление их чувствительности к действию гормона, однако ответ регистрировался только при повышении концентрации гормона до 10⁻⁴ М.