Сравнительное изучение противовирусной активности компонентов кордовой крови человека при экспериментальной инфекции вирусом гриппа
Проведено сравнительное изучение противовирусной активности лейкоконцентрата ядерных клеток кордовой крови человека и его компонентов. Установлено, что наибольшей ингибирующей активностью обладали лейкоконцентрат и плазма кордовой крови человека. Это позволяет предполагать использование их для профи...
Gespeichert in:
Datum: | 2008 |
---|---|
Hauptverfasser: | , , , |
Format: | Artikel |
Sprache: | Russian |
Veröffentlicht: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2008
|
Schriftenreihe: | Проблемы криобиологии и криомедицины |
Schlagworte: | |
Online Zugang: | http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/69084 |
Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
Zitieren: | Сравнительное изучение противовирусной активности компонентов кордовой крови человека при экспериментальной инфекции вирусом гриппа / Е.С. Онасенко, Е.В. Бровко, Л.В. Степанюк, В.Л. Пономарева // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 4. — С. 527-530. — Бібліогр.: 3 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraineid |
irk-123456789-69084 |
---|---|
record_format |
dspace |
spelling |
irk-123456789-690842014-10-05T03:02:16Z Сравнительное изучение противовирусной активности компонентов кордовой крови человека при экспериментальной инфекции вирусом гриппа Онасенко, Е.С. Бровко, Е.В. Степанюк, Л.В. Пономарева, В.Л. Секция «Криобанк пуповинной крови. Перспективы применения криоконсервированных препаратов пуповинной крови в медицине» Проведено сравнительное изучение противовирусной активности лейкоконцентрата ядерных клеток кордовой крови человека и его компонентов. Установлено, что наибольшей ингибирующей активностью обладали лейкоконцентрат и плазма кордовой крови человека. Это позволяет предполагать использование их для профилактики гриппозной инфекции. Для окончательного суждения об эффективности препарата как неспецифического средства профилактики гриппа необходимо дальнейшее исследование его противовирусного действия. Проведено порівняльне вивчення противірусної активності лейкоконцентрату ядерних клітин кордової крові людини та його компонентів. Встановлено, що найбільшу інгібуючу активність має саме лейкоконцентрат та плазма кордової крові людини. Це дозволяє припустити їх використання для профілактики інфекції грипу. Остаточні висновки про ефективність препарату як неспецифічного засобу профілактики грипу потребують подальшого дослідження його противірусної дії. Comparative studying of human cord blood leucoconcentrate and its components antiviral activity was carried out. It was established that the highest inhibiting activity possessed human cord blood leucoconcentrate and plasma. This allows to assume their usage for grippe virus diseases prophylaxis. The further research of leucoconcentrate antiviral activity is necessary for final judgement its efficiency as a nonspecific antiviral protective preparation. 2008 Article Сравнительное изучение противовирусной активности компонентов кордовой крови человека при экспериментальной инфекции вирусом гриппа / Е.С. Онасенко, Е.В. Бровко, Л.В. Степанюк, В.Л. Пономарева // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 4. — С. 527-530. — Бібліогр.: 3 назв. — рос. 0233-7673 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/69084 615.361.018.5.013.8.281:578.832.1 ru Проблемы криобиологии и криомедицины Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
collection |
DSpace DC |
language |
Russian |
topic |
Секция «Криобанк пуповинной крови. Перспективы применения криоконсервированных препаратов пуповинной крови в медицине» Секция «Криобанк пуповинной крови. Перспективы применения криоконсервированных препаратов пуповинной крови в медицине» |
spellingShingle |
Секция «Криобанк пуповинной крови. Перспективы применения криоконсервированных препаратов пуповинной крови в медицине» Секция «Криобанк пуповинной крови. Перспективы применения криоконсервированных препаратов пуповинной крови в медицине» Онасенко, Е.С. Бровко, Е.В. Степанюк, Л.В. Пономарева, В.Л. Сравнительное изучение противовирусной активности компонентов кордовой крови человека при экспериментальной инфекции вирусом гриппа Проблемы криобиологии и криомедицины |
description |
Проведено сравнительное изучение противовирусной активности лейкоконцентрата ядерных клеток кордовой крови человека и его компонентов. Установлено, что наибольшей ингибирующей активностью обладали лейкоконцентрат и плазма кордовой крови человека. Это позволяет предполагать использование их для профилактики гриппозной инфекции. Для окончательного суждения об эффективности препарата как неспецифического средства профилактики гриппа необходимо дальнейшее исследование его противовирусного действия. |
format |
Article |
author |
Онасенко, Е.С. Бровко, Е.В. Степанюк, Л.В. Пономарева, В.Л. |
author_facet |
Онасенко, Е.С. Бровко, Е.В. Степанюк, Л.В. Пономарева, В.Л. |
author_sort |
Онасенко, Е.С. |
title |
Сравнительное изучение противовирусной активности компонентов кордовой крови человека при экспериментальной инфекции вирусом гриппа |
title_short |
Сравнительное изучение противовирусной активности компонентов кордовой крови человека при экспериментальной инфекции вирусом гриппа |
title_full |
Сравнительное изучение противовирусной активности компонентов кордовой крови человека при экспериментальной инфекции вирусом гриппа |
title_fullStr |
Сравнительное изучение противовирусной активности компонентов кордовой крови человека при экспериментальной инфекции вирусом гриппа |
title_full_unstemmed |
Сравнительное изучение противовирусной активности компонентов кордовой крови человека при экспериментальной инфекции вирусом гриппа |
title_sort |
сравнительное изучение противовирусной активности компонентов кордовой крови человека при экспериментальной инфекции вирусом гриппа |
publisher |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
publishDate |
2008 |
topic_facet |
Секция «Криобанк пуповинной крови. Перспективы применения криоконсервированных препаратов пуповинной крови в медицине» |
url |
http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/69084 |
citation_txt |
Сравнительное изучение противовирусной активности компонентов кордовой крови человека при экспериментальной инфекции вирусом гриппа / Е.С. Онасенко, Е.В. Бровко, Л.В. Степанюк, В.Л. Пономарева // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 4. — С. 527-530. — Бібліогр.: 3 назв. — рос. |
series |
Проблемы криобиологии и криомедицины |
work_keys_str_mv |
AT onasenkoes sravnitelʹnoeizučenieprotivovirusnojaktivnostikomponentovkordovojkrovičelovekapriéksperimentalʹnojinfekciivirusomgrippa AT brovkoev sravnitelʹnoeizučenieprotivovirusnojaktivnostikomponentovkordovojkrovičelovekapriéksperimentalʹnojinfekciivirusomgrippa AT stepanûklv sravnitelʹnoeizučenieprotivovirusnojaktivnostikomponentovkordovojkrovičelovekapriéksperimentalʹnojinfekciivirusomgrippa AT ponomarevavl sravnitelʹnoeizučenieprotivovirusnojaktivnostikomponentovkordovojkrovičelovekapriéksperimentalʹnojinfekciivirusomgrippa |
first_indexed |
2025-07-05T18:48:44Z |
last_indexed |
2025-07-05T18:48:44Z |
_version_ |
1836833911967055872 |
fulltext |
527 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №4
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №4
УДК 615.361.018.5.013.8.281:578.832.1
Е.С.ОНАСЕНКО*, Е.В. БРОВКО, Л.В. СТЕПАНЮК, В.Л. ПОНОМАРЕВА
Сравнительное изучение противовирусной активности компонентов
кордовой крови человека при экспериментальной
инфекции вирусом гриппа
UDC 615.361.018.5.013.8.281:578.832.1
E.S. ONASENKO*, E.V. BROVKO, L.V. STEPANYUK, V.L. PONOMAREVA
Comparative Studying of Human Cord Blood Components
Antiviral Activity at Experimental Grippe Viral Infection
Проведено сравнительное изучение противовирусной активности лейкоконцентрата ядерных клеток кордовой крови человека
и его компонентов. Установлено, что наибольшей ингибирующей активностью обладали лейкоконцентрат и плазма кордовой крови
человека. Это позволяет предполагать использование их для профилактики гриппозной инфекции. Для окончательного суждения об
эффективности препарата как неспецифического средства профилактики гриппа необходимо дальнейшее исследование его
противовирусного действия.
Ключевые слова: кордовая кровь, противовирусный эффект, гемагглютинирующий титр.
Проведено порівняльне вивчення противірусної активності лейкоконцентрату ядерних клітин кордової крові людини та
його компонентів. Встановлено, що найбільшу інгібуючу активність має саме лейкоконцентрат та плазма кордової крові
людини. Це дозволяє припустити їх використання для профілактики інфекції грипу. Остаточні висновки про ефективність
препарату як неспецифічного засобу профілактики грипу потребують подальшого дослідження його противірусної дії.
Ключові слова: кордова кров, противірусний ефект, гемаглютинуючій титр.
Comparative studying of human cord blood leucoconcentrate and its components antiviral activity was carried out. It was
established that the highest inhibiting activity possessed human cord blood leucoconcentrate and plasma. This allows to assume their
usage for grippe virus diseases prophylaxis. The further research of leucoconcentrate antiviral activity is necessary for final judgement
its efficiency as a nonspecific antiviral protective preparation.
Key-words: cord blood, antiviral effect, hemagglutination titre.
Заболеваемость гриппом – одна из актуальных
проблем современной медицины. Постоянная сме-
на антигенных вариантов, доминирующих в эпиде-
мическом процессе штаммов, является особен-
ностью вирусов гриппа А, что осложняет разработ-
ку эффективных мер борьбы с этой инфекцией [2].
Ранее мы установили, что лейкоконцентрат кор-
довой крови человека (ЛККЧ) [1] способен нейтра-
лизовать вирус гриппа А/Виктория и обеспечить
100% выживаемость исследуемых животных при
предварительном и одновременном интроназаль-
ном его введении с вирусом.
Цель работы – изучение влияния лейкоконцен-
трата и отдельных его компонентов на морфо-
функциональное состояние органов и систем на
этапах развития вирусной инфекции гриппа.
Материалы и методы
Штамм вируса гриппа А/Виктория был предо-
ставлен НИИ гриппа РАМН (г. С.-Петербург). В
работе использовали стандартные вирусологичес-
кие и серологические методы исследований [3].
Проведено 6 пассажей вируса на белых мышах и
2 пассажа на куриных эмбрионах. Титр гемагглю-
тининов инфицированной аллантоисной жидкости
был 1:512, инфекционный титр –104 LD50/10. В ка-
честве объекта исследования использовали ЛККЧ,
плазму и сыворотку кордовой крови человека
(ККЧ), плазму крови взрослого человека. Сыворот-
ку проверяли с помощью РТГА на наличие специ-
фических антител к вирусу гриппа. В сыворотке
данные антитела отсутствовали. В эксперименте
использовали 2-месячных беспородных белых
мышей. Исследования с животными проводили в
соответствии с «Общими принципами эксперимен-
тов на животных», одобренными II Национальным
конгрессом по биоэтике (г. Киев, 2004) и согласо-
ванными с положениями “Европейской конвенции
о защите позвоночных животных, используемых
для экспериментальных и других научных целей”
* Автор, которому необходимо направлять корреспонденцию:
ул. Переяславская, 23, г. Харьков, Украина 61015; тел.:+38
(057) 373-31-26, факс: +38 (057) 373-30-84, электронная почта:
cryo@online.kharkov.ua
Институт проблем криобиологии и криомедицины
НАН Украины, г. Харьков
Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the Na-
tional Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine
* To whom correspondence should be addressed: 23,
Pereyaslavskaya str., Kharkov, Ukraine 61015; tel.:+380 57 373
3126, fax: +380 57 373 3084, e-mail: cryo@online.kharkov.ua
528 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №4
Примечание: цифрами обозначено число погибших животных.
(г. Страсбург, 1985). Все оперативные вмеша-
тельства на животных, включая декапитацию, про-
водили под ингаляционным эфирным наркозом.
Животных инфицировали интраназальным
введением 0,05 мл вируссодержащего материала.
Объем ингредиентов серологических реакций
РТГА и РГА составлял 0,05 мл. Во все лунки до-
бавляли также по 0,05 мл 2%-й взвеси эритроцитов
человека I(0) группы крови.
Результаты исследований
С целью изучения противовирусной активности
ЛККЧ и его компонентов первой опытной группе
животных О1 интраназально вводили одновременно
вирус гриппа А/Виктория в дозе LD100/10=102 и
ЛККЧ в соотношении 1:1 (по 0,05 мл).Второй
опытной группе животных О2 вводили одно-
временно вирус гриппа А/Виктория и плазму ККЧ.
В эксперименте было 4 контрольных группы
животных, которым вводили: К1– вирус гриппа +
физиологический раствор в соотношении 1:1 (по
0,05мл); К2 – вирус гриппа + плазма взрослого
человека; К3 – вирус гриппа + сыворотка ККЧ.
Группа К4 – интактные мыши. Каждая группа
состояла из 10 животных.
Полученные результаты представлены в табл.1.
В опытных группах выживаемость животных
составила 100%, что свидетельствует о проти-
вовирусной активности лейкоконцентрата и плазмы
ККЧ (табл. 1). В группе К3 погибло по 1 мыши из
Таблица 1. Противовирусная активность ядросодержащих клеток и плазмы ККЧ
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №4
10, в группе К1 гибель животных составляла 100%.
Гистологический анализ показал, что в группе
К1 через 48 ч после инфицирования наблюдалась
десквамация эпителиальных клеток слизистой
оболочки дыхательных путей с сохранением ба-
зального слоя клеток. Часть клеток набухала и ут-
рачивала мерцательные ворсинки. Отмечались ва-
куолизация цитоплазмы значительного числа
клеток, поражение ядер эпителиальных клеток,
перераспределение в них хроматина и его концен-
трации по периферии ядра, исчезновение ядрышка.
В легочной ткани в этот период исследования
выявлялась очаговая десквамация альвеолярных
клеток в просвет альвеол, в отдельных альвео-
лярных клетках – базофильные включения. Вокруг
бронхососудистого пучка легкого отмечалась лим-
фоцитарная инфильтрация с гистиоцитами. Сосуды
легкого были расширены.
Гистологические изменения и десквамация по-
верхностных слоев эпителия верхних дыхательных
путей в опытных группах через 48 ч после введения
вируса гриппа, лейкоконцентрата и плазмы ККЧ
были незначительными. Изменения в ядрах отме-
чались лишь в некоторых эпителиальных клетках.
Изредка обнаруживались фрагментация цитоплаз-
мы этих клеток, вакуолизация и базофильные
включения. Полнокровие, незначительный отёк и
скудная лимфоцитарная инфильтрация подслизис-
тых оболочек выявлялись через 48 ч и быстро
исчезали.
елсопиктуС
яинаворицифни
хынтовижыппурГ
О
1
О
2
К
1
К
2
К
3
1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3
1 - - - - - - - - - - - - - - -
2 - - - - - - - - - - - - - - -
3 - - - - - - - - - - - - - - -
4 - - - - - - - 1 2 1 1 - - - -
5 - - - - - - - 1 2 - 1 - - 1 -
6 - - - - - - 2 2 1 - - 1 1 - -
7 - - - - - - 1 - 2 1 - - - - 1
8 - - - - - - 1 1 - - - - - - -
9 - - - - - - - - - - 1 - - - -
01 - - - - - - - - - - - - - - -
529 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №4
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №4
При морфометрическом
анализе установлено, что вес
легких и селезенки животных
во всех группах не изменился,
тогда как вес тимуса в группе
животных О1 через 48 ч был
достоверно выше, чем в груп-
пе К4, но достоверно ниже, чем в
группе К1.
В ходе исследований прове-
ден сравнительный цитологи-
ческий анализ периферической
крови и костного мозга мы-
шей. Выявлено, что у мышей
при экспериментальной инфек-
ции гриппа в группах О1, О2 ко-
личество лейкоцитов сущест-
венно не отличалось от показа-
телей контрольной группы К4
(интактные мыши) на всех эта-
пах исследования. В контроль-
ной группе К1 отмечено резкое
снижение числа лейкоцитов,
что характерно для тяжелой
формы течения гриппа. Коли-
чество эритроцитов через 48 ч
после инфицирования досто-
верно снизилось в группе К1 по
сравнению с группой К4, а в
группах О1 и О2 эти показатели
Примечание: * – гибель животных 100%; ”–“ – вирус не обнаружен.
Таблица 2. Гемагглютинирующий титр вируса в органах мышей на разных
стадиях экспериментальной инфекции гриппа
соответствовали контролю.
Проведенные исследования костного мозга у
экспериментальных животных показали, что на 2-е
сутки количество ядросодержащих клеток в нем
снижалось в группе К1 по сравнению с контрольной
группой К4 (интактные мыши) и опытными груп-
пами О1, О2, показатели которых достоверно не
отличались от контроля К4. На 7-е сутки исследо-
вания наблюдалась тенденция к дальнейшему
снижению количества ядросодержащих клеток в
группе животных К1. В опытных группах О1 и О2
этот показатель не изменялся по сравнению с конт-
ролем К4 и был достоверно выше, чем в группе
К1.
С целью выявления вируса гриппа А/Виктория
и установления гемаггглютинирующего титра (по
РГА) на 2, 7, 14 и 30-е сутки после интраназального
введения у животных изымали и исследовали
легкие, лимфоузлы, носоглотку, надпочечники, се-
лезенку, тимус, щитовидную железу. На 2-е сутки
исследования вирус гриппа выявлен в лимфати-
ческих узлах, тимусе, селезенке, щитовидной желе-
зе, надпочечниках в группе животных К1. Число
животных с низким титром вируса в органах и
животных, у которых вирус в данных органах не
обнаруживался, было достоверно выше в группах
О1 и О2. В указанный период эксперимента титр
вируса в легких животных групп О1, О2, К3 был
достоверно ниже, чем в группе К1.
Результаты исследования патологического ма-
териала, выделенного из исследуемых животных,
приведены в табл. 2.
Выводы
Установлено, что ЛККЧ и плазма ККЧ обла-
дают более выраженным противовирусным дейст-
вием в отношении вируса гриппа А/Виктория. Об
этом свидетельствуют 100%-я выживаемость
животных, зараженных вирусом гриппа А/Виктория
в летальной дозе LD100\10 = 102, результаты гисто-
логических исследований и показатели перифе-
рической крови. В опытных группах животных О1,
О2, которым вводили ЛККЧ и плазму ККЧ одно-
временно с вирусом в течение всего развития
гриппозной инфекции, количество лейкоцитов и
эритроцитов достоверно не изменялось, тогда как
в периферической крови животных контрольной
группы К1 наблюдалось резкое снижение данных
показателей, характерное для тяжелой формы
течения гриппозной инфекции. Под действием
йымеуделссИ
лаиретам
икорС
,яинаводелсси
тус
асуривртитйищюуринитюлггамеГ
хаппургхымеуделссив
О
1
О
2
К
1
К
2
К
3
еикгеЛ
2
7
41
03
61:1
23:1
652:1
-
8:1
23:1
652:1
-
46:1
821:1
*
*
61:1
46:1
821:1
-
61:1
23:1
821:1
-
актолгосоН
2
7
41
03
1:1
-
-
-
1:1
-
-
-
8:1
-
-
-
2:1
-
-
-
4:1
4:1
4:1
4:1
икинчечопдаН
2
7
41
03
1:1
2:1
4:1
-
1:1
4:1
61:1
-
4:1
8:1
*
*
2:1
4:1
8:1
-
1:1
4:1
4:1
-
акнезелеС
2
7
41
03
4:1
61:1
61:1
-
8:1
23:1
23:1
-
8:1
61:1
*
*
4:1
23:1
23:1
-
2:1
8:1
8:1
-
ылзуофмиЛ
2
7
41
03
-
-
-
-
-
-
-
-
4:1
8:1
*
*
-
-
-
-
2:1
4:1
1:1
-
сумиТ
2
7
41
03
1:1
2:1
4:1
-
1:1
4:1
4:1
*
8:1
61:1
*
*
2:1
8:1
61:1
-
1:1
2:1
2:1
-
яандивотиЩ
азележ
2
7
41
03
2:1
8:1
8:1
-
1:1
8:1
4:1
-
2:1
4:1
*
*
4:1
61:1
61:1
-
1:1
4:1
8:1
-
530 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №4
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №4
Литература
Абдулкадыров К.М., Романенко Н.А., Старков Н.Н. Полу-
чение и клиническое применение периферических гемо-
поэтических стволовых клеток из пуповинной крови //
Вопросы онкологии.–2000.–Т. 46, №5.– С. 513–520.
Вирусология / Под ред. Б.Филдса, Д. Найна.– М.: Мир,
1998.–319 с.
Сюрин В.Н., Белоусова Р.В., Фомина Н.В. Ветеринарная
вирусология.– М.: Колос,1984.– 375 с.
Поступила 07.07.2008
1.
2.
3.
ЛККЧ и плазмы ККЧ у зараженных животных вы-
рабатывался противовирусный иммунитет, о кото-
ром свидетельствует появление нейтрализующих
антител в сыворотке крови.
|