Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші
Сконструйовано комбінаторну бібліотеку кДНК варіабельних генів імуноглобулінів мишей, імунізованих рекомбінантним інтерфероном β1b людини (rhIFN-β1b). Для цього ампліфіковану зі спленоцитів кДНК варіабельних генів важких (VH) і легких (VL) ланцюгів імуноглобулінів об’єднували лінкерною ДНК у складі...
Збережено в:
| Дата: | 2008 |
|---|---|
| Автори: | , , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Ukrainian |
| Опубліковано: |
Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України
2008
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/8078 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші / М.В. Павлова, П.В. Гільчук, Я.О. Похоленко, Ю.С. Ніколаєв, В.А. Кордюм // Цитология и генетика. — 2008. — Т. 42, № 2. — С. 10-15. — Бібліогр.: 12 назв. — укp. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
irk-123456789-8078 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
irk-123456789-80782010-04-30T12:01:26Z Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші Павлова, М.В. Гільчук, П.В. Похоленко, Я.О. Ніколаєв, Ю.С. Кордюм, В.А. Оригинальные работы Сконструйовано комбінаторну бібліотеку кДНК варіабельних генів імуноглобулінів мишей, імунізованих рекомбінантним інтерфероном β1b людини (rhIFN-β1b). Для цього ампліфіковану зі спленоцитів кДНК варіабельних генів важких (VH) і легких (VL) ланцюгів імуноглобулінів об’єднували лінкерною ДНК у складі послідовностей одноланцюгових антитіл – ScFv’s (single chain Fv antibodies). Одержаний пул ScFv-ДНК було клоновано у фагмідному векторі і використано для трансформації Escherichia coli. З використанням методу фагового дисплея відібрано бактеріальні клони, які продукують специфічні до rhIFN-β1b ScFv’s. У роботі встановлено такі характеристики створеної бібліотеки, як представленість, функціональний розмір та вихідне різноманіття послідовностей ScFv-ДНК. Продемонстровано високу специфічність взаємодії виділених фаговим дисплеєм ScFv’s з rhIFN-β1b. Была сконструирована комбинаторная библиотека кДНК вариабельных генов иммуноглобулинов мышей, иммунизированных рекомбинантным интерфероном β1b человека (rhIFN-β1b). Для этого амплифицированную из спленоцитов кДНК вариабельных генов тяжелых (VH) и легких (VL) цепей иммуноглобулинов объединяли линкерной ДНК в составе последовательностей одноцепочечных антител – ScFv’s (single-chain Fv-antibodies). Полученный пул ScFv-ДНК был заклонирован в фагемидный вектор и использован для трансформации клеток Escherichia coli. С использованием метода фагового дисплея отобраны бактериальные клоны, которые продуцируют специфические к rhIFN-β1b одноцепочечные антитела. В работе определены такие характеристики созданной библиотеки, как представленность, функциональный размер, а также исходное разнообразие последовательностей ScFv-ДНК. Продемонстрирована высокая специфичность взаимодействия ScFv, выделенных с помощью фагового дисплея, с rhIFN-β1b. A cDNA combinatorial antibody library of mouse variable immunoglobulin fragments has been constructed from mice immunized with rhIFN-β1b. For this purpose, cDNAS of immunoglobulin variable heavy (VH) and variable light (VL) chains genes amplified from splenocytes were joined with linker DNA to form ScFv’s (single-chain Fv-antibodies). The obtained ScFv-DNA pool was cloned into a phagemid vector and used for Escherichia coli transformation. Using the phage display technique, bacterial clones producing single-chain antibodies specific to rhIFN-β1b were selected. The following characteristics of the combinatorial library were determined in this work: abundance, functional size, and the initial ScFv-DNA diversity in the library constructed. High specificity of interaction between phage displayed ScFv’s and rhIFN-β1b has been demonstrated. 2008 Article Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші / М.В. Павлова, П.В. Гільчук, Я.О. Похоленко, Ю.С. Ніколаєв, В.А. Кордюм // Цитология и генетика. — 2008. — Т. 42, № 2. — С. 10-15. — Бібліогр.: 12 назв. — укp. 0564-3783 http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/8078 579.69 : 577.12 uk Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| language |
Ukrainian |
| topic |
Оригинальные работы Оригинальные работы |
| spellingShingle |
Оригинальные работы Оригинальные работы Павлова, М.В. Гільчук, П.В. Похоленко, Я.О. Ніколаєв, Ю.С. Кордюм, В.А. Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші |
| description |
Сконструйовано комбінаторну бібліотеку кДНК варіабельних генів імуноглобулінів мишей, імунізованих рекомбінантним інтерфероном β1b людини (rhIFN-β1b). Для цього ампліфіковану зі спленоцитів кДНК варіабельних генів важких (VH) і легких (VL) ланцюгів імуноглобулінів об’єднували лінкерною ДНК у складі послідовностей одноланцюгових антитіл – ScFv’s (single chain Fv antibodies). Одержаний пул ScFv-ДНК було клоновано у фагмідному векторі і використано для трансформації Escherichia coli. З використанням методу фагового дисплея відібрано бактеріальні клони, які продукують специфічні до rhIFN-β1b ScFv’s. У роботі встановлено такі характеристики створеної бібліотеки, як представленість, функціональний розмір та вихідне різноманіття послідовностей ScFv-ДНК. Продемонстровано високу специфічність взаємодії виділених фаговим дисплеєм ScFv’s з rhIFN-β1b. |
| format |
Article |
| author |
Павлова, М.В. Гільчук, П.В. Похоленко, Я.О. Ніколаєв, Ю.С. Кордюм, В.А. |
| author_facet |
Павлова, М.В. Гільчук, П.В. Похоленко, Я.О. Ніколаєв, Ю.С. Кордюм, В.А. |
| author_sort |
Павлова, М.В. |
| title |
Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші |
| title_short |
Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші |
| title_full |
Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші |
| title_fullStr |
Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші |
| title_full_unstemmed |
Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші |
| title_sort |
створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кднк варіабельних генів імуноглобулінів миші |
| publisher |
Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України |
| publishDate |
2008 |
| topic_facet |
Оригинальные работы |
| url |
http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/8078 |
| citation_txt |
Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші / М.В. Павлова, П.В. Гільчук, Я.О. Похоленко, Ю.С. Ніколаєв, В.А. Кордюм // Цитология и генетика. — 2008. — Т. 42, № 2. — С. 10-15. — Бібліогр.: 12 назв. — укp. |
| work_keys_str_mv |
AT pavlovamv stvorennâtaharakteristikaímunnoíkombínatornoíbíblíotekikdnkvaríabelʹnihgenívímunoglobulínívmiší AT gílʹčukpv stvorennâtaharakteristikaímunnoíkombínatornoíbíblíotekikdnkvaríabelʹnihgenívímunoglobulínívmiší AT poholenkoâo stvorennâtaharakteristikaímunnoíkombínatornoíbíblíotekikdnkvaríabelʹnihgenívímunoglobulínívmiší AT níkolaêvûs stvorennâtaharakteristikaímunnoíkombínatornoíbíblíotekikdnkvaríabelʹnihgenívímunoglobulínívmiší AT kordûmva stvorennâtaharakteristikaímunnoíkombínatornoíbíblíotekikdnkvaríabelʹnihgenívímunoglobulínívmiší |
| first_indexed |
2023-10-18T16:39:00Z |
| last_indexed |
2023-10-18T16:39:00Z |
| _version_ |
1796139531768954880 |