Новий напрямок у рослинництві – застосування природних полі компонентних регуляторів росту рослин з біозахисним ефектом

З використанням методу точкової дот-блот гібридизації виявлено різницю ступенів гомології між mRNA контрольних рослин і малими регуляторними si/miRNA, виділеними із проростків пшениці, кукурудзи, сої, цукрового буряка, нуту та ін. 2-го покоління, отриманих з насіння рослин, інфікованих та оброблени...

Повний опис

Збережено в:
Бібліографічні деталі
Опубліковано в: :Наука та інновації
Дата:2013
Автори: Пономаренко, С.П., Циганкова, В.А., Блюм, Я.Б., Галкін, А.П.
Формат: Стаття
Мова:Ukrainian
Опубліковано: Видавничий дім "Академперіодика" НАН України 2013
Теми:
Онлайн доступ:https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/114691
Теги: Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:Новий напрямок у рослинництві – застосування природних полі компонентних регуляторів росту рослин з біозахисним ефектом / С.П. Пономаренко, В.А. Циганкова, Я.Б. Блюм, А.П. Галкін // Наука та інновації. — 2013. — Т. 9, № 5. — С. 69-77. — Бібліогр.: 25 назв. — укр.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-114691
record_format dspace
spelling Пономаренко, С.П.
Циганкова, В.А.
Блюм, Я.Б.
Галкін, А.П.
2017-03-12T16:29:10Z
2017-03-12T16:29:10Z
2013
Новий напрямок у рослинництві – застосування природних полі компонентних регуляторів росту рослин з біозахисним ефектом / С.П. Пономаренко, В.А. Циганкова, Я.Б. Блюм, А.П. Галкін // Наука та інновації. — 2013. — Т. 9, № 5. — С. 69-77. — Бібліогр.: 25 назв. — укр.
1815-2066
DOI: doi.org/10.15407/scin9.05.069
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/114691
З використанням методу точкової дот-блот гібридизації виявлено різницю ступенів гомології між mRNA контрольних рослин і малими регуляторними si/miRNA, виділеними із проростків пшениці, кукурудзи, сої, цукрового буряка, нуту та ін. 2-го покоління, отриманих з насіння рослин, інфікованих та оброблених новими полікомпонентними регуляторами росту рослин Regoplant® і Stimpo® у 1-му поколінні. Доведено, що ця різниця пов’язана з частковим перепрограмуванням геному клітин під впливом біостимуляторів при вирощуванні рослин на інфікованих фонах, що виявляється в індукції синтезу низькомолекулярних si/mi RNA з антипатогенними та антипаразитарними властивостями, які є складовими імунної системи живого організму.
С использованием метода дот-блот точечной гибридизации обнаружено разницу ступеней гомологии между mRNA контрольных растений и малыми регуляторными si/mi RNA, выделенными из проростков пшеницы, кукурузы, сои, сахарной свеклы, нута и др. 2-го поколения, полученных из семян растений, инфицированных и обработанных новыми поликомпонентными регуляторами роста растений Regoplant® и Stimpo® в 1-м поколении. Доведено, что эта разница связана с частичным перепрограммированием генома клеток под влиянием биостимуляторов при выращивании растений на инфицированных фонах, что оказывается в индукции синтеза низкомолекулярных si/miRNA из антипатогенными и антипаразитарными свойствами, которые являются составляющими иммунной системы живого организма.
With the help of the Dot-blot hybridization the difference in steps of homology between mRNA of control plants and small regulatory si/mi RNA isolated from second-generation plantlets of wheat, corn, soybeans, sugar beets, chickpea, etc. cultivated from the seeds of plants infected and processed by new polycomponent plant growth regulators Regoplant® and Stimpo® in the first generation was found. It is proved that this difference is related to a partial reprogramming of the cell genome under the influence of biostimulators on growing plants with infected backgrounds that turns out in induction of low-molecular si/miRNA with antipathogenic and antiparasitic properties, which are the components of the immune system of a living organism.
uk
Видавничий дім "Академперіодика" НАН України
Наука та інновації
Світ інновацій
Новий напрямок у рослинництві – застосування природних полі компонентних регуляторів росту рослин з біозахисним ефектом
Новое направление в растениеводстве — применение природных поликомпонентных регуляторов роста растений с биозащитным эффектом
New Trend in Crop Production – Application of Plant Natural Multicomponent Growth Regulators with Bioprotective Effect
Article
published earlier
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
title Новий напрямок у рослинництві – застосування природних полі компонентних регуляторів росту рослин з біозахисним ефектом
spellingShingle Новий напрямок у рослинництві – застосування природних полі компонентних регуляторів росту рослин з біозахисним ефектом
Пономаренко, С.П.
Циганкова, В.А.
Блюм, Я.Б.
Галкін, А.П.
Світ інновацій
title_short Новий напрямок у рослинництві – застосування природних полі компонентних регуляторів росту рослин з біозахисним ефектом
title_full Новий напрямок у рослинництві – застосування природних полі компонентних регуляторів росту рослин з біозахисним ефектом
title_fullStr Новий напрямок у рослинництві – застосування природних полі компонентних регуляторів росту рослин з біозахисним ефектом
title_full_unstemmed Новий напрямок у рослинництві – застосування природних полі компонентних регуляторів росту рослин з біозахисним ефектом
title_sort новий напрямок у рослинництві – застосування природних полі компонентних регуляторів росту рослин з біозахисним ефектом
author Пономаренко, С.П.
Циганкова, В.А.
Блюм, Я.Б.
Галкін, А.П.
author_facet Пономаренко, С.П.
Циганкова, В.А.
Блюм, Я.Б.
Галкін, А.П.
topic Світ інновацій
topic_facet Світ інновацій
publishDate 2013
language Ukrainian
container_title Наука та інновації
publisher Видавничий дім "Академперіодика" НАН України
format Article
title_alt Новое направление в растениеводстве — применение природных поликомпонентных регуляторов роста растений с биозащитным эффектом
New Trend in Crop Production – Application of Plant Natural Multicomponent Growth Regulators with Bioprotective Effect
description З використанням методу точкової дот-блот гібридизації виявлено різницю ступенів гомології між mRNA контрольних рослин і малими регуляторними si/miRNA, виділеними із проростків пшениці, кукурудзи, сої, цукрового буряка, нуту та ін. 2-го покоління, отриманих з насіння рослин, інфікованих та оброблених новими полікомпонентними регуляторами росту рослин Regoplant® і Stimpo® у 1-му поколінні. Доведено, що ця різниця пов’язана з частковим перепрограмуванням геному клітин під впливом біостимуляторів при вирощуванні рослин на інфікованих фонах, що виявляється в індукції синтезу низькомолекулярних si/mi RNA з антипатогенними та антипаразитарними властивостями, які є складовими імунної системи живого організму. С использованием метода дот-блот точечной гибридизации обнаружено разницу ступеней гомологии между mRNA контрольных растений и малыми регуляторными si/mi RNA, выделенными из проростков пшеницы, кукурузы, сои, сахарной свеклы, нута и др. 2-го поколения, полученных из семян растений, инфицированных и обработанных новыми поликомпонентными регуляторами роста растений Regoplant® и Stimpo® в 1-м поколении. Доведено, что эта разница связана с частичным перепрограммированием генома клеток под влиянием биостимуляторов при выращивании растений на инфицированных фонах, что оказывается в индукции синтеза низкомолекулярных si/miRNA из антипатогенными и антипаразитарными свойствами, которые являются составляющими иммунной системы живого организма. With the help of the Dot-blot hybridization the difference in steps of homology between mRNA of control plants and small regulatory si/mi RNA isolated from second-generation plantlets of wheat, corn, soybeans, sugar beets, chickpea, etc. cultivated from the seeds of plants infected and processed by new polycomponent plant growth regulators Regoplant® and Stimpo® in the first generation was found. It is proved that this difference is related to a partial reprogramming of the cell genome under the influence of biostimulators on growing plants with infected backgrounds that turns out in induction of low-molecular si/miRNA with antipathogenic and antiparasitic properties, which are the components of the immune system of a living organism.
issn 1815-2066
url https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/114691
citation_txt Новий напрямок у рослинництві – застосування природних полі компонентних регуляторів росту рослин з біозахисним ефектом / С.П. Пономаренко, В.А. Циганкова, Я.Б. Блюм, А.П. Галкін // Наука та інновації. — 2013. — Т. 9, № 5. — С. 69-77. — Бібліогр.: 25 назв. — укр.
work_keys_str_mv AT ponomarenkosp noviinaprâmokuroslinnictvízastosuvannâprirodnihpolíkomponentnihregulâtorívrosturoslinzbíozahisnimefektom
AT cigankovava noviinaprâmokuroslinnictvízastosuvannâprirodnihpolíkomponentnihregulâtorívrosturoslinzbíozahisnimefektom
AT blûmâb noviinaprâmokuroslinnictvízastosuvannâprirodnihpolíkomponentnihregulâtorívrosturoslinzbíozahisnimefektom
AT galkínap noviinaprâmokuroslinnictvízastosuvannâprirodnihpolíkomponentnihregulâtorívrosturoslinzbíozahisnimefektom
AT ponomarenkosp novoenapravlenievrastenievodstveprimenenieprirodnyhpolikomponentnyhregulâtorovrostarasteniisbiozaŝitnyméffektom
AT cigankovava novoenapravlenievrastenievodstveprimenenieprirodnyhpolikomponentnyhregulâtorovrostarasteniisbiozaŝitnyméffektom
AT blûmâb novoenapravlenievrastenievodstveprimenenieprirodnyhpolikomponentnyhregulâtorovrostarasteniisbiozaŝitnyméffektom
AT galkínap novoenapravlenievrastenievodstveprimenenieprirodnyhpolikomponentnyhregulâtorovrostarasteniisbiozaŝitnyméffektom
AT ponomarenkosp newtrendincropproductionapplicationofplantnaturalmulticomponentgrowthregulatorswithbioprotectiveeffect
AT cigankovava newtrendincropproductionapplicationofplantnaturalmulticomponentgrowthregulatorswithbioprotectiveeffect
AT blûmâb newtrendincropproductionapplicationofplantnaturalmulticomponentgrowthregulatorswithbioprotectiveeffect
AT galkínap newtrendincropproductionapplicationofplantnaturalmulticomponentgrowthregulatorswithbioprotectiveeffect
first_indexed 2025-11-25T23:52:46Z
last_indexed 2025-11-25T23:52:46Z
_version_ 1850588832731234304
fulltext 69 © С.П. ПОНОМАРЕНКО, В.А. ЦИГАНКОВА, Я.Б. БЛЮМ, А.П. ГАЛКІН, 2013 Наука та інновації. 2013. Т. 9. № 5. С. 69—77 С.П. Пономаренко1, В.А. Циганкова2, Я.Б. Блюм3, А.П. Галкін3 1 Міжвідомчий науково-технологічний центр «Агробіотех» НАН і МОН України, Київ 2 Інститут біоорганічної хімії та нафтохімії НАН України, Київ 3 Інститут харчової біотехнології та геноміки НАН України, Київ НОВИЙ НАПРЯМОК У РОСЛИННИЦТВІ — ЗАСТОСУВАННЯ ПРИРОДНИХ ПОЛІКОМПОНЕНТНИХ РЕГУЛЯТОРІВ РОСТУ РОСЛИН З БІОЗАХИСНИМ ЕФЕКТОМ З використанням методу точкової дот-блот гібридизації виявлено різницю ступенів гомології між mRNA контроль- них рослин і малими регуляторними si/miRNA, виділеними із проростків пшениці, кукурудзи, сої, цукрового буряка, нуту та ін. 2-го покоління, отриманих з насіння рослин, інфікованих та оброблених новими полікомпонентними регу- ляторами росту рослин Regoplant® і Stimpo® у 1-му поколінні. Доведено, що ця різниця пов’язана з частковим пере- програмуванням геному клітин під впливом біостимуляторів при вирощуванні рослин на інфікованих фонах, що ви- являється в індукції синтезу низькомолекулярних si/mi RNA з антипатогенними та антипаразитарними властивостя- ми, які є складовими імунної системи живого організму. К л ю ч о в і с л о в а: стійкість рослин, імунітет, біостимулятори росту, si/miRNA, дот-блот-гібридизація. МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧНІ МЕХАНІЗМИ ДІЇ РЕГУЛЯТОРІВ РОСТУ РОСЛИН ІЗ БІОЗАХИСНИМИ ВЛАСТИВОСТЯМИ Упродовж останніх 15-и років великої уваги надається виділенню з клітин еукаріотів та ви- значенню біологічної ролі малих регулятор- них РНК (small regulatory RNA) в RNAi (RNA interference) в процесі, який прийнято назива- ти пост-транскрипційний сайленсинг генів (PTGS) у рослин, тварин та грибів [1—7]. Сайленсинг генів — процес, у результаті якого відбуваєть- ся або деградація, або блокування трансляції молекул-мішеней mRNA, — має велике зна- чення в адаптаційній резистентності до віру- сів, захисті геному від транспозицій мо більних ДНК-елементів, а також в онтогенетичній ре- гуляції експресії генів. Ос новну роль у сай- ленсингу виконують 2 типи малих регулятор- них RNA: miRNA (microRNA) та siRNA (short interfering RNA) [1—6]. MicroRNA утворю- ються з молекул-попередників шляхом двох раундів ендорибонуклеазного розщеплення за допомогою RNase-111 подібних ферментів. Спо- чатку за допомогою рибонуклеази RNase 111 Drosha утворюється pre-miRNA-пер вин ний шпилько-подібний подовжений (70 нт) тран- скрипт з одноланцюгових окремих геномних локусів. Ці молекули pre-miRNA експорту- ються в цитоплазму, де відбувається їх проце- синг за допомогою ендорибонуклеази RNase 111 Dicer, в результаті чого утворюються зрілі одноланцюгові (довжиною 21—22 нт) молеку- ли miRNA, які інкорпоруються в miRNPs (mi- cro-ribonucleoproteins) [3, 4]. Short interfering RNA (розміром 22—24 нт) утворюються з по- довжених дволанцюгових попередників RNA — dsRNA (double-stranded RNA) в результаті їх розщеплення ендорибонуклеазою RNase III Di- cer на короткі одноланцюгові (ss)siRNA (sing- 70 ISSN 1815-2066. Science and Innovation. T. 9, № 5, 2013 Світ інновацій le-stranded siRNA) [1, 2, 5, 6]. Одна частина (ss)siRNA використовується для «сайленсингу- вання» молекул-мішеней mRNA, тоді як інші молекули (ss)siRNA функціонують як прайме- ри до комплементарних послідовностей mRNA, на яких за допомогою полімерази RdRP (RNA- dependent RNA polymerase) утво рюються нові молекули dsRNA. Допускають, що siRNA є по- хідними від подовжених послідовностей, що повторюються, транспозонів та трансгенів. Вста- новлено, що si/miRNA близькі за структурою і функцією (характеризуються антисенсовою ком- плементарною структурою до mRNA) і віді- грають подвійну роль у рослин [1—15]: 1) разом із сайт-специфічними мультису- бодиничними ендо- та екзонуклеазами, які є скла довими RISC-комплексу (RNA-induced silen cing complex) визначають період життя кожної з молекул mRNA, насамперед знищу- ють шляхом або деградації (розщеплення), або блокування (сайленсингу) трансляції абе- рантні та не досконалі за структурою молеку- ли mRNA, які можуть з’являтися помилково в клітинах; 2) виконують захисні (антипатогенні та ан- типаразитичні) функції. В обох випадках ці біологічні ефекти дося- гаються шляхом зв’язування si/miRNA з комп- лементарною полінуклеотидною ланкою mRNA власних клітин чи mRNA хворобоутворюючих вірусів, або mRNA паразитичних організмів (напр., нематод). У клітинах тварин та рослин si/miRNA функціонують різними шляхами: si/miRNA тварин зв’язуються з З’-UTR ділян- ками (З’-untranslated regions) або з ORF (open reading frame) молекул-мішеней mRNA, в той час як si/miRNA рослин зв’язуються з кодую- чими послідовностями mRNA [16]. Але у випадках інфікування великої маси клі- тин у тканинах рослин шкідниками синтезує- ть ся недостатньо молекул si/miRNA проти тих чи інших паразитів і тому, відповідно, не до- сягається захисний ефект. Вчені пропонують два підходи підвищення кількості si/miRNA у відповідь на патогенез [1, 5, 8—10]: 1) за допомогою введення в клітини додат- кової кількості копій генів si/miRNA шляхом генетичної трансформації; 2) активацією експресії власних клітинних генів синтезу si/miRNA якимись специфічни- ми індукторами. До нових ефективних вітчизняних препара- тів — індукторів імунозахисних властивостей рослин — належать створені державним під- приємством «Міжвідомчий науково-тех ноло- гічний центр "Агробіотех" НАН і МОН Ук раї- ни» композиційні поліфункціональні препара- ти Стімпо та Регоплант, біозахисні властивості яких обумовлені синергійним ефектом взає- модії продуктів життєдіяльності в культурі in vitro гриба-мікроміцета Cylindrocarpon obtisiu- cuilum 680, виділеного з кореневої системи же- ньшеню (суміш амінокислот, вуглеводів, жир- них кислот, полісахаридів, фітогормонів, мік ро- елементів) та аверсектинів — комплексних антипаразитарних макролідних антибіотиків, продуктів метаболізму ґрунтового стрептомі- цету Streptomyces avermitilis [17]. Як виявлено нами у проведених моле ку ляр- но-генетичних дослідженнях [18, 19], ці пре- парати значно підвищують стійкість рослин до різних патогенів завдяки стимуляції ними синтезу власне клітинних малих регулятор- них RNA (small regulatory RNA), що беруть участь в RNAi-процесі (RNA interference), який прийнято називати посттранскрипційним сай- ленсингом генів (PTGS) у рослин, тварин та грибів [20—25]. До числа наших фундаментальних досягнень можна віднести розкриття молекулярно-гене- тичних механізмів опосередкованої дії екзоген- них регуляторів росту через ендогенний пул фі- тогормонів та вперше одержаних результатів, які свідчать про активізацію в клітинах рослин ендогенних si/miRNA, специфічно комплемен- тарних до mRNA патогенну чи паразиту і є скла- довими імунної системи в боротьбі із хворобами, шкідниками, стресами і, як наслідок, збережен- ня і більш повна реалізація генотипу, за рахунок чого збільшується врожай і його якість. 71ISSN 1815-2066. Наука та інновації. T. 9, № 5, 2013 Світ інновацій Нами показано, що ознаки стійкості рослин успадковуються і проявляються у другому і навіть у третьому поколінні як домінантний гомозиготний локус без розщеплення. На початку XX ст. український вчений М.Г. Хо- лодний виявив у точках росту рослин невідомі до того ростові речовини, які були названі фі- тогормонами, або регуля торами росту рослин. Ще тоді він передбачив, що прийде час, коли штучні аналоги фітогормонів будуть відіграва- ти не меншу роль, ніж сорти та інші агропри- йоми. Пізніше вчені різних країн створили чи- мало штучних та природних аналогів фітогор- монів, однак че рез неприйнятість цього нового знання широким загалом вони не знайшли практичного застосування. У 1987 р. було організовано Інститут біоор- ганічної хімії та нафтохімії НАНУ, а в 1989 р. розроблена державна програма створення су- часних регуляторів росту рослин. Ці дослід- ження підтримала Національна академія наук, Українська академія аграрних наук та Мі ніс- терство освіти і науки. І якщо говорити про успіхи цієї державної справи, то в нашій краї- ні створено широкий спектр регуляторів рос- ту рослин: штучних аналогів фі тогормонів, бі- отехнологічних продуктів життєдіяльності гри- бів-епіфітів з кореневої системи лікарських рослин, а також композиції природних і штуч- них регуляторів росту рослин. Один із осно- вних механізмів їх дії є прискорення передачі інформації, закладеної в клітинному гено мі. Фізіологічні ефекти українських регуляторів подібні до дії фітогормонів. За допомогою тест-об’єктів доведено, що препарати мають відповідну цілеспрямовану активність фіто- гормонів ауксинової і цитокінінової природи. За впливу біостимуляторів активізується син- тез основних біомакромолекул, в т. ч. ендоген- них фітогормонів. Ці реакції на молекулярно- му рівні — основа інтенсифікації фізіологіч- них процесів росту та поділу клітин і як ре- зультат — інтеграль ний ріст та розвиток рос- лин, підвищення стійкості до хвороб та стресів, збільшення вро жаю, покращення якості про- дукції рослинництва. Світові лідери агрови- робництва вже давно використовують іннова- ційні елементи технологій з використанням регуляторів росту рослин, «високі технології» активно реалізуються в органічному земле- робстві за вимогами ФАО та СOT. Широкі наукові дослідження і виробничі випробування, зокрема препаратів Біолан та Емістим С у зоні Полісся і Лісостепу підтвер- дили факт зменшення надходження радіону- клідів у проду кцію рослинництва на забрудне- них ними ґрунтах. За умови використання їх з пестицида ми для допосівної обробки насіння регулятори росту рослин підсилюють стій- кість ґрунтової мікрофлори до негативної дії пестицидів. Це досягнення — результат п’я ти- річних досліджень науковців Інституту мікро- біології та вірусології Національної академії наук. Екологічна роль регуляторів обумовле- на як прямою дією на мікробні угрупування, так і впливом через корене ву систему рослин, розвиток яких на 15—37 відсотків підсилюється. Про реальний внесок науки вказують спіль- ні накази по тодішньому Міністерству агроп- ромис лового комплексу та Українській акаде- мії аграрних наук: «Про впровадження біости- муляторів росту рослин для допосівної оброб- ки насіння» 1995 р.; «Про організацію науково- виробничої перевірки та впровадження нових біостимуляторів росту рослин на посівах сі- льськогосподар ських культур» 1995 р.; «Про державну підтримку міжнародного співробіт- ництва в галузі ви соких і критичних техноло- гій» 1997 р.; «Про впровадження нових регу- ляторів росту рослин» 1999р. та інші норма- тивні документи. Але історично так мало ста- тися, що саме в Україні на протязі останніх 20 років, з моменту створення Інституту біоорга- нічної хімії та нафтохімії НАНУ, було створе- но 15 регуляторів росту рослин. Саме стільки препаратів та 27 препарати вних форм зареє- стровано в Україні Міністерством екобезпеки та охорони навколишнього се редовища. На переданих Президією НАНУ виробничих площах Інституту біоорганічної хімії та наф- 72 ISSN 1815-2066. Science and Innovation. T. 9, № 5, 2013 Світ інновацій тохімії Державним підприємством «МНТЦ «Агробіотех» створені сучасні біотехнологічні виробництва регуляторів росту рослин, які лі- цензовані Міністерством промислової політи- ки та Мінагрополітики та продовольства Ук- раїни. Більш того, виконуючи завдання за- твердженої Мінпромполітики «Програми роз- витку вітчизняного виробництва за собів за- хисту і регуляторів рослин на 2004—2009 роки, МНТЦ «Агробіотех» створив нові уні кальні регулятори росту рослин «Біолан», «Біосил», «Біомакс», «Радостим». Вже сьогодні створені виробництва спроможні на протязі року забез- печити новітніми регуляторами росту рослин виробників аграрного комплексу на площах понад 1 млн. га. Таблиця 1 Вплив різних норм Калібру* та Біолану на забур'яненість посівів пшениці озимої (сорт Подолянка). Уманський державний університет, 2012 р. Варіант Через місяць після внесення препаратів Кількість бур’янів, шт./м2 Зниження забур’яненості, % Маса бур’янів, г/м2 Зниження забур’яненості, % Без препаратів (контроль) 34,1 0 50,7 0 Біолан 10 мл/га 20,7 39,3 35,2 30,6 Калібр 45 г/га 16,5 51,5 21,7 57,2 Калібр 60 г/га 14,8 56,6 19,3 61,9 Калібр 75 г/га 14,0 58,9 18,9 62,7 Калібр 45 г/га* Біолан 10 мл/га 12,9 62,2 19,6 61,3 Калібр 60 г/га* Біолан 10 мл/га 11,5 66,3 16,3 67,9 Калібр 75 г/га* Біолан 10 мл/га 10,4 69,5 15,1 70,2 Примітка. * — гербіцид, виробник Дюпон Інтернешенел, Швейцарія. Таблиця 2 Ефективність біостимуляторів у порівнянні з традиційними хімічними препаратами — протруйниками насіння проти нематоди пшеничної, жужелиці, озимої совки, злакових мух (2011 р.) Варіант Норма витрат, л/т Нематода пшенична Жужелиця Совка озима Мухи злакові 1 2 1 2 1 2 1 2 Контроль 42,5 36,6 15,2 39,4 Стимпо 0,025 22,5 47 14,6 60 9,9 35 17,1 57 Регоплант 0,25 5,4 87 6,8 81 5,9 61 10,1 74 Юнта Кваттро* 0,15 3,5 92 0,1 100 0 100 2,1 95 Селест Топ** 0,2 4,1 90 1,9 95 0 100 2,8 93 Імідаклоприд 1,0 17,9 58 1,1 97 0,6 96 2,1 95 НСР05 1,1 0,9 0,8 2,3 Примітка. * — фунгіцид фірми «Bayer Crop Science»; ** — інсектицид фірми «Syngenta»; 1 — кількість пошкоджених проростків; 2 — біологічна ефективність, % 73ISSN 1815-2066. Наука та інновації. T. 9, № 5, 2013 Світ інновацій Ще в наказі МінАПК і УААН 1999 року № 330/113 від 18.10.1999р. «Про провадження но вих регуляторів росту рослин» було наголо- шено, що зазначений агроприйом є найбільш ефек тивним, і дає можливість виробникам до- датково отримати 15—20 % продукції рослин- ництва з покращенням якості, особливо за умов застосування недостатньої кількості еле- ментів живлення. Під керівництвом проф. Грицаєнко З.М. в Ума- нському державному аграрному університеті протягом 12 років виконувалися дослідження по темі «Розробка новітніх технологій вироб- ництва еколо гічної продукції з мінімальним пестицидним навантаженням у сівозмінах». Бу ла показана екологі чна та економічна ефек- тивність спільного використання регуляторів росту рослин з сучасни ми гербіцидами при зменшені на 20—25 % норм використання ос- танніх (табл. 1). За останні роки вчені Одеського селекційно- генетичного інституту НААНУ перевірили ство- рені регулятори ро сту в технологіях вирощу- вання високопродуктивних сортів зернових ку- Таблиця 3 Ефективність біостимуляторів у порівнянні з іншими препаратами — протруйниками насіння проти збудників гнилі і цвілі сої (2011 р.) Варіант Норма витрат, л/т Fusarium sp. Botrytis cynerya Alternaria sp. Комплекс грибів зберігання*** 1 2 1 2 1 2 1 2 Контроль 43,6 29,3 9,7 32,4 Стимпо 0,025 12,8 71 8,1 72 1,1 89 8,9 73 Регоплант 0,25 1,8 96 0,6 98 0,5 95 4,5 86 Ламардор* 0,2 1,5 97 0 100 0 100 0 100 Юнта—Кваттро** 1,5 0 100 0 100 0 100 0 100 НСР 0,8 0,7 0,6 1,4 Примітка. * — фунгіцид фірми «Bayer Crop Science»; ** — Юнта-Кваттро — фунгіцид фірми «Bayer Crop Science»; *** — гриби Mucor spp., Rhizopus spp., Aspergillus spp., Penicillum spp., Tricholhecium roseum; 1 — кількість інфікованих зер- нівок, %; 2 — біологічна ефективність, %. Таблиця 4 Ефективність біостимуляторів у порівнянні з іншими препаратами — протруйниками насіння проти збудників гнилі і цвілі кукурудзи (2011 р.) Варіант Норма витрат, л/т Fusarium sp. Alternaria sp. Nigrospora sp. Комплекс грибів зберігання*** 1 2 1 2 1 2 1 2 Контроль 21,8 12,9 11,7 65,4 Стимпо 0,025 10,3 53 2,6 80 4,6 6,1 27,1 59 Регоплант 0,25 9,1 28 0,7 95 0,6 95 13,6 79 Ламардор* 0,2 1,5 97 0 100 0 100 0 100 Юнта—Кваттро** 1,5 0 100 0 100 0 100 0 100 НСР 0,5 0,8 0,6 3,1 Примітка. * — фунгіцид фірми «Bayer Crop Science»; ** — фунгіцид фірми «Bayer Crop Science»; *** — гриби Mucor spp., Rhizopus spp., Aspergillus spp., Penicillum spp., Tricholhecium roseum; 1 — кількість інфікованих зернівок, %; 2 — біологічна ефективність, %. 74 ISSN 1815-2066. Science and Innovation. T. 9, № 5, 2013 Світ інновацій льтур і показали доці льність використання бі- остимуляторів в захисно-стиму люю чих ком- позиціях з сучасними пес тицидами при об робці насіння і обприскуванні посівів, особливо на інфікованих полях (табл. 2, 3, 4). Особливого значення набувають регулято- ри росту рослин при допосівній обробці насін- ня. Якість зерна, адаптація його до конкретних ґрунтових зон та конкретних полів, зняття фі- тотоксичної дії протруйників, підсилення енер- гії проростання та польової схожості насіння роблять цей агрозахід економічно ефективним та екологічно доцільним. Наразі після проведених випробувань згідно з діючими законодавствами ряду країн препарати Державно го підприємства «МНТЦ "Аг робіотех" зареєст ровані в Республіці Бєларусь, Російській Федерації, Казахстані, Німеччині та Китаї. Безумовно, великого значення для продо- вольчої безпеки держави набувають нові регу- лятори росту рослин Regoplant® і Stimpo® із біозахисним ефектом (табл. 5). Окрім показників ефективності на 10 млн. га застосування, наданих у таблиці, ці високі технології дають можливість на 25—30 % змен- шити норми застосування добрив та пестици- дів без зменшення обсягів сільськогосподар- ського виробництва та з покращенням якості вирощеної продукції рослинництва, збережен- ням генетичного потенціалу насіння і значної економії коштів (десятки млн. дол. США на рік) на закупівлю закордонних пестицидів і підви- Таблиця 5 Техніко-економічне обґрунтування застосування біостимуляторів росту рослин на орієнтовних площах посіву зернових с/г культур( 2013—2015 рр.) Показники Усього за 3 роки У тому числі 2013р. 2014р. 2015 р. Площі посівів зернових с/г культур, млн. га Всього 14,6 14,6 14,6 в тому числі із застосуванням біостимуляторів росту рослин, млн. га 0,3 3,0 10,0 у відсотках до загальної площі посівів, % 2,1 20,5 68,5 Потреба біостимуляторів росту рослин (50 мл/га), тис. л 665 15 150 500 на суму, млн. дол. США. 66,5 1,5 15,0 50,0 Гарантована ефективність застосування біостимуляторів росту рос- лин (прибавка врожаю), тис. т 6650 150 1500 5000 Економічний ефект, млн. дол. США 1703,5 41,25 412,5 1250,0 Очікуване надходження коштів до бюджету (ПДВ 20 %) від реаліза- ції додатково отриманого зерна озимої пшениці за рахунок застосу- вання біостимуляторів, млн. грн. 340,75 8,25 82,5 250,0 Прибуток (економічний ефект мінус витрати на біостимулятори та відрахування до бюджету (ПДВ), млн. грн. 1296,5 31,5 315,0 950,0 Поставка на експорт тис. л 50,0 200,0 млн. дол. США 5,0 20,0 Рис. 1. Парадокси сьогодення 75ISSN 1815-2066. Наука та інновації. T. 9, № 5, 2013 Світ інновацій щення експортного потенціалу як продукції рослинництва, так і високих технологій, які стають реальною статтею експорту. Сьогод ні експортний потенціал розробок ДП МНТЦ «Агробіотех» у Німеччину, Китай, Росію, Бє- ларусь, Казахстан складає 39 % і забезпечує близько 1 млн. гектарів посівів ряду основних сільськогосподарських культур. Протягом останніх років нами було прове- дено значний об’єм робіт по відпрацюванню біотехнології виробництва у біореакторах, а від 16.11.2012 р. відпрацьовано процес промисло- вого виробництва полікомпонентних регуля- торів росту рослин з біозахисним ефектом на реконструйованому біотехнологічному під при- ємстві «Біоветфарм» (Новоград-Волинсь кий). Потужності біотехнологічного виробництва ДП «МНТЦ «Агробіотех» та «Біоветфарм» доз воляють виробляти щомісяця 100 т сучас- них біологічних регуляторів росту рослин з біозахисним ефектом, тобто забезпечувати 10 млн. га/рік посівів основних сільськогоспо- дарських культур. ВИСНОВКИ Здобутки українських вчених по створенню сучасних біотехнологічних регуляторів росту рослин опубліковані у 7 монографіях, 317 пу- блікаціях, 89 патентах і отримали визнання в ряді країн світу. Але найголовнішим є те, що створені в Україні технології затребувані та мають попит в багатьох країнах світу (100 тис. упаковок емістиму С — біостимулятора росту рослин природного походження — поставлено з України в Китай в 2013 році). Якщо «глобалізований» бізнес формується в країнах багатих, а чисельність населення швид- ко росте в бідних, то виникає питання: чи мо- жуть люди врівноважити цю загрозливу невід- повідність? Чи можна, принаймні, завдяки но- вим винаходам, вирішити проблеми голоду? Отже, що ми маємо на сьогодні і що необхід- но зробити на майбутнє (рис. 1—3). Колектив державного підприємства «Міжві- домчий науково-технологічний центр "Агро- біо тех"» НАН і МОН України, об’єднавши зу- силля фахівців наукових установ України та ряду інших країн, створив 15 найменувань ук- раїнських регуляторів росту рослин, визнаних в Україні, Росії, Бєларусі, Казахстані, Німеччині Рис. 3. Зелена революція Рис. 2. Майбутні перспективи 76 ISSN 1815-2066. Science and Innovation. T. 9, № 5, 2013 Світ інновацій та Китаї. На черзі Канада, де завершується реєстрація і підписана угода на поставку висо- ких технологій на американський континент. ЛІТЕРАТУРА 1. Elbashir S.M., Lendeckel W., Tuscht Т. RNA in terference is mediated by 21- and 22-nucleotide RNAs // Genes Dev. — 2001. — Vol. 15. — P. 188 —200. 2. Hamilton A., Voinnet O., Chappell L. et al. Two classes of short interfering RNA in RNA silencing // TheEMBO Journal. — 2002. — Vol. 21, № 17. — P. 4671—4679. 3. Lee V., Ahn С, Han J. et al. The nuclear RNase III Drosha initiates microRNA processing // Nature. — 2003. — Vol. 425. — P. 415—419. 4. Mourelatos Z., Dostie J., Paushkin S. et al. MiRNPs: a novel class of ribonucleoproteins con taining numerous microRNAs // Genes Dev. — 2002. — Vol. 16. — P. 720— 728. 5. Leung R.K.M., Whittaker P.A. RNA interference: from gene silencing to gene-specific therapeu tics // Pharma- cology and Therapeutics. — 2005. — № 107. — P. 222— 239. 6. Aravin A., Tuscht Т. Identification and character ization of small RNAs involved in RNA silencing // FEBS Letters. — 2005. — V. 579. — P. 5830—5840. 7. Fuller V.L., Lilley C.J., Urwin P.E. Nematode re sistance // New Phytologist. — 2008. — Vol. 180. — P. 27—44. 8. Bakhetia M., Charlton W.L., Urwin P.E. et al. RNA in- terference and plant parasitic nematodes // Trends in Plant Science. — 2005. — Vol.10, № 8. — P. 362—367. 9. Gheysen G., Vanholme B. RNAi from plants to nematodes // Trends in Biotechnology. — 2006. — Vol. 25, № 3. — P. 89—92. 10. Knox D.P., Geldhof P., Visser A., Britton C. RNA in ter fe- rence in parasitic nematodes of animals: a reality check? // Trends in Parasitology. — 2007. — Vol. 23, № 3. — P. 105— 107. 11. Jian X., Zhang L, Li G. et al. Identification of novel stress- regulated microRNAs from Oryza sativa L. // Genomics. — 2010. — Vol. 95. — P. 47—55. 12. Chen Ft., Hu Z., Zhang H. Identification of MicroR NAs in Wild Soybean (Glycine soja) // J. of Inte grative Plant Biology. — 2009. — Vol. 51, № 12. — P. 1071—1079. 13. Park W., Song R., Messing J., Chen X. CAR PEL FAC TO- RY a Dicer Homolog, and HEN1, a Novel Pro tein, Act in microRNA Metabolism in Arabidopsis thaliana in du- ced silencing complex (RISC), which targets homo lo- gous RNAs for deg radation // Current Biology. — 2002. — Vol. 12. — P. 1484—1495. 14. Llave С., Kasschau K.D., Rector M.A., Carring-ton J.C. Endogenous and Silencing-Associat-ed Small RNAs in Plants // Plant Cell. — 2002. — Vol. 14. — P. 1605—1619. 15. Lu C., Meyers B.C., Green P.G. Construction of small RNA cDNA libraries for deep sequencing // Methods. — 2007. — Vol. 43. — P. 110—117. 16. Yang T., Xue L., An L. Functional diversity of miR-NA in plants // Plant Science. — 2007. — Vol. 172. — P. 423—432. 17. Пономаренко С.П., Терек О.М., Грицаенко З.М. и др. Биорегуляция роста и развития рас тений // «Био ре- гу ляция микробно-растительных систем» / Под. ред. Иу тинской Г.А. и Пономаренко С. П. — Гл. 4. — К.: Нічлава, 2010. — 464 с. 18. Tsygankova V.A., Galkin А.Р., Galklna L.O. et al. Gene expression under regulators’ stimulation of plant growth and development // «New plant growth regulators: ba- sic research and technologies of application / Ed. S.P. Po- nomarenko, H.O. Іutynska. — Ch. 3. — Kyiv: Nichlava, 2011. — 211 p. 19. Циганкова B.A., Андрусевич Я.В., Блюм Я.Б. Виділення з клітин рослин малих регуляторних si/ miRNA з ан- тинематодною активністю // ДАН України. — 2011. — № 9. — С. 159—164. 20. Elbashir S.M., Lendeckel W., Tuscht Т. RNA interference is mediated by 21 — and 22-nucleotide RNAs // Genes and Development. — 2001. — Vol. 15. — P. 188—200. 21. Hamilton A., Voinnet O., Chappell L., Baulcombe D. Two classes of short interfering RNA in RNA silencing // EMBO Journal. — 2002. — Vol. 21, № 17. — P. 4671— 4679. 22. Lee Y., Ahn C., Han J. et al. The nuclear RNase III Drosha initiates microRNA processing // Nature. — 2003. — Vol. 425. — P. 415—419. 23. Mourelatos Z., Dostie J., Paushkin S. et al. MiRNPs: a no- vel class of ribonucleoproteins containing numerous mic- roRNAs // Genes Dev. — 2002. — Vol. 16. — P. 720—728. 24. Leung R.К.M., Whittaker P.A. RNA interference: from gene silencing to gene-specific therapeutics // Phar ma- col. Therapeutics. — 2005. — № 107. — P. 222—239. 25. Aravin A., Tuschl T. Identification and characterization of small RNAs involved in RNA silencing // FEBS Letters. — 2005. — Vol. 579. — P. 5830—5840. 77ISSN 1815-2066. Наука та інновації. T. 9, № 5, 2013 Світ інновацій С.П. Пономаренко, В.А. Циганкова, Я.Б. Блюм, А.П. Галкин НОВОЕ НАПРАВЛЕНИЕ В РАСТЕНИЕВОДСТВЕ — ПРИМЕНЕНИЕ ПРИРОДНЫХ ПОЛИКОМПОНЕНТНЫХ РЕГУЛЯТОРОВ РОСТА РАСТЕНИЙ С БИОЗАЩИТНЫМ ЭФФЕКТОМ С использованием метода дот-блот точечной гибри- дизации обнаружено разницу ступеней гомологии меж- ду mRNA контрольных растений и малыми регулятор- ными si/mi RNA, выделенными из проростков пшеницы, кукурузы, сои, сахарной свеклы, нута и др. 2-го поколе- ния, полученных из семян растений, инфицированных и обработанных новыми поликомпонентными регулято- рами роста растений Regoplant® и Stimpo® в 1-м поко- лении. Доведено, что эта разница связана с частичным перепрограммированием генома клеток под влиянием биостимуляторов при выращивании растений на инфи- цированных фонах, что оказывается в индукции синтеза низкомолекулярных si/miRNA из антипатогенными и антипаразитарными свойствами, которые являются со- ставляющими иммунной системы живого организма. К л ю ч е в ы е с л о в а: устойчивость растений, иммуни- тет, биостимуляторы роста, si/miRNA. дот-блот-гибри- дизация. S.P. Ponomarenko, V.A. Tsygankova, Ya.B. Blume, A.P. Galkin NEW TREND IN CROP PRODUCTION — APPLICATION OF PLANT NATURAL MULTICOMPONENT GROWTH REGULATORS WITH BIOPROTECTIVE EFFECT With the help of the Dot-blot hybridization the differ- ence in steps of homology between mRNA of control plants and small regulatory si/mi RNA isolated from second-gener- ation plantlets of wheat, corn, soybeans, sugar beets, chick- pea, etc. cultivated from the seeds of plants infected and processed by new polycomponent plant growth regulators Regoplant® and Stimpo® in the first generation was found. It is proved that this difference is related to a partial repro- gramming of the cell genome under the influence of bios- timulators on growing plants with infected backgrounds that turns out in induction of low-molecular si/miRNA with antipathogenic and antiparasitic properties, which are the components of the immune system of a living organism. Key words: plant stability, immunity, growth biosti mu- lators, si/miRNA, Dot-blot hybridization. Стаття надійшла до редакції 01.07.13 << /ASCII85EncodePages false /AllowTransparency false /AutoPositionEPSFiles true /AutoRotatePages /None /Binding /Left /CalGrayProfile (Dot Gain 20%) /CalRGBProfile (sRGB IEC61966-2.1) /CalCMYKProfile (U.S. Web Coated \050SWOP\051 v2) /sRGBProfile (sRGB IEC61966-2.1) /CannotEmbedFontPolicy /Error /CompatibilityLevel 1.4 /CompressObjects /Tags /CompressPages true /ConvertImagesToIndexed true /PassThroughJPEGImages true /CreateJobTicket false /DefaultRenderingIntent /Default /DetectBlends true /DetectCurves 0.0000 /ColorConversionStrategy /CMYK /DoThumbnails false /EmbedAllFonts true /EmbedOpenType false /ParseICCProfilesInComments true /EmbedJobOptions true /DSCReportingLevel 0 /EmitDSCWarnings false /EndPage -1 /ImageMemory 1048576 /LockDistillerParams false /MaxSubsetPct 100 /Optimize true /OPM 1 /ParseDSCComments true /ParseDSCCommentsForDocInfo true /PreserveCopyPage true /PreserveDICMYKValues true /PreserveEPSInfo true /PreserveFlatness true /PreserveHalftoneInfo false /PreserveOPIComments false /PreserveOverprintSettings true /StartPage 1 /SubsetFonts true /TransferFunctionInfo /Apply /UCRandBGInfo /Preserve /UsePrologue false /ColorSettingsFile () /AlwaysEmbed [ true ] /NeverEmbed [ true ] /AntiAliasColorImages false /CropColorImages true /ColorImageMinResolution 300 /ColorImageMinResolutionPolicy /OK /DownsampleColorImages true /ColorImageDownsampleType /Bicubic /ColorImageResolution 1200 /ColorImageDepth -1 /ColorImageMinDownsampleDepth 1 /ColorImageDownsampleThreshold 1.50000 /EncodeColorImages false /ColorImageFilter /DCTEncode /AutoFilterColorImages true /ColorImageAutoFilterStrategy /JPEG /ColorACSImageDict << /QFactor 0.15 /HSamples [1 1 1 1] /VSamples [1 1 1 1] >> /ColorImageDict << /QFactor 0.15 /HSamples [1 1 1 1] /VSamples [1 1 1 1] >> /JPEG2000ColorACSImageDict << /TileWidth 256 /TileHeight 256 /Quality 30 >> /JPEG2000ColorImageDict << /TileWidth 256 /TileHeight 256 /Quality 30 >> /AntiAliasGrayImages false /CropGrayImages true /GrayImageMinResolution 300 /GrayImageMinResolutionPolicy /OK /DownsampleGrayImages true /GrayImageDownsampleType /Bicubic /GrayImageResolution 1200 /GrayImageDepth -1 /GrayImageMinDownsampleDepth 2 /GrayImageDownsampleThreshold 1.50000 /EncodeGrayImages false /GrayImageFilter /DCTEncode /AutoFilterGrayImages true /GrayImageAutoFilterStrategy /JPEG /GrayACSImageDict << /QFactor 0.15 /HSamples [1 1 1 1] /VSamples [1 1 1 1] >> /GrayImageDict << /QFactor 0.15 /HSamples [1 1 1 1] /VSamples [1 1 1 1] >> /JPEG2000GrayACSImageDict << /TileWidth 256 /TileHeight 256 /Quality 30 >> /JPEG2000GrayImageDict << /TileWidth 256 /TileHeight 256 /Quality 30 >> /AntiAliasMonoImages false /CropMonoImages true /MonoImageMinResolution 1200 /MonoImageMinResolutionPolicy /OK /DownsampleMonoImages true /MonoImageDownsampleType /Bicubic /MonoImageResolution 1200 /MonoImageDepth -1 /MonoImageDownsampleThreshold 1.50000 /EncodeMonoImages false /MonoImageFilter /CCITTFaxEncode /MonoImageDict << /K -1 >> /AllowPSXObjects false /CheckCompliance [ /None ] /PDFX1aCheck false /PDFX3Check false /PDFXCompliantPDFOnly false /PDFXNoTrimBoxError true /PDFXTrimBoxToMediaBoxOffset [ 0.00000 0.00000 0.00000 0.00000 ] /PDFXSetBleedBoxToMediaBox true /PDFXBleedBoxToTrimBoxOffset [ 0.00000 0.00000 0.00000 0.00000 ] /PDFXOutputIntentProfile (None) /PDFXOutputConditionIdentifier () /PDFXOutputCondition () /PDFXRegistryName () /PDFXTrapped /False /CreateJDFFile false /Description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> /CHS <FEFF4f7f75288fd94e9b8bbe5b9a521b5efa7684002000410064006f006200650020005000440046002065876863900275284e8e9ad88d2891cf76845370524d53705237300260a853ef4ee54f7f75280020004100630072006f0062006100740020548c002000410064006f00620065002000520065006100640065007200200035002e003000204ee553ca66f49ad87248672c676562535f00521b5efa768400200050004400460020658768633002> /CHT <FEFF4f7f752890194e9b8a2d7f6e5efa7acb7684002000410064006f006200650020005000440046002065874ef69069752865bc9ad854c18cea76845370524d5370523786557406300260a853ef4ee54f7f75280020004100630072006f0062006100740020548c002000410064006f00620065002000520065006100640065007200200035002e003000204ee553ca66f49ad87248672c4f86958b555f5df25efa7acb76840020005000440046002065874ef63002> /CZE <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> /DAN <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> /DEU <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> /ESP <FEFF005500740069006c0069006300650020006500730074006100200063006f006e0066006900670075007200610063006900f3006e0020007000610072006100200063007200650061007200200064006f00630075006d0065006e0074006f00730020005000440046002000640065002000410064006f0062006500200061006400650063007500610064006f00730020007000610072006100200069006d0070007200650073006900f3006e0020007000720065002d0065006400690074006f007200690061006c00200064006500200061006c00740061002000630061006c0069006400610064002e002000530065002000700075006500640065006e00200061006200720069007200200064006f00630075006d0065006e0074006f00730020005000440046002000630072006500610064006f007300200063006f006e0020004100630072006f006200610074002c002000410064006f00620065002000520065006100640065007200200035002e003000200079002000760065007200730069006f006e0065007300200070006f00730074006500720069006f007200650073002e> /ETI <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> /FRA <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> /GRE <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a stvaranje Adobe PDF dokumenata najpogodnijih za visokokvalitetni ispis prije tiskanja koristite ove postavke. Stvoreni PDF dokumenti mogu se otvoriti Acrobat i Adobe Reader 5.0 i kasnijim verzijama.) /HUN <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> /ITA <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> /JPN <FEFF9ad854c18cea306a30d730ea30d730ec30b951fa529b7528002000410064006f0062006500200050004400460020658766f8306e4f5c6210306b4f7f75283057307e305930023053306e8a2d5b9a30674f5c62103055308c305f0020005000440046002030d530a130a430eb306f3001004100630072006f0062006100740020304a30883073002000410064006f00620065002000520065006100640065007200200035002e003000204ee5964d3067958b304f30533068304c3067304d307e305930023053306e8a2d5b9a306b306f30d530a930f330c8306e57cb30818fbc307f304c5fc59808306730593002> /KOR <FEFFc7740020c124c815c7440020c0acc6a9d558c5ec0020ace0d488c9c80020c2dcd5d80020c778c1c4c5d00020ac00c7a50020c801d569d55c002000410064006f0062006500200050004400460020bb38c11cb97c0020c791c131d569b2c8b2e4002e0020c774b807ac8c0020c791c131b41c00200050004400460020bb38c11cb2940020004100630072006f0062006100740020bc0f002000410064006f00620065002000520065006100640065007200200035002e00300020c774c0c1c5d0c11c0020c5f40020c2180020c788c2b5b2c8b2e4002e> /LTH <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> /LVI <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> /NLD (Gebruik deze instellingen om Adobe PDF-documenten te maken die zijn geoptimaliseerd voor prepress-afdrukken van hoge kwaliteit. De gemaakte PDF-documenten kunnen worden geopend met Acrobat en Adobe Reader 5.0 en hoger.) /NOR <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> /POL <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> /PTB <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> /RUM <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> /RUS <FEFF04180441043f043e043b044c04370443043904420435002004340430043d043d044b04350020043d0430044104420440043e0439043a043800200434043b044f00200441043e043704340430043d0438044f00200434043e043a0443043c0435043d0442043e0432002000410064006f006200650020005000440046002c0020043c0430043a04410438043c0430043b044c043d043e0020043f043e04340445043e0434044f04490438044500200434043b044f00200432044b0441043e043a043e043a0430044704350441044204320435043d043d043e0433043e00200434043e043f0435044704300442043d043e0433043e00200432044b0432043e04340430002e002000200421043e043704340430043d043d044b04350020005000440046002d0434043e043a0443043c0435043d0442044b0020043c043e0436043d043e0020043e0442043a0440044b043204300442044c002004410020043f043e043c043e0449044c044e0020004100630072006f00620061007400200438002000410064006f00620065002000520065006100640065007200200035002e00300020043800200431043e043b043504350020043f043e04370434043d043804450020043204350440044104380439002e> /SKY <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> /SLV <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> /SUO <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> /SVE <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> /TUR <FEFF005900fc006b00730065006b0020006b0061006c006900740065006c0069002000f6006e002000790061007a006401310072006d00610020006200610073006b013100730131006e006100200065006e0020006900790069002000750079006100620069006c006500630065006b002000410064006f006200650020005000440046002000620065006c00670065006c0065007200690020006f006c0075015f007400750072006d0061006b0020006900e70069006e00200062007500200061007900610072006c0061007201310020006b0075006c006c0061006e0131006e002e00200020004f006c0075015f0074007500720075006c0061006e0020005000440046002000620065006c00670065006c0065007200690020004100630072006f006200610074002000760065002000410064006f00620065002000520065006100640065007200200035002e003000200076006500200073006f006e0072006100730131006e00640061006b00690020007300fc007200fc006d006c00650072006c00650020006100e70131006c006100620069006c00690072002e> /ENU (Use these settings to create Adobe PDF documents best suited for high-quality prepress printing. Created PDF documents can be opened with Acrobat and Adobe Reader 5.0 and later.) /UKR <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> >> /Namespace [ (Adobe) (Common) (1.0) ] /OtherNamespaces [ << /AsReaderSpreads false /CropImagesToFrames true /ErrorControl /WarnAndContinue /FlattenerIgnoreSpreadOverrides false /IncludeGuidesGrids false /IncludeNonPrinting false /IncludeSlug false /Namespace [ (Adobe) (InDesign) (4.0) ] /OmitPlacedBitmaps false /OmitPlacedEPS false /OmitPlacedPDF false /SimulateOverprint /Legacy >> << /AddBleedMarks false /AddColorBars false /AddCropMarks false /AddPageInfo false /AddRegMarks false /ConvertColors /ConvertToCMYK /DestinationProfileName () /DestinationProfileSelector /DocumentCMYK /Downsample16BitImages true /FlattenerPreset << /PresetSelector /MediumResolution >> /FormElements false /GenerateStructure false /IncludeBookmarks false /IncludeHyperlinks false /IncludeInteractive false /IncludeLayers false /IncludeProfiles false /MultimediaHandling /UseObjectSettings /Namespace [ (Adobe) (CreativeSuite) (2.0) ] /PDFXOutputIntentProfileSelector /DocumentCMYK /PreserveEditing true /UntaggedCMYKHandling /LeaveUntagged /UntaggedRGBHandling /UseDocumentProfile /UseDocumentBleed false >> ] >> setdistillerparams << /HWResolution [2400 2400] /PageSize [612.000 792.000] >> setpagedevice