Новые термофильные люминесцентные бактерии, выделенные из Азовского моря
З метою пошуку нових перспективних тест-штамів для біолюмінесцентного аналізу проведено виділення світних бактерій в акваторії Азовського моря на території Криму. Виділено 6 штамів, що володіють яскравою біолюмінесценцією, які були ідентифіковані, як Photobacterium leiognathi. Для первинної ідент...
Збережено в:
| Опубліковано в: : | Таврический медико-биологический вестник |
|---|---|
| Дата: | 2014 |
| Автор: | |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Russian |
| Опубліковано: |
Кримський науковий центр НАН України і МОН України
2014
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/115618 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Новые термофильные люминесцентные бактерии, выделенные из Азовского моря / А.М. Кацев // Таврический медико-биологический вестник. — 2014. — Т. 17, № 2 (66). — С. 59-64. — Бібліогр.: 6 назв. — рос. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-115618 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Кацев, А.М. 2017-04-08T10:10:38Z 2017-04-08T10:10:38Z 2014 Новые термофильные люминесцентные бактерии, выделенные из Азовского моря / А.М. Кацев // Таврический медико-биологический вестник. — 2014. — Т. 17, № 2 (66). — С. 59-64. — Бібліогр.: 6 назв. — рос. 2070-8092 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/115618 573.6:579.22:579.26:579.843 З метою пошуку нових перспективних тест-штамів для біолюмінесцентного аналізу проведено виділення світних бактерій в акваторії Азовського моря на території Криму. Виділено 6 штамів, що володіють яскравою біолюмінесценцією, які були ідентифіковані, як Photobacterium leiognathi. Для первинної ідентифікації вивчали тип люциферазної кінетики, ферментацію різних джерел вуглецю, температурні інтервали зростання і біолюмінесценції. Додатково проводили фенотипування бактерій за допомогою системи ідентифікації мікроорганізмів Biolog. При цьому було виявлено, що усі виділені штами утворюють окремий кластер, близький до P. leiognathi, але, проте, що відрізняється від усіх відомих видів. Отримані результати можуть свідчити про приналежність бактерій до нового виду, або про ширшу варіабельність властивостей P. leiognathi. Висока термофільність і знижена галофільність виділених штамів робить їх перспективними тест-об’єктами для біотестування у фізіологічних умовах. We extracted luminous bacteria from the Crimean water area of the Azov Seato find new perspective test-strains for bioluminescent analysis. We have found six strains possessing bright bioluminescence; they areidentifiedasPhotobacterium leiognathi. Luciferase kinetics type as well as different carbon-containing substrates fermentationand temperature optimum intervals of growth and bioluminescence have been studied for primary identification. We have phenotyped the extracted strains using theBiologsystemfor identificationof microorganisms. We have established that the strains form a separate cluster close to P. leiognathiyet different from all the known species. Based on the obtained results, we can suggest that either the studied strains belong to new bacterial species or P. leiognathi speciespossessa widervariability. High thermophilicity and a low level of halophilic properties of these bacteria make them perspective test objects for biotesting under physiological conditions. ru Кримський науковий центр НАН України і МОН України Таврический медико-биологический вестник Оригинальные статьи Новые термофильные люминесцентные бактерии, выделенные из Азовского моря Нові термофільні люмінесцентні бактерії, виділені з Азовського моря New thermophilic luminescent bacteriaextracted from the Azov Sea Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Новые термофильные люминесцентные бактерии, выделенные из Азовского моря |
| spellingShingle |
Новые термофильные люминесцентные бактерии, выделенные из Азовского моря Кацев, А.М. Оригинальные статьи |
| title_short |
Новые термофильные люминесцентные бактерии, выделенные из Азовского моря |
| title_full |
Новые термофильные люминесцентные бактерии, выделенные из Азовского моря |
| title_fullStr |
Новые термофильные люминесцентные бактерии, выделенные из Азовского моря |
| title_full_unstemmed |
Новые термофильные люминесцентные бактерии, выделенные из Азовского моря |
| title_sort |
новые термофильные люминесцентные бактерии, выделенные из азовского моря |
| author |
Кацев, А.М. |
| author_facet |
Кацев, А.М. |
| topic |
Оригинальные статьи |
| topic_facet |
Оригинальные статьи |
| publishDate |
2014 |
| language |
Russian |
| container_title |
Таврический медико-биологический вестник |
| publisher |
Кримський науковий центр НАН України і МОН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Нові термофільні люмінесцентні бактерії, виділені з Азовського моря New thermophilic luminescent bacteriaextracted from the Azov Sea |
| description |
З метою пошуку нових перспективних тест-штамів для біолюмінесцентного аналізу проведено
виділення світних бактерій в акваторії Азовського моря на території Криму. Виділено 6 штамів, що володіють
яскравою біолюмінесценцією, які були ідентифіковані, як Photobacterium leiognathi. Для первинної
ідентифікації вивчали тип люциферазної кінетики, ферментацію різних джерел вуглецю, температурні
інтервали зростання і біолюмінесценції. Додатково проводили фенотипування бактерій за допомогою
системи ідентифікації мікроорганізмів Biolog. При цьому було виявлено, що усі виділені штами утворюють
окремий кластер, близький до P. leiognathi, але, проте, що відрізняється від усіх відомих видів. Отримані
результати можуть свідчити про приналежність бактерій до нового виду, або про ширшу варіабельність
властивостей P. leiognathi. Висока термофільність і знижена галофільність виділених штамів робить їх
перспективними тест-об’єктами для біотестування у фізіологічних умовах.
We extracted luminous bacteria from the Crimean water area of the Azov Seato find new perspective
test-strains for bioluminescent analysis. We have found six strains possessing bright bioluminescence; they
areidentifiedasPhotobacterium leiognathi. Luciferase kinetics type as well as different carbon-containing
substrates fermentationand temperature optimum intervals of growth and bioluminescence have been studied
for primary identification. We have phenotyped the extracted strains using theBiologsystemfor identificationof
microorganisms. We have established that the strains form a separate cluster close to P. leiognathiyet different
from all the known species. Based on the obtained results, we can suggest that either the studied strains
belong to new bacterial species or P. leiognathi speciespossessa widervariability. High thermophilicity and a
low level of halophilic properties of these bacteria make them perspective test objects for biotesting under
physiological conditions.
|
| issn |
2070-8092 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/115618 |
| citation_txt |
Новые термофильные люминесцентные бактерии, выделенные из Азовского моря / А.М. Кацев // Таврический медико-биологический вестник. — 2014. — Т. 17, № 2 (66). — С. 59-64. — Бібліогр.: 6 назв. — рос. |
| work_keys_str_mv |
AT kacevam novyetermofilʹnyelûminescentnyebakteriivydelennyeizazovskogomorâ AT kacevam novítermofílʹnílûmínescentníbakteríívidílenízazovsʹkogomorâ AT kacevam newthermophilicluminescentbacteriaextractedfromtheazovsea |
| first_indexed |
2025-11-26T06:22:49Z |
| last_indexed |
2025-11-26T06:22:49Z |
| _version_ |
1850615271703707648 |
| fulltext |
59
О Р И Г И Н А Л Ь Н Ы Е С Т А Т Ь И
УДК 573.6:579.22:579.26:579.843
© А.М. Кацев, 2014.
НОВЫЕ ТЕРМОФИЛЬНЫЕ ЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЕ
БАКТЕРИИ, ВЫДЕЛЕННЫЕ ИЗ АЗОВСКОГО МОРЯ
А.М. Кацев
Кафедра общей химии (зав. кафедрой– доц. А.М. Кацев), Государственное у чреждение «Крымский государственный
медицинский университет имени С. И. Георгиевского», г. Симферополь, бул. Ленина 5/7.
NEW THERMOPHILIC LUMINESCENT BACTERIAEXTRACTED FROM THE AZOV SEA
А. М. Каtsev
SUMMARY
We extracted luminous bacteria from the Crimean water area of the Azov Seato find new perspective
test-strains for bioluminescent analysis. We have found six strains possessing bright bioluminescence; they
areidentifiedasPhotobacterium leiognathi. Luciferase kinetics type as well as different carbon-containing
substrates fermentationand temperature optimum intervals of growth and bioluminescence have been studied
for primary identification. We have phenotyped the extracted strains using theBiologsystemfor identificationof
microorganisms. We have established that the strains form a separate cluster close to P. leiognathiyet different
from all the known species. Based on the obtained results, we can suggest that either the studied strains
belong to new bacterial species or P. leiognathi speciespossessa widervariability. High thermophilicity and a
low level of halophilic properties of these bacteria make them perspective test objects for biotesting under
physiological conditions.
НОВІ ТЕРМОФІЛЬНІ ЛЮМІНЕСЦЕНТНІ БАКТЕРІЇ, ВИДІЛЕНІ З АЗОВСЬКОГО МОРЯ
А.М. Кацев
РЕЗЮМЕ
З метою пошуку нових перспективних тест-штамів для біолюмінесцентного аналізу проведено
виділення світних бактерій в акваторії Азовського моря на території Криму. Виділено 6 штамів, що володіють
яскравою біолюмінесценцією, які були ідентифіковані, як Photobacterium leiognathi. Для первинної
ідентифікації вивчали тип люциферазної кінетики, ферментацію різних джерел вуглецю, температурні
інтервали зростання і біолюмінесценції. Додатково проводили фенотипування бактерій за допомогою
системи ідентифікації мікроорганізмів Biolog. При цьому було виявлено, що усі виділені штами утворюють
окремий кластер, близький до P. leiognathi, але, проте, що відрізняється від усіх відомих видів. Отримані
результати можуть свідчити про приналежність бактерій до нового виду, або про ширшу варіабельність
властивостей P. leiognathi. Висока термофільність і знижена галофільність виділених штамів робить їх
перспективними тест-об’єктами для біотестування у фізіологічних умовах.
Ключевые слова: люминесцентные бактерии, фенотипирование, биотестирование.
Бактериальный биолюминесцентный анализ
широко используется во всем мире для быстрой
оценки биотоксичности,как водных сред, так и ге-
терогенных систем, содержащих твердые части-
цы[1]. В большинстве коммерчески доступных тест-
систем, таких какMicrotox», «LUMIStox» «BioTox»,
используется один штамм светящихся бактерий
Vibrio fischeri NRRL B-11177. Однако эти тесты об-
ладают неодинаковой чувствительностью к токси-
ческим веществам различных классов и их методи-
ку невозможно адаптировать к конкретным образ-
цам, что ограничивает возможности биотестирова-
ния [2]. В результате этого в международный стан-
дарт ISO(ISO №11348) вошли две методики, кото-
рые включают в себя использование как лиофильно
высушенной культуры светящихся бактерий Vibrio
fischeri NRRL B-11177 (аналогично «Microtox»), так
и бактерий, культивируемых в лабораторных усло-
виях. Практическим воплощением дальнейшего со-
вершенствования методик биолюминесцентного
тестирования и поисков более чувствительных тест-
штаммов, явился еще одни коммерческий тест
«Checklight», основой которого стали светящиеся
бактерии другого вида Photobacterium leiognathi [3].
В данной работе проведена оценка фенотипичес-
ких особенностей штаммов P. leiognathi,выделенных
из Азовского моря на территории Крыма.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Выделение штаммов светящихся бактерий.
Морская вода для исследований отбиралась в при-
брежных зонах азовского моря, в районе городов
Щелкино иКерчи в летнее время (июль-август). Об-
разцы транспортировали в лабораторию для даль-
нейших исследований, или проводили предваритель-
ные эксперименты непосредственно в полевых ус-
ловиях. 10–50 мл морской воды концентрировали
60
ТА В Р И Ч ЕС К И Й М Е Д И КО - Б И ОЛ О Г И Ч Е С К И Й В Е С Т Н И К2014, том 17, №2 (66)
методом мембранной фильтрациичерез бактериаль-
ный фильтр с размером пор 0,2 мкм (Хийу калур,
эстония). Фильтр помещали на чашку Петри с твер-
дой питательной средой Нimedia laboratories pvt.
Limited (Индия), в которую дополнительно вводили
NaCl до концентрации 3%, и инкубировали при тем-
пературе 20–25 °С. Через 5 часов анализировали
биолюминесценцию образцов визуально в темном
помещении, после адаптации глаз в течение 10 – 20
минут. При обнаружении свечения, отбирали светя-
щиеся зоны стерильной микробиологической пет-
лей и производили выделение и очистку бактерий
по стандартным методикам.
Для выделения светящихся бактерий также ис-
пользовали другие объекты, полученные из морской
среды (моллюски, рыба, водоросли и т.п.). Принцип
работы со всеми образцами был приблизительно
одинаков. Свежевыловленный образец помещали в
контейнер с небольшим количеством 3% хлорида
натрия. Инкубацию проводили при температуре 20–
25 °С, в течение 12 – 24 ч. Через 5 часов после нача-
ла инкубации периодически анализировали объек-
ты в темном помещении после адаптации глаз, с
целью обнаружения свечения. При обнаружении
биолюминесценции, соответствующую зону отби-
рали стерильной микробиологической петлей и про-
водили выделение и очистку бактерий.
Идентификация светящихся бактерий. Иден-
тификацию выделенных штаммов светящихся бак-
терий проводили в соответствии с существующими
рекомендациями по идентификации бактерий семей-
ства Vibrionacea и рекомендациями по быстрой
идентификации фотобактерий [4]. При этом оцени-
вали: морфологические и тинкториальные свойства
бактерий; характеристики их роста и биолюминес-
ценции при различных температурах; ферментацию
сахаров; накопление клетками в-полиоксибутирата.
Изучение люциферазной кинетики проводили с
использованием трёх альдегидов: деканаль (Aldrich,
Germany), додеканаль и тетрадеканаль (Fluka,
Switzerland) и выделенных из биомассы бактерий
ферментных препаратов. Получение препаратов
люциферазы для анализа проводили по методике [5].
Изменения биолюминесценции во времени регист-
рировали с помощью люминометра БЛМ-8801 (Рос-
сия)с самописцем, в системе: 20 мкл препарата лю-
циферазы (разведения подбирались эксперименталь-
но), 20 мкл 0,001 – 0,01% эмульсии альдегида, пос-
ле инициирования реакции 0,5 мл 10-5 моль/л фото-
восстановленного флавинмононуклеотида
(ФМНН2), содержащего 10-3 моль/л Трилона Б. Вос-
становление ФМН проводили в стеклянном змееви-
ке, который освещался лампой дневного света мощ-
ностью 25 Ватт. Критерием восстановления было
исчезновение желтой окраски ФМН. Дозирование
восстановленного ФМНН2 осуществляли с помо-
щью дозатора А-2 (Украина) через иглу непосред-
ственно в кювету люминометра.
Дополнительное фенотипирование бактерий
проводили с использованием 96-луночных планше-
тов Biolog GN Microplate (Biolog, USA). Системаи-
дентификации микроорганизмов Biologвключала в
себя определение способности микроорганизмов
окислять 95 органических субстратов, перечень ко-
торых выбирался исходя из свойств тестируемых
микроорганизмов.Результаты теста Biolog обраба-
тывали с использованием кластерного анализа с
помощью программы Statistiсa (StatSoft, Tulsa, Okla).
Кластеры формировались на основании следующих
признаков: окраска по Граму, морфология, темпе-
ратуры роста (4, 25, 37 и 42 °С), оксидазная и ката-
лазная активности, тип люциферазной кинетики,
результаты окисления субстратов Biolog. Кластеры
анализировали методом Варда (Ward’s method), оп-
ределяя Эвклидовы расстояния. Результаты компь-
ютерной обработки представляли, как вертикальные
древовидные диаграммы, где по оси Y откладывали
Эвклидовы расстояния, а по оси X – сравниваемые
штаммы бактерий. Этот этап работы проводился на
кафедре микробиологии Университета Флориды в
лаборатории профессора Дж. Макемсона (Florida
International University, Miami).
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Проведено выделение светящихся бактерий в
акватории Азовского моря на территории Крыма.
Данная акватория обладает рядом отличительных
черт, которые имеют отношение к объекту исследо-
вания. Азовское море является самым мелким в мире
морем и поэтому обладает низкой тепловой инер-
цией, замерзая в зимний период и нагреваясь до 35°С
и выше, в летний период. Перепады температур при
этом могут достигать 40 и более градусов. Соленость
Азовского моря меньше, чем Черного, и может быть
в пределах 10 - 13 промилей (приблизительно в 3
раза ниже солености океана). Высокие значения тем-
пературы приводят к высокой биологической актив-
ности моря, по которой оно занимает одно из лиди-
рующих мест в мире.
При проведении микробиологических исследо-
ваний на Азовском море в летний период, вода в
прибрежной зоне прогревалась до 30–36°С. При
этом, светящиеся бактерии присутствовали повсе-
местно и выделялись практически из всех исполь-
зуемых источников, включая воду. В ходе работы
было выделено 6 штаммов светящихся бактерий, из
которых 3 – непосредственно из воды (маркировка
W), а остальные из таких представителей фауныА-
зовского моря, как краб (Cr), креветка (Sh) и рыба
(F). Все полученные изоляты были термофильны, а
некоторые продолжали расти при температуре 40°С
и люминесцировали до температуры 36 °С, что мож-
но считать нетипичным признаком для этой группы
бактерий [4].
61
О Р И Г И Н А Л Ь Н Ы Е С Т А Т Ь И
Таблица 1
Свойства выделенных штаммов светящихся бактерий
Сахара
Рост/
люминесценция
Штамм
светящихся
бактерий
4 °С 25°С 30°С 37°С
Пи
гм
ен
т
Ок
си
да
за
Гл
ю
ко
за
М
ан
ни
т
Са
ха
ро
за
Ла
кт
оз
а
М
ал
ьт
оз
а
P. leiognathi W1 -/- +/+ +/+ +/+ - - + - - - -
P. leiognathi W2 -/- +/+ +/+ +/+ - - + - - - -
P. leiognathiW 3 -/- +/+ +/+ +/+ - - + - - - -
P. leiognathi Cr1 -/- +/+ +/+ +/+ - - + - - - -
P. leiognathi
Sh1 -/- +/+ +/+ +/+ - - + - - - -
P. leiognathi F1 -/- +/+ +/+ +/+ - - + - - - -
P. phosphoreum +/+ +/+ -/- -/- - - + - - - +
V. fischeri -/- +/+ +/+ -/- + + + + - - +
V. harveyi -/- +/+ +/+ -/+ - + + + + - +
При первичной идентификации выделенных
штаммов были исследованы температурные опти-
мумы роста и биолюминесценции, пигментация,
люциферазная и оксидазная активности, способ-
ность ферментировать различные сахара, таблица 1
(результаты приведены в сравнении с выделенны-
ми ранее Черноморскими штаммами P. phosphoreum,
V. fischeri и V. harveyi).
Таблица 2
Кинетика люциферазных реакций выделенных штаммов
Время полузатухания
биолюминесценции, сШтамм
Тетрадеканаль Додеканаль Деканаль
Тип
кинетики
P. leiognathi
W1 0,70 1,50 1,50 Быстрый
P. leiognathi
W2 0,55 1,50 1,50 Быстрый
P. leiognathi
W3 0,60 1,50 1,50 Быстрый
P. leiognathi
Cr1 0,65 1,50 1,80 Быстрый
P. leiognathi
Sh1 0,65 1,50 2,00 Быстрый
P. leiognathi
F1 0,50 1,50 1,50 Быстрый
Средние значения
P. leiognathi 0,61±0,07 1,50±0 1,63±0,22 Быстрый
V. fischeri 0,61±0,048 1,55±0,29 3,64±1,73 Быстрый
P.
phosphoreum 1,72±0,40 3,97±0,58 4,72±0,40 Средний
V. harveyi 0,82±0,082 7,80±3,27 2,47±0,058 Медленный
62
ТА В Р И Ч ЕС К И Й М Е Д И КО - Б И ОЛ О Г И Ч Е С К И Й В Е С Т Н И К2014, том 17, №2 (66)
Также была изучена кинетика люциферазной
реакции с тремя альдегидами, которая при исполь-
зовании додеканаля, является одним из специфичес-
ких для светящихся бактерий диагностических по-
казателей [2, 4]. Исследования показали, что выде-
ленные штаммы обладают быстрым кинетическим
типом, характерным для рода Photobacteriumи не-
которых видов рода Vibrio(Таблица 2). Отсутствие
у бактерий желтого пигмента, который является ди-
агностическим свойством вида V. fischeri, а также
их неспособность ферментировать маннит, позво-
ляют отнести выделенные штаммы к роду
Photobacterium. Высокий температурный оптимум
роста и биолюминесценции и отсутствие фермен-
тации мальтозы свидетельствуют о наиболее веро-
ятной принадлежности идентифицируемых бакте-
рий к виду P. leiognathi.
Проведенные исследования по фенотипирова-
нию с использованием 96 субстратов системы Biolog
(США) подтвердили близость выделенных бактерий
к виду P. leiognathi, рис. 1. Однако образованный
ими кластер значительно отличался от имеющихся
в базе данных сведений об известных видах светя-
щихся бактериях, что означает возможную принад-
лежность штаммов к новому виду или о более ши-
рокой вариабельности вида P. leiognathi.
Рис. 1. Кластерный анализ фенотипов выделенных штаммов светящихся бактерий с
использованием системы идентификации микроорганизмов Biolog (США).
Рис. 2. Изучение скорости роста выделенных штаммов при различных концентрациях соли.
63
О Р И Г И Н А Л Ь Н Ы Е С Т А Т Ь И
Проведенные исследования показали также, что
светящиеся бактерии Азовского моря обладают более
высокой метаболической активностью при более низ-
кой концентрации соли в среде, эквивалентной 40%
от солености океана [5].
Для большинства изучаемых штаммов максималь-
ное количество биомассы накапливалось при концен-
трации хлорида натрия в среде 1 - 1,5%, а при концен-
трации соли более 2%, количество биомассы снижа-
лось для всех выделенных штаммов, рис. 2. Такая же
закономерность наблюдалась и при анализе способ-
ности метаболизировать субстраты системы Biolog.
Максимальная люминесценция бактерий проявлялась
при более высоких значениях солености, чем их рост.
Удельное свечение бактерий возрастало при увеличе-
нии концентрации соли от 1 до 3%, достигая максиму-
ма, который сохранялся и при более высоких значени-
ях солености 3–5%.
В этих условиях бактерии обладали максимальной
биолюминесценцией, сравнимой с самыми яркими
штаммами P. phosphoreum, интенсивность которой
зависела от штамма (таблица 3).
Таблица 3
Биолюминесценция выделенных штаммов светящихся бактерий
Биолюминесценция
Штамм Концентрация клеток
кл/мл мВ/мл мВ/кл
P .leiognathi W1 4,80·107 1,34·105 2,80·10-3
P .leiognathi W2 4,50·107 1,34·105 2,99·10-3
P. leiognathi W2 4,20·107 1,35·105 3,21·10-3
P. leiognathi Sh1 3,90·107 1,14·105 2,93·10-3
P. leiognathi Cr1 5,40·107 1,38·105 2,56·10-3
P. leiognathi F1 4,50·107 1,28·105 2,84·10-3
Средние значения
P. leiognathi 4,55·107 1,31·105 2,89·10-3
P. phosphoreum 2,64·107 1,00·105 3,96·10-3
V. fischeri 1,26·108 1,04·105 8,60·10-4
V. harveyi 2,41·108 9,21·104 3,82·10-4
Таким образом, выделенные штаммов светящих-
ся бактерий отличают высокие температурные оп-
тимумы, повышенная метаболическая активность
при пониженных значениях солености, а также вы-
сокие значения удельной биолюминесценции. От-
меченные особенности делают эти бактерии перс-
пективными тест-обьектами для биотестирования в
физиологических условиях, при которых концент-
рация хлорида натрия близка к 0,9% и температура
составляет 37 °С. Известные морские (или океани-
ческие)тест-штаммы обычно не дают возможности
проводить такие исследования, так как для их опти-
мальной люминесценции требуется высокая концен-
трация хлорида натрия (3-3,5%) и относительно не-
высокие температуры (15–25°С) [6].
ВЫВОДЫ
1. Выделены и идентифицированы как
Photobacteriumleiognathi шесть штаммов светящих-
ся бактерий из Азовского моря.
2. Установлены высокая термофильность и по-
ниженная галофильность выделенных бактерий, что
делает их перспективными тест-обьектами для био-
тестирования в физиологических условиях.
3. Фенотипирование светящихся бактерий с по-
мощью системы Biologпоказали, что они образуют
отдельный кластер, отличный от известных, что по-
зволило предположить принадлежность бактерий к
новому виду или большей вариабельности вида
P.leiognathi.
ЛИТЕРАТУРА
1. Doherty F. G. A review of the microtox toxicity
test system for assessing the toxicity of sediments and
soils / F. G. Doherty // Water Qual. Res. J. Canada. –
2001. – Vol. 36. – Р. 475–518.
2. Дерябин Д.Г. Бактериальная биолюминесцен-
ция: фундаментальные и прикладные аспекты / Д.Г.
Дерябин. – М: Наука, 2009. – 248 с.
3. Ulitzur S. Natural Luminescent Whole-Cell
Bioreporters / S. Ulitzur // Handbook of Biosensors and
Biochip. – John Wiley & Sons, Ltd., 2007 – P. 143-153.
4. The prokaryotes: a handbook on the biology of
bacteria, 3-d edition: Proteobacteria: Gamma subclass /
[ed. by M. Dworkin, S. Falkow, E. Rosenberg, et al.]. –
2006. - Vol. 6. – 1165 p.
5. Кацев А. М. Идентификация светящихся бак-
терий, выделенных из Черного и Азовского морей /
А. М. Кацев, Джон Макемсон // Ученые записки
ТНУ им. В.И. Вернадского, серия «Биология, хи-
64
ТА В Р И Ч ЕС К И Й М Е Д И КО - Б И ОЛ О Г И Ч Е С К И Й В Е С Т Н И К2014, том 17, №2 (66)
мия». – 2006. – Т. 19, №4. – С. 111–116.
6. Дерябин Д.Г. Причины, определяющие ха-
рактер изменения бактериальной люминесцен-
ции при воздействии сыворотки крови / Д.Г. Де-
рябин, Е.Г. Поляков // Микробиология. – 2005. –
№ 5. – С. 616–625.
|