Клінічне значення експресії пухлинних мікроРНК-122, -155, -182 та -200b у хворих на рак молочної залози
Дослідження проведено з метою вивчення зв’язків експресії онкогенних (-182, -155) і онкосупресорних (-122, -200b) мікроРНК в пухлинних клітинах з клініко-патологічними характеристиками раку молочної залози (РМЗ) та встановлення їх клінічного значення. Рівні мікроРНК визначали за допомогою зворотно-...
Збережено в:
| Опубліковано в: : | Наука та інновації |
|---|---|
| Дата: | 2017 |
| Автори: | , , , , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Ukrainian |
| Опубліковано: |
Видавничий дім "Академперіодика" НАН України
2017
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/129857 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Клінічне значення експресії пухлинних мікроРНК-122, -155, -182 та -200b у хворих на рак молочної залози / В.Ф. Чехун, Н.Ю. Лук’янова, Т.В. Борікун, Н.О. Бездєнєжних, І.В. Шепеленко, В.М. Базась, О.М. Клюсов // Наука та інновації. — 2017. — Т. 13, № 5. — С. 67-74. — Бібліогр.: 10 назв. — укр. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-129857 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Чехун, В.Ф. Лук’янова, Н.Ю. Борікун, Т.В. Бездєнєжних, Н.О. Шепеленко, І.В. Базась, В.М. Клюсов, О.М. 2018-01-31T14:15:40Z 2018-01-31T14:15:40Z 2017 Клінічне значення експресії пухлинних мікроРНК-122, -155, -182 та -200b у хворих на рак молочної залози / В.Ф. Чехун, Н.Ю. Лук’янова, Т.В. Борікун, Н.О. Бездєнєжних, І.В. Шепеленко, В.М. Базась, О.М. Клюсов // Наука та інновації. — 2017. — Т. 13, № 5. — С. 67-74. — Бібліогр.: 10 назв. — укр. 1815-2066 DOI: doi.org/10.15407/scin13.05.067 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/129857 Дослідження проведено з метою вивчення зв’язків експресії онкогенних (-182, -155) і онкосупресорних (-122, -200b) мікроРНК в пухлинних клітинах з клініко-патологічними характеристиками раку молочної залози (РМЗ) та встановлення їх клінічного значення. Рівні мікроРНК визначали за допомогою зворотно-транскрипційної полімеразно- ланцюгової реакції в реальному часі, експресію рецепторів естрогену, прогестерону та епідермального фактору росту Her2/neu — імуногістохімічним методом. Встановлено зв’язок експресії цих мікроРНК зі стадією захворювання, наявністю метастатичного ураження реґіонарних лімфатичних вузлів, ступенем диференціювання, молекулярним підтипом пухлини. Отримані результати свідчать про участь досліджених мікроРНК у формуванні ступеня злоякісності РМЗ, їх асоціацію з агресивністю перебігу пухлинного процесу, вказують на перспективність подальшого вивчення запропонованої панелі мікроРНК для використання як додаткових маркерів перебігу РМЗ. Исследования проведены с целью изучения взаимосвязей онкогенных (-182, -155) и онкосупрессорных (-122, -200b) микроРНК в опухолевых клетках с клинико-патологическими характеристиками рака молочной железы (РМЖ), а также выявления их клинического значения. Уровни микроРНК определяли с помощью обратно-транскрипционной полимеразно-цепной реакции в реальном времени, экспрессию рецепторов эстрогена, прогестерона и эпидермального фактора роста Her2/neu — иммунногистохимическим методом. Установлена связь экспрессии этих микроРНК со стадией заболевания, наличием метастатического поражения регионарных лимфатических узлов, степенью дифференцирования, молекулярным подтипом опухоли. Полученные результаты свидетельствуют об участии исследованных микроРНК в формировании степени злокачественности РМЖ, их ассоциации с агрессивностью течения опухолевого процесса, а также указывают на перспективность дальнейшего изучения предложенной панели микроРНК для применения в роли дополнительных маркеров течения РМЖ. The research was aimed at identifying the relationship between the oncogenic (-182, -155) and the onco-suppressive (-122, -200b) microRNAs in tumor cells with clinical and pathological characteristics of breast cancer (BC) and at establishing their clinical significance. MicroRNA levels have been determined by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) in real time. The ex pression of estrogen (ER) and progesterone (PR) receptors, and Her2/neu epidermal growth factor has been ascertained by immunohistochemical method. The relationship of these microRNAs expression with the disease stage, the presence of metastatic lesions of regional lymph nodes, the differen tiation degree, and the tumor molecular subtype has been established. The obtained results have confirmed the invol vement of the tested microRNAs in the formation of BC malignancy degree, their association with tumor aggres siveness and have defined the prospects of further studies of the proposed microRNAs panel for their use as BC additional markers. uk Видавничий дім "Академперіодика" НАН України Наука та інновації Науково-технічні інноваційні проекти Національної академії наук України Клінічне значення експресії пухлинних мікроРНК-122, -155, -182 та -200b у хворих на рак молочної залози Клиническое значение экспрессии опухолевых микроРНК-122, -155, -182 и -200b у больных раком молочной железы The Clinical Significance of Tumor MIR-122, -155, -182, and -200b Expression in Patients with Breast Cancer Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Клінічне значення експресії пухлинних мікроРНК-122, -155, -182 та -200b у хворих на рак молочної залози |
| spellingShingle |
Клінічне значення експресії пухлинних мікроРНК-122, -155, -182 та -200b у хворих на рак молочної залози Чехун, В.Ф. Лук’янова, Н.Ю. Борікун, Т.В. Бездєнєжних, Н.О. Шепеленко, І.В. Базась, В.М. Клюсов, О.М. Науково-технічні інноваційні проекти Національної академії наук України |
| title_short |
Клінічне значення експресії пухлинних мікроРНК-122, -155, -182 та -200b у хворих на рак молочної залози |
| title_full |
Клінічне значення експресії пухлинних мікроРНК-122, -155, -182 та -200b у хворих на рак молочної залози |
| title_fullStr |
Клінічне значення експресії пухлинних мікроРНК-122, -155, -182 та -200b у хворих на рак молочної залози |
| title_full_unstemmed |
Клінічне значення експресії пухлинних мікроРНК-122, -155, -182 та -200b у хворих на рак молочної залози |
| title_sort |
клінічне значення експресії пухлинних мікрорнк-122, -155, -182 та -200b у хворих на рак молочної залози |
| author |
Чехун, В.Ф. Лук’янова, Н.Ю. Борікун, Т.В. Бездєнєжних, Н.О. Шепеленко, І.В. Базась, В.М. Клюсов, О.М. |
| author_facet |
Чехун, В.Ф. Лук’янова, Н.Ю. Борікун, Т.В. Бездєнєжних, Н.О. Шепеленко, І.В. Базась, В.М. Клюсов, О.М. |
| topic |
Науково-технічні інноваційні проекти Національної академії наук України |
| topic_facet |
Науково-технічні інноваційні проекти Національної академії наук України |
| publishDate |
2017 |
| language |
Ukrainian |
| container_title |
Наука та інновації |
| publisher |
Видавничий дім "Академперіодика" НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Клиническое значение экспрессии опухолевых микроРНК-122, -155, -182 и -200b у больных раком молочной железы The Clinical Significance of Tumor MIR-122, -155, -182, and -200b Expression in Patients with Breast Cancer |
| description |
Дослідження проведено з метою вивчення зв’язків експресії онкогенних (-182, -155) і онкосупресорних (-122,
-200b) мікроРНК в пухлинних клітинах з клініко-патологічними характеристиками раку молочної залози (РМЗ) та встановлення їх клінічного значення. Рівні мікроРНК визначали за допомогою зворотно-транскрипційної полімеразно-
ланцюгової реакції в реальному часі, експресію рецепторів естрогену, прогестерону та епідермального фактору
росту Her2/neu — імуногістохімічним методом. Встановлено зв’язок експресії цих мікроРНК зі стадією захворювання, наявністю метастатичного ураження реґіонарних лімфатичних вузлів, ступенем диференціювання, молекулярним підтипом пухлини. Отримані результати свідчать про участь досліджених мікроРНК у формуванні ступеня злоякісності РМЗ, їх асоціацію з агресивністю перебігу пухлинного процесу, вказують на перспективність подальшого
вивчення запропонованої панелі мікроРНК для використання як додаткових маркерів перебігу РМЗ.
Исследования проведены с целью изучения взаимосвязей онкогенных (-182, -155) и онкосупрессорных
(-122, -200b) микроРНК в опухолевых клетках с клинико-патологическими характеристиками рака молочной
железы (РМЖ), а также выявления их клинического значения. Уровни микроРНК определяли с помощью обратно-транскрипционной полимеразно-цепной реакции в реальном времени, экспрессию рецепторов эстрогена,
прогестерона и эпидермального фактора роста Her2/neu —
иммунногистохимическим методом. Установлена связь
экспрессии этих микроРНК со стадией заболевания, наличием метастатического поражения регионарных лимфатических узлов, степенью дифференцирования, молекулярным подтипом опухоли. Полученные результаты
свидетельствуют об участии исследованных микроРНК
в формировании степени злокачественности РМЖ, их
ассоциации с агрессивностью течения опухолевого процесса, а также указывают на перспективность дальнейшего изучения предложенной панели микроРНК для применения в роли дополнительных маркеров течения РМЖ.
The research was aimed at identifying the relationship
between the oncogenic (-182, -155) and the onco-suppressive
(-122, -200b) microRNAs in tumor cells with clinical
and pathological characteristics of breast cancer (BC) and
at establishing their clinical significance. MicroRNA levels
have been determined by reverse transcription polymerase
chain reaction (RT-PCR) in real time. The ex pression of estrogen
(ER) and progesterone (PR) receptors, and Her2/neu
epidermal growth factor has been ascertained by immunohistochemical
method. The relationship of these microRNAs
expression with the disease stage, the presence of metastatic
lesions of regional lymph nodes, the differen tiation degree,
and the tumor molecular subtype has been established. The
obtained results have confirmed the invol vement of the
tested microRNAs in the formation of BC malignancy
degree, their association with tumor aggres siveness and have
defined the prospects of further studies of the proposed
microRNAs panel for their use as BC additional markers.
|
| issn |
1815-2066 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/129857 |
| citation_txt |
Клінічне значення експресії пухлинних мікроРНК-122, -155, -182 та -200b у хворих на рак молочної залози / В.Ф. Чехун, Н.Ю. Лук’янова, Т.В. Борікун, Н.О. Бездєнєжних, І.В. Шепеленко, В.М. Базась, О.М. Клюсов // Наука та інновації. — 2017. — Т. 13, № 5. — С. 67-74. — Бібліогр.: 10 назв. — укр. |
| work_keys_str_mv |
AT čehunvf klíníčneznačennâekspresíípuhlinnihmíkrornk122155182ta200buhvorihnarakmoločnoízalozi AT lukânovanû klíníčneznačennâekspresíípuhlinnihmíkrornk122155182ta200buhvorihnarakmoločnoízalozi AT boríkuntv klíníčneznačennâekspresíípuhlinnihmíkrornk122155182ta200buhvorihnarakmoločnoízalozi AT bezdênêžnihno klíníčneznačennâekspresíípuhlinnihmíkrornk122155182ta200buhvorihnarakmoločnoízalozi AT šepelenkoív klíníčneznačennâekspresíípuhlinnihmíkrornk122155182ta200buhvorihnarakmoločnoízalozi AT bazasʹvm klíníčneznačennâekspresíípuhlinnihmíkrornk122155182ta200buhvorihnarakmoločnoízalozi AT klûsovom klíníčneznačennâekspresíípuhlinnihmíkrornk122155182ta200buhvorihnarakmoločnoízalozi AT čehunvf kliničeskoeznačenieékspressiiopuholevyhmikrornk122155182i200bubolʹnyhrakommoločnoiželezy AT lukânovanû kliničeskoeznačenieékspressiiopuholevyhmikrornk122155182i200bubolʹnyhrakommoločnoiželezy AT boríkuntv kliničeskoeznačenieékspressiiopuholevyhmikrornk122155182i200bubolʹnyhrakommoločnoiželezy AT bezdênêžnihno kliničeskoeznačenieékspressiiopuholevyhmikrornk122155182i200bubolʹnyhrakommoločnoiželezy AT šepelenkoív kliničeskoeznačenieékspressiiopuholevyhmikrornk122155182i200bubolʹnyhrakommoločnoiželezy AT bazasʹvm kliničeskoeznačenieékspressiiopuholevyhmikrornk122155182i200bubolʹnyhrakommoločnoiželezy AT klûsovom kliničeskoeznačenieékspressiiopuholevyhmikrornk122155182i200bubolʹnyhrakommoločnoiželezy AT čehunvf theclinicalsignificanceoftumormir122155182and200bexpressioninpatientswithbreastcancer AT lukânovanû theclinicalsignificanceoftumormir122155182and200bexpressioninpatientswithbreastcancer AT boríkuntv theclinicalsignificanceoftumormir122155182and200bexpressioninpatientswithbreastcancer AT bezdênêžnihno theclinicalsignificanceoftumormir122155182and200bexpressioninpatientswithbreastcancer AT šepelenkoív theclinicalsignificanceoftumormir122155182and200bexpressioninpatientswithbreastcancer AT bazasʹvm theclinicalsignificanceoftumormir122155182and200bexpressioninpatientswithbreastcancer AT klûsovom theclinicalsignificanceoftumormir122155182and200bexpressioninpatientswithbreastcancer |
| first_indexed |
2025-11-24T02:30:16Z |
| last_indexed |
2025-11-24T02:30:16Z |
| _version_ |
1850838217382690816 |
| fulltext |
67
В.Ф. Чехун 1, Н.Ю. Лук’янова 1, Т.В. Борікун 1, Н.О. Бездєнєжних 1,
І.В. Шепеленко 1, В.М. Базась 2, О.М. Клюсов 2
1 Інститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р.Є. Кавецького НАН України,
вул. Васильківська, 45, Київ, 03022, Україна,
тел. +380 44 259 0183, факс +380 44 258 1656, chekhun@nas.gov.ua
2 Київський міський клінічний онкологічний центр, вул. Верховинна, 69, Київ, 03115, Україна,
тел. +380 44 424 6818, kmkoc.kiev@gmail.com
КЛІНІЧНЕ ЗНАЧЕННЯ ЕКСПРЕСІЇ
ПУХЛИННИХ МІКРОРНК-122, -155, -182 ТА -200b
У ХВОРИХ НА РАК МОЛОЧНОЇ ЗАЛОЗИ
© В.Ф. ЧЕХУН, Н.Ю. ЛУК’ЯНОВА, Т.В. БОРІКУН,
Н.О. БЕЗДЄНЄЖНИХ, І.В. ШЕПЕЛЕНКО,
В.М. БАЗАСЬ, О.М. КЛЮСОВ, 2017
Дослідження проведено з метою вивчення зв’язків експресії онкогенних (-182, -155) і онкосупресорних (-122,
-200b) мікроРНК в пухлинних клітинах з клініко-патологічними характеристиками раку молочної залози (РМЗ) та вста-
новлення їх клінічного значення. Рівні мікроРНК визначали за допомогою зворотно-транскрипційної полімеразно-
ланцюгової реакції в реальному часі, експресію рецепторів естрогену, прогестерону та епідермального фактору
росту Her2/neu — імуногістохімічним методом. Встановлено зв’язок експресії цих мікроРНК зі стадією захворюван-
ня, наявністю метастатичного ураження реґіонарних лімфатичних вузлів, ступенем диференціювання, молекуляр-
ним підтипом пухлини. Отримані результати свідчать про участь досліджених мікроРНК у формуванні ступеня зло-
якісності РМЗ, їх асоціацію з агресивністю перебігу пухлинного процесу, вказують на перспективність подальшого
вивчення запропонованої панелі мікроРНК для використання як додаткових маркерів перебігу РМЗ.
К л ю ч о в і с л о в а: рак молочної залози, мікроРНК, клінічне значення.
ISSN 1815-2066. Nauka innov. 2017, 13(5): 67—74 https://doi.org/10.15407/scin13.05.067
Рак молочної залози (РМЗ) є актуальною
проблемою онкології, що зумовлено високими
показниками захворюваності жінок багатьох
країн світу [1]. У статево-віковій структурі он-
кологічних захворювань населення України
РМЗ за питомою вагою займає перше місце у
жінок віком 30—74 років. Так, серед хворих
понад 37 %, а серед померлих — більше 30 %
становлять особи працездатного віку, що при-
зводить до значних втрат життєвого потенціа-
лу жіночої популяції України [2]. Наведені
показники визначають РМЗ як найбільш ак-
туальну і надзвичайно важливу проблему он-
кології, що має медико-соціальне значення.
На сьогодні встановлено, що різноманітна
клінічна картина РМЗ, відсутність у багатьох
випадках позитивного ефекту після стандарт-
них схем лікування у осіб одного віку з іден-
тичною поширеністю процесу, гістологічною
формою та ступенем диференціювання пухли-
ни пов’язані з існуванням міжпухлинної та
внутрішньопухлинної гетерогенності популя-
ції злоякісно-трансформованих клітин [3].
Біологічне явище внутрішньопухлинної гете-
рогенності, в основі якої лежить генетична
нестабільність, є багаторівневим і вважається
ключовим фактором, що визначає спрямо-
ваність пухлинного процесу як на початку
його виникнення, так і в процесі реалізації різ-
них форм/шляхів розвитку пухлинної про-
гресії, тобто агресивності перебігу захворю-
68 ISSN 1815-2066. Nauka innov. 2017, 13 (5)
В.Ф. Чехун, Н.Ю. Лук’янова, Т.В. Борікун, Н.О. Бездєнєжних, І.В. Шепеленко, В.М. Базась, О.М. Клюсов
вання [4]. На думку багатьох дослідників,
внутрішньопухлинна гетерогенність відіграє
вирішальну роль у темпах розвитку новоутво-
рення, підтримці його онкогенного потенціа-
лу, виживаності клітин в умовах динамічного
мікрооточення [5—6]. Проявом існуючої гете-
рогенності у межах однієї пухлини є відмін-
ності різних груп популяції клітин за морфо-
логічною будовою, генетичним, епігенетичним
статусом, а також варіабельність за експресією
різних маркерів, у тому числі молекулярно-ге-
нетичних [6].
Незважаючи на результати численних до-
сліджень, зв’язок гетерогенності пухлинних
клітин з агресивністю перебігу злоякісного
процесу РМЗ потребує більш детального до-
слідження. Доцільним у цьому напрямі слід
вважати виявлення нових маркерів, які само-
стійно або у комплексі з іншими відомими по-
казниками могли б розкрити додаткові ме-
ханізми пухлинного росту і стати підґрунтям
для оцінки ключових факторів прогресування
пухлинного процесу — метастазування, а саме:
проліферації, адгезії та інвазії злоякісно-
трансформованих клітин [7]. В цьому аспекті
все більшої актуальності набуває вивчення но-
вого класу потенційних епігенетичних онко-
маркерів — мікроРНК. МікроРНК — це клас
малих некодуючих РНК (19—30 нуклеотидів),
які функціонують на посттранскрипційному
рівні як регулятори експресії багатьох генів.
За фізіологічних умов мікроРНК беруть
участь у багатьох клітинних процесах, зокрема
і таких як проліферація, диференціювання,
апоптоз [8]. Експресію деяких мікроРНК по-
в’язують з ініціацією і прогресією багатьох ти-
пів раку, що є підґрунтям для їх використання
як діагностичних критеріїв перебігу пухлин-
ного процесу в цілому та в динаміці відповіді
на терапевтичні втручання [9]. Вони мають
суттєву перевагу перед іншими біомаркерами
через свою стабільність, оскільки вже на ран-
ніх стадіях канцерогенезу пухлини мають уні-
кальний профіль експресії мікроРНК [10].
Пошук та ідентифікація таких тканино-спе-
цифічних маркерів з урахуванням рівня гете-
рогенності пухлин є надзвичайно перспектив-
ним напрямком сучасної онкології.
Метою дослідження було визначити зв’язок
експресії онкогенних (-182, -155) та онкосуп-
ресорних (-122 та -200b) мікроРНК в пухлин-
них клітинах з клініко-патологічними харак-
теристиками РМЗ та встановити їх клі нічне
значення.
МАТЕРІАЛИ ТА МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕНЬ
Для верифікації пухлинного процесу прове-
дено гістологічне дослідження операційного
матеріалу хворих на РМЗ, зразки якого фіксу-
вали у 10%-му розчині нейтрального формалі-
ну протягом доби з наступною проводкою у
спиртах зростаючої концентрації та заливкою
у парафінові блоки. Загальну структуру пух-
лин оцінювали при перегляді гістологічних
зрізів, пофарбованих гематоксиліном та еози-
ном, гістологічний тип пухлин оцінювали
відповідно до Міжнародної гістологічної
класифікації Всесвітньої організації охорони
здоров’я (2008).
Для встановлення молекулярного підтипу
пухлин проведено імуногістохімічне дослід-
ження експресії рецепторів естрогену (РЕ),
рецепторів прогестерону (РП) та епідермаль-
ного фактору росту (Her2/neu) в пухлинних
клітинах, в результаті якого визначено чотири
молекулярні підтипи РМЗ: люмінальний А
(РЕ+, РП+, Her2/neu–), люмінальний Б (РЕ+,
РП+, Her2/neu+), базальний підтип (РЕ–,
РП–, Her2/neu–) та Her2/neu-позитивний
(Her2/neu+) (РЕ–, РП–, Her2/neu+). Імуно-
гістохімічне дослідження РЕ, РП, Her2/neu в
пухлинних клітинах проводили на парафіно-
вих зрізах (4–5 мікронів) із застосуванням
відповідних моноклональних антитіл (РЕ
(клон 1D5), РП (клон PgR636), Her2/neu
(клон c-erbB-2) — DakoCytomation, Denmark
згідно з інструкціями виробника).
Для детекції реакції використовували сис-
тему візуалізації EnVisionsystem (Dako LSAB2
system, Denmark) відповідно до рекомендацій
69ISSN 1815-2066. Nauka innov. 2017, 13 (5)
Клінічне значення експресії пухлинних мікроРНК-122, -155, -182 та -200b у хворих на рак молочної залози
виробника, зрізи забарвлювали гематоксилі-
ном Мейера. Оцінку експресії досліджених
білків у клітинах виконували за допомогою
світлооптичного мікроскопа з подальшим під-
рахунком клітин за методом H-Score [14].
Для дослідження експресії мікроРНК на
клі нічному матеріалі хворих було застосова-
но метод зворотно-транскрипційної поліме-
разної ланцюгової реакції (ЗТ-ПЛР) у реаль-
ному часі.
З гомогенату 100 мг пухлинної тканини
РМЗ виділяли тотальну РНК за допомогою
комерційного набору «Рибо-золь» (Амплі-
сенс, Росія). Кількість виділеної РНК визна-
чали на спектрофотометрі «NanoDrop 2000c
Spectrophotometer» (ThermoScientific, США).
Чистоту виділеної РНК контролювали, вико-
ристовуючи співвідношення величин оптич-
ного поглинання при довжині хвиль 260 та
280 нм. РНК розчиняли у tris-EDTA буфері та
до проведення ПЛР зберігали при t –20 °С.
ЗТ-ПЛР проводили на апаратній системі ви-
явлення AppliedBiosystems 7900HT FastReal-
Time PCR System з використанням комерцій-
ного набору для ЗТ-ПЛР TaqMan MicroRNA
Assay (ThermoScientific, США) за протоколом
виробника. В якості ендогенного контролю
для об’єктивізації показників експресії вико-
ристовували мікроРНК RNU48.
Відносну експресію досліджуваних мік ро-
РНК було визначено порівняльним dCT мето-
дом (ум. од.). Дослід проведено у трьох повто-
рах для кожного зразка.
Статистичну обробку одержаних резуль-
татів виконували за допомогою програми ста-
тистичної обробки даних STATISTIСA 6.0.
Порівняння достовірності відмінностей серед-
ніх величин проводили з використанням t-
критерію Стьюдента. Достовірними вважали
розбіжності при р < 0,05.
КЛІНІКО-МОРФОЛОГІЧНА
ХАРАКТЕРИСТИКА ХВОРИХ НА РМЗ
В основу роботи покладено аналіз резуль-
татів обстеження 215 хворих на РМЗ І—ІІІ
стадій, які перебували на стаціонарному ліку-
ванні у Київському міському клінічному он-
кологічному центрі протягом 2014—2016 рр. і
дали інформовану згоду на використання
клінічних даних у наукових цілях. Досліджу-
вали зразки операційного матеріалу РМЗ, які
зберігалися у базі клінічних даних відділу
моніторингу пухлинного процесу та дизайну
терапії Інституту експериментальної патоло-
Таблиця 1
Загальна клінічна характеристика хворих на РМЗ
Показник
РН
N %
Загальна кількість хворих 215 100
Вік хворих, роки:
середній 56,1+ 5,4
віковий діапазон 24—81
Менструальна функція:
збережена 60 27,9
менопауза 155 72,1
Стадія РМЗ за TNM:
стадія І 46 21,4
стадія ІІ 104 48,4
стадія ІІІ 65 30,2
Метастази у регіональні
лімфатичні вузли:
N0 149 69,3
N1-3 66 30,7
Морфологія РМЗ:
інфільтративний прото-
ковий РМЗ
147 68,4
інфільтративний долько-
вий РМЗ
68 31,6
Ступінь диференціювання
РМЗ:
G1 (високий) 60 27,9
G2 (помірний) 106 49,3
G3 (низький) 49 22,8
Молекулярний підтип:
люмінальний А 96 44,7
люмінальний Б 43 20,0
базальний 46 21,4
Her2/neu+ 30 13,9
70 ISSN 1815-2066. Nauka innov. 2017, 13 (5)
В.Ф. Чехун, Н.Ю. Лук’янова, Т.В. Борікун, Н.О. Бездєнєжних, І.В. Шепеленко, В.М. Базась, О.М. Клюсов
гії, онкології і радіобіології ім. Р.Є. Кавецького
НАН України.
Стадію пухлинного процесу визначали за
міжнародною класифікацією пухлин (TNM, 6
видання, 2002 р. та 7 видання, 2009 р.). Згідно
з даними історій хвороби, всім хворим прове-
дено загальні клінічні, біохімічні, лабораторні
обстеження, УЗД органів черевної порожни-
ни, мамографію, рентгеноскопію органів груд-
ної порожнини, пункційну біопсію пухлин мо-
лочної залози за стандартами діагностики і
лікування онкологічних хворих, затверджених
наказами МОЗ України від 30.07.2010 р. № 645
та від 30.06.2015 р. № 396.
Загальну характеристику хворих представ-
лено у таблиці 1.
РЕЗУЛЬТАТИ ТА ОБГОВОРЕННЯ
За допомогою ресурсу http://mirbase.org
було підібрано панель мікроРНК, задіяних у
онкогенезі, інвазії та метастазуванні РМЗ.
Експресію мікроРНК досліджували залеж-
но від основних клініко-патологічних пара-
метрів РМЗ, а саме — вік пацієнток, менстру-
альний статус, стадія РМЗ, наявність метаста-
зів у реґіонарних лімфатичних вузлах, ступінь
диференціювання пухлин, їх гістологічна бу-
дова та молекулярний підтип.
Аналіз результатів показав, що досліджені
випадки РМЗ характеризуються низьким рів-
нем експресії онкосупресорних мікроРНК-122,
-200b та високим рівнем онкогенних мікро-
РНК-182, -155 (табл. 2), порівняно з нормаль-
ною тканиною молочної залози. Отрима ні дані
підтверджують асоціацію обраної панелі мікро-
РНК зі злоякісним ростом у молочній залозі.
Встановлено, що рівні експресії онкосупре-
сорних мікроРНК-200b та мікроРНК-122 в
пухлинних клітинах хворих на РМЗ віком до
50 років зі збереженою менструальною функ-
цією вдвічі та у 1,5 рази відповідно, перевищує
аналогічні показники пацієнтів старше 50 ро-
ків у стані менопаузи. У клітинах РМЗ хворих
з менопаузою встановлено збільшення рівнів
експресії онкогенних мікроРНК-182 та -155 у
2,9 та 3,1 рази відповідно.
Найбільш високі рівні експресії онкогенних
мікроРНК-182 та -155 відмічено в пухлин-
них клітинах хворих з ІІІ-ю стадією РМЗ
(4,1 ± 0,77 та 2,7 ± 0,53) порівняно із хворими з
ІІ-ю (2,6 ± 0,39 та 1,4 ± 0,35) та І-ю стадією
(1,7 ± 0,52 та 1,9 ± 0,42). Збільшення стадії РМЗ
супроводжувалось зниженням експресії онко-
супресорних мікроРНК-122 та -200b (рис. 1).
Виявлено зв’язок експресії досліджених
мікроРНК з наявністю метастатичного ура-
ження реґіонарних лімфатичних вузлів у хво-
рих на РМЗ. Як видно з даних, наведених на
рис. 2, у пацієнток з метастазами показники
експресії мікроРНК-182, -155, -122 та -200b
становили 3,4 ± 0,85, 2,1 ± 0,82, 0,3 ± 0,05 та
0,2 ± 0,03 ум. од. відповідно, тоді як у хворих
з категорією N0 показники їх експресії були
іншими і дорівнювали 2,5 ± 0,29, 1,9 ± 0,48,
2,9 ± 0,73 та 3,6 ± 1,3 ум. од. відповідно.
Подальший аналіз дозволив встановити за-
лежність експресії деяких досліджених мік-
роРНК від ступеня диференціювання та моле-
кулярного підтипу РМЗ. Визначено, що рівні
експресії онкосупресорних мікроРНК-122 та
-200b у тканині високодиференційова ного
РМЗ є у 3,6 ± 0,73 та 2,4 ± 0,61 разів більшими
відповідно, ніж у пухлинах помірного та
низького ступеня диференціювання. Не вста-
новлено зв’язку показників експресії онкоген-
них мікроРНК-182 та -155 зі ступенем ди-
ференціювання досліджених випадків РМЗ.
Таблиця 2
Експресія онкогенних та онкосупресорних мікроРНК
в нормальній та злоякісно трансформованій тканині
молочної залози
МікроРНК
Нормальна тканина,
ум. од.
Пухлинна тканина,
ум. од.
МікроРНК-122 6,4 ± 0,45 1,7 ± 0,49 *
МікроРНК-200b 8,2 ± 0,95 1,9 ± 0,08 *
МікроРНК-182 1,9 ± 0,07 6,5 ± 0,78 *
МікроРНК-155 13,6 ± 1,25 37,8 ± 3,73 *
* p < 0,05 порівняно з нормальною тканиною.
71ISSN 1815-2066. Nauka innov. 2017, 13 (5)
Клінічне значення експресії пухлинних мікроРНК-122, -155, -182 та -200b у хворих на рак молочної залози
Рис. 1. Рівень мікроРНК у
пухлинній тканині залежно
від стадії РМЗ: * — p < 0,05
порівняно з нормальною тка-
ниною; # — p < 0,05 порівня-
но з I—II стадією
Рис. 2. Рівні мікроРНК у
пухлинній тканині залежно
від наявності метастатичного
ураження реґіонарних лім-
фатичних вузлів у хворих на
РМЗ: * — p < 0,05 порівняно
з нормальною тканиною; # —
p < 0,05 порівняно з пацієн-
тами без метастазів
Рис. 3. Особливості експре-
сії мікроРНК у пухлинній
тканині РМЗ різних молеку-
лярних підтипів: * — p < 0,05
порівняно з нормальною тка-
ниною; # — p < 0,05 порів-
няно з люмінальними під-
типами
5
6
7
8
9
1
2
3
4
0
В
ід
но
сн
ий
р
ів
ен
ь
ек
сп
ре
сі
ї м
ік
ро
РН
К
, у
м.
о
д.
мікроРНК–122
мікроРНК–200b
мікроРНК–182
мікроРНК–155
Нормальна тканина І стадія ІІ стадія ІІІ стадія
Стадія РМЗ
*
*
*
*# #*
*#
#
5
6
1
2
3
4
0
В
ід
но
сн
ий
р
ів
ен
ь
ек
сп
ре
сі
ї м
ік
ро
РН
К
, у
м.
о
д. мікроРНК–122
мікроРНК–200b
мікроРНК–182
мікроРНК–155
Нормальна тканина N0 N1–N3
Наявність метастазів у регіонарних лімфатичних вузлах
*
* #*
*# *#
*#
#*
*#
*
*
*
*
*
* *
* *
*
*
#
*#
4
5
6
7
1
2
3
0
В
ід
но
сн
ий
р
ів
ен
ь
ек
сп
ре
сі
ї м
ік
ро
РН
К
, у
м.
о
д.
мікроРНК–122
мікроРНК–200b
мікроРНК–182
мікроРНК–155
Нормальна тканина Люм А Люм Б Her2/neu+ Базальний
Молекулярні підтипи РМЗ
72 ISSN 1815-2066. Nauka innov. 2017, 13 (5)
В.Ф. Чехун, Н.Ю. Лук’янова, Т.В. Борікун, Н.О. Бездєнєжних, І.В. Шепеленко, В.М. Базась, О.М. Клюсов
Встановлено, що клітини люмінального А
та люмінального Б підтипів РМЗ практично
не відрізняються за профілем експресії усіх
досліджених мікроРНК. Як видно з даних, на-
ведених на рис. 3, рівень мікроРНК-182, -155,
-122 та -200b у клітинах люмінального А РМЗ
становить 2,1 ± 0,43, 1,6 ± 0,73, 1,75 ± 0,64 та
2,5 ± 0,35 ум. од., а у клітинах люмінального Б
підтипу складає 2,5 ± 0,28, 1,89 ± 0,31, 1,56 ± 0,11
та 2,35 ± 0,3 ум. од. відповідно. Також визна-
чено, що пухлини РМЗ Her2/neu+ підтипу
практично не відрізняються за показниками
експресії мікроРНК-182, -155 та -200b від
новоутворень люмінального А та люмінально-
го Б підтипів.
Найбільш суттєві відмінності профілю дос-
ліджених мікроРНК відзначено у клітинах
РМЗ базального підтипу. У клітинах цих пух-
лин встановлено найнижчі показники експ-
ре сії онкосупресорних мікроРНК-122, -200b
(0,25 ± 0,07 та 0,5 ± 0,03 ум. од. відповідно),
порівняно з клітинами інших молекулярних
підтипів. Рівні онкогенних мікроРНК-182 та
-155 у клітинах базального РМЗ є у 1,9 ± 0,4 та
1,7 ± 0,15 раз вищими відповідно, порівняно з
аналогічними показниками люмінального А,
люмінального Б та Her2/neu-позитивного під-
типів (рис. 3).
Отже, отримані дані свідчать про зв’язок рів-
нів досліджених мікроРНК у пухлинній тка-
нині з деякими клініко-морфологічними та
молекулярно-біологічними характеристиками
РМЗ. Залежність експресії досліджених онко-
генних та онкосупресорних мікроРНК від ста-
дії хвороби, наявності метастатичного уражен-
ня реґіонарних лімфатичних вузлів, ступеня
диференціювання та молекулярного підтипу
пухлин свідчить про їх участь у формуванні
ступеня злоякісності РМЗ та асоціюється з аг-
ресивністю перебігу захворювання.
ВИСНОВКИ
1. Розвиток злоякісного процесу у тканині
молочної залози супроводжується зниженням
експресії онкосупресорних мікроРНК-122
та -200b (у 3,8 та 4 рази) та підвищенням рів-
нів онкогенних мікроРНК-182 та -155 (у 3,4 та
2,8 рази).
2. У клітинах РМЗ хворих молодше 50 років
зі збереженою репродуктивною функцією від-
значено підвищення рівнів онкосупресорних
мікроРНК-122 та -200b у 1,5 та 2 рази від-
повідно, а у хворих із менопаузою встановлено
збільшення рівнів онкогенних мікроРНК-182
та -155 у 2,9 та 3,1 рази відповідно.
3. Визначено, що характерною ознакою пух-
лин низького ступеня диференціювання, ба-
зального молекулярного підтипу хворих на
пізню стадію РМЗ з наявністю метастатично-
го ураження реґіонарних лімфатичних вузлів
є низькі показники експресії онкосупресорних
мікроРНК-122, -200b та підвищення рівня он-
когенних мікроРНК-182 та -155.
4. Отримані дані свідчать про перспектив-
ність подальшого вивчення запропонованої
панелі мікроРНК з метою їх використання
як додаткових маркерів агресивності перебі-
гу РМЗ.
Дослідження проведено в рамках виконання
проекту «Розробка та впровадження прогнос-
тичної панелі біомаркерів раку молочної зало-
зи для персоналізованого моніторингу перебі-
гу пухлинного процесу» загальноакаде міч ного
конкурсу науково-технічних проектів (2016 р.,
№ державної реєстрації 0116U006053). Отри-
мані результати захищено п’ятьма патентами
України на корисну модель; видано чотири Ін-
формаційних листи про нововведення в сис-
темі охорони здоров’я; розроблені методики
впроваджено в КЗ «Прикарпатський клі ніч-
ний онкологічний центр» та КЗ «Рівненський
обласний онкологічний диспансер».
ЛІТЕРАТУРА
1. Siegel R. L., Miller K. D., Jemal A. Cancer statistics.
California. Cancer Journal for Clinicians. 2016. V. 66,
№ 1. P. 7—30.
2. Бюлетень національного канцер-реєстру України
№17 — «Рак в Україні», 2014—2015. Національний
інститут раку. Київ, 2016. 119 c.
3. Чехун В.Ф., Щербан С.Д., Савцова З.Д. Гетероген-
ность опухоли — динамичное состояние. Онкология.
2012. Т. 14, № 1. С. 4—12.
73ISSN 1815-2066. Nauka innov. 2017, 13 (5)
Клінічне значення експресії пухлинних мікроРНК-122, -155, -182 та -200b у хворих на рак молочної залози
4. Pareja F., Marchiò C., Geyer F.C., Weigelt B., Reis-Fil-
ho J. S. Breast Cancer Heterogeneity: Roles in Tumorige-
nesis and Therapeutic Implications. Current Breast Can-
cer Reports. 2017. V. 9, № 1. P. 34—44.
5. Ellsworth R.E., Blackburn H.L., Shriver C.D., Soon-
Shiong P., Ellsworth D.L. Molecular heterogeneity in
breast cancer: state of the science and implications for
patient care. Seminars in cell & developmental biology.
2017. V. 64. P. 65—72.
6. Chekhun V.F., Sherban S.D., Savtsova Z.D. Tumor cell
heterogeneity. Experimental Oncology. 2013. V. 35, № 3.
P. 154—162.
7. Lang J.E., Wecsler J.S., Press M.F., Tripathy D. Molecular
markers for breast cancer diagnosis, prognosis and
targeted therapy. Journal of Surgical Oncology. 2015.
V. 111, № 1. P. 81—90.
8. Чехун В.Ф., Бородай Н.В., Юрченко О.В. Микро-
РНК и опухолевый процесс. Онкология. 2012. Т. 15,
№ 2. С. 136—140.
9. Chekhun V.F., Borikun T.V., Lukianova N.Y. Effect of
5-azacytidine on miRNA expression in human breast
cancer cells with different sensitivity to cytostatics.
Experimental Oncology. 2016. V. 38, № 1. P. 26-30.
10. O’Bryan S., Dong S., Mathis J.M., Alahari S.K. The roles
of oncogenic miRNAs and their therapeutic importance
in breast cancer. European Journal of Cancer. 2017. V. 72.
P. 1—11.
Стаття надійшла до редакції 15.05.17
REFERENCES
1. Siegel R. L., Miller K. D., Jemal A. Cancer statistics.
California. Cancer Journal for Clinicians. 2016, 66 (1):
7—30.
2. Buleten’ natcionalnoho kancer-reestru Ukrainu №17 —
«Rak v Ukraini», 2014—2015 National Cancer Institute.
Kyiv, 2016. 119 p. [in Ukrainian].
3. Chekhun V.F., Sherban S.D., Savtsova Z.D. Heterohe-
noct’ opuholi — dynamichoe sostoyanie. Onkologia (On-
co lo gy). 2012, 14 (1): 4—12 [in Russian].
4. Pareja F., Marchiò C., Geyer F.C., Weigelt B., Reis-Filho,
J.S. Breast Cancer Heterogeneity: Roles in Tumorigene-
sis and Therapeutic Implications. Current Breast Cancer
Reports. 2017, 9 (1): 34—44.
5. Ellsworth R.E., Blackburn H.L., Shriver C.D., Soon-
Shiong P., Ellsworth D.L. Molecular heterogeneity in
breast cancer: state of the science and implications for
patient care. Seminars in cell & developmental biology.
2017, 64: 65—72.
6. Chekhun V.F., Sherban S.D., Savtsova Z.D. Tumor cell
heterogeneity. Experimental Oncology. 2013, 35 (3):
154—162.
7. Lang J.E., Wecsler J.S., Press M.F., Tripathy D. Molecular
markers for breast cancer diagnosis, prognosis and
targeted therapy. Journal of Surgical Oncology. 2015,
111 (1): 81—90.
8. Chekhun V.F., Borodai N.V., Yurchenko O.V. MikroRNK
i opuholevy proces. Onkologia (Oncology). 2012, 15 (2):
136—140 [in Russian].
9. Chekhun V.F., Borikun T.V., Lukianova N.Y. Effect of
5-azacytidine on miRNA expression in human breast
cancer cells with different sensitivity to cytostatics.
Experimental Oncology. 2016, 38 (1): 26—30.
10. O’Bryan S., Dong S., Mathis J.M., Alahari S.K. The roles
of oncogenic miRNAs and their therapeutic importance
in breast cancer. European Journal of Cancer. 2017, 72:
1—11.
Recieved 15.05.17
Chekhun 1, V.F., Lukianova 1, N.Y., Borikun 1, T.V.,
Bezdenezhnykh 1, N.A., Shepelenko 1, I.V.,
Bazas 2, V.M., and Klyusov 2, A.N.
1 Kavetsky Institute of Experimental Pathology,
Oncology, and Radiobiology, the NAS of Ukraine
45, Vasylkivska St., Kyiv, 03022, Ukraine,
tel. +38 044 259 0183, fax +38 044 258 1656,
chekhun@nas.gov.ua
2 Kyiv City Clinical Oncological Center
69, Verkhovynna St., Kyiv, 03115, Ukraine,
tel. +38 044 424 6818, kmkoc.kiev@gmail.com
THE CLINICAL SIGNIFICANCE OF TUMOR
MIR-122, -155, -182, AND -200b EXPRESSION
IN PATIENTS WITH BREAST CANCER
The research was aimed at identifying the relationship
between the oncogenic (-182, -155) and the onco-supp-
ressive (-122, -200b) microRNAs in tumor cells with clini cal
and pathological characteristics of breast cancer (BC) and
at establishing their clinical significance. MicroRNA levels
have been determined by reverse transcription polymerase
chain reaction (RT-PCR) in real time. The ex pression of est-
rogen (ER) and progesterone (PR) receptors, and Her2/neu
epidermal growth factor has been ascertained by immuno-
histochemical method. The relationship of these microRNAs
expression with the disease stage, the presence of metastatic
lesions of regional lymph nodes, the differen tiation degree,
and the tumor molecular subtype has been established. The
obtained results have confirmed the invol vement of the
tested microRNAs in the formation of BC malignancy
degree, their association with tumor aggres siveness and have
defined the prospects of further studies of the proposed
microRNAs panel for their use as BC additional markers.
Keywords: breast cancer, microRNAs, and clinical sig-
nificance.
74 ISSN 1815-2066. Nauka innov. 2017, 13 (5)
В.Ф. Чехун, Н.Ю. Лук’янова, Т.В. Борікун, Н.О. Бездєнєжних, І.В. Шепеленко, В.М. Базась, О.М. Клюсов
В.Ф. Чехун 1, Н.Ю. Лукьянова 1,
Т.В. Борикун 1, Н.А. Безденежных 1, И.В. Шепеленко 1,
В.М. Базась 2, А.Н. Клюсов 2
1 Институт экспериментальной патологии, онкологии
и радиобиологии им. Р.Е. Кавецкого НАН Украины,
ул. Васильковская, 45, Киев, 03022, Украина,
тел. +380 44 259 0183, факс +380 44 258 1656,
chekhun@nas.gov.ua
2 Киевский городской клинический онкологический
центр, ул. Верховинная, 69, Киев, 03115, Украина,
тел. +380 44 424 6818, kmkoc.kiev@gmail.com
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ЭКСПРЕССИИ
ОПУХОЛЕВЫХ МИКРОРНК-122, -155, -182
и -200b У БОЛЬНЫХ РАКОМ
МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ
Исследования проведены с целью изучения взаимо-
связей онкогенных (-182, -155) и онкосупрессорных
(-122, -200b) микроРНК в опухолевых клетках с кли-
ни ко-патологическими характеристиками рака мо лоч ной
же лезы (РМЖ), а также выявления их клинического
зна чения. Уровни микроРНК определяли с помощью
обратно-транскрипционной полимеразно-цепной реак ции
в реальном времени, экспрессию рецепторов эстро ге на,
прогестерона и эпидермального фактора роста Her2/neu —
иммунногистохимическим методом. Установлена связь
экспрессии этих микроРНК со стадией заболевания,
на личием метастатического поражения регионарных лим-
фатических узлов, степенью дифференцирования, моле-
кулярным подтипом опухоли. Полученные ре зультаты
свидетельствуют об участии исследованных микроРНК
в формировании степени злокачественности РМЖ, их
ассоциации с агрессивностью течения опухолевого про-
цесса, а также указывают на перспективность даль ней-
шего изучения предложенной панели микроРНК для при-
менения в роли дополнительных маркеров течения РМЖ.
Ключевые слова : рак молочной железы, микроРНК,
клиническое значение.
|