Osteopontin regulation by protein kinase B (Akt) in HepG2 cells

Osteopontin regulation by protein kinase B (Akt) in HepG2 cells

Aim: The mechanism responsible for osteopontin regulation is not understood in HepG2 cells. The aim of this study was to investigate the relationship between protein kinase B (Akt), a key gene in PI3K signal transduction pathway, and osteopontin expression. Methods: HepG2 cells were transfected with...

Full description

Saved in:
Bibliographic Details
Published in:Experimental Oncology
Date:2006
Main Authors: Zhang, G., Huang, Z., Shi, R., Lin, Y., Hao, B.
Format: Article
Language:English
Published: Інститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р.Є. Кавецького НАН України 2006
Subjects:
Original contributions
Online Access:https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/134159
Tags: Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
Journal Title:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Cite this:Osteopontin regulation by protein kinase B (Akt) in HepG2 cells / G. Zhang, Z. Huang, R. Shi, Y. Lin, B. Hao // Experimental Oncology. — 2006. — Т. 28, № 1. — С. 36-39. — Бібліогр.: 29 назв. — англ.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-134159
record_format dspace
spelling Zhang, G.
Huang, Z.
Shi, R.
Lin, Y.
Hao, B.
2018-06-12T16:16:54Z
2018-06-12T16:16:54Z
2006
Osteopontin regulation by protein kinase B (Akt) in HepG2 cells / G. Zhang, Z. Huang, R. Shi, Y. Lin, B. Hao // Experimental Oncology. — 2006. — Т. 28, № 1. — С. 36-39. — Бібліогр.: 29 назв. — англ.
1812-9269
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/134159
Aim: The mechanism responsible for osteopontin regulation is not understood in HepG2 cells. The aim of this study was to investigate the relationship between protein kinase B (Akt), a key gene in PI3K signal transduction pathway, and osteopontin expression. Methods: HepG2 cells were transfected with constitutively active Akt and dominant negative Akt using lipofectin. The Akt transfection was confirmed by Western blot analysis. Osteopontin expression was detected by both Northern blot and Western blot. Results: Overexpression of exogenous Akt was detected in HepG2 cells by Western blot, indicating that HepG2 cells were successfully transfected with the Akt genes. In serum-free condition, the expression of osteopontin was either low or undetectable in HepG2 cells transfected with vector only, however, the expression increased after transfection of cells with constitutively active Akt. Osteopontin expression decreased when HepG2 cells were transfected with dominant negative Akt. Conclusion: Protein kinase B (Akt) gene regulated osteopontin expression in RNA level and protein level, suggesting that osteopontin synthesis can be blocked by inactivation of the Akt gene. This leads to a potential means of intervention for the inhibition of metastases in liver cancer.
Цель: механизм регуляции экспресии остеопонтина еще детально не изучен. Целью данного исследования было изучение взаимосвязи между протеинкиназой В (Akt), ключевым геном PI3K пути сигнальной трансдукции, и экспрессией остеопон- тина. Методы: при помощи липофектина клетки HepG2 трансфецировали конститутивно экспрессирующимся геном Akt и доминантно негативным геном Akt. Akt-трансфектанты отбирали при помощи Вестерн-блоттинга. Детекцию экспрессии остеопонтина осуществляли методами Нозерн- и Вестерн-блоттинга. Результаты: эффективность трансфекции была подтверждена выявленной гиперэкспрессией экзогенного гена Akt в клетках линии HepG2. В условиях культивирования в бессывороточной среде экспрессия была низкой или даже ниже уровня детекции в клетках линии HepG2, трансфици- рованных только вектором; тем не менее, уровень экспрессии этого белка возрастал после трансфекции клеток консти- тутивно экспрессирующимся геном Akt. Экспрессия остеопонтина снижалась после трансфекции клеток линии HepG2 доминантно негативным геном Akt. Выводы: ген протеинкиназы В регулирует экспрессию остеопонтина на уровне РНК и белка. Предполагается, что его синтез может быть блокирован путем инактивации гена Akt.
This work was supported by grants from Natural Science Foundation of Jiangsu Province(BK2004157), and the Key Innovative Project of Nanjing Medical University (CX2003008).
en
Інститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р.Є. Кавецького НАН України
Experimental Oncology
Original contributions
Osteopontin regulation by protein kinase B (Akt) in HepG2 cells
Регуляция экспрессии остеопонтина при участии протеинкиназы в В клетках линии HepG2
Article
published earlier
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
title Osteopontin regulation by protein kinase B (Akt) in HepG2 cells
spellingShingle Osteopontin regulation by protein kinase B (Akt) in HepG2 cells
Zhang, G.
Huang, Z.
Shi, R.
Lin, Y.
Hao, B.
Original contributions
title_short Osteopontin regulation by protein kinase B (Akt) in HepG2 cells
title_full Osteopontin regulation by protein kinase B (Akt) in HepG2 cells
title_fullStr Osteopontin regulation by protein kinase B (Akt) in HepG2 cells
title_full_unstemmed Osteopontin regulation by protein kinase B (Akt) in HepG2 cells
title_sort osteopontin regulation by protein kinase b (akt) in hepg2 cells
author Zhang, G.
Huang, Z.
Shi, R.
Lin, Y.
Hao, B.
author_facet Zhang, G.
Huang, Z.
Shi, R.
Lin, Y.
Hao, B.
topic Original contributions
topic_facet Original contributions
publishDate 2006
language English
container_title Experimental Oncology
publisher Інститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р.Є. Кавецького НАН України
format Article
title_alt Регуляция экспрессии остеопонтина при участии протеинкиназы в В клетках линии HepG2
description Aim: The mechanism responsible for osteopontin regulation is not understood in HepG2 cells. The aim of this study was to investigate the relationship between protein kinase B (Akt), a key gene in PI3K signal transduction pathway, and osteopontin expression. Methods: HepG2 cells were transfected with constitutively active Akt and dominant negative Akt using lipofectin. The Akt transfection was confirmed by Western blot analysis. Osteopontin expression was detected by both Northern blot and Western blot. Results: Overexpression of exogenous Akt was detected in HepG2 cells by Western blot, indicating that HepG2 cells were successfully transfected with the Akt genes. In serum-free condition, the expression of osteopontin was either low or undetectable in HepG2 cells transfected with vector only, however, the expression increased after transfection of cells with constitutively active Akt. Osteopontin expression decreased when HepG2 cells were transfected with dominant negative Akt. Conclusion: Protein kinase B (Akt) gene regulated osteopontin expression in RNA level and protein level, suggesting that osteopontin synthesis can be blocked by inactivation of the Akt gene. This leads to a potential means of intervention for the inhibition of metastases in liver cancer. Цель: механизм регуляции экспресии остеопонтина еще детально не изучен. Целью данного исследования было изучение взаимосвязи между протеинкиназой В (Akt), ключевым геном PI3K пути сигнальной трансдукции, и экспрессией остеопон- тина. Методы: при помощи липофектина клетки HepG2 трансфецировали конститутивно экспрессирующимся геном Akt и доминантно негативным геном Akt. Akt-трансфектанты отбирали при помощи Вестерн-блоттинга. Детекцию экспрессии остеопонтина осуществляли методами Нозерн- и Вестерн-блоттинга. Результаты: эффективность трансфекции была подтверждена выявленной гиперэкспрессией экзогенного гена Akt в клетках линии HepG2. В условиях культивирования в бессывороточной среде экспрессия была низкой или даже ниже уровня детекции в клетках линии HepG2, трансфици- рованных только вектором; тем не менее, уровень экспрессии этого белка возрастал после трансфекции клеток консти- тутивно экспрессирующимся геном Akt. Экспрессия остеопонтина снижалась после трансфекции клеток линии HepG2 доминантно негативным геном Akt. Выводы: ген протеинкиназы В регулирует экспрессию остеопонтина на уровне РНК и белка. Предполагается, что его синтез может быть блокирован путем инактивации гена Akt.
issn 1812-9269
url https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/134159
citation_txt Osteopontin regulation by protein kinase B (Akt) in HepG2 cells / G. Zhang, Z. Huang, R. Shi, Y. Lin, B. Hao // Experimental Oncology. — 2006. — Т. 28, № 1. — С. 36-39. — Бібліогр.: 29 назв. — англ.
work_keys_str_mv AT zhangg osteopontinregulationbyproteinkinasebaktinhepg2cells
AT huangz osteopontinregulationbyproteinkinasebaktinhepg2cells
AT shir osteopontinregulationbyproteinkinasebaktinhepg2cells
AT liny osteopontinregulationbyproteinkinasebaktinhepg2cells
AT haob osteopontinregulationbyproteinkinasebaktinhepg2cells
AT zhangg regulâciâékspressiiosteopontinapriučastiiproteinkinazyvvkletkahliniihepg2
AT huangz regulâciâékspressiiosteopontinapriučastiiproteinkinazyvvkletkahliniihepg2
AT shir regulâciâékspressiiosteopontinapriučastiiproteinkinazyvvkletkahliniihepg2
AT liny regulâciâékspressiiosteopontinapriučastiiproteinkinazyvvkletkahliniihepg2
AT haob regulâciâékspressiiosteopontinapriučastiiproteinkinazyvvkletkahliniihepg2
first_indexed 2025-12-07T19:43:20Z
last_indexed 2025-12-07T19:43:20Z
_version_ 1850879875946119168

Similar Items