Влияние условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека

Изучено влияние различных условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность (ЖС) и колониеобразующую активность свежевыделенных и криоконсервированных клеток эмбриональной печени (КЭП) человека 7-10 недель гестации. Использование раствора Хенкса как среды отмывания (СО) приводит к снижению об...

Full description

Saved in:
Bibliographic Details
Published in:Проблемы криобиологии и криомедицины
Date:2002
Main Authors: Скоробогатова, Н.Г., Грищук, В.П., Петренко, А.Ю.
Format: Article
Language:Russian
Published: Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України 2002
Subjects:
Online Access:https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/136842
Tags: Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
Journal Title:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Cite this:Влияние условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека / Н.Г. Скоробогатова, В.П. Грищук, А.Ю. Петренко // Проблемы криобиологии. — 2002. — № 4. — С. 16–23. — Бібліогр.: 19 назв. — рос.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-136842
record_format dspace
spelling Скоробогатова, Н.Г.
Грищук, В.П.
Петренко, А.Ю.
2018-06-16T16:52:02Z
2018-06-16T16:52:02Z
2002
Влияние условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека / Н.Г. Скоробогатова, В.П. Грищук, А.Ю. Петренко // Проблемы криобиологии. — 2002. — № 4. — С. 16–23. — Бібліогр.: 19 назв. — рос.
0233-7673
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/136842
547.544:615.361.36.014.413
Изучено влияние различных условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность (ЖС) и колониеобразующую активность свежевыделенных и криоконсервированных клеток эмбриональной печени (КЭП) человека 7-10 недель гестации. Использование раствора Хенкса как среды отмывания (СО) приводит к снижению общего количества и количества жизнеспособных КЭП. Замена NaCl на сахарозу снижает повреждающее действие процедуры отмывания криопротектора. При этом медленное введение сахарозо-солевого раствора (ССР) позволяет в большей степени сохранить ЖС клеток по сравнению с быстрым способом добавления. Оценку повреждающего действия этапа удаления ДМСО проводили 2 методами окрашивания (трипановым синим и бромистым этидием), учитывая общее количество клеток, ЖС и выход жизнеспособных клеток (ВЖК). Результаты, полученные при различных условиях удаления криопротектора, не зависели от метода оценки и показали, что ВЖК является наиболее чувствительным параметром жизнеспособности криоконсервированных клеток. Колониеобразующая активность КЭП человека при культивировании в агаре на фидерном слое, содержащем лейкоциты здоровых взрослых доноров, после криоконсервирования и медленного удаления ДМСО с помощью ССР оставалась на уровне нативного контроля. Полученные результаты свидетельствуют о том, что ССР меньше повреждает КЭП человека на этапе удаления криопротектора ДМСО.
Вивчено вплив різних умов видалення кріопротектора ДМСО на життєздатність і колонієутворюючу активність нативних і кріоконсервованих клітин ембріональної печінки (КЕП) людини 7-10 тижнів гестації. Використання розчину Хенкса як середовища відмивання приводить до зниження загальної кількості і кількості життєздатних КЕП. Заміна NaCl на сахарозу знижує негативний вплив процедури видалення кріопротектора. При цьому повільне введення сахарозо-сольового розчину (ССР) дозволяє більше зберегти життєздатність клітин у порівнянні зі швидким способом відмивання. Оцінку дії етапу видалення ДМСО проводили 2 методами фарбування (трипановим синім і бромистим етидієм), враховуючи загальну кількість клітин, життєздатність і вихід життєздатних клітин. Результати, отримані при різних умовах видалення кріопротектора, не залежали від методу оцінки і показали, що вихід життєздатних клітин є найбільш чуттєвим параметром життєздатності кріоконсервованих клітин. Колонієутворююча активність КЕП людини при культивуванні в агарі на фідері, що містить лейкоцити здорових дорослих донорів, після кріоконсервування і повільного видалення ДМСО за допомогою ССР залишалася на рівні нативного контроля. Отримані результати свідчать про те, що ССР найменше ушкоджує КЕП людини на етапі видалення кріопротектора ДМСО.
The authors studied the influence of various conditions of Me₂SO cryoprotectant removal on viability and colony forming activity of freshly isolated and cryopreserved cells of human fetal liver (HFL) of 7-10 gestation weeks. Usage of Hanks solution as a washing-out medium (WM) leads to a decrease in both total number of HFL cells and their viability. Substitution of NaCl with sucrose decreases the damaging effect of cryoprotectant washing-out procedure. In this case a slow introduction of sucrose based saline (SBS) allows to preserve the cells’ viability when comparing with rapid washing-out. Estimation of damaging effect of Me₂SO removal stage was performed by two staining methods (trypan blue and ethidium bromide) with determining the total cell number, viability and cell survival. The results, obtained under various cryoprotectant removal conditions, did not depend on estimation method and showed that cell survival was the most sensible parameter for viability of cryopreserved cells. The value of colony forming activity of HFL cells by culturing in agar on feeder layer with leukocytes of healthy adult donors after cryopreservation and slow removing of Me₂SO with SBS was at the control level. Obtained results testify to the fact that SBS does less damages to HFL cells at the stage of Me₂SO cryoprotectant removal.
ru
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
Проблемы криобиологии и криомедицины
Теоретическая и экспериментальная криобиология
Влияние условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека
Influence of Me₂SO Cryoprotectant Removal Conditions to Viability and Colony Forming Activity of Cryopreserved Cells of Human Fetal Liver
Article
published earlier
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
title Влияние условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека
spellingShingle Влияние условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека
Скоробогатова, Н.Г.
Грищук, В.П.
Петренко, А.Ю.
Теоретическая и экспериментальная криобиология
title_short Влияние условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека
title_full Влияние условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека
title_fullStr Влияние условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека
title_full_unstemmed Влияние условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека
title_sort влияние условий удаления криопротектора дмсо на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека
author Скоробогатова, Н.Г.
Грищук, В.П.
Петренко, А.Ю.
author_facet Скоробогатова, Н.Г.
Грищук, В.П.
Петренко, А.Ю.
topic Теоретическая и экспериментальная криобиология
topic_facet Теоретическая и экспериментальная криобиология
publishDate 2002
language Russian
container_title Проблемы криобиологии и криомедицины
publisher Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
format Article
title_alt Influence of Me₂SO Cryoprotectant Removal Conditions to Viability and Colony Forming Activity of Cryopreserved Cells of Human Fetal Liver
description Изучено влияние различных условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность (ЖС) и колониеобразующую активность свежевыделенных и криоконсервированных клеток эмбриональной печени (КЭП) человека 7-10 недель гестации. Использование раствора Хенкса как среды отмывания (СО) приводит к снижению общего количества и количества жизнеспособных КЭП. Замена NaCl на сахарозу снижает повреждающее действие процедуры отмывания криопротектора. При этом медленное введение сахарозо-солевого раствора (ССР) позволяет в большей степени сохранить ЖС клеток по сравнению с быстрым способом добавления. Оценку повреждающего действия этапа удаления ДМСО проводили 2 методами окрашивания (трипановым синим и бромистым этидием), учитывая общее количество клеток, ЖС и выход жизнеспособных клеток (ВЖК). Результаты, полученные при различных условиях удаления криопротектора, не зависели от метода оценки и показали, что ВЖК является наиболее чувствительным параметром жизнеспособности криоконсервированных клеток. Колониеобразующая активность КЭП человека при культивировании в агаре на фидерном слое, содержащем лейкоциты здоровых взрослых доноров, после криоконсервирования и медленного удаления ДМСО с помощью ССР оставалась на уровне нативного контроля. Полученные результаты свидетельствуют о том, что ССР меньше повреждает КЭП человека на этапе удаления криопротектора ДМСО. Вивчено вплив різних умов видалення кріопротектора ДМСО на життєздатність і колонієутворюючу активність нативних і кріоконсервованих клітин ембріональної печінки (КЕП) людини 7-10 тижнів гестації. Використання розчину Хенкса як середовища відмивання приводить до зниження загальної кількості і кількості життєздатних КЕП. Заміна NaCl на сахарозу знижує негативний вплив процедури видалення кріопротектора. При цьому повільне введення сахарозо-сольового розчину (ССР) дозволяє більше зберегти життєздатність клітин у порівнянні зі швидким способом відмивання. Оцінку дії етапу видалення ДМСО проводили 2 методами фарбування (трипановим синім і бромистим етидієм), враховуючи загальну кількість клітин, життєздатність і вихід життєздатних клітин. Результати, отримані при різних умовах видалення кріопротектора, не залежали від методу оцінки і показали, що вихід життєздатних клітин є найбільш чуттєвим параметром життєздатності кріоконсервованих клітин. Колонієутворююча активність КЕП людини при культивуванні в агарі на фідері, що містить лейкоцити здорових дорослих донорів, після кріоконсервування і повільного видалення ДМСО за допомогою ССР залишалася на рівні нативного контроля. Отримані результати свідчать про те, що ССР найменше ушкоджує КЕП людини на етапі видалення кріопротектора ДМСО. The authors studied the influence of various conditions of Me₂SO cryoprotectant removal on viability and colony forming activity of freshly isolated and cryopreserved cells of human fetal liver (HFL) of 7-10 gestation weeks. Usage of Hanks solution as a washing-out medium (WM) leads to a decrease in both total number of HFL cells and their viability. Substitution of NaCl with sucrose decreases the damaging effect of cryoprotectant washing-out procedure. In this case a slow introduction of sucrose based saline (SBS) allows to preserve the cells’ viability when comparing with rapid washing-out. Estimation of damaging effect of Me₂SO removal stage was performed by two staining methods (trypan blue and ethidium bromide) with determining the total cell number, viability and cell survival. The results, obtained under various cryoprotectant removal conditions, did not depend on estimation method and showed that cell survival was the most sensible parameter for viability of cryopreserved cells. The value of colony forming activity of HFL cells by culturing in agar on feeder layer with leukocytes of healthy adult donors after cryopreservation and slow removing of Me₂SO with SBS was at the control level. Obtained results testify to the fact that SBS does less damages to HFL cells at the stage of Me₂SO cryoprotectant removal.
issn 0233-7673
url https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/136842
citation_txt Влияние условий удаления криопротектора ДМСО на жизнеспособность и колониеобразующую активность криоконсервированных клеток эмбриональной печени человека / Н.Г. Скоробогатова, В.П. Грищук, А.Ю. Петренко // Проблемы криобиологии. — 2002. — № 4. — С. 16–23. — Бібліогр.: 19 назв. — рос.
work_keys_str_mv AT skorobogatovang vliânieusloviiudaleniâkrioprotektoradmsonažiznesposobnostʹikolonieobrazuûŝuûaktivnostʹkriokonservirovannyhkletokémbrionalʹnoipečeničeloveka
AT griŝukvp vliânieusloviiudaleniâkrioprotektoradmsonažiznesposobnostʹikolonieobrazuûŝuûaktivnostʹkriokonservirovannyhkletokémbrionalʹnoipečeničeloveka
AT petrenkoaû vliânieusloviiudaleniâkrioprotektoradmsonažiznesposobnostʹikolonieobrazuûŝuûaktivnostʹkriokonservirovannyhkletokémbrionalʹnoipečeničeloveka
AT skorobogatovang influenceofme2socryoprotectantremovalconditionstoviabilityandcolonyformingactivityofcryopreservedcellsofhumanfetalliver
AT griŝukvp influenceofme2socryoprotectantremovalconditionstoviabilityandcolonyformingactivityofcryopreservedcellsofhumanfetalliver
AT petrenkoaû influenceofme2socryoprotectantremovalconditionstoviabilityandcolonyformingactivityofcryopreservedcellsofhumanfetalliver
first_indexed 2025-12-01T01:55:07Z
last_indexed 2025-12-01T01:55:07Z
_version_ 1850858995984629760