Оптимизация режима насыщения-отмывания овариальной ткани растворами проникающих криопротекторов
Збережено в:
| Дата: | 2015 |
|---|---|
| Автори: | , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Russian |
| Опубліковано: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2015
|
| Назва видання: | Проблемы криобиологии и криомедицины |
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/137126 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Оптимизация режима насыщения-отмывания овариальной ткани растворами проникающих криопротекторов / И.А. Трутаева, В.В. Кирошка, Ю.О. Божкова, Т.П. Бондаренко // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2015. — Т. 25, № 2. — С. 189. — рос. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-137126 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-1371262025-02-09T17:19:56Z Оптимизация режима насыщения-отмывания овариальной ткани растворами проникающих криопротекторов Optimization of ovarian tissue saturation with and washing of penetrating cryoprotectants solutions Трутаева, И.А. Кирошка, В.В. Божкова, Ю.О. Бондаренко, Т.П. Тезисы 2015 Article Оптимизация режима насыщения-отмывания овариальной ткани растворами проникающих криопротекторов / И.А. Трутаева, В.В. Кирошка, Ю.О. Божкова, Т.П. Бондаренко // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2015. — Т. 25, № 2. — С. 189. — рос. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/137126 ru Проблемы криобиологии и криомедицины application/pdf Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| language |
Russian |
| topic |
Тезисы Тезисы |
| spellingShingle |
Тезисы Тезисы Трутаева, И.А. Кирошка, В.В. Божкова, Ю.О. Бондаренко, Т.П. Оптимизация режима насыщения-отмывания овариальной ткани растворами проникающих криопротекторов Проблемы криобиологии и криомедицины |
| format |
Article |
| author |
Трутаева, И.А. Кирошка, В.В. Божкова, Ю.О. Бондаренко, Т.П. |
| author_facet |
Трутаева, И.А. Кирошка, В.В. Божкова, Ю.О. Бондаренко, Т.П. |
| author_sort |
Трутаева, И.А. |
| title |
Оптимизация режима насыщения-отмывания овариальной ткани растворами проникающих криопротекторов |
| title_short |
Оптимизация режима насыщения-отмывания овариальной ткани растворами проникающих криопротекторов |
| title_full |
Оптимизация режима насыщения-отмывания овариальной ткани растворами проникающих криопротекторов |
| title_fullStr |
Оптимизация режима насыщения-отмывания овариальной ткани растворами проникающих криопротекторов |
| title_full_unstemmed |
Оптимизация режима насыщения-отмывания овариальной ткани растворами проникающих криопротекторов |
| title_sort |
оптимизация режима насыщения-отмывания овариальной ткани растворами проникающих криопротекторов |
| publisher |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| publishDate |
2015 |
| topic_facet |
Тезисы |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/137126 |
| citation_txt |
Оптимизация режима насыщения-отмывания овариальной ткани растворами проникающих криопротекторов / И.А. Трутаева, В.В. Кирошка, Ю.О. Божкова, Т.П. Бондаренко // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2015. — Т. 25, № 2. — С. 189. — рос. |
| series |
Проблемы криобиологии и криомедицины |
| work_keys_str_mv |
AT trutaevaia optimizaciârežimanasyŝeniâotmyvaniâovarialʹnojtkanirastvoramipronikaûŝihkrioprotektorov AT kiroškavv optimizaciârežimanasyŝeniâotmyvaniâovarialʹnojtkanirastvoramipronikaûŝihkrioprotektorov AT božkovaûo optimizaciârežimanasyŝeniâotmyvaniâovarialʹnojtkanirastvoramipronikaûŝihkrioprotektorov AT bondarenkotp optimizaciârežimanasyŝeniâotmyvaniâovarialʹnojtkanirastvoramipronikaûŝihkrioprotektorov AT trutaevaia optimizationofovariantissuesaturationwithandwashingofpenetratingcryoprotectantssolutions AT kiroškavv optimizationofovariantissuesaturationwithandwashingofpenetratingcryoprotectantssolutions AT božkovaûo optimizationofovariantissuesaturationwithandwashingofpenetratingcryoprotectantssolutions AT bondarenkotp optimizationofovariantissuesaturationwithandwashingofpenetratingcryoprotectantssolutions |
| first_indexed |
2025-11-28T13:49:07Z |
| last_indexed |
2025-11-28T13:49:07Z |
| _version_ |
1850042226954993664 |
| fulltext |
Оптимизация режима насыщения-отмывания овариальной
ткани растворами проникающих криопротекторов
И.А. Трутаева, В.В. Кирошка, Ю.О. Божкова, Т.П. Бондаренко
Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков
Optimization of Ovarian Tissue Saturation with
and Washing of Penetrating Cryoprotectants Solutions
I.A. Trutaeva, V.V.Kiroshka, Yu.O.Bozhkova, T.P. Bondarenko
Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine
of the National Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine
В настоящее время одной из задач для повышения
эффективности протокола криоконсервирования ова-
риальной ткани является снижение осмотического
повреждения различных типов клеток в структуре ткани
при насыщении-отмывании гиперосмолярными раство-
рами проникающих криопротекторов (КП).
Цель работы – исследование сохранности морфоло-
гической структуры овариальной ткани и характера
объемных изменений ооцитов при многоэтапном насы-
щении-отмывании растворами проникающих КП в
зависимости от композиционного состава среды инку-
бации.
В работе были использованы фрагменты овариаль-
ной ткани. В качестве КП применяли 1,2-ПД и ДМСО.
Насыщение ткани КП проводили с помощью сред: 1 –
ДМЕМ; 2 – ДМЕМ, 10% ЭТС; 3 – ДМЕМ, 200 мМ
сахарозы. Криопротекторы добавляли поэтапно (10%→
20%) при 22°С. Время инкубации составляло 30 мин на
каждом этапе. Для удаления КП использовали два режи-
ма: 1 – ДМЕМ, 250 мМ сахарозы, 10% КП → ДМЕМ,
250 мМ сахарозы → ДМЕМ; 2 – ДМЕМ+500 мМ маннита,
10% КП → ДМЕМ + 500 мМ маннита → ДМЕМ + 250 мМ
маннита. Время инкубации составляло 10 мин на каждом
этапе (22°С).
Динамика морфологических трансформаций ова-
риальной ткани и объемные изменения ооцитов опреде-
лялись композиционным составом среды насыщения и
типом используемого КП. Так, при насыщении ткани
КП средами 2 и 3 наблюдалась аккумуляция жидкости в
строме овариальной ткани, тогда как при использовании
среды 1 в структуре ткани сохранялись плотные меж-
клеточные контакты. При этом насыщение ткани 1,2-ПД
приводило к значимому увеличению объема ооцитов в
среде 2 относительно контроля и его уменьшению в сре-
де 3. При использовании ДМСО объемные изменения
ооцитов не имели значимых отличий в зависимости от
состава среды насыщения, что обусловлено более высо-
ким коэффициентом проницаемости этого КП. Следует
отметить, что уровень сохранности фолликулов после
удаления КП был сопоставим при обоих исследуемых
режимах и определялся композиционным составом сре-
ды насыщения. Максимальная сохранность фолликулов
после удаления КП была выявлена при использовании
для насыщения среды 3. После чего была проведена
инкубация ткани в физиологических условиях. При этом
восстановление морфологической целостности ткани
наблюдалось в случае использования режима 2 для уда-
ления 1,2-ПД и ДМСО и режима 1 для ДМСО.
Таким образом, использование среды ДМЕМ, содер-
жащей 200 мМ сахарозы, для насыщения овариальной
ткани КП и многоступенчатого режима отмывки раст-
вором маннитола приводит к максимальной сохранности
ее морфологической структуры.
Currently, one of the tasks to improve the protocol for
ovarian tissue cryopreservation is the reduction of the
osmotic damage of different types of cells of the tissue
when adding and removing hyperosmolar solutions of
penetrating cryoprotectants (CP).
The research aim was to examine the preservation of
ovarian tissue morphological structure and the character of
volumetric changes of oocyte during multistage adding/
removing of penetrating CP solutions depending on the
composition of incubation medium.
The ovarian tissue fragments were used in the research.
As the CP we used 1,2-PD and DMSO. Tissue was saturated
by the following media: 1 – DMEM; 2 – DMEM, 10% FBS;
3 – DMEM, 200 mÌ sucrose. CPs were added step-by-step
(10%→20%) at 22°C. The incubation time was 30 minutes at
each step. Two procedures of removing the CP were tested:
1) DMEM, 250 mM sucrose, 10% CP→ DMEM, 250mM
sucrose → DMEM; 2) DMEM + 500 mM mannitol + 10%
CP → DMEM + 500mM mannitol → DMEM + 250mM
mannitol. The incubation time was 10 min at each stage,
22°Ñ.
It was shown that the dynamics of morphological
transformation of ovarian tissue depended on the compo-
sition of saturation medium and the type of used CP. In
particular, in case of using the media 2 and 3 to saturate the
tissue we observed accumulation of fluid in the ovarian
tissue stroma, whereas the application of the medium 1
resulted in preservation of tight intercellular contact between
stromal elements in the tissue structure. Saturation of tissue
by 1,2-PD resulted in a significant increase of oocyte volume
in a medium 2 comparing to the control and its reduction in
the medium 3. Using DMSO did not result in significant
volumetric changes in oocytes depending on the compo-
sition of the saturation medium, likely due to the higher
permeability coefficient of this CP. It should be noted that
the level of follicles integrity after CP removal was similar
after both procedures, and was determined only by the
composition of the saturation medium. Maximum follicles
integrity after removing the CP was found in the case of
saturation medium 3. The removal of CPs was followed by
incubation of the tissue in physiological conditions. The
recovery of tissue morphological structure was observed
in the case of procedure 2 for 1,2-PD and DMSO removal
and for DMSO in case of procedure 1.
Thus, using DMEM medium with 200 mM sucrose for
the procedure of ovarian tissue saturation by CPs and
multistep washing procedures using mannitol solution
results in the maximum preservation of tissue morphological
structure.
проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 25, №/issue 2, 2015
189
|