Создание трехмерного трансплантата поверхностных слоев клеток роговицы
Gespeichert in:
| Veröffentlicht in: | Проблемы криобиологии и криомедицины |
|---|---|
| Datum: | 2015 |
| Hauptverfasser: | , , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Russian |
| Veröffentlicht: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2015
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/137141 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Создание трехмерного трансплантата поверхностных слоев клеток роговицы / А.С. Кавелина, А.Г. Попандопуло, О.С. Прокопюк, М.В. Савчук // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2015. — Т. 25, № 2. — С. 197. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-137141 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Кавелина, А.С. Попандопуло, А.Г. Прокопюк, О.С. Савчук, М.В. 2018-06-17T00:00:29Z 2018-06-17T00:00:29Z 2015 Создание трехмерного трансплантата поверхностных слоев клеток роговицы / А.С. Кавелина, А.Г. Попандопуло, О.С. Прокопюк, М.В. Савчук // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2015. — Т. 25, № 2. — С. 197. — рос. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/137141 ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии и криомедицины Тезисы Создание трехмерного трансплантата поверхностных слоев клеток роговицы Creation of 3d graft of corneal surface layers Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Создание трехмерного трансплантата поверхностных слоев клеток роговицы |
| spellingShingle |
Создание трехмерного трансплантата поверхностных слоев клеток роговицы Кавелина, А.С. Попандопуло, А.Г. Прокопюк, О.С. Савчук, М.В. Тезисы |
| title_short |
Создание трехмерного трансплантата поверхностных слоев клеток роговицы |
| title_full |
Создание трехмерного трансплантата поверхностных слоев клеток роговицы |
| title_fullStr |
Создание трехмерного трансплантата поверхностных слоев клеток роговицы |
| title_full_unstemmed |
Создание трехмерного трансплантата поверхностных слоев клеток роговицы |
| title_sort |
создание трехмерного трансплантата поверхностных слоев клеток роговицы |
| author |
Кавелина, А.С. Попандопуло, А.Г. Прокопюк, О.С. Савчук, М.В. |
| author_facet |
Кавелина, А.С. Попандопуло, А.Г. Прокопюк, О.С. Савчук, М.В. |
| topic |
Тезисы |
| topic_facet |
Тезисы |
| publishDate |
2015 |
| language |
Russian |
| container_title |
Проблемы криобиологии и криомедицины |
| publisher |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Creation of 3d graft of corneal surface layers |
| issn |
0233-7673 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/137141 |
| citation_txt |
Создание трехмерного трансплантата поверхностных слоев клеток роговицы / А.С. Кавелина, А.Г. Попандопуло, О.С. Прокопюк, М.В. Савчук // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2015. — Т. 25, № 2. — С. 197. — рос. |
| work_keys_str_mv |
AT kavelinaas sozdanietrehmernogotransplantatapoverhnostnyhsloevkletokrogovicy AT popandopuloag sozdanietrehmernogotransplantatapoverhnostnyhsloevkletokrogovicy AT prokopûkos sozdanietrehmernogotransplantatapoverhnostnyhsloevkletokrogovicy AT savčukmv sozdanietrehmernogotransplantatapoverhnostnyhsloevkletokrogovicy AT kavelinaas creationof3dgraftofcornealsurfacelayers AT popandopuloag creationof3dgraftofcornealsurfacelayers AT prokopûkos creationof3dgraftofcornealsurfacelayers AT savčukmv creationof3dgraftofcornealsurfacelayers |
| first_indexed |
2025-11-25T20:35:34Z |
| last_indexed |
2025-11-25T20:35:34Z |
| _version_ |
1850523911958036480 |
| fulltext |
проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 25, №/issue 2, 2015
197
Создание трехмерного трансплантата
поверхностных слоев клеток роговицы
А.С. Кавелина1, А.Г. Попандопуло1, О.С. Прокопюк2, М.В. Савчук1
1Институт неотложной и восстановительной хирургии им. В.К. Гусака, г. Донецк
2Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков
Creation of 3d Graft of Corneal Surface Layers
A.S. Kavelina1, A.G. Popandopulo1, O.S. Prokopyuk2, M.V. Savchuk1
1V.K. Husak Institute of Urgent and Reconstructive Surgery, Donetsk, Ukraine
2Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine
of the National Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine
В клинической медицине возрастает интерес к ис-
пользованию тканевых биогенных стимуляторов, в
частности, к амниону. Результаты исследований in vitro
и in vivo доказали, что мембрана может быть успешно
использована в качестве субстрата для культивирования
эпителиальных стволовых клеток роговицы человека и
их последующего применения в лечении тяжелой пато-
логии поверхности глаза. Цель работы – создание
трехмерного трансплантата слоев клеток роговицы на
амниотической оболочке (АО) путем поэтапного культи-
вирования лимбальных стволовых клеток (ЛСК) и клеток
плоского эпителия (КПЭ) роговицы человека на стро-
мальной стороне и базальной мембране.
Для исследования использовали криозамороженный
амнион и первичные культуры, выделенные из энуклеи-
рованной роговицы человека [Попандопуло А.Г., 2014].
Размороженную мембрану аккуратно расправляли на
стерильной фольге и разрезали на небольшие кусочки
размером 1x1см2. В 8-луночное плато помещали по
четыре образца базальной мембраной вверх и четыре –
стромальной стороной. Наносили на поверхности
амниона по 10 тыс. ЛСК в 200 мкл питательной среды
[Гринь В.К., 2011]. После достижения конфлюэнтного
лимбального монослоя на поверхности АО, наносили
суспензию КПЭ роговицы и культивировали в течение
3-х дней. Для идентификации [Turksen K., 2012.] культи-
вированных клеток роговицы использовали иммуногис-
тохимию (Р63, цитокератин 19, цитокератин 3/12,
виментин, α-SMA, кератин сульфат, Ki 67, CD 34, CD 45,
CD 117, ALDH3A1).
Результаты исследования in vitro свидетельствуют о
повышенном потенциале пролиферации и дифферен-
циации субпопуляции ЛСК роговицы человека. Специ-
фические маркеры, характерные для этого вида клеток,
не экспрессируются в клетках плоского эпителия.
Поэтапное культивирование клеток роговицы человека
на АО в течение 3–7 дней позволило сформировать на
его поверхности полноценные конфлюэнтные монослои
с прочными состоятельными межклеточными взаимо-
связями. Полупрозрачная мембрана обладает прочнос-
тью и практичностью. Можно предположить, что ее
морфологические характеристики благоприятно влияют
на способность усиливать рост и дифференциацию ЛСК.
Культивирование поверхностных слоев клеток роговицы
на стромальной стороне и базальной мембране амниона
существенно не отличалось.
Clinical medicine represents an increasing interest to
the application of tissue biogenic stimulators, in particular,
to the amnion. In vitro and in vivo investigations have
shown that the membrane can be successfully used as a
substrate for culturing epithelial stem cells of human cornea
and their subsequent application when treating severe
ocular surface pathologies. The research aim was to create
three-dimensional graft of cornea cell layers on amniotic
membrane (AM) by stepwise culturing of limbal stem cells
(LSC) and squamous epithelial cells (SEC) of human cornea
on a stromal side and basal membrane.
The research was performed in cryopreserved amnion
and primary cultures derived from an enucleated human
cornea [Papadopoulo A.G., 2014]. Frozen-thawed membrane
was gently spread on a sterile foil and cut into small pieces
of 1x1cm2 size. In each 8-well plate we placed four samples
by a basal side upwards and the four pieces by stromal
side. The amnion surface was covered with 10 thousand of
LSCs in 200 µl of nutritive medium [Grin V.K., 2011]. After
achieving the confluent limbal monolayer on AM surface
the suspension of corneal SEC was introduced and then
cultured for 3 days. Cultured corneal cells were identified
immune histochemically [Turksen K., 2012.] (P63, cytokeratin
19, cytokeratin 3/12, vimentin, α-SMA, keratin sulfate, Ki 67,
CD 34, CD 45, CD 117, ALDH3A1).
The results of in vitro studies showed an increased po-
tential for proliferation and differentiation of human corneal
LSC subpopulation. Specific markers which are characteris-
tic for this type of cells were not expressed in the cells of
the squamous epithelium. The stepwise culturing of human
corneal cells on AM within 3–7 days allowed the formation
on its surface of full confluent monolayers with strong cell-
to-cell bonds. Semitransparent membrane was durable and
efficient. Its morphological characteristics can be assumed
as favorably affecting the ability to enhance the growth
and differentiation of the LCS. Culturing of the corneal
surface layers on stromal cells and the amnion basal
membrane did not significantly differ.
|