Эпитоп Gal-α-1,3-Gal: роль в биологии клетки и трансплантации

Эпитоп Gal-α-1,3-Gal (α-Gal) – это углеводная структура, которая экспрессируется на мембранах клеток млекопитающих, кроме некоторых видов обезьян и человека, и вызывает гиперострый иммунный ответ при ксенотрансплантации. В приведенной работе кратко рассматриваются вопросы эволюции эпитопа α-Gal, е...

Ausführliche Beschreibung

Gespeichert in:
Bibliographische Detailangaben
Veröffentlicht in:Проблемы криобиологии и криомедицины
Datum:2016
Hauptverfasser: Богуславский, К.И., Божок, Г.А., Легач, Е.И., Фурда, И.В., Бондаренко, Т.П.
Format: Artikel
Sprache:Russian
Veröffentlicht: Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України 2016
Schlagworte:
Online Zugang:https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/137363
Tags: Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Zitieren:Эпитоп Gal-α-1,3-Gal: роль в биологии клетки и трансплантации / К.И. Богуславский, Г.А. Божок, Е.И. Легач, И.В. Фурда, Т.П. Бондаренко // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2016. — Т. 26, № 1. — С. 3–12. — Бібліогр.: 45 назв. — рос.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-137363
record_format dspace
spelling Богуславский, К.И.
Божок, Г.А.
Легач, Е.И.
Фурда, И.В.
Бондаренко, Т.П.
2018-06-17T10:37:30Z
2018-06-17T10:37:30Z
2016
Эпитоп Gal-α-1,3-Gal: роль в биологии клетки и трансплантации / К.И. Богуславский, Г.А. Божок, Е.И. Легач, И.В. Фурда, Т.П. Бондаренко // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2016. — Т. 26, № 1. — С. 3–12. — Бібліогр.: 45 назв. — рос.
0233-7673
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/137363
576.314.63:612.6.089.6
Эпитоп Gal-α-1,3-Gal (α-Gal) – это углеводная структура, которая экспрессируется на мембранах клеток млекопитающих, кроме некоторых видов обезьян и человека, и вызывает гиперострый иммунный ответ при ксенотрансплантации. В приведенной работе кратко рассматриваются вопросы эволюции эпитопа α-Gal, его распространенности в животном мире, биологической роли, а также обсуждаются проблемы использования протезов свиного происхождения в медицинской практике. По многим причинам данный вид животных является наиболее подходящим для получения биопротезов сердечных клапанов, сосудов и биоскаффолдов, однако вследствие экспрессии в их организме большого количества эпитопа α-Gal требуется специальная обработка для его удаления. В настоящей обзорной статье предпринята попытка обобщить результаты изучения экспрессии эпитопа α-Gal после низкотемпературной обработки, поскольку данный метод широко используется для хранения биопротезов перед имплантацией.
Епітоп Gal-α-1,3-Gal (α-Gal) – це вуглеводна структура, яка експресується на мембранах клітин ссавців, окрім деяких видів мавп і людини, та викликає гіпергостру імунну відповідь при ксенотрансплантації. У наведеній роботі коротко розглядаються питання еволюції епітопа α-Gal, його поширеності у тваринному світі, біологічної ролі, а також обговорюються проблеми використання протезів свиного походження у медичній практиці. З багатьох причин даний вид тварин найбільш прийнятний для отримання протезів серцевих клапанів, судин та біоскафолдів, однак внаслідок експресії в їх організмі великої кількості епітопа α-Gal необхідною є спеціальна обробка для його елімінації. У даній оглядовій статті зроблено спробу узагальнити результати вивчення експресії епітопа α-Gal після низькотемпературної обробки, оскільки цей метод широко використовується для зберігання біопротезів перед імплантацією.
Gal-α-1,3-Gal (α-Gal) epitope is a carbohydrate structure, which is expressed on cell membranes of almost all the mammals except some species of monkeys and human, as well as causes a hyperacute immune response during xenotransplantation. This review briefly describes the issues of the evolution of α-Gal epitope, its distribution in the kingdom of animals, biological role and problems of using prostheses of porcine origin in medical practice. For many reasons, this species of animals is the most suitable to obtain the bioprostheses of cardiac valves, vessels and bioscaffolds, however, due to the high α-Gal epitope expression in their body a special treatment to eliminate it is required. This review attempts to summarize the results on studying the α-Gal epitope expression after low-temperature treatment, since it is widely used to store bioprostheses prior to implantation.
ru
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
Проблемы криобиологии и криомедицины
Обзоры
Эпитоп Gal-α-1,3-Gal: роль в биологии клетки и трансплантации
Gal-α-1,3-Gal epitope: role in cell biology and transplantation
Article
published earlier
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
title Эпитоп Gal-α-1,3-Gal: роль в биологии клетки и трансплантации
spellingShingle Эпитоп Gal-α-1,3-Gal: роль в биологии клетки и трансплантации
Богуславский, К.И.
Божок, Г.А.
Легач, Е.И.
Фурда, И.В.
Бондаренко, Т.П.
Обзоры
title_short Эпитоп Gal-α-1,3-Gal: роль в биологии клетки и трансплантации
title_full Эпитоп Gal-α-1,3-Gal: роль в биологии клетки и трансплантации
title_fullStr Эпитоп Gal-α-1,3-Gal: роль в биологии клетки и трансплантации
title_full_unstemmed Эпитоп Gal-α-1,3-Gal: роль в биологии клетки и трансплантации
title_sort эпитоп gal-α-1,3-gal: роль в биологии клетки и трансплантации
author Богуславский, К.И.
Божок, Г.А.
Легач, Е.И.
Фурда, И.В.
Бондаренко, Т.П.
author_facet Богуславский, К.И.
Божок, Г.А.
Легач, Е.И.
Фурда, И.В.
Бондаренко, Т.П.
topic Обзоры
topic_facet Обзоры
publishDate 2016
language Russian
container_title Проблемы криобиологии и криомедицины
publisher Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
format Article
title_alt Gal-α-1,3-Gal epitope: role in cell biology and transplantation
description Эпитоп Gal-α-1,3-Gal (α-Gal) – это углеводная структура, которая экспрессируется на мембранах клеток млекопитающих, кроме некоторых видов обезьян и человека, и вызывает гиперострый иммунный ответ при ксенотрансплантации. В приведенной работе кратко рассматриваются вопросы эволюции эпитопа α-Gal, его распространенности в животном мире, биологической роли, а также обсуждаются проблемы использования протезов свиного происхождения в медицинской практике. По многим причинам данный вид животных является наиболее подходящим для получения биопротезов сердечных клапанов, сосудов и биоскаффолдов, однако вследствие экспрессии в их организме большого количества эпитопа α-Gal требуется специальная обработка для его удаления. В настоящей обзорной статье предпринята попытка обобщить результаты изучения экспрессии эпитопа α-Gal после низкотемпературной обработки, поскольку данный метод широко используется для хранения биопротезов перед имплантацией. Епітоп Gal-α-1,3-Gal (α-Gal) – це вуглеводна структура, яка експресується на мембранах клітин ссавців, окрім деяких видів мавп і людини, та викликає гіпергостру імунну відповідь при ксенотрансплантації. У наведеній роботі коротко розглядаються питання еволюції епітопа α-Gal, його поширеності у тваринному світі, біологічної ролі, а також обговорюються проблеми використання протезів свиного походження у медичній практиці. З багатьох причин даний вид тварин найбільш прийнятний для отримання протезів серцевих клапанів, судин та біоскафолдів, однак внаслідок експресії в їх організмі великої кількості епітопа α-Gal необхідною є спеціальна обробка для його елімінації. У даній оглядовій статті зроблено спробу узагальнити результати вивчення експресії епітопа α-Gal після низькотемпературної обробки, оскільки цей метод широко використовується для зберігання біопротезів перед імплантацією. Gal-α-1,3-Gal (α-Gal) epitope is a carbohydrate structure, which is expressed on cell membranes of almost all the mammals except some species of monkeys and human, as well as causes a hyperacute immune response during xenotransplantation. This review briefly describes the issues of the evolution of α-Gal epitope, its distribution in the kingdom of animals, biological role and problems of using prostheses of porcine origin in medical practice. For many reasons, this species of animals is the most suitable to obtain the bioprostheses of cardiac valves, vessels and bioscaffolds, however, due to the high α-Gal epitope expression in their body a special treatment to eliminate it is required. This review attempts to summarize the results on studying the α-Gal epitope expression after low-temperature treatment, since it is widely used to store bioprostheses prior to implantation.
issn 0233-7673
url https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/137363
citation_txt Эпитоп Gal-α-1,3-Gal: роль в биологии клетки и трансплантации / К.И. Богуславский, Г.А. Божок, Е.И. Легач, И.В. Фурда, Т.П. Бондаренко // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2016. — Т. 26, № 1. — С. 3–12. — Бібліогр.: 45 назв. — рос.
work_keys_str_mv AT boguslavskiiki épitopgalα13galrolʹvbiologiikletkiitransplantacii
AT božokga épitopgalα13galrolʹvbiologiikletkiitransplantacii
AT legačei épitopgalα13galrolʹvbiologiikletkiitransplantacii
AT furdaiv épitopgalα13galrolʹvbiologiikletkiitransplantacii
AT bondarenkotp épitopgalα13galrolʹvbiologiikletkiitransplantacii
AT boguslavskiiki galα13galepitoperoleincellbiologyandtransplantation
AT božokga galα13galepitoperoleincellbiologyandtransplantation
AT legačei galα13galepitoperoleincellbiologyandtransplantation
AT furdaiv galα13galepitoperoleincellbiologyandtransplantation
AT bondarenkotp galα13galepitoperoleincellbiologyandtransplantation
first_indexed 2025-11-24T18:45:27Z
last_indexed 2025-11-24T18:45:27Z
_version_ 1850492776812118016
fulltext УДК 576.314.63:612.6.089.6 К.И. Богуславский1, Г.А. Божок1*, Е.И. Легач1, И.В. Фурда2, Т.П. Бондаренко1 Эпитоп Gal-ααααα-1,3-Gal: роль в биологии клетки и трансплантации UDC 576.314.63:612.6.089.6 K.I. Bohuslavskyi1, G.A. Bozhok1*, E.I. Legach1, I.V. Furda2, T.P. Bondarenko1 Gal-ααααα-1,3-Gal Epitope: Role in Cell Biology and Transplantation Реферат: Эпитоп Gal-α-1,3-Gal (α-Gal) – это углеводная структура, которая экспрессируется на мембранах клеток млекопитающих, кроме некоторых видов обезьян и человека, и вызывает гиперострый иммунный ответ при ксено- трансплантации. В приведенной работе кратко рассматриваются вопросы эволюции эпитопа α-Gal, его распространенности в животном мире, биологической роли, а также обсуждаются проблемы использования протезов свиного происхождения в медицинской практике. По многим причинам данный вид животных является наиболее подходящим для получения биопротезов сердечных клапанов, сосудов и биоскаффолдов, однако вследствие экспрессии в их организме большого количества эпитопа α-Gal требуется специальная обработка для его удаления. В настоящей обзорной статье предпринята попытка обобщить результаты изучения экспрессии эпитопа α-Gal после низкотемпературной обработки, поскольку данный метод широко используется для хранения биопротезов перед имплантацией. Ключевые слова: эпитоп α-Gal, трансплантация, биопротезы, гипотермическое хранение, криоконсервирование. Реферат: Епітоп Gal-α-1,3-Gal (α-Gal) – це вуглеводна структура, яка експресується на мембранах клітин ссавців, окрім деяких видів мавп і людини, та викликає гіпергостру імунну відповідь при ксенотрансплантації. У наведеній роботі коротко розглядаються питання еволюції епітопа α-Gal, його поширеності у тваринному світі, біологічної ролі, а також обговорюються проблеми використання протезів свиного походження у медичній практиці. З багатьох причин даний вид тварин найбільш прийнятний для отримання протезів серцевих клапанів, судин та біоскафолдів, однак внаслідок експресії в їх організмі великої кількості епітопа α-Gal необхідною є спеціальна обробка для його елімінації. У даній оглядовій статті зроблено спробу узагальнити результати вивчення експресії епітопа α-Gal після низькотемпературної обробки, оскільки цей метод широко використовується для зберігання біопротезів перед імплантацією. Ключові слова: епітоп α-Gal, трансплантація, біопротези, гіпотермічне зберігання, кріоконсервування. Abstract: Gal-α-1,3-Gal (α-Gal) epitope is a carbohydrate structure, which is expressed on cell membranes of almost all the mammals except some species of monkeys and human, as well as causes a hyperacute immune response during xenotrans- plantation. This review briefly describes the issues of the evolution of α-Gal epitope, its distribution in the kingdom of animals, biological role and problems of using prostheses of porcine origin in medical practice. For many reasons, this species of animals is the most suitable to obtain the bioprostheses of cardiac valves, vessels and bioscaffolds, however, due to the high α-Gal epitope expression in their body a special treatment to eliminate it is required. This review attempts to summarize the results on studying the α-Gal epitope expression after low-temperature treatment, since it is widely used to store bioprostheses prior to implantation. Key words: α-Gal epitope, transplantation, bioprosthesis, hypothermic storage, cryopreservation. *Автор, которому необходимо направлять корреспонденцию: ул. Переяславская, 23, г. Харьков, Украина 61016; тел.: (+380 57) 373-30-07, факс: (+380 57) 373-30-84, электронная почта: bozhokgaru@gmail.com *To whom correspondence should be addressed: 23, Pereyaslavskaya str., Kharkov, Ukraine 61016; tel.:+380 57 373 3007, fax: +380 57 373 3084, e-mail: bozhokgaru@gmail.com 1Department of Cryobiochemistry and pharmacology of Neuro-Hu- moral Systems, Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the National Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine 2Kharkov State Zooveterinary Academy, Kharkov, Ukraine 1Отдел криобиохимии и фармакологии нейрогуморальных систем, Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков 2Харьковская государственная зооветеринарная академия Поступила 29.09.2015 Принята в печать 14.01.2016 Проблемы криобиологии и криомедицины. – 2016. – Т. 26, №1. – С. 3–12. © 2016 Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины Received September, 29, 2015 Accepted January, 14, 2016 Probl Cryobiol Cryomed 2016; 26(1): 3–12. © 2016 Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine обзор review Эпитоп Gal-α-1,3-Gal (α-Gal) – углеводная струк- тура, которая экспрессируется на мембранах клеток в организме млекопитающих, кроме человека и не- которых видов обезьян, обитающих на территории Старого Света. У человека в течение жизни выра- батывается высокий титр антител к этому эпитопу, который получил название «главный ксеноантиген» из-за безуспешных попыток в 60-х годах XX века трансплантировать человеку свиные органы. Из- вестно, что связывание натуральных антител, пос- тоянно присутствующих в крови человека, с α-Gal вызывает гиперострое отторжение ксенотранс- плантата, что делает невозможным транспланта- цию органов и тканей от млекопитающих человеку. Epitope Gal-α-1,3-Gal (α-Gal) is a carbohydrate structure, which is expressed on cell membranes in the body of mammals, excluding humans and some species of monkeys inhabiting the Old World. A high titer of antibody to this epitope is produced in a hu- man over a lifetime, and it is called as ‘major xeno- antigen’ due to numerous unsuccessful attempts conducted in the 1960s to transplant pig organs to a human. It is known that the binding of natural antibodies, constantly present in human blood, with the α-Gal causes a hyperacute xenograft rejection, making impossible the transplantation of organs and tissues from human to mammals. One of the ways to solve this problem could be using the organs from 4 проблемы криобиологии и криомедицины problems of cryobiology and cryomedicine том/volume 26, №/issue 1, 2016 Одним из решений данной проблемы может быть использование органов обезьян, в организме кото- рых отсутствует эпитоп α-Gal. Однако сложность разведения и содержания в неволе, медленное вос- производство поголовья, высокий риск межвидовой вирусной трансмиссии, противоречия, связанные с соблюдением этических норм, являются основными причинами, ограничивающими использование дан- ного вида животных в качестве доноров. В связи с этим одним из направлений современ- ной экспериментальной биологии является выве- дение пород свиней для получения тканей и орга- нов, пригодных для трансплантации [1]. Благодаря селекции были созданы трансгенные и «нокаутные» свиньи, клетки которых не экспрессируют эпитоп α-Gal. Предполагается, что в перспективе органы свиней таких пород могут использоваться при ксенотрансплантации человеку. Получение свиных органов для трансплантации возможно в далеком будущем, однако использова- ние протезов свиного происхождения широко рас- пространено в медицинской практике уже сегодня, что придает важность исследованиям эпитопа α-Gal. Далее в обзоре будет проведен краткий анализ ра- бот, связанных с изучением эволюционного проис- хождения α-Gal, особенностей распределения на разных клетках млекопитающих и влиянию на его экспрессию факторов получения и хранения био- протезов. Присутствие эпитопа ααααα-Gal на клетках млекопитающих Эпитоп α-Gal не экспрессируется на клетках человека и некоторых высших приматов ввиду потери активности фермента α-1,3-галактозил- трансферазы (1,3-GT). У животных этот фермент, как и другие гликозилтрансферазы, участвует в преобразовании олигосахаридов для последую- щего синтеза мембранных гликопротеинов. Считается, что изначально в организме всех представителей класса млекопитающих экспресси- ровался эпитоп α-Gal, а супрессия механизма его синтеза у некоторых видов произошла в ходе эво- люционного развития вследствие действия эндеми- ческих факторов [19]. Наличие эпитопа на фибробластах опоссума и кенгуру доказывает, что его экспрессия в ядерных клетках млекопитающих началась еще до их разде- ления на Metatheria (сумчатых) и Eutheria (пла- центарных) зверей. Эпитоп α-Gal обнаружен у пред- ставителей отрядов Primates (некоторых обезьян), Lagomorpha (кроликов), Rodentia (крыс), Artiodac- tyla (коров, свиней) и Carnivora (собак) [12]. Клетки примитивных приматов, например лему- ров (Lemuridae), широко экспрессируют данный monkeys, which do not express α-Gal epitope. How- ever, the difficulty of breeding and keeping, slow reproduction of livestock, a high risk of cross-species viral transmission, the controversial compliance with ethical standards, are the main reasons, limiting the use of this species as donors. In this regard, one of the trends in contemporary experimental biology is the breeding of pig species to derive the transplantable tissues and organs [4]. Through the selection there were created the trans- genic and knockout pigs, the cells of which did not express the α-Gal epitope. The organs of these pig species are assumed to be used in human xenotrans- plantation in the future. Deriving of pig organs for transplantation is possible in far future, but the use of prostheses of a porcine origin is widespread in medical practice today, which makes important the research of α-Gal epitope. This review will deal with a brief analysis of the reports related to the study of the evolutio- nary origin of α-Gal, its specific distribution in various mammalian cells and the effect on its ex- pression of the factors of the bioprostheses obtaining and storage. Presence of ααααα -Gal epitopes in mammalian cells α-Gal epitope is not expressed in the cells of humans and some higher primates due to loss of activity of the enzyme α-1,3-galactosyltransferase (1,3-GT). In animals, this enzyme as well as other glycosyltransferases are involved into the transfor- mation of oligosaccharides for the following syn- thesis of membrane glycoproteins. It is believed that originally all the mammalian organisms expressed α-Gal epitope, and in some species its synthesis mechanism was suppressed during the evolution due to the action of endemic factors [19]. The epitope presence on the possum and wallaby fibroblasts proves that its expression in mammalian nucleated cells existed even before their dividing into Metatheria (marsupials) and Eutheria (placental) animals. α-Gal epitope was found in representatives of the Primates (some monkeys), Lagomorpha (rabbits), Rodentia (rats), Artiodactyla (cows, pigs), and Carnivora (dogs) [12]. The cells of primitive primates, e.g. lemurs (Lemuridae) widely express this epitope, as well as the New World monkeys (Callitrichidae, Cebidae, Aotidae, Pitheciidae, Atelidae) [6, 34]. However, it was not found in the representatives of Cerco- pithecidae, Hylobatidae, Hominidae families, inhabiting the Old World territory, including apes and humans [6]. проблемы криобиологии и криомедицины problems of cryobiology and cryomedicine том/volume 26, №/issue 1, 2016 5 эпитоп, как и обезьяны Нового Света (Callitrichidae, Cebidae, Aotidae, Pitheciidae, Atelidae) [6, 34]. Однако он не обнаружен у представителей се- мейств Cercopithecidae, Hylobatidae, Hominidae, обитающих на территории Старого Света, в том числе у человекообразных обезьян и человека [6]. Тестированию на присутствие эпитопа α-Gal были подвергнуты далеко не все виды животных, поэтому предстоит дальнейшее изучение инакти- вации экспрессии данного антигена в эволюционно- генетическом аспекте. На основании открытия интрон-обедненных вставочных ДНК D. Joziasse и соавт. [26] предпо- ложили, что ген 1,3-GT инактивировался между 40 и 25 млн лет до н. э., то есть уже после эволюцион- ного разделения на обезьян Старого и Нового Све- та. Данные, полученные при изучении эпитопа α-Gal у макак-резус, орангутанга и человека, сви- детельствуют об инактивации его экспресии у их общего предка [26, 28]. Однако U. Galili и соавт. [20] считают, что инактивация эпитопа у этих видов произошла гораздо позже, причем независимо друг от друга. Желудочно-кишечный тракт человека сразу после рождения заселяется бактериями семейства Enterobacteriaceae, которые несут на клеточной стенке липополисахариды с галактозными остатка- ми [17, 19]. На протяжении всей жизни кишечная микрофлора постоянно стимулирует выработку иммунной системой антител к α-Gal, которую трудно устранить даже путем интенсивной иммуно- супрессии [10, 16]. У человека антитела к α-Gal представлены в основном IgG и в меньшей степе- ни – IgM и IgA. Интересно, что при определенных условиях в организме человека возможны активация гена 1,3-GT и продукция эпитопа α-Gal на мембранах различных клеток [9]. Это приводит к взаимодейст- вию циркулирующих в крови антител, связывание с которыми вызывает аутоиммунную реакцию. Даже незначительной экспрессии эпитопа на мембране достаточно, чтобы вызвать антителозависимый цитолиз и тем самым индуцировать аутоиммунный процесс. Активация гена 1,3-GT может быть вызвана вирусной инфекцией, облучением или воздействием химических веществ [9]. Результаты эксперимен- тов in situ свидетельствуют, что α-1,3-Gal-галакто- зилтрансферазной активностью в определенных условиях обладают клетки семенников, поджелу- дочной железы, селезенки, печени, синовиальной мембраны суставной капсулы и крови [40]. Установлено, что 1% нормальных человеческих эритроцитов может взаимодействовать с антитела- ми к α-Gal [11, 13–15], поэтому некоторые исследо- Not all animal species were tested for the α-Gal epitope presence, therefore the evolutionary-genetic aspect of the inactivated antigen expression should be studied in future. Basing on the discovery of the intron-depleted intercalated DNA V. Joziasse et al. [26] suggested that 1,3-GT gene was inactivated between 40 and 25 million years BC, i. e. after the evolutionary division of the monkeys of the Old and New Worlds. The data obtained when studying the α-Gal epitope in rhesus monkeys, orangutans and humans indicate about its inactivated expression in their common ancestor [26, 28]. However, U. Galili et al. [20] believe that inactivation of epitope in these species occurred much later, and independently of each other. Immediately after birth the human gastrointestinal tract is populated with Enterobacteriaceae bacteria, bearing the lipopolysaccharide with galactose residues on the cell wall [17, 19]. Throughout the life an intestinal microflora constantly stimulates the production by an immune system of the antibodies to the α-Gal, which is difficult to be eliminated even by an intensive immune suppression [10, 16]. In humans, the antibodies to α-Gal are mainly repre- sented by IgG and with IgM and IgA in a lesser extent. It is interesting that under certain conditions the 1,3-GT gene activation and production of α-Gal epitope in a human body are possible on the mem- branes of various cells [9]. This leads to an inter- action of antibodies circulating in the blood, which binding causes an autoimmune reaction. Even slight epitope expression on membrane is sufficient to cause an antibody-dependent cytolysis and thereby to induce an autoimmune process. 1,3-GT gene activation may be caused by a viral infection, radiation or exposure to chemicals [9]. The results of in situ experiments indicate that α-1,3- Gal-galactosyltransferase activity under certain con- ditions are possessed by the cells of the testes, pan- creas, spleen, liver, synovial membrane of articular capsule and blood [40]. It has been established that 1% of normal human erythrocytes can interact with antibodies to α-Gal [11, 13–15], therefore some researchers have sug- gested that antibodies against α-Gal may play a role in the removal of senescent and pathological eryth- rocytes from circulatory channel [1, 15, 17, 18]. J. Etienne-De Cerf et al. [8] have shown in the studies in vitro that antibodies against α-Gal can interact not only with erythrocytes but also with trypsin-treated human thyroid cells. This effect confirms the presence of Gal-α-1,3-Gal latent structures and in other tissues of human body. 6 проблемы криобиологии и криомедицины problems of cryobiology and cryomedicine том/volume 26, №/issue 1, 2016 ватели предполагают, что антитела к α-Gal могут играть роль в удалении стареющих и патологичес- ких эритроцитов из циркуляторного русла [2, 15, 17, 18]. J. Etienne-Decerf и соавт. [8] в исследованиях in vitro показали, что антитела к α-Gal могут взаи- модействовать не только с эритроцитами, но и с клетками щитовидной железы человека, которые были обработаны трипсином. Данный эффект сви- детельствует о присутствии латентных структур Gal-α-1,3-Gal и в других тканях человеческого организма. Особый интерес с точки зрения биотехнологии представляет изучение присутствия эпитопа α-Gal в свиных органах. Результаты исследований мно- гих авторов показали, что α-Gal встречается у сви- ней разных пород и имеет высокую частоту экс- прессии в популяции [37]. Известно, что α-Gal в высокой плотности экс- прессируется на сосудистом эндотелии свиньи [3, 21, 39], а также на некоторых других тканях, в част- ности, на проксимальных почечных канальцах [24], эпителии бронхов и легочных альвеол, стенках желчного и панкреатического канальцев [36, 43, 44]. I. McKenzie и соавт. [33] обнаружили во всех долях печени стойкое позитивное окрашивание гепатоци- тов антителами к эпитопу α-Gal. В исследовании G. Rayat и соавт. [38], было ус- тановлено, что незрелые клетки островков подже- лудочной железы неонатальных поросят не несут антигенов данной группы. Однако уже в первые сутки после трансплантации островковых клеток под капсулу почки SCID мышей в ксенографте было обнаружено большое количество α-Gal-пози- тивных клеток. Это свидетельствует о том, что экспрессия эпитопа может запускаться как при созревании клеток, так и под действием других факторов, например трансплантации в ответ на стимулы иммунной системы реципиента. Роль эпитопа ααααα-Gal в экспериментальной ксенотрансплантации и клинической био- имплантации На данный момент ксенотрансплантация орга- нов свиньи человеку остается невозможной. В ор- ганизме человека ксенотрансплантат от свиньи не выживает, поскольку происходит гиперострое оттор- жение, сопровождающееся массивным гемолизом, агглютинацией эритроцитов, множественным тром- бозом сосудов пересаженного органа. Ксенореактивные естественные антитела к эпи- топу α-Gal, циркулирующие в крови человека, реа- лизуют реакцию гиперострого отторжения через сис- тему комплемента [26]. Связывание анти-Gal-IgM с эпитопами, экспрессируемыми эндотелиоцитами кровеносных сосудов свиного трансплантата, акти- Of particular interest in terms of biotechnology is the study of the α-Gal epitope presence in porcine organs. The results reported by many authors demonstrated that α-Gal was found in pigs of various breeds and frequently had a high expression in the population [37]. α-Gal is known to have high expression on vascular endothelium of pigs [2, 21, 39] as well as on some other tissues, especially on the proximal renal tubules [24], on the epithelium of bronchi and pulmonary alveoli, walls of gall and pancreatic ducts [36, 43, 44]. I. McKenzie et al. [33] found a stable positive staining of hepatocytes with antibodies to an epitope of α-Gal in all liver lobes. In the research of G. Rayat et al. [38] the imma- ture pancreatic islet cells of neonatal piglets were found to carry no antigens of this group. However, a large amount of α-Gal-positive cells were detected in xenograft in the first days after islet cell trans- plantation under the renal capsule of SCID mice. This indicates that the epitope expression can be initiated both during cell maturation and under the influence of other factors, e. g. transplantation, in response to the recipient’s immune system stimuli. Role of ααααα-Gal epitope in experimental xeno- transplantation and clinical bioimplantation At the moment, the xenotransplantation of pig organs to a human is impossible. In a human body the xenograft of a pig does not survive, as there is a hyperacute rejection, accompanied with a massive hemolysis, agglutination of red blood cells, multiple thrombosis of the vessels of the grafted organ. Xenoreactive natural antibodies to α-Gal epitope, circulating in human blood, implement a hyperacute rejection via the complement system [26]. Binding of anti-Gal IgM to the epitopes expressed by endo- thelial cells of porcine graft blood vessels activates the complement-dependent cascade reactions and induces platelet aggregation. This leads to rapid de- struction of vascular system, hemorrhage, cyto-lysis of cells and, ultimately finally to the destruction of xenografts [26]. For example, kidneys or heart grafted from pig to monkey are rejected within 30 min to several hours [7, 37]. It should be noted that xenotransplantation could be accompanied by various types of immune res- ponses to xenograft: complement-mediated rejection; acute antibody-mediated rejection, induced either by natural or T-lymphocyte-dependent antibodies; acute rejection as a result of the activation of cell immu- nity link; chronic rejection. Participation of anti-Gal IgM antibodies in hyper- acute rejection has been proven by A. Good et al. [22], which showed the neutralization of cytolytic проблемы криобиологии и криомедицины problems of cryobiology and cryomedicine том/volume 26, №/issue 1, 2016 7 вирует каскад комплемент-зависимых реакций и индуцирует агрегацию тромбоцитов. Это приводит к быстрому разрушению сосудистой системы, кро- воизлиянию, цитолизу клеток и, в конечном счете, деструкции ксенографта [26]. Например, почки или сердце, пересаженные от свиньи обезьяне, отторга- ются в течение 30 мин или нескольких часов [7, 37]. Важно отметить, что при ксенотрансплантации возможны разные типы иммунных реакций на ксенографт: комплемент-опосредованное отторже- ние; острое антител-опосредованное отторжение, индуцированное естественными или Т-лимфоцит- зависимыми антителами; острое отторжение в ре- зультате активации клеточного звена иммунитета; хроническое отторжение. Участие антител анти-Gal-IgM в реакции гипер- острого отторжения было доказано A. Good и соавт. [22], которые показали, что при удалении антител к эпитопу α-Gal из сыворотки нивелируется их цито- литическое действие на клетки свиного происхож- дения. Определение роли эпитопа α-Gal в механизме гиперострого отторжения позволило выработать основные подходы для пролонгированного сущест- вования свиных ксенографтов: удаление специфи- ческих антител из крови реципиента с помощью гемосорбции или плазмафереза [4, 31, 45]; ингиби- рование системы комплемента реципиента посред- ством биологически активных веществ, например, фактора яда кобры (cobra venom factor, CVF) [25, 32]; использование для трансплантации органов от трансгенных и «нокаутных» свиней [30, 35]. К сожалению, применение вышеописанных ме- тодов все же не позволяет добиться длительного функционирования ксенографта. Например, в ис- следованиях на обезьянах T. Xu и соавт. [45] пока- зано, что удаление специфических антител к Gal-α- 1,3-Gal с помощью плазмафереза предотвращает гиперострое отторжение свиного ксенографта, но только до повторного появления антител в циркуля- торном русле. В работах других авторов было уста- новлено, что уровень антител, специфичных к α-Gal, восстанавливается в течение нескольких дней пос- ле процедуры экстракорпоральной обработки [4]. Существовали попытки преодолеть гиперост- рое отторжение с помощью других методов, напри- мер, специфических ингибиторов B-клеток, кото- рые продуцируют анти-Gal-антитела [43]. Результа- ты экспериментов, проведенных на мышах, были обнадеживающими, однако их эффективность при ксенотрансплантации другим животным еще не оценена. При использовании биоматериала, полученного от неонатальных или генетически измененных α-Gal-дефицитных особей, или после его обработки effect on the cells of porcine origin rendered by antibodies to α-Gal epitope after their removal. Determining the role of α-Gal epitope in the mechanism of hyperacute rejection allowed to develop basic approaches for the sustained existen- ce of porcine xenografts: removal of specific antibodies from the recipient’s blood via hemo- sorption or plasmapheresis [3, 31, 45]; inhibition of the recipient complement system by means of biologically active substances, such as cobra venom factor (CVF) [25, 32]; application of transgenic and knockout pigs for organ transplantation [30, 35]. Unfortunately, the use of the methods described above has not yet allowed the xenograft to function for a long time. For example, in the researches in monkeys T. Xu et al. [45] has demonstrated that the removal of specific antibodies to the Gal-α-1,3-Gal via plasmapheresis prevented hyperacute rejection of porcine xenografts, but only until the re- appearance of the antibodies in the circulatory channel. Other scholars reported that the level of antibodies specific for α-Gal, is restored within a few days after extracorporeal treatment procedure [3]. There were the attempts to overcome hyper- acute rejection by other methods, e. g. specific inhi- bitors of B-cells which produce anti-Gal-antibodies [43]. Results of experiments performed in mice were encouraging, but their efficiency during xenotrans- plantation to other animals has not been evaluated yet. When using a biomaterial derived either from neonatal or genetically modified α-Gal-deficient animals, or after its processing with the enzyme α- galactosidase, removing the α-Gal epitope from the surface of cells, the lowering of immune response to the xenograft was found [21, 23, 29]. The paper of P. Simon et al. [42] reported that intravenous administration of purified oligosaccharide Gal-α-1,3-Gal to baboons resulted in neutralizing the specific antibodies and temporarily delayed a hyper- acute rejection of pig organs. While transplantation of organs from pigs to humans is not yet possible, the bioprostheses made from porcine tissues are now used quite widely. Thus, the bioprosthetic heart valves and biomatrices derived from the submucosa of small intestine and skin are popular in clinical practice. In this case the problem of hyperacute rejection using porcine biomaterial does not exist, since all the bioimplants are processed and loose the layer of cells carrying the α-Gal epitope. However, long-term observations of patients with cardiovascular prostheses of por- cine origin showed that the bioprostheses over time are subjected to degeneration because of tissue 8 проблемы криобиологии и криомедицины problems of cryobiology and cryomedicine том/volume 26, №/issue 1, 2016 ферментом α-галактозидазой, который удаляет эпитоп α-Gal с поверхности клеток, установлено снижение иммунного ответа на ксенотрансплантат [21, 23, 29]. В работе P. Simon и соавт. [42] показано, что внутривенное введение очищенного олигосахарида Gal-α-1,3-Gal бабуинам приводило к нейтрализации специфических антител и временно задерживало гиперострое отторжение свиных органов. Если трансплантация органов от свиньи челове- ку пока невозможна, то биопротезы, изготовленные из свиных тканей, активно применяются уже сегод- ня. Так, в клинической практике популярны биопро- тезы сердечных клапанов и биоматриксы, получен- ные из подслизистой оболочки тонкой кишки и кожи. В данном случае проблемы гиперострого отторжения при использовании свиного биомате- риала не существует, так как все биоимплантаты проходят обработку, в результате которой элимини- руется слой клеток, несущих эпитоп α-Gal. Однако по результатам долгосрочных наблюдений за па- циентами с сердечно-сосудистыми протезами сви- ного происхождения установлено, что биопротезы со временем испытывают дегенерацию вслед- ствие кальцификации ткани и структурных пере- строек коллагена [41]. В 2005 году K. Konakci и соавт. [29] предполо- жили, что иммунные реакции могут играть роль в деградации биопротезов сердечных клапанов, по- скольку в них были обнаружены остатки эпитопов α-Gal даже после использования глутарово-альдегид- ной предобработки. Более того, уже через 10 суток после имплантации свиных клапанов у реципиентов в сыворотке крови значительно увеличился титр специфических антигенов к данному эпитопу. Таким образом, проблема элиминации Gal-α- 1,3-Gal из свиных биопротезов остается актуаль- ной, также как и разработка чувствительных тес- товых систем для определения наличия данных антигенов в биоматериале для клинической имплантации. Влияние низкотемпературного хранения клеток на присутствие эпитопа ααααα-Gal Криоконсервирование является одним из спосо- бов долгосрочного хранения клеток и тканей перед трансплантацией. С целью забора, получения и хранения свиного биоматериала, пригодного для имплантации, могут использоваться специальные среды. Однако исследования, в которых детально было бы изучено влияние факторов криоконсер- вирования или гипотермического хранения на эпи- топ α-Gal, практически не проводятся. M. Keller и соавт. [27] получили данные о влия- нии гипотермии и кардиоплегических растворов на calcification and collagen structural rearrangements [41]. In 2005, K. Konak et al. [29] suggested that the immune responses may play a role in degradation of the heart valve bioprostheses, since the residues of α-Gal epitopes were found there even after glutaric aldehyde pre-treatment. Moreover, even 10 days later the implantation of porcine valves the titer of specific antigens to this epitope was significantly increased in the recipients’ blood serum. Thus, the problem of Gal-α-1,3-Gal elimination from porcine bioprostheses has remained important, as well as the development of sensitive test systems to determine the presence of these antigens in biomaterial for clinical implantation. Effect of low-temperature storage of cells on ααααα-Gal epitope presence Cryopreservation is one of the methods of long- term storage of cells and tissues prior to transplanta- tion. Sampling, storage and processing of porcine biomaterial suitable for implantation is performed in the specialized media. However, there are almost no detailed publications about influence of cryopre- servation factors or hypothermic storage on α-Gal epitope. M. Keller et al. [27] have got the data about the effect of hypothermia and cardioplegic solutions on the expression of α-Gal epitope in porcine aortic endothelial cells. The tissue storage at 4°C for 4 hrs in HTK solution containing mannitol resulted in a decrease in the expression of α-Gal epitopes by 32%. Storing the biomaterial in the University of Wisconsin solution under similar conditions resulted in 50% reduction of the antigen expression. The authors suggested three hypotheses to explain the described phenomenon. The first as- sumption was that the components of cardioplegic solutions caused the changes in the α-Gal epitope chemical structure, preventing it from binding with xenoreactive antibodies. The second one supposed a decoupling between the membrane components and α-Gal epitope, and according the third one there was a masking of α-Gal epitope by the molecules of the substances comprising the hypothermic solutions. Observations of P. Brenner et al. [5] have indirectly confirmed the effect of hypothermic storage on the α-Gal epitope presence. It has been found that a 4 hr perfusion of cardioplegic solutions prevented the development of heart hyperacute rejection. Unfortunately, to date there are no other reports on the issue of changing the expression of Gal-α- 1,3-Gal during low-temperature storage. This проблемы криобиологии и криомедицины problems of cryobiology and cryomedicine том/volume 26, №/issue 1, 2016 9 экспрессию эпитопа α-Gal в эндотелиоцитах аорты свиньи. Установлено, что хранение ткани при 4°C на протяжении 4 ч в маннитолсодержащем раст- воре HTK вызывал уменьшение экспрессии эпито- пов α-Gal на 32%. Установлено, что при хранении биоматериала в растворе Висконсинского универ- ситета в аналогичных условиях экспрессия анти- гена снижалась на 50%. Авторы предложили три гипотезы для объясне- ния описанного феномена. Согласно первому пред- положению компоненты кардиоплегических раство- ров вызывают изменения в химической структуре эпитопа α-Gal, что исключает связывание с ним ксенореактивных антител; второму – происходит разрыв связей между компонентами мембраны и эпитопом α-Gal; третьему – имеет место маскиров- ка эпитопа α-Gal молекулами веществ, входящих в состав гипотермических растворов. Результаты наблюдений P. Brenner и соавт. [5] были косвенным подтверждением влияния гипо- термического хранения на присутствие эпитопа α-Gal. Установлено, что 4-часовая перфузия сердца кардиоплегическими растворами предотвращает развитие гиперострого отторжения. К сожалению, других работ, посвященных во- просу изменения экспрессии Gal-α-1,3-Gal в усло- виях низкотемпературного хранения, в доступной научной литературе не обнаружено. Это свиде- тельствует о недостаточном изучении данного вопроса и необходимости дальнейших исследова- ний в этом направлении. Важно отметить, что наличие антигена Gal-α- 1,3-Gal является не единственным препятствием для использования свиных тканей в медицине, поскольку только 25% от общего пула свиных анти- тел, стимулирующих реакцию отторжения, прихо- дится на эпитоп α-Gal. Идентификация всех транс- плантационных антигенов свиньи, разработка способов их элиминации, в том числе и на основе низкотемпературных технологий, поможет в созда- нии биопротезов и биоскаффолдов для использо- вания в практике восстановительной и регенера- тивной медицины. indicates a lack of studies of this issue and the need for further investigations in this direction. It is important to note that the presence of Gal- α-1,3-Gal antigen is not the only obstacle to use the porcine tissues in medicine, since just 25% of the total pool of porcine antibodies, stimulating the rejection is accounted for the α-Gal epitope. Iden- tification of all porcine transplantation antigens, development of methods for their elimination, inclu- ding those based on low-temperature technologies will be helpful in creation of bioscaffolds and bio- prostheses to be applied in the practical regenerative medicine. Литература 1. Бондаренко Т.П., Божок Г.А., Алабедалькарим Н.М., Легач Е.И. Ксенотрансплантация: исторический аспект и современное состояние проблемы // Трансплантоло- гия. – 2004. – Т. 7, №3. – С. 130–135. 2. Anstee D.J. Blood group-active surface molecules of the human red blood cell // Vox Sang. – 1990. – Vol. 58, №1. – P. 1–20. 3. Artrip J.H., Kwiatkowski P., Michler R.E. et al. Target cell susceptibility to lysis by human natural killer cells is augmented References 1. Anstee D.J. Blood group-active surface molecules of the human red blood cell. Vox Sang 1990; 58(1): 1–20. 2. Artrip J. H., Kwiatkowski P., Michler R. E. et al. Target cell susceptibility to lysis by human natural killer cells is augmented by alpha(1,3)-galactosyltransferase and reduced by alpha(1,2)-fucosyltransferase. J Biol Chem 1999; 274(16): 10717–10722. 3. Azimzadeh A., Meyer C., Watier H. et al. Removal of primate xenoreactive natural antibodies by extracorporeal perfusion of pig kidneys and livers. Transpl Immunol 1998; 6(1): 13–22. 4. Bondarenko T.P., Bozhok G.A., Alabedalkarim N.M., Legach E.I. Xenotransplantation: historical aspect and modern state of the problem. Transplantologya 2004; 7(3): 130–135. 5. Brenner P., Hinz M., Huber H. et al. Influence of ischemic time on hyperacute xenograft rejection of pig hearts in a working heart perfusion model with human blood. Transpl Int 2000;13 (Suppl. 1): S494–503. 6. Collins B.H., Cotterell A.H., McCurry K.R. et al. Cardiac xenografts between primate species provide evidence of the α-galactosyl determinant in hyperacute rejection. J Immunol 1994; 154(10): 5500–5510. 7. Cooper D.K., Koren E., Oriol R. Oligosaccharides and discordant xenotransplantation. Immun Rev 1994; 141: 31–58. 8. Etienne-Decerf J., Malaise M., Mahieu P., Winand R. Elevated anti alpha-galactosyl antibody titers. A marker of progression in autoimmune thyroid disorders and endocrine ophthalmo- pathy. Acta Endocrinol 1987; 115: 67–74. 9. Galili U. Abnormal expression of alpha-galactosyl epitopes in man. A trigger for autoimmune processes. Lancet 1989; 8(8659): 358–361. 10.Galili U. Anti-Gal and anti-non Gal antibody barriers in xenotransplantation. Miyagawa S., editor. Xenotransplantation. InTech, 2012. Available from: http://www.intechopen.com/ books/xenotransplantation/anti-gal-and-anti-non-gal-antibody- barriers-in-xenotransplantation. 11.Galili U., Clark M., Mohandas N. et al. The natural anti-c~- galactosyl IgG on red cells in sickle cell disease. Blood Cells 1984; 14(1): 205–228. 12.Galili U., Clark M.R., Shohet S.B. et al. Evolutionary relationship between the natural anti-Gal antibody and the Gal-α-1,3-Gal epitope in primates. Proc Natl Acad Sci USA 1987; 84(5): 1369–1373. 13.Galili U., Clark M.R., Shohet S.B. Excessive binding of natural anti-alpha-galactosyl IgG to sickle erythrocytes may contribute to extravascular cell destruction. J Clin Invest 1986; 77(1): 27–33. 10 проблемы криобиологии и криомедицины problems of cryobiology and cryomedicine том/volume 26, №/issue 1, 2016 by alpha(1,3)-galactosyltransferase and reduced by alpha(1,2)-fucosyltransferase // J. Biol. Chem. – 1999. – Vol. 274, №16. – P. 10717–10722. 4. Azimzadeh A., Meyer C., Watier H. et al. Removal of primate xenoreactive natural antibodies by extracorporeal perfusion of pig kidneys and livers // Transpl. Immunol. – 1998. – Vol. 6, №1. – P. 13–22. 5. Brenner P., Hinz M., Huber H. et al. Influence of ischemic time on hyperacute xenograft rejection of pig hearts in a working heart perfusion model with human blood // Transpl. Int. – 2000. – Vol.13, Suppl. 1. – S494–503. 6. Collins B.H., Cotterell A.H., McCurry K.R. et al. Cardiac xenografts between primate species provide evidence of the α–galactosyl determinant in hyperacute rejection // J. Immunol. – 1994. – Vol. 154, №10. – P. 5500–5510. 7. Cooper D.K., Koren E., Oriol R. Oligosaccharides and dis- cordant xenotransplantation // Immun. Rev. – 1994. – Vol. 141. – P. 31–58. 8. Etienne-Decerf J., Malaise M., Mahieu P., Winand R. Elevated anti alpha-galactosyl antibody titers. A marker of progression in autoimmune thyroid disorders and endocrine ophthalmo- pathy // Acta Endocrinol. – 1987. – Vol. 115. – P. 67–74. 9. Galili U. Abnormal expression of alpha-galactosyl epitopes in man. A trigger for autoimmune processes // Lancet. – 1989. – Vol. 8, №8659. – P. 358–361. 10.Galili U. Anti-Gal and anti-non Gal antibody barriers in xeno- transplantation // Xenotransplantation / Ed. by S. Miyagawa, InTech, 2012. [Электронный документ] [веб-сайт] http:// www.intechopen.com/books/xenotransplantation/anti-gal- and-anti-non-gal-antibody-barriers-in-xenotransplantation. 11.Galili U., Clark M., Mohandas N. et al. The natural anti-c~- galactosyl IgG on red cells in sickle cell disease // Blood Cells. – 1984. – Vol. 14, №1. – P. 205–228. 12.Galili U., Clark M. R., Shohet S. B. et al. Evolutionary relationship between the natural anti-Gal antibody and the Gal-α-1,3–Gal epitope in primates // Proc Natl Acad Sci USA. – 1987. – Vol. 84, №5. – P. 1369–1373. 13.Galili U., Clark M. R., Shohet S. B. Excessive binding of natural anti-alpha-galactosyl IgG to sickle erythrocytes may contribute to extravascular cell destruction // J. Clin. Invest. – 1986. – Vol. 77, №1. – P. 27–33. 14.Galili U., Flechner I., Knyszynski A. et al. The natural anti- alpha-galactosyl IgG on human normal senescent red blood cells // Br J Haemotol. – 1986. – Vol. 62, №2. – P. 317–324. 15.Galili U., Korkesh A., Kahane I., Rachmilewitz E.A. Demonstra- tion of a natural antigalactosyl IgG antibody on thalassemic red blood cells // Blood. – 1983. – Vol. 61, №6. – P. 1258–1264. 16.Galili U., Macher B.A., Buehler J., Shohet S.B. Human natural anti-alpha-galactosyl IgG. II. The specific recognition of alpha (1-3)-linked galactose residues // J. Exp. Med. – 1985. – Vol. 162, №2. – P. 573–582. 17.Galili U., Mandrell R.E., Hamadeh R.M. et al. Interaction between human natural anti-α-galactosyl immunoglobulin G and bacteria of the human flora // Infect. Immun. – 1988. – Vol. 56, №7. – P. 1730–1737. 18.Galili U., Rachmilewitz E.A., Peleg A., Flechner I. A unique natural human IgG antibody with anti-α-galactosyl specificity // J. Exp. Med. – 1984. – Vol. 160, №5. – P. 1519–1531. 19.Galili U., Shohet S.B., Kobrin E. et al. Man, apes and Old World monkeys differ from other mammals in the expression of α- galactosyl epitopes on nucleated cells // J. Biol. Chem. – 1988. – Vol. 263, №33. – P. 17755–17762. 20.Galili U., Swanson K. Evolution gene sequences suggest inactivation of α-1,3-galactosyltransferase in catarrhines after the divergence of apes from monkeys // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. – 1991. – Vol. 88, №16. – P. 7401–7404. 21.Galili U., Tibell A., Samuelsson B. et al. Increased anti-Gal activity in diabetic patients transplanted with fetal porcine islet cell clusters // Transplantation. – 1995 – Vol. 59, №11. – P. 1549–1556. 14.Galili U., Flechner I., Knyszynski A. et al. The natural anti- alpha-galactosyl IgG on human normal senescent red blood cells. Br J Haemotol 1986; 62( 2): 317–324. 15.Galili U., Korkesh A., Kahane I., Rachmilewitz E.A. Demon- stration of a natural antigalactosyl IgG antibody on thalassemic red blood cells. Blood 1983; 61(6): 1258–1264. 16.Galili U., Macher B.A., Buehler J., Shohet S.B. Human natural anti-alpha-galactosyl IgG. II. The specific recognition of alpha (1-3)-linked galactose residues. J Exp Med 1985; 162(2): 573– 582. 17.Galili U., Mandrell R.E., Hamadeh R.M. et al. Interaction between human natural anti-α-galactosyl immunoglobulin G and bacteria of the human flora. Infect Immun 1988; 56(7): 1730–1737. 18.Galili U., Rachmilewitz E.A., Peleg A., Flechner I. A unique natural human IgG antibody with anti-α-galactosyl specificity. J Exp Med 1984; 160(5): 1519–1531. 19.Galili U., Shohet S.B., Kobrin E. et al. Man, apes and Old World monkeys differ from other mammals in the expression of α- galactosyl epitopes on nucleated cells. J Biol Chem 1988; 263(33): 17755–17762. 20.Galili U., Swanson K. Evolution gene sequences suggest inactivation of α-1,3-galactosyltransferase in catarrhines after the divergence of apes from monkeys. Proc Natl Acad Sci USA 1991; 88(16): 7401–7404. 21.Galili U., Tibell A., Samuelsson B. et al. Increased anti-Gal activity in diabetic patients transplanted with fetal porcine islet cell clusters. Transplantation 1995; 59(11): 1549–1556. 22.Good A.H., Cooper D.C.K., Malcolm A.J. et al. Identification of carbohydrate structures which bind human anti-porcine antibodies: implication for discordant xenografting in man. Transplant Proc 1992; 24(2): 559–562. 23.Groth C.G., Korsgren O., Tibell A. et al. Transplantation of fetal porcine pancreas to diabetic patients. Lancet 1994; 344(8934): 1402–1404. 24.Hayashi S., Katayama A., Nagasaka T. et al. Tissue distribution of Gal-alpha-1,3-Gal epitope in heart, kidney and liver of pig and mouse. Transplant Proceedings 1996; 28(1): 216. 25.Igaz P. Recent strategies to overcome the hyperacute rejection in pig to human xenotransplantation. Yale J Biol Med 2001; 74(5): 329–340. 26.Joziasse D.H., Oriol R. Xenotransplantation: the importance of the Gal-alpha-1,3-Gal epitope in hyperacute vascular rejec- tion. Biochem Biophys Acta 1999; 1455(2–3): 403–418. 27.Keller M., Beiras-Fernandez A., Schmoeckel M. et al. Influence of hypothermia and cardioplegic solutions on expression of alpha-Gal epitope on porcine aortic endothelial cells. Exp Clin Transplant 2010; 8(3): 250–257. 28.Koike C., Fung J.J., Geller D.A. et al. Molecular basis of evolutionary loss of the 1,3–galactosyltransferase gene in higher primates. J Biol Chem 2002; 277(12): 10114–10120. 29.Konakci K.Z., Bohle B., Blumer R. et al. Alpha-Gal on bioprostheses: xenograft immune response in cardiac surgery. European Journal of Clinical Investigation 2005; 35(1): 17–23. 30.Lai L., Kolber-Simonds D., Park K.W. et al. Production of alpha- 1,3-galactosyltransferase knockout pigs by nuclear transfer cloning. Science 2002; 295(5557): 1089–1092. 31.Leventhal J.R., Dalmasso A.P., Cromwell J.W. et al. Prolon- gation of cardiac xenograft survival by depletion of comple- ment. Transplantation 1993; 55(4): 857–865. 32.Mayo G.L., Posselt A.M., Barker C.F. et al. Prolongation of survival of donor-strain islet xenografts (rat-mouse) by intrathymic inoculation of xenogeneic islet and bone marrow cells. Transplantation 1994; 58(1): 107–109. 33.McKenzie I.F., Xing P.X., Vaughan H.A. et al. Distribution of the major xenoantigen (Gal-alpha-1,3-Gal) for pig to human xenografts. Transplant Immunol 1994; 2(2): 81–86. 34.Napier J.R., Napier P. H. The natural history of the primates. Cambridge: MIT Press, 1985. 35.Oldmixon B.A., Wood J.C., Ericsson T.A. et al. Porcine endogenous retrovirus transmission characteristics of an проблемы криобиологии и криомедицины problems of cryobiology and cryomedicine том/volume 26, №/issue 1, 2016 11 inbred herd of miniature swine. J Virol 2002; 76( 6): 3045– 3048. 36.Oriol R., Ye Y., Koren E., Cooper D.K. Carbohydrate antigenes of pig tissues reacting with human natural antibodies as potential targets for hyperacute vascular rejection in pig-to- man organ xenotransplantation.Transplantation.1993; 56(6): 1433–1442. 37.Platt J.L. A perspective on xenograft rejection and accommo- dation. Immunol Rev 1994; 141: 127–149. 38.Rayat G.R., Rajotte R.V., Hering B.J. et al. In vitro and in vivo expression of Gal-(1,3)-Gal on porcine islet cells is age dependent. J Endocrinology 2003; 177(1): 127–135. 39.Saadi S., Ihrcke N.S., Platt J.L. Endothelial cell shape and hyperacute rejection. Transplant Proc 1994; 26(3): 1149. 40.Sandrin M., Vaughan H.A., Dabkowski P.L., McKenzie I.F.C. Anti-pig IgM antibodies in human serum react predominantly with Gal-α-1,3-Gal epitopes. Proc Natl Acad Sci USA 1993; 90(23): 11391–11395. 41.Schoen F.J., Levy R.J. Calcification of tissue heart valve substitutes: progress toward understanding and prevention. Ann Thorac Surg 2005; 79(3): 1072–1080. 42.Simon P.M., Neethling F.A., Taniguchi S. et al. Intravenous infusion of Gal-alpha-1,3-Gal oligosaccharides in baboons delays hyperacute rejection of porcine hearts xenografts. Transplantation 1998; 65(3): 346–353. 43.Tanemura M., Yin D., DiSesa V. J., Galili U. Preventing anti-Gal response in xenograft recipients by an alpha-Gal toxin. Transplant Proc 2001; 33(1–2): 699–700. 44.van de Kerkhove M.P. Evidence for Gal-alpha-1,3-Gal expression on primary porcine hepatocytes: implication for bioartifical liver systems. J Hepatol 2005; 42(4): 541–547. 45.Xu T., Lorf T., Sablinski T. et al. Removal of anti-porcine natural antibodies from human and nonhuman primate plasma in vitro and in vivo by a Gal-α-1,3-Gal-α-1,4-Glc-R immunoaffinity column.Transplantation 1998; 65(2): 172–179. 22.Good A.H., Cooper D.C.K., Malcolm A.J. et al. Identification of carbohydrate structures which bind human anti-porcine antibodies: implication for discordant xenografting in man // Transplant Proc. – 1992. – Vol. 24, №2. – P. 559–562. 23.Groth C.G., Korsgren O., Tibell A. et al. Transplantation of fetal porcine pancreas to diabetic patients // Lancet. – 1994. – Vol. 344, №8934. – P. 1402–1404. 24.Hayashi S., Katayama A., Nagasaka T. et al. Tissue distribution of Gal-alpha-1,3-Gal epitope in heart, kidney and liver of pig and mouse // Transplant. Proceedings. – 1996. – Vol. 28, №1. – P. 216. 25.Igaz P. Recent strategies to overcome the hyperacute rejection in pig to human xenotransplantation // Yale J. Biol. Med. – 2001. – Vol. 74, №5. – P. 329–340. 26.Joziasse D.H., Oriol R. Xenotransplantation: the importance of the Gal-alpha-1,3-Gal epitope in hyperacute vascular rejec- tion // Biochem. Biophys. Acta. – 1999. – Vol. 1455, №2–3. – P. 403–418. 27.Keller M., Beiras-Fernandez A., Schmoeckel M. et al. Influence of hypothermia and cardioplegic solutions on expression of alpha-Gal epitope on porcine aortic endothelial cells // Exp. Clin. Transplant. – 2010. Vol. 8, №3. – P. 250–257. 28.Koike C., Fung J.J., Geller D.A. et al. Molecular basis of evo- lutionary loss of the 1,3-galactosyltransferase gene in higher primates // J. Biol. Chem. – 2002. – Vol. 277, №12. – P. 10114– 10120. 29.Konakci K.Z., Bohle B., Blumer R. et al. Alpha-Gal on bio- prostheses: xenograft immune response in cardiac surgery // Eur. J. Clin. Invest. – 2005. – Vol. 35, №1. – P. 17–23. 30.Lai L., Kolber-Simonds D., Park K. W. et al. Production of alpha- 1,3-galactosyltransferase knockout pigs by nuclear transfer cloning // Science. – 2002. – Vol. 295, №5557. – P. 1089–1092. 31.Leventhal J.R., Dalmasso A.P., Cromwell J.W. et al. Prolon- gation of cardiac xenograft survival by depletion of comple- ment // Transplantation. – 1993. – Vol. 55, № 4. – P. 857–865. 32.Mayo G.L., Posselt A.M., Barker C.F. et al. Prolongation of survival of donor-strain islet xenografts (rat-mouse) by intra- thymic inoculation of xenogeneic islet and bone marrow cells // Transplantation. – 1994. – Vol. 58, №1. – P. 107–109. 33.McKenzie I.F., Xing P.X., Vaughan H.A. et al. Distribution of the major xenoantigen (Gal-alpha-1,3-Gal) for pig to human xenografts // Transplant. Immunol. – 1994. – Vol. 2, №2. – P. 81–86. 34.Napier J.R., Napier P.H. The natural history of the primates. Cambridge: MIT Press, 1985. – 200 p. 35.Oldmixon B.A., Wood J.C., Ericsson T.A. et al. Porcine endo- genous retrovirus transmission characteristics of an inbred herd of miniature swine // J. Virol. – 2002. – Vol. 76, №6. – P. 3045–3048. 36.Oriol R., Ye Y., Koren E., Cooper D.K. Carbohydrate antigenes of pig tissues reacting with human natural antibodies as poten- tial targets for hyperacute vascular rejection in pig-to-man organ xenotransplantation // Transplantation. – 1993. – Vol. 6, №6. – P. 1433–1442. 37.Platt J.L. A perspective on xenograft rejection and accommo- dation // Immunol. Rev. – 1994. – Vol. 141. – P. 127–149. 38.Rayat G.R., Rajotte R.V., Hering B.J. et al. In vitro and in vivo expression of Gal-(1,3)Gal on porcine islet cells is age depen- dent // J. Endocrinol. – 2003. – Vol. 177, №1. – P. 127–135. 39.Saadi S., Ihrcke N.S., Platt J.L. Endothelial cell shape and hyperacute rejection // Transplant. Proc. – 1994. – Vol. 26, №3. – P. 1149. 40.Sandrin M., Vaughan H.A., Dabkowski P.L., McKenzie I.F.C. Anti-pig IgM antibodies in human serum react predominantly with Gal-α-1,3-Gal epitopes // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. – 1993. – Vol. 90, №23. – P. 11391–11395. 41.Schoen F.J., Levy R.J. Calcification of tissue heart valve substitutes: progress toward understanding and prevention // Ann. Thorac. Surg. – 2005. – Vol. 79, №3. – P. 1072–1080. 12 проблемы криобиологии и криомедицины problems of cryobiology and cryomedicine том/volume 26, №/issue 1, 2016 42.Simon P.M., Neethling F.A., Taniguchi S. et al. Intravenous infusion of Gal-alpha-1,3-Gal oligosaccharides in baboons delays hyperacute rejection of porcine hearts xenografts // Transplantation. – 1998. – Vol. 65, №3. – P. 346–353. 43.Tanemura M., Yin D., DiSesa V.J., Galili U. Preventing anti-Gal response in xenograft recipients by an alpha-Gal toxin // Transplant Proc. – 2001. – Vol. 33. №1–2. – P. 699–700. 44.van de Kerkhove M.P. Evidence for Gal-alpha-1,3-Gal expression on primary porcine hepatocytes: implication for bioartifical liver systems // J. Hepatol. – 2005. – Vol. 42, №4. – P. 541–547. 45.Xu T., Lorf T., Sablinski T. et al. Removal of anti-porcine natural antibodies from human and nonhuman primate plasma in vitro and in vivo by a Gal-α-1,3-Gal-α-1,4-Glc-R immunoaffinity column // Transplantation. – 1998. – Vol. 65, №2. – P. 172– 179.