Влияние криоконсервирования на экспрессию stemness-генов в клетках фетальной печени мышей
Збережено в:
| Опубліковано в: : | Проблемы криобиологии и криомедицины |
|---|---|
| Дата: | 2016 |
| Автори: | , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Russian |
| Опубліковано: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2016
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/137406 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Влияние криоконсервирования на экспрессию stemness-генов в клетках фетальной печени мышей / П.А. Борисов, А.Ю. Димитров, А.Н. Гольцев, М.В. Останков // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2016. — Т. 26, № 2. — С. 161. — рос. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-137406 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Борисов, П.А. Димитров, А.Ю. Гольцев, А.Н. Останков, М.В. 2018-06-17T10:58:22Z 2018-06-17T10:58:22Z 2016 Влияние криоконсервирования на экспрессию stemness-генов в клетках фетальной печени мышей / П.А. Борисов, А.Ю. Димитров, А.Н. Гольцев, М.В. Останков // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2016. — Т. 26, № 2. — С. 161. — рос. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/137406 ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии и криомедицины Тезисы Влияние криоконсервирования на экспрессию stemness-генов в клетках фетальной печени мышей Effect of cryopreservation on expression of stemness-genes in mouse fetal liver cells Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Влияние криоконсервирования на экспрессию stemness-генов в клетках фетальной печени мышей |
| spellingShingle |
Влияние криоконсервирования на экспрессию stemness-генов в клетках фетальной печени мышей Борисов, П.А. Димитров, А.Ю. Гольцев, А.Н. Останков, М.В. Тезисы |
| title_short |
Влияние криоконсервирования на экспрессию stemness-генов в клетках фетальной печени мышей |
| title_full |
Влияние криоконсервирования на экспрессию stemness-генов в клетках фетальной печени мышей |
| title_fullStr |
Влияние криоконсервирования на экспрессию stemness-генов в клетках фетальной печени мышей |
| title_full_unstemmed |
Влияние криоконсервирования на экспрессию stemness-генов в клетках фетальной печени мышей |
| title_sort |
влияние криоконсервирования на экспрессию stemness-генов в клетках фетальной печени мышей |
| author |
Борисов, П.А. Димитров, А.Ю. Гольцев, А.Н. Останков, М.В. |
| author_facet |
Борисов, П.А. Димитров, А.Ю. Гольцев, А.Н. Останков, М.В. |
| topic |
Тезисы |
| topic_facet |
Тезисы |
| publishDate |
2016 |
| language |
Russian |
| container_title |
Проблемы криобиологии и криомедицины |
| publisher |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Effect of cryopreservation on expression of stemness-genes in mouse fetal liver cells |
| issn |
0233-7673 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/137406 |
| citation_txt |
Влияние криоконсервирования на экспрессию stemness-генов в клетках фетальной печени мышей / П.А. Борисов, А.Ю. Димитров, А.Н. Гольцев, М.В. Останков // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2016. — Т. 26, № 2. — С. 161. — рос. |
| work_keys_str_mv |
AT borisovpa vliâniekriokonservirovaniânaékspressiûstemnessgenovvkletkahfetalʹnoipečenimyšei AT dimitrovaû vliâniekriokonservirovaniânaékspressiûstemnessgenovvkletkahfetalʹnoipečenimyšei AT golʹcevan vliâniekriokonservirovaniânaékspressiûstemnessgenovvkletkahfetalʹnoipečenimyšei AT ostankovmv vliâniekriokonservirovaniânaékspressiûstemnessgenovvkletkahfetalʹnoipečenimyšei AT borisovpa effectofcryopreservationonexpressionofstemnessgenesinmousefetallivercells AT dimitrovaû effectofcryopreservationonexpressionofstemnessgenesinmousefetallivercells AT golʹcevan effectofcryopreservationonexpressionofstemnessgenesinmousefetallivercells AT ostankovmv effectofcryopreservationonexpressionofstemnessgenesinmousefetallivercells |
| first_indexed |
2025-11-25T20:31:21Z |
| last_indexed |
2025-11-25T20:31:21Z |
| _version_ |
1850523925334720512 |
| fulltext |
Влияние криоконсервирования на экспрессию
stemness-генов в клетках фетальной печени мышей
П.А. Борисов, А.Ю. Димитров, А.Н. Гольцев, М.В. Останков
Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков
Effect of Cryopreservation on Expression
of Stemness-Genes in Mouse Fetal Liver Cells
P.A. Borysov, A.Yu. Dimitrov, A.N. Goltsev, M.V. Ostankov
Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine
of the National Academy of Sciences of Ukraine, Kharkiv, Ukraine
В настоящее время в клеточной и тканевой терапии
используются мезенхимальные (МСК) и гемопоэтичес-
кие стволовые клетки (ГСК) фетальной печени (ФП).
Применение биообъектов в клинической практике
предусматривает их криоконсервирование. Самообнов-
ление и плюрипотентность стволовых клеток находятся
под контролем транскрипционных факторов, из которых
наиболее значимыми являются nanog, oct4 и sox2.
Анализ состояния stemness-генов позволяет раскрыть
механизмы функционирования генетического аппарата
клетки после замораживания-отогрева, а также оптими-
зировать существующие протоколы криоконсерви-
рования.
Цель данного исследования – сравнительный анализ
изменения экспрессии генов nanog, oct4 и sox2 в клетках
фетальной печени мышей до и после криоконсервиро-
вания.
Объектом исследования были клетки ФП мышей
линии С57BL. Суспензию клеток получали из гомогената
фетальной печени мышей 14 суток гестации в среде 199.
Фракции CD105+ (МСК) и CD117+ (ГСК) выделяли
методом иммуномагнитного сортирования с помощью
моноклональных антител к CD105 и CD117 («BD», США).
Клетки ФП криоконсервировали под защитой 10% ДМСО
на программном замораживателе со скоростью
1 град/мин до –25°С с последующим погружением в
жидкий азот. Затем образцы отогревали на водяной бане
при 37°С. Жизнеспособность клеток определяли окра-
шиванием пропидий йодидом. Экспрессию генов nanog,
oct4 и sox2 в нативных и криоконсервированных
выделенных фракциях оценивали с помощью РТ-ПЦР.
Показано, что используемый метод выделения и
криоконсервирования позволяет сохранить высокую
жизнеспособность клеток. Уровень экспрессии иссле-
дуемых генов в суспензии клеток ФП и выделенных
фракциях CD105+ и CD117+ отличался до и после
криоконсервирования.
Таким образом, криоконсервирование влияет на
экспрессию stemness-генов в исследуемых фракциях и,
следовательно, изменяет функциональное состояние
генетического аппарата клетки.
Nowadays mesenchymal (MSCs) and hematopoetic
(HSCs) stem cells of fetal liver (FL) are used in cell and
tissue therapy. The important part of application of
biological objects in clinical practice is cryopreservation.
Stem cells self-renewal and pluripotency are controlled by
transcription factors, the most principal are nanog, oct4
and sox2. The analysis of stemness-genes state could clear
up the principles of cell genomic apparatus functioning after
cryopreservation, and improve existing cryopreservation
protocols. The aim of research was to carry out a comparative
analysis of changes in the expression of nanog, oct4 and
sox2 genes in mouse fetal liver cells before and after
cryopreservation.
Fetal liver cells from С57BL mice were the research object.
Cell suspension was obtained by homogenization of mouse
fetal livers in 199 medium at the 14th day of gestation.
Fractions CD105+ (МSCs) and CD117+ (HSCs) were
separated by immunomagnetic sorting using monoclonal
antibodies to CD105 and CD117 (BD, USA). Fetal liver cells
were cryopreserved under protection of 10% DMSO with
a programmed freezer with 1 deg/min cooling rate down to
–25°С and then immersed into liquid nitrogen. After storage
the samples were thawed in a water bath at 37°С. Cell
viability was assayed by propidium iodide staining. Gene
expression in isolated fresh and cryopreserved cell
subpopulations was estimated by RT-PCR.
It has been shown, that the used method of isolation
and cryopreservation allowed to preserve a high cell
viability. The expression of target genes in fetal liver
suspension and its isolated fractions was different before
and after cryopreservation.
Thus, cryopreservation affected the expression of
stemness-genes in the studied fractions and therefore
changed the functional state of genetic apparatus of a cell.
проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 26, №/issue 2, 2016
161
|