Восстановление структурно-функциональных параметров у крыс с криогенной травмой головного мозга после трансплантации клеток стромы костного мозга, индуцированных в нейробласты

Gespeichert in:

Bibliographische Detailangaben
Veröffentlicht in:	Проблемы криобиологии и криомедицины
Datum:	2005
Hauptverfasser:	Пятикоп, В.А., Щегельская, Е.А., Микулинский, Ю.Е., Шеверева, В.М., Дворцевой, В.К.
Format:	Artikel
Sprache:	Russian
Veröffentlicht:	Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України 2005
Schlagworte:	Стволовые клетки. Современные проблемы клеточной и тканевой терапии
Online Zugang:	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/137521
Tags:	Tag hinzufügen Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Назва журналу:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Zitieren:	Восстановление структурно-функциональных параметров у крыс с криогенной травмой головного мозга после трансплантации клеток стромы костного мозга, индуцированных в нейробласты / В.А. Пятикоп, Е.А. Щегельская, Ю.Е. Микулинский, В.М. Шеверева, В.К. Дворцевой // Проблемы криобиологии. — 2005. — Т. 15, № 3. — С. 449-451. — Бібліогр.: 9 назв. — рос.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-137521
record_format	dspace
spelling	Пятикоп, В.А. Щегельская, Е.А. Микулинский, Ю.Е. Шеверева, В.М. Дворцевой, В.К. 2018-06-17T12:24:50Z 2018-06-17T12:24:50Z 2005 Восстановление структурно-функциональных параметров у крыс с криогенной травмой головного мозга после трансплантации клеток стромы костного мозга, индуцированных в нейробласты / В.А. Пятикоп, Е.А. Щегельская, Ю.Е. Микулинский, В.М. Шеверева, В.К. Дворцевой // Проблемы криобиологии. — 2005. — Т. 15, № 3. — С. 449-451. — Бібліогр.: 9 назв. — рос. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/137521 616.714-001.18:616.419-089.843 ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии и криомедицины Стволовые клетки. Современные проблемы клеточной и тканевой терапии Восстановление структурно-функциональных параметров у крыс с криогенной травмой головного мозга после трансплантации клеток стромы костного мозга, индуцированных в нейробласты Article published earlier
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
title	Восстановление структурно-функциональных параметров у крыс с криогенной травмой головного мозга после трансплантации клеток стромы костного мозга, индуцированных в нейробласты
spellingShingle	Восстановление структурно-функциональных параметров у крыс с криогенной травмой головного мозга после трансплантации клеток стромы костного мозга, индуцированных в нейробласты Пятикоп, В.А. Щегельская, Е.А. Микулинский, Ю.Е. Шеверева, В.М. Дворцевой, В.К. Стволовые клетки. Современные проблемы клеточной и тканевой терапии
title_short	Восстановление структурно-функциональных параметров у крыс с криогенной травмой головного мозга после трансплантации клеток стромы костного мозга, индуцированных в нейробласты
title_full	Восстановление структурно-функциональных параметров у крыс с криогенной травмой головного мозга после трансплантации клеток стромы костного мозга, индуцированных в нейробласты
title_fullStr	Восстановление структурно-функциональных параметров у крыс с криогенной травмой головного мозга после трансплантации клеток стромы костного мозга, индуцированных в нейробласты
title_full_unstemmed	Восстановление структурно-функциональных параметров у крыс с криогенной травмой головного мозга после трансплантации клеток стромы костного мозга, индуцированных в нейробласты
title_sort	восстановление структурно-функциональных параметров у крыс с криогенной травмой головного мозга после трансплантации клеток стромы костного мозга, индуцированных в нейробласты
author	Пятикоп, В.А. Щегельская, Е.А. Микулинский, Ю.Е. Шеверева, В.М. Дворцевой, В.К.
author_facet	Пятикоп, В.А. Щегельская, Е.А. Микулинский, Ю.Е. Шеверева, В.М. Дворцевой, В.К.
topic	Стволовые клетки. Современные проблемы клеточной и тканевой терапии
topic_facet	Стволовые клетки. Современные проблемы клеточной и тканевой терапии
publishDate	2005
language	Russian
container_title	Проблемы криобиологии и криомедицины
publisher	Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
format	Article
issn	0233-7673
url	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/137521
citation_txt	Восстановление структурно-функциональных параметров у крыс с криогенной травмой головного мозга после трансплантации клеток стромы костного мозга, индуцированных в нейробласты / В.А. Пятикоп, Е.А. Щегельская, Ю.Е. Микулинский, В.М. Шеверева, В.К. Дворцевой // Проблемы криобиологии. — 2005. — Т. 15, № 3. — С. 449-451. — Бібліогр.: 9 назв. — рос.
work_keys_str_mv	AT pâtikopva vosstanovleniestrukturnofunkcionalʹnyhparametrovukrysskriogennoitravmoigolovnogomozgaposletransplantaciikletokstromykostnogomozgainducirovannyhvneiroblasty AT ŝegelʹskaâea vosstanovleniestrukturnofunkcionalʹnyhparametrovukrysskriogennoitravmoigolovnogomozgaposletransplantaciikletokstromykostnogomozgainducirovannyhvneiroblasty AT mikulinskiiûe vosstanovleniestrukturnofunkcionalʹnyhparametrovukrysskriogennoitravmoigolovnogomozgaposletransplantaciikletokstromykostnogomozgainducirovannyhvneiroblasty AT ševerevavm vosstanovleniestrukturnofunkcionalʹnyhparametrovukrysskriogennoitravmoigolovnogomozgaposletransplantaciikletokstromykostnogomozgainducirovannyhvneiroblasty AT dvorcevoivk vosstanovleniestrukturnofunkcionalʹnyhparametrovukrysskriogennoitravmoigolovnogomozgaposletransplantaciikletokstromykostnogomozgainducirovannyhvneiroblasty
first_indexed	2025-11-26T21:32:08Z
last_indexed	2025-11-26T21:32:08Z
_version_	1850777127982465024
fulltext	449ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 15, 2005, №3 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 15, 2005, №3 УДК 616.714-001.18:616.419-089.843 Восстановление структурно-функциональных параметров у крыс с криогенной травмой головного мозга после трансплантации клеток стромы костного мозга, индуцированных в нейробласты В.А. ПЯТИКОП1, Е.А. ЩЕГЕЛЬСКАЯ2, Ю.Е. МИКУЛИНСКИЙ2, В.М. ШЕВЕРЕВА3, В.К.ДВОРЦЕВОЙ4 1Харьковский государственный медицинский университет 2Лаборатория молекулярной диагностики и клеточных биотехнологий “Вирола”, г. Харьков 3Институт биологии, ХНУ им. В.Н.Каразина, г.Харьков 4Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков Адрес для корреспонденции: В.А. Пятикоп, Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, ул. Переяславская, 23, г. Харьков, Украина 61015; тел.:+38 (057) 705-67-48, факс: +38 (057) 373-30-84, e-mail: cryo@online.kharkov.ua Известно, что при черепно-мозговой травме (ЧМТ) происходят структурно-функциональные изменения головного мозга, иммунологические нарушения, нарушение липидного и нейро- медиаторного обмена, а также другие изменения в системе гомеостаза, требующие проведения определенной коррекции. В проблеме социальной адаптации больных, перенесших тяжелую ЧМТ, одно из ведущих мест занимает восстановление двигательных расст- ройств. Морфологическим субстратом двига- тельных нарушений в виде геми- или монопареза, моторной афазии, парезов лицевого нерва и других является посттравматический глиальный рубец или посттравматическая церебральная киста, образовавшиеся на месте очага размозжения, возникшего в результате травмы. Одной из основных задач нейрохирурга в остром периоде тяжелой ЧМТ является удаление очага контузии- размозжения с целью предотвращение форми- рования посттравматической кисты и образования глиального мозгового рубца. Традиционно счита- лось, что наличие очага контузии-размозжения головного мозга, выявляемого магнитно-резонанс- ным или рентгеновским компьютерным томогра- фом, является показанием к нейрохирургической операции. Однако оперативное вмешательство не предотвращает развитие морфологических последствий очагового поражения мозга, а иногда влечет за собой дополнительную травматизацию окружающего мозгового вещества. В последнее время появился ряд научных работ, которые свидетельствуют об эффективности расширения показаний к консервативному лечению больных с ушибами головного мозга [2] . В комплексе лечебных мероприятий как в остром, так и в отдаленном периоде травма- тической болезни мозга, с целью коррекции двигательных нарушений у больных, перенесших ЧМТ, в последние годы некоторые авторы используют трансплантацию эмбриональных нервных клеток (ЭНК) [3]. Полученные резуль- таты свидетельствуют о положительном влиянии трансплантации ЭНК на восстановление нарушен- ных двигательных функций, как при экспери- ментальной травме головного мозга, так и в клинической практике [1, 3]. Однако применение ЭНК связано с проблемами морально-этического характера, отсутствием достаточного количества жизнеспособных клеток для эффективной транс- плантации и нестабильностью достигнутого положительного результата. В то же время, имеются данные о возможности применения аутоклеток стромы костного мозга, индуци- рованных в нейробласты, в лечении ряда нейроде- генеративных заболеваний [6, 7, 8]. Цель исследования – изучение динамики двигательных реакций крыс и гисто-морфо- логических особенностей очага криогенной травмы головного мозга после трансплантации клеток стромы костного мозга (КСКМ), индуцированных в нейробласты. Материалы и методы Исследование проведено на 12 крысах-самцах линии Вистар, весом 220–270г. Моделирование криогенной травмы головного мозга у крыс проводили по описанной методике [9] в нашей модификации. Крысу в условиях тиопенталового наркоза (0,375 натрия тиопентала + 0,0001 г атропина сульфата внутрибрюшинно) помещали в стерео- таксический аппарат. С помощью бора диаметром 3 мм в левой теменной кости, на средине расстояния между коронарным и лямбдовидным швами, на 3 мм латеральнее сагиттальной линии, наносили фрезевое отверстие. Твердая мозговая оболочка оставалась интактной. Автономный нейрохирургический криозонд, с наружным диаметром 2 мм, устанавливали в стерео- таксический аппарат и вводили его рабочую часть в сформированное в кости отверстие, а затем производили четырехкратную криодеструкцию моторной зоны коры головного мозга с временем экспозиции по 30 сек. Практически у всех животных вызывали полную гемиплегию. Нейротранс- плантацию (НТ) проводили с использованием 450ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 15, 2005, №3 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 15, 2005, №3 стереотаксического аппарата через 7 дней после криодеструкции. Затем животных разделили на две группы: I – с нейротрансплантацией КСКМ (n=7) и II – контрольную группу (n=5). КСКМ крысы получали из костного мозга бедренной кости, размножали в культуре до образования клеточного монослоя (рис. 1) по методике [5] и индуцировали в нейробласты (рис. 2) под действием ретиноевой кислоты (10-6М). КСКМ, индуцированные в нейробласты, перед трансплантацией метили суправитальным зеле-ным флюоресцентным красителем DDC, синтезированным в Институте “Монокристалл”, Харьков. DDC связывается с липидными компо- нентами клеточной мембраны, не повреждая клетку, и позволяет проследить судьбу меченых клеток после трансплантации, по крайней мере, в течение 2 недель. Нейротрансплантацию осуществляли путем стереотаксического введения 5µl суспензии клеток (50×105 клеток) в область криотравмы моторной коры мозга через центр фрезевого отверстия на глубину 2 мм от твердой мозговой оболочки с помощью шприца Hamilton. Гисто-морфологические исследования проводи- ли на криосрезах мозга крыс на 8 и 14 сутки после моделирования криогенной травмы головного мозга. Результаты и обсуждение Двигательные расстройства в виде глубокого гемипареза, вплоть до гемиплегии, наступали у всех животных сразу после проведения криодеструкции моторной зоны коры головного мозга. Кроме двигательных нарушений у животных отмечали поведенческие нарушения в виде сонливости в течение первых 3-5 часов после операции, отказа от приема пищи на протяжении первых суток, вялости, гиподинамии. Признаки восстановления двигательных нарушений у контрольной группы животных (5 крыс) начинались с 10-11 суток. Регресс гемиплегии у 3 животных наблюдался с верхней конечности, у 2 – с нижней. Полное восстановление движений произошло у 2 животных через 22 и 25 суток после моделирования криогенной травмы мозга. У остальных 3 живот- ных явления гемиплегии уменьшились, однако полного восстановления движений в конечностях не наблюдалось даже через 60 суток. Наблюдение за животными, которым была произведена нейротрансплантация КСКМ, индуци- рованных в нейробласты, показало, что процесс восстановления гемиплегии и гемипареза у них начинался на 9-11 сутки после травмы, т.е. через 2 -4 дня после нейротрансплантации. Приведенные данные свидетельствуют о том, что НТ способствует ускоренному адекватному восстановлению зоны повреждения коры головного мозга, и, возможно, предотвращает формирование посттравматического соединительнотканного мозгового рубца, который и определяет необра- тимость травмы. На вторые сутки после трансплантации меченые клетки обнаруживались в зоне травмы в виде компактной группы с интенсивной зеленой флюоресценцией (рис. 3). Через неделю после нейротрансплантации меченые клетки проникали в ткань мозга, граничащую с травмой, и равно- мерно распределялись среди клеток реципиента (рис. 4). Интенсивность флюоресценции клеток при этом была ниже. Полученные результаты настоящего сообще- ния свидетельствуют о совпадении сроков восстановления двигательных нарушений и сроков Рис. 1. Клетки стромы костного мозга крысы в культуре. Ув. 200. Рис. 2. Клетки стромы костного мозга крысы, инду- цированные в нейробласты под действием ретиноевой кислоты. Окраска метиленовым синим. Ув. 300. 451ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 15, 2005, №3 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 15, 2005, №3 a б Рис. 3. Компактное скопление меченых КСКМ, индуци- рованных в нейробласты, в зоне криотравмы на 2 сутки после нейротрансплантации. Ув.100. Световая (а) и люминесцентная микроскопия (б). Рис. 4. Распределение меченых КСКМ, индуцированных в нейробласты, в области травмы через 7 суток после нейротрансплантации. Ув.100. Световая (а) и люминес- центная микроскопия (б). a б миграции КСКМ в очаг криогенной травмы мозга, т.е. на 2-7 сутки после НТ. Выводы 1. Трансплантация КСКМ, индуцированных в нейробласты, через неделю после криогенной травмы головного мозга способствует восста- новлению морфологической структуры повреж- денного мозга и двигательной активности крыс. 2. Меченые флюоресцентным красителем КСКМ, индуцированные в нейробласты, при локальном введении в зону криодеструкции мигрируют в область травмы и распределяются в ткани могза. 3. Сроки регресса двигательных и поведен- ческих нарушений совпадают со сроками восста- новления поврежденного участка коры головного мозга. Литература Современные представления о патогенезе закрытой черепно-мозговой травмы / Под ред. Е.Г. Педаченко.– Киев, 1996.– 282 с. Потапов А.А., Лихтерман Л.Б., Зельман В.Л. и др. Доказательная нейротравматология.– М., 2003.– 517 с. 1. 2. Цымбалюк В.И., Щерба И.Н., Гордиенко О.В. Влияние трансплантации эмбриональной нервной ткани на динамику отека головного мозга при экспериментальной черепно-мозговой травме // Нейрофизиология.– 1998.– Т. 30, №3.– С. 206-211. Цымбалюк В.И., Васильева И.Г., Чопик Н.Г. и др. Влияние экстракта из эмбриональной нервной ткани на содер- жание дофамина и норадреналина в эксплантах среднего и продолговатого мозга новорожденных крыс // Нейрофизиология.– 1998.– №2.– С. 98-103. Щегельская Е.А., Микулинский Ю.Е., Ревищин А.В. и др. Индуцированная дифференцировка клеток стромы костного мозга мыши в нервные клетки // Цитология.– 2002.– Т. 44, №7.– С. 637-641. Щегельская Е.А., Пятикоп В.А., Микулинский Ю.Е., Денисенко Т.В. Индукция стромальных клеток костного мозга в нейробласты и их использование в лечении пациентов с болезнью Паркинсона // Трансплантология.– 2004.– Т. 7, №3.– С. 381-384. Mahmood A., Lu D., Li Y. et al. Treatment of traumatic brain injury in female rats with intravenous administration of bone marrow stromal cells // J. Neurosurg.– 2001.– Vol.49, N5.– P. 1196-1203. Mahmood A., Lu D., Li Y. et al. Intracranial bone marrow transplantation after traumatic brain injury improving functional outcome in adult rats // J. Neurosurg.– 2001.– Vol. 94, N4.– P. 683-685. Laska Z., Horvath E., Busija D.W. Neural stem cells transplantation in cold lesion: a novel approach for the investigation of brain trauma and repair // Brain Res. Protoc.– 2003.– Vol.11, N3.– P. 145-154. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9.

Institution

Ähnliche Einträge