Динамика изменений уровня дофамина в головном мозге и крови крыс с моделью паркинсонизма после трансплантации клеток стромы костного мозга, индуцированных в нейробласты

Saved in:

Bibliographic Details
Published in:	Проблемы криобиологии и криомедицины
Date:	2005
Main Authors:	Пятикоп, В.А., Щегельская, Е.А., Горбач, Т.В., Микулинский, Ю.Е., Кирошка, В.В.
Format:	Article
Language:	Russian
Published:	Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України 2005
Subjects:	Стволовые клетки. Современные проблемы клеточной и тканевой терапии
Online Access:	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/137524
Tags:	Add Tag No Tags, Be the first to tag this record!
Journal Title:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Cite this:	Динамика изменений уровня дофамина в головном мозге и крови крыс с моделью паркинсонизма после трансплантации клеток стромы костного мозга, индуцированных в нейробласты / В.А. Пятикоп, Е.А. Щегельская, Т.В. Горбач, Ю.Е. Микулинский, В.В. Кирошка // Проблемы криобиологии. — 2005. — Т. 15, № 3. — С. 452-454. — Бібліогр.: 8 назв. — рос.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-137524
record_format	dspace
spelling	Пятикоп, В.А. Щегельская, Е.А. Горбач, Т.В. Микулинский, Ю.Е. Кирошка, В.В. 2018-06-17T12:25:35Z 2018-06-17T12:25:35Z 2005 Динамика изменений уровня дофамина в головном мозге и крови крыс с моделью паркинсонизма после трансплантации клеток стромы костного мозга, индуцированных в нейробласты / В.А. Пятикоп, Е.А. Щегельская, Т.В. Горбач, Ю.Е. Микулинский, В.В. Кирошка // Проблемы криобиологии. — 2005. — Т. 15, № 3. — С. 452-454. — Бібліогр.: 8 назв. — рос. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/137524 616.858-089.843:612.419 ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии и криомедицины Стволовые клетки. Современные проблемы клеточной и тканевой терапии Динамика изменений уровня дофамина в головном мозге и крови крыс с моделью паркинсонизма после трансплантации клеток стромы костного мозга, индуцированных в нейробласты Article published earlier
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
title	Динамика изменений уровня дофамина в головном мозге и крови крыс с моделью паркинсонизма после трансплантации клеток стромы костного мозга, индуцированных в нейробласты
spellingShingle	Динамика изменений уровня дофамина в головном мозге и крови крыс с моделью паркинсонизма после трансплантации клеток стромы костного мозга, индуцированных в нейробласты Пятикоп, В.А. Щегельская, Е.А. Горбач, Т.В. Микулинский, Ю.Е. Кирошка, В.В. Стволовые клетки. Современные проблемы клеточной и тканевой терапии
title_short	Динамика изменений уровня дофамина в головном мозге и крови крыс с моделью паркинсонизма после трансплантации клеток стромы костного мозга, индуцированных в нейробласты
title_full	Динамика изменений уровня дофамина в головном мозге и крови крыс с моделью паркинсонизма после трансплантации клеток стромы костного мозга, индуцированных в нейробласты
title_fullStr	Динамика изменений уровня дофамина в головном мозге и крови крыс с моделью паркинсонизма после трансплантации клеток стромы костного мозга, индуцированных в нейробласты
title_full_unstemmed	Динамика изменений уровня дофамина в головном мозге и крови крыс с моделью паркинсонизма после трансплантации клеток стромы костного мозга, индуцированных в нейробласты
title_sort	динамика изменений уровня дофамина в головном мозге и крови крыс с моделью паркинсонизма после трансплантации клеток стромы костного мозга, индуцированных в нейробласты
author	Пятикоп, В.А. Щегельская, Е.А. Горбач, Т.В. Микулинский, Ю.Е. Кирошка, В.В.
author_facet	Пятикоп, В.А. Щегельская, Е.А. Горбач, Т.В. Микулинский, Ю.Е. Кирошка, В.В.
topic	Стволовые клетки. Современные проблемы клеточной и тканевой терапии
topic_facet	Стволовые клетки. Современные проблемы клеточной и тканевой терапии
publishDate	2005
language	Russian
container_title	Проблемы криобиологии и криомедицины
publisher	Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
format	Article
issn	0233-7673
url	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/137524
citation_txt	Динамика изменений уровня дофамина в головном мозге и крови крыс с моделью паркинсонизма после трансплантации клеток стромы костного мозга, индуцированных в нейробласты / В.А. Пятикоп, Е.А. Щегельская, Т.В. Горбач, Ю.Е. Микулинский, В.В. Кирошка // Проблемы криобиологии. — 2005. — Т. 15, № 3. — С. 452-454. — Бібліогр.: 8 назв. — рос.
work_keys_str_mv	AT pâtikopva dinamikaizmeneniiurovnâdofaminavgolovnommozgeikrovikryssmodelʹûparkinsonizmaposletransplantaciikletokstromykostnogomozgainducirovannyhvneiroblasty AT ŝegelʹskaâea dinamikaizmeneniiurovnâdofaminavgolovnommozgeikrovikryssmodelʹûparkinsonizmaposletransplantaciikletokstromykostnogomozgainducirovannyhvneiroblasty AT gorbačtv dinamikaizmeneniiurovnâdofaminavgolovnommozgeikrovikryssmodelʹûparkinsonizmaposletransplantaciikletokstromykostnogomozgainducirovannyhvneiroblasty AT mikulinskiiûe dinamikaizmeneniiurovnâdofaminavgolovnommozgeikrovikryssmodelʹûparkinsonizmaposletransplantaciikletokstromykostnogomozgainducirovannyhvneiroblasty AT kiroškavv dinamikaizmeneniiurovnâdofaminavgolovnommozgeikrovikryssmodelʹûparkinsonizmaposletransplantaciikletokstromykostnogomozgainducirovannyhvneiroblasty
first_indexed	2025-11-25T23:07:44Z
last_indexed	2025-11-25T23:07:44Z
_version_	1850578745175310336
fulltext	452ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 15, 2005, №3 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 15, 2005, №3 УДК 616.858-089.843:612.419 Динамика изменений уровня дофамина в головном мозге и крови крыс с моделью паркинсонизма после трансплантации клеток стромы костного мозга, индуцированных в нейробласты В.А. ПЯТИКОП1, Е.А. ЩЕГЕЛЬСКАЯ2, Т.В. ГОРБАЧ1, Ю.Е. МИКУЛИНСКИЙ2, В.В. КИРОШКА3 1Харьковский государственный медицинский университет 2Лаборатория молекулярной диагностики и клеточных биотехнологий “Вирола”, г. Харьков 3Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков В настоящее время можно считать установ- ленным, что основной причиной возникновения болезни Паркинсона (БП) является дегенерация дофаминэргических клеток черной субстанции (SN). Одним из высокоэффективных подходов в лечении больных БП является дофаминзамести- тельная терапия в виде дофаминсодержащих препаратов (наком, синемет, мадопар и др.). Кроме того, источником дофамина могут быть переса- женные дофаминпродуцирующие нервные клетки фетального происхождения [3, 4]. При этом, для эффективного лечения одного пациента, получают смесь фетальных нервных клеток от 4-6 плодов [1], причем 90-95% трансплантированных клеток обычно погибает в первые дни после операции [2]. Морально-этические запреты, гетерогенность популяции трансплантируемых клеток, опасность инфицирования и иммунологические проблемы, связанные с нейротрансплантацией фетальных тканей, делают актуальным поиск другого источника дофаминпродуцирующих клеток. Таким источником могут стать эмбриональные ство- ловые клетки, дифференцированные в нервные [7] или аутологичные нервные клетки, полученные из стволовых клеток взрослого организма, в част- ности, из клеток стромы костного мозга (КСКМ) [5, 6] Цель работы – изучение процесса восста- новления двигательных нарушений и изменения уровня дофамина в головном мозге и крови крыс с экспериментальной моделью паркинсонизма после трансплантации клеток стромы костного мозга крыс, индуцированных в нейробласты. Материалы и методы Исследование выполнено на 54 половозрелых крысах-самцах линии Vistar массой 250-300г; 6 животных были интактными (1 группа); 24 составили контрольную группу с двусторонней деструкцией SN (модель паркинсонизма, 2 группа) и 24 – с двусторонней деструкцией SN и после- дующей НТ КСКМ, индуцированных в нейро- бласты (3 группа ). Моделирование паркинсонизма (МП). МП проводили с помощью стереотаксического аппарата с использованием атласа стерео- таксических координат мозга крысы Е. Фифкова и Дж. Маршалла. Координаты SN соответствовали точке, находящейся на линии АР+ 4 мм, латераль- но – 2 мм, вглубь – 8,1 мм. Для наркоза исполь- зовали внутрибрюшинное введение тиопентала натрия в дозе 12 мг на 100 г массы тела. Деструкцию в области SN с двух сторон произво- дили методом анодного электролиза. Анод изготовляли из стальной проволоки диаметром 0,3 мм, изолированной по всей длине бакелитовым лаком за исключением кончика длиной до 1 мм. Катод помещали в рот животного. Электролиз производили током с напряжением 12 В с силой тока 0,3 А экспозицией 6-8 сек. Культивирование и индукция КСКМ в нейробласты. Клетки стромы костного мозга выделяли из костного мозга, который получали из бедренных костей крыс и рассеивали в культу- ральные флаконы площадью 80 см2 в среде DMEM/F12 c 20% фетальной бычьей сыворотки и 50 мкг/мл гентамицина. Через 24 часа культи- вирования среду сливали и тщательно промывали клетки раствором Хэнкса. Добавляли свежую среду и культивировали стромальные клетки при 37°С и 5% СО2 в течение 14 суток до образования клеточного монослоя, меняя среду каждые 3 суток. Для индукции дифференцировки в нейробласты КСКМ инкубировали в растворе ретиноевой кислоты (10-6М) в течение 2 часов при 37°С. Животным опытной группы вводили по 30-50 тыс. клеток в зону деструкции через микрокапилляр. Уровень дофамина (ДА) во фронтальной коре, хвостатом ядре и крови крыс определяли через 5, 15 и 30 суток после МП методом колоночной хроматографии с последующим флуориметричес- ким анализом и выражали в нмоль/литр [8 ]. Результаты и обсуждение Билатеральная деструкция SN вызывала у крыс грубые двигательные нарушения в виде насиль- ственных монотонных движений головой, “горбо- подобного” изгиба туловища, причем у некоторых Адрес для корреспонденции: В.А. Пятикоп, Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, ул. Переяславская, 23, г. Харьков, Украина 61015; тел.:+38 (057) 705-67-48, факс: +38 (057) 373-30-84, e-mail: cryo@online.kharkov.ua 453ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 15, 2005, №3 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 15, 2005, №3 животных были неестественно вытянуты конечности и вертикально поднят хвост. Описанные двигательные расстройства возникали у всех животных на 1-2 сутки после деструкции. Одним из характерных прояв- лений МП у животных были двигательные акты в виде манежного бега. Регресс двига- тельных нарушений был выражен в обеих группах опытных животных. В контрольной группе (2) восстановление двигательных функций наступало спонтанно на 45-50 сутки после деструкции SN. В группе животных (3) после деструкции SN и одно- временной НТ нормализация движений наступала на 12-14 сутки после НТ. Результаты исследования уровня ДА в разные сроки после операции представлены в таблицах 1-4. Нормальные показатели уровня ДА по данным для 6 интактных животных являются общими для всех таблиц. Из данных таблицы 1 видно, что на 5 сутки в результате МП происходит резкое снижение уровня ДА в хвостатом ядре и фронтальной коре, менее выраженная реакция наблюдается в крови. Однако уже в эти сроки происходит определенная компенсация дефицита ДА в группе животных с одновременной деструк- цией и НТ. Через 15 суток после операции описанные нарушения двигательных функций постепенно регрессируют, особенно заметно это происхо- дит у животных с НТ, причем регресс двигательных нарушений у этой группы животных несколько опережает нормализацию показателей уровня ДА в структурах мозга. По-видимому, в процессе восстановления двигательных функций важную роль играют не только нормализации уровня ДА, но и другие репаративные и компенсаторные механизмы головного мозга (табл. 2). Полное восстановление уровня ДА в структурах мозга наступает через 30 суток, когда у животных 3 группы практически отсутствуют какие-либо двигательные нарушения (табл. 3). При дальнейшем наблюдении за живот- ными мы отмечали практически полный регресс симптоматики МП в обеих экспери- ментальных группах. Через 50 дней после операции наблюдается нормализация уровня ДА в хвостатом ядре у животных 2 и 3 групп и незначительное его снижение во фронталь- ной коре (табл.4). Оценка динамики концентраций ДА в крови показывает, что в обеих экспери- ментальных группах наблюдается досто- илиьнакТ аруткуртс хынтовижыппурГ ,еынткатнИ 6=N ,NSяицкуртсеД 6=N +NSяицкуртсеД яицатналпснарт 6=N яаньлатнорФ арок 21,0±57,0 30,0±81,0 10,0±96,0 еотатсовХ ордя 37,0±11,3 51,0±1,1 35,0±18,2 ьворK 36,0±65,9 3,1±9,6 75,0±10,8 Таблица 1. Уровень дофамина (нмоль/литр) в структурах головного мозга и в крови крыс через 5 суток после деструкции и деструкции с НТ нейробластов, индуцированных из КСКМ Примечание: – отличия достоверны относительно интактных крыс (Р< 0,05) илиьнакТ аруткуртс хынтовижыппурГ ,еынткатнИ 6=N ,NSяицкуртсеД 6=N +NSяицкуртсеД яицатналпснарт 6=N яаньлатнорФ арок 21,0±57,0 80,0±81,0 40,0±37,0 еотатсовХ ордя 37,0±11,3 34,0±57,1 21,0±47,2 ьворK 36,0±65,9 1,1±8,6 37,0±67,7 Таблица 2. Уровень дофамина (нмоль/литр) в структурах головного мозга и в крови крыс через 15 суток после деструкции и деструкции с НТ нейробластов, индуцированных из КСКМ Примечание: * – отличия достоверны относительно интактных крыс (Р< 0,05) илиьнакТ аруткуртс хынтовижыппурГ ,еынткатнИ 6=N ,NSяицкуртсеД 6=N +NSяицкуртсеД яицатналпснарт 6=N яаньлатнорФ арок 21,0±57,0 30,0±21,0 40,0±57,0 еотатсовХ ордя 37,0±11,3 60,0±8,2 14,0±11,4 ьворK 36,0±65,9 21,0±8,5 37,0±65,8 Таблица 3. Уровень дофамина (нмоль/литр) в структурах головного мозга и в крови крыс через 30 суток после деструкции и деструкции с НТ нейробластов, индуцированных из КСКМ Примечание: – отличия достоверны относительно интактных крыс (Р< 0,05) 454ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 15, 2005, №3 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 15, 2005, №3 верное снижение уровня ДА в крови и последующая тенденция к его нормализации. Выводы 1. Билатеральная деструкция SN с по- мощью анодного электролиза вызывает у животных развитие МП с характерными двигательными проявлениями и снижением уровня дофамина в структурах мозга и крови крыс. 2. Трансплантация КСКМ крыс, индуци- рованных в нейробласты, крысам с МП приводит к ускорению нормализации движений и достоверному увеличению уровня дофамина в структурах головного мозга. 3. Показано, что нормализация уровня ДА наступает позже полного регресса двигатель- ных нарушений. илиьнакТ аруткуртс хынтовижыппурГ ,еынткатнИ 6=N ,NSяицкуртсеД 6=N +NSяицкуртсеД яицатналпснарт 6=N яаньлатнорФ арок 21,0±57,0 41,0±12,0 41,0±86,0 еотатсовХ ордя 37,0±11,3 21,0±9,2 73,0±17,2 ьворK 36,0±65,9 30,0±49,5 75,0±33,8 Таблица 4. Уровень дофамина (нмоль/литр) в структурах головного мозга и в крови крыс через 50 суток после деструкции и деструкции с НТ нейробластов, индуцированных из КСКМ Примечание: – отличия достоверны относительно интактных крыс (Р< 0,05) Литература Угрюмов М.В., Шабалов В.А., Федорова Н.В. и др. Использование нейротрансплантации в лечении болезни Паркинсона. // Вопросы нейрохирургии. – 1998. – Т. 20, №1.– С.40-51 Цымбалюк В.И., Медведев В.В. Нейрогенные стволовые клетки.– Киев, 2005.– 596 с. Цымбалюк В.И., Васильева И.Г., Чопик Н.Г. и др. Влияние экстракта из эмбриональной нервной ткани на содер- жание дофамина и норадреналина в эксплантах среднего и продолговатого мозга новорожденных крыс // Нейрофизиология.– 1998.– №2.– С. 98-103. Чехонин В.П., Лебедев С.В., Дмитриева Т.Б. и др. Критерии эффективности трансплантации препаратов эмбриональной нервной ткани у крыс с повреждением дофаминэргической нигростриарной системы 6-гидро- оксидофамином (6-OHDA) // Патол. физиол. и эксперим. терапия.– 2002.– №3.– С. 19-22. Щегельская Е.А., Пятикоп В.А., Микулинский Ю.Е. Индукция стромальных клеток костного мозга в нейробласты и их использование в лечении пациентов с болезнью Паркинсона // Трансплантология.– 2004.– Т. 7, №4.– С. 381-384. Ahn T.B., Kim J.M., Kwon K.M. et al. Survival and migration of transplanted neural stem cells-derived dopamine cells in brain of parkinsonian rat // Int. J. Neurosci.– 2004.– Vol. 114, N5.– P. 575-585. Bjorklund L.M., Sanchez-Pernaute R., Chung S. et al. Embryonic stem cells develop into functional dopaminergic neurons after transplantation in a Parkinson rat model // PNAS USA.– 2002.– Vol. 99.– P. 2344-2349 Colin A., Tor M. A procedure for the isolation of noradrenalin (together with adrenalin), dopamine, 5-hydroxytriptamine and histamine from the same sample using a single column of strongly acid cation exchange resin // Acta Pharmacol. Toxicol.– 1978.– Vol. 42.– P. 35-57. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8.

Institution

Similar Items