Органная культура щитовидной железы новорожденных поросят как объект криоконсервирования
Проведено исследование функциональных характеристик органной культуры щитовидной железы новорожденных поросят (ОКЩЖНП) при культивировании ее в течение 10 сут в питательных средах различного состава. Проведено дослідження функціональних характеристик органної культури щитовидної залози новонароджени...
Gespeichert in:
| Veröffentlicht in: | Проблемы криобиологии и криомедицины |
|---|---|
| Datum: | 2003 |
| Hauptverfasser: | , , , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Russisch |
| Veröffentlicht: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2003
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/137539 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Органная культура щитовидной железы новорожденных поросят как объект криоконсервирования / С.В. Луговой, Т.П. Бондаренко, Н.Ф. Губина, А.И. Олефиренко, А.А. Олефиренко // Проблемы криобиологии. — 2003. — № 2. — С. 98–103. — Бібліогр.: 8 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1860134287154610176 |
|---|---|
| author | Луговой, С.В. Бондаренко, Т.П. Губина, Н.Ф. Олефиренко, А.И. Олефиренко, А.А. |
| author_facet | Луговой, С.В. Бондаренко, Т.П. Губина, Н.Ф. Олефиренко, А.И. Олефиренко, А.А. |
| citation_txt | Органная культура щитовидной железы новорожденных поросят как объект криоконсервирования / С.В. Луговой, Т.П. Бондаренко, Н.Ф. Губина, А.И. Олефиренко, А.А. Олефиренко // Проблемы криобиологии. — 2003. — № 2. — С. 98–103. — Бібліогр.: 8 назв. — рос. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Проблемы криобиологии и криомедицины |
| description | Проведено исследование функциональных характеристик органной культуры щитовидной железы новорожденных поросят (ОКЩЖНП) при культивировании ее в течение 10 сут в питательных средах различного состава.
Проведено дослідження функціональних характеристик органної культури щитовидної залози новонароджених поросят при культивуванні її протягом 10 діб у живильних середовищах різного складу.
The investigation of functional characteristics for organ culture of thyroid gland of new born piglets (OCThGNP) was carried-out during its culturing for 10 days in nutrient media of different composition.
|
| first_indexed | 2025-12-07T17:47:00Z |
| format | Article |
| fulltext |
98ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2003, №2
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2003, №2
Органная культура щитовидной железы новорожденных поросят как
объект криоконсервирования
С.В. ЛУГОВОЙ1, Т.П. БОНДАРЕНКО1, Н.Ф. ГУБИНА1, А.И. ОЛЕФИРЕНКО2, А.А. ОЛЕФИРЕНКО2
1Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков
2Дорожная клиническая больница №1 ст. Харьков-пассажирский МПС Украины
Organ Culture of Newborn Piglets’ Thyroid Gland as an Object
for Cryopreservation
LUGOVOJ S.V.1, BONDARENKO T.P.1, GUBINA N.F.1, OLEFIRENKO A.I.2, OLEFIRENKO A.A.2
1Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the National Academy
of Sciences of the Ukraine, Kharkov
2Railway Clinical Hospital N1 of Kharkov-Passenger station of the Ministry of Communications
of Ukraine
Проведено исследование функциональных характеристик органной культуры щитовидной железы новорожденных поросят
(ОКЩЖНП) при культивировании ее в течение 10 сут в питательных средах различного состава.
Ключевые слова: щитовидная железа, криоконсервирование, тиреодные гормоны, органная культура.
Проведено дослідження функціональних характеристик органної культури щитовидної залози новонароджених поросят
при культивуванні її протягом 10 діб у живильних середовищах різного складу.
Ключові слова: щитовидна залоза, кріоконсервування, тироїдні гормони, органна культура.
The investigation of functional characteristics for organ culture of thyroid gland of new born piglets (OCThGNP) was carried-out
during its culturing for 10 days in nutrient media of different composition.
Key words: thyroid gland, cryopreservation, thyroid hormones, organ culture.
УДК 615.361.441.014.41 UDC 615.361.441.014.41
Адрес для корреспонденции: Луговой С.В. Институт проблем
криобиологии и криомедицины НАН Украины,ул. Переяславская,23,
г. Харьков, Украина 61015; тел.:+38 (057) 7722007, факс: +38 (057)
7720084, e-mail: cryo@online.kharkov.ua
Address for correspondence: Lugovoy S.V. Institute for Problems of
Cryobiology&Cryomedicine of the Natl. Acad. Sci. of Ukraine, 23,
Pereyaslavskaya str.,Kharkov, Ukraine 61015; tel.:+38 (057)
7722007, fax: +38 (057) 7720084, e-mail:cryo@online.kharkov.ua
Трансплантация клеточных и органных культур
эндокринных тканей широко применяется в
клинической практике для лечения различных
эндокринопатий. Предложены различные методы
культивирования эндокринных тканей [1,2].
Основная задача при органотипическом культи-
вировании ткани щитовидной железы (ЩЖ) для
последующего клинического применения –
обеспечение элиминации антигенпредставляющих
клеток: passenger лейкоцитов, дендритных клеток,
клеток сосудистого эндотелия. Кроме того,
искусственная модификация трофики в процессе
культивирования позволяет тироцитам адапти-
роваться к нефизиологическим условиям, что при
последующей свободной гетеротопической
трансплантации является благоприятным фак-
тором для их приживления в организме реципиента.
Известно, что ткань ЩЖ в условиях органного
культивирования способна от 3-х до 14-ти суток (в
зависимости от метода культивирования) сох-
ранять свои морфологические и функциональные
характеристики, адекватно отвечать на действие
стимулирующих агентов, а тироциты сохраняют
способность к активной пролиферации, синтезу
тиреоидных гормонов de novo [4, 6-8].
Поскольку в процессе культивирования пос-
The transplantation of endocrine tissues’ cellular
and organ cultures is widely applied in clinical practice
for treating different endocrinopathies. Various
methods of endocrine tissues’ culturing have been
proposed [1, 2]. The main task during organotypical
culturing of thyroid gland (ThG) tissue for further
clinical application is to provide the elimination of
antigen-presenting cells: passenger leukocytes,
dendritic cells, vascular endothelium cells. In addition,
an artificial modification of trophicity during culturing
permits thyrocytes to be adapted under non-
physiological conditions, that is a favourable factor for
their engrafting into a recipient’s organism during the
following free heterotopic transplantation. ThG tissue
under the organ culturing conditions is known to be
able of keeping its morphological and functional
characteristics, to adequately respond to the effect of
stimulating agents from 3 to 14 days (depending on
culturing method), but the thyrocytes preserve the
capability of an active proliferation and thyroid hormone
synthesis de novo [4, 6-8].
Since during culturing the tissue dedifferentiation
with the loss of capability to the thyroid hormones’
synthesis and secretion occurs gradually, it is necessary
to determine an optimal term of its culturing, during
which the ThG organ culture does not lose its specific
99ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2003, №2
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2003, №2
тепенно происходит дедифференцировка ткани с
утратой ее способности к синтезу и секреции
тиреодных гормонов, необходимо определить
оптимальный срок ее культивирования, в течение
которого органная культура ЩЖ не теряет своей
специфической функции. Важным показателем
функциональной состоятельности ткани ЩЖ в
условиях органного культивирования является
также ее способность адекватно отвечать на
действие стимуляторов гормонопоэза. Целью
данного исследования было изучение динамики
секреции тиреоидных гормонов в процессе
культивирования в питательных средах различного
состава для определения оптимальных условий
культивирования ткани ЩЖ для её последующего
криоконсервирования.
Материалы и методы
При культивировании ткани ЩЖ новорож-
денных поросят за основу нами была взята
стандартная методика [3]. Исследовался уровень
секреции тиреоидных гормонов ОКЩЖНП с 1-х
по 10-е сутки при культивировании ее в средах
различного состава. Базовой средой была среда
199 с добавлением 10%-й инактивированной
эмбриональной сыворотки теленка и антибиотиков
(пенициллин – 100 ед/мл и канамицин – 150 ед/мл).
Базовая среда была модифицирована добавлением
в нее 75 мкг/мл йодида калия и/или 0,02 мл
экстракта гипофиза.
Таким образом, в работе представлены
результаты исследований, полученные при
использовании различных по составу сред: среда
1- базовая; среда 2 с добавлением 75 мкг/л йодида
калия; среда 3 с добавлением 75 мкг/л йодида
калия и 0,02 мл/л экстракта гипофиза; среда 4 с
добавлением 0,02 мл/л экстракта гипофиза.
Соответственно для органных культур, куль-
тивируемых в этих средах, сохранен тот же
порядок нумерации. Каждые 24 ч заменяли
питательную среду и отбирали пробы для
измерения содержания тиреоидных гормонов в
среде культивирования радиоиммунологическим
методом при помощи наборов РИА-Т3,Т4-СТ.
Уровень содержания гормонов в культуральной
среде пересчитывали на миллиграмм белка
гомогената ткани. Измерение белка проводилось
по методу Бредфорда. Статистическую обработку
результатов выполняли по методу Стьюдента –
Фишера. Полученные результаты представлены на
рис. 1,2.
Результаты и обсуждение
В первые сутки культивирования наблюдается
низкий уровень базальной секреции как Т3, так и
Т4, что, по-видимому, обусловлено периодом
function. An important index of the ThG tissue
functional integrity under conditions of organ culturing
is also its capability to adequately respond to the
hormonopoiesis stimulators’ effect. The aim of this
investigation was to study the dynamics of thyroid
hormone secretion during culturing in nutrient media
of different composition for determining the optimal
conditions of ThG tissue culturing for its further
cryopreservation.
Materials and methods
We based on the standard technique when culturing
the newborn piglets’ ThG tissue [3]. The level of the
OCThGNP thyroid hormone secretion from the 1st to
10th day was studied when culturing with the solutions
of different composition. The medium 199 with the
10% inactivated embryonic calf serum and antibiotics
additives (100 unit/ml of penicillin and 150 unit/ml of
canamicin) served as the base solution. The base
solution was modified by adding 75 mcg/ml potassium
iodide and/or 0.02 hypophysis extract.
Thus, the results of investigations, obtained when
using the solutions with different composition are
presented in the work:
solution 1 is the base one; solution 2 with adding
75 mcg/l of potassium iodide; solution 3 with adding
75 mcg/l of potassium iodide and 0.02 ml/l of
hypophysis extract; solution 4 with adding 0.02 ml/l of
hypophysis extract.
Correspondingly, the same order of numeration for
the cultured in these media organ cultures, is kept. The
nutritive medium was changed every 24 hours and the
samples were taken for measuring the thyroid
hormones’ content in cultural medium with the
radioimmunological method using the RIA-T3, T4-ST
sets. The protein measurement was measured
according to the Bredfords’ method. Statistical
processing of the results was accomplished by the
Student-Fisher method. The results obtained are
presented in the Fig.1, 2.
Results and discussion
In the first day of culturing a low level of basal
secretion for both T3 and T4 was observed, that,
apparently, is stipulated by the period of tissue
adaptation to non-physiological conditions. At the same
time the tissue, cultured at the presence of hypophysis
extract manifested a higher hormonal activity,
especially for thyroxin secretion. The presence of
potassium iodide in a nutrient medium did not cause a
manifested effect on the intensity of hormone
secretion.
The growth of both basal and stimulated T3 and T4
secretion was observed from the 2nd day, at the same
time the level of stimulated secretion exceeded the
level of basal one in 2.5 times in average. No statistical
100ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2003, №2
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2003, №2
0
0,5
1
1,5
2
2,5
3
3,5
4
4,5
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0
5
10
15
20
25
30
35
40
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Дни культивирования
Days of culturing
Дни культивирования
Days of culturing
Рис. 1. Уровень секреции Т3 ОКЩЖНП.
- cреда 1; - cреда 2; ▲-cреда 3; -cреда 4.
Fig. 1. Level of T3 secretion of OCThGNP.
- solution 1; - solution 2; ▲- solution 3; - solution 4.
* - P<0,05 по сравнению с базовой средой (среда 2).
* - P<0.05 in comparison with the base solution (solution 2).
Рис. 2. Уровень секреции Т4.
- cреда 1; - cреда 2; ▲- cреда 3; - cреда 4.
Fig. 2. Level of T4 secretion.
- solution 1; - solution 2; ▲- solution 3; - solution 4.
* - P<0,05 по сравнению с базовой средой (среда 2).
* - P<0.05 in comparison with the base solution (solution 2).
*
*
* * * *
*
*
*
*
*
* *
*
* * * *
*
*
*
* * * * * *
адаптации ткани к нефизиологическим условиям.
В то же время ткань, культивируемая в при-
сутствии экстракта гипофиза, проявила более
высокую гормональную активность, особенно для
секреции тироксина. Наличие йодида калия в
питательной среде не оказывало выраженного
влияния на интенсивность секреции гормонов.
Со 2-х суток отмечается рост как базальной,
так и стимулированной секреции Т3 и Т4, при этом
уровень стимулированной секреции превышал
уровень базальной в среднем в 2,5 раза. Досто-
верных различий в уровне секреторной активности
ткани, культивированной как при наличии йодида
калия, так и без него не выявлено, что можно
объяснить наличием резервов йодированного
тиреоглобулина, за счет протеолиза которого и
поддерживается адекватный уровень секреции.
С 3-х суток культивирования ткань в среде без
йодида калия (культуры №1, №4) проявляет резкое
снижение секреции тироксина. Более выражен
данный процесс в ткани, культивируемой в
присутствии экстракта гипофиза (культура №4). В
то же время в динамике секреции Т3 наблюдается
тенденция к некоторому ее увеличению, что может
реализовываться двумя механизмами. Поскольку
биологическая активность Т3 в 6 раз выше, чем
Т4, то в условиях дефицита йода включаются
эволюционно сформированные адаптационные
механизмы, которые переводят ткань ЩЖ в
and true differences in the level of secretory activity
of tissue, cultured both at the potassium iodide presence
and absence were revealed, that could be explained
by the presence of stocks of iodinated thyroglobulin,
due to the proteolysis of which the adequate level of
secretion was maintained.
Starting from the 3rd day of culturing the tissue in
the medium without potassium iodide (cultures 1, 4)
manifests a sharp decrease in thyroxin secretion. This
process in more manifested in the tissue, cultured at
the hypophysis extract presence (culture 4). At the
same time in the dynamics of T3 secretion the tendency
to its certain increase is observed, that can be realised
by means of two mechanisms. Since the T3 biological
activity is in 6 times higher than T4, under conditions
of iodine deficiency there is the triggering of the
evolutionarily formed adaptation mechanisms, shifting
the ThG tissue to the “economic” regimen of
functioning, due to an increase in triiodothyronine in
respect of thyroxin.
One more mechanism, related to our observation,
is described. During an organ culturing along with
proliferation processes, there are those of thyrocytes’
dedifferentiation and follicular structure degradation
of ThG tissue, manifesting in thyroid epithelium
desquamation from basal membrane, appearance of
disorganised accumulations of thyrocytes, which,
however, keep their hormonopoietic activity, but in a
slightly unnatural form, that is manifested in T3 fraction
С
од
ер
жа
ни
е
Т 3
в
п
ит
ат
ел
ьн
ой
с
ре
де
, н
м
ол
ь/
л/
м
г
бе
лк
а
T 3 c
on
te
nt
in
n
ut
rie
nt
m
ed
iu
m
, n
M
/l/
m
g
of
p
ro
te
in
С
од
ер
жа
ни
е
Т 4
в
п
ит
ат
ел
ьн
ой
с
ре
де
, н
м
ол
ь/
л/
м
г
бе
лк
а
T 4 c
on
te
nt
in
n
ut
rie
nt
m
ed
iu
m
, n
M
/l/
m
g
of
p
ro
te
in
101ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2003, №2
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2003, №2
“экономичный” режим функционирования за счет
увеличения синтеза трийодтиронина относительно
тироксина.
Описан еще один механизм, который может
иметь место применительно к нашему наблю-
дению. В процессе органного культивирования,
наряду с процессами пролиферации, происходят
процессы дедифференцировки тироцитов и
деградации фолликулярного строения ткани ЩЖ,
выражающиеся в десквамации тиреоидного
эпителия с базальной мембраны, появлении
дезорганизованных скоплений тироцитов, которые,
однако, сохраняют свою гормонопоэтическую
активность, хотя и в несколько извращенной форме,
что выражается в преобладании синтеза фракции
Т3 над Т4 [4]. Однако мы считаем, что данный
механизм характерен для более поздних сроков
культивирования, что подтверждается дальнейшим
увеличением секреторной активности как для Т3,
так и Т4 в культурах, инкубируемых в средах,
содержащих йодид калия (культуры №2 и №3).
К 4-м суткам культивирования мы отмечали
снижение содержания в среде культивирования как
Т4, так и Т3 в средах, не содержащих йодид калия
(культуры №1 и №4). При этом следует указать,
что наиболее выраженная динамика снижения
секреции наблюдалась в среде без йодида калия,
но содержащей экстракт гипофиза (культура №4).
Регресс секреции за 24 ч составил 25% для Т3 и
20% для Т4, что, по-видимому, обусловлено
быстрым исчерпанием резервов интрацел-
люлярного йодида и йодированного тиреоглобулина
под действием тиреотропного гормона (ТТГ). И
если для базовой среды (культура №1) изменений
в уровне секреции Т3 по сравнению с предыдущими
сутками не наблюдалось, то для секреции Т4 было
отмечено ее снижение на 45%, что может быть
следствием развивающегося дефицита йодида,
однако не такого выраженного, как в культуре №3,
что позволяет тироцитам поддерживать на
прежнем уровне секрецию трийодтиронина.
Культура № 3 продемонстрировала наивысший
уровень секреторной активности как по Т3, так и
Т4, при этом динамики изменений показателей за
период с 3-х по 4-е сутки не наблюдалось. К 5-м
суткам она сохраняет неизменным прежний
высокий уровень секреций Т3 и Т4.
В культурах №1, №2, №4 с 5-х суток до
окончания срока наблюдения прослеживается
тенденция снижения уровня секреции как Т3, так и
Т4, при этом более выражена динамика снижения
Т4 по сравнению с Т3, в результате чего изменяется
соотношение между фракциями Т4 и Т3 в сторону
увеличения относительного содержания Т3, что
может быть обусловлено началом дегенератив-
ного процесса на поздних сроках культивирования,
predominance over T4 [4]. However we believe, that
this mechanism is typical for later terms of culturing,
that is confirmed by further augmentation of secretory
activity for both T3 and T4 in the cultures, being
incubated in the solution with potassium iodide (cultures
2 and 3).
By the 4th day of culturing we observed a decrease
in both T3 and T4 content in potassium iodide-free
culturing solution (cultures 1 and 4). At the same time
it should be noted, that the most manifested dynamics
of the secretion decrease was observed in potassium
iodide-free solution, but with the hypophysis extract
(culture 4). The secretion regress for 24 hrs made 25%
for T3 and 20% for T4, that, apparently, was stipulated
by a rapid exhausting of the intracellular iodide and
iodinated thyroglobulin stocks under the effect of
thyrotropic hormone (TTH). And if for the base solution
(culture 1) no changes in the T3 secretion level in
comparison with the previous days were observed, for
T4 secretion its decrease by 45% was noted, that could
result from the developing iodine deficiency, but not so
manifested as for the culture 3, that allowed to
thyrocytes the maintaining of triiodothyronine secretion
at a previous level.
The culture 3 demonstrated the highest level of
secretory activity for both T3 and T4, at the same time
the dynamics of the indices’ changes for the period
from the 3rd to 4th days was not observed. To the 5th
day it keeps a previous high level of T3 and T4 secretion
without changes.
In the cultures 1, 2, 4 from the 5th day up to the
observation term finishing there is the tendency of the
level decrease in both T3 and T4 secretion, at the same
time the dynamics of T4 decrease is more manifested
in comparison with T3, following which there is the
change in the ratio between T4 and T3 fractions into
the side of the increase in a relative T3 content, that
can be stipulated by the degenerative process beginning
at the late terms of culturing, which action mechanism
was considered in the paper [4].
For the culture 3 the described above tendency
starts to be traced from the 7th day of culturing, but at
the same time it is characterised by a very manifested
negative dynamics.
Thus, we can observe the dependence of the
character of thyroid hormone secretion on the
potassium iodide and hypophysis extract presence in
the culturing medium, that permits to state the following:
at the used by us method of culturing the hormone-
production in OCThGNP occurs both due to the
proteolysis of deposed prior to the tissue explantation
iodinated thyroglobulin and de novo. The highest level
of thyroid hormone secretion is observed in the tissue,
cultured at the potassium iodide presence from the 3rd
up to 5th day for basal secretion and from the 3rd upto
6th day for stimulated one. However in the culture,
102ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2003, №2
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2003, №2
механизм действия которого был рассмотрен в [4].
Для культуры №3 описанная выше тенденция
начинает прослеживаться с 7-х суток культиви-
рования, однако при этом она характеризуется
очень выраженной отрицательной динамикой.
Таким образом, можно наблюдать зависимость
характера секреции тиреоидных гормонов от
присутствия в среде культивирования йодида калия
и экстракта гипофиза, что позволяет утверждать:
при используемом нами методе культивирования
гормонообразование в ОКЩЖНП происходит как
за счет протеолиза депонированного до экс-
плантации ткани йодированного тиреоглобулина,
так и de novo. Наиболее высокий уровень секреции
тиреоидных гормонов наблюдается у ткани,
культивируемой в присутствии йодида калия с 3-х
по 5-е сутки для базальной секреции и с 3-х по 6-е
сутки для стимулированной. Однако в культуре,
инкубируемой в присутствии йодида калия и
экстракта гипофиза, с 6-х суток отмечается резкое
падение гормональной активности, что может
быть обусловлено повреждающим действием ТТГ
на ткань в условиях эксплантации. В основе
данного механизма, возможно, лежит перенап-
ряжение под влиянием ТТГ метаболических
процессов в клетках ЩЖ с недостаточным
адаптационно-трофическим обеспечением ,
следствием чего являются усиленный расход
пластического и энергетического материала
клеток, преобладание процессов катаболизма над
восстановительными процессами. Итогом этих
процессов будут дистрофия клеток и их гибель.
Кроме того, с точки зрения криобиологии, данный
процесс должен неблагоприятно отразиться на
криоустойчивости клеток. При высокой функцио-
нальной активности клеток ЩЖ происходит
активная резорбция коллоида, который, как
being incubated at the potassium iodide and hypophysis
extract presence, from the 6th day a sharp fall of
hormonal activity is observed, that can be stipulated
by the TTH damaging effect on tissue under
explantation conditions. The overtension under TTH
effect of metabolic processes in ThG cells with the
insufficient adaptational and trophic providing is
possibly the base for this mechanism, resulting in the
strengthened expenditure of plastic and energetic cell
material and the predominance of catabolism processes
over recovery ones. These processes will result in
cells’ dystrophy and their death. In addition, from
cryobiological point of view this process should
unfavourably affect the cell cryoresistance. At a high
functional activity of ThG cells an active colloid
resorption occurs, which, as known, is a natural
cryoprotectant due to its physical and chemical
properties [5], therefore the colloid loss by follicles will
be accompanied with a decrease in tissue cryo-
resistance.
The results of investigations allow to conclude, that
the most adequate modus of functional activity is
observed in the tissue under organ culturing conditions
in potassium iodide-containing solution from the 3rd to
5th day including, that is confirmed by the performed
OCThGNP morphological investigations to the 5th day
of culturing in the solution 2.
By the 5th day of culturing there is noted a satisfied
preservation of histostructure, the signs of tissue
functional tension are observed (Fig. 3). Degenerative
changes to the 5th day of culturing have not a sharply
marked character and are manifested by the
desquamation of a certain number of cubic epithelium
cells into the follicle cavity, by the activation of
connective-tissue elements (Fig. 4).
Conclusions
Thus, for following cryopreservation the most
Рис. 3. Органная культура ЩЖ новорожденного поро-
сенка на 5-е сутки культивирования ( × 320).
Fig. 3. Organ culture of newborn piglet’s ThG to the 5th day
of culturing ( × 320).
Рис. 4. Интактная ткань ЩЖ новорожденного поросенка
( × 320).
Fig. 4. Intact tissue of newborn piglet’s ThG ( × 320).
103ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2003, №2
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2003, №2
suitable is the culturing of ThG tissue in the solution of
following composition: medium 199 with adding the 10%
inactivated calf embryonic serum and antibiotics
(100 unit/ml of penicillin and 150 unit/ml for
canamicin), as well as 75 mkg/l of potassium iodide.
An optimal term for culturing is 5 days.
известно, является в силу своих физико-химических
свойств естественным криопротектором [5],
поэтому утрата фолликулами коллоида будет
сопровождаться снижением криоустойчивости
ткани.
Результаты исследований позволяют заключить,
что наиболее адекватный модус функциональной
активности наблюдается у ткани в условиях
органного культивирования в среде, содержащей
йодид калия с 3-х по 5-е сутки включительно, что
подтверждается проведенными морфологичес-
кими исследованиями ОКЩЖНП на 5-е сутки
культивирования в среде №2.
К 5-м суткам культивирования отмечается
удовлетворительная сохранность гистоструктуры,
наблюдаются признаки функционального напря-
жения ткани (рис.3). Дегенеративные изменения к
5-м суткам культивирования носят не резко
выраженный характер и проявляются десква-
мацией некоторого числа клеток кубического
эпителия в полость фолликулов, активацией
соединительно-тканных элементов (рис.4).
Выводы
Таким образом, для последующего криоконсер-
вирования наиболее приемлемо культивирование
ткани ЩЖ в среде следующего состава: среда 199
с добавлением 10%-й инактивированной эмбрио-
нальной сыворотки теленка и антибиотиков
(пенициллин – 100 ед/мл и канамицин – 150 ед/мл),
а также 75 мкг/л йодида калия. Оптимальный срок
культивирования - 5 суток.
Литература
Адамс Р. Методы культур клеток для биохимиков.– М.:
Мир, 1983.– 263 с.
Гаврилюк Б.К. Органотипическое культивирование
тканей.– М.: Наука, 1983.– 128 с.
Грищенко В.І., Бондаренко Т.П., Луговий С.В. та ін.
Заготівля, кріоконсервування та клінічне застосування
органної культури щитовидної залози новонароджених
поросят в лікуванні гіпотиреозів: Метод. рекомендації.–
Харків, 2000.– 14 с.
Надольник Л.И., Басинский В.А. и др. Влияние условий
культивирования на функциональную активность
тироцитов в органной культуре щитовидной железы
новорожденных поросят // Рос. физиолог. журн. им. И.М.
Сеченова.– 2001.– №3 (87).– С. 375-382.
Пушкарь Н.С., Шраго М.И., Белоус А.И. и др. Крио-
протекторы.– Киев: Наук. думка, 1978.– 216 с.
Шостак И.Н., Тронько Н.Д., Зурнаджи Ю.Н., Пастер И.П.
Изучение морфофункциональных свойств культи-
вируемых тироцитов новорожденных поросят с целью
определения возможности их применения для компен-
сации гипофункции щитовидной железы // Пробл.
эндокринологии.– 1992.– Т. 38, №5.– С. 33-37.
Kraiem Z., Sadeh O., Yosef M. J. Iodide uptake and
organification, triiodothyronine secretion, cyclic AMP
accumulation and cell proliferation in an optimized system of
human thyroid follicles cultured in collagen gel suspended in
serum-free medium // Endocrinol.– 1991.– 131(3).– Р. 499-506.
Murphy A., Mothersill C., O’Connor M.K. et al. An investigation
of the optimum culture conditions for a differentiated culture
of sheep thyroid cells //Acta Endocrinol (Copenh).– 1983.–
104(4).– Р. 431-436.
Поступила 08.10.2002
References
Adams R. Methods of cell cultures for biochemists.–
Moscow: Mir.– 1983.– 263 p.
Gavrilyuk B.K. Organotypical culturing of tissues.– Moscow:
Nauka, 1983.– 128 p.
Grischenko V.I., Bondarenko T.P., Lugovoj S.V. et al.
Procurement, cryopreservation and clinical application of
organ culture of newborn piglets’ thyroid gland at hypothyrosis
treatment / Method. recommendations.– Kharkov, 2000.– 14 p.
Nadolnik L.I., Basinsky V.A. et al. Effect of culturing
conditions on thyrocyte’s functional activity in organ culture
of newborn piglets’ thyroid gland//Rossijskij fiziologicheskij
zhurnal imeni I.M. Sechenova.– 2001.– N3.– 87.– P. 375-382.
Pushkar N.S., Shrago M.I., Belous A.M. et al. Cryo-
protectants.– Kiev: Naukova dumka, 1978.– 216 p.
Shostak I.N., Tronko N.D., Zurnadzhi Yu.N, Paster I.P. Study
of morphofunctional properties of newborn piglets’ cultured
thyrocytes with the aim to determine the possibility of their
application for compensation of thyroid gland’s hypofunction //
Problemy endocrionologii.– 1992.– N5.– V.38.– P. 33-37.
Kraiem Z., Sadeh O., Yosef M.J. Iodide uptake and
organification, triiodothyronine secretion, cyclic AMP
accumulation and cell proliferation in an optimized system of
human thyroid follicles cultures in collagen gel suspension in
serum-free medium.– Endocrinol.– 1991.– 131(3).– P. 499-506.
Murphy A., Mothersill C., O’Connor M.K. et al. An investigation
of the optimum culture conditions for a differentiated culture
of sheep thyroid cells.– Acta Endocrinol. (Copenh).– 1983.–
104(4).– P. 431-436.
Accepted in 08.10.2002
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-137539 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7673 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-12-07T17:47:00Z |
| publishDate | 2003 |
| publisher | Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Луговой, С.В. Бондаренко, Т.П. Губина, Н.Ф. Олефиренко, А.И. Олефиренко, А.А. 2018-06-17T12:32:04Z 2018-06-17T12:32:04Z 2003 Органная культура щитовидной железы новорожденных поросят как объект криоконсервирования / С.В. Луговой, Т.П. Бондаренко, Н.Ф. Губина, А.И. Олефиренко, А.А. Олефиренко // Проблемы криобиологии. — 2003. — № 2. — С. 98–103. — Бібліогр.: 8 назв. — рос. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/137539 615.361.441.014.41 Проведено исследование функциональных характеристик органной культуры щитовидной железы новорожденных поросят (ОКЩЖНП) при культивировании ее в течение 10 сут в питательных средах различного состава. Проведено дослідження функціональних характеристик органної культури щитовидної залози новонароджених поросят при культивуванні її протягом 10 діб у живильних середовищах різного складу. The investigation of functional characteristics for organ culture of thyroid gland of new born piglets (OCThGNP) was carried-out during its culturing for 10 days in nutrient media of different composition. ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии и криомедицины Криоконсервирование биообъектов Органная культура щитовидной железы новорожденных поросят как объект криоконсервирования Organ Culture of Newborn Piglets’ Thyroid Gland as an Object for Cryopreservation Article published earlier |
| spellingShingle | Органная культура щитовидной железы новорожденных поросят как объект криоконсервирования Луговой, С.В. Бондаренко, Т.П. Губина, Н.Ф. Олефиренко, А.И. Олефиренко, А.А. Криоконсервирование биообъектов |
| title | Органная культура щитовидной железы новорожденных поросят как объект криоконсервирования |
| title_alt | Organ Culture of Newborn Piglets’ Thyroid Gland as an Object for Cryopreservation |
| title_full | Органная культура щитовидной железы новорожденных поросят как объект криоконсервирования |
| title_fullStr | Органная культура щитовидной железы новорожденных поросят как объект криоконсервирования |
| title_full_unstemmed | Органная культура щитовидной железы новорожденных поросят как объект криоконсервирования |
| title_short | Органная культура щитовидной железы новорожденных поросят как объект криоконсервирования |
| title_sort | органная культура щитовидной железы новорожденных поросят как объект криоконсервирования |
| topic | Криоконсервирование биообъектов |
| topic_facet | Криоконсервирование биообъектов |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/137539 |
| work_keys_str_mv | AT lugovoisv organnaâkulʹturaŝitovidnoiželezynovoroždennyhporosâtkakobʺektkriokonservirovaniâ AT bondarenkotp organnaâkulʹturaŝitovidnoiželezynovoroždennyhporosâtkakobʺektkriokonservirovaniâ AT gubinanf organnaâkulʹturaŝitovidnoiželezynovoroždennyhporosâtkakobʺektkriokonservirovaniâ AT olefirenkoai organnaâkulʹturaŝitovidnoiželezynovoroždennyhporosâtkakobʺektkriokonservirovaniâ AT olefirenkoaa organnaâkulʹturaŝitovidnoiželezynovoroždennyhporosâtkakobʺektkriokonservirovaniâ AT lugovoisv organcultureofnewbornpigletsthyroidglandasanobjectforcryopreservation AT bondarenkotp organcultureofnewbornpigletsthyroidglandasanobjectforcryopreservation AT gubinanf organcultureofnewbornpigletsthyroidglandasanobjectforcryopreservation AT olefirenkoai organcultureofnewbornpigletsthyroidglandasanobjectforcryopreservation AT olefirenkoaa organcultureofnewbornpigletsthyroidglandasanobjectforcryopreservation |