Зв’язок матриксних металопротеїназ-2 та -9 із регіонарним і віддаленим метастазуванням раку шлунка людини
Обґрунтування: серед білків, які активуються за умов гіпоксії, важливу роль уметастазуванні пухлини відіграють матриксні металопротеїнази (ММП), зокрема ММП-2 та -9, які здійснюють деградацію позаклітинного матриксу. Мета: визначення взаємозв’язку між рівнем активності ММП у пухлинній тканин...
Збережено в:
| Опубліковано в: : | Онкологія |
|---|---|
| Дата: | 2014 |
| Автори: | , , , , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Ukrainian |
| Опубліковано: |
Інститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р.Є. Кавецького НАН України
2014
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/137684 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Зв’язок матриксних металопротеїназ-2 та -9 із регіонарним і віддаленим метастазуванням раку шлунка людини / І.І. Ганусевич, Л.Д. Гуменюк, Д.С. Осинський, А.В. Ковельська, Л.М. Бубновська, Л.А. Мамонтова, С.П. Осинський // Онкологія. — 2014. — Т. 16, № 1. — С. 40-46. — Бібліогр.: 29 назв. — укр. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-137684 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Ганусевич, І.І. Гуменюк, Л.Д. Осинський, Д.С. Ковельська, А.В. Бубновська, Л.М. Мамонтова, Л.А. Осинський, С.П. 2018-06-17T14:59:27Z 2018-06-17T14:59:27Z 2014 Зв’язок матриксних металопротеїназ-2 та -9 із регіонарним і віддаленим метастазуванням раку шлунка людини / І.І. Ганусевич, Л.Д. Гуменюк, Д.С. Осинський, А.В. Ковельська, Л.М. Бубновська, Л.А. Мамонтова, С.П. Осинський // Онкологія. — 2014. — Т. 16, № 1. — С. 40-46. — Бібліогр.: 29 назв. — укр. https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/137684 Обґрунтування: серед білків, які активуються за умов гіпоксії, важливу роль уметастазуванні пухлини відіграють матриксні металопротеїнази (ММП), зокрема ММП-2 та -9, які здійснюють деградацію позаклітинного матриксу. Мета: визначення взаємозв’язку між рівнем активності ММП у пухлинній тканині раку шлунка (РШ), клініко-патологічними показниками та деякими асоційованими згіпоксією характеристиками пухлини (співвідношення вмісту фосфомоноестери/неорганічний фосфат— PME/Pi, фосфомоноестери/фосфодіестери — PME/PDE, HIF-1α, CD34), наявністю пухлинних клітин у регіонарних лімфатичних вузлах (РЛВ) та тривалістю життя хворих. Методи:імуногістохімічний, зимографія, ЯМР-спектроскопія, статистичний аналіз. Результати: за задовільної оксигенації пухлини (РМЕ/Рі > 2,0) характерні низькі показники сумарної активності ММП, при зростанні рівня гіпоксії (1,0 < РМЕ/Рі < 2,0) ці показники підвищуються в середньому в 4,5 раза. Сумарна активність ММП-2 і -9 корелює з експресією HIF1α у РШ (r = 0,58; р < 0,05). Виявлено пряму позитивну кореляцію між активністю ММП-9, з одного боку. та метаболічним показником РМЕ/РDE (r = 0,44; р < 0,05) і щільністю мікросудин (r = 0,46, р < 0,05), зіншого. Вміст активної ММП-2 зворотно корелює із категорією М. Не виявлено залежності між концентраціями активних ММП у пухлині та категорією N, але для хворих із цитокератинпозитивними (СК⁺) РЛВ характерні достовірно вищі (в 1,5 раза) значення активності ММП-2 у пухлині порівняно з пацієнтами із цитокератиннегативними (СК⁻) РЛВ. Хворі на РШ, у яких концентрація активної ММП-2 в пухлині < 2 мкг/г, а ММП-9 — < 4,5 мкг/г, живуть достовірно довше та мають нижчий ризик несприятливого перебігу захворювання, ніж пацієнти з відповідно вищою концентрацією активних ММП у пухлині. Висновок: визначення активності ММП-2 та-9 у пухлині може бути використано для прогнозу раннього метастазування, зокрема в РЛВ, та в контролі перебігу захворювання у пацієнтів із РШ. Background: among proteins that are activated by the conditions of hypoxia, an important role in the metastasis of tumor belongs to matrix metalloproteinases (MMPs) in particular MMP-2 and -9, which carry out the degradation of the extracellular matrix. Objective: to identify interrelation between of MMP activity in tumor tissue of the gastric cancer (GC), a clinical-pathological indices and hypoxia associated characteristics of the tumor (ratio of phosphomonoesters/inorganic phosphate (PME/Pi), phosphomonoesters/phosphodiesters (PME/PDE), HIF-1α, CD34), the presence of tumor cells in the lymphatic nodes (LN) and survival. Methods: immunohistochemistry, zimography, NMR-spectroscopy, statistical analysis. Results: satisfactory tumor oxygenation (ITRS/ Ri > 2,0) is characterized by low total activity of MMP. When hypoxia increases (1,0 < ITRS/Ri < 2,0), MMP activity is about 4.5-fold elevated. The total activity of MMP-2 and -9 correlates with expression of HIF-1α in CS (r = 0,58; p < 0.05). The direct positive correlation is demonstrated between the MMP-9 activity, on the one hand, and the metabolic indicator of the ITRS/ РDE (r = 0.44; p < 0.05) and the density of microvessels (r = 0.46; p < 0.05), on the other. The content of the active MMP-2 is inversely correlated with the presence of metastases in the patients. The correlation between concentrations of active MMP in the tumor and the involvement of regional lymph nodes (RLN) has not been revealed. Nevertheless, for patients with cytokeratin-positive (SC⁺) RLN, MMP-2 activity in tumor is 1.5 times as much as that in patients with cytokeratinnegative (SC⁻) RLN. The survival of the GC patients with the concentration of the active MMP-2 in tumor below 2 μg/g, and MMP-9 — less than 4.5 μg/g, is significantly higher with lower risk of unfavorable course of the disease compared with the patients with correspondingly higher concentration of active MMPs in the tumor. Conclusion: the assay of MMP-2 and -9 activity in the tumor can be used for prediction of early metastasis, in particular in RLN, and in monitoring the course of disease in patients GC. uk Інститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р.Є. Кавецького НАН України Онкологія Оригинальные исследования Зв’язок матриксних металопротеїназ-2 та -9 із регіонарним і віддаленим метастазуванням раку шлунка людини Relationship of matrix metalloproteinase-2 and -9 with regional and remote metastasis of human gastric cancer Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Зв’язок матриксних металопротеїназ-2 та -9 із регіонарним і віддаленим метастазуванням раку шлунка людини |
| spellingShingle |
Зв’язок матриксних металопротеїназ-2 та -9 із регіонарним і віддаленим метастазуванням раку шлунка людини Ганусевич, І.І. Гуменюк, Л.Д. Осинський, Д.С. Ковельська, А.В. Бубновська, Л.М. Мамонтова, Л.А. Осинський, С.П. Оригинальные исследования |
| title_short |
Зв’язок матриксних металопротеїназ-2 та -9 із регіонарним і віддаленим метастазуванням раку шлунка людини |
| title_full |
Зв’язок матриксних металопротеїназ-2 та -9 із регіонарним і віддаленим метастазуванням раку шлунка людини |
| title_fullStr |
Зв’язок матриксних металопротеїназ-2 та -9 із регіонарним і віддаленим метастазуванням раку шлунка людини |
| title_full_unstemmed |
Зв’язок матриксних металопротеїназ-2 та -9 із регіонарним і віддаленим метастазуванням раку шлунка людини |
| title_sort |
зв’язок матриксних металопротеїназ-2 та -9 із регіонарним і віддаленим метастазуванням раку шлунка людини |
| author |
Ганусевич, І.І. Гуменюк, Л.Д. Осинський, Д.С. Ковельська, А.В. Бубновська, Л.М. Мамонтова, Л.А. Осинський, С.П. |
| author_facet |
Ганусевич, І.І. Гуменюк, Л.Д. Осинський, Д.С. Ковельська, А.В. Бубновська, Л.М. Мамонтова, Л.А. Осинський, С.П. |
| topic |
Оригинальные исследования |
| topic_facet |
Оригинальные исследования |
| publishDate |
2014 |
| language |
Ukrainian |
| container_title |
Онкологія |
| publisher |
Інститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р.Є. Кавецького НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Relationship of matrix metalloproteinase-2 and -9 with regional and remote metastasis of human gastric cancer |
| description |
Обґрунтування: серед білків, які активуються за умов гіпоксії, важливу роль
уметастазуванні пухлини відіграють матриксні металопротеїнази (ММП),
зокрема ММП-2 та -9, які здійснюють деградацію позаклітинного матриксу.
Мета: визначення взаємозв’язку між рівнем активності ММП у пухлинній
тканині раку шлунка (РШ), клініко-патологічними показниками та деякими
асоційованими згіпоксією характеристиками пухлини (співвідношення
вмісту фосфомоноестери/неорганічний фосфат— PME/Pi, фосфомоноестери/фосфодіестери
— PME/PDE, HIF-1α, CD34), наявністю пухлинних клітин
у регіонарних лімфатичних вузлах (РЛВ) та тривалістю життя хворих.
Методи:імуногістохімічний, зимографія, ЯМР-спектроскопія, статистичний
аналіз. Результати: за задовільної оксигенації пухлини (РМЕ/Рі > 2,0)
характерні низькі показники сумарної активності ММП, при зростанні
рівня гіпоксії (1,0 < РМЕ/Рі < 2,0) ці показники підвищуються в середньому
в 4,5 раза. Сумарна активність ММП-2 і -9 корелює з експресією HIF1α
у РШ (r = 0,58; р < 0,05). Виявлено пряму позитивну кореляцію між активністю
ММП-9, з одного боку. та метаболічним показником РМЕ/РDE
(r = 0,44; р < 0,05) і щільністю мікросудин (r = 0,46, р < 0,05), зіншого. Вміст
активної ММП-2 зворотно корелює із категорією М. Не виявлено залежності
між концентраціями активних ММП у пухлині та категорією N, але для
хворих із цитокератинпозитивними (СК⁺) РЛВ характерні достовірно вищі
(в 1,5 раза) значення активності ММП-2 у пухлині порівняно з пацієнтами
із цитокератиннегативними (СК⁻) РЛВ. Хворі на РШ, у яких концентрація
активної ММП-2 в пухлині < 2 мкг/г, а ММП-9 — < 4,5 мкг/г, живуть
достовірно довше та мають нижчий ризик несприятливого перебігу захворювання,
ніж пацієнти з відповідно вищою концентрацією активних ММП
у пухлині. Висновок: визначення активності ММП-2 та-9 у пухлині може
бути використано для прогнозу раннього метастазування, зокрема в РЛВ,
та в контролі перебігу захворювання у пацієнтів із РШ.
Background: among proteins that are activated
by the conditions of hypoxia, an important role in
the metastasis of tumor belongs to matrix metalloproteinases
(MMPs) in particular MMP-2 and -9, which carry out the degradation of the extracellular matrix.
Objective: to identify interrelation between of MMP
activity in tumor tissue of the gastric cancer (GC),
a clinical-pathological indices and hypoxia associated
characteristics of the tumor (ratio of phosphomonoesters/inorganic
phosphate (PME/Pi), phosphomonoesters/phosphodiesters
(PME/PDE), HIF-1α,
CD34), the presence of tumor cells in the lymphatic
nodes (LN) and survival. Methods: immunohistochemistry,
zimography, NMR-spectroscopy, statistical analysis.
Results: satisfactory tumor oxygenation (ITRS/
Ri > 2,0) is characterized by low total activity of MMP.
When hypoxia increases (1,0 < ITRS/Ri < 2,0), MMP
activity is about 4.5-fold elevated. The total activity
of MMP-2 and -9 correlates with expression of HIF-1α
in CS (r = 0,58; p < 0.05). The direct positive correlation
is demonstrated between the MMP-9 activity, on
the one hand, and the metabolic indicator of the ITRS/
РDE (r = 0.44; p < 0.05) and the density of microvessels
(r = 0.46; p < 0.05), on the other. The content of the active
MMP-2 is inversely correlated with the presence
of metastases in the patients. The correlation between
concentrations of active MMP in the tumor and the involvement
of regional lymph nodes (RLN) has not
been revealed. Nevertheless, for patients with cytokeratin-positive
(SC⁺) RLN, MMP-2 activity in tumor is
1.5 times as much as that in patients with cytokeratinnegative
(SC⁻) RLN. The survival of the GC patients with
the concentration of the active MMP-2 in tumor below
2 μg/g, and MMP-9 — less than 4.5 μg/g, is significantly
higher with lower risk of unfavorable course of the disease
compared with the patients with correspondingly higher
concentration of active MMPs in the tumor. Conclusion:
the assay of MMP-2 and -9 activity in the tumor can
be used for prediction of early metastasis, in particular
in RLN, and in monitoring the course of disease in patients
GC.
|
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/137684 |
| citation_txt |
Зв’язок матриксних металопротеїназ-2 та -9 із регіонарним і віддаленим метастазуванням раку шлунка людини / І.І. Ганусевич, Л.Д. Гуменюк, Д.С. Осинський, А.В. Ковельська, Л.М. Бубновська, Л.А. Мамонтова, С.П. Осинський // Онкологія. — 2014. — Т. 16, № 1. — С. 40-46. — Бібліогр.: 29 назв. — укр. |
| work_keys_str_mv |
AT ganusevičíí zvâzokmatriksnihmetaloproteínaz2ta9ízregíonarnimívíddalenimmetastazuvannâmrakušlunkalûdini AT gumenûkld zvâzokmatriksnihmetaloproteínaz2ta9ízregíonarnimívíddalenimmetastazuvannâmrakušlunkalûdini AT osinsʹkiids zvâzokmatriksnihmetaloproteínaz2ta9ízregíonarnimívíddalenimmetastazuvannâmrakušlunkalûdini AT kovelʹsʹkaav zvâzokmatriksnihmetaloproteínaz2ta9ízregíonarnimívíddalenimmetastazuvannâmrakušlunkalûdini AT bubnovsʹkalm zvâzokmatriksnihmetaloproteínaz2ta9ízregíonarnimívíddalenimmetastazuvannâmrakušlunkalûdini AT mamontovala zvâzokmatriksnihmetaloproteínaz2ta9ízregíonarnimívíddalenimmetastazuvannâmrakušlunkalûdini AT osinsʹkiisp zvâzokmatriksnihmetaloproteínaz2ta9ízregíonarnimívíddalenimmetastazuvannâmrakušlunkalûdini AT ganusevičíí relationshipofmatrixmetalloproteinase2and9withregionalandremotemetastasisofhumangastriccancer AT gumenûkld relationshipofmatrixmetalloproteinase2and9withregionalandremotemetastasisofhumangastriccancer AT osinsʹkiids relationshipofmatrixmetalloproteinase2and9withregionalandremotemetastasisofhumangastriccancer AT kovelʹsʹkaav relationshipofmatrixmetalloproteinase2and9withregionalandremotemetastasisofhumangastriccancer AT bubnovsʹkalm relationshipofmatrixmetalloproteinase2and9withregionalandremotemetastasisofhumangastriccancer AT mamontovala relationshipofmatrixmetalloproteinase2and9withregionalandremotemetastasisofhumangastriccancer AT osinsʹkiisp relationshipofmatrixmetalloproteinase2and9withregionalandremotemetastasisofhumangastriccancer |
| first_indexed |
2025-11-25T21:22:32Z |
| last_indexed |
2025-11-25T21:22:32Z |
| _version_ |
1850551106068807680 |
| fulltext |
ОНКОЛОГИЯ • Т. 16 • № 1 • 2014
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
40
ВСТУП
Серед основних нозологічних форм злоякісних но-
воутворень рак шлунка (РШ) займає 2-ге місце у світі.
Показники 2011 р. свідчать, що в Україні РШ у струк-
турі захворюваності на злоякісні новоутворення по-
сідає 4-те місце серед чоловіків і 7-ме — серед жінок,
у структурі смертності від злоякісних новоутворень
РШ займає 2-ге місце серед чоловічого і 3-тє — се-
ред жіночого населення [1]. Відомо, що покращити
ефективність терапії та показники виживаності хво-
рих можливо завдяки прогнозу перебігу онкологічного
захворювання та відповідної своєчасної корекції схе-
ми лікування. Зокрема, при РШ використовують низ-
ку прогностичних факторів, серед яких найпоширені-
шими є показники системи TNM [2], а саме категорії
N та M, а також наявність дисемінованих пухлиних
клітин (ПК) у кістковому мозку хворих [3].
Однією з найбільш характерних ознак злоякіс-
ного новоутворення, що сприяє пухлинній прогре-
сії, є гіпоксія [4]. Наразі в експериментальних до-
слідженнях та на клінічному матеріалі показано
зв’язок між кількістю дисемінованих ПК у кістко-
вому мозку та окремими гіпоксіязалежними показ-
никами в пухлинній тканині (ПТ) [5, 6], але стосов-
но прогнозу перебігу РШ, який враховував би рівні
гіпоксії та/або експресії/активності гіпоксіязалеж-
них білків в пухлині, наукові дані є малочисельни-
ми та недостатньо підтвердженими.
Серед білків, які активуються за умов гіпоксії,
важливу роль у пухлинній прогресії відіграють ма-
триксні металопротеїнази-2 та -9 (ММП-2 та -9),
або желатинази А і В відповідно [7–9], які є фермен-
тами родини цинкзалежних ендопептидаз, синтезу-
ються клітинами пухлини та прилеглої до неї ткани-
ни, ендотеліальними, імунокомпетентними кліти-
нами та їх попередниками і здійснюють деградацію
позаклітинного матриксу при метастазуванні пухли-
ни [10, 11]. У сучасних дослідженнях пригнічення,
ЗВ’ЯЗОК МАТРИКСНИХ
МЕТАЛОПРОТЕЇНАЗ-2 ТА -9
ІЗ РЕГІОНАРНИМ І ВІДДАЛЕНИМ
МЕТАСТАЗУВАННЯМ РАКУ
ШЛУНКА ЛЮДИНИ
Обґрунтування: серед білків, які активуються за умов гіпоксії, важливу роль
у метастазуванні пухлини відіграють матриксні металопротеїнази (ММП),
зокрема ММП-2 та -9, які здійснюють деградацію позаклітинного матрик-
су. Мета: визначення взаємозв’язку між рівнем активності ММП у пухлин-
ній тканині раку шлунка (РШ), клініко-патологічними показниками та дея-
кими асоційованими з гіпоксією характеристиками пухлини (співвідношення
вмісту фосфомоноестери/неорганічний фосфат — PME/Pi, фосфомоноесте-
ри/фосфодіестери — PME/PDE, HIF-1α, CD34), наявністю пухлинних клі-
тин у регіонарних лімфатичних вузлах (РЛВ) та тривалістю життя хворих.
Методи: імуногістохімічний, зимографія, ЯМР-спектроскопія, статистич-
ний аналіз. Результати: за задовільної оксигенації пухлини ( РМЕ/ Рі > 2,0)
характерні низькі показники сумарної активності ММП, при зростанні
рівня гіпоксії (1,0 < РМЕ/Рі < 2,0) ці показники підвищуються в середньо-
му в 4,5 раза. Сумарна активність ММП-2 і -9 корелює з експресією HIF-
1α у РШ (r = 0,58; р < 0,05). Виявлено пряму позитивну кореляцію між ак-
тивністю ММП-9, з одного боку. та метаболічним показником РМЕ/РDE
( r = 0,44; р < 0,05) і щільністю мікросудин (r = 0,46, р < 0,05), з іншого. Вміст
активної ММП-2 зворотно корелює із категорією М. Не виявлено залежнос-
ті між концентраціями активних ММП у пухлині та категорією N, але для
хворих із цитокератинпозитивними (СК+) РЛВ характерні достовірно вищі
(в 1,5 раза) значення активності ММП-2 у пухлині порівняно з пацієнтами
із цитокератиннегативними (СК−) РЛВ. Хворі на РШ, у яких концентра-
ція активної ММП-2 в пухлині < 2 мкг/г, а ММП-9 — < 4,5 мкг/г, живуть
достовірно довше та мають нижчий ризик несприятливого перебігу захво-
рювання, ніж пацієнти з відповідно вищою концентрацією активних ММП
у пухлині. Висновок: визначення активності ММП-2 та-9 у пухлині може
бути використано для прогнозу раннього метастазування, зокрема в РЛВ,
та в контролі перебігу захворювання у пацієнтів із РШ.
І.І. Ганусевич1
Л.Д. Гуменюк1
Д.С. Осинський2
А.В. Ковельська1
Л.М. Бубновська1
Л.А. Мамонтова1
С.П. Осинський1
1Інститут експериментальної
патології, онкології
і радіобіології
ім. Р.Є. Кавецького
НАН України
2Київський міський
клінічний онкологічний центр
МОЗ України, Київ, Україна
Ключові слова: рак шлунка,
матриксні металопротеїнази,
гіпоксія, гіпоксіяасоційовані
показники, метастазування,
виживаність.
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
41ОНКОЛОГИЯ • Т. 16 • № 1 • 2014 41
стабілізацію чи посилення деструкції позаклітинно-
го матриксу вважають критичною характеристикою
злоякісного прогресування [10] та пов’язують рівень
експресії желатиназ із рівнем метастазування та за-
гальною виживаністю хворих на рак [11], зокрема
РШ [12–15]. Прогноз перебігу РШ шляхом визна-
чення гіпоксіяасоційованих показників у ПТ (і се-
ред них рівня експресії/активності ММП-2 та -9)
дасть можливість комплексної оцінки ступеня агре-
сивності пухлини, дозволить контро лювати ефек-
тивність протипухлинної терапії, коригувати схе-
ми лікування та поліпшити показники виживанос-
ті хворих.
Раніше в наших дослідженнях на мишах із кар-
циномою легені Льюїс було показано, що підви-
щення рівня пухлинної гіпоксії супроводжується
збільшенням активності желатиназ у пухлині та
посиленням метастазування [16]. Також резуль-
тати наших експериментів in vitro демонструють,
що формування клітинної гіпоксії за участю ра-
дикальних форм кисню призводить до активації
ММП-2 та -9 в тканині РШ [17]. На підставі за-
значених результатів і даних літератури нами роз-
ширено пошук можливостей використання жела-
тиназ як гіпоксіяасоційованих маркерів метаста-
зування РШ.
Метою роботи є виявлення взаємозв’язку між
рівнем активності желатиназ у пухлині, клініко-па-
тологічними та деякими гіпоксіяасоційованими по-
казниками (PME/Pi, PME/PDE, HIF-1α, CD34), на-
явністю ПК у лімфатичних вузлах (ЛВ) та триваліс-
тю життя хворих на РШ.
ОБ’ЄКТ І МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ
Досліджено зразки ПТ (післяопераційний мате-
ріал) 112 хворих на первинний РШ, які перебували
на лікуванні у Київському міському клінічному он-
кологічному центрі МОЗ України з 2005 по 2011 р.
Пацієнти не отримували передопераційної тера-
пії. Хворі були проінформовані та дали згоду на ви-
користання хірургічного матеріалу з дослідниць-
кою метою.
За гістологічною структурою більшість до-
сліджуваних пухлин становить аденокарцинома
(60%) та недиференційований рак (30%), за сту-
пенем диференціації — G3 (45%), за локалізаці-
єю — пухлини нижньої третини шлунка (50%).
Обстежені пацієнти розподілилися майже рівно-
мірно за II, III та IV стадіями захворювання (29;
30; 24% відповідно), дещо меншою є група хворих
із I стадією (17%). Серед хворих переважають па-
цієнти з категоріями T3 (56%) та M0 (88%), за ка-
тегоріями N0 та N1–2 розподіл рівномірний (48 та
52% відповідно).
Частину ПТ, отриманої під час оперативно-
го втручання, одразу занурювали в забуферений
формалін, після чого готували парафінові бло-
ки за стандартною методикою. Парафінові бло-
ки за допомогою мікротома нарізали на зрізи
товщиною 4–6 мкм, які наносили на предмет-
не скло. Іншу частину ПТ, отриманої під час опе-
рації, зберігали в рідкому азоті при температурі
–180 °С не більше 1 міс.
В отриманих зразках ПТ визначали концентра-
цію активних і латентних форм ММП-2 та -9 ме-
тодом зимографії в поліакриламідному гелі (із
додаванням желатину-субстрата) на основі SDS-
електрофорезу білків [18]. Після відмивання гелю
активні форми ММП-2 та -9 візуалізувалися у ви-
гляді знебарвлених смужок на синьому тлі, локалі-
зація яких відповідала молекулярній масі кожно-
го із ферментів (72 та 92 кДа відповідно) і визна-
чалася за стандартами молекулярної маси (Sigma,
США). Оцінку протеолітичної активності прово-
дили шляхом обчислення площі зони лізису, ви-
користовуючи для порівняння стандартний набір
ММП-2 і -9 (Sigma, США). Результати оцінювали
за допомогою стандартної програми TotalLab 1.01.
З метою визначення PME/Pi застосовували ме-
тод ЯМР-спектроскопії [19]. Зі зразка гомогенізо-
ваної ПТ екстрагували фосфорвмісні речовини роз-
чином холодної 1,2 н HClO4. Потім рН доводили
до значень 7,6–8,0, дівалентні іони видаляли за до-
помогою Chelex 10 мг/5 мл (Sigma, США), філь-
трували, ліофілізували та зберігали при температу-
рі –20 °С. Перед реєстрацією спектрів ПХЕ на 31Р
ЯМР спектрометрі зразки розчиняли в 1,0 мл D2O,
центрифугували і переносили в ЯМР-пробірки
для аналізу. Спектри ПХЕ реєстрували на ЯМР-
спектрометрі (Brucker), використовуючи кювети
5 мм; вимірювали при 161,976 MГц зі спектраль-
ною шириною 64724,9 Гц, шириною імпульсу 90°
та затримкою 4 с. Тринатрієва сіль метилендифос-
фонієвої кислоти (Sigma, США) правила за стан-
дарт. Усі 31Р-хімічні зрушення у спектрах співвід-
носили до сигналу фосфокреатину, який познача-
ли як 0,0 ppm. Визначали співвідношення PME / Pi
та PME/PDE (фосфомоноестери/фосфодіестери).
Імуногістохімічне (ІГХ) виявлення експресії
білка СD34 проводили з використанням відповід-
них МкАТ (клас ІІ, клон QBEnd, DakoCytomation,
Данія) у розведенні 1:100 на депарафінізованих зрі-
зах ПТ. Для виявлення експресії СD34 на зрізи на-
носили 1% розчин сироваткового альбуміну бика,
потім проводили інкубацію препаратів із відповід-
ними МкАТ в оптимальному розведенні протягом
1 год. Після промивання препаратів у розчині фос-
фатного буфера їх інкубували 40 хв у полімерному
розчині. Для візуалізації активності пероксидази
використовували 3,3′-діамінобензидин тетрагідрох-
лоридом (ДАБ) (DakoCytomation, Данія) та забарв-
лювали зрізи гематоксиліном Мейєра. За допомо-
гою світлового мікроскопа візуалізували клітини,
що експресують СD34, як клітини, забарвлені ко-
ричневим кольором.
У тканині РШ тих самих хворих визначали екс-
пресію транскрипційного фактора HIF-1α, вико-
ристовуючи відповідні МкАТ (H1alpha67, Abcam,
ОНКОЛОГИЯ • Т. 16 • № 1 • 2014
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
42
Англія). Як систему візуалізації використано лан-
цюговий метод із полімеразною кон’югацією
EnVision/ HRP (DakoCytomation, Данія) із субстрат-
хромогеном ДАВ.
У тканині ЛВ ІГХ методом виявляли панци-
токератинпозитивні клітини. Як первинне ан-
титіло використовували aнтипанцитокератинові
МкАТ (MNF116, DakoCytomation, Данія). Як
систему візуалізації застосовано ланцюговий ме-
тод із полімеразною кон’югацією EnVision/HRP
(DakoCytomation, Данія) із субстрат-хромогеном
ДАВ. Виявлення в ЛВ хворих на РШ панцитоке-
ратинпозитивних (СК+) клітин було підставою
для констатації наявності ПК, тобто метастастич-
ного ураження.
Проводили статистичну обробку даних із вико-
ристанням методів варіаційної статистики із засто-
суванням програм «Statistica 8.0» та «Prism 4.0». Ві-
рогідність відмінностей між показниками оцінюва-
ли за t-критерієм Стьюдента. Кореляційний аналіз
проводили з використанням коефіцієнта кореля-
ції Спірмена (rho). Виживаність хворих аналізували
за методом Каплана — Мейєра, вірогідність розбіж-
ностей між кривими виживаності визначали за до-
помогою log-rank-тесту. Статистичну значущість
прийнято при р < 0,05.
РЕЗУЛЬТАТИ ТА ЇХ ОБГОВОРЕННЯ
У пухлинах усіх обстежених визначали кон-
центрації активних форм ММП-2 і -9. Активність
ММП-2 коливалася в межах 0,1÷52,8 мкг/г, серед-
нє значення становило 8,2±4,9 мкг/г тканини. Ак-
тивність ММП-9 варіювали від 0,05 до 28,8 мкг/
тканини, середнє значення — 8,3± 5,9 мкг/г.
Про гіпоксія-регульований характер активації
ММП-2 та -9 у пухлині свідчать встановлені по-
зитивні залежності між рівнями активності жела-
тиназ і низкою гіпоксія асоційованих показників
у тканині РШ.
Як відомо, для оцінки біоенергетичного стату-
су тканини та рівня її гіпоксії визначали метабо-
лічний показник PME/Pi співвідношення (фосфо-
моноестери/неорганічний фосфат), що узагальнює
прояви хронічної та гострої гіпоксії у тканині і ха-
рактеризує рівень фосфорвмісних речовин, які за-
діяні в енергетичному обміні тканини. Визначено
лінійну кореляцію (р < 0,001) між середнім значен-
ням парціального тиску кисню (рО2) та відповід-
ним значенням цього співвідношення [19]. Резуль-
тати дослідження рівня гіпоксії у тканині РШ свід-
чать про значні коливання індивідуальних значень
співвідношення PME/Pi від 0,8 до 5,32 при медіані
1,4. Виявлено також, що у «нормальній» слизовій
оболонці шлунка співвідношення PME/Pi майже
в 2 рази вище порівняно з відповідним співвідно-
шенням у тканині РШ, тобто «нормальна» тканина
удвічі краще оксигенована, ніж пухлинна. Встанов-
лено, що при умовно прийнятій межі між «добре» та
«бідно» оксигенованими пухлинами, яка дорівнює
1,4, «гіпоксичний» РШ становить 44%, а «оксигено-
ваний» — 56% випадків. При аналізі отриманих да-
них виявлено 3 умовні групи хворих на РШ за рівнем
гіпоксії в пухлині: група хворих, у яких співвідно-
шення PME/Pi < 1,0, тобто пухлини з надто глибо-
кою гіпоксією; 1,0 < PME/Pi < 2,0 — з помірним рів-
нем гіпоксії; PME/Pi > 2,0 — задовільно оксигенова-
ні пухлини (29; 58 та 13% хворих відповідно). Рівень
оксигенації в останній групі співвідноситься з рів-
нем гіпоксії в «нормальних» тканинах.
Проаналізовано взаємозв’язок між рівнем гіпок-
сії та активністю ММП-2 і -9 у ПТ хворих на РШ.
Виявлено залежність між показником РМЕ/Рі, що
характеризує рівень оксигенації пухлини, та сумар-
ною желатиназною активністю (таблиця). При ви-
сокій оксигенації пухлини (РМЕ/Рі > 2,0) відзна-
чають невисокі показники активності желатиназ,
при збільшенні гіпоксії (1,0 < РМЕ/Рі < 2,0) значен-
ня зростають у декілька разів, а в умовах глибокої гі-
поксії (РМЕ/Рі < 1,0) мають тенденцію до зниження.
Отримані дані свідчать про те, що конт роль актив-
ності ММП-2 і -9 у пухлині асоційований із рівнем
гіпоксії, та співвідносяться з результатами, одер-
жаними нами раніше в модельних експериментах
на мишах із карциномою легені Льюїс [16].
Таблиця
Співвідношення РМЕ/Рi та сумарна активність желатиназ у ПТ
хворих на РШ
РМЕ/Рi Активність желатиназ, мкг/г
тканини
> 2,0 5,1 ± 3,9
1,0 ÷ 2,0 23,0 ± 12,8*
< 1,0 17,3 ± 15,9
Примітка: * p < 0,05.
Досліджені також кореляційні зв’язки між ак-
тивністю желатиназ і метаболічним показником
РМЕ/ РDE, високі значення якого співвідносять із
раннім метастазуванням пухлин. За нашими дани-
ми, між цим показником і ММП-9 існує пряма по-
зитивна кореляція (r = 0,45; р < 0,05) (рис. 1). Зро-
зумілою є необхідність ширших досліджень, але
завчасно можна передбачити, що ММП-9 відпові-
дальна за раннє метастазування завдяки ключовій
ролі, яка належить їй у неоангіогенезі. Так, із даних
літератури відомо, що, беручи участь у неоангіоге-
незі, ММП-9 впливає на ефективність інтраваза-
ції. Показано на тваринних моделях, що експресія
ММП-9 в деяких клітинних лініях корелює зі здат-
ністю ПК до інтравазації. При цьому дія маримас-
тату, який є інгибітором і ММП, і ангіогенезу одно-
часно, призводила до інгібіції інтравазації ПК [22].
У результаті визначення експресії HIF-1α у тка-
нині РШ виявлено значну варіабельність кількос-
ті HIF-1α-позитивних клітин (HIF-1α+ клітин) від
5,1 до 71,5% з медіаною 26% (рис. 2). Лише у 7%
хворих пухлини були диференційовані як HIF-1α-
негативні. Встановлено пряму позитивну кореляцію
між кількістю HIF-1α+-клітин і сумарною активніс-
тю ММП-2 та -9 (r = 0,58; p < 0,05) (рис. 3).
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
43ОНКОЛОГИЯ • Т. 16 • № 1 • 2014 43
Рис. 1. Активність ММП-9 та співвідношення PME/PDE
в тканині РШ
Рис. 2. HIF-1α-позитивні клітини у тканині РШ (× 200)
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
0 10 20 30 40 50 60 70 80
Àê
òè
âí
³ñ
òü
æ
åë
àò
èí
àç
, ì
êã
/ã
ò
êà
íè
íè
ʳëüê³ñòü HIF-1α+ êë³òèí, %
Рис. 3. Кількість HIF-1α+-клітин і сумарна активність
желатиназ у тканині РШ
Визначено рівень експресії CD34, що є показ-
ником щільності мікросудин (ЩМС) у тканині
РШ досліджуваних хворих (рис. 4). За результата-
ми ІГХ реакції експресію CD34 реєстрували у всіх
зразках ПТ. Виявлено, що ЩМС у пухлинах хво-
рих на РШ не є однорідною і характеризується зна-
чною варіабельністю: від 64 до 367 мікросудин/мм2
(медіана 136 мікросудин/мм2). Встановлено також
пряму позитивну залежність ЩМС від активнос-
ті ММП-9 в пухлині (r = 0,46; p < 0,05) (рис. 5), що
підтверджує важливу роль цієї желатинази у неовас-
куляризації [11].
Рис. 4. Високий рівень експресії CD34 в тканині РШ, оці-
нений ІГХ методом, що вказує на активний неоангіоге-
нез (×160)
0
50
100
150
200
250
300
0 5 10 15 20 25
Ù
Ì
Ñ,
ì
³ê
ðî
ñó
äè
í/
ì
ì
2
ÌÌÏ-9, ìêã/ã òêàíèíè
Рис. 5. Активність ММП-9 та ЩМС у тканині РШ
Таким чином, виявлено зв’язки між рівнем ак-
тивності желатиназ і гіпоксіяасоційованими по-
казниками в РШ. Отримані результати підтверджу-
ють дані літератури про те, що гіпоксія (прямо чи
опосередковано) бере участь у формуванні желати-
назної активності в тканині РШ. Механізми такої
регуляції потребують подальшого вивчення. Вона
може відбуватися як на рівні синтезу, так і актива-
ції ММП. Відомо, що латентні форми ММП-2 і -9
мають у своєму складі продомен із консерватив-
ною послідовністю в активному центрі та залишком
цистеїну і Zn2+. Активація профермента відбуваєть-
ся шляхом ди соціації зв’язку Zn2+-цистеїн. Такий
розрив зв’язку може бути зумовлений гіпоксичним
станом тканини, а саме взаємодією з радикальни-
ми формами кисню, що є тіол-модифікуючими
ОНКОЛОГИЯ • Т. 16 • № 1 • 2014
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
44
агентами та можуть активувати латентну форму
фермента [17].
Проаналізовано зв’язок рівня активності же-
латиназ зі стадіями захворювання та з метаста-
зуванням. Показано, що концентрація активної
ММП-2 в пухлині зростає від І до ІІ стадії захво-
рювання майже в 2 рази (p > 0,05) і дещо знижуєть-
ся у ІІІ та IV стадії. У IV стадії в порівнянні зі ста-
дією I концентрація активної ММП-9 підвищуєть-
ся в 1,7 раза, але різниця також є недостовірною
(p > 0,05) (рис. 6). Концентрація активної форми
ММП-2 перебуває у зворотній залежності від ка-
тегорії М: для загальної кількості обстежених паці-
єнтів показано, що за відсутності віддалених мета-
стазів концентрація активних форм ММП-2 в пух-
лині майже в 2 рази перевищує таку за наявності
метастазів (p < 0,05), а для пацієнтів із захворю-
ванням у IV стадії ці показники різняться майже
в 4 рази (p < 0,05) (див. рис. 6). Максимальна ак-
тивація латентних форм ММП-2 у пухлинах при
М0 свідчить про значне посилення деструкції пух-
линного матриксу на такому етапі розвитку пух-
лини, коли віддалені метастази клінічно не вияв-
лені, тобто, можливо, відбувається їх формування
та/або дисемінація ПК, що опосередковано під-
тверджується високими показниками активності
ММП-2 в РШ у ІІ стадії. Отримані результати спів-
відносяться з даними про здатність пухлини через
відповідні сигнальні шляхи заздалегідь створюва-
ти сприятливе мікрооточення у передметастатич-
них «нішах» [20, 21].
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
I II III IV IVM0 IVM1
Àê
òè
âí
³ñ
òü
Ì
Ì
Ï
, ì
êã
/ã
ò
êà
íè
íè
ÌÌÏ-2
ÌÌÏ-9
Рис. 6. Рівень активності желатиназ у тканині РШ на різ-
них стадіях процесу
Не виявлено достовірної різниці між показника-
ми концентрації активних форм желатиназ у пухли-
нах при категорії N0 та N1–2, тобто з відсутніми та
наявними метастазами у регіонарних лімфатичних
вузлах (РЛВ) (рис. 7). При дослідженні РЛВ на на-
явність прихованих ПК за допомогою ІГХ реак-
ції на цитокератини мікрометастази було виявле-
но у 24% хворих на РШ категорії N0 [23]. Показано
при цьому, що для хворих із СК+ РЛВ характерне
достовірно вище (у 1,5 раза) значення активнос-
ті ММП-2 в пухлині при зіставленні з такою у хво-
рих із СК− РЛВ (див. рис. 7). Це вірогідно вказує
на участь ММП-2 у метастазуванні ПК у РЛВ, що
може бути використано для прогнозу метастазуван-
ня: підвищена активність ММП-2 у первинній пух-
лині свідчить про метастазування у ЛВ навіть за умо-
ви категорії N0.
Раніше нами визначено [29], що пацієнти, у яких
концентрація в пухлині активної ММП-2 < 2 мкг/г,
а концентрація активної ММП-9 < 4,5 мкг/г, жи-
вуть достовірно довше (p = 0,015; p = 0,004 відпо-
відно) порівняно з хворими, у пухлинах яких по-
казники концентрації ММП високі. Встановлено,
що концентрація активних форм желатиназ має
прогностичне значення, зокрема при концентрації
ММП-2 у пухлині < 2 мкг/г і ММП-9 — < 4,5 мкг/г
ризик несприятливого перебігу захворювання май-
же в 4 та 5 разів відповідно нижчий за такий при ви-
щій концентрації ММП (нazard ratio — HR — 3,8;
95% confidence interval — Cl — 0,78–8,2; p < 0,05 та
HR 4,7; 95% C l0,83–7,7; p < 0,05 відповідно). Отри-
мані результати корелюють із даними літератури, що
свідчать про стимулюючий вплив ММП на прогре-
сування пухлинного процесу, зокрема на інвазію
та метастазування різних злоякісних пухлин [11,
15, 24–28].
ÌÌÏ-2 ÌÌÏ-9
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
N0 N1-2 CK- CK+
Àê
òè
âí
³ñ
òü
Ì
Ì
Ï
, ì
êã
/ã
ò
êà
íè
íè
Рис. 7. Активність ММП-2 та -9 у тканині РШ за відсут-
ності (N0) та наявності (N1–2) метастазів у РЛВ (p > 0,05)
та із CK− і CK+ ЛВ (p < 0,05 для ММП-2)
Таким чином, можна констатувати, що актив-
ність ММП корелює не лише з рівнем гіпоксії та
експресією гіпоксіязалежних білків у пухлині, але й
із тривалістю життя хворих на РШ, вказуючи на до-
цільність визначення активності ММП-2, асоційо-
ваної з дисемінацією ПК, та ММП-9, задіяної в ан-
гіогенезі, для прогнозу раннього метастазування (зо-
крема в РЛВ) та перебігу захворювання.
ВИСНОВКИ
1. Для високої оксигенації пухлини (РМЕ/ Рі > 2, 0)
характерні низькі показники сумарної активності же-
латиназ, при збільшенні гіпоксії (1,0 < РМЕ/Рі < 2,0)
ці показники зростають відповідно у 4,5 раза. Сумар-
на активність ММП-2 та -9 корелює з експресією
HIF-1α в РШ (r = 0,58; р < 0,05).
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
45ОНКОЛОГИЯ • Т. 16 • № 1 • 2014 45
2. Виявлено пряму позитивну кореляцію між ак-
тивністю ММП-9, з одного боку, та метаболічним
показником РМЕ/РDE (r = 0,44; р < 0,05) і ЩМС
(r = 0,46; р < 0,05), з іншого.
3. Вміст активної ММП-2 зворотньо корелює з
категорією М. Не виявлено залежності між концен-
траціями активних желатиназ у пухлині та категорі-
єю N. Тоді як для хворих із СК+ (цитокератинпози-
тивними) ЛВ характерні достовірно вищі (у 1,5 раза)
значення активності ММП-2 в пухлині порівняно
з пацієнтами із СК- (цитокератиннегативними) ЛВ.
3. Хворі на РШ, що мали концентрацію активної
ММП-2 в пухлині < 2 мкг/г, а ММП-9 — < 4,5 мкг/г,
живуть достовірно довше та мають нижчий ризик
несприятливого перебігу захворювання, ніж паці-
єнти з вищою концентрацією активних желатиназ.
4. Визначення показників активності ММП-2,
асоційованої з дисемінацією ПК, та ММП-9, заді-
яної в ангіогенезі, може бути використано для оцін-
ки раннього метастазування (зокрема в РЛВ) та
в контролі перебігу захворювання у пацієнтів із РШ.
СПИСОК ВИКОРИСТАНОЇ ЛІТЕРАТУРИ
1. Федоренко ЗП, Михайлович ЮЙ, Гулак ЛО та ін. Рак
в Україні, 2011–2012. Захворюваність, смертність, показни-
ки діяльності онкологічної служби. Бюл Нац канцер-реєстру
України, 2013; (14): 8, 28–9.
2. Macdonald JS, Cervantes A. New horizons for gastric can-
cer: commentary. Eur J Cancer Suppl 2006; 4(10): 1–2.
3. Muller V, Alix-Panabieres C, Pantel K. Insight into mini-
mal residual disease in cancer patient: Implication for anti-cancer
therapies. Eur J Cancer 2010; 46: 1189–97.
4. Hoeckel M, Vaupel P. Tumor hypoxia: definitions and cur-
rent clinical, biologic, and molecular aspects. J Natl Cancer Inst
2001; 93: 266–76.
5. Ameri K, Luong R, Zhang H, et al. Circulating tumor cells
demonstrate an altered response to hypoxia and an aggressive phe-
notype. Br J Cancer 2010; 102: 561–9.
6. Kakeji Y, Maehara Y, Shibahara K, et al. Clinical significance
of micrometastasis in bone marrow of patients with gastric can-
cer and its relation to angiogenesis. Gastr Cancer 1999; 2: 46–51.
7. Dalton SJ, Whiting CV, Bailey JR, et al. Mechanisms of
Chronic Skin Ulceration Linking Lactate, Transforming Growth
Factor-beta, Vascular Endothelial Growth Factor, Collagen Re-
modeling, Collagen Stability, and Defective Angiogenesis. J In-
vest Dermatol 2007; 34: 1988–92.
8. McCormick ML, Gavrila D, Weintraub NL. Role of Oxida-
tive Stress in the Pathogenesis of Abdominal Aortic Aneurysms.
Arterioscler Thromb Vasc Biol 2007; 28 (4): 1432–8.
9. Ho FM, Liu SH, Lin WW, Liau CS. Opposite effects of high
glucose on MMP-2 and TIMP-2 in human endothelial cells. J Cell
Biochem 2007; 86: 1628–30.
10. Fingleton B. Matrix metalloproteinases: roles in cancer and
metastasis. Front Biosci 2006; 11: 479–91.
11. Ганусевич ИИ. Роль матриксных металлопротеиназ
(ММП) при злокачественных новообразованиях. Характе-
ристика ММП, регуляция их активности, прогностическое
значение. Онкология 2010; 12(1): 10–6.
12. Kubben F, Sier C, Duijn W, et al. Matrix metalloprote-
inase-2 is a consistent prognostic factor in gastric cancer. Br J Can-
cer 2006; 94: 1035–40.
13. Peña S. Matrix metalloproteases as molecular markers in
gastric cancer. Med Clin 2010; 134 (3): 123–6.
14. Wu CY, Wu MS, Chiang EP, et al. Plasma matrix metal-
loproteinase-9 level is better than serum matrix metalloprote-
inase-9 level to predict gastric cancer evolution. Clin Cancer Res
2007; 13: 2054–60.
15. Chu D, Zhang Z, Li Y, et al. Matrix metalloproteinase-9 is
associated with disease-free survival and overall survival in patients
with gastric cancer. Int J Cancer 2011; 129: 887–95.
16. Osinsky S, Bubnovskaya L, Ganusevich I, et al. Hypoxia
level and matrix metalloproteinases-2 and -9 activity in Lewis lung
carcinoma: correlation with metastasis. Exp Oncol 2005; 27: 202–5.
17. Burlaka A, Ganusevich I, Sidorik E, Osinsky S. Effects of
radical oxygen species and NO: formation of intracellular hypoxia
and activation of matrix metalloproteinases in tumor tissues. Exp
Oncol 2006; 28: 49–53.
18. De Clerk YA, Perez N, Shimada H, et al. Inhibition of in-
vasion and metastasis in cells transfected with an inhibitor of me-
talloproteinases. Cancer research 1992; 52: 701–8.
19. Vaupel P, Okunieff P, Kallinowski F, et al. Correlation be-
tween 31P-NMR spectroscopy and tissue O2 tention measurements
in a murine fibrocarcoma. Radiation Res 1989; 120: 477–93.
20. Muller MM and Fusenig NE. Friends or foes — bipolar
effects of the tumour stroma in cancer. Nature Rewiews 2004; 4:
839–49.
21. Coussens LM, Tinkle CL, Hanahan D, et al. MMP-9 sup-
plied by bone marrow-derived cells contributes to skin carcinoge-
nesis. Cell 2000; 103: 481–90.
22. Kim J, Yu W, Kovalski K, Ossowski L. Requirement for spe-
cific proteases in cancer cell intravasation as releaved by a novel
semiquantitative PCR-based assay. Cell 1998; 94: 353–362.
23. Антонов ЄО, Гуменюк ЛД, Мамонтова ЛА, Осин-
ський ДС. Пухлинні клітини у регіонарних лімфатичних вуз-
лах хворих на рак шлунка з категорією N0 та їх клінічне зна-
чення. Онкология 2013; 15(3): 230–4.
24. Zhi YH, Song MM, Wang PL, et al. Suppression of ma-
trix metalloproteinase-2 via RNA interference inhibits pancrea tic
carcinoma cell invasiveness and adhesion. World J Gastroenterol
2009; 15: 1072–8.
25. Shaco-Levy R, Sharabi S, Benharroch D, et al. Matrix me-
talloproteinases 2 and 9, E-cadherin, and beta-catenin expression
in endometriosis, low-grade endometrial carcinoma and non-neo-
plastic eutopic endometrium. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol
2008; 139: 226–32.
26. Chen JS, Wang Q, Fu XH, et al. Involvement of PI3K/
PTEN/AKT/mTOR pathway in invasion and metastasis in he-
patocellular carcinoma: Association with MMP-9. Hepatol Res
2009; 39: 177–86.
27. Pennanen H, Kuittinen O, Soini Y, et al. Prognostic signi-
ficance of p53 and matrix metalloproteinase-9 expression in fol-
licular lymphoma. Eur J Haematol 2008; 81: 289–97.
28. Kondakova IV, Klisho EV, Savenkova OV, et al. Matrix me-
talloproteinase 2 and 9 as the factor of head and neck tumor me-
tastasis. Biomed Khim 2008; 54: 555–60.
29. Ганусевич ІІ, Гуменюк ЛД, Мамонтова ЛА та ін. Пух-
линоасоційовані макрофаги та вміст активованих форм же-
латиназ у тканині раку шлунка: зв’язок з виживаністю хво-
рих. Онкология 2013; 15 (1): 14–9.
RELATIONSHIP OF MATRIX
METALLOPROTEINASE-2 AND -9
WITH REGIONAL AND REMOTE
METASTASIS OF HUMAN GASTRIC CANCER
I.I. Ganusevich, L.D. Gumeniuk, D.S. Osinsky,
A.V. Kovelskaya, L.N. Bubnovskaya,
L.A. Mamontova, S.P. Osinsky
Summary. Background: among proteins that are acti-
vated by the conditions of hypoxia, an important role in
the metastasis of tumor belongs to matrix metallopro-
teinases (MMPs) in particular MMP-2 and -9, which
ОНКОЛОГИЯ • Т. 16 • № 1 • 2014
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
46
carry out the degradation of the extracellular matrix.
Objective: to identify interrelation between of MMP
activity in tumor tissue of the gastric cancer (GC),
a cli nical-pathological indices and hypoxia associ-
ated cha racteristics of the tumor (ratio of phospho-
monoesters/inorganic phosphate (PME/Pi), phospho-
monoesters/phosphodiesters (PME/PDE), HIF-1α,
CD34), the presence of tumor cells in the lymphatic
nodes (LN) and survival. Methods: immunohistoche-
mistry, zimo graphy, NMR-spectroscopy, statistical ana-
lysis. Results: satisfactory tumor oxygenation (ITRS/
Ri > 2,0) is cha racterized by low total activity of MMP.
When hypo xia increases (1,0 < ITRS/Ri < 2,0), MMP
activity is about 4.5-fold elevated. The total activity
of MMP-2 and -9 correlates with expression of HIF-1α
in CS (r = 0,58; p < 0.05). The direct positive corre-
lation is demonstrated between the MMP-9 acti vity, on
the one hand, and the metabolic indicator of the ITRS/
РDE (r = 0.44; p < 0.05) and the density of microvessels
(r = 0.46; p < 0.05), on the other. The content of the ac-
tive MMP-2 is inversely correlated with the presence
of metastases in the patients. The correlation between
concentrations of active MMP in the tumor and the in-
volvement of regional lymph nodes (RLN) has not
been revealed. Nevertheless, for patients with cytoke-
ratin-positive (SC+) RLN, MMP-2 activity in tumor is
1.5 times as much as that in patients with cytokeratin-
negative (SK) RLN. The survival of the GC patients with
the concentration of the active MMP-2 in tumor below
2 μg/g, and MMP-9 — less than 4.5 μg/g, is signi ficantly
higher with lower risk of unfavorable course of the disease
compared with the patients with correspondingly higher
concentration of active MMPs in the tumor. Conclusion:
the assay of MMP-2 and -9 activity in the tumor can
be used for prediction of early metastasis, in particular
in RLN, and in monitoring the course of disease in pa-
tients GC.
Key Words: gastric cancer, matrix
metalloproteinases, hypoxia, hypoxia-associated
indices, metastasis, survival.
Адреса для листування:
Ганусевич І.І.
03022, Київ, вул. Васильківська, 45
Інститут експериментальної патології,
онкології і радіобіології ім. Р.Є. Кавецького
НАН України
E-mail: iganus2000@yahoo.com
Одержано: 29.01.2014
|