Гипертонический криогемолиз эритроцитов млекопитающих в средах с различным катионным составом
Изучено влияние сред, содержащих одновалентные катионы Li⁺, Na⁺, К⁺ либо смесь (Na⁺ + К⁺) (осмолярность 2400 мОсмоль/кг), на ход временной зависимости гипертонического криогемолиза высококалиевых (человека и лошади) и высоконатриевых (собаки и быка) эритроцитов Показано фактически во всех средах сни...
Gespeichert in:
| Veröffentlicht in: | Проблемы криобиологии и криомедицины |
|---|---|
| Datum: | 2007 |
| Hauptverfasser: | , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Russian |
| Veröffentlicht: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2007
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/138198 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Гипертонический криогемолиз эритроцитов млекопитающих в средах с различным катионным составом / С.С. Ершов, Н.В. Орлова, Н.М. Шпакова // Проблемы криобиологии. — 2007. — Т. 17, № 3. — С. 243-250. — Бібліогр.: 16 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-138198 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Ершов, С.С. Орлова, Н.В. Шпакова, Н.М. 2018-06-18T10:51:35Z 2018-06-18T10:51:35Z 2007 Гипертонический криогемолиз эритроцитов млекопитающих в средах с различным катионным составом / С.С. Ершов, Н.В. Орлова, Н.М. Шпакова // Проблемы криобиологии. — 2007. — Т. 17, № 3. — С. 243-250. — Бібліогр.: 16 назв. — рос. https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/138198 57.043:591.111.1 Изучено влияние сред, содержащих одновалентные катионы Li⁺, Na⁺, К⁺ либо смесь (Na⁺ + К⁺) (осмолярность 2400 мОсмоль/кг), на ход временной зависимости гипертонического криогемолиза высококалиевых (человека и лошади) и высоконатриевых (собаки и быка) эритроцитов Показано фактически во всех средах снижение уровня гипертонического криогемолиза эритроцитов человека, собаки и лошади в условиях продолжительной инкубации при 37°С в отличие от эритроцитов быка, для которых характерна обратная временная зависимость. Установлено что чувствительность эритроцитов человека к гипертоническому криогемолизу снижается в ряду Na⁺ > K⁺+Na⁺ > K⁺> Li⁺, собаки - в обратном порядке. Временные зависимости гемолиза эритроцитов как лошади, так и быка в средах с разным катионным составом практически не имеют отличий. Полученные результаты обсуждаются с точки зрения особенностей ионтранспортных систем эритроцитов разных видов млекопитающих. Вивчено вплив середовищ, що містять одновалентні катіони Li⁺, Na⁺, К⁺ або їх суміш (Na⁺+К⁺) (осмолярність 2400 мОсмоль/кг), на хід залежності гіпертонічного кріогемолізу від часу інкубування висококалієвих еритроцитів (людини і коня) і високонатрієвих клітин (собаки і бика). Показано фактично у всіх середовищах зниження рівня гіпертонічного кріогемолізу еритроцитів людини, собаки і коня в умовах тривалої інкубації при 37°С на відміну від еритроцитів бика, для яких характерна часова зворотня залежність. Встановлено що чутливість еритроцитів людини до гіпертонічного кріогемолізу знижується у ряду Na⁺>K⁺+Na⁺>K⁺>Li⁺, собаки - у зворотному порядку. Залежності гемолізу від часу інкубації еритроцитів як коня, так і бика у середовищах із різним катіонним складом фактично не мають відмінностей. Отримані результати обговорюються з точки зору особливостей іонтранспортних систем еритроцитів різних видів ссавців. The effect of media, containing either Li⁺, Na⁺, K⁺ monovalent cations or combination (Na⁺+K⁺) (2,400 mOsm/kg osmolarity) on a time dependence proceeding of hypertonic cryohemolysis in high-potassium erythrocytes (human and equine) and high-sodium (canine and bovine) ones has been studied. A decrease in hypertonic cryohemolysis level of human, canine and equine erythrocytes under long-term incubation at 37°C in contrast to bovine ones with typical reversible time dependence has been demonstrated almost in all media. Sensitivity of human erythrocytes to hypertonic cryohemolysis has been established to reduce in the series of Na⁺ >K⁺+Na⁺ >K⁺ >Li⁺ and in a reversible order for canine ones. Time dependencies of both equine and bovine erythrocyte hemolysis in media with different cation composition are practically similar. The results obtained are discussed from the point of view of peculiarities of erythrocyte ion transport systems of different mammalian species. ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии и криомедицины Проблемы криобиологии и криомедицины Теоретическая и экспериментальная криобиология Гипертонический криогемолиз эритроцитов млекопитающих в средах с различным катионным составом Hypertonic cryohemolysis of mammalian erythrocytes in media with different cation compositions Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Гипертонический криогемолиз эритроцитов млекопитающих в средах с различным катионным составом |
| spellingShingle |
Гипертонический криогемолиз эритроцитов млекопитающих в средах с различным катионным составом Ершов, С.С. Орлова, Н.В. Шпакова, Н.М. Теоретическая и экспериментальная криобиология |
| title_short |
Гипертонический криогемолиз эритроцитов млекопитающих в средах с различным катионным составом |
| title_full |
Гипертонический криогемолиз эритроцитов млекопитающих в средах с различным катионным составом |
| title_fullStr |
Гипертонический криогемолиз эритроцитов млекопитающих в средах с различным катионным составом |
| title_full_unstemmed |
Гипертонический криогемолиз эритроцитов млекопитающих в средах с различным катионным составом |
| title_sort |
гипертонический криогемолиз эритроцитов млекопитающих в средах с различным катионным составом |
| author |
Ершов, С.С. Орлова, Н.В. Шпакова, Н.М. |
| author_facet |
Ершов, С.С. Орлова, Н.В. Шпакова, Н.М. |
| topic |
Теоретическая и экспериментальная криобиология |
| topic_facet |
Теоретическая и экспериментальная криобиология |
| publishDate |
2007 |
| language |
Russian |
| container_title |
Проблемы криобиологии и криомедицины |
| publisher |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Hypertonic cryohemolysis of mammalian erythrocytes in media with different cation compositions |
| description |
Изучено влияние сред, содержащих одновалентные катионы Li⁺, Na⁺, К⁺ либо смесь (Na⁺ + К⁺) (осмолярность 2400 мОсмоль/кг), на ход временной зависимости гипертонического криогемолиза высококалиевых (человека и лошади) и высоконатриевых (собаки и быка) эритроцитов Показано фактически во всех средах снижение уровня гипертонического криогемолиза эритроцитов человека, собаки и лошади в условиях продолжительной инкубации при 37°С в отличие от эритроцитов быка, для которых характерна обратная временная зависимость. Установлено что чувствительность эритроцитов человека к гипертоническому криогемолизу снижается в ряду Na⁺ > K⁺+Na⁺ > K⁺> Li⁺, собаки - в обратном порядке. Временные зависимости гемолиза эритроцитов как лошади, так и быка в средах с разным катионным составом практически не имеют отличий. Полученные результаты обсуждаются с точки зрения особенностей ионтранспортных систем эритроцитов разных видов млекопитающих.
Вивчено вплив середовищ, що містять одновалентні катіони Li⁺, Na⁺, К⁺ або їх суміш (Na⁺+К⁺) (осмолярність 2400 мОсмоль/кг), на хід залежності гіпертонічного кріогемолізу від часу інкубування висококалієвих еритроцитів (людини і коня) і високонатрієвих клітин (собаки і бика). Показано фактично у всіх середовищах зниження рівня гіпертонічного кріогемолізу еритроцитів людини, собаки і коня в умовах тривалої інкубації при 37°С на відміну від еритроцитів бика, для яких характерна часова зворотня залежність. Встановлено що чутливість еритроцитів людини до гіпертонічного кріогемолізу знижується у ряду Na⁺>K⁺+Na⁺>K⁺>Li⁺, собаки - у зворотному порядку. Залежності гемолізу від часу інкубації еритроцитів як коня, так і бика у середовищах із різним катіонним складом фактично не мають відмінностей. Отримані результати обговорюються з точки зору особливостей іонтранспортних систем еритроцитів різних видів ссавців.
The effect of media, containing either Li⁺, Na⁺, K⁺ monovalent cations or combination (Na⁺+K⁺) (2,400 mOsm/kg osmolarity) on a time dependence proceeding of hypertonic cryohemolysis in high-potassium erythrocytes (human and equine) and high-sodium (canine and bovine) ones has been studied. A decrease in hypertonic cryohemolysis level of human, canine and equine erythrocytes under long-term incubation at 37°C in contrast to bovine ones with typical reversible time dependence has been demonstrated almost in all media. Sensitivity of human erythrocytes to hypertonic cryohemolysis has been established to reduce in the series of Na⁺ >K⁺+Na⁺ >K⁺ >Li⁺ and in a reversible order for canine ones. Time dependencies of both equine and bovine erythrocyte hemolysis in media with different cation composition are practically similar. The results obtained are discussed from the point of view of peculiarities of erythrocyte ion transport systems of different mammalian species.
|
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/138198 |
| citation_txt |
Гипертонический криогемолиз эритроцитов млекопитающих в средах с различным катионным составом / С.С. Ершов, Н.В. Орлова, Н.М. Шпакова // Проблемы криобиологии. — 2007. — Т. 17, № 3. — С. 243-250. — Бібліогр.: 16 назв. — рос. |
| work_keys_str_mv |
AT eršovss gipertoničeskiikriogemolizéritrocitovmlekopitaûŝihvsredahsrazličnymkationnymsostavom AT orlovanv gipertoničeskiikriogemolizéritrocitovmlekopitaûŝihvsredahsrazličnymkationnymsostavom AT špakovanm gipertoničeskiikriogemolizéritrocitovmlekopitaûŝihvsredahsrazličnymkationnymsostavom AT eršovss hypertoniccryohemolysisofmammalianerythrocytesinmediawithdifferentcationcompositions AT orlovanv hypertoniccryohemolysisofmammalianerythrocytesinmediawithdifferentcationcompositions AT špakovanm hypertoniccryohemolysisofmammalianerythrocytesinmediawithdifferentcationcompositions |
| first_indexed |
2025-11-25T20:54:31Z |
| last_indexed |
2025-11-25T20:54:31Z |
| _version_ |
1850543476449476608 |
| fulltext |
243ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 17, 2007, №3
УДК 57.043:591.111.1
С.С. ЕРШОВ, Н.В. ОРЛОВА, Н.М. ШПАКОВА*
Гипертонический криогемолиз эритроцитов млекопитающих
в средах с различным катионным составом
UDC 57.043:591.111.1
S.S. ERSHOV, N.V. ORLOVA, N.M. SHPAKOVA*
Hypertonic Cryohemolysis of Mammalian Erythrocytes in Media
with Different Cation Compositions
Изучено влияние сред, содержащих одновалентные катионы Li+, Na+, К+ либо смесь (Na+ + К+) (осмолярность 2400
мОсмоль/кг), на ход временной зависимости гипертонического криогемолиза высококалиевых (человека и лошади) и
высоконатриевых (собаки и быка) эритроцитов Показано фактически во всех средах снижение уровня гипертонического
криогемолиза эритроцитов человека, собаки и лошади в условиях продолжительной инкубации при 37°С в отличие от
эритроцитов быка, для которых характерна обратная временная зависимость. Установлено что чувствительность
эритроцитов человека к гипертоническому криогемолизу снижается в ряду Na+ > K++Na+ > K+> Li+, собаки - в обратном
порядке. Временные зависимости гемолиза эритроцитов как лошади, так и быка в средах с разным катионным составом
практически не имеют отличий. Полученные результаты обсуждаются с точки зрения особенностей ионтранспортных систем
эритроцитов разных видов млекопитающих.
Ключевые слова: эритроциты человека, лошади, собаки, быка, гипертонический криогемолиз, Na+–, К+– , Li+– и (Na+ +
К+)–содержащие среды.
Вивчено вплив середовищ, що містять одновалентні катіони Li+, Na+, К+ або їх суміш (Na++К+) (осмолярність 2400 мОсмоль/кг),
на хід залежності гіпертонічного кріогемолізу від часу інкубування висококалієвих еритроцитів (людини і коня) і високонатрієвих
клітин (собаки і бика). Показано фактично у всіх середовищах зниження рівня гіпертонічного кріогемолізу еритроцитів
людини, собаки і коня в умовах тривалої інкубації при 37°С на відміну від еритроцитів бика, для яких характерна часова
зворотня залежність. Встановлено що чутливість еритроцитів людини до гіпертонічного кріогемолізу знижується у ряду
Na+>K++Na+>K+>Li+, собаки - у зворотному порядку. Залежності гемолізу від часу інкубації еритроцитів як коня, так і бика
у середовищах із різним катіонним складом фактично не мають відмінностей. Отримані результати обговорюються з точки
зору особливостей іонтранспортних систем еритроцитів різних видів ссавців.
Ключові слова: еритроцити людини, коня, собаки, бика, гіпертонічний кріогемоліз, середовища, що містять Na+, К+ , Li+ та
(Na+ + К+).
The effect of media, containing either Li+, Na+, K+ monovalent cations or combination (Na++K+) (2,400 mOsm/kg osmolarity) on
a time dependence proceeding of hypertonic cryohemolysis in high-potassium erythrocytes (human and equine) and high-sodium
(canine and bovine) ones has been studied. A decrease in hypertonic cryohemolysis level of human, canine and equine erythrocytes
under long-term incubation at 37°C in contrast to bovine ones with typical reversible time dependence has been demonstrated almost
in all media. Sensitivity of human erythrocytes to hypertonic cryohemolysis has been established to reduce in the series of Na+
>K++Na+ >K+ >Li+ and in a reversible order for canine ones. Time dependencies of both equine and bovine erythrocyte hemolysis in
media with different cation composition are practically similar. The results obtained are discussed from the point of view of peculiari-
ties of erythrocyte ion transport systems of different mammalian species.
Key-words: human, equine, canine, bovine erythrocytes, hypertonic cryohemolysis, Na+-, K+-, Li+- and (Na++K+)-containing
media.
* Автор, которому необходимо направлять корреспонденцию:
ул. Переяславская, 23, г. Харьков, Украина 61015; тел.:+38
(057) 373-41-35, факс: +38 (057) 373-30-84, электронная почта:
cryo@online.kharkov.ua
* To whom correspondence should be addressed: 23, Pereyaslavskaya
str., Kharkov, Ukraine 61015; tel.:+380 57 373 4135, fax: +380 57
373 3084, e-mail:cryo@online.kharkov.ua
Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the Na-
tional Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine
Институт проблем криобиологии и криомедицины
НАН Украины, г. Харьков
Изучению чувствительности эритроцитов к
изменению температурных и осмотических
факторов окружающей среды уделяется большое
внимание [1, 2]. Перенос эритроцитов человека и
животных в гипертонические среды приводит к
температурно-зависимому повреждению клеточ-
ной мембраны, вследствие которого гемоглобин
может выходить из клетки [2, 4, 15]. Известно, что
гипертонический криогемолиз эритроцитов –
повреждение клеток, возникающее в результате их
A great attention is paid to studying the human
erythrocyte sensitivity to change in temperature and
osmotic environmental factors [1, 2]. Human and
animal erythrocyte transfer into hypertonic media
results in a temperature-dependent cell membrane
damage, due to which the hemoglobin release out of
cell may occur [2, 4, 15]. Erythrocyte hypertonic
cryohemolysis is known as a cell damage, resulting
from erythrocyte exposure into hypertonic solution at
20-45°C and following cooling down to the temperature
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 17, 2007, №3
244
экспозиции в гипертоническом растворе при 20-
45°С и последующего охлаждения до температуры
ниже 13°С [8, 15]. Установлены особенности разви-
тия временной зависимости гипертонического
криогемолиза эритроцитов человека в различных
средах [3]. В результате продолжительной инку-
бации эритроцитов человека при 37°С в среде,
содержащей 1,2 М NaCl, наблюдается снижение
гемолиза клеток при их последующем охлаждении
до 0°С. В неэлектролитных средах (0,86 М раствор
сахарозы) гипертонический криогемолиз повы-
шается по мере увеличения продолжительности
инкубации клеток при 37°С, что объясняется пере-
распределением ионов Na+, K+ между внутренней
и внешней средой клеток в электролитной среде и
его отсутствием в неэлектролитной [13, 16].
При инкубации эритроцитов человека в среде,
содержащей 1,2 М NaCl, происходит медленное
освобождение К+ [3], вследствие которого
уменьшается объем клеток [7]. Считают, что
последнее приводит к изменению барьерной
функции мембраны, увеличению ее проницаемости
для ионов Na+. Поглощение ионов Na+ клеткой
тормозит уменьшение объема, что влечет сниже-
ние чувствительности эритроцитов к последую-
щему охлаждению. Транспорт ионов Сl– является
одним из важных механизмов изменения объема
эритроцитов [13]. Это обусловлено связью транс-
порта ионов Сl– с транспортом ионов К+, что, в
свою очередь, влияет на выход воды из клетки и
уменьшение ее объема. Активация выхода Сl– и
отсутствие входа Na+ определяют характерную
временную зависимость гипертонического криоге-
молиза в сахарозной среде.
Эритроциты млекопитающих по внутри-
клеточному составу подразделяют на 2 типа:
первый (классический) – эритроциты с высокой
концентрацией ионов К+ и низкой ионов Na+, второй –
эритроциты некоторых видов млекопитающих с
высоким уровнем Na+ и низким К+[10]. В связи с
этим было исследовано влияние внеклеточной
среды с разным катионным составом на эритроциты
обоих типов. Известно, что в цитоплазме эритроцитов
человека и лошади преобладает катион K+, а собаки
и быка – катион Na+ [5, 10].
Цель данной работы – провести сравнительное
изучение временной зависимости гипертонического
криогемолиза эритроцитов разных видов млеко-
питающих (человека, лошади, собаки, быка) в средах
с осмолярностью 2400 мОсмоль/кг и разным
катионным составом (Na+, К+, Li+ и (Na+ + К+)).
Материалы и методы
Эритроциты человека, быка, собаки и лошади
получали из крови (n=6), заготовленной на
консерванте “Глюгицир”. Все среды готовили на
0,01 М фосфатном буфере, pH 7,4.
lower than 13°C [8, 15]. There were established the
peculiarities of time dependency development of human
erythrocyte hypertonic cryohemolysis in different
media [3]. As a result of human erythrocyte long-term
incubation at 37°C in the 1.2 M NaCl-containing
medium there was observed a decrease in cells
hemolysis within their further cooling down to 0°C. In
non-electrolyte media (0.86 M sucrose) a hypertonic
cryohemolysis enhances with an increase in cell
incubation time at 37°C, that is explained by Na+, K+
ion redistribution between internal and external cell
media in electrolyte medium and its absence in non-
electrolyte one [13, 16].
Under human erythrocyte incubation in 1.2 M NaCl-
containing medium even under slight membrane
damages [3] a slow K+ release occurs, resulting in cell
volume reduction [7]. The latter is considered as
resulting in a change of membrane barrier function, its
permeability increase for Na+ ions. The absorption of
Na+ ions by cell inhibits the volume reduction, that leads
to a decrease in erythrocyte sensitivity to following
cooling. Cl– ion transport is one of the important
mechanisms of erythrocyte volume change [13]. This
is stipulated by the bond of Cl– ion transport with K+
one, that in its turn affects water release out of cell
and decrease in its volume. Activation of Cl- release
and no Na+ incoming determine a typical time
dependence of hypertonic cryohemolysis in sucrose
medium.
Mammalian erythrocytes by their intracellular
composition are divided into 2 types: the first (classic)
comprises erythrocytes with K+ ion high concentration
and a low one for Na+ ions, the second one consists of
erythrocytes of certain mammalian species with high
Na+ level and low K+ one [10]. Due to this we have
investigated the effect of extracellular medium with
different cation composition on both type erythrocytes.
K+ cation is known to predominate in human and equine
erythrocytes but Na+ cation does in canine and bovine
ones [5, 10].
This research was targeted to comparatively study
a time dependence of erythrocyte hypertonic
cryohemolysis of different mammalian species (human,
horse, dog, bull) in media with 2400 mOsm/kg
osmolarity with different cation composition (Na+, K+,
Li+- and (Na++K+)).
Materials and methods
Human, bovine, canine and equine erythrocytes
were procured from blood (n=6) and prepared with
“Glugicir” preservative. All media were prepared with
0.01 M phosphate buffer, pH 7.4.
Hypertonic solutions with 2,400 mOsm/kg
osmolarity such as: 1.2 M NaCl; 1.2 M KCl; 1.2 M
LiCl; 1.1875 M NaCl+0.0125 M KCl were used in the
research. Na+, K+ and Li+ cations were selected by
their presence in erythrocyte cytoplasm. Combined
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 17, 2007, №3
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 17, 2007, №3
245
В работе использовали гипертонические растворы
с осмолярностью 2400 мОсмоль/кг: 1,2 М NaCl; 1,2 M
KCl; 1,2 M LiCl; 1,1875 М NaCl +0125 М KCl. Выбор
катионов Na+; K+ и Li+ обусловлен их наличием в
цитоплазме эритроцитов. Смешанную среду
(1,1875 М NaCl + 0,0125 М KCl) использовали с
целью получения во внеклеточной среде концент-
рации ионов K+, подобной концентрации этого
катиона в плазме крови, но при этом учитывали,
что объем клетки в гипертонической среде
уменьшится примерно на 40 % [12]. Внеклеточная
среда, содержащая смесь катионов Na+ и K+,
должна соответствовать вышеуказанной осмоляр-
ности. Это достигается введением соответству-
ющего количества ионов Na+.
Осмолярность растворов контролировали с
помощью осмометра ОМКА 1Ц-01 (Украина).
Для гипертонического криогемолиза эритро-
цитов клетки переносили на 1-120 мин в раствор с
соответствующим катионным составом при тем-
пературе 37°С, после чего аликвоту помещали на
10 мин в аналогичный раствор, охлажденный до
0°С (конечный гематокрит – 0,4%). Уровень гемо-
глобина в супернатанте определяли спектро-
фотометрически (λ=543 нм) и рассчитывали в про-
центах по отношению к 100%-му гемолизу эритро-
цитов в присутствии детергента тритона Х-100
(0,1 %).
В работе для каждого графика из серии пов-
торов одного эксперимента представлено макси-
мальное отклонение величины гемолиза эритро-
цитов в виде точки с разбросом значений, имею-
щих соответствующую маркировку.
В работе использовали реактивы отечествен-
ного производства квалификации “х.ч” и “ч.д.а”.
Экспери-ментальные данные приведены как
среднее арифметическое ± стандартная ошибка
среднего и представлены на графиках как точки с
максимальным разбросом, имеющие соответст-
вующую маркировку.
Результаты и обсуждение
Эритроциты млекопитающих после инкуби-
рования при 37°С в гипертонических средах с
разным катионным составом переносили на 10 мин
в соответствующие среды с температурой 0°С. Для
описания полученных временных зависимостей
гипертонического криогемолиза эритроцитов
использовали два параметра: уровень гиперто-
нического криогемолиза эритроцитов и характер
его изменения в результате продолжительной
инкубации клеток при 37°С (рис. 1, а). Эритроциты
человека, проинкубированные в гипертонических
средах с разным катионным составом, характери-
зуются достаточно высоким исходным уровнем
повреждения клеток 90-100% (после минутной
medium (1.1875 M NaCl+0.0125 M KCl) was used
with the aim to obtain in an extracellular medium the
K+ ion concentration similar to that in blood plasm, but
thereby taking into account the fact that cell volume in
hypertonic medium would nearly reduce by 40% [12].
An extracellular medium, containing Na+ and K+ cation
combination should correspond to the mentioned above
osmolarity. This is achieved by introducing the
corresponding amount of Na+ ions.
The solution osmolarity was controlled with ОMKA
1C-01 osmometer (Ukraine).
For erythrocyte hypertonic cryohemolysis the cells
were transferred for 1-120 min into the solution with
corresponding cation composition at 37°C, afterwards
an aliquot was placed for 10 min into similar solution
cooled down to 0°C (final hematocrit was 0.4%).
Hemoglobin level in supernatant was spectro-
photometrically determined (λ=543 nm) and calculated
in percentage in respect to 100% erythrocyte
hemolysis at the presence of X-100 triton (0.1%).
In the work for each plot from the repeat series of
one experiment the maximum deviation of erythrocyte
hemolysis value is shown as a point with value spread
with corresponding labeling.
Nationally produced reagents with “chemically
pure” and “pure for analysis” grades have been used
in the research. Experimental data are presented as
arithmetic mean ± standard error of mean and
presented in plots as points with maximum spread with
corresonding symbols.
Results and discussion
Mammalian erythrocytes after incubation at 37°C
under hypertonic media with different cation
composition were transferred for 10 min into the
corresponding media with 0°C temperature. To describe
the obtained time dependencies of erythrocyte
hypertonic cryohemolysis we used two parameters:
the level of erythrocyte hypertonic cryohemolysis and
the character of its change resulting from a long-term
cell incubation at 37°C (Fig. 1, a). Human erythrocytes,
incubated in hypertonic media with different cation
composition are characterized with quite a high initial
level of cell damages of 90-100% (after 1 min
incubation at 37°C and following cooling down to 0°C),
that decreases with augmentation of cell incubation
duration at 37°C (Fig. 1, a).
Human erythrocytes manifest different sensitivity
to cooling in studied electrolyte media. The data
reported in the paper [14], testifying to an equal level
of cell damage under cooling in hypertonic media with
different cation composition are not contrary to our
results. According to the experimental conditions of
the research [14] after a short-term erythrocyte
incubation (5 min) no differences were found-out, but
after more prolonged cell exposure into hypertonic
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 17, 2007, №3
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 17, 2007, №3
246
Время, мин
Time, min
Время, мин
Time, min
Рис.1. Зависимость уровня гипертонического криогемолиза эритроцитов человека (а) и лошади (б) от времени
инкубации при 37°С в средах: – 1,2 М NaCl; – 1,2 М KCl; – 1,1875 М NaCl + 0,0125 М KCl; ✕✕✕✕✕ –1,2 M LiCl.
Fig. 1. Dependency of hypertonic cryohemolysis level in human (a) and equine (b) erythrocytes on incubation time at 37°C
in the media: – 1.2 М NaCl; – 1.2 М KCl; – 1.1875 М NaCl + 0.0125 М KCl; ✕✕✕✕✕ –1.2 M LiCl.
Ге
м
ол
из
,
%
H
em
ol
ys
is
,
%
Ге
м
ол
из
,
%
H
em
ol
ys
is
,
%
инкубации при 37°С и последующего охлаждении
до 0°С), который снижается по мере увеличения
продолжительности инкубации клеток при 37°С
(рис 1, а).
Эритроциты человека проявляют различную
чувствительность к охлаждению в изучаемых
электролитных средах. Данные работы [14],
свидетельствующие об одинаковом уровне
повреждения клеток при охлаждении в гипертони-
ческих средах с разным катионным составом, не
противоречат нашим результатам. По эксперимен-
тальным условиям работы [14] после непродолжи-
тельного инкубирования эритроцитов (5 мин)
различия не выявлены, а после более длительного
выдерживания клеток в гипертонической среде при
37°С установлены различия уровня гиперто-
нического криогемолиза эритроцитов, помещенных
в среды с различным катионным составом.
Максимальное повреждение клеток человека
наблюдается в Na+-содержащей среде, менее
выраженное – в Na+ + К+- и К+-содержащих
средах и минимальное – в растворе LiCl. Если в
отношении первых трех сред можно говорить о
примерно одинаковой скорости снижения уровня
гипертонического криогемолиза на протяжении
инкубации до 120 мин, то в последней среде в течение
40 мин наблюдаются стремительное снижение
уровня гемолиза (с 100 до 25%) и выход кривой на
плато.
Снижение во времени уровня гипертонического
гемолиза эритроцитов лошади, которые как и
эритроциты человека относятся к высококалиевым
medium at 37°C the differences in hypertonic
cryohemolysis level of erythrocytes, placed into the
media with various cation composition, were estab-
lished. The maximum damage in human cells is obser-
ved in a Na+-containing medium, a less manifested one
in Na+ + K+- and K+-containing media and the minimum
one in LiCl solution. If in respect of the first three
media we can suggest about an approximately equal
decrease rate of hypertonic cryohemolysis level within
incubation down to 120 min, in the latter medium during
40 min an impetuous decrease in hemolysis level (from
100 down to 25%) and curve approaching to the plateau
were observed.
Decrease in time of hypertonic cryohemolysis level
of equine erythrocytes, which are referred together
with human ones to high-potassium cells, is slightly
manifested (Fig. 1. b) In addition, in the media with
different cation compositions there were established
the insignificant differences (to 10%) in the level of
erythrocyte hypertonic cryohemolysis withinin the
whole time range (1-120 min).
When transferring human erythrocytes, referred to
a high-potassium type into a hypertonic Na+-containing
medium, the two processes in time are observed. From
one side, the intracellular K+ ions release out of
erythrocytes via transmembrane defects by a con-
centration gradient [3], from another one the
extracellular Na+ ions, which concentration significantly
exceeds their intracellular one, enter into erythrocytes,
in spite of potassium pump and other transport system
functioning [10]. Due to the fact that gradient by Na+
is much higher than that by K+, an intracellular Na+
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
0 15 30 45 60 75 90 105 120
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
0 15 30 45 60 75 90 105 120
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 17, 2007, №3
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 17, 2007, №3
247
клеткам, слабо выражено (рис. 1, б). Кроме того, в
средах с разным катионным составом выявлены
несущественные различия (до 10%) в уровне
гипертонического криогемолиза эритроцитов во
всем временном диапазоне (1-120 мин).
При переносе эритроцитов человека, относя-
щихся к высококалиевому типу, в гипертоническую
Na+-содержащую среду в клетках происходят два
процесса. С одной стороны, внутриклеточные ионы
К+ выходят из эритроцитов через трансмембранные
дефекты по концентрационному градиенту [3], а с
другой – внеклеточные ионы Na+, концентрация
которых значительно превосходит их внутри-
клеточную концентрацию, входят в эритроциты,
несмотря на работу натриевого насоса и других
транспортных систем [10]. В силу того, что
градиент по Na+ гораздо выше, чем градиент по
К+, со временем будет существенно повышаться
внутриклеточная концентрация Na+, вследствие
чего выравнивается осмотический градиент на
мембране.
В том случае, когда эритроциты находятся в
1,2 М KCl, катионы Na+ будут выходить из клетки,
а катионы К+ входить. Поскольку исходный
градиент на мембране для К+ будет несколько
ниже, чем градиент по Na+ в среде, содержащей
1,2 М NaCl, то условное равновесие на мембране
будет достигаться быстрее, что проявится в более
существенном снижении уровня гипертонического
криогемолиза эритроцитов со временем (рис.1, а).
Промежуточное положение занимает повреждаемость
клеток в среде, содержащей смесь ионов Na+ и K+.
Быстрое снижение во времени криогемолиза
эритроцитов человека в Li+-содержащей среде,
вероятно, связано со способностью Li+, который
является небольшим катионом, быстро распре-
деляться между внешней и внутренней средой
клетки. Возможно, внеклеточный Li+ как меньший
по размеру ион [11] быстрее входит в клетку,
замещая ионы Na+ и K+, вышедшие из клетки по
градиенту. Движение ионов Li+ через эритро-
цитарную мембрану осуществляется различными
транспортными системами (Na+/K+- насос; Na+/Li+-
противотранспорт; бикарбонат зависимый путь и
пассивный транспорт), однако пассивная диффузия
обеспечивает основную часть транспорта этого
катиона (до 70%) [9].
Слабо выраженные различия гипертонического
криогемолиза эритроцитов лошади в средах,
содержащих различные катионы, остаются не
исследованными. Эритроциты лошади и человека
имеют подобный градиент Na+ и K+ на мембране,
однако анализ особенностей катионного транспорта
в эритроцитах лошади и человека [6] свидетельствует
о существенном различии Na+- и K+-транспортных
concentration will significantly increase in time,
resulting in osmotic gradient leveling on membrane.
In case when erythrocytes are in 1.2 M KCl, the
Na+ cations will release out of cells and K+ cations
will enter. Since an initial gradient on membrane for K
will slightly lower than gradient by Na in 1.2 M NaCl-
containing medium, a conditional balance on membrane
will be achieved rapidly, that will manifest in a greater
decrease in the level of erythrocyte hypertonic cryohe-
molysis with time (Fig. 1, a). An intermediate place is
taken by cell damage rate in the medium containing
Na+ and K+ ion mixture.
A rapid decrease in time of human erythrocyte
cryohemolysis in a Li+-containing medium is probably
related to the ability of Li+, that is not big cation, to a
rapid distribution between external and internal cell
media. Possibly, an extracellular Li+ as lesser by size
ion [11] enters a cell more rapidly, by substituting Na+
and K+ ions, released out of cell by gradient. Li+ ion
movement through an erythrocyte membrane is realised
by various transport systems (Na+/K+-pump; Na+/Li+-
exchange transport; bicarbonate-dependent way and
passive transport), but a passive diffusion provides the
main part of this cation transport (up to 70%) [9].
Slightly manifested differences of hypertonic
cryohemolysis of equine erythrocytes in the media,
containing different cations, have still remained
unstudied. Equine and human erythrocytes have similar
Na+ and K+ gradient on membrane, but the analysis of
cation transport peculiarities in equine and human
erythrocytes [6] testifies to a significant difference of
Na+ and K+-transport systems in these cells. In equine
erythrocytes compared to human ones a unidirectional
flow of K+ ions through Na+-pump is realised in 3-4
times slower, but Na+/Li+-transport exchange is
contrarily done in 6 times more rapidly. In addition, for
equine erythrocytes Na+/K+-exchange transport is not
typical. The Table shows equine and human erythro-
cytes as differed either by intracellular level of K+ and
Na+ ions or by their total concentration and K+/Na+
ratio [4]. Species peculiarities of equine erythrocytes
apparently stipulate their difference in time development
of hypertonic cryohemolysis compared to human
erythrocytes.
Manifested differences in time development of
human and equine erythrocyte cryohemolysis in Li+-
containing media (Fig. 1, a, b) are apparently stipulated
by the capability of the previous for more intensive (in
twice) accumulation of Li+ cations [10]. Of note is
that a lower Li+ accumulation is observed in equine
cells, to which a higher Na+/Li+-exchange transport
activity (in 6 times) is characteristic. Due to the
mentioned fact there was assumed about participation
of Li+-transport systems, differed from Na+/Li+-co-
transport in transfer [6].
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 17, 2007, №3
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 17, 2007, №3
248
ыдиВ
хищюатипокелм
seicepsnailammaM
овтсечилоК
воротвоп
forebmuN
staeper
K+ Мм,
)m±M(
aN + Мм,
)m±M(
K+ aN+ +,
Мм K
+ aN/ + H2O )m±M(
акабоС
goD 3 32,1±8,01 5,4±4,081 2,191 60,0 30,0±89,1
ьдашоЛ
esroH 6 7,4±8,931 5,2±7,13 5,171 04,4 50,0±38,1
кеволеЧ
namuH 41 9,3±5,241 8,2±4,32 4,561 80,6 50,0±90,2
кыБ
lluB 5 8,2±6,14 3,5±2,211 8,351 63,0 70,0±68,1
Содержание одновалентных ионов и воды в эритроцитах млекопитающих [4]
Content of monovalent ions and water in mammalian erythrocytes [4]
систем в этих клетках. В эрит-
роцитах лошади, по сравнению
с эритроцитами человека, од-
нонаправленный поток ионов
К+ через Na+-насос осущест-
вляется в 3-4 раза медленнее,
а Na+/Li+-противотранспорт,
напротив, – быстрее примерно
в 6 раз. Кроме того, для эритро-
цитов лошади Na+/K+- котранс-
порт не характерен. Из данных
таблицы следует, что эритро-
циты лошади и человека разли-
чаются как по внутриклеточ-
ному уровню ионов К+ и Na+, так и по их суммарной
концентрации и соотношению K+/Na+ [4]. По-
видимому, видовые особенности эритроцитов
лошади обусловливают их отличие во временном
развитии гипертонического криогемолиза по срав-
нению с эритроцитами человека.
Выраженные различия во временном развитии
гипертонического криогемолиза эритроцитов
человека и лошади в Li+-содержащих средах
(рис. 1, а, б), по-видимому, обусловлены способ-
ностью первых более интенсивно (в 2 раза)
накапливать катионы Li+ [10]. Отметим, что
меньшее накопление Li+ наблюдается в клетках
лошади, для которых характерна более высокая
Na+/Li+- противотранспортная активность (в 6 раз).
На основании указанного факта сделано предпо-
ложение об участии в переносе Li+- транспортных
систем, отличных от Na+/Li+- котранспорта [6].
Для эритроцитов собаки (рис.2, а) характерно
времязависимое снижение уровня гиперто-
нического гемолиза в Na+-, K+- и (Na++K+) - средах
в отличие от Li+-содержащей среды. По уровню
гипертонического повреждения этих клеток среды
можно расположить следующим образом: Li+>K+ >
K++Na+ >Na+, т.е. в порядке, противоположном для
эритроцитов человека (Na+ >K++Na+>K+>Li+).
Для гипертонического криогемолиза клеток
быка (рис. 2, б) в отличие от результатов,
полученных для эритроцитов человека, лошади и
собаки, характерны низкое исходное повреждение
(10-30%) и обратная временная зависимость
гипертонического криогемолиза эритроцитов во
всех используемых средах, т.е. повышение
гипертонического криогемолиза по мере увели-
чения продолжительности инкубирования клеток
при 37°С.
Для эритроцитов быка в исследованных средах
развитие гипертонического криогемолиза во
времени (рис. 2, б) можно охарактеризовать
следующим образом: низкая повреждаемость в
смешанной Na++K+- среде, более высокая – в Li+-
и наивысшая – в Na+- и K+-средах. В Na+- и K+-
For canine erythrocytes (Fig. 2, a) a time-dependent
decrease in hypertonic hemolysis level in Na+-, K+-
and (Na++K+)-media in contrast to Li+-containing
medium is typical. By the level of hypertonic damage
of these cells the media may be placed as follows:
Li+>K+>K++Na+>Na+, i.e. in an opposite order for
human erythrocytes (Na+>K++Na+>K+>Li+).
For bovine cell hypertonic cryohemolysis (Fig. 2, b)
in contrast to the results, obtained for human, equine
and canine erythrocytes the typical features are low
initial damage (10-30%) and a reversible time
dependency of erythrocyte hypertonic cryohemolysis
in all used media, i.e. an increase in hypertonic
cryohemolysis with augmentation of cell incubation
duration at 37°C.
For bovine erythrocytes in the studied media the
development of hypertonic cryohemolysis in time (Fig.
2, b) may be characterised as follows: low damage
rate in a combined Na++ K+-medium, higher one in
Li+- and the highest in Na+- and K+-media. In Na+-
and K+-media the differences between curves of
bovine erythrocyte hypertonic cryohemolysis are
insignificant, but the highest cell damage rate is
observed in K+-medium.
Canine and bovine cells in contrast to human and
equine erythrocytes are referred to low-potassium type,
i.e. their cells contain Na+ as dominating cation. The
results obtained for canine erythrocytes by a decrease
in the level of hypertonic cryohemolysis at a long-term
incubation in the media with different cations (Fig. 2, a)
also correlate with the described above hypothesis of
Na+ and K+ redistribution in hypertonic media with time.
In the medium, containing Na+ cation dominating in
cells, the rate of hemolysis level reduction is higher
and cell damage rate is the lowest. This is apparently
related to a low content of K+ ions in a cell, therefore
their leakage and substitution for Na+ ions occur quite
rapidly. In the K+ ions-containing medium a decrease
with time is the lowest, the cell behaviour in a combined
(Na++K+)-medium is intermediate. The fact of a
complete absence of a decrease of hypertonic cryo-
hemolysis level in LiCl-containing medium remains
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 17, 2007, №3
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 17, 2007, №3
249
средах различия между кривыми гипертонического
криогемолиза эритроцитов быка незначительны,
однако наибольшая повреждаемость клеток
наблюдается в К+-среде.
Эритроциты собаки и быка, в отличие от клеток
человека и лошади, относятся к низкокалиевому
типу, т.е. их клетки в качестве доминирующего
катиона содержат Na+. Результаты, полученные
для эритроцитов собаки, по снижению уровня
гипертонического криогемолиза при длительной
инкубации в средах с разными катионами (рис.2, а)
также согласуются с вышеописанной гипотезой
перераспределения Na+ и K+ в гипертонических
средах со временем. В среде, содержащей доми-
нирующий в клетках катион Na+, скорость снижения
уровня гемолиза больше, а повреждаемость клеток
самая низкая. По-видимому, это связано с низким
содержанием ионов К+ в клетке, поэтому их утечка
и замещение на ионы Na+ происходят довольно
быстро. В среде, содержащей ионы К+, снижение
уровня гемолиза со временем наименьшее, промежу-
точным является поведение клеток в смешанной
(Na++K+)-среде. Факт полного отсутствия снижения
уровня гипер-тонического криогемолиза в среде,
содержащей LiCl, остается не ясным. Однако можно
предположить, что он обусловлен особенностями
транспорта Li+ в мембране эритроцитов собаки.
Из полученных результатов следует, что пове-
дение эритроцитов млекопитающих в средах с
разным катионным составом определяется не
только качественно-количественным катионным
составом цитоплазмы, но и особенностями транс-
порта ионов через эритроцитарную мембрану.
unclear. However it may be assumed as stipulated by
the peculiarities of Li+ transport in canine erythrocyte
membrane.
As proceeded from the results obtained, the beha-
viour of mammalian erythrocytes in media with diffe-
rent cation compositions is determined not only by
quality-quantity cation cytoplasm composition, but the
peculiarities of ion transport through erythrocyte
membrane as well.
Conclusions
Decrease in hypertonic cryohemolysis level of
human, canine and equine erythrocytes under conditions
of a long-term incubation at 37°C is observed in Na+-,
K+- and (Na++K+)-containing media (2,400 mOsm/kg
osmolarity). In LiCl-containing medium the same time
dependency of hypertonic cryohemolysis is typical only
for human and equine erythrocytes. The sensitivity of
human erythrocytes, referred to a high-potassium cells,
to hypertonic cryohemolysis reduces in a following way:
Na+>K++Na+>K+>Li+, and for canine high-potassium
erythrocytes: Li+>K+>K++Na+>Na+.
Ге
м
ол
из
,
%
H
em
ol
ys
is
,
%
Ге
м
ол
из
,
%
H
em
ol
ys
is
,
%
Время, мин
Time, min
Время, мин
Time, min
Рис.2. Зависимость уровня гипертонического криогемолиза эритроцитов собаки (а) и быка (б) от времени инкубации
при 37°С в средах: – 1,2 М NaCl; – 1,2 М KCl; – 1,1875 М NaCl + 0,0125 М KCl; ✕✕✕✕✕ –1,2 M LiCl.
Fig. 2. Dependency of hypertonic cryohemolysis level in canine (a) and bovine (b) erythrocytes on incubation time at 37°C
in the media: – 1.2 М NaCl; – 1.2 М KCl; – 1.1875 М NaCl + 0.0125 М KCl; ✕✕✕✕✕ –1.2 M LiCl
References
Belous A.M., Grischenko V.I. Cryobiology.– Kiev: Nauk.
dumka, 1994.– 432 p.
Gordienko E.A., Kovalenko S.E. Basic rules of the event of
posthypertonic cryohemolysis // Problems of Cryobiology.–
1997.– N3.– P. 3-7
Shpakova N.M., Bondarenko V.A. The sensitivity of erythrocytes
to cold shock in media containing salts and nonelectrolytes //
Problems of Cryobiology.– 1992.– N3.– P.15-20.
1.
2.
3.
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
0 15 30 45 60 75 90 105 120
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
0 15 30 45 60 75 90 105 120
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 17, 2007, №3
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 17, 2007, №3
250
Выводы
Снижение уровня гипертонического криоге-
молиза эритроцитов человека, собаки и лошади в
условиях продолжительной инкубации при 37°С
наблюдается в Na+-, К+- и (Na++ К+)- содержащих
средах (осмолярность 2400 мОсмоль/кг). В среде,
содержащей LiCl, подобная временная зависи-
мость гипертонического криогемолиза характерна
только для эритроцитов человека и лошади.
Чувствительность эритроцитов человека, относя-
щихся к высококалиевым клеткам, к гиперто-
ническому криогемолизу снижается таким
образом: Na+ >K++Na+> K+> Li+, а высоконатриевых
эритроцитов собаки: Li+>K+ > K++Na+ >Na+.
Литература
Белоус А.М., Грищенко В.И. Криобиология.– Киев: Наук.
думка, 1994.– 432 с.
Гордиенко Е.А., Коваленко С.Е. Основные законо-
мерности явления гипертонического криогемолиза//
Пробл. криобиологии. – 1997. – №3.– С. 3-7.
Шпакова Н.М., Бондаренко В.А. Чувствительность
эритроцитов к холодовому шоку в средах, содержащих
соли и неэлектролиты // Пробл. криобиологии.– 1992.–
№3.– С. 15-20.
Шпакова Н.М., Ершов С.С. Гипертонический криогемолиз
эритроцитов млекопитающих// Пробл. криобиологии.–
2006.– Т. 16, №3. – С. 286-291.
Bogner P., Sipos K., Ludany A. et al. A. Steady-state volumes
and metabolism-independent osmotic adaptation in mammalian
erythrocytes // Eur. Biophys. J.– 2002. – Vol. 31, N2.– P.145-152.
Contreras A., Martinez R., Deves R., Marusic E.T. An unusual
pattern of Na+ and K+ movements across the horse erythrocyte
membrane // Biochim. Biophys. Acta.– 1986.–Vol. 856, N2.–
P. 388-391.
Dalmark M. Chloride and water distribution in human red cell //
J.Physiol.– 1975.– Vol. 250, N1.– P. 65-84.
Dubbelman T.V.A.R., Bruijne A.W., Christianse K.,
Steveninck J. Hypertonic cryohemolysis of human red blood
cells // J. Memb. Biol.– 1979.– Vol. 50, N3-4.– P. 225-240.
Ehrlich B.E., Jared M.D. Lithium fluxes in human еrythrocytes //
Am. J. Physiol.– 1979.– Vol. 23, N1.– P. 102-110.
Ellory J.C., Tucker E.M. Cation transport in red blood cells
(1983) In: Agar N.S., Board P.G. (eds) Red blood cells of
domestic mammals. Elsevier, Amsterdam.– P. 291-314.
Kiriukhin M.Y., Collins K.D. Dynamic hydration numbers for
biologically important ions // Biophys. Chem.– 2002.– Vol. 99,
N2.– P. 155-168.
Meryman H.T. Osmotic stress as a mechanism of freezing
injury // Cryobiology.– 1971.– Vol. 8, N5.– P. 489-500.
Meryman H.T., Williams R.J., Douglas M.St.J. Freezing injury
from “solution effects” and its prevention by natural or artificial
cryoprotection // Cryobiology. – 1977. – Vol. 14, N3.– P. 287-302.
Morris G.J. Lipid loss and haemolysis by thermal shock: lack
of correlation // Cryobiology.– 1975.– Vol. 12, N3.– P.192-201.
Takahashi T., Williams R.J. Thermal shock hemolysis in
human red cells. I. The effects of temperature, time, and os-
motic stress // Cryobiology.– 1983. – Vol. 20, N5.– P.507-520.
Woolgar A.E. Hemolysis of human red blood cells by freezing
and thawing in solutions containing sucrose: relationship with
posthypertonic hemolysis and solute movement // Cryobiology. –
1974.– Vol.11, N1.– P. 44-51.
Поступила 20.03.2007
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
Shpakova N.M., Ershov S.S. Hypertonic cryohemolysis in
mammalian erythrocytes // Problems of Cryobiology.– 2006.–
Vol. 16, N3.– P.286-291.
Bogner P., Sipos K., Ludany A. et al. Steady-state volumes and
metabolism-independent osmotic adaptation in mammalian
erythrocytes // Eur. Biophys. J.– 2002. – Vol. 31, N2.– P.145-152.
Contreras A., Martinez R., Deves R., Marusic E.T. An unusual
pattern of Na+ and K+ movements across the horse erythrocyte
membrane // Biochim. Biophys. Acta.– 1986.–Vol. 856, N2.–
P. 388-391.
Dalmark M. Chloride and water distribution in human red cell //
J.Physiol.– 1975.– Vol. 250, N1.– P. 65-84.
Dubbelman T.V.A.R., Bruijne A.W., Christianse K.,
Steveninck J. Hypertonic cryohemolysis of human red blood
cells // J. Memb. Biol.– 1979.– Vol. 50, N3-4.– P. 225-240.
Ehrlich B.E., Jared M.D. Lithium fluxes in human еrythrocytes //
Am. J. Physiol.– 1979.– Vol. 23, N1.– P. 102-110.
Ellory J.C., Tucker E.M. Cation transport in red blood cells
(1983) In: Agar N.S., Board P.G. (eds) Red blood cells of
domestic mammals. Elsevier, Amsterdam.– P. 291-314.
Kiriukhin M.Y., Collins K.D. Dynamic hydration numbers for
biologically important ions // Biophys. Chem.– 2002.– Vol. 99,
N2.– P. 155-168.
Meryman H.T. Osmotic stress as a mechanism of freezing
injury // Cryobiology.– 1971.– Vol. 8, N5.– P. 489-500.
Meryman H.T., Williams R.J., Douglas M.St.J. Freezing injury
from “solution effects” and its prevention by natural or artificial
cryoprotection // Cryobiology. – 1977. – Vol. 14, N3.– P. 287-302.
Morris G.J. Lipid loss and haemolysis by thermal shock: lack
of correlation // Cryobiology.– 1975.– Vol. 12, N3.– P.192-201.
Takahashi T., Williams R.J. Thermal shock hemolysis in
human red cells. I. The effects of temperature, time, and os-
motic stress // Cryobiology.– 1983. – Vol. 20, N5.– P.507-520.
Woolgar A.E. Hemolysis of human red blood cells by freezing
and thawing in solutions containing sucrose: relationship with
posthypertonic hemolysis and solute movement // Cryobiology. –
1974.– Vol.11, N1.– P. 44-51.
Accepted in 20.03.2007
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 17, 2007, №3
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 17, 2007, №3
|