Вплив кріоконсервованих експлантів плаценти на жіночу репродуктивну систему в нормі та за патології (Експериментальне дослідження)
Збереження та відновлення репродуктивного здоров'я – найважливіші задачі сучасної медицини. Перспек- тивним у лікуванні жіночої патології є застосування похідних плаценти людини (мезенхімальні стромальні клітини, плодові оболонки, екстракти та експланти), які мають великий проліферативний пот...
Gespeichert in:
| Veröffentlicht in: | Проблемы криобиологии и криомедицины |
|---|---|
| Datum: | 2017 |
| Hauptverfasser: | , , , , , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Ukrainisch |
| Veröffentlicht: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2017
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/138289 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Вплив кріоконсервованих експлантів плаценти на жіночу репродуктивну систему в нормі та за патології (Експериментальне дослідження) / В.Ю. Прокопюк, О.В. Грищенко, О.В. Прокопюк, Н.О. Шевченко, О.В. Фалько, А.В. Сторчак, А.О. Щедров // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2017. — Т. 27, № 3. — С. 250-265. — Бібліогр.: 23 назв. — укр., англ. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1859461461501280256 |
|---|---|
| author | Прокопюк, В.Ю. Грищенко, О.В. Прокопюк, О.В. Шевченко, Н.О. Фалько, О.В. Сторчак, А.В. Щедров, А.О. |
| author_facet | Прокопюк, В.Ю. Грищенко, О.В. Прокопюк, О.В. Шевченко, Н.О. Фалько, О.В. Сторчак, А.В. Щедров, А.О. |
| citation_txt | Вплив кріоконсервованих експлантів плаценти на жіночу репродуктивну систему в нормі та за патології (Експериментальне дослідження) / В.Ю. Прокопюк, О.В. Грищенко, О.В. Прокопюк, Н.О. Шевченко, О.В. Фалько, А.В. Сторчак, А.О. Щедров // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2017. — Т. 27, № 3. — С. 250-265. — Бібліогр.: 23 назв. — укр., англ. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Проблемы криобиологии и криомедицины |
| description | Збереження та відновлення репродуктивного здоров'я – найважливіші задачі сучасної медицини. Перспек-
тивним у лікуванні жіночої патології є застосування похідних плаценти людини (мезенхімальні стромальні клітини, плодові
оболонки, екстракти та експланти), які мають великий проліферативний потенціал та тропність до жіночої репродуктивної
системи. У роботі визначали вплив кріоконсервованих експлантів плаценти на жіночу репродуктивну систему щурів та
мишей в нормі (фертильність та естральний цикл) та за патології (інфекційний процес, ендокринопатія, аутоімунний стан,
травма та ішемія). Виявлено, що кріоконсервовані експланти плаценти мають трофічний ефект на матку та яєчники,
тимчасово затримують овуляцію, полегшують перебіг аутоімунної та ендокринної патології, ішемії. При цьому під дією експлан-
тів плаценти погіршується перебіг інфекційного процесу та посилюється спайкоутворення.
Сохранение и восстановление репродуктивного здоровья – важнейшие задачи современной медици-
ны. Перспективным в лечении патологии женской репродуктивной системы является применение производных пла-
центы человека (мезенхимальные стромальные клетки, плодные оболочки, экстракты и экспланты), которые имеют
большой пролиферативный потенциал и тропность к женской репродуктивной системе. В работе определяли влияние
криоконсервированных эксплантов плаценты на женскую репродуктивную систему крыс и мышей в норме (фертиль-
ность и эстральный цикл) и при патологии (инфекционный процесс, эндокринопатия, аутоиммунное состояние, травма
и ишемия). Выявлено, что криоконсервированные экспланты плаценты имеют трофический эффект в отношении
матки и яичников, временно задерживают овуляцию, положительно влияют на течение аутоиммунной и эндокринной
патологии, ишемии. При этом, под действием эксплантов плаценты ухудшается течение инфекционного процесса и
повышается образование спаек.
One of the most important tasks in current medicine is the preservation and restoration of fertility. The application of
human placental derivatives (mesenchymal stromal cells, fetal membranes, extracts and explants), having a high proliferative
potential and the affinity to female reproductive system, is a promising direction for treating female reproductive pathology. Here
we determined the effect of cryopreserved placental explants on female reproductive system of rats and mice under normal
conditions (fertility and estrous cycle) and in pathology (infectious process, endocrinopathy, autoimmune pathology, trauma/ischemia). The
cryopreserved placental explants were revealed to have a trophic effect on uterus and ovaries, they temporarily delayed ovulation
and positively affected autoimmune, endocrine pathology and ischemia course. In addition, placental explants aggravated the infection
course and increased the peritoneal adhesion formation.
|
| first_indexed | 2025-11-24T02:34:43Z |
| format | Article |
| fulltext |
УДК 615.361:618,46]:57.086.13:[612.6.08+618.1-092.4
В.Ю. Прокопюк1*, О.В. Грищенко3, О.В. Прокопюк4,
Н.О. Шевченко1, О.В. Фалько2, А.В. Сторчак3, А.О. Щедров5
Вплив кріоконсервованих експлантів плаценти
на жіночу репродуктивну систему в нормі та за патології
(Експериментальне дослідження)
UDC 615.361:618,46]:57.086.13:[612.6.08+618.1-092.4
V.Yu. Prokopyuk1*, O.V. Grischenko3, O.V. Prokopyuk4,
N.O. Shevchenko1, O.V. Falko2, A.V. Storchak3, A.O. Schedrov5
Effect of Cryopreserved Placental Explants on Female
Reproductive System Under Normal and Pathological Conditions
(Experimental study)
Реферат: Збереження та відновлення репродуктивного здоров'я – найважливіші задачі сучасної медицини. Перспек-
тивним у лікуванні жіночої патології є застосування похідних плаценти людини (мезенхімальні стромальні клітини, плодові
оболонки, екстракти та експланти), які мають великий проліферативний потенціал та тропність до жіночої репродуктивної
системи. У роботі визначали вплив кріоконсервованих експлантів плаценти на жіночу репродуктивну систему щурів та
мишей в нормі (фертильність та естральний цикл) та за патології (інфекційний процес, ендокринопатія, аутоімунний стан,
травма та ішемія). Виявлено, що кріоконсервовані експланти плаценти мають трофічний ефект на матку та яєчники,
тимчасово затримують овуляцію, полегшують перебіг аутоімунної та ендокринної патології, ішемії. При цьому під дією експлан-
тів плаценти погіршується перебіг інфекційного процесу та посилюється спайкоутворення.
Ключові слова: плацента, кріоконсервування, миші, щури, вагітність, безпліддя, антифосфоліпідний синдром, синдром
полікістозних яєчників, інфекція, перекрут яєчників.
Реферат: Сохранение и восстановление репродуктивного здоровья – важнейшие задачи современной медици-
ны. Перспективным в лечении патологии женской репродуктивной системы является применение производных пла-
центы человека (мезенхимальные стромальные клетки, плодные оболочки, экстракты и экспланты), которые имеют
большой пролиферативный потенциал и тропность к женской репродуктивной системе. В работе определяли влияние
криоконсервированных эксплантов плаценты на женскую репродуктивную систему крыс и мышей в норме (фертиль-
ность и эстральный цикл) и при патологии (инфекционный процесс, эндокринопатия, аутоиммунное состояние, травма
и ишемия). Выявлено, что криоконсервированные экспланты плаценты имеют трофический эффект в отношении
матки и яичников, временно задерживают овуляцию, положительно влияют на течение аутоиммунной и эндокринной
патологии, ишемии. При этом, под действием эксплантов плаценты ухудшается течение инфекционного процесса и
повышается образование спаек.
Ключевые слова: плацента, криоконсервирование, мыши, крысы, беременность, бесплодие, антифосфолипидный
синдром, синдром поликистозных яичников, инфекция, перекрут яичников.
Abstract: One of the most important tasks in current medicine is the preservation and restoration of fertility. The application of
human placental derivatives (mesenchymal stromal cells, fetal membranes, extracts and explants), having a high proliferative
potential and the affinity to female reproductive system, is a promising direction for treating female reproductive pathology. Here
we determined the effect of cryopreserved placental explants on female reproductive system of rats and mice under normal
conditions (fertility and estrous cycle) and in pathology (infectious process, endocrinopathy, autoimmune pathology, trauma/ischemia). The
cryopreserved placental explants were revealed to have a trophic effect on uterus and ovaries, they temporarily delayed ovulation
and positively affected autoimmune, endocrine pathology and ischemia course. In addition, placental explants aggravated the infec-
tion course and increased the peritoneal adhesion formation.
Key words: placenta, cryopreservation, mice, rats, pregnancy, infertility, antiphospholipid syndrome, polycystic ovary syndrome,
infection, ovarian torsion.
*Автор, якому необхідно надсилати кореспонденцію:
вул. Переяславська, 23, м. Харків, Україна 61016;
тел.: (+38 057) 373-74-35, факс: (+38 057) 373-59-52,
електронна пошта: v.yu.prokopiuk@gmail.com
*To whom correspondence should be addressed:
23, Pereyaslavska str., Kharkiv, Ukraine 61016;
tel.: +380 57 373 7435, fax: +380 57 373 5952,
e-mail: v.yu.prokopiuk@gmail.com
1Department of Cryobiology of Reproduction System,Institute for
Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the National Acad-
emy of Sciences of Ukraine, Kharkiv, Ukraine
2Low Temperature Bank of Biological Objects, Institute for Prob-
lems of Cryobiology and Cryomedicine of the National Academy
of Sciences of Ukraine, Kharkiv, Ukraine
3V.N. Karazin Kharkiv National University, Ukraine
4Kharkiv Medical Academy of Postgraduate Education, Ukraine
5Kharkiv National Medical University, Ukraine
1Відділ кріобіології систем репродукції, Інститут проблем кріо-
біології і кріомедицини НАН України, м. Харків
2Сектор «Низькотемпературний банк біологічних об’єктів», Інсти-
тут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, м. Харків
3Харківський національний університет імені В.Н. Каразіна
4Харківська медична академія післядипломної освіти
5Харківський національний медичний університет
Надійшла 20.03.2017
Прийнята до друку 26.07.2017
Received March, 20, 2017
Accepted July, 26, 2017
оригінальне дослідження research article
Probl Cryobiol Cryomed 2017; 27(3): 250–265
https://doi.org/10.15407/cryo27.03.250
This is an Open Access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution License (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0),
which permits unrestricted reuse, distribution, and reproduction in any medium, provided the original work is properly cited.
© 2017 V.Yu. Prokopyuk et al., Published by the Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine
проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 27, №/issue 3, 2017
251
Збереження та відновлення жіночого репродук-
тивного здоров’я – пріоритетний напрямок роботи
Всесвітньої організації охорони здоров’я у XXI сто-
річчі. За даними ВООЗ в останні роки в Україні
спостерігається тенденція до покращення показ-
ників репродуктивного здоров’я жінки порівняно з
іншими країнами, які мають схожий рівень доходу,
однак відмічається деяке відставання від країн За-
хідної Європи [22]. Подолання проблем безпліддя
та патологій вагітності, які зазвичай є результатом
порушень жіночої статевої системи, дозволить покра-
щити демографічні показники та здоров’я новона-
роджених [3, 23]. Найбільш поширеними причи-
нами безпліддя та патологій вагітності є інфекційні
процеси, викликана ними спайкова хвороба, ауто-
імунні, ендокринні та судинні розлади [11, 23]. Наразі
у сучасній медицині розвиваються технології, по-
в’язані з застосуванням стовбурових клітин та
факторів росту, одним із найбільш перспективних
джерел яких є плацента [3, 15, 18]. По-перше, це
пояснюється тим, що клітини плаценти мають
активний проліферативний потенціал та здатність
регулювати як розвиток плода, так і материнсько-
плодову взаємодію. По-друге, плацента змінює
гомеостаз матері, а це впливає на перебіг багатьох
захворювань [20]. Клінічне застосування об’єктів
плацентарного походження можливе тільки за наяв-
ності стандартизованого та біобезпечного мате-
ріалу, що забезпечується технологіями кріокон-
сервування та низькотемпературного банкування
[3, 4, 7]. Існує багато експериментальних та клі-
нічних повідомлень щодо застосування мезенхі-
мальних стовбурових клітин (МСК), екстрактів,
тканини плаценти при патологіях жіночої репро-
дуктивної системи [3, 5, 6, 9, 10, 13]. Однак ці біологічні
об’єкти не є стандартизованими та систематизова-
ними відповідно до методик, а також тварин, похідних
плаценти, які застосовуються в експериментах.
Продемонстровано, що МСК, виділені з плацентар-
ного матеріалу, відрізняються за властивостями від
МСК із інших джерел [12]. Із кріоконсервованих
біооб’єктів саме експланти плаценти (органотипова
культура) мають виражені властивості усіх дери-
ватів плаценти та є найбільш близькими до неї за
структурою та функціями [7].
Визначення впливу плаценти та її похідних на
організм експериментальних тварин у нормі та за
патології дозволить, з одного боку, спрямувати дос-
лідження щодо доцільності застосування похід-
них плаценти за конкретних патологічних станів
із визначенням показань, протипоказнь та ефек-
тивності, з іншого, – глибше дослідити вплив пла-
центарних факторів на органи та системи жінки.
Це може бути важливо не тільки для використання
у клітинній терапії, а й для вивчення особливостей
патологічних процесів під час вагітності.
One of the priorities of the World Health Organi-
zation’s activity in the 21st century is to preserve female
fertility. According to the WHO data the tendency to
improve the female reproductive health indices has
been recently observed in Ukraine as compared to other
countries with similar income level, but there is some
lag behind the Western European countries [22]. Over-
coming the infertility and pregnancy pathologies, usually
resulting from disorders of female reproductive system,
will improve demographic indices and newborn health
[8, 23]. The most common causes of infertility and preg-
nancy pathologies are infectious processes and resul-
ting adhesive disease, autoimmune, endocrine and vas-
cular disorders [4, 23]. The therapies involving stem
cells and growth factors, where placenta is one of the
most promising sources, are now in progress in current
medicine [8, 10, 16]. First, this is due to an active proli-
ferative potential of placental cells and capability to
regulate both fetal development and maternal-fetal
interaction. Secondly, the placenta changes maternal
homeostasis, thereby affecting the course of many di-
seases. Clinical application of placenta-derived objects
is possible only if standardized and biosafe material is
available, which could be provided by technologies of
cryopreservation and low-temperature banking [8, 12,
5]. There is a huge number of experimental and clinical
reports on using mesenchymal stem cells (MSCs),
extracts, placental tissue in female reproductive patholo-
gies [2, 3, 7, 8, 11, 19]. However, these biological objects
are not standardized and classified according to the
techniques, experimental animals, as well as placental
products used in the experiments. The MSCs of placen-
tal origin differ by their properties from the cells procured
from other sources [6]. Among the cryopreserved bio-
objects, namely placental explants (organotype culture)
have pronounced properties of all the placental deriva-
tives, and the most similar structure and functions [15].
Determining the impact of placenta and its deriva-
tives on experimental animals’ body under normal
conditions and in pathology will allow, on the one hand,
to study the expediency to apply placental derivatives
in specific pathological conditions with determining
the indications, contraindications and efficiency and to
better understand the impact of placental factors on
female organs and systems, on the other hand. This may
be important not only for cell therapy, but also for un-
derstanding the peculiarities of pathological processes
during pregnancy.
The research was aimed to elucidate the effect of
cryopreserved placental explants on female reproduc-
tive system under normal conditions and in different
pathologies in laboratory animals.
Materials and methods
Experiment design. For a versatile estimation of
the impact of cryopreserved placental explants (CPEs)
252 проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 27, №/issue 3, 2017
Метою роботи було визначення впливу кріокон-
сервованих експлантів плаценти на жіночу репро-
дуктивну систему у нормі та за різних патологічних
станів на лабораторних тваринах.
Матеріали та методи
Дизайн експерименту. Для всебічної оцінки
впливу кріоконсервовних експлантів плаценти
(КЕП) на жіночу репродуктивну систему спочатку
з’ясовували їхній вплив на характер естрального
циклу та репродуктивні показники інтактних
тварин. Далі визначали дію КЕП на основні пато-
логічні стани, які призводять до порушення репро-
дуктивної функції (інфекційний процес, аутоімунний
процес, ендокринна патологія, травма та ішемія).
У якості інфекційного процесу була обрана модель
перитоніту з пункцією та легуванням, яка є від-
творюваною. Це дозволяє моделювати гострий ін-
фекційний процес із наступним спайкоутворенням.
При цьому дана модель забезпечує низькі показ-
ники летальності [16]. Антифосфоліпідний синдром
(АФС) був обраний як типова та розповсюджена
аутоімунна патологія, характерна для вагітності.
Основною ланкою у розвитку цієї патології є ви-
роблення аутоантитіл до фосфоліпідів, що приз-
водить до коагулопатії, порушення плацентації та
збільшення показників материнської, а також
перинатальної захворюваності й летальності [6, 21].
Синдром полікістозних яєчників (СПКЯ) обрано як
модель ендокринної патології, яка супроводжуєть-
ся порушеннями функцій гіпоталамуса, гіпофіза,
наднирників, яєчників; безпліддям; підвищеною
секрецією андрогенів та естрогенів [14, 17]. Пере-
крут яєчників обрано як патологію, в основі якої
лежить артеріальна ішемія та венозний застій із
крововиливами у паренхіму яєчників, формуван-
ням тромбів, загибеллю фолікулів, унаслідок чого
розвивається безпліддя, яєчникова недостатність,
посткастраційний синдром [19].
Отримання КЕП проводили за раніше розроб-
леним методом [4]. Плаценту людини, доставлену
протягом 3-х годин після операції кесаревого роз-
тину, промивали фосфатно-сольовим буфером і
фрагментували. У якості кріозахисного середовища
використовували 10%-й розчин диметилсульфок-
сиду («Sigma», США) на основі середовища DMEM
із високим вмістом глюкози і L-глутаміном («Bio-
West», Франція), збагаченого 10% фетальної бича-
чої сироватки («Lonza», Німеччина). Зразки замо-
рожували у кріопробірках «Nunc» (США) з викорис-
танням ізопропанолових контейнерів «Mr. Frosty™
Freezing Container» («Thermo Fisher Scientific», США)
зі швидкістю 1 град/хв до –70°С із наступним за-
нуренням у рідкий азот. Розморожували на водяній
бані («ВБ-4», Україна) за температури 37°С з нас-
тупним відмиванням від кріопротектора живиль-
on female reproductive system, we elucidated first
how they affected the character of estrous cycle, and
reproductive indices in the intact animals. Then we
determined the CPEs effect on the main pathologi-
cal states, stipulating the reproductive function disor-
der (infection, autoimmune process, endocrine patho-
logy, trauma and ischemia). The model of peritonitis
with puncture and legation was chosen to simulate
infection process. This model is replicable, thereby
enabling to observe an acute process with subsequent
formation of adhesions, herewith the animals are cha-
racterized with quite a low mortality [13]. An antipho-
spholipid syndrome (APS) was selected as a typical and
widespread autoimmune pathology, being typical for
pregnancy. The major link of this pathology is the pro-
duction of autoantibodies to phospholipids, resulting in
coagulopathy, placentation disorder, increased maternal
and perinatal morbidity and mortality [19, 20]. The
polycystic ovary syndrome (POS) was taken as a mo-
del of endocrine pathology, accompanied by disorde-
red functions of hypothalamus, pituitary, adrenal glands,
ovaries; infertility; increased secretion of androgens
and estrogens [9, 14]. The ovarian torsion model was
used as the pathology, characterized with arterial ische-
mia and venous stasis with hemorrhages in ovarian
parenchyma, thrombus formation, loss of follicles, re-
sulting in development of infertility, ovarian failure,
postcastration syndrome [18].
The CPEs were procured according to the previously
designed technique [12]. Human placenta, delivered
within 3 hrs after Caesarean section was washed with
phosphate-buffered saline and disintegrated. As a cryo-
protective medium we used 10% dimethyl sulfoxide
(Sigma, USA), in high glucose DMEM medium with
L-glutamine (BioWest, France) enriched with 10% fe-
tal bovine serum (Lonza, Germany). The samples were
frozen in Nunc cryovials (USA) using Mr. Frosty™
isopropanol freezing containers (Thermo Fisher Scien-
tific, USA) with 1 deg/min rate down to –70°C, fol-
lowed by immersion into liquid nitrogen. Then they
were warmed in a water bath (WB-4, Ukraine) at 37°C
with following cryoprotectant wash-out with nutrient
medium. Prior to administration the CPEs were frag-
mented down to single villi and weighed on Axis AD
50 scales (Axis, Poland) with 0.5 mg precision.
In this research we used 6-month-old female
BALB/c mice and outbred F1 ones (first generation
BALB/c and CBA) weighing (20.0 ± 1.5) g and
6-month-old female Wistar rats weighing (250.0 ±
± 20.0) g. During experiment the animals were housed
at the animal facility with natural light/dark cycle and
a standard diet. Animals were kept in accordance with
the animal facility rules and regulations. The CPEs
doses for animals were calculated according to the
guidelines for drug study [17]. The calculated dose
(10 and 70 mg for mice and rats, respectively) was
ним середовищем. Перед введенням КЕП фраг-
ментували до окремих ворсин та зважували на вагах
«Axis AD 50» («Axis», Польща) з дискретністю 0,5 мг.
Експерименти проводили на 6-місячних сами-
цях мишей лінії BALB/c та нелінійних F1 (перше
покоління BALB/c та СВА) масою (20,0 ± 1,5) г та
на 6-місячних самицях щурів лінії Вістар масою
(250,0 ± 20,0) г. Протягом експерименту тварини
знаходилися за умов природного освітлення та
стандартного харчування. Тварин утримували від-
повідно до правил оснащення та функціонування
віварію. Дози КЕП для тварин розраховували згідно
з рекомендаціями щодо дослідження лікарських
препаратів [1]. Розраховану дозу (для мишей – 10 мг,
для щурів – 70 мг) вводили у фосфатно-сольовому
буфері через товсту голку підшкірно.
Дослідження впливу КЕП на оваріальний цикл
та загальний стан проводили на двох групах ми-
шей BALB/c по 10 у кожній: 1 – із введенням КЕП;
2 – контрольна. У мишей досліджували вагінальні
мазки, виявляли фазу циклу, визначали масу, за
5-бальною шкалою оцінювали загальний стан (блиск
очей, колір і стан шерсті, активність). Проводили
гістологічне дослідження матки та яєчників.
Дослідження впливу КЕП на фертильність
виконували на двох групах мишей BALB/c по 10 у
кожній: 1 – із введенням КЕП; 2 – контрольна. Після
введення КЕП самиць спарювали з самцями у
співвідношенні 2:1, реєстрували кількість тварин,
які завагітніли, час до пологів, кількість та масу
новонароджених.
Дослідження впливу КЕП на перебіг інфек-
ційного процесу. Запалення черевної порожнини
моделювали на нелінійних лабораторних мишах
шляхом перев’язки та пункції нижньої третини сліпої
кишки за загальноприйнятим методом [16]. Вико-
ристання у роботі аутбредних тварин пов’язане з
високою смертністю при моделюванні інфекційного
процесу на інбредних тваринах. Мишей розділили
на три групи по 10 у кожній: 1 – введення КЕП через
2 тижні після моделювання; 2 – моделювання ін-
фекційного процесу без введення КЕП; 3 – контроль
(хибнооперовані тварини). Досліджували показники
клінічного аналізу крові, морфологічну структуру яєч-
ників та матки. Для підтвердження впливу перито-
ніту на статеву систему через місяць після виконання
моделі самиць спарювали з самцями у співвідношен-
ні 2:1, реєстрували час від спарювання до пологів, оці-
нювали репродуктивні показники, після завершення
лактації тварин виводили з експерименту, оцінювали
спайковий процес за I–IV ступенями [2].
Дослідження впливу КЕП на перебіг аутоімун-
ного процесу проводили на моделі АФС, як типового
прояву аутоімунної патології, яка впливає на репро-
дукцію. У мишей лінії BALB/c АФС моделювали
шляхом активної імунізації [6, 21] з використанням
subcutaneously administered in phosphate-buffered
saline through a thick needle.
The CPEs effect on ovarian cycle and general
condition was studied in 2 groups of BALB/c mice
of 10 in each: the group 1 comprised the animals with
CPEs administration; the group 2 was the control. In
mice we examined vaginal smears, determined the
phase of cycle, recorded the weight, and assessed ge-
neral health condition (eye shadow, hair colour and
state, activity) by a 5-point scale. The uterus and ova-
ries were histologically examined.
The CPEs effect on fertility was investigated in
BALB/c mice groups of 10 in each: the group 1 consisted
of animals with introduced CPEs, the group 2 was the
control. After CPEs administration the females were
coupled with males in 2:1 ratio, then the number of
animals, that became pregnant, time to delivery, number
and weight of newborn animals were recorded.
Study of CPEs effect on infection process course.
The inflammation of abdominal cavity was simulated
in outbred laboratory mice via ligation and puncture of
the cecum lower third according to the standard tech-
nique [13]. The use of outbred animals was caused by
a high mortality following simulation of infectious
process in inbred animals. The mice were divided into
3 groups of 10 in each: group 1 – CPEs administration
in 2 weeks after simulation; group 2 – the simulation
of infectious process with no CPEs administration,
and group 3 was the control, sham-operated animals.
The complete blood count, morphological structure of
ovaries and uterus were examined. In order to confirm
this model effect on sexual system one month after
surgery the females were coupled with males in 2:1
ratio with following recording the time from coupling
to labour and assessment of reproductive indices.
When lactation was terminated the animals were
sacrificed and the adhesion process was evaluated by
I–IV stages [5].
The CPEs effect on the autoimmune state course
was studied in the model of antiphospholipid synd-
rome (APS), as a typical manifestation of autoimmune
pathology, affecting reproduction. In BALB/c mice
the APS was simulated via active immunisation [19,
21] using cardiolipin antigen (Biolik, Ukraine) diluted
in 0.1% albumin solution, injected four times every 7
days with a total dose of cardiolipin of 30 µg per animal.
The APS model was considered to be formed 4 weeks
after the last administration of the drug and confirmed
by the reaction of microprecipitation, performed with
the commercial kit ‘Cardiolipin antigen for micro-
precipitation reaction’ (Biolik) according to the ma-
nufacturer’s instructions. Animals were divided into
3 groups of 20 mice in each: group 1 comprised untrea-
ted animals with APS, group 2 consisted of animals
with APS and administrated CPEs one week after the
model formation, group 3 was the control. The comp-
проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 27, №/issue 3, 2017
253
254 проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 27, №/issue 3, 2017
кардіоліпінового антигена («Біолек», Україна), роз-
веденого у 0,1%-му розчині альбуміну, який вводили
чотириразово через кожні 7 діб із загальною дозою
кардіоліпіну 30 мкг на тварину. Модель АФС вва-
жали сформованою через 4 тижні після останнього
введення препарату та підтверджували реакцією
мікропреципітації, яку проводили з використан-
ням комерційного набору «Антиген кардіоліпіно-
вий для реакції мікропреципітації» («Біолек»,
Україна) згідно з інструкцією виробника. Тварин
розділили на три групи по 20 у кожній: 1 – із АФС
без лікування; 2 – із АФС та введенням КЕП через
тиждень після формування моделі; 3 – контроль. До-
сліджували клінічний аналіз крові, реакцію бласт-
трансформації лімфоцитів (спонтанну та індуко-
вану) через 1 та 3 тижні після лікування. Через мі-
сяць після лікування з кожної групи виводили по
10 самиць для гістологічного дослідження матки
та яєчників, решту спарювали з самцями у співвід-
ношенні 2:1. Час настання вагітності реєстрували
методом вагінальних мазків. На 18-ту добу вагіт-
ності тварин виводили з експерименту, визначали
кількість живих та мертвих плодів, масу плодів та
плаценти. Проводили гістологічне дослідження
плаценти.
Дослідження впливу КЕП на перебіг ендо-
кринної патології яєчників проводили на моделі
СПКЯ. Цю модель обрали як розповсюджену
ендокринопатію з порушенням центральної регу-
ляції та гіперфункції яєчників, за якої спосте-
рігається відносна або абсолютна гіперестроге-
нія. Патологію моделювали на щурах лінії Вістар
підшкірним введенням раз на добу 4 мг міфе-
пристону («Stada», Росія), розведеному у 0,2 мл
персикової олії, протягом 8 діб [17]. Тварин розді-
лили на три групи по 12 у кожній: 1 – тварини з
СПКЯ, які отримували КЕП через 2 тижні після
формування моделі; 2 – тварини з СПКЯ без ліку-
вання; 3 – інтактні тварини. Оваріальний цикл тва-
рин досліджували методом вагінальних мазків. Че-
рез місяць після лікування з експерименту виводили
по 6 тварин із кожної групи, визначали масові кое-
фіцієнти, досліджували гістологічні препарати яєч-
ників та матки. Інших самиць спарювали з самцями
у співвідношенні 2:1, після пологів визначали кіль-
кість плодів, їхню масу і час від початку спарювання
до пологів.
Вплив КЕП на реабілітацію після травми та
ішемії вивчали на моделі перекруту яєчників. Пато-
логію моделювали на щурах лінії Вістар за методом
O. Taskin та співавт. [19] шляхом накладання ліга-
тури кетгутом №6 («Ігар», Україна) на 1 см нижче
правого яєчника на матку з мезосальпінгсом на
4 години з наступною релапаротомією та зняттям
лігатури. Тварин розділили на три групи по 12 у
кожній: 1 – щури після моделювання перекруту
lete blood count, blast-transformation reaction of lym-
phocytes (spontaneous and induced) were examined
1 and 3 weeks post therapy. One month after therapy
10 animals from each group were sacrificed for histo-
logical examination of uterus and ovaries, the others
were coupled with males in 2:1 ratio. The time of preg-
nancy onset was recorded using the vaginal smear
method. To day 18 of pregnancy the animals were
sacrificed, the number of live and dead fetuses, fetal
and placental weight were estimated. Placenta was
histologically examined.
The CPEs effect on ovarian endocrine pathology
course was investigated in the POS model. This model
was selected as an example of common endocrino-
pathy with disordered central regulation and ovarian
hyperfunction, when either relative or absolute hypere-
strogenism could be observed. The pathology was simu-
lated in Wistar rats via subcutaneous administration of
4 mg Mifepristonum (Stada, Russia) diluted in 0.2 ml
of peach oil once a day for 8 days [14]. Animals were
divided into 3 groups of 12 in each: the group 1 com-
prised the animals with POS, received CPEs in 2 weeks
after the model formation; the untreated animals with
POS were in the group 2, the group 3 was intact ani-
mals. Animals’ ovarian cycle was examined by vaginal
smears. Six animals in each group were sacrificed
one month after therapy. The mass coefficients, histo-
logical sections of ovaries and uterus were assessed.
Remained females were coupled with males in 2:1 ratio,
after labour the number of fetuses, their weight and
time from the beginning of coupling to labour were
determined.
The CPEs effect on rehabilitation after trauma
and ischemia was studied in a model of ovarian torsion.
The pathology was simulated in Wistar rats according
to the method of O. Taskin et al. [18], via imposing
catgut ligatures №6 (Igar, Ukraine) 1 cm below the
right ovary onto the uterus with mesosalpinx for 4 hrs
with following relaparotomy and ligature removal.
The animals were divided in 3 groups (n = 12): the
group 1 – the rats after simulating ovarian torsion with
CPEs administration within post-surgery period; the
group 2 – the animals after simulating ovarian torsion
without therapy; the group 3 – sham-operated ones.
Two animals in each group were sacrificed during
second surgery for morphological studies of uterus
and ovaries to confirm the pathological process for-
mation. Other animals were coupled with males in
2:1 ratio one month after surgery. The pregnancy time
onset was assessed by vaginal smears. To day 18 of
pregnancy the animals were sacrificed, the number of
live and dead fetuses, fetal and placental weight were
assessed. The ovaries were histologically examined.
The placenta was derived with the informed con-
sent of women after a Cesarean section. The perfor-
mance of experiments was approved by the Committee
проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 27, №/issue 3, 2017
255
яєчників із введенням КЕП у післяопераційному
періоді; 2 – тварини після моделювання перекруту
яєчників без лікування; 3 – хибнооперовані тва-
рини. Під час релапаротомії для морфологічного
дослідження матки та яєчників із експерименту ви-
водили по дві тварині з метою підтвердження фор-
мування патологічного процесу. Інших самиць через
місяць після операції спарювали з самцями у спів-
відношенні 2:1, час настання вагітності реєстрували
методом вагінальних мазків. На 18-ту добу вагіт-
ності тварин виводили з експерименту, визначали
кількість живих та мертвих плодів, масу плодів і
плаценти. Проводили гістологічне дослідження
яєчників.
Плаценту отримували з інформованої згоди жі-
нок після операції кесарів розтин. Проведення екс-
периментів було погоджено з комітетом біоетики
Інституту проблем кріобіології і кріомедицини
НАН України (протокол №2 від 03.06.2013) відпо-
відно до «Загальних принципів експериментів на
тваринах», схвалених VI конгресом із біоетики
(Київ, 2016) і узгоджених із положенням «Євро-
пейської конвенції про захист хребетних тварин, які
використовуються для експериментальних та
інших наукових цілей» (Страсбург, 1986).
Для отримання статистично значущих даних
застосовували U-критерій Манна-Уїтні та критерій
Стьюдента. Для статистичних розрахунків і обробки
даних використовували програмне забезпечення
«Past V. 3.15» (Університет м. Осло, Норвегія).
Результати та обговорення
Під час дослідження впливу КЕП на оваріальний
цикл та загальний стан тварин було виявлено, що
протягом 2-х тижнів до лікування регулярний чоти-
риденний цикл у групі 1 був у 7-ми, у групі 2 – у 8-ми
тварин. Маса мишей дорівнювала (20,6 ± 1,2) та
(20,2 ± 0,9) г, середній бал загального стану – (4,8 ±
± 0,2) та (4,7 ± 0,3) відповідно. Після лікування та
спостереження протягом 2-х місяців регулярний
естральний цикл спостерігали в усіх тварин з КЕП
та у 7-ми тварин без КЕП. Середній бал загаль-
ного стану складав (4,7 ± 0,7) та (4,8 ± 0,3), маса –
(23,3 ± 1,1) та (22,5 ± 0,9) г відповідно, що є
фізіологічною нормою у цьому віці. Гістологічне
дослідження яєчників у обох групах показало збе-
реження фолікулярного апарата, строми та кро-
вообігу. У тварин із введенням КЕП спостері-
гали незначне збільшення розмірів яєчників та
зменшення кількості зріючих фолікулів (рис. 1).
Під час дослідження матки у тварин із введенням
КЕП спостерігали різку гіпертрофію як матки в
цілому, так і ендометрію зокрема, збільшення кіль-
кості залоз. Ці зміни, на наш погляд, можуть бути
обумовлені дією хоріонічного гонадотропіну лю-
дини [8].
in Bioethics of the Institute for Problems of Cryobio-
logy and Cryomedicine of the National Academy of
Sciences of Ukraine (protocol №2 dated of June 03,
2013) according to the General Principles of Experi-
ments in Animals, approved by the 6th National Congress
in Bioethics (Kyiv, 2016) and the statements of the
European Convention for the Protection of Vertebrate
Animals Used for Experimental and Other Scientific
Purposes (Strasbourg, 1986).
We used the Mann-Whitney U-test and Student’s
t-test to obtain the statistically significant conclusions.
The results were statistical processed using Past V.
3.15 software (Norway).
Results and discussion
Studying the CPEs effect on ovarian cycle and
general health condition of animals revealed a regular
four-day cycle during 2 weeks prior to therapy in 7
and 8 animals of the group 1 and 2, respectively. The
mice weight was (20.6 ± 1.2) and (20.2 ± 0.9) g, the
mean score of general health condition was (4.8 ±
± 0.2) and (4.7 ± 0.3), respectively. After therapy
and observation within 2 months, regular estral cycle
was observed in all the animals with CPEs and in
7 without CPEs. The mean score of general health
condition made (4.7 ± 0.7) and (4.8 ± 0.3), the weight
was (23.3 ± 1.1) and (22.5 ± 0.9) g, respectively, and
it corresponded to a physiological norm at this age.
Histological examination of ovaries in both groups
showed the preservation of follicular apparatus, stroma
and blood circulation, a certain increase was observed
in ovarian size in group with CPEs and a decrease was
found in a number of maturing ovarian follicles (Fig. 1).
Examination of the uterus of animals with CPEs showed
a sharp hypertrophy in the whole uterus, and endo-
metrium, in particular, an increased number of glands.
We believe that these changes may be stipulated by
the effect of human chorionic gonadotropin [1].
This could indicate that CPEs have a positive trophic
effect on reproductive organs. The application of
placental derivatives is possible in pathological states
with atrophic phenomena, previously shown in the
model of ovarian failure after chemotherapy [2].
Study of reproductive indices of animals after CPEs
application showed that the pregnancy occurred likely
later despite the estral cycle normalization in animals
after CPEs application (Table 1). This may be due to
the inhibited ovulation caused by human chorionic
gonadotrophin. Previously we have reported the dyna-
mics of its release from CPEs [15]. There was obser-
ved an increased number and weight of fetuses in the
main group, but these data had no significant differen-
ces vs the control.
After infectious process simulating (Fig. 2A) the
number of pregnant animals was significantly lower in
the group with CPEs application than in the control
256 проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 27, №/issue 3, 2017
У зв’язку з цим можна зробити припущення, що
КЕП чинять позитивний трофічний вплив на ор-
гани репродуктивної системи. Застосування похід-
них плаценти можливе при патологічних станах із
атрофічними явищами, що раніше було показано
на моделі яєчникової недостатності після хіміо-
терапії [9].
При дослідженні репродуктивних показників
тварин після застосування КЕП продемонстровано,
що, незважаючи на нормалізацію естрального циклу
у тварин після застосування КЕП,. вагітність настає
вірогідно пізніше (табл. 1). Це може бути пов’язане
з інгібуванням овуляції хоріонічним гонадотропіном
людини, динаміка вивільнення якого з КЕП була
нами показана у попередніх дослідженнях [7]. Спо-
стерігалося збільшення кількості та маси плодів у
тварин основної групи, однак ці дані не мали значу-
щих відмінностей від контролю.
Після моделювання інфекційного процесу (рис. 2,
А) відмічено, що у групі з застосуванням КЕП кіль-
кість тварин, які завагітніли, була значуще меншою,
group and in that with untreated inflammation. Preg-
nancy occurred later after therapy as well, a number
of fetuses was significantly reduced (Table 2).
After experiment completing the single adhesions
of I–II degrees were revealed in sham-operated ani-
mals (group 3) during autopsy, in group 2 mice (in-
flammation without therapy) the adhesions were ob-
served virtually in all the cases, in the group 1 animals
(inflammation and CPEs administration) the severi-
ty of adhesive process was in progress (Fig. 2B),
and the conglomerate included the ovaries and uterus
(Table 3). The inter-loop abscesses were noted in
3 animals. Histological examination of organs in animals
with abscesses demonstrated the presence of septic
phenomena. In particular, in uterus we have observed
a sharp atrophy, cell approach, shrinkage of connec-
tive tissue, hyperchromic nuclei, vasoconstriction, leu-
kocyte infiltration (Fig. 2C), there were atrophic phe-
nomena, leukocyte infiltration, a decreased number
of developing follicles in ovaries (Fig. 2D). Renal
glomeruli and tubules were significantly swollen with
Рис. 1. Структура яєчників та матки інтактної групи та групи після застосування КЕП: A – яєчник інтактної миші;
B – яєчник після введення КЕП; C – матка інтактної миші; D – матка після введення КЕП. Забарвлювання
гематоксиліном та еозином. Масштабна лінійка 100 мкм.
Fig. 1. Structure of ovaries and uterus of intact group and group with applied CPEs: A is ovary of intact mouse; B is ovary
after CPEs; C is uterus of intact mouse; D is uterus after CPEs introduction. H&E stain. Scale bar 100 µm.
A
D
B
C
проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 27, №/issue 3, 2017
257
атрофію, зближення клітин, зморщення сполуч-
ної тканини, гіперхромні ядра, звуження судин,
лейкоцитарну інфільтрацію (рис. 2, С), у яєчниках –
атрофічні явища, лейкоцитарну інфільтрацію,
зменшення кількості фолікулів, які розвиваються
(рис. 2, D). Клубочки та канальця нирок були знач-
но набряклими, з крововиливами у тканину (рис. 2,
E), у селезінці відзначалося значне збільшення пло-
щі білої пульпи (рис. 2, F). Ці зміни характерні для
септичного процесу, який моделюється методом пе-
рев’язки та пункції, та підтверджують вплив даної
моделі на репродуктивні органи.
bleeding into the tissue (Fig. 2E), a significantly in-
creased area of white pulp was noted in spleen (Fig. 2F).
These typical changes of septic process, being simu-
lated via ligation and puncture, confirm the effect of
this model on reproductive organs.
The rearrangement of immune response by Th2-
type, being more tolerogenic variant, occurs during
pregnancy [20], as well as possible aggravation of chronic
infectious diseases. A similar immunosuppressive effect
is inherent to placenta-derived stem cells [6]. These
data explain the aggravation and prolongation of infec-
tious process in animals with CPEs. Thus, we believe
Таблиця 1. Вплив КЕП на репродуктивні показники
Table 1. CPEs effect on reproductive indices
Примітка: * – різниця статистично значуща порівняно з інтактними твари-
нами, p < 0,05.
Note: * – difference is statistically significant as compared to the intact animals,
p < 0.05.
ніж у контрольній групі та у тварин
із запаленням без лікування. Вагіт-
ність після лікування також наставала
пізніше, кількість плодів значуще змен-
шувалася (табл. 2).
У хибнооперованих тварин (гру-
па 3) після закінчення експерименту
під час аутопсії виявлено поодинокі
спайки І–ІІ ступенів, у мишей групи 2
(запалення без лікування) спайки
спостерігали практично в усіх випад-
ках, у тварин групи 1 (запалення та
введення КЕП) спайковий процес
прогресував (рис. 2, B) з включен-
ням у конгломерат яєчників та матки
(табл. 3). У трьох тварин відмічали
міжпетлеві абсцеси. Гістологічне до-
слідження органів у тварин із абсце-
сами показало наявність септичних
явищ. Так, у матці спостерігали різку
Таблиця 2. Репродуктивні показники у досліджуваних групах
при моделюванні інфекційного процесу
Table 2. Reproductive indices in the studied groups
under infectious process simulation
Примітка: * – різниця статистично значуща порівняно з хибнооперованими тваринами,
(контроль), p < 0,05; # – різниця статистично значуща порівняно з групою тварин із
запаленням та без введення КЕП, p < 0,05.
Note: * – difference is statistically significant as compared to sham-operated animals,
(control), p < 0.05; # – difference is statistically significant as compared to the group of animals
with inflammation and without CPEs, p < 0.05.
that the presence of untreated
infectious process in the body
may be a contraindication for
placental material application.
Comparing the groups of
animals with APS in group 1 mi-
ce (untreated) revealed an in-
creased blood coagulation ra-
te, thrombocytopenia and in-
creased indices of lymphocyte
blast transformation test both
to week 1 and 3 after simula-
tion (Table 4). The CPEs appli-
cation (group 2) enabled re-
ducing blood coagulation rate
and lymphocyte blast transfor-
mation test to the level of in-
tact animals (group 3), here-
with the thrombocytopenia was
kept, but a number of platelets
was significantly higher than in
group 1 animals. A sharp hy-
pertrophy of uterus in animals
of group 2, and some ovarian
ниравтапурГ
slaminafopuorG
яннавюрапсдівсаЧ
ибод,віголопод
gnilpuocmorfemiT
syad,ruobalot
відолпьтсікьліK
sesutefforebmuN
асамяндереС
г,відолп
latefegarevA
g,thgiew
ПЕKяннедевВ
noitartsinimdasEPC *5,3±2,83 4,1±1,8 2,0±3,1
)ьлортнок(анткатнІ
)lortnoc(tcatnI 2,1±3,52 1,1±2,6 1,0±1,1
ниравтапурГ
slaminafopuorG
,ниравтьтсікьліK
%,илінтігавазікя
,slaminaforebmuN
emacebhcihw
%,tnangerp
дівсаЧ
одяннавюрапс
ибод,віголоп
morfemiT
,ruobalotgnilpuoc
syad
ьтсікьліK
відолп
forebmuN
sesutef
асамяндереС
г,відолп
latefegarevA
g,thgiew
ПЕK+яннелапаЗ
+noitammalfnI
sEPC
*0,04 *4,5±3,26 #, *2,0±0,5 #, 2,0±2,1
яннелапаЗ
noitammalfnI 0,08 2,2±4,52 *3,0±1,6 5,0±3,1
ьлортноK
)інаворепоонбих(
-mahs(lortnoC
)detarepo
0,09 1,2±4,62 4,0±9,7 2,0±1,1
258 проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 27, №/issue 3, 2017
Під час вагітності спостерігається перебудова
імунної відповіді за Th2-типом, тобто за більш то-
лерогенним варіантом [20], можливе загострення
хронічних інфекційних захворюваннь. Подібний
імуносупресивний ефект мають стовбурові кліти-
ни, виделені з плацентарного матеріалу [12]. Ці дані
пояснюють механізм загострення та пролонгування
інфекційного процесу у тварин із введенням КЕП.
Таким чином, наявність несанованого інфекційного
hypertrophy as well was noted in histological exami-
nation of reproductive organs (Fig. 3).
Assessing reproductive parameters in group 1 ani-
mals revealed a significant decrease in weight and
number of fetuses, an increased number of resorbtions
and dead fetuses, herewith the placental mass was not
changed significantly. After applying CPEs (group 2)
in animals with APS we managed to achieve a signi-
ficant increase in a number of live fetuses. Virtually
Рис. 2. Структура органів мишей з інфекційним процесом після лікування КЕП: A – моделювання інфекційного
процесу шляхом перев'язки та пункції; B – спайки між кишківником, черевною стінкою та печінкою; C – матка;
D – яєчник; E – нирка; F – селезінка. A, B – макрофотографії; C–F – забарвлювання гематоксиліном та еозином.
Масштабна лінійка 100 мкм.
Fig. 2. Structure of murine organs with infectious process post therapy with CPEs: A – simulation of infectious process via
ligation and puncture; B – adhesions between intestine, abdominal wall and liver; C – uterus; D – ovary; E – kidney;
F – spleen. A, B are macrophotos; C–F – H&E staining. Scale bar 100 µm.
Таблиця 3. Ступінь спайкового процесу в досліджуваних групах
при моделюванні інфекційного процесу, %
Table 3. Degree of adhesive process in the studied groups
under infectious process simulation, %
no resorption was observed, ne-
vertheless there were the fema-
les with dead fetuses, and fetal
weight remained low (Table 5).
This testifies to the fact, that the
patients with APS during preg-
nancy should receive an anticoa-
gulant therapy, since the precon-
ception preparation occurs to be
insufficient to overcome autoim-
mune response [19]. The results
of examination of dead fetus pla-
centas and resorption sites sho-
wed thromboses, i. e. indicating
a typical death of fetuses of APS
animals due to coagulopathy and
thrombus formation in placental
pool.
A CB
E FD
ниравтапурГ
slaminafopuorG
іконидооп(І
)икйапс
elgnis(I
)snoisehda
ялібикйапс(ІІ
)вікинчєяатиктам
raensnoisehda(II
)seiravodnasuretu
зикйапс(ІІІ
)мокинвікшик
snoisehda(III
)enitsetnihtiw
утаремолгнок(VІ
йінвереч
)інинжороп
etaremolgnoc(VI
lanimodbani
)ytivac
ПЕK+яннелапаЗ
+noitammalfnI
sEPC
0 06 01 03
яннелапаЗ
noitammalfnI 02 05 02 0
інаворепоонбиХ
detarepo-mahS 02 02 0 0
проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 27, №/issue 3, 2017
259
процесу в організмі, на наш погляд, може бути про-
типоказанням до застосування плацентарного ма-
теріалу.
На першому та третьому тижнях після моделю-
вання АФС у мишей групи 1 (без лікування) виявлено
збільшення швидкості згортання крові, тромбоци-
топенію та підвищення показників реакції бласт-
трансформації лімфоцитів (табл. 4). Застосування
КЕП (група 2) дозволило знизити швидкість згор-
тання крові та реакцію бласттрансформації лімфо-
цитів до рівня тварин групи 3. При цьому тромбо-
пенія залишалася, але кількість тромбоцитів була
значно вищою, ніж у тварин групи 1. При гісто-
логічному дослідженні репродуктивних органів у
тварин групи 2 відмічали різку гіпертрофію матки
та незначну гіпертрофію яєчників (рис. 3).
Під час дослідження репродуктивних показ-
ників виявлено, що у тварин групи 1 значно змен-
шені маса та кількість плодів, збільшена кількість
резорбцій і мертвих плодів, маса плаценти вірогідно
не змінювалася. Після застосування КЕП (група 1)
у тварин із АФС вдалося досягти значного підвищен-
ня кількості живих плодів, практично не відміча-
лося резорбцій, але залишалися самиці з мертвими
плодами, маса яких була зниженою (табл. 5). Це
свідчить про те, що пацієнткам, які під час вагіт-
ності мають АФС, необхідно проводити антикоа-
гулянтну терапію, оскільки предгравідарної під-
готовки не вистачає для подолання аутоімунної
відповіді [6]. Під час дослідження плацент загиблих
плодів та місць резорбції виявлено тромбози, що
вказує на типову загибель плодів тварин із АФС
від коагулопатії та тромбоформування у плацен-
тарному басейні.
After simulating POS in the group 1 rats we obser-
ved a sharp increase in ovaries size, the mass coef-
ficient of which almost twice exceeded the normal va-
lues due to the cysts (Table 6). In 50% of animals an
estral type of vaginal smear was found during a month.
During further observation, no animal became preg-
nant. Histological examination of reproductive sys-
tem demonstrated the presence of cystic changes in
ovaries (Fig. 4A), slightly reduced uterus, without thin-
ning of its layers (Fig. 4C), and the uterine coefficient
was almost unchanged. In the animals treated with
CPEs (group 1), the regular changes in estral cycle
were recorded in a month, 40% of animals became
pregnant, but the time to delivery was significantly
longer than in group 3 females (intact rats), and the
number of fetuses was lower. The results of morpho-
logical analysis of reproductive organs showed a
slightly increased uterus (Fig. 4D), but the mass
coefficients did not differ from the control group, the-
re were observed single cysts in ovaries (Fig. 4B),
the mass coefficients of which approached the norm
(Table 6).
Thus, the CPEs application occurred to be efficient
in POS therapy. In this case the pathology is simulated
by blocking progesterone receptors of uterus and
ovaries by Mifepristonim. The CPEs effect may be
caused by a trophic effect on reproductive system,
receptor recovery, as well as the central mechanism
of action.
Hemorrhages in ovaries and uterus, which reached
the sizes of 10–15 mm (Fig. 5A) were observed in ani-
mals during ovarian torsion simulation at the moment
of repeated laparotomy. Histological study demonst-
rated the massive hemorrhages in parenchyma, follicles,
Таблиця 4. Показники згортання крові, кількості тромбоцитів та реакції бласттрансформації
лімфоцитів у експериментальних тварин (M ± m)
Table 4. Indices of blood coagulation, platelet number and lymphocyte blast
transformation test in experimental animals (M ± m)
Примітка: * – різниця статистично значуща порівняно з інтактною групою (хибнооперовані тварини); # – різниця статистично
значуща порівняно з групою АФС без введення КЕП; p < 0,05.
Note: * – difference is statistically significant as compared to the intact animals (sham-operated); # – difference is statistically significant
as compared to the group with APS without introduced CPEs; p < 0.05.
ниравтапурГ
fopuorG
slamina
вх,мецівороМазіворкяннатрогЗ
noitalugaocdoolB
nim,ztiwaroMyb
итицобморТ X 01 3 лм/
steletalP X 01 3 lm/
їіцамрофснарттсалбяіцкаеР
%,аннатнопсвітицофміл
,tsetnoitamrofsnarttsalbetycohpmyL
%,suoenatnops
ьнеджит1
keew1
інжит3
skeew3
ьнеджит1
keew1
інжит3
skeew3
ьнеджит1
keew1
інжит3
skeew3
СФА
SPA *6,0±4,3 *7,0±1,4 *6,91±9,19 *7,31±5,68 *9,0±1,02 *2,1±3,51
ПЕK+СФА
sEPC+SPA *8,0±7,5 *9,0±9,5 #, *3,91±2,581 #, *0,71±2,861 #, *7,0±2,01 *1,1±2,7
анткатнІ
tcatnI 5,1±8,7 5,0±1,8 9,51±2,142 2,71±3,632 1,1±3,11 7,0±8,9
260 проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 27, №/issue 3, 2017
нального мазка. При подальшому
спостереженні жодна тварина не за-
вагітніла. Гістологічне дослідження
статевої системи показало наявність
кістозних змін у яєчниках (рис. 4, А),
зменшення розмірів матки без стон-
шення її шарів (рис. 4, С), матковий
коефіцієнт майже не змінювався. У
тварин, яким проводили терапію
КЕП (група 1), через місяць реє-
стрували регулярні зміни естраль-
ного циклу, 40% тварин завагітніло,
але час до пологів був значно дов-
ший, ніж у самиць групи 3 (інтактні
щури), а кількість плодів – меншою.
Результати морфологічного аналізу
репродуктивних органів показали де-
що збільшений розмір матки (рис. 4,
D), при цьому масові коефіцієнти
не відрізнялися від контрольної гру-
пи. Спостерігали поодинокі кісти у
яєчниках (рис. 4, В), масові коефі-
цієнти яких наближалися до нор-
ми (табл. 6).
yellow bodies and ovarian gates (Fig. 5B). Hemorrha-
ges in the inner layers: closer to endometrium were
observed in uterus (Fig. 5C). During re-examination
at the end of the experiment, the ovaries (Fig. 5D) and
uterus had no signs of hemorrhages.
Рис. 3. Структура органів мишей із АФС: A – матка тварини з АФС; B – матка тварини з АФС та після лікування КЕП;
C – яєчник тварини з АФС; D – яєчник тварини з АФС та після лікування КЕП; E, F – плацента загиблих плодів із
крововиливами. Забарвлювання гематоксиліном та еозином. Масштабна лінійка 100 мкм.
Fig. 3. Structure of murine organs with APS: A – uterus of APS animals; B – uterus of animals with APS and after CPEs
therapy; C – ovary of APS animals; D – ovary of animals with APS and after CPEs therapy; E, F – placenta of dead fetuses
with hemorrhages. H&E staining. Scale bar 100 µm.
Таблиця 5. Показники репродуктивної функції у експериментальних
тварин із АФС (M ± m)
Table 5. Indices of reproductive function in experimental animals
with APS (M ± m)
Примітка: * – різниця статистично значуща порівняно з інтактними твари-
нами, p < 0,05.
Note: * – difference is statistically significant as compared to the intact animals,
p < 0.05.
Після моделювання СПКЯ у щурів групи 2 спо-
стерігали різке збільшення яєчників, масовий кое-
фіцієнт яких майже удвічі перевищував нормальні
показники за рахунок кіст (табл. 6). У 50% тварин
протягом місяця реєстрували естральний тип вагі-
A CB
E FD
икинзакоП
secidnI
ниравтапурГ
slaminafopuorG
ПЕK+СФА
sEPC+SPA
СФА
SPA
анткатнІ
tcatnI
відолпьтсікьліK
sesutefforebmuN 5,0±8,6 *3,0±2,5 7,0±3,8
%,юєіцброзерзиниравТ
%,noitproserhtiwslaminA 0 *05 0
мадолпимивтремзиниравТ %,и
%,sesutefdaedhtiwslaminA *04 *02 0
г,адолпасамяндереС
g,thgiewlatefegarevA 50,0±*7,0 40,0±*7,0 30,0±60,1
г,итнецалпасамяндереС
g,thgiewlatnecalpegarevA 300,0±91,0 700,0±81,0 20,0±22,0
проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 27, №/issue 3, 2017
261
Autopsy examination of group 2 animals revealed
the reduction in yellow bodies number, lower number
of implantation sites and viable fetuses (Table 7). An
average placental and fetal weight almost did not differ
from the control indices. Adhesions were rare.
In females of group 1 (CPEs therapy) the number
of yellow bodies, live fetuses, implantation sites, as well
Таким чином, застосування КЕП є ефективним
при лікуванні СПКЯ. У даному випадку патологія
моделюється блокуванням прогестеронових рецеп-
торів матки та яєчників міфепристоном. Дія КЕП
може бути обумовлена трофічним впливом на ре-
продуктивну систему, відновленням рецепторів,
а також центральним механізмом впливу.
Примітка: * – різниця статистично значуща порівняно з інтактними тваринами, p < 0,05.
Note: * – difference is statistically significant as compared to the intact animals, p < 0.05.
Таблиця 6. Репродуктивні показники тварин із моделлю СПКЯ
Table 6. Reproductive indices of animals with POS model
Рис. 4. Структура органів щурів із СПКЯ: A – яєчник тварин із СПКЯ без лікування; B – яєчник тварин із СПКЯ та
лікуванням КЕП; C – матка тварин із СПКЯ без лікування; D – матка тварин із СПКЯ та введення КЕП. Забарв-
лювання гематоксиліном та еозином. Масштабна лінійка 100 мкм.
Fig. 4. Organ structure of rats with POS: A – ovary of POS animals without therapy; B – ovary of POS animals with
CPEs therapy; C – uterus of POS animals without therapy; D is uterus of POS animals with introduced CPEs.
H&E stain. Scale bar 100 µm.
B
D
B
C
A
ниравтапурГ
slaminafopuorG
тнєіціфеокйивосаМ
вікинчєя
tneiciffeocssaM
seiravofo
йивосаМ
иктамтнєіціфеок
tneiciffeocssaM
suretufo
лкицйинрялугеР
%,ьцясімзереч
nielcycralugeR
%,htnoma
хинтігавьтсікьліK
%,ниравт
tnangerpforebmuN
%,slamina
абод,віголоподсаЧ
,ruobalerofebemiT
yad
ьтсікьліK
.тш,відолп
forebmuN
seceip,sesutef
ПЕK+ЯKПС
sEPC+SOP 540,0 82,0 09 *04 23 2,3
ЯKПС
SOP *870,0 42,0 05 - - -
иниравтінткатнІ
slaminatcatnI 240,0 32,0 001 09 52 2,7
262 проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 27, №/issue 3, 2017
При моделюванні перекруту яєчників на мо-
мент повторної лапаротомії у тварин спостері-
гали крововиливи у яєчники та матку, які досягали
розмірів 10–15 мм (рис. 5, А). При гістологічному
дослідженні виявляли масивні крововиливи у парен-
хімі, фолікулах, жовтих тілах та воротах яєчника
(рис. 5, B). У матці спостерігали крововиливи у
внутрішніх шарах – ближче до ендометрію (рис. 5,
С). Наприкінці повторного дослідження яєчники
(рис. 5, D) та матка не мали ознак крововиливів.
Під час аутопсії було виявлено, що у тварин гру-
пи 2 на місці перекруту була різко зменшена кіль-
кість жовтих тіл, місць імплантації та живих плодів
(табл. 7). Середня маса плаценти та плода майже не
відрізнялася від контрольних показників. Спайки
виявлялися рідко.
Показано, що у самиць групи 1 (лікування КЕП)
кількість жовтих тіл, живих плодів, місць імплантації,
а також маса плодів та плаценти не відрізнялися
від групи 3 (хибнооперовані тварини). Спостерігали
as fetal and placental weight did not differ from group
3 (sham-operated animals). There was observed an
increased number of adhesions in abdominal cavity as
compared to sham-operated animals and those with
ovarian torsion with no therapy (Table 7).
Thus, the CPEs use in animals with simulated
ischemia in terms of ovarian torsion enables recovering
the function of the organ, as evidenced by an increa-
sed number of yellow bodies and live fetuses, but
contributes to increased adhesion formation.
As a result of studying the CPEs effect on repro-
ductive system of experimental animals, their effect
was revealed to have common features with MSCs
[2, 8, 10, 16], on the one hand, and the similar ones
with placental effect on female organism during
pregnancy, on the other hand [1, 20]. Thus, a positive
trophic effect on uterus and ovaries under normal
conditions and ischemization was revealed, herewith
the folliculogenesis was temporarily suppressed, that
might be explained by human chorionic gonadotropin
Рис. 5. Структура органів щурів із перекрутом яєчників: А – яєчник із перекрутом; B – яєчник із перекрутом
(тотальний крововилив); C – матка із перекрутом яєчників; D – яєчник із перекрутом наприкінці експерименту
(мимовільний регрес). Крововиливи показано стрілками. B–D – забарвлювання гематоксиліном та еозином;
масштабна лінійка 200 мкм.
Fig. 5. Structure of rat organs with ovarian torsion: A – ovary with torsion; B – ovary with torsion (total hemorrhage); C –
uterus of animals with ovarian torsion; D – ovary with torsion at the end of experiment (involuntary regression).
Hemorrhages are indicated by arrows. B–D – H&S staining; scale bar 200 µm.
D
BA
C
проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 27, №/issue 3, 2017
263
що вплив КЕП, з одного боку, має спільні риси з дією
МСК [3, 9, 15, 18], з іншого – з впливом плаценти
на жіночий організм під час вагітності [8, 20]. Так,
виявлено позитивний трофічний ефект на матку
та яєчники у нормі й при ішемії, при цьому фолі-
кулогенез тимчасово пригнічується, що можна по-
яснити дією хоріонічного гонадотропіну та стате-
вих гормонів у комплексі з антиоксидантними та
ростовими факторами [3, 8, 9, 15]. Подібна реакція
спостерігається при застосуванні плацентарного
матеріалу для лікування наслідків хіміотерапії [9].
Показано позитивну дію МСК та вагітності на пере-
біг аутоімунної патології [12, 20]. Відновлення фер-
тильності при СПКЯ у моделі, викликаній блоку-
ванням прогестеронових рецепторів та порушенням
регуляції, може бути пов’язане як із центральними
механізмами, через дію гонадотропінів та естро-
генів, так і з відновленням після прямого впливу на
яєчники та матку. Крім того, для СПКЯ описано роль
оксидативного стресу та хронічного запалення в
патогенезі [14], які можуть невілюватися застосу-
ванням похідних плаценти [3, 5, 18]. Після введення
КЕП відбувалася активація інфекційного процесу,
що можна пояснити загальним імуносупресивним
впливом плаценти, який спостерігається під час
вагітності [20]. Інтенсивність спайкоутворення в
моделях інфекційного процесу та перекруту, при
якому відбувається асептичне запалення, можна
пояснити активацією не тільки інфекційного про-
цесу, а й проліферативної фази запалення, що має
негативні наслідки [2].
Результати проведеного дослідження з ураху-
ванням літературних даних дозволяє характери-
зувати КЕП та, можливо, інші плацентарні біооб’єк-
and sex hormones effect combined with antioxidants
and growth factors [1, 2, 8, 10]. A similar response is
observed when applying placental material to treat
chemotherapy effects [2]. There was demonstra-
ted a positive effect on autoimmune pathology course,
being characteristic of both MSCs and proceeding of
these processes during pregnancy [6, 20]. The res-
toration of fertility in POS in the model caused by
blocking progesterone receptors and regulation di-
sorder may be associated with both central mechanism
via gonadotropins and estrogens effect, and recovery
after a direct effect on ovaries and uterus. For POS
there was also described the role of oxidative stress
and chronic inflammation in pathogenesis [9], which
might be inhibited by use of placental derivatives
[8, 11, 16]. At the same time, following application of
CPEs we observed the strengthening of infectious
process, which was explained by general immuno-
suppressive effect of placenta, observed during preg-
nancy [19]. An increased adhesion formation in the
models of infection process and torsion, where an
aseptic inflammation occurs, may be explained not on-
ly by activation of infection process, but particularly
a proliferative phase of inflammation, which has nega-
tive effect [5].
Our findings together with the previously reported
data enable characterising the CPEs and possibly other
placental bioobjects as a promising product for using
in therapy or rehabilitation of pathological states of
female reproductive system, which pathogenesis is as-
sociated with endocrinopathy, autoimmune processes,
ovarian failure and ischemia. The presence of acute
infectious or aseptic inflammation in abdominal cavity
is a contraindication for CPEs use.
збільшену кількість
спайок у черевній по-
рожнині порівняно із
хибнооперованими тва-
ринами та тваринами з
перекрутом яєчників без
лікування (табл. 7).
Таким чином, вве-
дення КЕП тваринам
із моделлю ішемії на
прикладі перекруту яєч-
ників дозволяє відно-
вити функцію останніх,
про що свідчить збіль-
шення кількості жовтих
тіл та живих плодів, але
викликає підвищене ут-
ворення спайок.
У результаті дослід-
ження дії КЕП на ста-
теву систему дослідних
тварин було виявлено,
Таблиця 7. Репродуктивні показники тварин із моделлю СПКЯ
Table 7. Reproductive indices of animals with POS model
Примітка: * – різниця статистично значуща порівняно з тваринами групи 3, p < 0,05.
Note: * – difference is statistically significant as compared to sham-operated animals, p < 0.05.
ниравтапурГ
puorglaminA
ьтсікьліK
літхитвож
rebmuN
wolleyfo
seidob
ьтсікьліK
ьцсім
їіцатналпмі
forebmuN
noitatnalpmi
setis
ьтсікьліK
відолп
rebmuN
sesuteffo
яндереС
асам
г,адолп
egarevA
latef
g,thgiew
яндереС
асам
г,итнецалп
egarevA
latnecalp
g,thgiew
ьтсікьліK
ізниравт
%,имакйапс
forebmuN
htiwslamina
%,snoisehda
туркереП
атвікинчєя
ПЕKяннедевв
noisrotnairavO
sEPCdna
noitcudortni
5,0±2,6 5,0±1,5 8,0±8,4 3,0±3,2 60,0±7,0 *06
туркереП
вікинчєя
noisrotnairavO
*2,0±5,3 *3,0±3,3 *2,0±5,3 5,0±2,2 90,0±8,0 02
інаворепоонбиХ
иниравт
detarepo-mahS
slamina
6,0±5,7 7,0±9,6 6,0±2,6 8,0±3,2 1,0±7,0 02
ти як перспективні у лікуванні (реабілітації) па-
тологічних станів жіночої статевої системи, в пато-
генезі яких є ендокринопатія, аутоімунний компо-
нент, яєчникова недостатність, ішемія. Наявність
гострого інфекційного або асептичного запалення
в черевній порожнині вважається протипоказанням
для застосування КЕП.
Висновки
У результаті проведених досліджень щодо
впливу КЕП на жіночу репродуктивну систему в
нормі та при патологічних станах можна зробити
наступні висновки.
1. Гуморальні фактори, які виділяються після
введення кріоконсервованих експлантів плаценти
людини мишам-самицям, мають позитивний тро-
фічний вплив на матку та яєчники. При цьому повно-
цінний фолікулогенез та овуляція тимчасово приг-
нічуються, що можна пояснити дією хоріонічного
гонадотропіну.
2. Кріоконсервовані експланти плаценти людини
позитивно впливають на саногенез при патологіч-
них станах, пов’язаних із аутоімунними процесами,
ендокринопатією (зокрема, СПКЯ, пов’язаним із
гіперестрогенією) та яєчниковою недостатністю.
3. Кріоконсервовані експланти плаценти нега-
тивно впливають на перебіг інфекційного процесу:
підвищують ризик формування спайок, підсилюють
запалення у малому тазу. При цьому можлива акти-
вація інфекційного процесу або формування трубо-
оваріального безпліддя.
Conclusions
Our findings on CPEs effect on female reproduc-
tive system under normal and pathological conditions
enable concluding as follows.
1. The humoral factors, released after administering
human cryopreserved placenta explants to female mice
had a positive trophic effect on uterus and ovaries.
Herewith a complete folliculogenesis and ovulation we-
re temporarily suppressed, which might be explained
by chorionic gonadotropin effect.
2. Human cryopreserved placental explants posi-
tively affected the sanogenesis in pathological states
associated with autoimmune processes, endocrino-
pathy (in particular, hyperestrogeny-associated POS)
and ovarian failure.
3. Cryopreserved placental explants negatively
affected the course of infectious process, by increasing
the risk of adhesion formation, strengthening the
inflammation in small pelvis, herewith the activation
of infectious process or formation of tubo-ovarian
infertility were possible.
Література
1. Доклінічні дослідження лікарських засобів: Метод. рекомен-
дації / За ред. О.В. Стефанова. – К.: Авіцена, 2001. – 528 с.
2. Кулаков В.И., Адамян Л.В., Мынбаев О.А. Послеопера-
ционные спайки: этиология, патогенез, профилактика. –
М.: Медицина, 1998. – 526 с.
3. Насадюк К.М. Клеточные технологии в репродуктологии,
акушерстве и гинекологии // Клітинна та органна транс-
плантологія. – 2013. – Т. 1, №1. – С. 56–60.
4. Прокопюк В.Ю., Прокопюк О.С., Мусатова И.Б. и др. Оценка
сохранности эксплантов плаценты и плодных оболочек
после криоконсервирования // Клітинна та органна транс-
плантологія. – 2015. – Т. 3, №1. – С. 28–33.
5. Прокопюк О.С., Прокопюк В.Ю., Пасієшвілі Н.М. та ін.
Імплантація кріоконсервованих фрагментів плаценти лю-
дини відновлює прооксидантно-антиоксидантний баланс
у експериментальних тварин пізнього онтогенезу // Пробле-
мы криобиологии и криомедицины. – 2017. – Т. 27, №1. –
С. 61–70.
6. Трифонов В.Ю., Прокопюк В.Ю., Зайченко А.В. Криоконсер-
вированная сыворотка кордовой крови в восстановлении
репродуктивной функции при антифосфолипидном синд-
роме // Проблемы криобиологии. – 2011. – Т. 21, №1. –
С. 75–84.
7. Шевченко Н.О., Сомова К.В., Воліна В.В. та ін. Динаміка
активності та тривалості функціонування кріоконсерво-
ваних кріоекстракту, клітин та фрагментів плаценти в орга-
References
1. Cole L.A. Biological functions of hCG and hCG-related molecules.
Reprod Biol Endocrinol 2010; 8: 102.
2. Guan-Yu X., I-Hsuan L., Chun-Chun C. et al. Amniotic fluid stem
cells prevent follicle atresia and rescue fertility of mice with
premature ovarian failure induced by chemotherapy. PLoS One
2014; 9(9): e106538.
3. Han N.R., Park C.L., Kim N.R. et al. Protective effect of porcine
placenta in a menopausal ovariectomized mouse. Reproduction
2015; 150(3): 173–181.
4. Hanson B., Johnstone E., Dorais J. et al. Female infertility, infertility-
associated diagnoses, and comorbidities: a review. J Assist
Reprod Genet 2016; 34(2): 167–177.
5. Kulakov V.I., Adamyan L.V., Mynbayev O.A. Postoperative
adhesions: etiology, pathogenesis, prevention. Moscow: Me-
ditsina; 1998.
6. Lee J.M., Jung J., Lee H.J. et al. Comparison of immunomodulatory
effects of placenta mesenchymal stem cells with bone marrow
and adipose mesenchymal stem cells. Int Immunopharmacol 2012;
13(2): 219–224.
7. Lee Y.K., Chung H.H., Kang S.B. et al. Efficacy and safety of
human placenta extract in alleviating climacteric symptoms:
prospective, randomized, double-blind, placebo-controlled trial.
J Obstet Gynaecol Res 2009; 35(6): 1096–1101.
8. Nasadyuk K.M. Cell technologies in reproductology, obstetrics
and gynecology. Cell and Organ Transplantology 2013; 1(1): 61–
65.
9. Pandey V., Singh A., Singh A. et al. Role of oxidative stress and
low-grade inflammation in letrozole-induced polycystic ovary
syndrome in the rat. Reprod Biol 2016; 16(1): 70–77.
10.Pipino C., Shangaris P., Resca E. et al. Placenta as a reservoir of
stem cells: an underutilized resource? Br Med Bull 2013; 105:
43–68.
11.Prokopyuk O.S., Prokopyuk V.Yu., Pasieshvili N.M. et al. Implantation
of cryopreserved human placental fragments restores pro-
oxidant-antioxidant balance in experimental animals of late
ontogeny. Probl Cryobiol Cryomed 2017; 27(1): 61–70.
12.Prokopyuk V.Yu., Prokopyuk O.S., Musatova I.B. et al. Safety of
placental, umbilical cord and fetal membrane explants after
264 проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 27, №/issue 3, 2017
нізмі експериментальних тварин // Морфологія. – 2016. –
Т. 10, №2. – С. 93–98.
8. Cole L.A. Biological functions of hCG and hCG-related mole-
cules // Reprod Biol Endocrinol. – 2010. – №8. – P. 102.
9. Guan-Yu X., I-Hsuan L., Chun-Chun C. et al. Amniotic fluid stem
cells prevent follicle atresia and rescue fertility of mice with
premature ovarian failure induced by chemotherapy // PLoS
One. – 2014. – Vol. 9, №9. – e106538.
10.Han N.R., Park C.L., Kim N.R. et al. Protective effect of porcine
placenta in a menopausal ovariectomized mouse // Repro-
duction. – 2015. – Vol. 150, №3. – Р. 173–181.
11.Hanson B., Johnstone E., Dorais J. et al. Female infertility, in-
fertility-associated diagnoses, and comorbidities: a review //
J. Assist. Reprod. Genet. – 2016. – Vol. 34, №2. – P. 167–177.
12.Lee J.M., Jung J., Lee H.J. et al. Comparison of immunomo-
dulatory effects of placenta mesenchymal stem cells with
bone marrow and adipose mesenchymal stem cells // Int.
Immunopharmacol. – 2012. – Vol. 13, № 2. – P. 219–224.
13.Lee Y.K., Chung H.H., Kang S.B. et al. Efficacy and safety of
human placenta extract in alleviating climacteric symptoms:
prospective, randomized, double-blind, placebo-controlled
trial // J. Obstet. Gynaecol. Res. – 2009. – Vol. 35, №6. –
Р. 1096–1101.
14.Pandey V., Singh A., Singh A. et al. Role of oxidative stress
and low-grade inflammation in letrozole-induced polycystic
ovary syndrome in the rat // Reprod Biol. – 2016. – Vol. 16,
№1. – P. 70–77.
15.Pipino C., Shangaris P., Resca E. et al. Placenta as a reservoir
of stem cells: an underutilized resource? // Br. Med. Bull. –
2013. – Vol. 105. – P. 43–68.
16.Rittirsch D., Huber-Lang M.S., Flierl M.A., Ward P.A. Immunode-
sign of experimental sepsis by cecal ligation and puncture //
Nat. Protoc. – 2009. – Vol. 4, №1. – P. 31–36.
17.Ruiz A., Aguilar R., Tebar M. et al. RU486–treated rats show
endocrine and morphological responses to therapies analo-
gous to responses of women with polycystic ovary syndrome
treated with similar therapies // Biol. Reprod. – 1996. – Vol. 55,
№6. – P. 1284–1291.
18.Silini A.R., Cargnoni A., Magatti M. et al. The long path of hu-
man placenta, and its derivatives, in regenerative medicine //
Front. Bioeng. Biotechnol. – 2015. – №3. – P. 162.
19.Taskin O., Birincioglu M., Aydin A. et al. The effects of twisted
ischaemic adnexa managed by detorsion on ovarian viability
and histology: an ischaemia-reperfusion rodent model // Hum.
Reprod. – 1998. – Vol. 13, №10. – P. 2823–2827.
20. Veenstra van Nieuwenhoven A.L., Heineman M.J., Faas M.M.
The immunology of successful pregnancy // Hum. Reprod. –
2003. – Vol. 9, №4. – P. 347–357.
21.Velayuthaprabhu S., Archunan G., Balakrishnan K. Placental
Thrombosis in Experimental Anticardiolipin Antibodies-Mediated
Intrauterine Fetal Death // Am. J. Reprod. Immunol. – 2007. –
Vol. 57, №4. – P. 270–276.
22.World health statistics 2016: monitoring health for the SDGs,
sustainable development goals. ISBN 978 92 4 156526 4. –
136 р. [Electron resource]. – Access mode: http://apps.who.int/
iris/bitstream/10665/206498/1/9789241565264_eng.pdf?ua=1
(May, 23, 2016).
23.Zarinara A., Zeraati H., Kamali K. et al. Models predicting
success of infertility treatment: a systematic review // J. Reprod.
Infertil. – 2016. – Vol.17, №2. – P. 68–81.
cryopreservation. Cell and Organ Transplantology 2015; 3(1):
34–38.
13.Rittirsch D., Huber-Lang M.S., Flierl M.A., Ward P.A. Immunodesign
of experimental sepsis by cecal ligation and puncture. Nat Protoc
2009; 4(1): 31–36.
14.Ruiz A., Aguilar R., Tebar M. et al. RU486-treated rats show
endocrine and morphological responses to therapies analogous
to responses of women with polycystic ovary syndrome treated
with similar therapies. Biol Reprod 1996; 55(6): 1284–1291.
15.Schevchenko N.O., Somova K.V., Prokopyuk V.Yu. et al. Dy-
namics of activity and duration of functioning of cryopreserved
cryoextract, placental cells and fragments in the organism of
experimental animals. Morphologia 2016; 10(2): 93–98.
16.Silini A.R., Cargnoni A., Magatti M. et al. The long path of human
placenta, and its derivatives, in regenerative medicine. Front
Bioeng Biotechnol 2015; 3: 162.
17.Stefanov O.V., editor. Preclinical trials of medicines [guidelines].
Kyiv: Avitsena; 2001.
18.Taskin O, Birincioglu M, Aydin A. et al. The effects of twisted
ischaemic adnexa managed by detorsion on ovarian viability and
histology: an ischaemia-reperfusion rodent model. Hum Reprod
1998; 13(10): 2823–2827.
19.Trifonov V.Y., Prokopyuk V.Y., Zaychenko A.V. Cryopreserved
cord blood serum for reproductive function restoration during
antiphospholipid syndrome. Probl Cryobiol 2011: 21(1), 75–84.
20.Veenstra van Nieuwenhoven A.L., Heineman M.J., Faas M.M.
The immunology of successful pregnancy. Hum Reprod 2003;
9(4): 347–57.
21.Velayuthaprabhu S., Archunan G., Balakrishnan K. Placental
thrombosis in experimental anticardiolipin antibodies-mediated
intrauterine fetal death. Am J Reprod Immunol 2007; 57(4): 270–
276.
22.World health statistics 2016: monitoring health for the SDGs,
sustainable development goals. 136 р. [Electron resource].
Available from: http://apps.who.int/iris/bitstream/10665/206498/
1/9789241565264_eng.pdf (May, 23, 2016).
23.Zarinara A., Zeraati H., Kamali K. et al. Models predicting success
of infertility treatment: a systematic review. J Reprod Infertil 2016;
17(2): 68–81.
проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 27, №/issue 3, 2017
265
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-138289 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7673 |
| language | Ukrainian |
| last_indexed | 2025-11-24T02:34:43Z |
| publishDate | 2017 |
| publisher | Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Прокопюк, В.Ю. Грищенко, О.В. Прокопюк, О.В. Шевченко, Н.О. Фалько, О.В. Сторчак, А.В. Щедров, А.О. 2018-06-18T13:09:17Z 2018-06-18T13:09:17Z 2017 Вплив кріоконсервованих експлантів плаценти на жіночу репродуктивну систему в нормі та за патології (Експериментальне дослідження) / В.Ю. Прокопюк, О.В. Грищенко, О.В. Прокопюк, Н.О. Шевченко, О.В. Фалько, А.В. Сторчак, А.О. Щедров // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2017. — Т. 27, № 3. — С. 250-265. — Бібліогр.: 23 назв. — укр., англ. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/138289 615.361:618,46]:57.086.13:[612.6.08+618.1-092.4 Збереження та відновлення репродуктивного здоров'я – найважливіші задачі сучасної медицини. Перспек- тивним у лікуванні жіночої патології є застосування похідних плаценти людини (мезенхімальні стромальні клітини, плодові оболонки, екстракти та експланти), які мають великий проліферативний потенціал та тропність до жіночої репродуктивної системи. У роботі визначали вплив кріоконсервованих експлантів плаценти на жіночу репродуктивну систему щурів та мишей в нормі (фертильність та естральний цикл) та за патології (інфекційний процес, ендокринопатія, аутоімунний стан, травма та ішемія). Виявлено, що кріоконсервовані експланти плаценти мають трофічний ефект на матку та яєчники, тимчасово затримують овуляцію, полегшують перебіг аутоімунної та ендокринної патології, ішемії. При цьому під дією експлан- тів плаценти погіршується перебіг інфекційного процесу та посилюється спайкоутворення. Сохранение и восстановление репродуктивного здоровья – важнейшие задачи современной медици- ны. Перспективным в лечении патологии женской репродуктивной системы является применение производных пла- центы человека (мезенхимальные стромальные клетки, плодные оболочки, экстракты и экспланты), которые имеют большой пролиферативный потенциал и тропность к женской репродуктивной системе. В работе определяли влияние криоконсервированных эксплантов плаценты на женскую репродуктивную систему крыс и мышей в норме (фертиль- ность и эстральный цикл) и при патологии (инфекционный процесс, эндокринопатия, аутоиммунное состояние, травма и ишемия). Выявлено, что криоконсервированные экспланты плаценты имеют трофический эффект в отношении матки и яичников, временно задерживают овуляцию, положительно влияют на течение аутоиммунной и эндокринной патологии, ишемии. При этом, под действием эксплантов плаценты ухудшается течение инфекционного процесса и повышается образование спаек. One of the most important tasks in current medicine is the preservation and restoration of fertility. The application of human placental derivatives (mesenchymal stromal cells, fetal membranes, extracts and explants), having a high proliferative potential and the affinity to female reproductive system, is a promising direction for treating female reproductive pathology. Here we determined the effect of cryopreserved placental explants on female reproductive system of rats and mice under normal conditions (fertility and estrous cycle) and in pathology (infectious process, endocrinopathy, autoimmune pathology, trauma/ischemia). The cryopreserved placental explants were revealed to have a trophic effect on uterus and ovaries, they temporarily delayed ovulation and positively affected autoimmune, endocrine pathology and ischemia course. In addition, placental explants aggravated the infection course and increased the peritoneal adhesion formation. uk Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии и криомедицины Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология Вплив кріоконсервованих експлантів плаценти на жіночу репродуктивну систему в нормі та за патології (Експериментальне дослідження) Effect of Cryopreserved Placental Explants on Female Reproductive System Under Normal and Pathological Conditions (Experimental study) Article published earlier |
| spellingShingle | Вплив кріоконсервованих експлантів плаценти на жіночу репродуктивну систему в нормі та за патології (Експериментальне дослідження) Прокопюк, В.Ю. Грищенко, О.В. Прокопюк, О.В. Шевченко, Н.О. Фалько, О.В. Сторчак, А.В. Щедров, А.О. Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология |
| title | Вплив кріоконсервованих експлантів плаценти на жіночу репродуктивну систему в нормі та за патології (Експериментальне дослідження) |
| title_alt | Effect of Cryopreserved Placental Explants on Female Reproductive System Under Normal and Pathological Conditions (Experimental study) |
| title_full | Вплив кріоконсервованих експлантів плаценти на жіночу репродуктивну систему в нормі та за патології (Експериментальне дослідження) |
| title_fullStr | Вплив кріоконсервованих експлантів плаценти на жіночу репродуктивну систему в нормі та за патології (Експериментальне дослідження) |
| title_full_unstemmed | Вплив кріоконсервованих експлантів плаценти на жіночу репродуктивну систему в нормі та за патології (Експериментальне дослідження) |
| title_short | Вплив кріоконсервованих експлантів плаценти на жіночу репродуктивну систему в нормі та за патології (Експериментальне дослідження) |
| title_sort | вплив кріоконсервованих експлантів плаценти на жіночу репродуктивну систему в нормі та за патології (експериментальне дослідження) |
| topic | Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология |
| topic_facet | Криомедицина, клиническая и экспериментальная трансплантология |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/138289 |
| work_keys_str_mv | AT prokopûkvû vplivkríokonservovaniheksplantívplacentinažínočureproduktivnusistemuvnormítazapatologííeksperimentalʹnedoslídžennâ AT griŝenkoov vplivkríokonservovaniheksplantívplacentinažínočureproduktivnusistemuvnormítazapatologííeksperimentalʹnedoslídžennâ AT prokopûkov vplivkríokonservovaniheksplantívplacentinažínočureproduktivnusistemuvnormítazapatologííeksperimentalʹnedoslídžennâ AT ševčenkono vplivkríokonservovaniheksplantívplacentinažínočureproduktivnusistemuvnormítazapatologííeksperimentalʹnedoslídžennâ AT falʹkoov vplivkríokonservovaniheksplantívplacentinažínočureproduktivnusistemuvnormítazapatologííeksperimentalʹnedoslídžennâ AT storčakav vplivkríokonservovaniheksplantívplacentinažínočureproduktivnusistemuvnormítazapatologííeksperimentalʹnedoslídžennâ AT ŝedrovao vplivkríokonservovaniheksplantívplacentinažínočureproduktivnusistemuvnormítazapatologííeksperimentalʹnedoslídžennâ AT prokopûkvû effectofcryopreservedplacentalexplantsonfemalereproductivesystemundernormalandpathologicalconditionsexperimentalstudy AT griŝenkoov effectofcryopreservedplacentalexplantsonfemalereproductivesystemundernormalandpathologicalconditionsexperimentalstudy AT prokopûkov effectofcryopreservedplacentalexplantsonfemalereproductivesystemundernormalandpathologicalconditionsexperimentalstudy AT ševčenkono effectofcryopreservedplacentalexplantsonfemalereproductivesystemundernormalandpathologicalconditionsexperimentalstudy AT falʹkoov effectofcryopreservedplacentalexplantsonfemalereproductivesystemundernormalandpathologicalconditionsexperimentalstudy AT storčakav effectofcryopreservedplacentalexplantsonfemalereproductivesystemundernormalandpathologicalconditionsexperimentalstudy AT ŝedrovao effectofcryopreservedplacentalexplantsonfemalereproductivesystemundernormalandpathologicalconditionsexperimentalstudy |