Изменение спектральных характеристик белков плазмы донорской крови под влиянием озона
Saved in:
| Published in: | Проблемы криобиологии и криомедицины |
|---|---|
| Date: | 2005 |
| Main Author: | |
| Format: | Article |
| Language: | Russian |
| Published: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2005
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/138492 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Изменение спектральных характеристик белков плазмы донорской крови под влиянием озона / Е.В. Сомова // Проблемы криобиологии. — 2005. — Т. 15, № 4. — С. 737–738. — рос., англ. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-138492 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Сомова, Е.В. 2018-06-19T07:51:54Z 2018-06-19T07:51:54Z 2005 Изменение спектральных характеристик белков плазмы донорской крови под влиянием озона / Е.В. Сомова // Проблемы криобиологии. — 2005. — Т. 15, № 4. — С. 737–738. — рос., англ. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/138492 ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии и криомедицины Криобиологическое оборудование Изменение спектральных характеристик белков плазмы донорской крови под влиянием озона Changes in Spectral Characteristics of Donor Blood Plasm Proteins under Ozone Effect Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Изменение спектральных характеристик белков плазмы донорской крови под влиянием озона |
| spellingShingle |
Изменение спектральных характеристик белков плазмы донорской крови под влиянием озона Сомова, Е.В. Криобиологическое оборудование |
| title_short |
Изменение спектральных характеристик белков плазмы донорской крови под влиянием озона |
| title_full |
Изменение спектральных характеристик белков плазмы донорской крови под влиянием озона |
| title_fullStr |
Изменение спектральных характеристик белков плазмы донорской крови под влиянием озона |
| title_full_unstemmed |
Изменение спектральных характеристик белков плазмы донорской крови под влиянием озона |
| title_sort |
изменение спектральных характеристик белков плазмы донорской крови под влиянием озона |
| author |
Сомова, Е.В. |
| author_facet |
Сомова, Е.В. |
| topic |
Криобиологическое оборудование |
| topic_facet |
Криобиологическое оборудование |
| publishDate |
2005 |
| language |
Russian |
| container_title |
Проблемы криобиологии и криомедицины |
| publisher |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Changes in Spectral Characteristics of Donor Blood Plasm Proteins under Ozone Effect |
| issn |
0233-7673 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/138492 |
| citation_txt |
Изменение спектральных характеристик белков плазмы донорской крови под влиянием озона / Е.В. Сомова // Проблемы криобиологии. — 2005. — Т. 15, № 4. — С. 737–738. — рос., англ. |
| work_keys_str_mv |
AT somovaev izmeneniespektralʹnyhharakteristikbelkovplazmydonorskoikrovipodvliâniemozona AT somovaev changesinspectralcharacteristicsofdonorbloodplasmproteinsunderozoneeffect |
| first_indexed |
2025-11-25T20:31:22Z |
| last_indexed |
2025-11-25T20:31:22Z |
| _version_ |
1850523974832750592 |
| fulltext |
(TG-404) яичный альбумин, полученный в Институте
монокристаллов НАН Украины.
Показано, что ДМФА и этиленгликоль, имеющие
больший в сравнении с глицерином коэффициент
проницаемости через мембраны клеток, проявляют
высокую криозащитную активность в отношении СС и
не оказывают на них существенного цитотоксического
действия, что позволяет рассматривать эти вещества как
перспективные криопротекторы для низкотемпера-
турного хранения СС. Выявлено, что замена желтка
куриных яиц в составе среды на яичный альбумин не
снижает жизнеспособность СС в процессе криоконсер-
вирования. Лучшие результаты после замораживания-
оттаивания СС получены при сочетании в криозащитной
среде 1 М ДМФА с 1%-м яичным альбумином.
Установлен факт взаимодействия флуоресцентно
меченого яичного альбумина с искусственными
липидными мембранами.
Изменение спектральных характеристик белков плазмы
донорской крови под влиянием озона
Е.В. СОМОВА
Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков
Changes in Spectral Characteristics of Donor Blood
Plasm Proteins under Ozone Effect
E.V. SOMOVA
Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the National Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov
Изучение молекулярных механизмов действия озона
на компоненты крови представляет интерес в связи с
развитием методов озонотерапии.
Цель работы – изучение влияния малых доз озона на
спектральные характеристики белков плазмы донорской
крови и функциональное состояние сывороточного
альбумина человека (САЧ).
Плазму крови выделяли центрифугированием (800 g,
10 мин) из цельной крови здоровых доноров. Содержание
белка и нуклеотидов измеряли спектрофотометрически
по поглощению в УФ-области (А.П.Демченко, 1981).
Общее содержание САЧ в плазме измеряли по погло-
щению при длине волны 640 нм с использованием
стандартного набора реактивов “Альбумин-Агат” с
бромкрезоловым зеленым (Россия), индекс токсичности
САЧ (Т = (ОКА/ЭКА)-1) – набора “Зонд” (“Серум-
Альфа”, Россия). Концентрацию озона оценивали
спектрофотометрическим методом на приборе Specord
UV VIS (Германия) по поглощению света на полосе
Хартли. Озонированный физиологический раствор
(ОФР) получали на установке с генератором озона
барьерного типа, сконструированной в ИПКиК НАН
Украины. Физиологический раствор (0,89% NaCl, рН 7,2)
во флаконе объемом 200 мл барботировали озоно-
кислородной смесью, концентрация растворенного
озона в ОФР 3,8 мг/л. Растворение озона и дальнейшее
хранение ОФР для замедления процесса распада озона
проводили в термостате со льдом. Плазму смешивали с
ОФР непосредственно после озонирования.
Спектры флуоресценции измеряли на спектро-
флуориметре Cary Eclipse (Varian). Триптофановую
флуоресценцию белков плазмы возбуждали светом с
Studying molecular mechanisms of ozone effect on
blood components is of interest because of ozone therapy
methods development.
The work was aimed to investigate the effect of low
ozone doses on spectral characteristics of donor blood
plasm proteins and functional state of human serum albumin
(HSA).
Blood plasm was isolated by centrifuging (800 g, 10
min) from healthy donor whole blood. Protein and nucleotide
content was measured spectrophotometrically by absorp-
tion in UV-area (A.P. Demchenko, 1981). HSA total content
in plasm was measured by absorption at 640 nm wavelength
using the “Albumin-Agat” standard kit of reagents with
bromocresol green (Russia), HSA toxicity index (T=(OCA/
ECA)-1) was done with “Zond” kit (“Serum-Alpha”, Russia).
Ozone concentration was evaluated spectrophotometrically
with Specord UV VIS device (Germany) by light absorption
on Hartley band. Ozonized physiological solution (OPS)
was obtained using the device with barrier-type ozone
generator, designed at the Institute for Problems of
Cryobiology and Cryomedicine of the National Academy
of Sciences of Ukraine. Physiological solution (0.89% NaCl;
pH 7.2) in 200 ml flask was bubbled by ozone-oxygen mixture,
concentration of dissolved ozone in OPS made 3.8 mg/l.
Ozone dissolution and further OPS storage for inhibiting
the ozone decay process was carried-out in thermostat with
ice. Plasm was mixed with OPS right after ozonizing.
Fluorescence spectra were estimated with Cary Eclipse
(Varian) Spectrofluorimeter. Tryptophan fluorescence of
plasm proteins was light-excited at 296 nm. Absorption
spectra were recorded with Perkin Elmer (USA) spectro-
photometer.
membranes have been shown to manifest a high cryo-
protective activity in respect of CS and do not cause a
significant cytotoxic effect on them, that enables to consider
these substances as perspective cryoprotectants for low
temperature storage of CS. It was revealed that the
substitution of chicken egg yolk as the part of the medium
to egg albumin did not reduce viability of CS during
cryopreservation. The best results after CS freeze-thawing
were obtained when combining 1M DMFA with 1% egg
albumin in cryoprotective medium. The fact of interaction
of fluorescent-labeled egg albumin with artificial lipid
membranes was established.
737ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 15, 2005, №4
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 15, 2005, №4
длиной волны 296 нм. Спектры поглощения регистри-
ровали на спектрофотометре Perkin Elmer (США).
Было показано, что малые дозы озона изменяют
оптические характеристики белков плазмы крови и
связывающую способность САЧ. При этом эффект дейст-
вия озона является дозозависимым, а ответная реакция
белков плазмы имеет нелинейный характер. После
добавления к плазме ОФР в концентрациях 0,2-0,4 мг/л
наблюдается снижение триптофановой флуоресценции
белков плазмы, которое коррелирует со снижением
поглощения белковых хромофоров в УФ-области.
Положения же спектров флуоресценции и поглощения
белков плазмы изменяются незначительно (0,5 нм). При
концентрациях озона более 0,4 мг/л фиксируется
волнообразный рост указанных параметров, которые,
однако, не достигают первоначальных величин. Наблю-
даемые изменения сходны с изменениями прямого
рэлеевского рассеяния образцов под углом 90° и свето-
рассеяния, измеренного на спаде спектров поглощения
(400 нм), а также с изменениями уровня общего белка,
САЧ и нуклеотидов плазмы. При содержании озона в
плазме 0,2–0,4 мг/л индекс токсичности САЧ, отражаю-
щий степень его нагруженности токсичными лигандами
(Г.Е. Добрецов, 1998), возрастает до 0,32±0,07 и при
дальнейшем повышении дозы колеблется в пределах 0,14-
0,32. Однако индекс токсичности также обнаруживает
нелинейность изменений в зависимости от примененной
дозы озона.
Полученные данные свидетельствуют о том, что при
добавлении к плазме ОФР происходят дозозависимые
конформационные изменения белков, в том числе САЧ,
которые отражаются на его функциональных свойствах
(способности связывать токсические лиганды).
Динамика гиперосмотического лизиса эритроцитов человека в присутствии озона
И.А.БЕЛЫХ
Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков
Dynamics of Human Erythrocyte Hyperosmotic Lysis in Ozone Presence
I.A. BELYKH
Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the National Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov
Гемолиз эритроцитов из донорской крови человека
исследовали в присутствии озона в растворах: NaCl
0,15-4 моль/л при 4°С без замораживания и 0,15 моль/л
после замораживания-оттаивания в криозащитных средах
“Пропандиосахароль” и Glycerolyte 57 Solution (Baxter).
Чувствительность эритроцитов к гипертоническому
шоку определяли по выходу гемоглобина в раствор и
выражали в процентах по отношению к количеству
гемоглобина в исходной суспензии клеток. Для опреде-
ления 100%-го гемолиза эритроциты разрушали
тритоном Х–100 (0,1%). Озон получали электросинтезом
из газообразного кислорода. Концентрацию озона
измеряли спектрофотометрически по поглощению света
на полосе Хартли (255 нм) на спектрофотометре
SPECORD UV VIS.
В контрольных образцах, не содержащих озон, после
помещения эритроцитов в среду инкубирования с
концентрацией NaCl 0,15-2 моль/л (при 4°C) величина
гемолиза некоторое время остается близкой к нулю и
There was investigated erythrocyte hemolysis from
human donor blood in ozone presence in following
solutions: 0.15-4 mol/l NaCl at 4°C without freezing and
0.15 mol/l NaCl after freeze-thawing in “Propan-diosakharol”
and Glycerolyte 57 Solution (Baxter) cryoprotective media.
Erythrocyte sensitivity to hypertonic shock was
determined by hemoglobin release and expressed in percents
in respect of hemoglobin amount in initial cell suspension.
To determine 100% erythrocyte hemolysis erythrocytes were
destroyed with Triton X-100 (0.1%). Ozone was obtained
by electrosynthesis from gaseous oxygen. Ozone concen-
tration was spectrophotometrically measured by light
consumption on Hartley band (255 nm) with SPECORD UV
VIS spectrophotometer.
In ozone-free control samples after placing erythrocytes
in incubation medium with 0.15-2 mol/l NaCl concentration
(at 4°C) the hemolysis value remains for some time close to
zero and hemolysis slightly increases in time. In the media,
containing 0.15, 0.25 and 0.85 mol/l NaCl this time makes 3
Low ozone doses were shown to change optical
characteristics of blood plasm proteins and HSA binding
ability. At the same time ozone effect is dose-dependent
and response of plasm proteins is of non-linear character.
After adding OPS under 0.2-0.4 mg/l concentrations into
plasm a decrease in tryptophan fluorescence of plasm
proteins, correlating with the reduction of protein
chromophore absorption in UV-range, is observed. But the
positions of fluorescence spectra and plasm protein
absorption slightly change (0.5 nm). At ozone concentra-
tions more than 0.4 mg/l a wave-like growth in the mentioned
parameters, although not getting the initial values, is
recorded. Changes in a direct Rayleigh scattering of samples
under 90° and light scattering, measured at the absorption
spectra fall (400 nm), as well as those in total proteins level,
HSA and plasm nucleotides are similar to the observed ones.
At 0.2-0.4 mg/l ozone content in plasm the HSA toxicity
index, reflecting the degree of its loading by toxic ligands
(G.E. Dobretsov, 1998) increases up to 0.32±0.07 and during
following dose increase varies within 0.14-0.32 limits.
However toxicity index also reveals the non-linearity of
changes depending on the applied ozone dose.
The data obtained testify to the fact, that when adding
OPS into plasm the dose-dependent conformational protein
changes, including HSA, affecting its functional properties
(ability to bind toxic ligands).
738ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 15, 2005, №4
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 15, 2005, №4
|