Cтруктурные перестройки в клетках и их мембранах при длительном гипотермическом хранении
Gespeichert in:
| Veröffentlicht in: | Проблемы криобиологии и криомедицины |
|---|---|
| Datum: | 2005 |
| Hauptverfasser: | , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Russisch |
| Veröffentlicht: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2005
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/138513 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Cтруктурные перестройки в клетках и их мембранах при длительном гипотермическом хранении / Н.В. Репин, Т.П. Говоруха // Проблемы криобиологии. — 2005. — Т. 15, № 4. — С. 630-635. — Бібліогр.: 5 назв. — рос., англ. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1860126612717043712 |
|---|---|
| author | Репин, Н.В. Говоруха, Т.П. |
| author_facet | Репин, Н.В. Говоруха, Т.П. |
| citation_txt | Cтруктурные перестройки в клетках и их мембранах при длительном гипотермическом хранении / Н.В. Репин, Т.П. Говоруха // Проблемы криобиологии. — 2005. — Т. 15, № 4. — С. 630-635. — Бібліогр.: 5 назв. — рос., англ. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Проблемы криобиологии и криомедицины |
| first_indexed | 2025-12-07T17:41:50Z |
| format | Article |
| fulltext |
630ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 15, 2005, №4
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 15, 2005, №4
УДК 612.351.1.014.43
Cтруктурные перестройки в клетках и их мембранах при
длительном гипотермическом хранении
Н.В. РЕПИН, Т.П. ГОВОРУХА
Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков
Structural Rearrangements in Cells and Their Membranes
Under Long-Term Hypothermic Storage
N.V. REPIN, T.P. GOVORUKHA
Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the National Academy
of Sciences of the Ukraine, Kharkov
Проведено морфологическое исследование ультраструктуры мембран эритроцитов и клеток печени, длительное время
хранившихся при 4°С. Показано,что после 20 суток хранения наблюдается выраженная дестабилизация структуры их мембран,
сопровождаемая образованием спикул и потерей мембранного материала. Ультраструктурное состояние клеток печени после
суток хранения в жидкой фазе свидетельствует об их высокой сохранности и обратимости наблюдаемых изменений. По степени
лабильности при гипотермическом хранении внутриклеточные структуры располагаются следующим образом: митохондрии,
эндоплазматическая сеть, ядерный аппарат.
Ключевые слова: эритроциты, гепатоциты, гипотермия, ультраструктура.
Проведено морфологічне дослідження ультраструктури мембран еритроцитів і клітин печінки, які тривалий час зберігали
при 4°С. Показано, що після 20-ї доби зберігання спостерігається виражена дестабілізація структури їхніх мембран, яка
супроводжується утворенням спікул і втратою мембранного матеріалу. Ультраструктурний стан клітин печінки після доби
зберігання в рідкій фазі свідчить про їхню високу збереженність і оборотність змін, що спостерігалися. За ступенем лабільності
при гіпотермічному зберіганні внутрішньоклітинні структури розташовані в такій послідовності: мітохондрії, ендоплазматична
мережа, ядерний апарат.
Ключові слова: еритроцити, гепатоцити, гіпотермія, ультраструктура.
Morphological investigation of ultrastructure of erythrocyte membrane and liver cells, stored for a long time under 4°C was
carried-out. It was shown, that a manifested destabilisation of their membrane structure, accompanied with spiculae formation and loss
of membrane material was observed following 20 days of storage. Ultrastructural state of liver cells after 1 day of storage in a liquid
phase testifies to their high integrity and reversibility in the observed changes. By lability extent under hypothermic storage the
intracellular structures are graded as follows: mitochondria, endoplasmic reticulum, nuclear apparatus.
Key-words: erythrocytes, hepatocytes, hypothermia, ultrastructure.
Address for correspondence: Repin N.V., Institute for Problems of
Cryobiology&Cryomedicine of the Natl. Acad. Sci. of Ukraine, 23,
Pereyaslavskaya str.,Kharkov, Ukraine 61015; tel.:+380 57 373 3034,
fax: +380 57 373 3084, e-mail: cryo@online.kharkov.ua
UDC 612.351.1.014.43
По гипотермическому хранению (ГХ) эритро-
цитов, изолированных гепатоцитов и фрагментов
ткани накоплен значительный опыт. В то же время
сведения о сроках начала изменения ультра-
структуры клеток печени при хранении противо-
речивы. Считается, что продолжительность
хранения биологического материала в жизне-
способном состоянии в составе ткани ограничена,
как правило, несколькими часами [4, 5], клеточных
суспензий – 1-3 сутками [1], а эритроцитов – 1-2
неделями [2].
Представлялось интересным выяснить времен-
ной предел морфологической сохранности структу-
ры печени и эритроцитов при пониженных (4°С)
температурах.
Цель работы – изучить структурные пере-
стройки в клетках и их мембранах при длительном
гипотермическом хранении.
Материалы и методы
В качестве объекта исследования использованы
эритроциты донорской крови, которые хранили при
Адрес для корреспонденции: Репин Н.В., Институт проблем
криобиологии и криомедицины НАН Украины, ул. Переяславская,
23, г. Харьков, Украина 61015; тел.:+38 (057) 373-30-34, факс: +38
(057) 373-30-84, e-mail: cryo@online.kharkov.ua
Significant experience in hypothermic storage (HS)
of erythrocytes, isolated hepatocytes and tissue
fragments has been accumulated. At the same time
the information about the terms when liver cell
ultrastructure begins to change during storage is
contradictory. Duration of biological material storage
in a viable state as a part of tissue is considered to be
generally limited by some hours [4,5], 1-3 days for
cell suspensions [1] and 1-2 weeks for erythrocytes
[2].
Of interest was to reveal a time limit of morpho-
logical integrity for liver structure and erythrocytes
under lowered temperatures (4°C).
The work was aimed to study structural rearrange-
ments in cells and their membranes under long-term
hypothermic storage.
Materials and Methods
Donor blood erythrocytes and Wistar rats’ liver
fragments, stored under 4°C within 30 days and more
(for erythrocytes) and up to 6 days (for liver fragments)
were used as research object. Investigations of
631ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 15, 2005, №4
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 15, 2005, №4
температуре 4°С 30 сут и более, и фрагменты
печени крыс линии Вистар, хранившиеся до 6
суток. Исследования мембран эритроцитов
проводили электронно-микроскопическим мето-
дом замораживания-скалывания. Образцы крио-
фиксировали сэндвич-методом с помощью двух
охлажденных в жидком азоте медных блоков.
Скалывание и напыление реплики осуществляли в
вакуумной напылительной установке при темпе-
ратуре от –100 до –105°С и давлении 10–6мм рт. ст.
Образцы печени препарировали по общепринятой
методике [3]. Ультратонкие срезы контрастиро-
вали насыщенным водным раствором уранил-
ацетата и цитратом свинца. Просмотр образцов
проводили с помощью электронных микроскопов:
растрового РЭММА-101А и трансмиссионного
ПЭМ 125К, снабженного системой съема и анализа
изображения САИ-01А (AO “SELMI”, г. Сумы)
на основе CCD камеры DX-2 и пакета программ
фирмы “KAPPA” (Германия) при ускоряющем
напряжении 75 кВ.
Результаты и обсуждение
Известно, что мембрана интактных эритро-
цитов при скалывании расщепляется вдоль
гидрофобной области, обнажая при этом две
относительно гладкие поверхности PF и EF с
характерным хаотическим распределением
внутримембранных частиц (ВМЧ). Экспери-
ментально доказано, что ВМЧ представляют
собой интегральные белки, встроенные в липидную
область мембраны. Можно считать установ-
ленным, что характер их распределения отражает
динамику белок-липидных взаимодействий и
определяется структурно-функциональным
состоянием мембраны. В норме вращательная и
латеральная подвижность мембранных белков
резко ограничена, т.е. система мембрана-
цитоскелет довольно устойчива, и наблюдать
латеральное перераспределение ВМЧ в плоскости
мембраны не удается.
Критерием морфологического состояния
мембраны служили плотность и характер распре-
деления ВМЧ, а также условия прохождения
плотности скола внутри мембраны.
Небольшие сроки хранения эритроцитов (до
10 сут) не приводят к существенным изменениям
их формы и ультраструктуры мембран (рис.1).
Численные значения плотности ВМЧ, характер
прохождения плотности скола находились в
пределах нормы. В этот период лишь в цитозоле
клеток отмечены компактизация и конденсация
гемоглобина, наблюдаемые в виде бифазной,
гелеподобной структуры – гладкие, лишенные
молекул гемоглобина области и зоны конденсиро-
ванного гемоглобина (рис. 2). При исследовании
распределения плотности ВМЧ на РF- и ЕF-
erythrocyte membranes were carried-out using
electron-microscopy method of freeze-fracturing.
Samples were cryofixed by sandwich-method using
two copper blocks, cooled in liquid nitrogen. Fracturing
and replica sputtering were carried-out in vacuum
sputtering unit at –100 to –105°C and 10-6 mm hg
pressure. Liver samples after each storage term were
prepared by the standard methods [3]. Ultrathin
sections were counterstained with a saturated uranil
acetate aqueous solution and lead citrate. Liver cell
ultrastructure was studied using electron microscopes
such as: REMMA-101A scanning and PEM-125K
transmission ones, supplied with SAI-01A system for
extraction and image analysis (“SELMI” company, city
of Sumy), based on CCD of DX-2 chamber and
“KAPPA” Software (Germany) at 75 kV accelerating
voltage.
Results and discussion
Membrane of intact erythrocytes during fracturing
is known to be splitted along hydrophobic area thereby
uncovering two relatively smooth PF and EF surfaces
with a typical chaotic distribution of so-called
intramembranous particles (IMPs). As experimentally
approved, IMPs are integral proteins built into
membrane lipid area. The fact that a character of their
distribution reflects dynamics of protein-lipid
interactions and is determined by structural and
functional membrane state can be considered as
established one. Rotative and lateral mobility of
membrane proteins is sharply limited in the norm, i.e.
membrane-cytoskeleton system is quite resistant and
observation for lateral IMPs redistribution in membrane
surface is failed.
Density and character of IMPs distribution, as well
as the conditions of chip density passing inside
membrane served as the criterion for membrane
morphological state.
Short terms of erythrocyte storage (up to 10 days)
do not result in considerable changes in their shape
and membrane ultrastructure (Fig. 1). Numerical
values of IMPs density, the character of chip density
passing were within the normal range. In this period
only in cell cytosol there were noted hemoglobin
compacting and condensation, observed as biphase,
gel-like structure: smooth, hemoglobin molecule-free
areas and those of condensed hemoglobin (Fig. 2).
When investigating IMPs density redistribution on PF-
and EF-surfaces of erythrocyte membrane chip there
was found out that at a relatively equal IMPs total
density in comparison with the control cells during initial
step of storage, a stable tendency of their redistribution
between internal (PF) and external (EF) membrane
monolayers in favour of the latter was observed. This
testifies to a change in protein-lipid and protein-protein
interactions both in a membrane itself and between
integral components of membrane and cytoskeleton.
632ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 15, 2005, №4
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 15, 2005, №4
поверхностях скола мембраны эритроцитов
установлено, что при относительно одинаковой с
контрольными клетками суммарной плотности
ВМЧ в процессе начального этапа хранения
отмечается устойчивая тенденция их пере-
распределения между внутренним (PF) и внешним
(EF) монослоями мембраны в пользу последнего.
Это свидетельствует об изменении белок-
липидных и белок-белковых взаимодействий как
в самой мембране, так и между интегральными
компонентами мембраны и цитоскелетом.
При сроках хранения 10-25 суток отмечены
существенное изменение формы эритроцитов и
поверхности скола их мембран, образование
впячиваний и выростов на мембранной поверх-
ности, характерных для истощенных по АТФ
эритроцитов (рис. 2, а), а также уменьшение
времени кислотного гемолиза эритроцитов и
возрастание их однородности по отношению к
этому показателю. Величина гемолиза была не
столь значительной и составляла в среднем 3-5%.
Начиная с 20-х суток, происходит процесс
набухания эритроцитов, а на их поверхности
Рис. 1. Морфологическое состояние (а) и структура
цитозоля (б) эритроцитов после 10 сут ГХ. Cyt – цитозоль.
Fig. 1. Morphological state (a) an cytosol (Cyt) structure
(b) of erythrocytes after 10 days of HS.
a a
б b
a a
б b
Рис. 2. Морфологическое состояние поверхности
эритроцитов: a – до 20 сут ГХ; б – формирование спикул
(S) на поверхности после 20 сут ГХ.
Fig. 2. Morphological state of erythrocyte surface: a – up
to 20 days’ HS; b – spiculae (S) formation on surface after
20 days’ HS.
Under 10-25 days’ storage term there were
observed considerable changes in erythrocyte shape
and chip surface of their membranes, formation of in-
and outgrowths on membrane surface, typical for
exhausted by ATP erythrocytes (Fig. 2, a), as well as
a decrease in time of erythrocyte acid hemolysis and
increase in their heterogeneity in respect of this index.
Hemolysis value was not so significant and made 3-
5% on average.
Starting with the 20th day the process of erythrocyte
swelling occurs and spiculae (typical membrane
outgrowths) appear on their surface (Fig. 2, b). At a
long-term storage (30 days and more) we observed
smooth, IMPs-free vesicular formations in erythrocyte
suspension, that testified to their lipid origin, as well as
an increase in IMPs density on PF-surface. Vesicle
formation reflects an intensive loss in membrane
material.
Thus, cell and especially its membrane, being a
dynamic structure, actively responds to changed
conditions by modifying its structure.
Studying the effect of temperature factor on
ultrastructure of nucleated cells enabled to trace the
633ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 15, 2005, №4
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 15, 2005, №4
появляются характерные мембранные выросты –
спикулы (рис. 2, б). При длительном сроке хранения
(30 сут и более) в суспензии эритроцитов нами
отмечены гладкие, лишенные ВМЧ везикулярные
образования, что свидетельствует об их липидной
природе, а также возрастание плотности ВМЧ на
РF-поверхности. Образование везикул отражает
интенсивную потерю мембранного материала.
Таким образом, клетка и особенно ее мембрана,
являясь динамической структурой, активно
реагирует своей модификацией на изменяющиеся
условия.
Изучение влияния температурного фактора на
ультраструктуру ядросодержащих клеток позво-
лило проследить последовательность деградации
клеточных органелл при хранении.
Гипотермическое хранение фрагментов печени
в среде 199 в течение 24 ч показало сохранение ее
основных морфологических характеристик –
трабекулярного строения печеночных долек и
структуры микрососудистого русла. Ультра-
структурный анализ гепатоцитов подтверждает
сохранность всех клеточных структур, а также
тесную связь элементов белоксинтезирующей и
энергообеспечивающей систем клетки. Форма
гепатоцитов и межклеточные контакты остаются
неповрежденными. Ядро, как одна из наиболее
устойчивых клеточных органелл, в данных
условиях полностью сохраняет свою структуру
(рис. 3). В цитоплазме гранулярный ЭПР пред-
ставлен узкими канальцами, окружающими
митохондрии, и параллельными цистернами,
которые сосредоточены, главным образом, в
околоядерной зоне. Агранулярный ЭПР в виде
небольших везикул и сравнительно коротких
трубочек распределен по всей цитоплазме.
Ультраструктура митохондрий близка к нор-
мальной. Для них характерны округлая или
овальная форма, четкая двойная мембрана и
матрикс средней электронной плотности со
слабовыраженными кристами. Аппарат Гольджи
состоит из пузырьков и плоских цистерн, содер-
жимое которых имеет низкую электронную
плотность. Гликоген в виде скоплений гранул и
розеток рассредоточен по всей цитоплазме. Как и
в норме, эндотелий синусоидных капилляров
представлен уплощенными эндотелиоцитами
(рис. 4) с широкими порами и фенестрами в их
периферических отростках, а также печеночными
макрофагами. Желчные капилляры и пространство
Диссе содержат хорошо выраженные микро-
ворсинки, образованные цитолеммой гепатоцитов.
Через 1,5-2 сут хранения в клетках происходят
набухание и частичная деструкция мембран
гранулярного ЭПР, что приводит к увеличению
количества свободных рибосом. Набухание мито-
sequence for cell organella degradation during storage.
Under liver fragment hypothermic storage in 199
medium during 24 hrs there was noted the integrity in
its principal morphological characteristic, such as
trabecular structure of liver lobules and microvascular
channel structure. Ultrastructural analysis of
hepatocytes confirms the integrity of all cell structures,
as well as a tight relationship between elements of
protein-synthesising and energy-efficient cell system.
Hepatocyte shape and intercellular contacts remain
undamaged. Under these conditions a nucleus as one
of the most resistant cell organella completely
preserves its structure (Fig. 3). In cytoplasm the
endoplasmic reticulum (EPR) is presented by narrow
channels, surrounding mitochondria and parallel
cisterns, mostly located in perinuclear area. Agranular
EPR as small vesicles and comparatively short tubes
is distributed along all cytoplasm.
The mitochondria ultrastructure is close to the
normal one. They are characterised by a roundish or
oval shape, distinct double membrane and matrix of
average electron density with a slightly manifested
crysts. Golgi apparatus comprises vesicles and flat
cisterns with low electron density in their content.
Glycogen in the form of granule and rosula accu-
mulations is distributed along all cytoplasm. Endo-
thelium of sinusoid capillaries is presented by flattened
endotheliocytes (Fig. 4) with wide pores and fenestras
in their peripheric islets, as well as by hepatic
macrophages as in the norm. Biliary capillaries and
Disse’s space comprise well manifested microvilli,
formed by hepatocyte cytomembrane.
Following 1.5-2 days of storage a swelling and
partial membrane destruction of granular EPR in cells
occur, resulting in an increase of free ribosome number.
Mitochondria swelling is accompanied with matrix
Рис. 3. Фрагмент двухядерного гепатоцита после 24 ч
ГХ в среде 199: N – ядро; М – митохондрия; EPR –
эндоплазматический ретикулум; G – розетки гликогена;
n – ядрышко.
Fig. 3. Fragment of two-nuclear hepatocyte after 24 hrs’ HS
in 199 medium. N – nucleus; M – mitochondrion; EPR; G –
glycogen; n – nucleolus.
634ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 15, 2005, №4
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 15, 2005, №4
хондрий сопровождается просветлением матрикса
и частичным разрушением крист. В аппарате
Гольджи преобладают вакуолеобразные и вези-
кулярные структуры. В ядрах клеток появляется
изрезанность контура без нарушения ширины
перинуклеарного пространства, изменяется
соотношение между гетеро- и эухроматином с
увеличением доли конденсированных участков.
Однако и при данных сроках хранения встре-
чаются значительные участки ткани, в которых
сохранность ультраструктуры достаточно высо-
кая. Как видно из рис. 5, структура ЭПР, а также
его топологическая связь с митохондриями и
кариолеммой практически не нарушаются.
В условиях более длительного гипотерми-
ческого хранения в большей степени наблюдаются
динамичные изменения структуры митохондрий
(набухание, дезорганизация крист) и ЭПР (фраг-
ментация, вакуолизация и расширение цистерн,
уменьшение количества рибосом). Количество
гликогена в цитоплазме гепатоцитов значительно
уменьшается, что сопровождается появлением
обширных просветленных областей. В зависи-
мости от условий хранения (влажная камера или
жидкая фаза) наблюдались либо стагнация, либо
расширение просветов синусоидов. Обнаружи-
ваются также разрушенные клетки эндотелио-
цитов. Пролонгация сроков хранения до 72 ч и
далее приводит к деструкции всех клеточных
компонентов ткани независимо от условий
хранения.
Следует также отметить, что после 48 ч
различие в условиях гипотермического хранения
фрагментов печени приводит к значительным,
часто разнонаправленным изменениям в структуре
ткани и клеток. Это проявляется не только на ее
основных морфологических характеристиках
Рис. 4. Состояние ультраструктуры синусоидного
капилляра после 24 ГХ в среде 199. Обозначения те же,
что на рис. 3; Е – эндотелий.
Fig. 4. State of synusoid capillary ultrastructure after 24
hrs’ HS in 199 medium. The same legends as for Fig.3, E –
endothelium.
enlightenment and a partial cryst destruction. Vacuole-
like and vesicular structures predominate in Golgi
apparatus. The contour unevenness with no change in
perinuclear space width appears in cell nuclei, there is
a change in ratio between hetero- and euchromatin
with an increase in a part of condensed sites.
However even under these storage terms the
considerable sites of tissues with quite high ultra-
structure integrity are seen. As presented in Fig. 5,
the EPR structure, as well as its topologic relationship
with mitochondria and kariolemma are not practically
impaired.
Dynamic changes in mitochondria structures (their
swelling, cryst disorganisation) and EPR (frag-
mentation, vacuolisation and cistern widening, reduction
of ribosome number) are mostly seen under conditions
of more long-term hypothermic storage. Glycogen
amount in hepatocyte cytoplasm reduces in a
considerable extent with appearance of extended
enlightened areas. Depending on storage conditions
(humid chamber or fluid phase) either sinusoid lumen
Рис. 5. Ультраструктура фрагмента участка гепатоцита
после 48ч ГХ во влажной камере. а – зона ядра; б –
сохранение топологической связи ЭПР с митохондриями.
Обозначения те же, что на рис. 3.
Fig. 5. Ultrastructure of hepatocyte site fragment after 48
hrs’ HS in humid chamber: a – nucleus area; b – preservation
of EPR topological relation with mitochondria. The same
legends as for Fig.3.
a a
б b
635ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 15, 2005, №4
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 15, 2005, №4
(балочном строении печеночных долек и структуре
микрососудистого русла), но и ультраструктуре
клеток.
Выводы
Гипотермическое хранение (24 ч) фрагментов
печени в жидкой фазе (среда 199) обеспечивает
высокий уровень сохранности клеток. Ультра-
структурное состояние клеток таково, что
позволяет говорить об обратимости наблюдаемых
изменений.
Начало развития аутолитических процессов в
ткани печени проявляется к 48 ч хранения.
Изучение влияния температурного фактора на
ультраструктуру гепатоцитов позволило просле-
дить последовательность деградации клеточных
органелл в процессе хранения. По степени
лабильности при гипотермическом хранении
внутриклеточные структуры располагаются
следующим образом: митохондрии, эндоплазма-
тическая сеть, ядерный аппарат.
Литература
Кравченко Л.П., Шанина И.В., Белоус А.М., Сампсон В.
Эффективность сахарозосодержащего раствора при
холодовом хранении целой печени крысы // Пробл.
криобиологии.– 1997.– №3.– С. 45-48.
Крымский Л.Д., Нестайко Г.В., Рыбалов А.Г. Растровая
электронная микроскопия сосудов и крови.– М.:
Медицина, 1976.– 168 с.
Уикли Б. Электронная микроскопия для начинающих.–
М.: Мир.– 1975.– 324 с.
Griffiths B.J.N., Evans P.J. Ultrastructural changes in
hypothermicaly preseved hepatocytes // Cryobiology.– 2000.–
Vol. 40, N2.– P. 176-181.
Stefanovich P., Ezzell R.M., Sheehan S.J. et. al. Effects of
hypothermia on the function, membrane integrity and
cytoskeletal structure of hepatocytes // Cryobiology.– 1995.–
Vol.32, N4.– P. 389-403.
Поступила 14.11.2005
1.
2.
3.
4.
5.
stasis or extension were observed. Destroyed cells of
endotheliocytes are also seen. Prolongation of storage
terms up to 72 hrs and more results in destruction of
all cell components of tissue independently on storage
conditions.
Of note is that after 48 hrs a difference in
hypothermic storage conditions for liver fragments
results in significant, often the changes of versatile
directions in tissue and cell structure. This affects not
only its main morphological characteristics (beam
structure of liver lobules and microvascular channel
structure), but cell ultrastructure as well.
Conclusions
Hypothermic storage (24 hrs) of liver fragments in
liquid phase (199 medium) provides a high level of cell
integrity. Ultrastructural state of cells is that one
enabling to suggest about a reversibility of observed
changes.
Beginning of autolytic process development in liver
tissue manifests to the 48 hr of storage.
Studying the effect of temperature factor on
hepatocyte ultrastructure enables to trace the sequence
of cell organella degradation during storage. By lability
extent under hypothermic storage the intracellular
structures are graded as follows: mitochondria,
endoplasmic reticulum, nuclear apparatus.
References
Kravchenko L.P., Shanina I.V., Belous A.M., Sampson V.
Efficiency of a sucrose-containing solution in cold storage of
the whole rat liver // Problems of Cryobiology.– 1997.– N3.–
P. 45-48.
Krymsky L.D., Nestajko G.V., Rybalov A.G. Scanning electron
microscopy of vessels and blood.– Moscow: Meditsina,
1976.– 168 p.
Wickly B. Electron microscopy for beginners.– Moscow: Mir,
1975.– 324 p.
Griffiths B.J.N., Evans P.J. Ultrastructural changes in
hypothermicaly preseved hepatocytes // Cryobiology.– 2000.–
Vol. 40, N2.– P. 176-181.
Stefanovich P., Ezzell R.M., Sheehan S.J. et. al. Effects of
hypothermia on the function, membrane integrity and
cytoskeletal structure of hepatocytes // Cryobiology.– 1995.–
Vol.32, N4.– P. 389-403.
Accepted in 14.11.2005
1.
2.
3.
4.
5.
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-138513 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7673 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-12-07T17:41:50Z |
| publishDate | 2005 |
| publisher | Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Репин, Н.В. Говоруха, Т.П. 2018-06-19T08:28:51Z 2018-06-19T08:28:51Z 2005 Cтруктурные перестройки в клетках и их мембранах при длительном гипотермическом хранении / Н.В. Репин, Т.П. Говоруха // Проблемы криобиологии. — 2005. — Т. 15, № 4. — С. 630-635. — Бібліогр.: 5 назв. — рос., англ. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/138513 612.351.1.014.43 ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии и криомедицины Теоретическая и экспериментальная криобиология Cтруктурные перестройки в клетках и их мембранах при длительном гипотермическом хранении Structural Rearrangements in Cells and Their Membranes Under Long-Term Hypothermic Storage Article published earlier |
| spellingShingle | Cтруктурные перестройки в клетках и их мембранах при длительном гипотермическом хранении Репин, Н.В. Говоруха, Т.П. Теоретическая и экспериментальная криобиология |
| title | Cтруктурные перестройки в клетках и их мембранах при длительном гипотермическом хранении |
| title_alt | Structural Rearrangements in Cells and Their Membranes Under Long-Term Hypothermic Storage |
| title_full | Cтруктурные перестройки в клетках и их мембранах при длительном гипотермическом хранении |
| title_fullStr | Cтруктурные перестройки в клетках и их мембранах при длительном гипотермическом хранении |
| title_full_unstemmed | Cтруктурные перестройки в клетках и их мембранах при длительном гипотермическом хранении |
| title_short | Cтруктурные перестройки в клетках и их мембранах при длительном гипотермическом хранении |
| title_sort | cтруктурные перестройки в клетках и их мембранах при длительном гипотермическом хранении |
| topic | Теоретическая и экспериментальная криобиология |
| topic_facet | Теоретическая и экспериментальная криобиология |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/138513 |
| work_keys_str_mv | AT repinnv ctrukturnyeperestroikivkletkahiihmembranahpridlitelʹnomgipotermičeskomhranenii AT govoruhatp ctrukturnyeperestroikivkletkahiihmembranahpridlitelʹnomgipotermičeskomhranenii AT repinnv structuralrearrangementsincellsandtheirmembranesunderlongtermhypothermicstorage AT govoruhatp structuralrearrangementsincellsandtheirmembranesunderlongtermhypothermicstorage |