Експериментальне дослідження ендотеліальних клітин фетальної печінки людини

Проведено експериментальне дослідження з метою визначення та ідентифікації ендотеліальних клітин - попередників в суспензії фетальної печінки людини 8-10 тижнів гестації. З застосуванням морфологічних, електронно-мікроскопічних, імуноцитохімічних методів та культивування в позаклітинному матриксі за...

Full description

Saved in:
Bibliographic Details
Published in:Актуальні проблеми транспортної медицини
Date:2012
Main Authors: Петренко, Ю.О., Салютін, Р.В., Репін, Н.В., Петренко, О.Ю.
Format: Article
Language:Ukrainian
Published: Фізико-хімічний інститут ім. О.В. Богатського НАН України 2012
Subjects:
Online Access:https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/139701
Tags: Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
Journal Title:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Cite this:Експериментальне дослідження ендотеліальних клітин фетальної печінки людини / Ю.О. Петренко, Р.В. Салютін, Н.В. Репін, О.Ю. Петренко // Актуальні проблеми транспортної медицини. — 2012. — № 2 (28). — С. 121-125. — Бібліогр.: 8 назв. — укр.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
_version_ 1859607989260910592
author Петренко, Ю.О.
Салютін, Р.В.
Репін, Н.В.
Петренко, О.Ю.
author_facet Петренко, Ю.О.
Салютін, Р.В.
Репін, Н.В.
Петренко, О.Ю.
citation_txt Експериментальне дослідження ендотеліальних клітин фетальної печінки людини / Ю.О. Петренко, Р.В. Салютін, Н.В. Репін, О.Ю. Петренко // Актуальні проблеми транспортної медицини. — 2012. — № 2 (28). — С. 121-125. — Бібліогр.: 8 назв. — укр.
collection DSpace DC
container_title Актуальні проблеми транспортної медицини
description Проведено експериментальне дослідження з метою визначення та ідентифікації ендотеліальних клітин - попередників в суспензії фетальної печінки людини 8-10 тижнів гестації. З застосуванням морфологічних, електронно-мікроскопічних, імуноцитохімічних методів та культивування в позаклітинному матриксі за умов in vitro доведено що: первинна суспензія клітин фетальної печінки людини містить клітини ендотеліального паростку, які здатні до експресії маркеру ендотелію FLK-1 та формування капіляроподібних структур за умов in vitro. Вбачається перспективним дослідження їх використання клітинної культури фетальної печінки в комплексному лікуванні патологічних станів що супроводжуються ішемічним синдромом (хронічна ішемія, тощо). Проведено экспериментальное исследование с целью выявления и идентификации эндотелиальных клеток – предшественников в суспензии фетальной печени человека 8-10 недель гестации. Используя морфологические, электронно-микроскопические, иммуноцитохимические методы и культивирование в внеклеточном матриксе, в условиях in vitro доказано: первичная суспензия клеток фетальной печени содержит клетки эндотелиального ростка, которые способны к экспрессии маркера эндотелия FLK-1 и формирования в условиях in vitro капиляроподобных структур. Представляется перспективным исследование возможности использования клеточной культуры фетальной печени в комплексном лечении патологических состояний, которые сопровождаются ишемическим синдромом (хроническая ишемия, и т.д.). An experimental study has been carried out aiming at determining and identifying endothelial cells - precursors in a suspension of human fetal liver of 8-10 gestation weeks. Using of morphological, electron microscopic, imunocytochemical methods and in vitro cultivation in the extracellular matrix we have proven the following: the primary suspension of human fetal liver cells contains endothelial line cells, which are capable to express the endothelial marker FLK-1 and to form capillary-like structures in vitro. The use of fetal liver cell cultures in treating pathological conditions accompanied by the ischemic syndrome (chronic ischemia, etc.) is considered a promising area of further studies.
first_indexed 2025-11-28T07:41:56Z
format Article
fulltext ACTUAL PROBLEMS OF TRANSPORT MEDICINE �#2 (28), 2012 АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ТРАНСПОРТНОЙ МЕДИЦИНЫ � № 2 (28), 2012 г. 121 4. Dopitova R. Functional analysis of the aglycone3binding site of the maize beta3 glucosidase Zm3p60.1 / R. Dopitova, P. Mazura, L. Janda. [et al.] // FEBS J. 3 2008. 3 Vol.275 (24). 3 P. 612336135. 5. van Goor H. Consequences and complications of peritoneal adhesions / H. van Goor // Colorectal Dis. – 2007. – Vol. 9, Suppl. 2. – P. 25 3 34. Резюме ПАТОФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПРОТИВОСПАЕЧНОЙ ЭФЕКТИВНОСТИ ЭНДОГЕННЫХ ПЕПТИДОВ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ Демидов В.М., Демидов С.М. Недостаточная эффективность лечеб3 но3профилактических мероприятий при спа3 ечной болезни брюшной полости (СББП), по всей видимости, обусловлена неполными и недостаточными представлениями о патофи3 зиологических механизмах заболевания. Те3 чение СБ СББП у крыс характеризуется зна3 чительным увеличением активности перито3 неальных β3глюкозидаз, причем в наиболь3 шей степени была увеличена активность N3 ацетил3β3гликозаминидазы. При экспери3 ментальной СББП была показана противо3 спаечная активность сандостатина и дельта3 рана с акцентом на нормализацию под их влиянием активности β3глюкозидаз перито3 неальной жидкости. Выраженная противо3 спаечная эффективность нейропептидов в условиях СББП у крыс является эксперимен3 тальным обоснованием целесообразности тестирования противоспаечной эффективно3 сти сандостатина, даларгина и дельтарана в клинических условиях при лечении или про3 филактике развития данной патологии. Ключевые слова: спаечная болезнь брюш* ной полости, сандостатин, дельтаран, β* глюкозидазы. Summary ENDOGENOUS NEUROPEPTIDES EXPERIMENTAL ANTIADHESIVE EFFICACY PATHOPHYSIOLOGICAL BACKGROUND Demidov V.M., Demidov S.M. Curing and prophylactic events insufficient efficacy seems to be as the result of adhesions pathophysiological mechanisms unclear estimation. Adhesions manifestation characterised by peritoneal β3glucosidases activity significant increasing, besides, N3acetyl3 β3glicosaminidase activity was increased maximally. Sandostatin and deltaran revealed antiadhesive activity during the experimental adhesions accenting on peritoneal β3 glucosidases activity normalization under their influences. Neuropeptides antiadhesive efficacy in conditions of experimental adhesions serves as experimental background of sandostatin, dalargin and deltaran antiadhesive activity testing in clinical conditions for adhesions treatment or prophylaxy. Key words: adhesions, sandostatin, deltaran, β*glucosidases. Впервые поступила в редакцию 28.03.2012 г. Рекомендована к печати на заседании редакционной коллегии после рецензирования УДК 612.35:616.36*092.4 ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНЕ ДОСЛІДЖЕННЯ ЕНДОТЕЛІАЛЬНИХ КЛІТИН ФЕТАЛЬНОЇ ПЕЧІНКИ ЛЮДИНИ Петренко Ю.О.1, Салютін Р.В.2, Репін Н.В.1, Петренко О.Ю.1 1 Інститут проблем кріобіології та кріомедицини НАН України (Харків). 2 Координаційний центр трансплантації органів, тканин і клітин МОЗ України, Київ Проведено експериментальне дослідження з метою визначення та ідентифікації ендотеліальних клітин 3 попередників в суспензії фетальної печінки людини 8310 тижнів гестації. З застосуванням морфологічних, електронно3мікроскопічних, імуноцитохімічних методів та культивування в позаклітинному матриксі за умов in vitro доведено що: первин3 на суспензія клітин фетальної печінки людини містить клітини ендотеліального паростку, які здатні до експресії маркеру ендотелію FLK31 та формування капіляроподібних струк3 тур за умов in vitro. Вбачається перспективним дослідження їх використання клітинної культури фетальної печінки в комплексному лікуванні патологічних станів що супроводжу3 ються ішемічним синдромом (хронічна ішемія, тощо). Ключові слова: стромальні клітини, фетальна печінка, ендотеліальне диференціювання. АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ТРАНСПОРТНОЙ МЕДИЦИНЫ � № 2 (28), 2012 г. 122 ACTUAL PROBLEMS OF TRANSPORT MEDICINE �#2 (28), 2012 Вступ Хронічна ішемія кінцівок, що зумовле3 на ураженням дистального судинного рус3 ла, характеризується тяжким і прогресив3 ним перебігом та приводить до соціальної і трудової дезінтеграції хворого [1]. В нау3 ковій літературі обговорюється ефек3 тивність застосування методів клітинно 3 тканинної терапії в комплексному хірургіч3 ному лікуванні ранового процесу у хворих з судинними порушеннями [1, 2]. В основі впливу клітинної терапії на процеси регенерації тканини лежить син3 тез клітинами факторів росту, цитокінів і молекул позаклітинного матриксу, які в зоні пошкодження вступають у взаємодію з трансплантатом і клітинами ранового ложа. Внаслідок подібної взаємодії клітини син3 тезують широкий спектр регуляторних мо3 лекул, необхідний у конкретній ситуації, причому необхідної кількості [1]. У клініках і лабораторіях широко дос3 ліджуються джерела клітинних трансплан3 татів. Проаналізувавши характер росту клітин в культурі та оцінивши їх функціо3 нальну активність, дослідники переконали3 ся у більших проліферативних можливостях клітин ембріональної печінки і кордової крові порівняно з кістковим мозком, що може бути пов’язане з гетерогенністю сто3 вбурових клітин 3 попередників. Кордова кров містить стовбурові клітини попередни3 ки ( CD 34+ ), значно більше некомітованих гемопоетичних клітин в порівнянні з дорос3 лим кістковим мозком. Окрім того, у них високий проліферативний потенціал та менша імуногенність. Кровотворні клітини зважені у плазмі кордової крові, яка, в свою чергу, містить компоненти репродуктивних імуномодуляторів, спектр гормонів, ростові фактори, вітаміни, мікроелементи [3, 4]. Звертає на себе увагу значний та унікальний потенціал фетальної печінки що містить значний спектр стовбурових клітин та клітин3попередників різних паростків, які мають низьку імуногеність, що дозволяє їх використовувати без попереднього HLA3 типуванння [3]. Наряду з гепатичними і гемопоетичними клітинами, фетальна печ3 інки містить клітини ендотеліального та мезенхімального паростків [4, 5]. На теперішній час для ідентифікації та оцінки ендотеліальних клітин використову3 ють ряд маркерів, серед яких найбільш демонстративними є FLТ31 і FLK31 CD31 (PECAM), Ska1, фактор Вон Виллебрандта (vonWilebrandt factor) [8,9]. Одним з найбільш показовим та раннім маркером ендотеліальних клітин – попередників є FLK31 ( fetal liver kinase 31), який є рецеп3 тором фактора росту судинного ендотелію (VEGF), що відповідає за проліферацію та диференціювання ендотеліальних клітин [6, 7]. Мета даної роботи полягає в дослід3 женні ендотеліальних клітин – попередників в фетальній печінці людини 8310 тижнів гестації, визначення експресії FLK31 та здатності клітин фетальної печінки до фор3 мування капіляроподібної мережі в позак3 літинному матриксі, за умов in vitro. Матеріали та методи дослідження Роботи проводились з додержанням законодавчо3нормативних вимог, на базі кафедри біохімії Інституту проблем кріобі3 ології і кріомедицини НАН України (м. Харків), завідувач кафедри, професор Пет3 ренко О.Ю. Для отримання суспензії клітин фе3 тальної печінки останню дезагрегували з використанням неферментативного мето3 ду, модифікованого для малих об’ємів, після чого, отриману суспензію клітин фільтрували [8]. Отримані клітини культивували в жи3 вильному середовищі альфа3МЕМ, що була доповнена ембріональною сироваткою ве3 ликої рогатої худоби (ЕС), 2 мМ L3глутамі3 ну, 50 ед/мл пеніциліну і 50 мг/мл стрепто3 міцину при 37°С, 5% СО2 і більше 90% во3 логості. Заміну живильного середовища проводили через 24 год. Клітини культиву3 вали протягом трьох3чотирьох пасажів із зміною середовища 2 рази на тиждень. Для оцінки морфології клітин, клітинну культу3 ру фіксували 70% етанолом, на протязі 30 хвилин, після чого забарвлювали розчином азур3еозіну, розведеного 1:10 дистильова3 ною водою, продовж 10 хвилин. Після трьохкратного промивання дистильованою водою, препарати досліджували під світло3 вим інвертованим мікроскопом «Сетi» (Бельгія). Здатність культивованих клітин утво3 рювати капіляроподібні структури оцінюва3 ли на 7 і 14 добу культивування в індукую3 чому середовищі із використанням екст3 раклітинного матриксу Матрігель (BD Biosciences, UK). Для цього заздалегідь охолоджений Матрігель вносили по 100 мкл в 963лунковий планшет і залишали на 30340 хвилин при 37 °С. Потім на поверхню матриксу наносили 100 мкл суспензії клітин в концентрації 105 клітин/мл. і культивува3 ли протягом 24 годин в середовищі EGM3 2. Аналіз проводили під світловим інверто3 ACTUAL PROBLEMS OF TRANSPORT MEDICINE �#2 (28), 2012 АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ТРАНСПОРТНОЙ МЕДИЦИНЫ � № 2 (28), 2012 г. 123 ваним мікроскопом «Сетi» (Бельгія). З метою визначення можливості екс3 пресії клітинами фетальної печінки марке3 ра ендотеліальних клітин FLK31 клітинна культура фіксувалась 4% параформальде3 гідом на протязі 30 хвилин при температурі 4 °С. Після трьохразового відмивання клітин фосфатним буфером, проводили блоку3 вання неспецифічного зв’язування 5% БСА, який був виготовлений на основі фосфат3 ного буфера на протязі 30 хвилин. Потім клітини інкубували з первинними полікло3 нальними антітілами rabbit3anti3human FLK3 1 (1:75), на протязі 1 години за умов кімнат3 ної температури. Надалі, після трьохкратного відми3 вання фосфатним буфером, клітини інкубу3 вали з вторинними goat3anti3rabbit антітіла3 ми, коньюгованими AlexaFluor 488 nm про3 тягом 40 хвилин при кімнатній температурі та темряві. Після інкубування та трьохкрат3 ного відмивання фосфатним буфером, проводили дофарбування клітин 4',6 3 diamidino323 phenylindole (DAPI, 100 ng/ml) протягом 5 хвилин. Пофарбовані клітинні культури досліджували за допомогою флу3 оресцентної мікроскопії під інвертованим флуоресцентним мікроскопом Ceti Inverso EPIFluor (UK). Для проведення електроно3мікроско3 пічного дослідження тканини фетальної печінки (638 тижнів гестації) її фрагменти фіксували в 2 % розчині глутарового аль3 дегіду, який був виготовлений на фосфат3 ному буфері (рН 7,4) при температурі 034 °С на протязі 2 годин. Надалі матеріал про3 мивали в фосфатному буфері і фіксували в 1% розчині чотирьохокису осмію на фос3 фатному буфері на протязі 1 години. Після фіксації зразки промивали фосфатним бу3 фером, зневоджували ацетоном з поступо3 вим збільшенням концентрації останнього (схема проводки: 50%, 70%, 85%, 96% 3 по 10 хв. и в 100 % ацетоні – двічі по 10 хв.) та просочували сумішшю епотон3аралдит. Потім зразки поміщали в поліетиленові ампули, що містили заливну смолу та пол3 імеризували на протязі 24 годин при тем3 пературі 60 °С. Ультратонкі зрізи контрасту3 вали насиченім водним розчином ураніл ацетату і розчином цитрату свинцю по Рей3 нольдсу. Ультраструктуру клітин печінки досліджували за допомогою електронного мікроскопу ПЭМ3125К ( при прискорюючій напрузі 75 kV) який був оснащений систе3 мою зняття та аналізу зображення САИ 3 01А (AO “SELMI”, М. Суми) на основі CCD камери DX3 2 і пакету програм фірми «KAPPA» (Німеччина). Результати та їх обговорення. Результати морфологічного дослід3 ження тканини фетальної печінки свідчили про значну гетерогенність клітинного скла3 ду фетальної печінки людини 8310 тижнів гестації (рис. 1.). Рис. 1. Структура фетальної печінки людини 8- 10 тижнів гестації з типовим клітинним складом: ПЕ – проеритробласт; Ек – ендотеліальна кліти- на; Ек та ЕП – еритробласти різного ступеню зрілості; Г – гепатині клітини Рис. 2. Морфологічні особливості первинної культури адгезивних клітин фетальної печінки людини на 5 добу культивування (х 40) Рис. 3. Формування капіляроподібних структур ПСКФП в «Матрігелі» після 14 діб культивування в середовищі EGM-2 (збільшення х100) АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ТРАНСПОРТНОЙ МЕДИЦИНЫ � № 2 (28), 2012 г. 124 ACTUAL PROBLEMS OF TRANSPORT MEDICINE �#2 (28), 2012 В досліджуваних зразках переважно фіксували наявність клітин гемопоетично3 го та гепатичного ростків. Однак, зразки тканини фетальної печінки в значній кількості містили клітини ендотеліального ряду, які формували синусоїдальні капіля3 ри. Після дезагрегації тканини фетальної печінки, отриману клітинну суспензію рез3 суспензіювали на поживному середовищі, яке містило 15% ембріональну сироватку великої рогатої худоби та поміщали в умо3 ви моношарового культивування. Через 483 72 години після посіву культури фіксували на дні культурального флакону наявність ге3 терогенної популяції адгезировавших клітин, які мали різну морфологічну струк3 туру. Виявляли клітини епітеліальної мор3 фології (представники печінкового паро3 стку), які в процесі культивування (на 5 добу) утворювали щільні центри та ділянки росту (рис. 2). На периферії ділянок росту були на3 явними клітини фібробластоподібної мор3 фології, а також овальні і багатокутні кліти3 ни, з значною кількістю відростків та віро3 гідно мали макрофагальну природу. При мікроскопічному дослідженні клітини з явними ознаками ендотеліальних попередників виявити не вдалося, що обу3 мовило проведення подальших дослід3 жень, метою яких було визначити клітини ендотеліального паростку за допомогою імуноцитохімічних тестів – специфічного маркеру ендотеліальних клітин FLK31 та функціонального методу оцінки здатності клітин до капіляроутворення in vitro в позак3 літинному матриксі. Проведені дослідження, з культиву3 вання суспензії клітин фетальної печінки в позаклітинному матриксі, за умов in vitro свідчили про їх здатність до формування капілярних трубочок. Клітини, ймовірно, за рахунок міграції, утворювали структури типу лан3 цюжків і нещільно упакованих скупчень, а поодинокі клітинні елементи демонструва3 ли тенденцію до набуття веретеноподібної форми. На 7 добу експерименту спостері3 гали за формуванням клітинних агрегатів, з яких витягувалися короткі капіляроподібні відростки. Надалі капілярні відростки з’єднува3 лися між собою і формували гіллясті утво3 рення, що нагадують капілярну мережу. Проте не всі клітини витягувалися – части3 на з них залишалася в округлому стані (рис.3.). Паралельно на 5 добу культивування досліджували експресію адгезивними клітинами фетальної печінки людини мар3 керу ендотеліальних клітин FLK31. Результати проведеного імуноцитох3 імічного дослідження вказували на те що частина клітин культури фетальної печінки позитивно забарвлювалась на FLK31, тоб3 то належала до клітин ендотеліального паростку. Експресія клітинами FLK31 прояв3 лялась у вигляді злегка гранульованого за3 барвлення, концентрованого поблизу ядра, а в деяких випадках по всій поверхні кліти3 ни. Висновки Результати морфологічного дослід3 ження тканини фетальної печінки людини 8310 тижнів гестації свідчили про гетеро3 генність їх клітинного складу, включаючи значну кількості клітини ендотеліального ряду, які формували синусоїдальні капіля3 ри. Проведені дослідження, з культиву3 вання суспензії клітин фетальної печінки в позаклітинному матриксі, за умов in vitro свідчили про їх здатність до формування капілярних трубочок. Клітини, ймовірно, за рахунок міграції, утворювали структури типу лан3 цюжків і нещільно упакованих скупчень, а поодинокі клітинні елементи демонструва3 ли тенденцію до набуття веретеноподібної форми. На 7 добу експерименту формува3 лись клітинні агрегати, з яких витягувалися короткі капіляроподібні відростки. Надалі капілярні відростки з’єднувалися між собою і формували гіллясті утворення, що нагаду3 ють капілярну мережу. Проте не всі клітини витягувалися – частина з них залишалася в округлому стані Результати проведеного імуноцитох3 імічного дослідження вказували на те що частина клітин культури фетальної печінки належала до клітин ендотеліального паро3 стку. Експресія клітинами FLK31 проявля3 лась у вигляді злегка гранульованого за3 барвлення, концентрованого поблизу ядра, а в деяких випадках і по всій поверхні кліти3 ни. Враховуючи ендотеліальний потенці3 ал клітин фетальної печінки вбачається перспективним дослідження їх використан3 ня в комплексному лікуванні хворих ура3 женнями термінального судинного русла кінцівок та з іншою патологією що супро3 воджується ішемічним синдромом. ACTUAL PROBLEMS OF TRANSPORT MEDICINE �#2 (28), 2012 АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ТРАНСПОРТНОЙ МЕДИЦИНЫ � № 2 (28), 2012 г. 125 Література 1. Wasiak K, Paczkowski P.M, Garlicki J.M. Surgical results of leg amputation according to Ghormley’s technique in the treatment of chronic lower limb ischaemia. // Acta Chir. Belg. – 2006. 3 №106(1). – Р.52356. 2. Kim S., Von Recum H. Endothelial Stem Cells and Precursors for Tissue Engineering: Cell Source, Differentiation, Selection, and Application Tissue engineering: Part B Volume 14, Number 1, 2008 1333147 3. Baumgartner I. Lessons learned from human gene therapy in patients with chronic critical limb ischemia // J. Invasive Cardiol. – 2001. – vol. 13, №4. – P. 3303332. 4. Петренко Ю.А. Иммунорегуляторные свойства клеток фетальной печени человека // Клеточная трансплантоло3 гия и тканевая инженерия. – 2007. – Т. 2, №3. – С. 57361 5. Cherqui S.., Kurian S.M., Schussler O., Hewel J.A., Yates III J.R., Salomon D.R. Isolation and angiogenesis by endothelial progenitors in the fetal liver // Stem cells. – 2006. – Vol. 24. – P.44–54 6. Chen M.Y., Lie P.C., Li Z.L., Wei X. Endothelial differentiation of Wharton’s jelly–derived mesenchymal stem cells in comparison with bone marrow–derived mesenchymal stem cells // Experimental Hematology 2009;37:629–640 7. Liu J.W., Dunoyer3Geindre S., Serre3 Beinier V., Mai G., Lambert J.F., Fish R.J., Pernod G., Buehler L., Bounameaux H., Kruithof E.K.O. Characterization of endothelial cells derived from human mesenchymal stem cells // Journal of thrombosis and haemostasis 2007, 5 8263834. 8. Petrenko A.Yu., Sukach A.N. Isolation of intact mitochondria and hepatocytes using vibration //Analytical Biochem. – 1991. – Vol. 194, № 2. – P. 3253329. Резюме ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ЕНДОТЕЛИАЛЬНЫХ КЛЕТОК ФЕТАЛЬНОЙ ПЕЧЕНИ ЧЕЛОВЕКА Петренко Ю.А., Салютин Р.В., Репин Н.В., Петренко А.Ю. Проведено экспериментальное ис3 следование с целью выявления и иденти3 фикации эндотелиальных клеток – предше3 ственников в суспензии фетальной печени человека 8310 недель гестации. Используя морфологические, электронно3микроско3 пические, иммуноцитохимические методы и культивирование в внеклеточном матрик3 се, в условиях in vitro доказано: первичная суспензия клеток фетальной печени содер3 жит клетки эндотелиального ростка, кото3 рые способны к экспрессии маркера эндо3 телия FLK31 и формирования в условиях in vitro капиляроподобных структур. Представляется перспективным ис3 следование возможности использования клеточной культуры фетальной печени в комплексном лечении патологических со3 стояний, которые сопровождаются ишеми3 ческим синдромом (хроническая ишемия, и т.д.). Ключевые слова: стромальные клетки, фетальная печень, эндотелиальная диф* ференцировка. Summary EXPERIMENTAL RESEARCHES OF ENDOTELIAL CELLS OF A FATAL LIVER OF THE PERSON Petrenko Yu.O., Salyutin R.V., Repin N.V., Petrenko O.Yu. An experimental study has been carried out aiming at determining and identifying endothelial cells 3 precursors in a suspension of human fetal liver of 8310 gestation weeks. Using of morphological, electron microscopic, imunocytochemical methods and in vitro cultivation in the extracellular matrix we have proven the following: the primary suspension of human fetal liver cells contains endothelial line cells, which are capable to express the endothelial marker FLK31 and to form capillary3like structures in vitro. The use of fetal liver cell cultures in treating pathological conditions accompanied by the ischemic syndrome (chronic ischemia, etc.) is considered a promising area of further studies. Key words: stromal cells, fetal liver, endothelial differentiation. Впервые поступила в редакцию 28.03.2012 г. Рекомендована к печати на заседании редакционной коллегии после рецензирования
id nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-139701
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
issn 1818-9385
language Ukrainian
last_indexed 2025-11-28T07:41:56Z
publishDate 2012
publisher Фізико-хімічний інститут ім. О.В. Богатського НАН України
record_format dspace
spelling Петренко, Ю.О.
Салютін, Р.В.
Репін, Н.В.
Петренко, О.Ю.
2018-06-21T09:08:28Z
2018-06-21T09:08:28Z
2012
Експериментальне дослідження ендотеліальних клітин фетальної печінки людини / Ю.О. Петренко, Р.В. Салютін, Н.В. Репін, О.Ю. Петренко // Актуальні проблеми транспортної медицини. — 2012. — № 2 (28). — С. 121-125. — Бібліогр.: 8 назв. — укр.
1818-9385
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/139701
612.35:616.36-092.4
Проведено експериментальне дослідження з метою визначення та ідентифікації ендотеліальних клітин - попередників в суспензії фетальної печінки людини 8-10 тижнів гестації. З застосуванням морфологічних, електронно-мікроскопічних, імуноцитохімічних методів та культивування в позаклітинному матриксі за умов in vitro доведено що: первинна суспензія клітин фетальної печінки людини містить клітини ендотеліального паростку, які здатні до експресії маркеру ендотелію FLK-1 та формування капіляроподібних структур за умов in vitro. Вбачається перспективним дослідження їх використання клітинної культури фетальної печінки в комплексному лікуванні патологічних станів що супроводжуються ішемічним синдромом (хронічна ішемія, тощо).
Проведено экспериментальное исследование с целью выявления и идентификации эндотелиальных клеток – предшественников в суспензии фетальной печени человека 8-10 недель гестации. Используя морфологические, электронно-микроскопические, иммуноцитохимические методы и культивирование в внеклеточном матриксе, в условиях in vitro доказано: первичная суспензия клеток фетальной печени содержит клетки эндотелиального ростка, которые способны к экспрессии маркера эндотелия FLK-1 и формирования в условиях in vitro капиляроподобных структур. Представляется перспективным исследование возможности использования клеточной культуры фетальной печени в комплексном лечении патологических состояний, которые сопровождаются ишемическим синдромом (хроническая ишемия, и т.д.).
An experimental study has been carried out aiming at determining and identifying endothelial cells - precursors in a suspension of human fetal liver of 8-10 gestation weeks. Using of morphological, electron microscopic, imunocytochemical methods and in vitro cultivation in the extracellular matrix we have proven the following: the primary suspension of human fetal liver cells contains endothelial line cells, which are capable to express the endothelial marker FLK-1 and to form capillary-like structures in vitro. The use of fetal liver cell cultures in treating pathological conditions accompanied by the ischemic syndrome (chronic ischemia, etc.) is considered a promising area of further studies.
uk
Фізико-хімічний інститут ім. О.В. Богатського НАН України
Актуальні проблеми транспортної медицини
Экспериментальные исследования
Експериментальне дослідження ендотеліальних клітин фетальної печінки людини
Експериментальное исследование ендотелиальных клеток фетальной печени человека
Experimental researches of endotelial cells of a fatal liver of the person
Article
published earlier
spellingShingle Експериментальне дослідження ендотеліальних клітин фетальної печінки людини
Петренко, Ю.О.
Салютін, Р.В.
Репін, Н.В.
Петренко, О.Ю.
Экспериментальные исследования
title Експериментальне дослідження ендотеліальних клітин фетальної печінки людини
title_alt Експериментальное исследование ендотелиальных клеток фетальной печени человека
Experimental researches of endotelial cells of a fatal liver of the person
title_full Експериментальне дослідження ендотеліальних клітин фетальної печінки людини
title_fullStr Експериментальне дослідження ендотеліальних клітин фетальної печінки людини
title_full_unstemmed Експериментальне дослідження ендотеліальних клітин фетальної печінки людини
title_short Експериментальне дослідження ендотеліальних клітин фетальної печінки людини
title_sort експериментальне дослідження ендотеліальних клітин фетальної печінки людини
topic Экспериментальные исследования
topic_facet Экспериментальные исследования
url https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/139701
work_keys_str_mv AT petrenkoûo eksperimentalʹnedoslídžennâendotelíalʹnihklítinfetalʹnoípečínkilûdini
AT salûtínrv eksperimentalʹnedoslídžennâendotelíalʹnihklítinfetalʹnoípečínkilûdini
AT repínnv eksperimentalʹnedoslídžennâendotelíalʹnihklítinfetalʹnoípečínkilûdini
AT petrenkooû eksperimentalʹnedoslídžennâendotelíalʹnihklítinfetalʹnoípečínkilûdini
AT petrenkoûo eksperimentalʹnoeissledovanieendotelialʹnyhkletokfetalʹnoipečeničeloveka
AT salûtínrv eksperimentalʹnoeissledovanieendotelialʹnyhkletokfetalʹnoipečeničeloveka
AT repínnv eksperimentalʹnoeissledovanieendotelialʹnyhkletokfetalʹnoipečeničeloveka
AT petrenkooû eksperimentalʹnoeissledovanieendotelialʹnyhkletokfetalʹnoipečeničeloveka
AT petrenkoûo experimentalresearchesofendotelialcellsofafatalliveroftheperson
AT salûtínrv experimentalresearchesofendotelialcellsofafatalliveroftheperson
AT repínnv experimentalresearchesofendotelialcellsofafatalliveroftheperson
AT petrenkooû experimentalresearchesofendotelialcellsofafatalliveroftheperson